MANUAL DE PROCEDIMENTOS

COLETA, ACONDICIONAMENTO E TRANSPORTE DE AMOSTRAS BIOLGICAS

LABORATRIO DE SADE PBLICA DR. GIOVANNI CYSNEIROS

MANUAL

DE

PROCEDIMENTOS: E

COLETA, DE

ACONDICIONAMENTO AMOSTRAS BIOLGICAS.

TRANSPORTE

GOINIA GO 2010

LABORATRIO DE SADE PBLICA DR. GIOVANNI CYSNEIROS

MARCONI FERREIRA PERILLO JNIOR Governador do Estado de Gois

ANTNIO FALEIROS FILHO Secretria de Estado da Sade

MARIA BRBARA HELOU RODRIGUES Diretoria Geral Laboratrio de Sade Pblica Dr. Giovanni Cysneiros

MARCOS VINICIOS MILKI Diretoria Administrativa Laboratrio de Sade Pblica Dr. Giovanni Cysneiros

ILDA MARIA DA SILVA OLIVEIRA Diretoria Tcnica Laboratrio de Sade Pblica Dr. Giovanni Cysneiros

CARMEM HELENA RAMOS Departamento de Biologia Mdica Laboratrio de Sade Pblica Dr. Giovanni Cysneiros

LABORATRIO DE SADE PBLICA DR. GIOVANNI CYSNEIROS EQUIPE RESPONSVEL PELA ELABORAO

ANDRA FINOTTI Diviso de Virologia ANGLICA LIMA DE BASTOS Seo de Micologia ANGLICA SOCORRO DO NASCIMENTO ACIOLI Seo de Imunologia / Parasitologia CARMEN HELENA RAMOS Departamento de Biologia Mdica JOS EMMANUEL CONRADO ACIOLI Seo de Anlises Complementares MARCELO SANTALUCIA Seo de Biologia MARIA JOS DA CUNHA Diviso de Biologia Molecular ROBMARY MATIAS DE ALMEIDA Seo de Bacteriologia SUELI LEMES DE VILA ALVES Seo de Micobactrias VAIRENE ISABEL W. DE OLIVEIRA CHAVEIRO Diviso de Gerenciamento de Amostras

APOIO TCNICO-OPERACIONAL

JOO QUIRINO RODRIGUES JUNIOR Executor Administrativo Departamento de Biologia Mdica

LABORATRIO DE SADE PBLICA DR. GIOVANNI CYSNEIROS

coisa preciosa, a sade, e a nica, em verdade, que merece que em sua procura empreguemos no apenas o tempo, o suor, a pena, os bens, mas at a prpria vida; tanto mais que sem ela a vida acaba por tornar-se penosa e injusta.

Montaigne, Michel de. In Ensaios.

LABORATRIO DE SADE PBLICA DR. GIOVANNI CYSNEIROS

AGRADECIMENTO ESPECIAL A todos os servidores do LACEN pela colaborao na ocasio de coleta das informaes contidas neste Manual.

SUMRIO
APRESENTAO ................................................................................................................................ I LABORATRIO DE SADE PBLICA DR. GIOVANNI SYNEIROS ........................................ II O DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA MDICA ............................................................................. III ORIENTAES GERAIS ................................................................................................................... IV ROTEIRO DE CONSULTA................................................................................................................. V ________________________________________________________________________________ 1. AIDS / HIV............................................................................................................................................. 01 1.1. AIDS / HIV CONTAGEM DE LINFCITOS CD4+ E CD+ 1.2. AIDS / HIV DETECO DAS MUTAES ASSOCIADAS COM A RESISTNCIA DO HIV AOS ANTI-RETROVIRAIS 1.3. AIDS / HIV DETECO QUALITATIVA DO DNA PR-VIRAL 1.4. AIDS / HIV QUANTIFICAO DA CARGA VIRAL (b - DNA) 1.5. AIDS / HIV SOROLOGIA 2. 3. 4. 5. ASPERGILOSE..................................................................................................................................... 03 BRUCELOSE SOROLOGIA ............................................................................................................ 03 CANCRO MOLE .................................................................................................................................. 04 CANDIDIASE........................................................................................................................................ 04 5.1. CANDIDASE SISTMICA 5.2. CANDIDASE SUPERFICIAL 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. CISTICERCOSE - IMUNOFLUORESCNCIA INDIRETA IGG ................................................. 05 COCCDIOS INTESTINAIS ISOSPORA BELLI CRYPTOSPORIDIUM PARVUM CYSCLOSPORA CAYETANENSIS................................................................................................... 06 COLINESTERASE ............................................................................................................................... 06 COQUELUCHE .................................................................................................................................... 07 CRIPTOCOCOSE................................................................................................................................. 07 CROMOMICOSE (CROMOBLASTOMICOSE).............................................................................. 08 CULTURAS PARA BACTRIAS AERBIAS ................................................................................. 08 12.1. CULTURA ABSCESSOS LESES FECHADAS 12.2. CULTURA ESCARRO 12.3. CULTURA FERIDA (CIRRGICAS, MORDEDURAS DE ANIMAIS, QUEIMADURAS, LACERAES, ESCARAS, LCERAS DE P DIABTICO) 12.4. CULTURA FEZES 12.5. CULTURA LAVADO BRONCO - ALVEOLAR 12.6. CULTURA LIQUIDOS ORGNICOS ESTREIS: LQUIDO PLEURAL, ASCTICO E BILIAR 12.7. CULTURA NASOFARINGE (SECREO) 12.8. CULTURA PONTA DE CATETER 12.9. CULTURA SANGUE

12.10. CULTURA SECREO OCULAR 12.11. CULTURA SECREO DE OROFARINGE 12.12. CULTURA SECREO DE OUVIDO 12.13. CULTURA SECREO TRAQUEAL 12.14. CULTURA SECREO VAGINAL 12.15. CULTURA URINA 13. DENGUE................................................................................................................................................ 15 13.1. DENGUE COM COMPLICAES NEUROLGICAS DIAGNSTICO DIFERENCIAL PARA ENTEROVRUS 13.2. DENGUE COM COMPLICAES NEUROLGICAS SOROLOGIA IgM ou IgG 13.3. DENGUE DETECO QUALITATIVA DO RNA 13.4. DENGUE E FEBRE AMARELA - HISTOPATOLGICO IMUNOHISTOQUMICA VSCERAS 13.5. DENGUE E FEBRE AMARELA ISOLAMENTO VIRAL SANGUE 13.6. DENGUE E FEBRE AMARELA - ISOLAMENTO VIRAL VSCERAS 13.7. DENGUE E FEBRE AMARELA PCR SORO 13.8. DENGUE E FEBRE AMARELA SOROLOGIA IgM ou IgG 13.9. DENGUE ESPECTRO DE GOTAS 13.10. DENGUE PESQUISA ENTOMOLGICA 14. 15. 16. DERMATOFITOSES (TINHAS)......................................................................................................... 20 DIFTERIA ............................................................................................................................................. 20 DOENA DE CHAGAS ....................................................................................................................... 21 16.1. DOENA DE CHAGAS AGUDA SOROLOGIA 16.2. DOENA DE CHAGAS PESQUISA ENTOMOLGICA 16.3. DOENA DE CHAGAS PESQUISA PARASITOLGICA (T. Cruzi) EM TRIATOMNIOS 16.4. DOENA DE CHAGAS TRIATOMNIOS ENCAMINHADOS PELA POPULAO 16.5. DOENA DE CHAGAS SOROLOGIA 17. 18. DOENA DE LYME SOROLOGIA................................................................................................ 22 DOENA DE CREUTZFELDT .......................................................................................................... 23 18.1. DOENA DE CREUTZFELDT JACOB PESQUISA DA PROTENA 14-3-3 LIM 15 18.2. DOENA DE CREUTZFELDT JACOB PESQUISA DE AC PrPsc / PROTENA TAU / UBIQUITINA / GFAP / AMILIDE / SINUCLEINA 18.3. DOENA DE CREUTZFELDT JACOB PESQUISA DE POLIMORFISMO OU MUTAES DO CDON 129 DO GEN PRPN 19. 20. 21. 22. ESPOROTRICOSE............................................................................................................................... 24 ESQUITOSSOMOSE PESQUISA ENTOMOLGICA................................................................. 24 FEBRE AMARELA PESQUISA ENTOMOLGICA ................................................................... 25 FEBRE MACULOSA ........................................................................................................................... 25 22.1. FEBRE MACULOSA CULTIVO CELULAR PARA ISOLAMENTO EM SHELL VIAL E PCR SANGUE E TECIDOS 22.2. FEBRE MACULOSA IMUNOHISTOQUMICA - BIPSIA DE PELE

22.3. FEBRE MACULOSA IMUNOHISTOQUMICA TECIDOS 22.4. FEBRE MACULOSA SOROLOGIA POR IFI 23. 24. FEOHIFOMICOSE .............................................................................................................................. 27 GONORREIA ........................................................................................................................................ 27 24.1. GONORRIA BACTERIOSCOPIA + CULTURA 24.2. GONORRIA CULTURA 25. HANTAVRUS ...................................................................................................................................... 28 25.1. HANTAVRUS IMUNOHISTOQUMICA VCERAS 25.2. HANTAVRUS PCR SORO / SANGUE TOTAL 25.3. HANTAVRUS SOROLOGIA SORO 26. HEPATITES VIRAIS ........................................................................................................................... 29 26.1. HEPATITE B QUANTIFICAO DO DNA DO VRUS DA HEPATITE B 26.2. HCV PCR QUALITATIVO PCR QUANTITATIVO GENOTIPAGEM (LIPA) 26.3. HEPATITES VIRAIS - SOROLOGIA 27. 28. 29. HIALOHIFOMICOSE ......................................................................................................................... 31 HISTOPLASMOSE .............................................................................................................................. 31 LEISHMANIOSE.................................................................................................................................. 31 29.1. LEISHMANIOSE CANINA SOROLOGIA 29.2. LEISHMANIOSE HUMANA PUNO MEDULAR LVA 29.3. LEISHMANIOSE PESQUISA ENTOMOLGICA 29.4. LEISHMANIOSE TEGUMENTAR AMERICANA PESQUISA DIRETA 29.5. LEISHMANIOSE VISCERAL CONTROLE DA QUALIDADE DE LMINAS 29.6. LEISHMANIOSE VISCERAL SOROLOGIA 30. 31. LEPTOSPIROSE SOROLOGIA ...................................................................................................... 34 MALRIA ............................................................................................................................................. 34 31.1. MALRIA CONTROLE DA QUALIDADE DE LMINAS DA PESQUISA DIRETA 31.2. MALRIA PESQUISA ENTOMOLGICA 31.3. MALRIA PESQUISA DE HEMATOZORIOS 32. MENINGITE ......................................................................................................................................... 36 32.1. MENINGITE VIRAL ISOLAMENTO VIRAL E PCR 32.2. MENINGITES AGLUTINAO PELO LTEX + CIE 32.3. MENINGITES CULTURA LQUOR 32.4. MENINGITES CULTURA SANGUE 32.5. MENINGITES QUIMIOCITOLGICO + BACTERIOSCPICO 33. 34. MICETOMAS (ACTINOMICETOMAS EUMICETOMAS)........................................................ 38 MICOBACTRIAS NO TUBERCULOSAS ................................................................................... 39 34.1. MICOBACTRIAS NO TUBERCULOSAS 34.2. MICOBACTRIAS NO TUBERCULOSAS IRAS 35. MICOSES SISTEMICAS (PARACOCCIDIODOMICOSE, HISTOPLASMOSE E ASPERGILOSE) SOROLOGIA....................................................................................................... 40

36. 37. 38. 39. 40. 41. 42. 43. 44.

MONONUCLEOSE INFECCIOSA SOROLOGIA ........................................................................ 40 PARACOCCIDIODOMICOSE (BLASTOMICOSE SUL-AMERICANA) .................................... 40 PIEDRA BRANCA E PIEDRA NEGRA............................................................................................. 41 PITIRASE VERSICOLOR ERITRASMA..................................................................................... 41 PNEUMOCYSTIS CARINI ................................................................................................................. 42 POLIOVRUS ISOLAMENTO VIRAL E PCR ............................................................................. 42 ROTAVRUS E ADENOVRUS EIERA ......................................................................................... 43 RUBOLA ISOLAMENTO VIRAL ................................................................................................ 43 SARAMPO............................................................................................................................................. 44 44.1. SARAMPO ISOLAMENTO VIRAL 44.2. SARAMPO E RUBOLA SOROLOGIA

45.

SFILIS................................................................................................................................................... 44 45.1. SFILIS PRIMRIA/CANCRO DURO TREPONEMA PALLIDUM 45.2. SFILIS SOROLOGIA

46. 47. 48.

SNDROME GRIPAL (INFLUENZA A E B, ADENOVRUS VRUS SINCIVIAL RESPIRATRIO PARA INFLUENZA 1,2 E 3) IMUNOFLUORESCNCIA INDIRETA....... 45 TINHA NEGRA..................................................................................................................................... 45 TOXOPLASMOSE ............................................................................................................................... 46 48.1. TOXOPLASMOSE IMUNOFLUORESCNCIA INDIRETA IGG E IGM 48.2. TOXOPLASMOSE SOROLOGIA

49. 50.

TRICOMICOSE NODULAR AXILAR .............................................................................................. 46 TUBERCULOSE................................................................................................................................... 47 50.1. TUBERCULOSE BIPSIA, FRAGMENTOS CUTNEOS E DE OSSOS 50.2. TUBERCULOSE INTESTINAL BIPSIA RETAL 50.3. TUBERCULOSE LQUIDOS ASSPTICOS (PLEURAL, ASCTICO, SINOVIAL, PERICRDICO E PERITONEAL) 50.4. TUBERCULOSE MENINGEA LCR 50.5. TUBERCULOSE MILIAR SANGUE; ASPIRADO DE MEDULA SSEA 50.6. TUBERCULOSE PULMONAR ESCARRO DE EXPECTORAO ESPONTNEA 50.7. TUBERCULOSE PULMONAR ESCARRO DE EXPECTORAO INDUZIDA 50.8. TUBERCULOSE PULMONAR LAVADOS: BRNQUICO, BRONCOALVEOLAR, TRAQUEOBRNQUICO 50.9. TUBERCULOSE PULMONAR LAVADO GSTRICO 50.10. TUBERCULOSE PUS PROVENIENTE DE CAVIDADE ABERTA 50.11. TUBERCULOSE PUS PROVENIENTE DE CAVIDADE FECHADA 50.12. TUBERCULOSE RENAL - URINA 50.13. TUBERCULOSE TESTE DE SENSIBILIDADE

51.

