Cluster do Conhecimento Nanotecnologia

NANOBIOSSENSORES

Diana Brito Parreira Tiago Guerreiro Leito Examinadores de patentes

Junho de 2010

Nanobiossensores

NDICE

1 BREVE INTRODUO NANOTECNOLOGIA ....3

2 NANOBIOTECNOLOGIA ...3

3 NANOBIOSSENSORES ...3 3.1 Sensores de nanofios ...5 3.2 Nanobiossensores de canais inicos ....5 3.3 Nanobiossensores virais .7 3.4 Nanobiossensores PEBBLE ...7 3.5 Nanobiossensores pticos ......7 3.6 Sensores Nanoshell.8 3.7 Nanobiochips. Lab-on-a-chip. .9

4 ANLISE DE PATENTES DE NANOBIOSSENSORES ..11 4.1 Exemplos de patentes de nanobiossensores ......11 4.2 Diagnstico tecnolgico na rea dos nanobiossensores ..16

5 CONCLUSAO E PERSPECTIVAS FUTURAS ..19

6 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS .....21

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1 BREVE INTRODUO NANOTECNOLOGIA

A Nanotecnologia uma rea cientfica multidisciplinar que consiste na criao e utilizao de materiais, dispositivos e sistemas atravs da manipulao de matria escala do nanmetro (nm) nano-escala, isto um milionsimo de milmetro ou um bilionsimo do metro. Nos ltimos anos, a Nanotecnologia tem sofrido um desenvolvimento extraordinrio, trazendo avanos revolucionrios em reas como: tecnologias da informao e comunicao, robtica, materiais, medicina e biotecnologia.

2 NANOBIOTECNOLOGIA
Uma das reas da nanotecnologia que se encontra em rpida progresso e na qual este documento se ir focar a Nanobiotecnologia, que aplica ferramentas e processos de nanofabricao construo de dispositivos para estudar e melhor compreender os sistemas e os processos biolgicos. A Nanobiotecnologia resulta da integrao das cincias fsicas, da engenharia molecular, da biologia, biotecnologia e da qumica e promete considerveis avanos na indstria farmacutica e na rea dos cuidados de sade. A extraordinria evoluo da compreenso dos sistemas biolgicos tem sido acompanhada pelo desenvolvimento dos sistemas de anlise bioqumica e diagnstico molecular. A emergncia da nanotecnologia abriu portas possibilidade de detectar e manipular parmetros bioqumicos e moleculares atravs de dispositivos nano escala nanodispositivos, como nanobiossensores e biochips. A miniaturizao dos dispositivos de anlise bioqumica e sistemas de diagnstico molecular vem proporcionar uma dramtica melhoria na rapidez, preciso e sensibilidade dos seus resultados, assim como uma maior acessibilidade e flexibilidade dos mesmos, como iremos ver ao longo deste documento.

3 NANOBIOSSENSORES
Um nanobiossensor um dispositivo nano-escala que converte um evento biolgico, como um distrbio gentico e/ou metablico ou uma infeco (viral ou bacteriana), num sinal mensurvel e processvel. De um modo geral, um nanobiossensor incorpora um elemento biolgico biorreceptor, que pode ser uma protena (ex: enzimas1 ou anticorpos2), cidos
De modo geral, uma enzima uma protena que catalisa (isto , intervm e acelera) uma reaco qumica fisiolgica. 2 Os anticorpos so protenas complexas, constitudas por centenas de aminocidos (unidades de construo das protenas). Os anticorpos so produzidos por clulas do sistema imunitrio, quando estas so expostas a determinadas substncias denominadas antignios.
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nucleicos 3(ADN ou ARN), estruturas proteicas como canais inicos ou ainda clulas inteiras [1, 2]. O biorreceptor o agente responsvel pelo reconhecimento especfico do analito, isto , o que se pretende analisar, que pode ser, por exemplo, ADN, ARN, genes, protenas ou metabolitos (isto , produtos do metabolismo). A interaco do biorreceptor com o analito desencadeia uma resposta ou reaco fisiolgica que produz uma perturbao bioqumica no nanobiossensor, que pode em seguida ser convertida por um transdutor num efeito detectvel e mensurvel, como um sinal elctrico (Figura 1) [3].
Analito Biorreceptor Transdutor Sinal mensurvel

