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AGOSTO/2013
Introduo
Fontes
Produo
Substratos
Inculo
Biorreatores (FSm e
FSS)
Comparao entre FSm
e FSS
Purificao
Ensaio de celulase
Concluses e
INTRODUO
1012
toneladas de biomassa
so produzidas no
planeta Terra
anualmente;
Cerca de 1,8 x
Cerca de 60%
lignocelulose;
35-50% de celulose;
20-35% de
hemicelulose;
Celulase
s
Celulose
Composto estrutural
essencial em:
txteis, de papel e materiais
de construo.
Principal nutriente para
animais ruminantes
Hemicelulases,
Diferentes enzimas que degradam lignina
Celulose
Cadeias lineares de -1,4-D-glicose;
Composta por longo polmero no
ramificado de glicose;
Cristais altamente insolveis.
Fonte: http://comendonaquimica.blogspot.com.br/2012_07_01_archive.html
Celulase
Componentes enzimticos principais:
- Endoglucanase;
Exoglucanases ou celobiohidrolases;
-glicosidases ou celobiase.
Celulose
Celobiose
Indstria
Alimentcia
Txtil
Aplicao
- Extrao de sucos de frutas e
vegetais,
- Tratamento de vinhos,
- Produtos de padaria.
-Biostoning
-Polimento de tecido celulsico
Papel
Limpeza
Agrobiotecnolgi
ca
- Reutilizao de papel
-Detergente para roupas
- Biocombustveis
- Suplemento da alimentao
FONTES
Fusarium solani
Microrganismos terrestres e
marinhos;
Fungos filamentosos:
Solo,
Plantas,
Ambiente marinho.
Bactrias.
Fonte: http://www.apsnet.org/publications/imageresources/Pages/phyto31.aspx
Aspergillus niger
Fonte: http://www.taxateca.com/ordeneurotiales.html
especfica.
Pesquisas:
Isolar estirpes selvagens altamente
produtoras, Trichoderma reesei
1970 E.U.A
Primeiro programa de mutao
Trichoderma reesei QM 6a : estirpe
selvagem.
Mutante: Trichoderma reesei QM 9414;
Produziu de duas a quatro vezes mais
celulase do que o tipo selvagem
QM
Trichoderma reesei
QM 6a
6a
Trichoderma sp.et al, 1971).
(Mandels
Fonte: http://ec.asm.org/content/11/7/885/F3.expansion.html
Fonte: http://mycorant.com/trichoderma-sex-and-fuel/
reesei .
Mutante T. reesei Rut NG-14 ;
Mutante T. reesei Rut C30
PRODUO
Depende do uso;
Custos relativamente altos;
Reduo dos custos:
Produo in situ: resduo do
Substrato
Fonte de carbono e
nitrognio solveis
Celulase pura
ou
monocomponen
te
Celulose pura
Resduos de colheitas:
Bagao da cana
Farelo de trigo
Serragem
Materiais lignocelulsicos
naturais;
Produtos de base a granel
com aplicao agrobiotecnolgica;
Pr-tratamento:
Fsico: moinho de bolas;
Qumico: cido ou base;
Combinado: exploso a
vapor.
Fonte: Santos et la, 2012.
Inculo
Disponibilidade de uma cultura inicial
Fonte: Infoescola
Biorreatores
Condies timas para o crescimento
do fungo:
Temperatura
pH
Transferncia de O2
Fermentao Submersa
Reator agitado
mecanicamente (STR);
T. reesei so
cultivados em:
Fermentadores de at
230 m;
Meios simples e
barato ;
Materiais como soro e
vrios resduos
vegetais.
Fonte:http://www.discoverarmfield.co.uk/data/cex/images/cem.jpg
cultivo;
Segundo estgio (48-96h):produo de
enzimas.
200-400 FPU/g
Produtividad
100-400 FPU/hL
e
Maior rendimento
Maior produtividade
Condies timas de
cultivo
Fermentao contnua no tem tido
Fermentao em Estado
Slido
Tecnologia alternativa;
Mutantes de T. reesei:
Rendimento: 100-200 FPU /g ;
Produtividade: 200-800 FPU /mL.
T. Reesei Rut C30
Fonte: http://www.slideshare.net/EmeC1/celulases
Reator bsico:
Reator bandejas do tipo Koji
(PlaFractor).
Fonte: http://www.sciencephoto.com/media/211806/enlarge
Novos modelos:
Controle da
temperatura
Controle da
umidade
Controle on-line
Fermentao
Fermentao Slida
Submersa
Prefervel
Enzimas puras ou
O produto fermentado
quando
componentes
bruto pode ser usado
enzimticos especficos
diretamente.
so desejados.
Rendimento 200-400 FPU/g DM em
100-400 FPU/hL
global
substrato
Produtivida
10-20 FPU/mL
33 FPU/mL
de
Reator
STR- Stirred Tank
Reator Tipo Koji
bsico
Reactors
Custo
$ 160/m
$150/ toneladas
Rendimento mdio de Rendimento mdio de
celulase de 20 FPU/ mL produo de celulase
Estimativa do custo de
de 50 FPU/ g de
produo: $8/ 106
substrato, Estimativa
FPU
do custo de produo:
$3/ 106
PURIFICAO
Primeira etapa downstream (FSm):
Fonte: http://media-sa.viva-images.com/vivastreet_br/clad/63/7/71619394/large/1.jpg?dt=11246aa48ae159eb188c80d0a8fe6a2f
Fonte:http://www.hellopro.es/Riera_Nadeu_S_A_-8923-noprofil-1001494-10142-0-1-1-fr-societe.html
lquido (sobrenadante).
Ultrafiltrao
Fonte http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/b/b6/Ultrafiltration_Grundm%C3%BChle.jpg
componentes:
Cromatografia de troca inica
omatografia de excluso
Cromatografia de afinidade
or tamanho
ENSAIO DE CELULASE
Identificar a atividade hidroltica total em
substratos selecionados;
Mtodo mais utilizado: Ensaio da
atividade em papel filtro (FPA)
Quantifica a capacidade de hidrlise de
uma preparao enzimtica de numa
faixa do papel filtro Whatman #1 em
acares redutores.
Fonte: http://chemistry.umeche.maine.edu/CHY431/Wood12.html
Fonte: http://enzymeinchina.com.pt/product/6-3b.jpg
CONCLUSO E
PERSPECTIVAS
A celulase uma das mais importantes
enzimas industriais;
Variabilidade de aplicao na indstria;
Limitaes: alto preo;
Fonte: http://www.epama.com.br/demissoes-de-alto-custo
Fonte: http://chemistry.umeche.maine.edu/CHY431/Wood12.html
celulase so necessrios:
1) Seleo e melhoria dos melhores
microrganismos produtores de celulase;
2) Escolha da tecnologia de fermentao;
de lignocelulose ir guiar a
produo microbiana de
celulase.
Referncias
CASTRO, A. M.; JNIOR, N. P. Produo, propriedades e aplicao de
de
GUIMARES, V.M.; REZENDE, S. T. Potencial da palha de cana-deacar para produo de etanol .Quim. Nova, v. 35, n. 5, p. 10041010, 2012.
SURYANARAYAN,