ZIGOMICOSE ...................................................................................................................................... 53 BIBLIOGRFIA CONSULTADA ......................................................................................................... 54

ANEXOS
ANEXO I ................... AVALIAO DO ESPECTRO DE GOTAS LEITURA DE GOTAS; ANEXO II.................. AVALIAO DO ESPECTRO DE GOTAS; ANEXO III ................ BOLETIM DE CAPTURA DE ARTRPODES; ANEXO IV ................ DETECO DO DNA PR-VIRAL EM CRIANAS NASCIDAS DE MES SOROPOSITIVAS E GESTANTES COM SOROLOGIA INDETERMINADA NO BRASIL; ANEXO V ................. FICHA DE ENCAMINHAMENTO DE MATERIAL PARA LEISHMANIOSE CANINA; ANEXO VI ................ FICHA DE ENCAMINHAMENTO PARA REALIZAO DE EXAME CONFIRMATRIO; ANEXO VII ............... FICHA DE LEISHIMANIOSE CANINA; ANEXO VIII .............. FICHA DE PESQUISA DE FLEBOTOMNEOS BOLETIM DIRIO DE CAMPO; ANEXO IX ................ FICHA DE SOLICITAO DE EXAMES GAL; ANEXO X ................. FICHA QUANTIFICAO DE CIDO NUCLICO CARGA VIRAL HBV; ANEXO XI ................ FORMULRIO DE COLINESTERASE I (COLIN I); ANEXO XII ............... FORMULRIO DE ENVIO DE LMINAS PARA CONTROLE DA QUALIDADE; ANEXO XIII .............. FORMULRIO DE SOLICITAO DE CULTURA E TESTE DE SENSIBILIDADE PARA MICOBACTRIAS; ANEXO XIV.............. FORMULRIO PARA SOLICITAO DE EXAME DE GENOTIPAGEM HIV FORMULRIO A; ANEXO XV ............... FORMULRIO PARA SOLICITAO DE IDENTIFICAO DE MICOBACTRIAS NO TUBERCULOSAS; ANEXO XVI.............. INSTRUES DE COLETA PARA PESQUISA DIRETA PARA LTA; ANEXO XVII ............ LAUDO MDICO PARA EMISSO DE BPA I CONTAGEM DE LINFSITOS; ANEXO XVIII ........... LAUDO MDICO PARA EMISSO DE BPA I QUANTIFICAO DE CIDO NUCLICO CARGA VIRAL DO HIV; ANEXO XIX.............. LAUDO PARA SOLICITAO/AUTORIZAO DE PROCEDIMENTO LABORATORIAL; ANEXO XX ............... MANUAL DE COLETA DA QUANTIFICAO DO RNA VIRAL DO HIV-1 CARGA VIRAL; ANEXO XXI.............. NORMAS PARA O ATENDIMENTO DOS EXAMES DE BIOLOGIA MOLECULAR PARA HEPATITE C; ANEXO XXII ............ PARECER DO MDICO DE REFERNCIA EM GENOTIPAGEM HIV FORMULRIO B; ANEXO XXIII ........... PORTARIA N 2472, DE 31 DE AGOSTO DE 2010; ANEXO XXIV ........... PROTOCOLO DE COLETA, ACONDICIONAMENTO E TRANSPORTE DE AMOSTRAS CLNICAS PARA CULTURA DE BACTRIAS AERBIAS; ANEXO XXV ............ RECOMENDAES PARA COLETA E TRANSPORTE DE AMOSTRAS BIOLGICAS PARA CONTAGEM DE LINFCITOS T CD4/CD8/CD45; ANEXO XXVI ........... RELAO DOS INSETICIDAS INIBIDORES DA COLINESTERASE SANGUNEA, USO, PROGRAMA E PERIODICIDADE; ANEXO XXVII .......... SINAN FICHA DE INVESTIGAO EPIDEMIOLGICA; ANEXO XXVIII......... SINAN FICHA DE NOTIFICAO/INVESTIGAO DOENAS DE CREUTZFELDT JAKOB; ANEXO XXIX ........... SOLICITAO DE TESTE MOLECULAR PARA GESTANTES; ANEXO XXX ............ TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE ESCLARECIMENTO DST/AIDS; ANEXO XXXI ........... TERMO DE CONSENTIMENTO PS-INFORMADO; ANEXO XXXII .......... TERMO / PROTOCOLO / FICHA DE ENCAMINHAMENTO DE AMOSTRAS BIOLGICAS. ANEXO XXXIII......... TEGUMENTAR HUMANA (LTA) - FORMULRIO DE ENVIO DE LMINAS PARA CONTROLE DA QUALIDADE.

ABREVIATURAS
BHI ....................BRAIN HEART INFUSION; BPA....................BOLETIM DE PRODUO AMBULATORIAL; CDC ...................CENTER ON DISEASE CONTROL; CGLAB..............COORDENAO GERAL DE LABORATRIOS DE SADE PBLICA; CGPNCD...........COORDENAO GERAL DO PROGRAMA NACIONAL DE CONTROLE DA DENGUE; CIE.....................CONTRAIMUNOELETROFORESE; CIM....................CONCENTRAO INIBITRIA MNIMA; CNES .................CADASTRO NACIONAL DE ESTABELECIMENTOS DE SADE; CEPCISS ...........COORDENAO ESTADUAL DE PREVENO E CONTROLE DE INFECO EM SERVIOS DE SADE; DF ......................DISTRITO FEDERAL; DNA ...................CIDO DESOXIRRIBONUCLEICO; DPCISS..............DIVISO DE PREVENO E CONTROLE DE INFECO EM SERVIOS DE SADE; EDTA.................(ETHYLENEDIAMINE TETRAACETIC ACID) CIDO ETILENODIAMINO TETRAACTICO; EIERA ...............ENSAIO IMUNOENZIMTICO COMBINADO PARA ROTAVRUS E ADENOVRUS; FIOCRUZ .........FUNDAO INSTITUTO OSWALDO CRUZ; FTA-ABS...........FLUORESCENT TREPONEMAL ANTIBODY ABSORPTION; GAL ...................SISTEMA DE GERENCIAMENTO DE AMBIENTE LABORATORIAL; HAV ...................VRUS DA HEPATITE A; HBV ...................VRUS DA HEPATITE B; HCV ...................VRUS DA HEPATITE C; HDT ...................HOSPITAL DE DOENAS TROPICAIS; HPLC.................HIGH-PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY; IAL.....................INSTITUTO ADOLFO LUTZ; IRAS ..................INFECES RELACIONADAS ASSISTNCIA SADE; LACEN..............LABORATOTIO CENTRAL DE SAUDE PBLICA; LCR ...................LQUIDO CEFALORRAQUIDIANO; LTA....................LESHIMANIOSE TEGUMENTAR AMERICANA; LV ......................LESHIMANIOSE VISCERAL; LVA ...................LESHIMANIOSE VISCERAL AMERICANA; LTA....................LESHIMANIOSE TEGUMENTAR AMERICANA; MNT...................MICOBACTRIAS NO TUBERCULOSAS; MS......................MINISTRIO DA SADE; PFA ....................PARALISIA FLCIDA AGUDA; PNH ...................PRIMATAS NO HUMANOS; PCR....................REAO DE POLIMERIZAO EM CADEIA; POP....................PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRO; RNA ...................CIDO RIBONUCLEICO; RT ......................REAL TIME; SINAN ...............SISTEMA DE INFORMAES DE AGRAVOS DE NOTIFICAO; SISLAB..............SISTEMA NACIONAL DE LABORATRIOS DE SADE PBLICA; SUS ....................SISTEMA NICO DE SADE; SVISA ................SUPERINTENDNCIA DE VIGILNCIA SANITRIA E AMBIENTAL; SVO....................SERVIO DE VERIFICAO DE BTO; TBMDR .............TUBERTCULOSE MULTIDROGA RESISTENTE; UFRJ..................UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO DE JANEIRO; USP ....................UNIVERSIDADE DE SO PAULO; VDRL.................VENEREAL DISEASE RESEARCH LABORATORY.

APRESENTAO

Este manual foi elaborado pelo Departamento de Biologia Mdica do Laboratrio de Sade Pblica Dr. Giovanni Cysneiros (LACEN GO), vinculado Secretaria de Estado da Sade, com o objetivo de orientar a coleta, o acondicionamento e o transporte de materiais para a realizao de uma anlise com qualidade. Ressalta-se o fato de que um exame coletado, armazenado ou transportado de maneira inadequada, dificilmente ter um resultado confivel, independentemente da qualidade tcnica em que o ensaio for realizado. Portanto, este Manual deve ser consultado freqentemente por todos os usurios do Sistema de Vigilncia em Sade, que fazem uso dos servios de diagnstico laboratorial do LACEN GO.

MISSO
Participar das aes de vigilncia em sade, realizando anlises laboratoriais com qualidade, coordenando a rede estadual de laboratrios e gerando informaes para a melhoria da sade pblica.

II

LABORATRIO DE SADE PBLICA DR. GIOVANNI CYSNEIROS

O Laboratrio Central de Sade Pblica Dr. Giovanni Cysneiros (LACEN-GO) uma unidade de referncia da Secretaria de Estado da Sade de Gois, responsvel pela realizao de diagnstico e monitoramento de patgenos e da qualidade de produtos, aes consideradas estratgicas para os sistemas de vigilncias epidemiolgica, ambiental e sanitria. integrante do Sistema Nacional de Laboratrios de Sade Pblica (SISLAB), regulamentado por meio da Portaria n. 2031, de 23 de setembro de 2004 do Ministrio da Sade, que dispe sobre um conjunto de Redes Nacionais De Laboratrios organizados em sub-redes, por agravos ou programas, de forma hierarquizada por grau de complexidade das atividades relacionadas Vigilncia em Sade. As aes desenvolvidas pelo SISLAB, em atendimento s necessidades do Sistema nico de Sade nas reas de vigilncia, preveno e controle de doenas e monitoramento de resistncia a drogas, entre outras, proporcionam intervenes oportunas e eficazes na reduo e na eliminao de riscos sade da populao. Com atribuies importantes no contexto da Sade Pblica, o LACEN responsvel pela definio das diretrizes laboratoriais a serem seguidas no mbito do SUS e no conjunto de suas competncias essenciais, destacando-se: o desenvolvimento de recursos humanos, a incorporao e o repasse de tecnologias para a Rede Estadual de Laboratrios, padronizao de novas tcnicas e controle de qualidade dos servios desenvolvidos. A Figura a seguir mostra as atribuies do LACEN. . FIGURA 1 Atribuies do LACEN conforme port. N. 2031/SISLAB.
Coordenar a rede de laboratrios pblicos e privados Controlar a qualidade das anlises na rede de laboratrios Capacitar recursos humanos

Laboratrio Central de Sade Pblica

Complementar diagnstico

Habilitar laboratrios para integrar a rede estadual

Encaminhar amostras ao LR

Disponibilizar Informaes ao MS por meio relatrios

Fonte: Ministrio da Sade.

III

DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA MDICA

O Departamento de Biologia Mdica realiza: a) Diagnsticos laboratoriais de Doenas de Notificao Compulsria,

monitoramento e controle de endemias, considerados estratgicos para Vigilncia em Sade, conforme a Portaria n. 2.472, de 31 de agosto de 2010; b) c) d) Procedimentos laboratoriais de maior complexidade; Controle de qualidade dos diagnsticos descentralizados; Capacitao de recursos humanos para as aes laboratoriais descentralizadas.

Nos ltimos anos o Departamento de Biologia Mdica tem investido na formao de seus profissionais, avanando no desenvolvimento e na melhoria de suas atividades nas diversas reas de atuao: Biologia Molecular, Vigilncia em Endemias, Imunologia, Microbiologia Humana (Bacteriologia, Micologia e Micobactrias), Parasitologia e Virologia. O grfico a seguir mostra a participao, em termos percentuais, das Sees no total de procedimentos realizados no ano de 2009.

FIGURA 2 Participao percentual das sees no total de procedimentos realizados, 2009.

Parasitologia 1,9% Biologia Molecular 8,3%

Entomologia 23,8%

Anlises Clnicas 0,1% Imunologia 17,9%

Virologia 28,5%

Microbiologia 19,5%

Fonte: Demonstrativo de procedimentos SIA/SUS - LACEN/GO.

IV

FIGURA 3 Fluxo dos processos realizados pelas Sees e Divises do Departamento de Biologia Mdica.

DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA MDICA

Diviso de Gerenciamento de Amostras
Coleta e recepo de amostras (material para diagnostico, confirmatrio e controle de qualidade) Reter amostra

Seo de Anlises Complementares Seo de Bacteriologia Diviso de Biologia Molecular

Seo de Micobactrias Seo de Micologia Seo de Biologia Diviso de Virologia

No Conformidade? Conferir (critrios de aceitao)

Seo de Imunoparasitologia

Sim Cadastrar ou Conferir (GAL, SILACEN) Distribuir as amostras com seus respectivos encaminhamentos LACEN realiza o exame? Sim

Procedimentos Tcnicos
Sim GAL? No

Expediente (emisso de resultados para ARS, unidades de sade, vigilncias e rede de Laboratrios)

No

Laboratrios De Referncia Nacional

Fonte: Departamento de Biologia Mdica - LACEN/GO.

ORIENTAES GERAIS

Para que o laboratrio possa obter um resultado confivel, no basta que execute as tcnicas de forma correta; necessrio que receba uma amostra adequada em quantidade suficiente, em recipiente apropriado, bem identificada, conservada e transportada corretamente. Por isso ao enviar material para o LACEN, as informaes, critrios e procedimentos a seguir so estritamente necessrios. SEO DE RECEPO E COLHEITA DE MATERIAL

LOCAL: .......Avenida Contorno n 3.556 Jardim Bela Vista Goinia - GO. FONE: ..........(62) 3201-3825 e 3201-3827 E-MAIL: ......lacen.coleta@saude.go.gov.br FAX: (62) 3201-3884

Horrio de funcionamento:

Entrega de Resultados: ....................................................................................7:00 18:00 h Colheita de amostra biolgica (sangue, micolgico): .....................................7:00 11:00 h Agendamento para colher amostras para contagem de Linfcitos, CD4 / CD8, carga viral para HIV, por telefone ou pessoalmente: ........................................................7:30 18:00 h

Recebimento de amostras:

Sangue para determinao de CD4 e CD8: ....................................................7:00 - 11:00 h Outros tipos de exames: ..................................................................................7:00 17:00 h Culturas em Geral:...........................................................................................7:00 16:00 h Secreo de Nasofaringe (Influenza)...............................................................7:00 14:00 h Secreo de Nasofaringe e Urina (Isolamento para Sarampo e Rubola).......7:00 14:00 h

Observaes:

Os exames de alta complexidade devem ser acompanhados dos formulrios especficos (BPA-1 e outros);

As guias de remessas e chas do SINAN devem ser preenchidas de forma legvel e completas;

As solicitaes mdicas devem ser assinadas e carimbadas;

VI

Pesquisa em Comunicantes no necessita preenchimento da Ficha epidemiolgica SINAN, no entanto necessrio indicar o caso fonte.

No caso de ocorrncia de surtos, suspeita de doenas emergentes e ou reemergentes ou outras situaes inusitadas comunicar imediatamente ao LACEN-GO.

Os municpios devem enviar o material Regional de Sade de sua rea, a qual far o cadastro no GAL e o envio ao LACEN.

Cabe Regional conferir as fichas, pedidos e amostras antes de encaminhar ao LACEN. O resultado ser encaminhado Regional de Sade a qual ser responsvel pelo envio do resultado aos municpios (ou acessado pelo GAL).

Em caso de situaes de urgncia, como no caso de meningites e/ou surtos, o material poder ser enviado diretamente ao LACEN.

Para colheitas especiais: Carga Viral, CD4 / CD8 e Genotipagem para HIV, PCR qualitativo, quantitativo e Genotipagem para o vrus da Hepatite C, PCR quantitativo para HBV, fazer contato prvio com a Seo de Coleta.

Para colheita de amostras para diagnstico de meningite, solicitar o kit para colheita de meningite ao LACEN. Observar as condies de conservao contidas no rtulo. Aps a coleta, enviar atravs da vigilncia de cada municpio ao LACEN. Parte do lquor deve ser enviada ao laboratrio local, ou conveniado, para anlise citoqumica.

Para colheita de amostra para diagnostico de influenza, secreo de nasofaringe (swab ou aspirado), solicitar o kit com swab de Rayon e meio de transporte viral ao LACEN.

CRITRIOS PARA RECEBIMENTO DAS AMOSTRAS

As amostras biolgicas devem estar acompanhadas de documentos especficos para cada doena/agravo conforme as instrues prprias de cada exame solicitado:

Ficha do GAL Sistema Gerenciador de Ambiente Laboratorial (para todas as amostras); Ficha do SINAN em casos de doenas de noticao compulsria; Guia de remessa em duas vias; Pedido Mdico; Histrico Clnico; Amostras para controle de qualidade devero ser encaminhadas junto com a ficha de

encaminhamento.

VII

DADOS CADASTRAIS

A cha de solicitao de exame deve apresentar:

Dados da Instituio solicitante: nome, endereo, municpio, CNES, e regional de sade; Dados do Cliente: nome completo, data de nascimento, sexo, carteira de identidade (obrigatrio para maiores de 18 anos), n do carto SUS, endereo completo.

Dados da Amostra: tipo de amostra (sangue, LCR, urina, fezes), data da colheita, hora da colheita quando apropriado;

Exames de noticao compulsria: nome completo, idade, tipo de amostra (sangue, LCR, urina, fezes), data da colheita, hiptese diagnstica, perodo de exposio ao agente, incio dos sintomas, sintomatologia clnica, dados de exames;

Dados do responsvel da solicitao do exame: nome, assinatura, carimbo, nmero do conselho prossional.

IDENTIFICAO DA AMOSTRA

FIGURA 4 - Maneira correta de envio de material, com identificao.

Fonte: Departamento de Biologia Mdica do LACEN-GO.

VIII

TRANSPORTE E ACONDICIONAMENTO DAS AMOSTRAS BIOLGICAS

Acondicionar as amostras de forma a evitar vazamento e contaminao. Sugere-se envolver as amostras em saco plstico;

As requisies de exames devem ser acondicionadas em saco plstico separadas das amostras biolgicas;

Colocar os tubos de polipropileno (sangue, LCR) em estantes e acondicionar recipiente de transporte;

em

Os recipientes de transporte devem ser adequados para manter a temperatura ideal necessria conforme especificado para cada exame solicitado;

Os recipientes de transporte devem ser identicados com o smbolo risco biolgico; As amostras biolgicas transportadas em tambores de nitrognio lquido devem ser acondicionadas em criotubos ou tubos de polipropileno com tampa de rosca, resistentes temperatura e com a identicao da amostra no lado externo;

FIGURA 5 Maneira Correta de Envio de Material.