Enzima Anticorpo Canais inicos cidos nucleicos

Substncia electroactiva Alterao pH Calor Luminescncia Alterao de massa

Elctrodo Elctrodo pH Termstor Contador de fotes Dispositivo piezoelctrico Sinal elctrico

Figura 1: Esquema geral de funcionamento de um nanobiossensor. Os biorreceptores reconhecem e ligam-se aos analitos. A interaco entre o analito alvo e o biorreceptor concebida de forma a produzir uma perturbao bioqumica no nanobiossensor (ex: alterao pH) transduo, que pode em seguida ser convertida num efeito detectvel e mensurvel, como um sinal elctrico.

Exemplos das referidas perturbaes bioqumicas so: Calor transferido ou absorvido pela reaco fisiolgica; Mudanas na distribuio de cargas, produzindo-se um potencial elctrico; Movimento de electres, produzindo uma reaco redox; Emisso de luz durante a reaco fisiolgica ou uma diferena entre a absorvncia de luz entre reagentes e produtos; Efeitos de massa dos reagentes ou produtos. Existem diversos tipos de nanobiossensores, consoante o tipo de analito, biorreceptor, mtodo de transduo e/ou sinal obtido, alguns dos quais sero discutidos em seguida.

Um cido nucleico um tipo de composto qumico que ocorre em todas as clulas vivas e que responsvel pelo armazenamento e transmisso da informao gentica, sendo a sua traduo expressa pela sntese precisa de protenas.

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3.1 Sensores de nanofios Os nanofios, tal como o nome indica, so fios com um dimetro da ordem dos nanmetros. Existem diferentes tipos de nanofios: metlicos (ex.: de nquel, platina ou ouro), semicondutores (ex.: de silcio, fosfato de ndio ou nitrito de glio) ou isolantes (ex: de slica ou dixido de titnio). As propriedades da superfcie dos nanofios so facilmente modificveis, pelo que os sensores de nanofios podem incorporar praticamente qualquer elemento de reconhecimento biolgico (biorreceptor). Os nanomateriais destes sensores vo transduzir o evento biolgico (como uma ligao qumica) que ocorre na sua superfcie numa alterao detectvel em tempo real da condutividade do nanofio, isto , a facilidade com a qual um nanofio capaz de conduzir uma corrente elctrica. A reduzida dimenso, a sensibilidade e a possibilidade de deteco em tempo real associadas aos nanofios semicondutores tornam-nos especialmente teis para a anlise e diagnstico in vivo. Recentemente, uma equipa multidisciplinar dirigida por investigadores da Universidade de Yale (EUA) desenvolveu um sensor de nanofios para detectar e medir as concentraes de dois biomarcadores do cancro, isto , dois compostos indicadores da presena de cancro: um do cancro de prstata e outro do cancro da mama [4]. Outro nanobiossensor, desenvolvido pelo projecto Nodo Nanotec4 (Argentina) visa tambm a deteco de tumores. O nanobiossensor consiste em dois microelctrodos ligados por uma ponte de nanofios com anticorpos. A unio do biorreceptor ao tumor gera um sinal elctrico, permitindo a deteco do aparecimento de um tumor. (Fonte: http://nanobugle.wordpress.com/2009/06/26/nanobiosensor-to-detect-tumors/).

3.2 Nanobiossensores de canais inicos O ICSTM um biossensor de canais inicos, pertencente Ambri Ltd. Este biossensor constitudo por uma membrana, onde esto incorporados canais inicos (canais existentes nas membranas das clulas, atravs dos quais passam ies para dentro e para fora da clula como, por exemplo, ies sdio). membrana esto acoplados biorreceptores que consistem em fragmentos de anticorpos que se ligam especificamente ao analito em questo. A ligao do fragmento do anticorpo e o analito vai causar um bloqueio no canal inico, que impede a normal passagem de ies atravs do mesmo. Consequentemente, a condutividade elctrica do canal inico diminuda, sendo esta alterao mensurvel quantitativamente (Figura 2).

