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Diluição Fracionada
Diluição Fracionada
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Fevereiro/2004
1
INDICE
1. Introduo
03
2. Monitoramento microbiolgico........................................................... 05
3. Leveduras................................................................................ 08
4. Bactrias.......................................... 10
5. Mtodos microbiolgicos para controle em processos industriais de
produo de lcool............
5.1. Leveduras.....
15
15
15
19
26
26
1. INTRODUO
2. MONITORAMENTO MICROBIOLGICO
ocorrendo
inclusive
na
etapa
da
fermentao
alcolica,
tambm
bactrias
que
induzem
floculao
de
sobre as bactrias,
3. LEVEDURAS
4. BACTRIAS
10
13
14
5.1. Leveduras
16
B. Aspecto de um
Procedimento
ou
No. total de clulas/mL = no. clulas nos 100 retculos X 4 X diluio X 104
18
Procedimento
).
19
20
para
deteco
de
leveduras
contaminantes
(selvagens)
Saccharomyces
21
22
23
de
leveduras
contaminantes
baseiam-se
em
caractersticas
Meios
Saccharomyces
cerevisiae
Outras
No
Saccharomyces Saccharomyces
(-)
(-)
(+)
LWYN
(-)
(+)
(+)
Meio de Lisina
(-)
(-)
(+)
Em trabalho realizado por Ceccato-Antonini & Silva (2000), concluiuse que os meios acima citados foram eficientes no isolamento de leveduras
selvagens, embora o meio de Lisina tenha propiciado o isolamento de
Saccharomyces e o meio LWYN, de outros gneros, como no era esperado. A
contagem de colnias nesse ltimo meio mostrou-se difcil, devido ao grande
nmero
de
microcolnias
desenvolvidas,
possivelmente
resistentes
24
25
Procedimento
As
amostras
sero
novamente
centrifugadas,
desprezando-se
os
5.2. Bactrias
Procedimento
27
28
29
0,4 g
0,5 g
-glicose....................................................
5,0 g
-fosfato monopotssico*..........................
55,0 mg
-cloreto de potssio*................................
42,5 mg
-cloreto de clcio*....................................
12,5 mg
-sulfato de magnsio*..............................
12,5 mg
-cloreto frrico*........................................
0,25 g
-sulfato de mangans*.............................
0,25 g
-verde de bromocresol............................
2,2 mg
-cido nalidxico*.....................................
5,0 mg
-gar .......................................................
2,0 g
-ampicilina*..............................................
5,0 mg
100 mL
30
1,17 mg
-lisina......................................................
0,10 g
-gar .......................................................
2,0 g
-cido nalidxico.......................................
5,0 mg
-ampicilina ..............................................
5,0 mg
100 mL
0,20 g
-extrato de levedura................................
0,40 g
-peptona..................................................
0,20 g
-glicose ..................................................
1,00 g
0,10 g
0,05 g
-gar .......................................................
2,00 g
0,6 mg
0,01 g
5,0 mg
-ampicilina * ...........................................
5,0 mg
100 mL
31
5g
-extrato de carne.....................................
3g
-cloreto de sdio......................................
1g
-gar........................................................
20 g
1000 mL
0,01 g
-citrato de sdio........................................
2g
100 mL
Soluo salina
-cloreto de sdio.......................................
8,5 g
1000 mL
2g
-lcool a 95%...........................................
20 mL
Soluo B
-oxalato de amnio..... .............................
0,8g
-gua destilada.........................................
80 mL
Misturar as solues A e B.
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Lugol (Gram)
-iodo....... ........................
1g
-iodeto de potssio...................................
2g
300 mL
Safranina (Gram)
-safranina em soluo alcolica a 2,5%.
10 mL
100 mL
7. Bibliografia
TORTORA, G.J. FUNKE, B.R., CASE, C.L. Microbiologia. Porto Alegre: Artmed,
2000. 827p.
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