(A) - Maneira correta de envio de material, com todos os espaos preenchidos e utilizando gelo reciclvel. (B) Maneira incorreta de envio de material, com a amostra solta na caixa. Para o envio correto, preencher os espaos vazios com jornal e gelo reciclvel.

Fonte: Departamento de Biologia Mdica do LACEN-GO

IX

ROTEIRO DE CONSULTA

Este manual1 aplica-se aos exames realizados pelo Departamento de Biologia Mdica e suas Divises e Sees: Anlises Complementares, Biologia, Biologia Molecular, Bacteriologia, Imunoparasitologia, Micobactrias, Micologia, Virologia. Os exames esto ordenados alfabeticamente visando facilitar a consulta. Na apresentao consta o nome da doenas/exame, a seo responsvel, as instrues de coleta, material e conservao, transporte, informaes e metodologia utilizada. Quando necessrio, so feitas observaes importantes para garantir a qualidade dos resultados dos exames.

FIGURA 5 Modelo da Apresentao das Doenas/Exames. X. Nome do Grupo (doenas / exames em ordem alfabtica)
X.xx. Nome do item (doena, exame - em ordem alfabtica) Nome da Seo responsvel pelo exame Instrues de Coleta Procedimentos para realizar a coleta. Material e Conservao para Envio Tipo de material coletado. Como deve ser conservado e armazenado o material coletado. Transporte Como deve ser transportado o material. Informaes Importantes Observaes necessrias para garantir a validade e conabilidade dos resultados dos exames. Mtodo Metodologia utilizada para o diagnstico.

OBS: X. X.xx

= Nmero de ordem do Grupo. = Nmero de ordem do exame.

Qualquer esclarecimento adicional, entrar em contato com o Departamento de Biologia Mdica do LACEN-GO. Telefone: (62) 3201-3880. e-mail: lacen.bmedica@saude.go.gov.br.

1. 1.1.

AIDS / HIV AIDS / HIV CONTAGEM DE LINFCITOS CD4+ E CD8+ Seo de Imunoparasitologia

Instrues de Coleta Venopuno em tubo com EDTA K3 ou K2 (amostras totalmente lipnicas, hemolisadas ou com microcogulos devem ser rejeitadas). Material e Conservao para Envio Coletar a quantidade de sangue respeitando o rtulo indicativo do tubo de coleta (no alterar a proporo volume de sangue/anticoagulante). A conservao e o envio devem ser feitos em temperatura ambiente no prprio tubo da coleta, envolto em saco plstico individual. Entrega at as 24 horas aps a coleta (MAIS INFORMAES NO ANEXO XXV).

Transporte Caixa de Isopor. Em locais em que a temp. ambiente for superior a 25C, colocar gelo reciclvel na caixa para manter a temperatura adequada. ATENO: As amostras no devem ter contato diretamente com o gelo, para evitar a hemlise. Informaes Importantes SEGUIR ORIENTAES DO ANEXO XXV; Enviar Laudo Mdico para Emisso de BPA-I (ANEXO XVII) corretamente preenchido, assinado e carimbado pelo mdico solicitante e autorizador. Respeitar rigorosamente o horrio e o agendamento feito pelo setor de coleta do LACEN para a recepo das amostras Mtodo Citometria de Fluxo.

1.2.

AIDS / HIV - DETECO DAS MUTAES ASSOCIADAS COM A RESISTNCIA DO HIV AOS ANTI-RETROVIRAIS (GENOTIPAGEM) Diviso de Biologia Molecular

Instrues de Coleta Venopuno em 2 (dois) tubos de 5 ml com EDTA k3 ou k2. Material e Conservao para Envio 10 ml de sangue total Separar o plasma at 2 horas aps a coleta. Armazenar em tubos de polipropileno, com tampa de rosca, estreis, livres de RNAses e DNAses. Sendo 3 tubos com 1,0 mL de plasma cada e 1 tubo com papa de leuccitos. Acondicionar individualmente as 4 amostras em saco plstico e colocar -80C at o envio ao LACENDF para execuo.

Transporte Amostras para teste de Genotipagem sempre devem ser congeladas e transportadas em gelo seco em caixas prprias para transporte. Informaes Importantes 2Enviar Formulrio de Solicitao de Exame (ANEXO XIV) e Parecer Mdico de Referncia (ANEXO XXII), devidamente preenchidos e assinados em duas vias. Ser encaminhado ao LACEN-DF. Mtodo Genotipagem para HIV.

A coleta dever ser feita no LACEN-GO.

1.3.

AIDS / HIV DETECO QUALITATIVA DO DNA PR-VIRAL Diviso de Biologia Molecular

Instrues de Coleta Venopuno em 1 (um) tubo de 5 mL com EDTA k3 ou k2. Material e Conservao para Envio Encaminhar o sangue total, preferencialmente no mesmo dia ou armazenar entre 2C e 25 C no mximo 3 dias aps a coleta. No congelar. Transporte Caixa trmica com termmetro: Sangue total Com gelo reciclvel suficiente para manter a temperatura entre 2C a 25C. No acondicionar os tubos com sangue total diretamente em contato com gelo reciclvel, para evitar hemlise.

Informaes Importantes Encaminhar as amostras ao LACEN-GO, juntamente com documentos abaixo. a) AMOSTRA DA CRIANA: termo de Consentimento Livre Esclarecimento (ANEXO XXX) devidamente preenchido e assinado pelo responsvel. b) AMOSTRA DA GESTANTE: termo de Consentimento Livre Esclarecimento (ANEXO XXX) devidamente preenchido e assinado; e, Solicitao de Teste Molecular para Gestante (ANEXO XXIX), contendo os respectivos dados sorolgicos. As amostras devero ser acompanhadas da Solicitao da BPA-I de Carga Viral HIV-1 (ANEXO XVIII). No usar tubos de EDTA com gel (PPT). Nunca utilizar tubos de coleta reciclados. Trocar as luvas sempre que houver contaminao com material biolgico. No congelar sangue total. Manuseie todas as amostras como potencialmente infectantes; A Unidade solicitante s poder coletar o material aps treinamento no LACEN. Mtodo PCR Amplicor HIV-1DNA test, verso 1,5 - Roche

1.4.

AIDS / HIV QUANTIFICAO DA CARGA VIRAL (b - DNA) Diviso de Biologia Molecular

Instrues de Coleta ANEXO XX. Material e Conservao para Envio ANEXO XX.

Transporte ANEXO XX. Informaes Importantes ANEXO XX.

Mtodo ANEXO XX.

1.5.

AIDS / HIV SOROLOGIA Seo de Imunoparasitologia

Instrues de Coleta Venopuno em tubo seco e limpo ou sistema a vcuo. Material e Conservao para Envio 5 ml de soro. Aps separao do soro: tubo de ensaio com tampa em 4C a 8C, aps 48 horas, congelado a 20C.

Transporte Isopor com gelo. Informaes Importantes A amostra dever ser encaminhada juntamente com pedido mdico assinado e carimbado. Para exame confirmatrio enviar ficha de solicitao (ANEXO VI). Mtodo Enzimaimunoensaio, Imunofluorescncia indireta e Western Blot.

2.

ASPERGILOSE ASPERGILOSE Seo de Micologia

Instrues de Coleta O material biolgico constitudo principalmente por bipsias de tecidos afetados. Material e Conservao para Envio Enviar o mais rpido ao laboratrio, caso contrrio manter sob refrigerao (4C a 8C). A bipsia dever ser mantida em salina.

Transporte Frasco estril. Informaes Importantes necessrio constar na requisio a suspeita clnica para que o laboratrio possa fazer uso dos meios e condies de cultivo mais adequados. Mtodo Cultura.

3.

BRUCELOSE BRUCELOSE SOROLOGIA Seo de Imunoparasitologia

Instrues de Coleta Venopuno em tubo seco e limpo ou sistema a vcuo. Material e Conservao para Envio 1 ml de soro. Tubo de ensaio com tampa em 4C a 8C, aps 48 horas congelar a -20C.

Transporte Isopor com gelo. Informaes Importantes A amostra dever ser encaminhada juntamente com pedido mdico assinado e carimbado. Mtodo Aglutinao direta em lmina (Rosa Bengala).

4.

CANCRO MOLE CANCRO MOLE / CANCRIDE HAEMOPHILUS DUCREYI Seo de Bacteriologia

Instrues de Coleta Colher amostras com swab estril, das bordas e centros das leses das regies genitais, obtendo-se maior quantidade possvel de secrees ou pus. Com o prprio swab da coleta, preparar um esfregao em lmina identificada; deixar secar a temperatura ambiente. Para cultura utilizar outro swab estril e colocar em meio de transporte de Amies ou meio de Agar chocolate em microerofilia (lato com algodo umedecido e vela acesa)

Material e Conservao para Envio Secrees das leses. Lminas envoltas em papel alumnio. Transporte Em porta lminas suporta at 8hs em temperatura ambiente ou at 24hs Agar chocolate em microaerofilia. Mtodo Bacterioscopia e cultura.

5. 5.1.

CANDIDASE CANDIDASE SISTMICA Seo de Micologia

Instrues de Coleta a) Sangue: colher cerca de 2,0ml de sangue em caso de crianas e 5,0ml em adultos, aps prvia antisepsia da rea. Inocular o sangue em frascos de hemocultura para fungos (ex: BHI - Bifsico + SPS) e na ausncia desses, em frascos de hemocultura para bactrias (caldo BHI+SPS). Obedecer proporo de 1/10 de sangue a inocular. Em frascos de hemocultura de criana com 20 ml de meio, inocular 2,0 ml de sangue e em frascos para adulto com 50 ml de meio, inocular 5,0 ml de sangue. No utilizar anticoagulante, uma vez que, o meio contm SPS. b) Catteres: colet-los assepticamente e coloclos em frascos estreis; Material e Conservao para Envio Temperatura ambiente.

Transporte a) Sangue: transport-lo nos frascos de hemocultura para fungos ou de hemocultura para bactrias, na ausncia do anterior. O material deve ser exclusivo para o cultivo fngico, uma vez que, o perodo e a temperatura de incubao da cultura para bactrias e fungos so diferentes. b) Catteres: Frasco estril. Informaes Importantes Recomendam-se colher 3 amostras. Romper o lacre central das fases e fazer assepsia na tampa de borracha com lcool a 70%. Inocular o sangue direto da seringa de coleta, sem trocar a agulha, no frasco de hemocultura, misturar bem (sem agitar) para evitar coagulao. Encaminhar imediatamente ao LACEN. Mtodo Cultura.

5.2.

CANDIDASE SUPERFICIAL Seo de Micologia

Instrues de Coleta a) Candidase oral: coletar com auxlio de um Swab material proveniente de placas brancas na mucosa oral e cantos dos lbios (sapinho); b) Candidase intertriginosa e muco-cutnea: considerar a coleta de pele das Dermatofitoses; c) Vulvovaginite: coletar secreo vaginal com auxlio de um Swab; d) Onicomicose: Considerar a coleta de unhas das Dermatofitoses.

Material e Conservao para Envio a) Enviar o mais rpido ao laboratrio, caso contrrio manter sob refrigerao (4C a 8C); b) Temperatura ambiente; c) Idem a Candidase Oral; d) Temperatura ambiente. Transporte a) Frasco estril com 3,0ml de salina; b) Placa de Petri estril; c) Idem a Candidase Oral; d) Placa de Petri estril Mtodo Pesquisa Direta e Cultura.

6.

CISTICERCOSE CISTICERCOSE - IMUNOFLUORESCNCIA INDIRETA IgG Seo de Imunoparasitologia

Instrues de Coleta Venopuno em tubo seco e limpo ou sistema a vcuo ou LCR (procedimento mdico). Material e Conservao para Envio 2 ml de soro ou 1 ml de LCR. Tubo de ensaio com tampa em 4C a 8C, aps 48 horas congelar a -20c

Transporte Isopor com gelo. Informaes Importantes A amostra dever ser encaminhada Juntamente com pedido mdico assinado e carimbado. Mtodo Imunofluorescncia Indireta IgG.

7.

COCCDIOS INTESTINAIS MICROSPORIDIOSE ESQUISTOSOMOSE PESQUISA DE ISOSPORA BELLI, CRYPTOSPORIDIUM PARVUM, CYSCLOSPORA CAYETANENSIS, MICROSPORIDEOS E ESQUISTOSSOMOSE Seo de Imunoparasitologia

Instrues de Coleta Orientar o paciente para realizar a coleta das fezes em recipiente seco e limpo. Evitar contato com o solo, gua e urina. Se estiver com diarria, ele poder defecar diretamente no pote ou frasco coletor. Colocar, dentro de um pote ou frasco coletor de 50 ml de capacidade, uma quantidade de fezes suficiente para complet-lo metade. Se o paciente no estiver com diarria, dever desprezar a poro inicial e pegar a poro das fezes em que observar a presena de sangue, muco ou parasitos. Material e Conservao para Envio Fezes. Conservar as amostras refrigeradas de 2C a 8C, por no mximo 3 dias, em recipientes hermeticamente fechados. Aps este perodo conserv-las em formalina tamponada a 10% num volume correspondente a 2 vezes a quantidade da amostra (homogeneze com esptula de madeira e feche bem o pote).

Transporte Transportar o material em frascos bem fechados, com a tampa para cima e colocando-os em sacos plsticos; colocar os frascos em caixa, prpria para o transporte, no caso de amostras sem a formalina, refrigerar a caixa com gelo reciclvel. Informaes Importantes A amostra dever ser encaminhada junto com o pedido mdico assinado e carimbado. Mtodo Colorao e Microscopia.

8.

COLINESTERASE COLINESTERASE Seo de Anlises Complementares

Instrues de Coleta Seguir periodicidade de coletas conforme Nota Tcnica N 165/2008 - CGLAB - CGPNCD/SVS/MS (ANEXO XXVI - Relao dos Inseticidas Inibidores da Colinesterase Sangunea, Uso, Programa e Periodicidade). Colher vcuo (jejum de 8 horas), centrifugar e transferir, por inverso, o soro para outro tubo (novo) e refrigerar rapidamente. Separar no mnimo 1 ml de soro, sendo que o mesmo deve ser lmpido e isento de hemlise. Material e Conservao para Envio 1 ml de soro refrigerado entre 2C e 8C. Volume mnimo para realizao 500 L.

Informaes Importantes Soro estvel em temperatura ambiente por 6 horas. Evitar soro hemolisado e coleta com citrato e fluoreto. Anotar medicao em uso. Encaminhar o formulrio de controle de realizao de exames de Colinesterase Sangunea (Colin-1 ANEXO XI). Os resultados dos exames dos agentes de endemias dos Municpios sero encaminhados as Regionais de Sade para anlise do mdico solicitante em conformidade com a Norma Regulamentadora n 7 da Portaria 3.214/78-MTE. Os resultados dos agentes de endemias do quadro da FUNASA cedidos a SES ou SMS sero encaminhados a coordenao regional da FUNASA para os devidos fins. Mtodo Teste Fotomtrico Cintico.

Transporte Acondicionadas em caixa trmica com gelo reciclvel.

9.

COQUELUCHE COQUELUCHE Seo de Bacteriologia

Instrues de Coleta Introduzir um Swab ultrafino com haste metlica flexvel e com algodo alginatado na narina do paciente at encontrar resistncia da parede posterior da nasofaringe, fazer movimentos rotatrios e retirlo. Material e Conservao para Envio Secreo de Nasofaringe. O Swab dever ser introduzido imediatamente no meio de transporte Regan-Lowe com antibitico, cedido pelo LACEN. Em seguida fechado firmemente. Deixar em temperatura ambiente ou incubar em estufa a 37C por no mximo 24 horas.

Transporte O material dever ser enviado ao LACEN em temperatura ambiente, acondicionado em saco plstico bem vedado. O transporte dever ser imediato ou no mximo at 24 horas Informaes Importantes Retirar o meio de transporte de Regan-Lowe da geladeira 30 minutos antes do incio da coleta. Ateno para que os Swab fiquem submersos no meio de cultura; O material dever ser encaminhado com a ficha de investigao epidemiolgica devidamente preenchida (ANEXO XXVII). Mtodo Cultura em meios prprios

10.

CRIPTOCOCOSE CRIPTOCOCOSE Seo de Micologia

Instrues de Coleta Os materiais biolgicos de escolha para esta micose so: escarro, LCR, sangue, material ganglionar e leses mucocutneas (normalmente obtidas por bipsia). Material e Conservao para Envio Enviar o mais rpido ao laboratrio, caso contrrio manter sob refrigerao (4 a 8C). A bipsia dever ser mantida em soluo salina.