Financiado pela Comisin Nacional de Energa Atmica e pela Agencia de Promocin Cientfica y Tecnolgica. A Universidad Nacional de Baha Blanca e o Instituto de Investigaciones Cientficas y Tcnicas para la Defensa colaboraram tambm neste projecto.

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biorreceptor
+ +

ies

fosfolpidos da membrana
+ +

Na ausncia do analito: o canal inico um dmero condutor

+

membrana

Detector

analito
+ + + + + +

Na presena do analito: monmeros no condutores

Figura 2: Princpio de funcionamento de um nanobiossensor de canais inicos

Esta a tecnologia que est na base do SensiDx System da Ambri Ltd. Este nanobiossensor foi desenhado para analisar amostras de sangue em unidades hospitalares, proporcionando resultados precisos e quantitativos imediatos. Este dispositivo tem um potencial para detectar at 40 substncias ou marcadores de doenas em amostras sanguneas. Outros testes incluem marcadores cardacos para deteco de ataques cardacos e tambm os electrlitos sdio e potssio.

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3.3 Nanobiossensores virais Os vrus Herpes Simplex (HSV) e adenovrus tm sido utilizados para desencadear a formao de nanopartculas magnticas para utilizao como nanossensores de vrus clinicamente relevantes. Estas nanopartculas so constitudas por um ncleo ultra magntico de xido de ferro revestido com dextrano. Investigadores do Center for Molecular Imaging Research, da Harvard Medical School (EUA) desenvolveram uma nanopartcula magntica qual se encontra acoplado um anticorpo que reconhece o vrus Herpes Simplex (anti-HSV) e o adenovrus-5, permitindo uma deteco destes vrus com elevada sensibilidade (5 partculas virais por 10 l de amostra de soro) [5]. As propriedades magnticas destas nanopartculas fazem com que sejam detectveis e monitorizveis atravs de tcnicas de ressonncia magntica, sendo assim possvel visualizar a distribuio viral num organismo.

3.4 Nanobiossensores PEBBLE (Probes Encapsulated by Biologically Localized Embedding) Estes nanossensores tm a forma de esferas com uma dimenso na ordem dos 20 a 200 nm e so formados pela encapsulao de molculas selectivas que se ligam a analitos especficos, numa matriz polimrica (polmero). As referidas molculas encapsuladas incorporam pigmentos fluorescentes, o que faz com que, quando se ligam ao analito, permitam a sua monitorizao [6]. Estes sensores possibilitam a monitorizao em tempo real do analito em questo (ies e molculas especficas). Estes sensores so ainda especificamente desenhados para serem minimamente invasivos, facilitando a monitorizao do analito em clulas viveis (clulas vivas, possuindo a capacidade de se multiplicarem), sem perturbar o seu normal funcionamento. Os nanossensores PEBBLE permitem a anlise e monitorizao de metabolitos como o clcio, potssio, oxignio, cloro, sdio e glucose [7, 8]. Estes nanobiossensores podem ser tambm utilizados na deteco precoce do cancro [6]. Um nanossensor do tipo PEBBLE foi desenvolvido recentemente pela University of Southern Denmark. At data j foi desenvolvido um nanobiossensor para analisar ADN. Outros nanossensores para outros compostos qumicos de reduzida dimenso esto neste momento a ser desenvolvidos. (Fonte:http://www.sdu.dk/~/media/Files/Om_SDU/Faellesadministrationen/Forskerse rvice/pdffiler/Patenter/Omnisensing%20nanobiosensor.ashx)

3.5 Nanobiossensores pticos Muitos dos nanossensores actualmente comercializados baseiam-se nas propriedades pticas de lasers para monitorizar e quantificar interaces entre biomolculas depositadas em diversas superfcies especialmente desenvolvidas.

