UNIVERSIDADE ESTADUAL DO SUDOESTE DA BAHIA – UESB

DEPARTAMENTO DE FITOTECNIA E ZOOTECNIA– DFZ

XILÓFAGOS

RASTREAMENTO DE ENZIMAS EM CUPINS COM ALTO POTENCIAL DE

DEGRADAÇÃO DE RESÍDUOS LIGNOCELULÓSICOS PARA PRODUÇÃO DE
ETANOL

Discente: Welder Freitas Santos

Orientador: Prof. Rita de Cássia Antunes Lima de Paula

Vitória da Conquista – BA
Novembro de 2019
 INFORMAÇÕES
Autores:
Irapoan Bertholdo; Andressa Bittencourt ; Isabelly Santos ; Vinícius Thomaz ;
Severino Lucena
Apresentação:
Anais 5º Simpósio de Gestão Ambiental e Biodiversidade (21 a 23 de junho
2016).
Sessão Técnica: Biotecnologia.
CEFET RJ.

Rastreamento de enzimas em cupins com alto potencial de degradação de resíduos lignocelulósicos para produção de etanol 2
 INTRODUÇÃO
 Biomassa lignocelulósica.
O mais abundante recurso biológico renovável da terra é a biomassa lignocelulósica.

 Biocombustíveis de 2° geração.
Produzidos a partir de resíduos agrícolas, florestais e industriais.

 Diferentes tipos de biomassa.

Palha da cana de açúcar se destaca.

 Conversão da biomassa em açucares fermentáveis.

Dificuldades técnicas e econômicas.

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 INTRODUÇÃO
 Dificuldades de conversão.

Figura 1 – Parede celular vegetal e seu principais componentes

Fonte – Rubin (2008)

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 INTRODUÇÃO

REFERENCIAL
Insetos queTEÓRICO
alimentam de madeira.

Enzimas produzidas pelos próprios insetos e

por simbiontes
 Protozóarios, fungos, bactérias e archaea

capacidade de degradar lignocelulose dá aos Figura 2 – Cornitermes cumulans.

Fonte – agrolink.com.br
cupins um lugar importante no ciclo do
carbono.

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 INTRODUÇÃO
Exemplo de Biorrefinaria de etanol 2G

Figura 3 – Esquema de processo de produção de etanol 2G a partir de bagaço de cana de açúcar (SCB) . 1 Moagem; 2 Pré tratamento; 3
Sacarificação; 4 Fermentação; 5 Destilação.
Fonte – Empresa Raízen

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 INTRODUÇÃO

Nesse contexto, o rastreamento de enzimas hidrolíticas no trato digestivo de

cupins da espécie Cornitermes cumulans é altamente relevante, uma vez que as
buscas por suas enzimas contidas no seu trato intestinal possuem
características desejáveis para incorporação em processos industriais,
objetivando a decomposição de resíduos ricos em celulose e propiciando a
produção de biocombustíveis de segunda geração e consequentemente, o seu
barateamento.

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 MATERIAL E MÉTODOS
 Os cupinzeiros foram coletados no estado de Minas Gerais.

 Eles foram levados para o laboratório e somente os cupins operários

foram selecionados para a dissecção.

 Foi realizada a dissecção dos cupins, sendo o tubo digestivo separado

em quatro diferentes seções: glândula salivar, intestino anterior, intestino
médio e intestino posterior

 Estes foram agrupados em um pool de 10 insetos, armazenados e

criopreservados em microtubos de 1,5 ml.

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 MATERIAL E MÉTODOS
A detecção das atividades
enzimáticas em diferentes
seções do tubo digestivo dos
cupins (glândula salivar,
intestinos anterior, médio e
posterior)

Figura 4- Parâmetros físico-químicos no

intestino de cupins inferiores. Medidas de
pH, pressão parcial – P (kPa) de O2.
Fonte – Brune 2014

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 MATERIAL E MÉTODOS
 Foi realizada sobre os ensaios enzimáticos miniaturizados: b-Glicosidase,
a- Amilase, Carboximetil Celulase (CMC) e Celulase Cristalina.

 Utilizando os seguintes substratos: 4-Nitrofenil b-D-Glicopiranosídeo,

Carboximetilcelulose, Amido, Celulose Cristalina (Avicel).

 Para a realização dos ensaios as amostras contendo intestino anterior,

médio e posterior foram diluídas 10x, já a glândula salivar foi diluída 2x

 A quantificação de proteínas dos ensaios foi feita através do método

BCA.

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 RESULTADOS E DISCUSSÃO
Tabela 1 – Atividades hidrolíticas e quantidade de proteína presente nas glândulas salivares e
em diferentes partes do intestino (tecido mais conteúdo) de operários de Cornitermes
cumulans.

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 RESULTADOS E DISCUSSÃO
 Um dado que chama a atenção é que o sítio preferencial de secreção de
enzimas celulolíticas é o intestino médio, e não o intestino posterior.

 Os dados de atividade sugerem que as celulases secretadas pelo inseto

correspondem à atividade hidrolítica majoritária no intestino de cupins.

 Embora tal fato não signifique que celulases de microrganismos não sejam
relevantes, ainda mais em um contexto biotecnológico, ele ressalta a
importância do transcriptoma do intestino médio desses animais, e a
provável relevância que as enzimas originadas de cupins podem ter no
tratamento de biomassas lignocelulolíticas.

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 CONCLUSÃO

Foi confirmada a existência das principais atividades enzimáticas envolvidas

no processo de degradação de biomassa lignocelulósica. As enzimas
secretadas pelo inseto são responsáveis pelas maiores atividades de
celulases do cupim, em comparação com as enzimas secretadas pelos
micro-organismos presentes no intestino posterior do inseto.

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REFERÊNCIAS
BERTHOLDO, I.; BITTENCOURT, A.; SANTOS, I.; THOMAZ, V.; LUCENA, S. Rastreamento
de enzimas em cupins com alto potencial de degradação de resíduos lignocelulósicos
para produção de etanol. Anais 5º Simpósio de Gestão Ambiental e Biodiversidade (21 a 23
de junho 2016).
Brune A. Symbiotic digestion of lignocellulose in termite guts. Nat Rev Microbiol.
2014;12:168-80.
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DE RESÍDUOS LIGNOCELULÓSICOS PARA PRODUÇÃO DE ETANOL

OBRIGADO

CONTATO: welderfreitas@hotmail.com
(77) 98804-0221