Transporte No caso de sangue, considerar as informaes relatadas em Candidase Sistmica e o restante dos espcimes clnicos em frasco estril. Mtodo Cultura e Quimiotipagem.

11.

CROMOMICOSE (CROMOBLASTOMICOSE) CROMOMICOSE (CROMOBLASTOMICOSE) Seo de Micologia

Instrues de Coleta Escarificar as leses, de preferncia por cima de pontos negros que se formam nas mesmas com auxlio de uma lmina de bisturi. Pode-se tambm recorrer bipsia. Material e Conservao para Envio

Transporte Placa de Petri estril na escarificao da leso e frasco estril com salina em caso de bipsia. Mtodo Pesquisa direta e Cultura.

Enviar o mais rpido ao laboratrio, caso contrrio manter sob refrigerao (4 a 8C). CULTURAS PARA BACTRIAS AERBIAS 3

12.

12.1. CULTURA ABSCESSOS LESES FECHADAS Seo de Bacteriologia Instrues de Coleta Um abcesso fechado o local ideal para coleta, no deve utilizar swab. Fazer anti-sepsia, aspirar o material com agulha e seringa, colocar em frasco estril em temperatura ambiente at o momento da semeadura. Material e Conservao para Envio O material deve ser entregue para semeadura em um perodo no superior a 2 horas, semear em gar sangue de carneiro 5% e em thioglicolato. Enviar ao LACEN em temperatura ambiente: a placa e o restante do material em thioglicolato em at 12 horas. Transporte Temperatura ambiente. No refrigerar

Informaes Importantes Caso no dispor de meio de cultura para semeadura enviar o contedo da seringa em frasco estril ao LACEN em at duas horas. Mtodo Cultura e antibiograma.

VER ANEXO XXIV - PROTOCOLO DE COLETA, ACONDICIONAMENTO E TRANSPORTE DE AMOSTRAS CLNICAS PARA CULTURA DE BACTRIAS AERBIAS.

12.2. CULTURA ESCARRO Seo de Bacteriologia Instrues de Coleta A amostra de preferncia a 1 da manh; Orientar o paciente para enxaguar vrias vezes a boca com gua para remover a flora bacteriana; Colher a amostra obtida aps tosse profunda, diretamente em um frasco estril de boca larga, ou amostra colhida induzida por nebulizao; Escarro com aspecto de saliva deve ser rejeitado. Material e Conservao para Envio Colhido em frasco estril de boca larga. Conservar em temperatura ambiente por 2 horas aps a coleta. Para perodos maiores refrigerar de 2C a 8C por 12 horas. Transporte Enviar ao laboratrio a temperatura ambiente em at 2 horas aps a coleta. Para perodos maiores, refrigerar (2C a 8 C). Informaes Importantes No considerado ideal para avaliao microbiolgica do trato respiratrio (pneumonias). S possvel isolar o patgeno causador de infeco se a amostra seja realmente significativa e de boa qualidade. Especificar no pedido mdico qual a bactria a investigar. Controle de Qualidade das amostras: realizar exame microscpico da amostra aps colorao de Gram. Observar com objetiva de 10x pelo menos 10 campos microscpicos. Controle realizado pelo laboratrio do hospital, anotado e anexado junto ao pedido mdico. Adequado para cultura <=10 clulas epiteliais /campo e >=25 leuccitos/campo. para cultura > 10 clulas Inadequada epiteliais/campo e < 25 leuccitos/campo Freqncia do controle de qualidade: TODAS as amostras recebidas devem ser avaliadas. Mtodo Cultura e antibiograma.

12.3.

CULTURA FERIDA (CIRRGICAS, MORDEDURAS DE ANIMAIS, QUEIMADURAS, LACERAES, ESCARAS, LCERAS DE P DIABTICO) Seo de Bacteriologia

Instrues de Coleta Ferida aberta: Descontaminar as margens e a superfcie da leso com soluo fisiolgica e soluo de povidona-iodo. Coletar o material purulento localizado na parte mais profunda da leso. Em seguida, obter secreo por aspirao com seringa ou swab estril. Material e Conservao para Envio

Transporte Transportar em temperatura ambiente em at 12 horas. No refrigerar. Informaes Importantes No recomendada cultura de leses secas ou crostas. A escarificao das bordas aps anti-sepsia pode produzir material seroso que adequado para cultura.

Mtodo Retirar o excesso da seringa e colocar o material em frasco estril. Cultura e antibiograma. Secrees coletadas com swab: Coloc-lo dentro do tubo com meio de transporte (Stuart) e introduzilo na gelia at o fundo do tubo ou semear em thioglicolato.

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12.4.

CULTURA FEZES Seo de Bacteriologia

Instrues de Coleta Fezes diarricas ou no, em recipientes de boca larga, limpos e estreis; Swab retal: Introduzir um swab umedecido em soluo fisiolgica na ampola retal do paciente, comprimindo-o em movimentos rotatrios suaves; Swab fecal: Recolher com um swab uma alquota de fezes colhidas em recipiente limpo e estril e inocular no meio de transporte. Material e Conservao para Envio O material colhido em frascos de boca larga deve ser enviado ao LACEN o mais rpido possvel (1 hora) ou conservado sob refrigerao por at 24 horas. Os materiais colhidos atravs de swab devem ser inoculados no meio de transporte de Cary Blair e mantidos em temperatura ambiente at o momento de envio ao LACEN por at 24 horas.

Transporte O transporte dever ser feito em temperatura ambiente para pequenas distncias. Utilizar caixa de isopor com gelo para distncias maiores ou se a amostra foi conservada sob refrigerao. Os swabs depois de inoculados no meio de transporte devem ser encaminhados ao LACEN/GO no mximo at 72 horas aps coleta em temperatura ambiente Informaes Importantes Coletar o material o mais precoce possvel (Na fase aguda-diarrica) e antes do tratamento com antibiticos. Evitar colher amostras fecais contidas nas roupas do paciente, cama etc. Surtos de gastrenterites e clera os materiais devero estar acompanhados da ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII) devidamente preenchida. Mtodo Coprocultura (cultura e antibiograma).

12.5.

CULTURA LAVADO BRONCO ALVEOLAR Seo de Bacteriologia

Instrues de Coleta Coleta realizada por equipe mdica especializada. O material obtido deve ser realizado antes das bipsias para evitar sangue. Material e Conservao para Envio Coletado em frasco estril. Conservar em temperatura ambiente at a semeadura. O tempo para semeadura essencial: 30 minutos, mximo aceitvel de 1 a 2 horas. Aps semeadura, manter o material refrigerado (2C a 8C) para o envio. Transporte A placa semeada em temperatura ambiente por no mximo 12 horas O Lavado Bronco-Alveolar em frasco estril refrigerado por no mximo 12 horas

Informaes Importantes Semear o material em Agar sangue de carneiro 5% com ala calibrada 1/1000 pela tcnica de semeadura por esgotamento (escrever na placa: ala calibrada 1/1000). Mtodo mais fidedigno para investigao microbiolgica do trato respiratrio inferior (Pneumonias) Mtodo Cultura quantitativa e antibiograma.

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12.6. CULTURA LIQUIDOS ORGNICOS ESTREIS: LQUIDO PLEURAL, ASCTICO E BILIAR Seo de Bacteriologia Instrues de Coleta Coleta realizada por equipe mdica. Transporte Temperatura ambiente. No refrigerar.

Material e Conservao para Envio Coletar em frasco estril, inocular de 1 a 2mL da amostra diretamente no frasco de hemocultura (BHI+SPS) ou frascos de hemocultura de automao. Conservar em temperatura ambiente por at 12 horas.

Informaes Importantes Caso no dispor do meio de cultura para cultivo enviar em frasco estril, em temperatura ambiente em at 2 horas. Mtodo Cultura e antibiograma.

12.7. CULTURA NASOFARINGE (SECREO) Seo de Bacteriologia Instrues de Coleta Remover o excesso de secreo ou exsudato nasal. Inserir, delicadamente, um swab fino atravs do nariz at a nasofaringe. Fazer movimentos rotatrios por 10 a 15 segundos. Remover o swab e coloc-lo em meio de transporte. Colher com swab e colocar em meio de transporte (Stuart). Este meio de transporte utilizado para cultura de bactrias comuns, exceto para difteria e coqueluche. Material e Conservao para Envio Conservar em temperatura ambiente por at 12 horas. Transporte Temperatura ambiente Informaes Importantes Para cultura de bactrias, especificar no pedido mdico qual a bactria a investigar. Mtodo Cultura e antibiograma.

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12.8. CULTURA PONTA DE CATETER Seo de Bacteriologia Instrues de Coleta Fazer anti-sepsia da pele que circunda o local de insero do cateter, remover assepticamente o cateter, cortar 5 cm da parte mais distal, colocar em um tubo ou frasco estril seco. Semeadura: Utilizando uma pina estril, colocar o cateter na superfcie do gar sangue de carneiro 5%. Com auxlio da pina, rolar o cateter por toda a superfcie do meio. Para frente e para trs, duas vezes (mtodo de MAKI). Aps a rolagem, colocar a ponta de cateter em frasco estril contendo 0,5mL de salina e enviar ao LACEN juntamente com o gar sangue. Material e Conservao para Envio Quando no realizada a semeadura, colocar e enviar a ponta de cateter em tubo ou frasco estril seco temperatura ambiente, para ser semeado imediatamente por tcnica de rolagem (mtodo de MAKI). Quando realizada a semeadura (mtodo de MAKI), enviar a ponta de cateter em tubo ou frasco estril com salina temperatura ambiente at 72 horas. Transporte Temperatura ambiente. Informaes Importantes Ponta de cateter venoso em meio de cultura lquido ou meio de transporte. No processar. Mtodo Mtodo de MAKI: cultura semiquantitativa.

12.9. CULTURA SANGUE Seo de Bacteriologia Instrues de Coleta: Transporte

Adulto: 4 a 5 mL de sangue colhido sem Aps semeadura nos meios de cultura, o material anticoagulante em frasco de BHI+SPS ou 8 mL de dever ser transportado imediatamente ao laboratrio do sangue sem anticoagulante em frascos especficos hospital e enviado ao LACEN em at 12 horas para cultura automatizada Informaes Importantes Criana: 1 a 3 mL de sangue colhido sem anticoagulante em frasco de BHI+SPS ou 3 mL de Por indicao mdica, devem ser colhidas tantas sangue sem anticoagulante em frascos especficos amostras quantas solicitadas, observando-se os intervalos entre as mesmas que so variveis de acordo para cultura automatizada com a suspeita clnica. Recm nascido: 0,5 a 1 mL de sangue colhido Os frascos devem estar identificados com o nome sem anticoagulante em frasco de BHI+SPS ou em do paciente, procedncia, nmero do pronturio, data e frascos de cultura automatizada. Para recm-nascido hora da puno. Cabe ao clnico orientar qual o aceitvel coleta de sangue com heparina. intervalo entre as punes e quantas amostras devem ser colhidas. Material e Conservao para Envio Semear nos meios de culturas identificados e Mtodo conservar em temperatura ambiente ou conservar em Cultura e antibiograma. estufa a 35 ou 37 C.

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12.10. CULTURA SECREO OCULAR Seo de Bacteriologia Instrues de Coleta Colher antes da aplicao de antibiticos, solues, colrios ou outros medicamentos. Desprezar a secreo purulenta superficial, com swab, colher o material da parte interna da plpebra inferior. Material e Conservao para Envio Secreo da leso. Colocar o swab no meio de transporte (STUART) e encaminhar em temperatura ambiente at 12 horas. Transporte Temperatura ambiente. Mtodo Cultura e antibiograma.

12.11. CULTURA SECREO DE OROFARINGE Seo de Bacteriologia Instrues de Coleta Solicitar ao paciente que abra bem a boca. Usando abaixador de lngua e swab estril, fazer esfregaos sobre as amgdalas e faringe posterior, evitando tocar na lngua e na mucosa bucal. Remover o pus ou a placa, colhendo o material abaixo da mucosa. Colocar o swab no meio de transporte especfico (Stuart). Material e Conservao para Envio Swab em meio de transporte Stuart. Conservar em temperatura ambiente por at 12 horas. Transporte Temperatura ambiente

Informaes Importantes As amostras devem ser cultivadas para recuperao do Streptococcus Pyogenes ou Cultura de Vigilncia. Especificar no pedido mdico qual a bactria a investigar. Contaminao com a saliva dificulta o isolamento do agente infeccioso. Mtodo Cultura e antibiograma.

12.12. CULTURA SECREO DE OUVIDO Seo de Bacteriologia Instrues de Coleta Conduto auditivo mdio: amostra obtida por aspirao atravs do tmpano. Em caso de rompimento da membrana do tmpano, o fluido pode ser colhido com swab fino. Antes da coleta, limpar o ouvido externo com anti-sptico seguido de lavagem com salina estril. Transporte Temperatura ambiente

Informaes Importantes

As amostras colhidas por aspirao no devem ser enviadas ao laboratrio como secreo de ouvido e sim como secreo obtida por timpanocentese. Conduto auditivo externo: a coleta limpar o Amostra colhida por aspirao deve ser enviada ao canal do ouvido com anti-sptico seguido de lavagem laboratrio dentro de 2 horas em temperatura ambiente. com salina estril. Colher com swab. Inserir no meio Amostras colhidas com swab colocar em meio de transporte Stuart ou thioglicolato. de transporte (Stuart) ou thioglicolato. Material e Conservao para Envio Mtodo Cultura e antibiograma. Conservar em temperatura ambiente, enviar ao LACEN em at 12h.

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12.13. CULTURA SECREO TRAQUEAL Seo de Bacteriologia Instrues de Coleta Coleta realizada atravs da sonda de aspirao em pacientes entubados. Material e Conservao para Envio Colher em tubo estril. Conservar em temperatura ambiente at 2 horas aps coleta, perodos maiores refrigerar (2 a 8C) at 12 horas. Transporte Refrigerado. Caixa de isopor com gelo. Informaes Importantes Controle de Qualidade das amostras: realizar exame microscpico da amostra aps colorao de Gram. Observar com objetiva de 10x pelo menos 10 campos microscpicos. Controle realizado pelo laboratrio do hospital, anotado e anexado junto ao pedido mdico. Adequado para cultura <= 10 clulas epiteliais /campo e >= 25 leuccitos/campo. Inadequado para cultura > 10 clulas epiteliais/campo e < 25 leuccitos/campo Freqncia do controle de qualidade: TODAS as amostras recebidas devem ser avaliadas Mtodo Cultura quantitativa e antibiograma.

12.14. CULTURA SECREO VAGINAL Seo de Bacteriologia Instrues de Coleta Introduzir o espculo; coletar a amostra do saco vaginal com um auxlio de um swab; introduzir o swab em tubo de 1mL de salina estril, identificando o mesmo, ou meio de transporte Stuart. Material e Conservao para Envio Secreo vaginal. Conservar em salina estril ou meio de transporte Stuart. Mtodo Cultura. Transporte Encaminhar imediatamente temperatura ambiente. Informaes Importantes ao LACEN em

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12.15. CULTURA URINA Seo de Bacteriologia Instrues de Coleta Coletar em frasco estril de boca larga, tampa de rosca no mnimo 2 mL de urina, de jato mdio, de preferncia a primeira da manh. Se no for possvel, coletar urinas posteriores que estejam retidas por pelo menos de 2 a 4 horas. Adulto: Lavar rigorosamente os genitais externos com gua e sabo, enxaguar bem e secar. Desprezar o primeiro jato e colher o jato mdio em frasco estril. Criana (que necessitem do coletor): Lavar os genitais com gua e sabo, enxaguar e secar. Colocar o coletor que dever ser trocado de 30 em 30 minutos, repetindo a higienizao a cada troca, at que a criana urine. Material e Conservao para Envio Enviar ao laboratrio o mais rpido possvel, at 2 horas em temperatura ambiente ou conservar sob refrigerao (2 a 8C) por no mximo 12 horas Transporte Urinas recm coletada: Temperatura ambiente; Urinas refrigeradas: Caixa de isopor com gelo. Informaes Importantes Sonda Urinria: desconectar a sonda da bolsa de drenagem e colher a urina diretamente em frasco estril, aps desprezar a poro inicial do fluxo. Nunca colher a urina armazenada na bolsa coletora. Mtodo Cultura, contagem de colnias e antibiograma.

13.