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Uma das primeiras aplicaes de nanofibras pticas nos biossensores envolvia um nanobiossensor cujo biorreceptor consistia num anticorpo. Este nanobiossensor visava a deteco de um marcador da exposio humana a uma conhecida substncia carcinognea, o benzo[a]pireno (BaP) [9], que pode ser encontrado, por exemplo, em gases de combusto e exausto. Num nanossensor de laser, a luz laser dirigida para a fibra e o campo electromagntico gerado na ponta da fibra usado para excitar molculas alvo ligadas a anticorpos (biorreceptores). Um sistema de deteco fotomtrica (deteco de luz) utilizado para detectar o sinal ptico (por exemplo, fluorescncia) originado pelas molculas do analito ou pela reaco entre o analito e o biorreceptor [6]. Desde o desenvolvimento deste primeiro nanobiossensor ptico, esta tecnologia tem sido aplicada deteco de vrios metabolitos como o xido ntrico e o glutamato, assim como determinao de mecanismos de transporte de vrios compostos [10]. Os sensores de laser podem ser usados in vivo, na anlise de protenas e biomarcadores em clulas vivas individuais [6].

3.6 Sensores Nanoshell Os sensores nanoshell consistem usualmente em nanoesferas constitudas por um ncleo de slica, que so revestidas por uma concha de um metal o ouro. Estes materiais conseguem captar e armazenar um largo espectro de luz, concentrando a sua intensidade, gerando um pigmento muito forte e definido. Assim, estes compostos podem constituir sensores biolgicos e qumicos ultra sensveis.

Figura 3: Imagem de microscopia electrnica de nanoshells (cores falsas).

A estas nanoesferas podem ser acoplados anticorpos, formando conjugados. Estes tm sido utilizados em testes imunolgicos, conseguindo detectar especificamente analitos em meios biolgicos complexos num s passo, sem necessidade de preparao de uma amostra.

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Esto a ser desenvolvidos sensores do tipo nanoshell para aplicaes como o diagnstico do cancro, terapia do cancro e anlise de protenas associadas doena de Alzheimer [6].

3.7 Nanobiochips. Lab-on-a-chip. Uma classe especial de nanobiossensores so os nanobiochips, que contm mltiplos elementos transdutores e se baseiam em circuitos integrados [11]. Um biochip, de um modo geral, define-se como um dispositivo que tem um array de biorreceptores, denominados sondas, imobilizados numa superfcie. Um array uma coleco de locais de anlise miniaturizados, arranjados de forma a permitir a realizao de testes em simultneo ou em paralelo. A tecnologia Lab-on-a-chip concilia conhecimentos de diferentes reas: micro/nanofabricao, anlise qumica, microfludica e bioinformtica, constituindo um novo paradigma para os sistemas de anlises clnicas. Um dispositivo deste tipo integra diversas anlises laboratoriais num nico chip de dimenses muito reduzidas. Estes dispositivos analisam processos bioqumicos em massa, detectando diversos analitos numa s amostra. A maioria destes dispositivos fabricada atravs de processos de moldagem ou fotolitografia5 desenvolvidos na indstria electrnica para criar circuitos de compartimentos (onde vo ser imobilizadas as sondas) e canais usando materiais compsitos como a quartzo, slica ou vidro [6]. Como j foi referido, um dos conceitos chave que esto por trs desta tecnologia a microfludica, que consiste na manipulao de pequenas quantidades de fluidos (microlitros, nanolitros ou ainda picolitros) que circulam em canais com a espessura de um cabelo humano. Os circuitos microfludicos podem ser desenhados de forma a permitir muitos processos biolgicos, incluindo anlises de protenas e outros metabolitos, marcadores especficos de doenas, ADN, entre outros. Recentemente, foi apresentado um nanobiochip verstil, que permite detectar cidos, protenas e clulas relevantes para o diagnstico de diferentes doenas de uma forma flexvel. Esta flexibilidade resulta do desenho do chip ser modular (isto , em partes separadas mdulos), conferindo-lhe a possibilidade de uma rpida incluso de anlises da presena de novos biomarcadores, cidos nucleicos, protenas e clulas. Assim podem ser criadas modalidades de anlise especficas para diferentes tipos de doena [12]. Tambm recente um nanobiochip capaz de efectuar a deteco do cancro da boca, desenvolvido por investigadores da Universidade de Rice (Houston, Texas, EUA). Este sensor integra mltiplos processos laboratoriais numa plataforma microfludica, que envolvem o isolamento das clulas, o reconhecimento e marcao imunolgica dos biomarcadores associados ao cancro e a sua deteco e visualizao por meio de fluorescncia. Este nanobiochip tem a vantagem de evitar a realizao de uma biopsia, necessitando apenas de uma amostra da leso que pode ser obtida por escovagem da
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Gravao qumica de uma placa, em combinao com tcnicas fotogrficas

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mesma. Este chip mostrou-se sensvel em 97% dos casos analisados e exibiu especificidade na determinao da pr-malignidade em 93% dos tumores analisados [13].

Figura 4: Nanobiochip

Outro nanobiochip semelhante foi bioquimicamente programado para detectar conjuntos de protenas presentes na saliva utilizada no diagnstico cardaco. Nesta anlise, uma amostra de saliva inserida num receptculo semelhante a um carto de crdito, que contm o nanochip. Este receptculo depois inserido num dispositivo analisador, que processa a informao do estado cardaco do doente, comunicando-a imediatamente (Fonte: http://www.noticias21.com/node/237). Investigadores do London Centre for Nanotehnology desenvolveram um novo dispositivo que utiliza nanossensores que consistem em arrays que medem o vrus VIH e outras protenas indicativas de uma subida nos nveis virais, associadas progresso da doena. Uma das principais vantagens deste dispositivo a capacidade de monitorizar marcadores virais e imunolgicos num nico chip, sem necessidade de recorrer a anlises morosas em laboratrios especializados (Fonte: http://www3.imperial.ac.uk/newsandeventspggrp/imperialcollege/newssummary/ne ws_7-4-2009-12-27-49). A Philips desenvolveu tambm um outro tipo de biossensor que utiliza nanopartculas magnticas para medir molculas alvo. Este dispositivo permitir fazer diagnsticos e monitorizar um doente, por exemplo, a partir de casa. A anlise efectuada atravs da deposio de uma gota de sangue num cartucho, que se enche automaticamente. Esta amostra vai ser analisada atravs da aplicao de um campo magntico externo, que controla o movimento das nanopartculas inseridas no dispositivo aquando da sua produo. Estas nanopartculas, por sua vez, contm biorreceptores que se ligam s molculas alvo contidas na amostra de sangue. Um man situado na parte inferior do cartucho atrai as nanopartculas para uma superfcie onde esto imobilizados outros biorreceptores que se ligam tambm s molculas alvo, concentrando as mesmas na superfcie. Em seguida as nanopartculas magnticas so atradas por um man situado na parte superior do cartuxo. Finalmente procede-se leitura e deteco destas nanopartculas por mtodos pticos.

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Foram feitos estudos concretos com notrio sucesso com este dispositivo, relativos deteco de marcadores da ocorrncia de ataque cardaco. (Fonte: Philips Newscenter).