DENGUE

13.1. DENGUE COM COMPLICAES NEUROLGICAS DIAGNSTICO DIFERENCIAL PARA ENTEROVRUS Diviso de Virologia Instrues de Coleta Coletar fezes na quantidade de 1/3 do coletor. Material e Conservao para Envio Fezes. Coletor estril com tampa rosqueada. Conservar em freezer a -20C at o momento de encaminhar ao LACEN. Transporte Colocar a amostra em saco plstico individualizado dentro de outro saco plstico. Transportar em caixa trmica com gelo reciclvel. Informaes Importantes Enviar junto com a Ficha de Investigao Epidemiolgica (ANEXO XXVII) e a ficha complementar. Mtodo Pesquisa de Enterovrus (diagnstico diferencial).

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13.2. DENGUE COM COMPLICAES NEUROLGICAS SOROLOGIA IGM ou IGG Diviso de Virologia Instrues de Coleta Colher o sangue sem anticoagulante entre 6 e 60 dia aps o incio dos sintomas. Separa no mnimo 1 ml do soro para sorologia. Material e Conservao para Envio Soro. Tubo plstico estril com tampa de rosca devidamente identificado e conservado em freezer a 20 C. Transporte Colocar a amostra em saco plstico individualizado dentro de outro saco plstico. Transportar em caixa trmica com gelo reciclvel. Informaes Importantes Enviar amostra biolgica junto com a Ficha de Investigao epidemiolgica com dados do paciente (ANEXO XXVII). Mtodo Imunoensaio enzimtico para deteco de anticorpos IgM ou IgG.

13.3. DENGUE DETECO QUALITATIVA DO RNA RT PCR Diviso de Biologia Molecular Instrues de Coleta Soro: Venopuno em tubo sem anticoagulante; LCR: Puno lombar (puno espinal). Material e Conservao para Envio 1 ml de Soro: Separar o soro realizando a retrao do cogulo em tempo mnimo possvel. A amostra pode ficar a temperatura ambiente por no mximo 2 horas ou em geladeira (~4C) por 4 horas, at o envio ao laboratrio. Armazenar a -80C. 1 ml de LCR: Aps coleta o material deve ser enviado imediatamente ao laboratrio. Estocagem em geladeira (~4C) at o envio pode ocorrer por no mximo 2 horas. Armazenar a -80C. As amostras devero ser acondicionadas em tubos plsticos novos com tampa de rosca, devidamente rotulados e lacrados. Os tubos devem suportar congelamento a baixas temperaturas. Transporte Para ambas as amostras: O transporte dever ser feito preferencialmente em caixa de isopor contendo gelo seco, ou em botijo de nitrognio lquido at o laboratrio executor. Informaes Importantes O teste de Deteco Qualitativa do RNA do vrus Dengue direcionado para confirmao diagnstica de sorotipo viral em casos graves de Dengue com complicao neurolgica ou quadros de infeco crnica com suspeita alta viremia. Para realizao do exame a amostra dever estar acompanhada de pedido mdico da unidade de Sade e cpia da ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII) de registro no SINAN. Mtodo RT-PCR convencional segundo Lanciotti et al., 1992.

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13.4.

DENGUE E FEBRE AMARELA - HISTOPATOLGICO IMUNOHISTOQUMICA VSCERAS Diviso de Virologia

Instrues de Coleta Coletar fragmentos pequenos (1 a 2 mm3 ) do fgado, bao, pulmo, e crebro at 24 horas aps o bito (ideal at 8 horas). Material e Conservao para Envio Vceras. Colocar os fragmentos de vsceras em frasco estril com tampa de rosca contendo formalina tamponada.

Transporte Colocar os frascos em uma caixa trmica, sem gelo. Conservar em temperatura ambiente. Informaes Importantes Usar formol a 10 %, com volume 10 vezes maior que o volume dos fragmentos. Material enviado ao Instituto Evandro Chagas para diagnstico. Enviar amostra biolgica junto com a ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII) com dados do paciente e a ficha do SVO de forma legvel. Mtodo Histopatolgico Imunohistoqumica.

13.5.

DENGUE E FEBRE AMARELA ISOLAMENTO VIRAL SANGUE Diviso de Virologia

Instrues de Coleta Coletar o sangue sem anticoagulante at 5 dia aps o incio dos sintomas. Reservar 1 ml de sangue em caso de isolamento viral. Material e Conservao para Envio Sangue / soro. Tubo resistente a temperatura ultra-baixa (CRIOTUBO) capacidade de 2 ml com tampa de rosca e anel de vedao, devidamente identificado. Conservar em freezer a 70 C.

Transporte Colocar em saco plstico individualizado dentro de uma canaleta identificada no botijo de nitrognio lquido. Sugerese tampar a canaleta do botijo com um chumao de algodo para que o tubo no se perca dentro deste. Informaes Importantes Enviar amostra biolgica junto com a ficha epidemiolgica com dados do paciente. Em caso de bito enviar a ficha do SVO de forma legvel. Mtodo Cultura celular, clone C636, tipagem viral em reao de Imunofluorescncia indireta.

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13.6.

DENGUE E FEBRE AMARELA - ISOLAMENTO VIRAL VSCERAS Diviso de Virologia

Instrues de Coleta Coletar fragmentos pequenos (1 mm3 ) do fgado, bao, pulmo, e crebro, at 24 horas aps o bito (ideal at 8 dias). Material e Conservao para Envio Vsceras. Frasco plstico estril com tampa de rosca resistente a temperatura ultra-baixa. Capacidade 15 ml. Conservar em freezer a 70 C ou nitrognio lquido. Transporte Colocar em saco plstico individualizado dentro de uma canaleta identificada no botijo de nitrognio lquido. Sugerese tampar a canaleta do botijo com um chumao de algodo para que o tubo no se perca dentro deste.

Informaes Importantes Colocar o fragmento de crebro em frascos separados dos demais fragmentos. Material enviado ao Instituto Evandro Chagas para diagnstico. Enviar amostra biolgica junto com a ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII) com dados do paciente e a ficha do SVO de forma legvel. Mtodo Cultura celular, clone C636, tipagem viral em reao de Imunofluorescncia indireta.

13.7.

DENGUE E FEBRE AMARELA PCR SORO Diviso de Biologia Molecular

Instrues de Coleta Coletar o sangue sem anticoagulante entre 1 e 5 dias (ideal 3-5) aps o incio dos sintomas. Separar no mnimo 1 ml de soro para PCR. Material e Conservao para Envio Soro. Tubo resistente a temperatura ultrabaixa (CRIOTUBO) capacidade de 2 ml com tampa de rosca e anel de vedao, devidamente identificado. Conservar em freezer a -70C.

Transporte Colocar em saco plstico individualizado dentro de uma canaleta identificada no botijo de nitrognio lquido. Informaes Importantes Acompanha ficha com dados do paciente. Mtodo PCR.

13.8. DENGUE E FEBRE AMARELA SOROLOGIA IGM ou IGG. Diviso de Virologia Instrues de Coleta Colher pela manh, em jejum de no mnimo 4 horas. Coletar o sangue sem anticoagulante entre 6 e 60 dia aps o incio dos sintomas. Separar no mnimo 1 ml do soro para sorologia. Material e Conservao para Envio Soro. Tubo plstico estril com tampa de rosca devidamente identificado e conservado em freezer a 20 C. Transporte Colocar a amostra em saco plstico individualizado dentro de outro saco plstico. Transportar em caixa trmica com gelo comum ou reciclvel. Informaes Importantes Acompanha ficha epidemiolgica com dados do paciente (ANEXO XXVII). Mtodo Imunoensaio enzimtico IgM ou IgG (deteco de anticorpos IgM).

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13.9. DENGUE E FEBRE AMARELA SOROLOGIA IGM ou IGG. Diviso de Virologia Instrues de Coleta Colher pela manh, em jejum de no mnimo 4 horas. Coletar o sangue sem anticoagulante entre 6 e 60 dia aps o incio dos sintomas. Separar no mnimo 1 ml do soro para sorologia. Material e Conservao para Envio Soro. Tubo plstico estril com tampa de rosca devidamente identificado e conservado em freezer a 20 C. Transporte Colocar a amostra em saco plstico individualizado dentro de outro saco plstico. Transportar em caixa trmica com gelo comum ou reciclvel. Informaes Importantes Acompanha ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII) com dados do paciente. Mtodo Imunoensaio enzimtico IgM ou IgG para deteco de anticorpos.

13.10. DENGUE ESPECTRO DE GOTAS Seo de Biologia Instrues de Coleta Agitao manual da lmina atravs de um basto (vertical ou horizontal). Material e Conservao para Envio Lminas com superfcies recobertas com xido de magnsio ou outra substncia de acordo com o tipo de inseticida e padronizao do Ministrio da Sade, com gotas de inseticida impregnadas, devidamente identificadas; Acondicionamento em caixas de lminas para microscpios e leitura imediata. Transporte Normal. Informaes Importantes Leitura em microscpio bacteriolgico com micrmetro de ocular calibrado com micrmetro de platina. Mtodo Definido pelo Ministrio da Sade e Organizao Mundial da Sade.

13.11. DENGUE PESQUISA ENTOMOLGICA Seo de Biologia Instrues de Coleta Formas imaturas: Pesquisa direta em criadouros com a utilizao de pipetas, pesca-larvas, bacia; Formas aladas: captura com capturador de Castro, capturado de suco oral, aspirador eltrico, pu. Material e Conservao para Envio Culicdeos com nfase para as espcies Aedes aegypti e Ae. Albopictus; Formas imaturas: Tubos e frascos plsticos com lcool a 70 %; Formas aladas: Tubos ou frascos alternando algodo e papel de filtro entre os exemplares e um pouco de naftalina para melhor conservao; Todos os frascos ou tubos devidamente identificados. Transporte Normal. Informaes Importantes Envio de 5% das formas imaturas e 100% dos alados; As amostras devero ser acompanhadas de boletins prprios. Mtodo Definido pela Secretaria de Vigilncia em Sade/Ministrio da Sade e; Utilizados pelas Instituies de Pesquisas Nacionais e Internacionais.

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14.

DERMATOFITOSES (TINHAS) DERMATOFITOSES (TINHAS) Seo de Micologia

Instrues de Coleta a) Couro cabeludo e plos: coletar amostras de reas descamativas, depiladas, plos e/ou cabelos quebradios, sem brilho e/ou com ndulos aderidos com auxlio de lmina de bisturi ou pina. No caso de ndulos aderidos, cortar um chumao de cabelos com auxlio de uma tesoura; b) Pele: raspar as bordas das leses com auxlio de lmina de bisturi. O material da regio interdigital e de intertrigo tambm deve ser obtido por meio de raspagem; c) Unhas: raspar a regio limite entre a parte suspeita de micose e a parte sadia ou toda superfcie de uma unha com auxlio de uma lmina de bisturi. Coletar tambm material sub-ungueal e se for o caso, periungueal tambm.

Material e Conservao para Envio Placa de Petri estril.

Transporte Temperatura ambiente.

Informaes Importantes Preferencialmente no utilizar medicao antifngica tpica ou sistmica por 07 dias antes da coleta. Recomenda-se tambm no utilizar creme algum na pele, unhas e cabelos, pelo menos um (01) dia antes do exame. No caso das unhas, as mesmas devero estar limpas e livres de esmaltes. Mtodo Pesquisa direta e cultura.

15.

DIFTERIA DIFTERIA Seo de Bacteriologia

Instrues de Coleta Secreo de Nasofaringe (NARIZ): Introduzir suavemente um Swab ultrafino, com haste metlica flexvel, na narina at encontrar resistncia da parede posterior da nasofaringe e fazer movimentos rotatrios. Repetir a operao utilizando o mesmo Swab na outra narina. Secreo de Orofaringe (GARGANTA): Com auxlio de um abaixador de lngua, pressionar a lngua para baixo e com swab estril, fazer a coleta ao redor da superfcie da garganta, passando o swab pelas amdalas, vula e toda a parede da garganta. Em doentes o swab deve ser passado cuidadosamente apenas ao redor das leses para que no haja descolamento da placa. Material e Conservao para Envio Secreo de Nasofaringe: Semear imediatamente em meio de PAI (cedido pelo LACEN), passando o swab em toda a extenso (superfcie) do tubo apenas uma vez girando-o nos dedos e em zig zag, a partir da base at o pice do meio de cultura. Fechar firmemente, identificar com N (Nasofaringe). Deixar em temperatura ambiente ou incubar em estufa a 37C por no mximo 24 horas.

Secreo de Orofaringe: Semear imediatamente em meio de PAI (cedido pelo LACEN), passando o swab em toda a extenso (superfcie) do tubo apenas uma vez girando-o nos dedos em zig-zag, a partir da base at pice do meio de cultura. Fechar firmemente, identificar com O (Orofaringe). Deixar em temperatura ambiente ou incubar em estufa a 37C por no mximo 24 horas. Transporte Secreo de Nasofaringe e Orofaringe: O material dever ser enviado ao LACEN em temperatura ambiente, acondicionado em saco plstico bem vedado. O transporte dever ser imediato ou no mximo at 24 horas. Informaes Importantes A bacterioscopia no tem valor no diagnstico da difteria devido baixa especificidade do mtodo; Retirar o meio de transporte de PAI da geladeira 30 minutos antes do incio da coleta. O material dever ser encaminhado com a ficha de investigao epidemiolgica devidamente preenchida (ANEXO XXVII). Mtodo Cultura em meios prprios.

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16.

DOENA DE CHAGAS

16.1. DOENA DE CHAGAS AGUDA SOROLOGIA Seo de Imunoparasitologia Instrues de Coleta Venopuno em tubo seco e limpo ou sistema a vcuo. Material e Conservao para Envio 2 ml de soro. Aps separao do soro: tubo de ensaio com tampa em 4 a 8C, aps 48 horas, congelado a 20C. Transporte Isopor com gelo. Informaes Importantes A amostra dever ser encaminhada obrigatoriamente com a ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII). Mtodo Imunofluorescncia Indireta IgM.

16.2. DOENA DE CHAGAS PESQUISA ENTOMOLGICA Seo de Biologia Instrues de Coleta Pesquisa direta nas residncias e anexos com o uso de pinas e desalojante (quando recomendado); Identificar os triatomneos. Material e Conservao para Envio Ninfas e adultos de Triatomneos; Frascos ou tubos devidamente identificados. Transporte Normal. Informaes Importantes Envio de 10% dos triatomneos coletados; As amostras devero ser acompanhadas de boletins prprios. Mtodo Definido pela Secretaria de Vigilncia em Sade/Ministrio da Sade e utilizados pelas Instituies de Pesquisas Nacionais e Internacionais.

16.3. DOENA DE CHAGAS PESQUISA PARASITOLGICA (T. cruzi) EM TRIATOMNEOS Seo de Biologia Instrues de Coleta Exame a fresco do material intestinal, em lminas, dos Triatomneos j identificados; Corar as lminas quando positivas. Material e Conservao para Envio Lminas embrulhadas em papel ou dentro de caixas/tubos especficos; Ninfas e adultos de Triatomneos. Lminas, frascos, tubos, devidamente identificados. Transporte Normal. Informaes Importantes Envio de 10% das lminas negativas e 100% das positivas. Envio dos triatomneos correspondentes s lminas negativas e positivas a serem enviadas As amostras devero ser acompanhadas de boletins prprios. Mtodo Definido pela Secretaria Sade/Ministrio da Sade e; de Vigilncia em

Utilizados pelas Instituies de Pesquisas Nacionais e Internacionais.

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16.4. DOENA DE CHAGAS TRIATOMNEOS ENCAMINHADOS PELA POPULAO Seo de Biologia Instrues Proceder da mesma forma coletado o triatomneo; Identificar os triatomneos. como se tivesse Informaes Importantes Envio de 10% dos triatomneos recebidos; As amostras devero ser acompanhadas de boletins prprios. Mtodo Definido pela Secretaria Sade/Ministrio da Sade e; de Vigilncia em

Material e Conservao para Envio Ninfas e adultos de Triatomneos; Frascos ou tubos devidamente identificados. Transporte Normal.

Utilizados pelas Instituies de Pesquisas Nacionais e Internacionais.

16.5. DOENA DE CHAGAS SOROLOGIA Seo de Imunoparasitologia Instrues de Coleta Venopuno em tubo seco e limpo ou sistema a vcuo. Material e Conservao para Envio 2 ml de soro. Aps separao do soro: tubo de ensaio com tampa em 4 a 8C, aps 48 horas, congelado a 20C. Transporte Isopor com gelo. Informaes Importantes A amostra dever ser encaminhada juntamente com pedido mdico assinado e carimbado. Mtodo Enzimaimunoensaio IgG, Imunofluorescncia Indireta IgG e Hemaglutinao Indireta.

17.

DOENA DE LYME SOROLOGIA DOENA DE LYME SOROLOGIA Seo de Imunoparasitologia

Instrues de Coleta Venopuno em tubo seco e limpo ou sistema a vcuo. Material e Conservao para Envio 2 ml de soro. Tubo de ensaio com tampa a 4 a 8C, aps 48 h congelar a -20C.

Transporte Isopor com gelo. Informaes Importantes A amostra dever ser encaminhada juntamente com pedido mdico assinado e carimbado. Mtodo ELISA IgG e IgM e Western Blot.

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18. 18.1.

DOENA DE CREUTZFELDT JACOB DOENA DE CREUTZFELDT JACOB PESQUISA DA PROTENA 14-3-3 LIM 15 Diviso de Virologia

Instrues de Coleta Coletar 1 a 2 ml de Lquor por puno cefaloraquidiana. Material e Conservao para Envio Lquor. Tubo de plstico, estreis, com tampa rosquevel, devidamente identificado e conservado em geladeira (4 a 8 C).

Transporte Colocar amostra em saco plstico individualizado dentro de outro saco plstico. Transportar em caixa trmica com gelo reciclvel. Informaes Importantes Enviar amostra biolgica junto com a ficha de notificao (ANEXO XXVIII). O material ser enviado ao Hospital das Clnicas / USP. Mtodo Imunobloting.

18.2. DOENA DE CREUTZFELDT JACOB PESQUISA DE AC PrPsc / PROTENA TAU / UBIQUITINA / GFAP / AMILIDE / SINUCLEINA Diviso de Virologia Instrues de Coleta Coletar fragmentos pequenos (1 a 2 mm3) de tecidos cerebrais ou blocos de parafina. Material e Conservao para Envio Amostras de tecidos cerebrais. Colocar os fragmentos de vsceras em frasco estril com tampa de rosca contendo formalina tamponada. Transporte Colocar os frascos em caixa trmica (sem gelo). Conservar em temperatura ambiente. Informaes Importantes Enviar amostra biolgica junto com a ficha epidemiolgica (ANEXO XXVIII). Usar formol a 10 %, com volume 10 vezes maior que o volume dos fragmentos. Material enviado ao Laboratrio de Patologia, UFRJ. Mtodo Imunohistoqumico / Neuropatolgico.

18.3. DOENA DE CREUTZFELDT JACOB PESQUISA DE POLIMORFISMO OU MUTAES DO CDON 129 DO GEN PRPN Diviso de Virologia Instrues de Coleta Coletar 2 ml de sangue sem anticoagulante (separar o soro) e sangue perifrico. Avisar ao LACEN dia e hora da coleta. Enviar ao LACEN imediatamente, pois o material deve chegar em 24 horas em So Paulo. Material e Conservao para Envio Sangue e soro (reserva tcnica). Tubo de plstico, estreis, com tampa rosquevel, devidamente identificado e conservado em geladeira (4C a 8C). Transporte Colocar amostra em saco plstico individualizado dentro de outro saco plstico. Transportar em caixa trmica com gelo reciclvel. Informaes Importantes Enviar a amostra biolgica junto com a ficha de notificao original (ANEXO XXVIII) e termo de consentimento (ANEXO XXXI). O material ser enviado para o Instituto Ludwig, So Paulo. Mtodo HPLC / Seqenciamento gentico.

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19.

ESPOROTRICOSE ESPOROTRICOSE Seo de Micologia

Instrues de Coleta Coletar a secreo purulenta que se encontra nos ndulos fechados com seringa e agulha estreis. No caso do ndulo que ulcerou, recolher a secreo do mesmo com auxlio de uma lmina de bisturi. Material e Conservao para Envio Enviar o mais rpido ao laboratrio, caso contrrio manter sob refrigerao (4C 8C).

Transporte Seringa com a agulha protegida e/ou Placa de Petri estril. Mtodo Cultura.

20.

ESQUITOSSOMOSE PESQUISA MALACOLGICA ESQUISTOSSOMOSE PESQUISA MALACOLGICA Seo de Biologia

Instrues de Coleta Pesquisa direta em criadouros utilizando pinas e conchas especficas. Material e Conservao para Envio Moluscos do gnero Biomphalaria e outros. Frascos especficos com gua da prpria coleo hdrica, devidamente identificados. Podem ser transportados tambm envoltos em gaze e algodo, umedecidos com gua. Todos os frascos ou tubos devidamente identificados.

Transporte Normal. Informaes Importantes Envio de 100% das amostras coletadas. As amostras devero ser acompanhadas de boletins prprios. Mtodo Definido pela Secretaria Sade/Ministrio da Sade e; de Vigilncia em

Utilizados pelas Instituies de Pesquisas Nacionais e Internacionais.

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21.

FEBRE AMARELA PESQUISA ENTOMOLGICA FEBRE AMARELA PESQUISA ENTOMOLGICA Seo de Biologia

Instrues de Coleta Formas imaturas: coleta em ocos de rvores, bambus, buracos naturais. Material: pesca larvas, pipetas Pasteur, pipeto vaginal, aparelho de suco oral com coletor para larvas; Formas aladas: captura em solo e copas de rvores. Pu, capturador de suco oral, capturador de Castro, barraca de Shannon. Material e Conservao para Envio Culicdeos em geral, com nfase para os gneros Haemagogus e Sabethes. Formas imaturas: Tubos e frascos plsticos com lcool a 70 %; Formas aladas: Tubos ou frascos alternando algodo e papel de filtro entre os exemplares e um pouco de naftalina para melhor conservao;

Formas aladas para isolamento viral: exemplares armazenados ainda vivos em nitrognio lquido ou em gelo seco. Transporte Em botijo contendo nitrognio lquido ou em isopor com gelo seco. Informaes Importantes As amostras devero ser acompanhadas de boletins prprios. Todos os frascos ou tubos devidamente identificados. Mtodo Definido pela Secretaria de Vigilncia em Sade/Ministrio da Sade e; Utilizados pelas Instituies de Pesquisas Nacionais e Internacionais.

22.

FEBRE MACULOSA

22.1. FEBRE MACULOSA CULTIVO CELULAR PARA ISOLAMENTO EM SHELL VIAL E PCR SANGUE E TECIDOS Seo de Imunoparasitologia Instrues de Coleta Coletar 2 ml de sangue em tubo seco, sem anticoagulante ou fragmentos de pele. Aps retrao, transferir o cogulo ou o fragmento de pele para flaconete com tampa de rosca contendo, preferencialmente, 1 ml de meio de transporte BHI. Obs.: As amostras devero ser coletadas no incio dos sintomas (fase aguda) antes da antibioticoterapia ou com at 48 h de medicao. Material e Conservao para Envio Sangue. Aps a coleta colocar a 4C por no mximo, aps isso congelar em freezer a 70C ou nitrognio lquido. Transporte Encaminhar ao Laboratrio de Referncia no prazo mximo de 8 h, aps coleta, em isopor com gelo. Caso isso no seja possvel, congelar em freezer 70C ou em nitrognio lquido e transportar em caixa adequada ou em botijo prprio para nitrognio. Informaes Importantes amostra dever ser encaminhada A obrigatoriamente com a ficha de investigao epidemiolgica (ANEXO XXVII) Mtodo Cultivo celular para isolamento em SHELL VIAL e PCR.

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22.2. FEBRE MACULOSA IMUNOHISTOQUMICA - BIPSIA DE PELE Seo de Imunoparasitologia Instrues de Coleta Coletar aps surgimento de petquias. Material e Conservao para Envio Colher o fragmento de pele e colocar em frasco com tampa de rosca contendo formol a 10 %. Transporte Transportar os frascos em embalagem que permita o transporte sem danos ao material. Manter em temperatura ambiente, desde que no ultrapasse 40C. Informaes Importantes A amostra dever ser encaminhada obrigatoriamente com a ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII). Mtodo Tcnicas imunohistoqumicas com a colorao com imunoperoxidase e fosfatase alcalina.

22.3. FEBRE MACULOSA IMUNOHISTOQUMICA TECIDOS Seo de Imunoparasitologia Instrues de Coleta Coletar logo aps o bito ou no mximo em 6 horas. Material e Conservao para Envio Tecidos (fragmentos de pele, pulmo, fgado e outros). As amostras devem, preferencialmente, ser submetidas a processamento histolgico (bloco de parafina) no local da necropsia. Os blocos de parafina encaminhados aos LRs devem conter quantidades representativas das amostras coletadas. O laudo de necropsia discriminando os achados macro e microscpicos e contendo identificao e contato do Patologista responsvel deve acompanhar o material. Transporte Transportar os blocos de parafina em embalagem que permita o transporte sem danos ao material. Manter em temperatura ambiente, desde que no ultrapasse 40C. Informaes Importantes A amostra dever ser encaminhada obrigatoriamente com a ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII). Mtodo Tcnicas imunohistoqumicas com a colorao com imunoperoxidase e fosfatase alcalina.

22.4.

FEBRE MACULOSA SOROLOGIA POR IFI Seo de Imunoparasitologia

Instrues de Coleta Coletar 10 ml de sangue em tubo seco ou vacutainer, sem anticoagulante Aps retrao do cogulo, em temperatura ambiente, direcionar o soro a frasco prprio. Enviar duas amostras (observar intervalo mnimo de 15 dias entre as coletas). Material e Conservao para Envio
Soro. Tubo de ensaio com tampa em 4 a 8C, aps 48 h

Transporte Isopor com gelo Informaes Importantes A amostra dever ser encaminhada obrigatoriamente com a ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII). Mtodo Imunofluorescncia Indireta.

congelar a -20C.

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23.

FEOHIFOMICOSE FEOHIFOMICOSE Seo de Micologia

Instrues de Coleta O material biolgico constitudo principalmente por bipsias de tecidos afetados. Material e Conservao para Envio Enviar o mais rpido ao laboratrio, caso contrrio manter sob refrigerao (4 a 8C). A bipsia dever ser mantida em salina.

Transporte Frasco estril. Mtodo Cultura.

24. 24.1.

GONORREIA GONORRIA BACTERIOSCOPIA + CULTURA Seo de Bacteriologia

Cultura: Em meio de transporte de Amies, conservar em temperatura ambiente por at 8hs. Aps Mulher: Introduzir o espculo; limpar com gaze a semeadura em meio de cultura de Thayer-Martin deve secreo do fundo do saco vaginal e a que recobre o ser conservado em microaerofilia (lata com vela e colo do tero; introduzir o swab alginatado cerca de 1 chumao de algodo). cm no canal endocervical, girando-o delicadamente de 8 a 10 vezes, para absorver a secreo. Retirar o swab Transporte sem tocar as paredes vaginais e faa um esfregao fino e homogneo em uma lmina identificada com o Encaminhar ao LACEN no mximo at 8 horas em temperatura ambiente. nome, idade do paciente. Proceda a nova coleta para cultura, utilizando Informaes Importantes outro swab alginatado, da mesma forma descrita anteriormente, e inocular imediatamente no meio de Os swabs utilizados devem ser com algodo alginatado ou com carvo ativado. transporte de Amies. A coleta de secreo uretral deve ser feita de Homem: Solicite ao paciente para retrair o preferncia pela manh, antes do paciente urinar. Caso prepcio; limpe a secreo emergente com gaze; no seja possvel, espere pelo menos trs horas aps a introduza o swab alginatado 2 cm no canal uretral; ltima mico. gire o swab delicadamente de 8 a 10 vezes para Assegure-se de que o paciente no esteja sob efeito absorver a secreo; retire o swab, faa um esfregao de tratamento com antibitico. fino e homogneo em uma lmina identificada com Em crianas e mulheres histerectomizadas, a nome, idade do paciente. Proceda a nova coleta para secreo do fundo do saco vaginal poder ser utilizada. cultura, utilizando outro swab alginatado, da mesma forma descrita anteriormente, e inocular Mtodo imediatamente no meio de transporte de Amies. Bacterioscopia e cultura. Instrues de Coleta Material e Conservao para Envio Secrees: uretral, endocervical. Bacterioscopia: Lminas com esfregao seco, conservar em temperatura ambiente. Envolve-las em papel alumnio.

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24.2. GONORRIA CULTURA Seo de Bacteriologia Instrues de Coleta Ala ou swab da faringe posterior e criptas tonsilares. Swab da mucosa anal. Swab da parte interna das plpebras. Material e Conservao para Envio Secrees de orofaringe, anal e ocular. Meio de transporte de Amies por at 8 horas, ou Thayer-Martin por at 24 horas em microaerofilia (lato hermeticamente fechado contendo chumao de algodo umedecido e vela). Transporte Em estantes apropriadas ou lato em ambiente de microaerofilia. Informaes Importantes Os swabs utilizados devem ser com algodo alginatado ou com carvo ativado. Mtodo Cultura.

25.

HANTAVRUS

25.1. HANTAVRUS IMUNOHISTOQUMICA VCERAS Diviso de Virologia Instrues de Coleta Coletar fragmento (1 a 2 cm ) de pulmo, bao, rim, linfonodo, corao, pncreas, glndula pituitria, crebro e fgado at 8 horas aps o bito.
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Transporte Colocar os frascos em caixa trmica, sem gelo. Informaes Importantes Enviar amostras biolgicas junto com a ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII) e a ficha do SVO de forma legvel. Usar formol a 10 %, com volume 10 vezes maior que o volume dos fragmentos. Material enviado ao Instituto Adolfo Lutz, So Paulo, para diagnstico. Mtodo Imunohistoqumica.

Material e Conservao para Envio Vceras Colocar os fragmentos de vsceras em frasco estril com tampa de rosca contendo formalina tamponada. Conservar em temperatura ambiente.

25.2.

HANTAVRUS PCR SORO / SANGUE TOTAL Diviso de Virologia

Instrues de Coleta Material dever ser coletado at o 7 dia, a partir do inicio dos sintomas. Material e Conservao para Envio Soro / Sangue total. Tubo resistente a temperatura ultrabaixa (CRIOTUBO) capacidade de 2 ml com tampa de rosca e anel de vedao, devidamente identificado. Conservar em freezer a -70C.

Transporte Tubos criognicos, resistentes a temperaturas ultrabaixas, em gelo seco ou nitrognio lquido. Informaes Importantes Enviar amostra biolgica junto com a ficha epidemiolgica (AENXO XXVII). Frascos ou tubos devidamente identificados. Mtodo PCR

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25.3.

HANTAVRUS SOROLOGIA SORO IgM ou IgG Diviso de Virologia

Instrues de Coleta Coletar o sangue sem anticoagulante e separar o soro. Coletar a 1 amostra no atendimento mdico, coletar a 2 nos primeiros dias de internao e 3, 2 a 3 semanas aps o inicio dos sintomas. Material e Conservao para Envio Soro. Tubo plstico estril com tampa de rosca e conservado a -20C.

Transporte Colocar a amostra em saco plstico individualizado dentro de outro saco plstico. Transportar em caixa trmica com gelo reciclvel. Informaes Importantes Acompanha ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII) com dados do paciente. Mtodo Ensaio Imunoenzimtico (IgM ou IgG).

26.

HEPATITES VIRAIS

26.1. HEPATITE B QUANTIFICAO DO DNA DO VRUS DA HEPATITE B Diviso de Biologia Molecular Instrues de Coleta Venopuno em 2 (dois) tubos de 5 mL com EDTA. Amostras com nveis elevados de lipdeos, bilirrubina, protenas ou hemoglobinas no interferem neste ensaio. Material e Conservao para Envio Sangue total. Pode permanecer at 4 horas em temperatura ambiente (15C a 25C). Armazenar no mximo 24 horas entre 2C e 8C (geladeira) antes da separao; centrifugar e separar 1200ul de plasma em dois tubos de polipropileno, com tampa de rosca, estreis, livres de RNAses e DNAses. Armazenar o plasma entre 2C a 8C (geladeira) no mximo 3 dias ou freezer 20 a 80C. Transporte Caixa trmica com termmetro: Plasma - com gelo reciclvel (2C a 8C) no prazo mximo de 24 horas. Sangue total - com gelo reciclvel suficiente para manter a temperatura entre 2 e 8C no mximo 24h. Informaes Importantes Enviar a Ficha Quantificao de cido Nuclico Carga Viral HBV (ANEXO X) corretamente preenchida, com a assinatura e carimbo do mdico. Separao s poder ser feita aps treinamento no LACEN. No acondicione os tubos com sangue total diretamente em contato com gelo reciclvel, para evitar hemlise. Mtodo PCR em Tempo Real Cobas Ampliprep / Taqman HBV test, Roche.