Figura 5: Cartucho do biossensor desenvolvido pela Philips. Fonte: Philips Newscenter

Em Portugal, na Faculdade de Cincias e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa (FCT-UNL) est a ser desenvolvido um nanobiossensor, o NSS1, que consiste num nanochip que permitir detectar compostos biolgicos e qumicos para diagnstico de doenas em tempo real. De acordo com um dos investigadores do projecto, uma das vertentes deste chip ser o diagnstico do vrus VIH. (Fonte: http://dn.sapo.pt/inicio/ciencia/interior.aspx?content_id=1514305). Para alm da investigao desenvolvida na FCT-UNL, ser de extrema importncia a colaborao do Laboratrio Ibrico de Nanotecnologia (INL), que ser a primeira instituio de investigao completamente internacional na rea das nanocincias e nanotecnologias, criada por deciso conjunta dos governos portugus e espanhol. Segundo o director-geral adjunto do INL, esta instituio ter uma rea especializada em nanomedicina, que estabelecer a ligao entre a engenharia e a medicina (Fonte: http://www.publico.pt/Sociedade/laboratorio-de-nanotecnologia-vai-privilegiar-areada-saude_1392132).

4 ANLISE DE PATENTES DE NANOBIOSSENSORES

4.1 Exemplos de patentes de nanobiossensores Aps uma pesquisa em bases de dados de patentes (Epodoc, WPI), foram encontrados diversos pedidos de nanobiossensores. A ttulo exemplificativo, foram seleccionados alguns pedidos de patente cuja descrio se considerou particularmente elucidativa e representativa de alguns dos tipos de nanobiossensores descritos no captulo anterior e que se apresentam de seguida.

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Inventores da Northwestern University fizeram um pedido de patente (US2010087723 Figura 6), que se refere a um nanobiossensor para deteco de analitos in vivo e ex vivo, em particular da glucose. De acordo com os inventores, este dispositivo mais rpido, simples e menos doloroso e permite uma medio contnua in vivo da glucose no sangue. Este dispositivo pode assim ser muito til na rpida deteco da hiper e hipoglicmia em doentes diabticos.

Figura 6: Pedido de patente de nanobiossensor para monitorizar a glucose no sangue US2010087723)

A empresa Nano Proprietary Inc., actualmente Applied Nanotech Inc., efectuou um pedido de patente (US2008302676 Figura 7) de um nanobiossensor de nanotubos de carbono para deteco de compostos qumicos e biolgicos. Os biorreceptores encontram-se imobilizados em polmeros, que por sua vez esto imobilizados nos nanotubos do carbono. Este nanobiossensor pode tambm ser utilizado para a deteco da glucose, sendo o biorreceptor, neste caso, a glucose oxidase. Esta enzima reage com a glucose para produzir perxido de hidrognio (vulgo gua oxigenada) que,

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por sua vez, modifica o ambiente qumico no sensor atravs da transferncia de electres, que detectada pelo elemento transdutor do sensor.

Figura 7: Pedido de patente de nanobiossensor de nanotubos de carbono US2008302676

A mesma empresa fez um pedido de patente (KR20070004572 Figura 7) para um nanobiossensor que contm uma matriz (array) contendo nanotubos de carbono, polmeros condutores, enzimas, nanopartculas e outros biorreceptores nano escala. Este nanobiossensor fabricado por processos fotolitogrficos e tem um sistema electrnico miniaturizado que permite a deteco eficiente de, por exemplo, ADN, metais e metabolitos (glucose, lactose, fructose, ureia, cido rico, fosfolpidos, entre outros). Os analitos, por seu lado, podem ser lquidos e tambm gases.

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Figura 8: Pedido de patente de nanobiossensor para deteco simultnea de vrios analitos, que podem ser lquidos ou gasosos KR20070004572

A Agency for Science, Technology and Research (A*STAR) de Singapura tem um pedido de patente (WO2008018834) para um sensor de nanofios para deteco de vrios tipos de molculas de grande dimenso como cidos nucleicos (ADN e ARN), protenas e hidratos de carbono. Este dispositivo pode ainda permitir a deteco de vrus como VIH. A superfcie dos nanofios encontra-se adaptada de modo a incorporar molculas que funcionam como biorreceptores, formando complexos com o analito de interesse. Estes biorreceptores podem ser, por exemplo, sequncias de cidos nucleicos (que se ligam especificamente a determinadas sequncias de cidos nucleicos de interesse) ou anticorpos ou fragmentos destes. A presena ou ausncia destes complexos vai provocar mudanas na carga das superfcies dos nanofios, que so detectveis e mensurveis por este sensor.