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26.2. HCV PCR QUALITATIVO - PCR QUANTITATIVO - GENOTIPAGEM (LIPA) Diviso de Biologia Molecular Instrues de Coleta Venopuno em um tubo de 5mL com EDTA. Material e Conservao para Envio 5ml de sangue total. Separar at 5 horas aps a coleta. Armazenar 600 l em 2 tubos de polipropileno, com tampa de rosca, estreis, livres de RNAses e DNAses. Armazenar o plasma entre 2C e 8 C (geladeira) no mximo 48horas. Caso no ocorra separao enviar ao Lacen at 3 horas aps coleta. Transporte Caixa trmica com termmetro: Plasma temperatura entre 2C a 8C com gelo reciclvel ou gelo seco. Sangue total deve ser transportado entre 2 e 25C. No acondicione os tubos com sangue total diretamente em contato com gelo reciclvel, para evitar hemlise. Informaes Importantes Enviar Laudo para Solicitao/Autorizao de Procedimento Ambulatorial (ANEXO XIX) corretamente preenchido com as assinaturas e carimbo dos mdicos solicitantes e autorizador. A Unidade solicitante s poder coletar o material aps treinamento no LACEN. Mtodo a) Qualitativo: PCR - Amplicor HCV test, verso 2.0 Roche. b) Quantitativo: (conforme tcnica empregada). c) Genotipagem: Versant HCVGenotype Assay (LiPA) Siemens.

26.3.

HEPATITES VIRAIS SOROLOGIA Diviso de Virologia

Instrues de Coleta Coletar o sangue sem anticoagulante a partir do incio dos sintomas ou a critrio mdico. Separar no mnimo 2 ml do soro para sorologia. Material e Conservao para Envio Soro. Tubo plstico estril com tampa de rosca. Conservar em freezer 20C.

Transporte Colocar a amostra em saco plstico individualizado dentro de outro saco plstico. Transportar em caixa trmica com gelo comum ou reciclvel. Informaes Importantes Acompanha ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII) com dados do paciente. Mtodo Ensaio Imunoenzimtico.

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27.

HIALOHIFOMICOSE HIALOHIFOMICOSE Seo de Micologia

Instrues de Coleta O material biolgico a ser colhido bem diverso: escarro, lavado brnquico, sangue e bipsia. Material e Conservao para Envio Enviar o mais rpido ao laboratrio, caso contrrio manter sob refrigerao (4 a 8C). A bipsia dever ser mantida em salina.

Transporte Frasco estril. Informaes Importantes No caso de sangue, considerar as informaes relatadas em CANDIDASE Sistmica e o restante dos espcimes clnicos em frasco estril. Mtodo Cultura.

28.

HISTOPLASMOSE HISTOPLASMOSE Seo de Micologia

Instrues de Coleta O material biolgico a ser colhido bem diverso: sangue, puno ganglionar, puno medular, puno esplnica e heptica, etc. Pode-se tambm recorrer bipsia. Material e Conservao para Envio Enviar o mais rpido ao laboratrio, caso contrrio manter sob refrigerao (4 a 8C). A bipsia dever ser mantida em salina.

Transporte Frasco estril. Cultura Cultura.

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29.

LEISHMANIOSE

29.1. LEISHMANIOSE CANINA SOROLOGIA Seo de Imunoparasitologia Instrues de Coleta Venopuno em tubo seco e limpo. Coletar sangue da orelha do animal em papel de filtro e deixar secar. Material e Conservao para Envio 1 ml. de soro. Sangue em papel de filtro Whatman. Aps separao do soro: Tubo de ensaio com tampa 4 a 8o C, aps 48 horas, congelado a menos 20o C. Temperatura ambiente. Transporte Isopor com gelo. Saco plstico. Informaes Importantes As amostras de Goinia para inqurito de Leishmaniose so enviadas atravs do Centro de Controle de Zoonoses. As amostras dos outros municpios devero ser coletadas nos Centros de Controle de Zoonoses e enviadas ao LACEN pelas respectivas Regionais junto com a ficha de identificao do animal (ANEXO VII) e a ficha de encaminhamento de material (ANEXO V). Mtodo ELISA e Imunofluorescncia Indireta.

29.2. LEISHMANIOSE HUMANA PUNO MEDULAR LVA Seo de Imunoparasitologia Instrues de Coleta Coleta (puno) dever ser realizada exclusivamente por mdicos treinados. Uma gota do material aspirado colocada em uma das extremidades da lmina previamente limpa, e o material firmemente dispersado na outra direo. Aps secagem em temperatura ambiente, o esfregao dever ser fixado em lcool metlico. Material e Conservao para Envio Puno medular ou esplnica (esfregao em lmina limpa, desengordurada e seca). Depois de secas, acondicionar as lminas temperatura ambiente. Transporte Colocar em recipiente apropriado para lminas. Opcionalmente embrulhar cada lmina em papel absorvente (higinico) de forma que no haja atrito entre elas. Formar pequenos pacotes e coloc-los, de preferncia, em uma caixinha de isopor ou frasco para que no se quebrem durante o transporte. Informaes Importantes A amostra dever ser encaminhada com o pedido mdico assinado e carimbado e ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII). Recomenda-se pelo menos quatro lminas. Preferencialmente utilizar lamina com borda fosca para facilitar sua identificao. Mtodo Exame parasitolgico (pesquisa direta de parasitos em lamina corada).

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29.3. LEISHMANIOSE PESQUISA ENTOMOLGICA Seo de Biologia Instrues de Coleta Armadilhas luminosas tipo CDC, barraca de Shannon, capturador de Castro, capturador de suco oral, aspirador eltrico. Material e Conservao para Envio Flebotomneos. Tubos e frascos plsticos com lcool a 70%, devidamente identificados. Transporte Normal. Informaes Importantes As amostras devero ser acompanhadas de boletins prprios. Mtodo Definido pela Secretaria Sade/Ministrio da Sade e; de Vigilncia em

Utilizados pelas Instituies de Pesquisas Nacionais e Internacionais.

29.4. LEISHMANIOSE TEGUMENTAR AMERICANA (LTA) PESQUISA DIRETA Seo de Imunoparasitologia Instrues de Coleta ANEXO XVI. Material e Conservao para Envio Raspado de Leso. Depois de secas, acondicionar as lminas temperatura ambiente. Transporte Colocar em recipiente apropriado para lminas. Opcionalmente embrulhar cada lmina em papel absorvente (higinico) de forma que no haja atrito entre elas. Formar pequenos pacotes e coloc-los, de preferncia, em uma caixinha de isopor ou frasco para que no se quebrem durante o transporte. 29.5. LEISHMANIOSE VISCERAL (LV) CONTROLE DE QUALIDADE DE LAMINAS DA PESQUISA DIRETA Seo de Imunoparasitologia Informaes Importantes As lminas devero ser enviadas, acompanhadas do formulrio especfico do LACEN, preenchido corretamente (ANEXO XXXIII); O formulrio, juntamente com as lminas, dever ser entregue no setor de coleta do LACEN; Enviar mensalmente todas as lminas positivas e 10 % do total de lminas negativas; As lminas com divergncias entre o LACEN e o laboratrio de origem, permanecero arquivadas para futuras consultas. Embrulhar cada lmina em papel absorvente (higinico) de forma que no haja atrito entre elas; Formar pequenos pacotes e coloc-los, de preferncia, em uma caixinha de isopor ou frasco para que no se quebrem durante o transporte. Colocar etiquetar com o nome do destinatrio. LACEN: Aos cuidados da seo de Imunoparasitologia, CUIDADO FRGIL. Informaes Importantes A amostra dever ser encaminhada com o pedido mdico assinado e carimbado e ficha epidemiolgica. Recomenda-se pelo menos quatro lminas. Mtodo Exame parasitolgico (pesquisa direta de parasitos em lamina corada).

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29.6. LEISHMANIOSE VISCERAL (LV) SOROLOGIA (HUMANA) Seo de Imunoparasitologia Instrues de Coleta Venopuno em tubo seco e limpo. Aps a retrao do cogulo, proceder a separao do soro (no mximo 1 hora aps a coleta). Aliquotar em tubo com tampa. Identificar com nome do paciente, data da coleta, etc. Material e Conservao para Envio 2 ml Soro. Aps separao do soro: tubo de ensaio com tampa em 4 a 8C, aps 48 horas, congelado a 20 C. Transporte Isopor com gelo. Informaes Importantes Sorologia Humana: a amostra dever ser encaminhada obrigatoriamente com a ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII). Mtodo Imunofluorescncia indireta IgG.

30.

LEPTOSPIROSE SOROLOGIA LEPTOSPIROSE SOROLOGIA Seo de Imunoparasitologia

Instrues de Coleta Venopuno em tubo seco e limpo ou sistema a vcuo. Material e Conservao para Envio 2 ml de soro. Tubo de ensaio com tampa em 4 a 8C, aps 48 horas congelar a -20C.

Transporte Isopor com gelo. Informaes Importantes A amostra dever ser encaminhada obrigatoriamente com a ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII). Mtodo Enzimaimunoensaio (FIOCRUZ). IgM e Microaglutinao

31. 31.1.

MALRIA MALRIA CONTROLE DE QUALIDADE DE LAMINAS DA PESQUISA DIRETA Seo de Imunoparasitologia

Informaes Importantes As lminas devero ser enviadas, acompanhadas do formulrio especfico do LACEN, preenchido corretamente (ANEXO XII). O formulrio, juntamente com as lminas, dever ser entregue no setor de coleta do LACEN; Enviar mensalmente todas as lminas positivas e 10 % do total de lminas negativas; As lminas com divergncias entre o LACEN e o laboratrio de origem, permanecero arquivadas para futuras consultas. Embrulhar cada lmina em papel absorvente (higinico) de forma que no haja atrito entre elas; Formar pequenos pacotes e coloc-los, de preferncia, em uma caixinha de isopor ou frasco para que no se quebrem durante o transporte. Colocar etiquetar com o nome do destinatrio. LACEN: Aos cuidados da seo de Imunoparasitologia, CUIDADO FRGIL.

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31.2. MALRIA PESQUISA ENTOMOLGICA Seo de Biologia Instrues de Coleta Formas imaturas: coleta em criadouros naturais, remansos, riachos, lagoas, ocos de rvores. Material: pesca larvas, pipetas Pasteur; Formas aladas: armadilhas luminosas tipo CDC, barraca de Shannon, capturador de Castro, capturador de suco oral, aspirador eltrico. Material e Conservao para Envio Culicdeos em geral com nfase para o gnero Anopheles; Formas imaturas: tubos e frascos plsticos com lcool a 70%; Formas aladas: Tubos ou frascos alternando algodo e papel de filtro entre os exemplares e um pouco de naftalina para melhor conservao. Transporte Normal. Informaes Importantes As amostras devero ser acompanhadas de boletins prprios (ANEXO III); Todos os frascos ou tubos devidamente identificados. Mtodo Definido pela Secretaria de Vigilncia em Sade / Ministrio da Sade e; Utilizados pelas Instituies de Pesquisas Nacionais e Internacionais.

31.3.

MALRIA PESQUISA DE HEMATOZORIOS Seo de Imunoparasitologia

Instrues de Coleta Colher por puno digital ou do lbulo da orelha, no adulto, e da superfcie plantar do calcanhar, na criana. Pode ser usado tambm o sangue venoso em tubo com EDTA. Fazer preferencialmente a Gota Espessa ou esfregao em lmina. Material e Conservao para Envio Sangue Capilar ou Sangue Venoso. Deixar a lmina secar ao calor suave ou a temperatura ambiente.

Transporte Colocar em recipiente apropriado para lminas. Opcionalmente embrulhar cada lmina em papel absorvente (higinico) de forma que no haja atrito entre elas. Formar pequenos pacotes e coloc-los, de preferncia, em uma caixinha de isopor ou frasco para que no se quebrem durante o transporte. Informaes Importantes A amostra dever ser encaminhada junto com o pedido mdico e a ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII). Mtodo Exame parasitolgico (pesquisa direta de parasitos em lamina corada).

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32.

MENINGITES

32.1. MENINGITE VIRAL ISOLAMENTO VIRAL E PCR Diviso de Virologia Instrues de Coleta Lquor: Caso suspeito com lquor claro e pleocitose separar 1,5 a 2,0 ml para diagnstico. No enviar fragmentos de crebro, somente lquor e fezes. Fezes: Coletar de 4 a 8 g de fezes para diagnstico; Material e Conservao para Envio Lquor: Tubo resistente a temperatura ultra baixa (CRIOTUBO). Colocar imediatamente em banho de gelo ou em freezer a 20 C por at 24 horas. Fezes: Frasco plstico estril com tampa rosqueada de boca larga. Conservar em freezer a -20 C por at 72 horas. Transporte Colocar a amostra em saco plstico individualizado dentro de outro saco plstico. Transportar em caixa trmica com gelo comum ou reciclvel. Informaes Importantes Acompanha ficha epidemiolgica com dados do paciente (ANEXO XXVII). Material enviado ao Instituto Osvaldo Cruz FIOCRUZ, Rio de Janeiro, para diagnstico. O fluxo de envio de lquor e fezes foram estabelecidos para duas amostras por semana coletadas pelo hospital sentinela (HDT). Mtodo Isolamento viral e PCR.

32.2.

MENINGITES AGLUTINAO PELO LTEX + CIE. Seo de Bacteriologia

Instrues de Coleta Lquor: Puno lombar (Espao entre as vrtebras lombares L3 e L4). Coletar 1 ml a 2 ml em frasco estril com tampa de borracha (penicilina). Soro: Puno venosa. Coletar 5 ml de sangue em um frasco estril sem anticoagulante para obteno do soro. Material e Conservao para Envio Lquor: At 3 horas temperatura ambiente. Mais de 3 horas: 4C. Vivel at 5-7 dias 4C, mas no aconselhvel. Soro: Mant-lo at uma hora em temperatura ambiente, mais de 1 hora 4C, ou congelar.

Transporte Embalar em saco plstico e transportar em caixa de isopor com gelo. Informaes Importantes A puno do lquor um procedimento de urgncia, invasivo e que deve ser realizado no hospital por um profissional treinado (mdico). O LACEN fornece Kit com materiais necessrios (meios de cultura, frascos e lminas) para o diagnstico de meningite. O material dever ser encaminhado com a ficha de investigao epidemiolgica (ANEXO XXVII) devidamente preenchida. Ver ANEXO XXIV. Mtodo Prova do Ltex Deteco de antgenos atravs de partculas de ltex. CIE Eletroforese em tira de acetato de celulose

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32.3.

MENINGITES CULTURA LQUOR Seo de Bacteriologia

Instrues de Coleta Puno lombar (Espao entre as vrtebras lombares L3 e L4). 5 a 10 gotas em frasco contendo meio Agar chocolate. Material e Conservao para Envio Lquor. Aps a semeadura imediata, colocar em estufa 37C ou temperatura ambiente em saturao de umidade e CO2 (lata de alumnio com vela e algodo umedecido). Transporte

Informaes Importantes A puno do lquor um procedimento de urgncia, invasivo e que deve ser realizado no hospital por um profissional treinado (mdico). Nunca deixar o frasco de cultura aps semeado em geladeira. O LACEN fornece Kit com materiais necessrios (meios de cultura, frascos e lminas) para o diagnstico de meningite. O material dever ser encaminhado com a ficha de investigao epidemiolgica (ANEXO XXVII) devidamente preenchida. Ver ANEXO XXIV.

Mtodo Embalar em saco plstico e transportar em caixa de isopor sem gelo. Cultura em gar chocolate

32.4.

MENINGITES CULTURA SANGUE Seo de Bacteriologia

Instrues de Coleta Puno venosa: Criana: inocular 1 a 3 ml de sangue em frasco contendo 20 ml de meio de cultura (caldo BHI com anticoagulante), ou 3 ml em frasco especfico para cultura automatizada; Adulto: inocular 2,5 a 5ml de sangue em frasco contendo 50ml de meio de cultura (caldo BHI com anticoagulante), ou 8ml em frascos especficos para cultura automatizada. Material e Conservao para Envio Sangue. Caso possvel mant-lo 37C ou deix-lo temperatura ambiente.

Transporte Embalar em saco plstico e transportar em caixa de isopor sem gelo. Transportar imediatamente ou dentro de 16 - 18 horas. Informaes Importantes Caso necessrio utilizar anticoagulante, fazer uso da heparina. Nunca deixar o frasco de cultura semeado em geladeira. O LACEN fornece Kit com materiais necessrios (meios de cultura, frascos e lminas) para o diagnstico de meningite. O material dever ser encaminhado com a ficha de investigao epidemiolgica (ANEXO XXVII) devidamente preenchida. Ver ANEXO XXIV. Mtodo Cultura em meios prprios.