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Figura 9: Pedido de patente de um sensor de nanofios para deteco de molculas de grande dimenso - WO2008018834

A University of Southern Denmark fez um pedido de patente (Figura 10) ainda no publicado que se refere a um nanobiossensor que pode ser desenhado para detectar virtualmente qualquer molcula de pequenas dimenses, com elevada afinidade e especificidade. At agora foi testado para detectar a molcula de ATP (adenosina trifosfato). Este nanobiossensor pode ser utilizado in vivo, sem afectar o ambiente celular interno e apresenta um tempo de resposta de apenas alguns segundos, consistindo numa nanopartcula porosa constituda por um polmero, que encapsula um elemento biorreceptor nanobiossensor do tipo PEBBLE. A ligao do analito a este biorreceptor est associada a uma alterao da conformao do biorreceptor, que pode ser detectada por fluorescncia ou outras tcnicas de deteco.

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Figura 10: Pedido de patente de nanobiossensor para deteco de molculas de pequena dimenso

4.2 Diagnstico tecnolgico na rea dos nanobiossensores Foi efectuada uma anlise ao panorama de patenteamento na rea tcnica dos nanobiossensores, com o apoio da Thomson Innovation, uma ferramenta comercial de pesquisa e anlise de base de dados comercial fornecida pela Thomson/Reuters. Esta anlise visou identificar quais as principais empresas/instituies que fizeram pedidos de patente na rea dos nanobiossensores (Figura 11) e tambm quais os principais pases intervenientes nesta rea (Figura 12). Analisou-se ainda a evoluo da publicao de patentes ao longo da presente dcada (Figura 13).

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Figura 11: Nmero de publicaes das principais empresas ou instituies que fizeram pedidos de patente na rea dos biossensores e biochips no perodo de 2000 a 2009.

Como se pode constatar no grfico da Figura 11, os trs principais requerentes identificados na rea dos biossensores e tambm dos biochips so a Philips, o CNRS Centre National de la Recherche Scientifique (Frana) e o Korea Advanced Institute of Science & Technology (KAIST). Em termos da actividade de investigao e desenvolvimento de cada uma delas, a Philips tem incidido sobre biossensores que utilizam nanopartculas magnticas, como alis foi descrito no captulo anterior. Quanto ao CNRS, uma das suas patentes referese a um biossensor piezoelctrico que, como referido anteriormente, efectua deteces de alterao de massa referentes a processos biolgicos. Por fim, o KAIST tem privilegiado o desenvolvimento de biossensores de nanotubos para deteco de diversas molculas alvo.

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Figura 12: Grfico do nmero de publicaes por pas de patentes na rea dos biossensores e biochips no perodo de 2000 a 2009.

Relativamente ao nmero de publicaes, tendo por base o pas de prioridade, (Figura 12), verifica-se que apesar dos maiores requerentes em volume de pedidos no serem oriundos dos Estados Unidos, o nmero de empresas que se dedicam aos biossensores neste pas bastante elevado, facto que explica a preponderncia dos EUA em nmero de publicaes. Em seguida, prevalecem em nmero de publicaes o Japo e a Coreia, sendo notrio que as empresas destes pases apostam fortemente na tecnologia de biossensores.

Figura 13: Grfico da evoluo do nmero de publicaes no perodo de 2000 a 2009.

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Na evoluo do nmero de publicaes ao longo da ltima dcada (Figura 13) constata-se uma marcada tendncia de aumento, o que est em consonncia com a importncia crescente desta tecnologia a nvel mundial, quer em termos de investigao e desenvolvimento, quer em termos de disponibilizao de produtos comerciais. Depreende-se assim que existe uma crescente apetncia do mercado por esta tecnologia, o que tender a servir de motor ao investimento neste sector, sendo previsvel que o mesmo continue a crescer nos prximos anos.

5 CONCLUSO E PERSPECTIVAS FUTURAS

A nanomedicina comea agora a ser uma realidade, a comear com o nanodiagnstico, onde sero especialmente teis os nanobiossensores. Estes dispositivos, que representam uma tendncia em expanso e cada vez mais influente, permitem a realizao de mltiplas anlises clnicas personalizadas e diagnsticos precisos num s dispositivo e, em alguns casos, a partir de casa. O modo de obteno dos resultados destas anlises a partir de casa e a transmisso desta informao ao mdico assistente do doente basear-se-o em redes de comunicao de alta velocidade e sero naturalmente acompanhados pela rpida evoluo das tecnologias de informao. No futuro, as dimenses dos biossensores sero cada vez mais reduzidas, assim como a sua resoluo espacial e o volume necessrio para a deteco; podero ser obtidos resultados de anlises complexas em milissegundos. Simultaneamente, os biossensores tornar-se-o ferramentas de diagnstico cada vez mais usuais e pouco dispendiosas [14]. Estes dispositivos permitiro assim eliminar grande parte dos gastos associados realizao das anlises e diagnsticos clnicos e simultaneamente simplificar a aplicao dos mesmos. Assim, os nanobiossensores conduziro a importantes avanos tecnolgicos na indstria farmacutica e cuidados de sade e traro importantes benefcios econmicos aos sistemas de sade. No que concerne importncia da Propriedade Industrial na rea dos nanobiossensores, a anlise dos grficos anteriormente apresentados no diagnstico tecnolgico indica que, tratando-se de um campo tecnolgico emergente onde previsvel um aumento crescente do investimento em I&D, existe um grande nmero de empresas e instituies que desenvolvem trabalhos nesta rea, tudo indicando que a proteco por direitos de incidncia tecnolgica, como o caso de patentes de inveno, venha a assumir uma preponderncia crescente. Outro facto que aponta nesta direco que, actualmente, este campo tecnolgico ainda assenta muito numa fase de investigao e de testes clnicos dos produtos, pelo que medida que muitos destes desenvolvimentos atingirem a fase de comercializao, ser natural que a necessidade de proteco num contexto concorrencial de mercado venha a servir de estmulo a um aumento crescente das publicaes de pedidos de patente, tendncia, alis, que j se comea a desenhar, conforme se pde verificar nos grficos

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apresentados anteriormente. O mesmo ser verdade em relao a todos os direitos de incidncia comercial, como sejam as marcas, os logtipos e os desenhos ou modelos, que permitiro garantir a eficcia distintiva do marketing dos diferentes produtos. Desta forma, a Propriedade Industrial dever assumir um relevo crescente na rea dos biossensores, salvaguardando o carcter diferenciador dos diferentes desenvolvimentos tecnolgicos, maximizando as sinergias entre a Investigao e o mercado e servindo de estmulo ao investimento nesta rea tcnica.

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6 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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Nanobiossensores

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Notcias: http://nanobugle.wordpress.com/2009/06/26/nanobiosensor-to-detect-tumors/ http://www.designawards.com.au/application_detail.jsp?status=2&applicationID=226 6 http://medgadget.com/archives/2010/04/nanobiochip_detects_oral_cancer.html http://www.dailytech.com/Nanowires+Detect+Cancer+Biomarkers+in+Whole+Blood/a rticle17119.htm http://www.cli-online.com/featured-articles/clinical-applications-of-a-programmablenano-bio-chip/index.html http://www.noticias21.com/node/237 http://www.tdtonline.org/PDF/Revista0.pdf http://www.newscenter.philips.com/main/standard/news/backgrounders/2010/2010 0107_magnetic_biosensor.wpd http://dn.sapo.pt/inicio/ciencia/interior.aspx?content_id=1514305 http://www3.imperial.ac.uk/newsandeventspggrp/imperialcollege/newssummary/ne ws_7-4-2009-12-27-49 http://www.publico.pt/Sociedade/laboratorio-de-nanotecnologia-vai-privilegiar-areada-saude_1392132

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