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32.5.

MENINGITES QUIMIOCITOLGICO + BACTERIOSCPICO Seo de Bacteriologia

Instrues de Coleta Puno lombar (Espao entre as vrtebras lombares L3 e L4). 2 a 3ml de LCR em frasco estril com tampa de borracha (penicilina). Material e Conservao para Envio Lquor. At 3 horas: temperatura ambiente. Mais de 3 horas: 4C. Transporte Embalar em saco plstico e transportar em caixa de isopor com gelo.

Informaes Importantes A puno do lquor um procedimento de urgncia, invasivo e que deve ser realizado no hospital por um profissional treinado (mdico). O LACEN fornece Kit com materiais necessrios (meios de cultura, frascos e lminas) para o diagnstico de meningite. O material dever ser encaminhado com a ficha de investigao epidemiolgica (ANEXO XXVII) devidamente preenchida. Mtodo Quimiocitolgico exame fresco- Bacterioscpico colorao pelo Gram.

33.

MICETOMAS (ACTINOMICETOMAS EUMICETOMAS) MICETOMAS (ACTINOMICETOMAS EUMICETOMAS) Seo de Micologia

Instrues de Coleta Coletar secreo com auxlio de uma lmina de bisturi ou de seringa sem agulha estril. Recolher tambm os gros que porventura existirem. Pode-se tambm recorrer a bipsia. Material e Conservao para Envio Enviar o mais rpido ao laboratrio, caso contrrio manter sob refrigerao (4 a 8C).

Transporte Frasco estril e/ou Placa de Petri estril. Colocar a bipsia em salina. Mtodo Pesquisa direta.

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34. 34.1.

MICOBACTRIAS NO TUBERCULOSAS MICOBACTRIAS NO TUBERCULOSAS Seo de Micobactrias

Instrues de Coleta De acordo com a suspeita clnica. Colher em frascos esterilizados. Material e Conservao para Envio Amostras In natura. Transporte Acondicionar adequadamente em recipientes esterilizados, fechados adequadamente, envolvidos em sacos plsticos e transportados em suportes de forma a manter o recipiente na posio vertical.

Informaes Importantes A pesquisa de MNT est indicada em casos de suspeita de micobacterioses ou infeco hospitalar por este microrganismo. Enviar imediatamente ao LACEN acompanhadas do Formulrio de notificao de casos de MNT devidamente preenchidas (ANEXO XV). Mtodo a) Baciloscopia: Colorao de Ziehl Neelsen. b) Cultura: Semeadura direta em meio de Lweintein Jensen conservando metade da amostra em geladeira para descontaminao quando necessrio. c) Identificao de espcie de MNT PRA hsp 65. d) Teste de Sensibilidade: Concentrao Inibitria Mnima (CIM). Indicado apenas em casos de surtos.

34.2.

MICOBACTRIAS NO TUBERCULOSAS - INFECES RELACIONADAS ASSISTNCIA SADE (IRAS) Seo de Micobactrias

Instrues de Coleta De acordo com a suspeita clnica. Colher em frascos esterilizados. Material e Conservao para Envio Cepas/Isolados Comunicar SMS/SVS/VISA/ Goinia/DPCISS (062 - 3524 1552) ou SES/SVISA/CEPCISS (062 3201 4128 para notificao do caso e fornecimento dos dados necessrios ao preenchimento do Formulrio de Notificao de MNT (ANEXO XV). Transporte Embalar o frasco contendo a cepa em sacos plsticos e acondicion-los em caixas adequadas para transporte de amostras biolgicas.

Informaes Importantes No municpio de Goinia, o profissional da SMS/VEM ser comunicado pela DPCISS e se encarregar de pegar o isolado no laboratrio responsvel pela notificao e encaminh-la ao LACEN. No caso de amostras provenientes de laboratrios do interior o contato dever ser feito com a SES/SVISA/CEPCISS fone: 062 3201 4128. Os resultados sero expedidos do LACEN para as Vigilncias Sanitrias que se encarregaro da investigao de IRAS/Surtos e repasse dos resultados aos pacientes e/ou profissionais de sade, quando necessrio. No sero recebidos isolados transportados pelo paciente. Mtodo Identificao de espcie de MNT PRA hsp 65. Teste de Sensibilidade: Concentrao Inibitria Mnima (CIM). Indicado apenas em casos de surtos.

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35.

MICOSES SISTEMICAS (PARACOCCIDIODOMICOSE, HISTOPLASMOSE E ASPERGILOSE) SOROLOGIA

MICOSES SISTEMICAS (PARACOCCIDIODOMICOSE, HISTOPLASMOSE E ASPERGILOSE) SOROLOGIA Seo de Imunoparasitologia Instrues de Coleta Venopuno em tubo seco e limpo ou sistema a vcuo. Material e Conservao para Envio 2 ml de soro. Tubo de ensaio com tampa em 4 a 8C, aps 48 horas congelado a 20C. Transporte Isopor com gelo. Informaes Importantes A amostra dever ser encaminhada juntamente com pedido mdico assinado e carimbado. Mtodo Imunodifuso dupla.

36.

MONONUCLEOSE INFECCIOSA SOROLOGIA MONONUCLEOSE INFECCIOSA SOROLOGIA Seo de Imunoparasitologia

Instrues de Coleta Venopuno em tubo seco e limpo ou sistema a vcuo. Material e Conservao para Envio 1 ml de soro. Tubo de ensaio com tampa em 4 a 8C, aps 48 horas congelado a -20C.

Transporte Isopor com gelo. Informaes Importantes A amostra dever ser encaminhada juntamente com pedido mdico assinado e carimbado. Mtodo Hemaglutinao direta em lmina.

37.

PARACOCCIDIODOMICOSE (BLASTOMICOSE SUL-AMERICANA) PARACOCCIDIODOMICOSE (BLASTOMICOSE SUL-AMERICANA) Seo de Micologia

Instrues de Coleta O material biolgico a ser colhido depende do tipo de leso e pode ser: escarro, lavado brnquico, raspado de leses cutneas, bipsias e outros. Material e Conservao para Envio Temperatura ambiente em caso de raspados. Os demais materiais sob refrigerao, caso no seja enviado imediatamente ao laboratrio. A bipsia dever ser mantida em salina.

Transporte Placa de Petri estril (para raspados). Os demais materiais em frasco estril. Mtodo Pesquisa direta e Cultura.

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38.

PIEDRA BRANCA E PIEDRA NEGRA PIEDRA BRANCA E PIEDRA NEGRA Seo de Micologia

Instrues de Coleta Coletar plos e cabelos com ndulos aderidos com auxlio de uma tesoura. Material e Conservao para Envio Temperatura ambiente. Transporte Placa de Petri estril.

Informaes Importantes Preferencialmente no utilizar medicao antifngica tpica ou sistmica por 07 dias antes da coleta. Recomenda-se tambm no utilizar creme algum na pele, unhas e cabelos, pelo menos um (01) dia antes do exame. No caso das unhas, as mesmas devero estar limpas e livres de esmaltes. Mtodo Pesquisa direta e Cultura.

39.

PITIRASE VERSICOLOR ERITRASMA PITIRASE VERSICOLOR - ERITRASMA Seo de Micologia

Instrues de Coleta Raspar as leses na pele com auxlio de uma lmina de bisturi. Material e Conservao para Envio Temperatura ambiente. Transporte Placa de Petri estril.

Informaes Importantes Preferencialmente no utilizar medicao antifngica tpica ou sistmica por 07 dias antes da coleta. Recomenda-se tambm no utilizar creme algum na pele, unhas e cabelos, pelo menos um (01) dia antes do exame. No caso das unhas, as mesmas devero estar limpas e livres de esmaltes. Mtodo Pesquisa direta.

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40.

PNEUMOCYSTIS CARINI PNEUMOCYSTIS CARINI OU JIROVECI Seo de Imunoparasitologia

Instrues de Coleta Jejum de 8 horas para a coleta. Lavar vigorosamente toda a boca com uma escova de dente, escovar os dentes, usar gua em abundncia. No usar pasta, dentifrcias ou anti-spticos bucais. Escarro: 5 a 10 ml colhidos em trs amostras consecutivas, pela manh. Colher preferencialmente em sala aberta e bem arejada. Escarro Induzido: Aps a limpeza os pacientes devem ser submetidos a uma inalao por meio de um nebulizador contendo soluo salina a 3%, por 5 a 15 minutos. O nebulizador dever eliminar 3,1 ml de soluo salina por minuto. As amostras coletadas em tubos estreis devem conter de 2 a 5 ml de volume. As demais amostras devem ser coletadas por Procedimentos Mdicos.

Material e Conservao para Envio Escarro aspirado Aspirado traqueal Lavado brnquico Bipsia dos brnquios Lavado brnquico alveolar Aspirado transtraqueal Aspirado de bipsia pulmonar Lquido pleural. Manter amostras sob refrigerao entre 2C e 8C at 48 horas e protegidas da luz solar. Usar frascos estreis e descartveis. Toda amostra, sujeita a ressecamento, deve ser protegida com o acrscimo de soro fisiolgico estril. Transporte No recipiente devidamente identificado, datado e hermeticamente fechado. Informaes Importantes A amostra dever ser encaminhada junto com o pedido mdico assinado e carimbado. Mtodo Imunofluorescncia direta.

41.

POLIOVRUS ISOLAMENTO VIRAL E PCR POLIOVRUS ISOLAMENTO VIRAL E PCR Diviso de Virologia

Instrues de Coleta Coletar as fezes na quantidade de 3 a 5 g e colocar em frasco identificado com o nome e a data da coleta. Na coleta tardia coletar duas amostras at 60 dias da PFA. Material e Conservao para Envio Fezes. Frasco plstico estril com tampa rosqueada de boca larga. Conservar em freezer a 20C por at 72 horas.

Transporte Colocar a amostra em saco plstico individualizado dentro de outro saco plstico. Transportar em caixa trmica com gelo comum ou reciclvel. Informaes Importantes Acompanha ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII) com dados do paciente. Material enviado ao Instituto Osvaldo Cruz FIOCRUZ, Rio de Janeiro, para diagnstico. Mtodo Isolamento viral e PCR.

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42.

ROTAVRUS, NOROVRUS E ADENOVRUS EIERA ROTAVRUS E ADENOVRUS EIERA Diviso de Virologia

Instrues de Coleta Coletar 5 ml de fezes no atendimento (menos de 48 horas. Material e Conservao para Envio Fezes. Frasco plstico estril com tampa rosqueada de boca larga. Conservar refrigerado a 4 C por no mximo 5 dias.

Transporte Colocar a amostra em saco plstico individualizado dentro de outro saco plstico. Transportar em caixa trmica com gelo comum ou reciclvel. Informaes Importantes Acompanha ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII) com dados do paciente. Material enviado ao Instituto Osvaldo Cruz FIOCRUZ, Rio de Janeiro, para diagnstico. Mtodo ELISA OU EIERA.

43.

RUBOLA ISOLAMENTO VIRAL RUBOLA ISOLAMENTO VIRAL Diviso de Virologia

Instrues de Coleta Swab combinado Nasal/Oral, obtido at 5 dias aps incio dos sintomas. Material e Conservao para Envio Secreo de Nasofaringe. Amostras acondicionadas em tubo de plstico contendo meio de transporte viral, individualizados em sacos plsticos, identificados (nome, n de amostra, data da coleta, forma de coleta). Conservar o material resfriado a 4 C at o envio ao LACEN (enviar imediatamente).

Transporte O transporte dever ser realizado no mesmo dia da coleta, em caixa de isopor com gelo reciclvel. Informaes Importantes Acompanha ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII). Material enviado ao Instituto Osvaldo Cruz FIOCRUZ, Rio de Janeiro, para diagnstico. Mtodo Isolamento Viral.

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44.

SARAMPO

44.1. SARAMPO ISOLAMENTO VIRAL Diviso de Virologia Instrues de Coleta Coletar de 15 a 100 ml de urina em frasco estril, at 5 dias aps o incio do exame. No congelar a amostra. Material e Conservao para Envio Urina. Frasco plstico novo e estril. Conservar em geladeira (4 8C). Transporte Enviar ao LACEN em caixa de isopor com gelo reciclvel. Em no mximo 24 a 48 horas aps a coleta. Informaes Importantes Enviar amostra junto com a ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII). Material enviado ao Instituto Osvaldo Cruz FIOCRUZ, Rio de Janeiro, para diagnstico. Mtodo Isolamento Viral.

44.2. SARAMPO E RUBOLA SOROLOGIA Diviso de Virologia Instrues de Coleta Coletar o sangue sem anticoagulante aps 3 dias do incio dos sintomas. Separar no mnimo 2 ml do soro para sorologia. Material e Conservao para Envio Soro. Tubo plstico estril com tampa de rosca. Conservar em freezer 20C. Transporte Colocar a amostra em saco plstico individualizado dentro de outro saco plstico. Transportar em caixa trmica com gelo comum ou reciclvel. Informaes Importantes Enviar amostra biolgica junto com a ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII). Mtodo Ensaio imunoenzimtico.

45.

SFILIS

45.1.

SFILIS PRIMRIA/CANCRO DURO TREPONEMA PALLIDUM Seo de Bacteriologia

Instrues de Coleta Limpar a superfcie da leso com gaze estril, promover uma irritao sem que haja sangramento, utilizando gaze umedecida com ter, encostando sobre o local. Adicionar uma gota de soluo fisiolgica, aguardar 30 segundos, coletar a gota, coloc-la em lmina e cobrir com lamnula. Material e Conservao para Envio Secreo da leso. Enviar ao LACEN imediatamente.

Transporte Em Placa de Petri. Informaes Importantes O ideal realizar a coleta no laboratrio onde ser realizado o exame. Mtodo Exame fresco.

45

45.2.

SFILIS SOROLOGIA Seo de Imunoparasitologia

Instrues de Coleta Venopuno em tubo seco e limpo ou sistema a vcuo ou LCR (procedimento mdico). Material e Conservao para Envio 2 ml de soro ou 1 ml de LCR. Tubo de ensaio com tampa em 4 a 8C, aps 48 horas congelado a 20C.

Transporte Isopor com gelo. Informaes Importantes Solicitao mdica junto com a ficha de encaminhamento para realizao de exame confirmatrio (ANEXO VI) e Ficha epidemiolgica (ANEXO XXVII) para gestantes e Sfilis congnita. Mtodo Enzimaimunoensaio IgG /IgM, FTA-abs IgG e VDRL.

46.

SNDROME GRIPAL (INFLUENZA A E B, ADENOVRUS VRUS SINCICIAL RESPIRATRIO PARA INFLUENZA 1,2 E 3) IMUNOFLUORESCNCIA INDIRETA

SNDROME GRIPAL (INFLUENZA A E B, ADENOVRUS VRUS SINCICIAL RESPIRATRIO PARA INFLUENZA 1,2 E 3) IMUNOFLUORESCNCIA INDIRETA Diviso de Virologia Instrues de Coleta Aspirado de nasofaringe ou swab combinado Nasal/Oral, obtido at 5 dias do incio dos sintomas. Material e Conservao para Envio Secreo nasofarngea. Amostras acondicionadas em coletor brnquico ou tubo de plstico contendo meio de transporte viral, individualizados em sacos plsticos, identificados (nome, n amostra, data coleta, forma de coleta). Conservar o material resfriado a 4C at o envio ao LACEN (enviar imediatamente). Transporte O transporte dever ser realizado no mesmo dia da coleta, em caixa de isopor com gelo reciclvel. Informaes Importantes Acompanha fichas com dados dos pacientes (ANEXO XXVII). Amostras positivas sero enviadas ao IAL para isolamento do vrus em cultivo celular. Mtodo Imunofluorescncia Indireta.

47.

TINHA NEGRA TINHA NEGRA Seo de Micologia

Instrues de Coleta Raspar as leses na pele com auxlio de uma lmina de bisturi. Material e Conservao para Envio Temperatura ambiente. Transporte Placa de Petri estril.

Informaes Importantes Preferencialmente no utilizar medicao antifngica tpica ou sistmica por 07 dias antes da coleta. Recomenda-se tambm no utilizar creme algum na pele, unhas e cabelos, pelo menos um (01) dia antes do exame. No caso das unhas, as mesmas devero estar limpas e livres de esmaltes. Mtodo Pesquisa direta e Cultura.

46

48.

TOXOPLASMOSE

48.1. TOXOPLASMOSE IMUNOFLUORESCNCIA INDIRETA IgG e IgM Seo de Imunoparasitologia Instrues de Coleta Puno medular de responsabilidade mdica. Material e Conservao para Envio 1 ml de LCR. Tubo de ensaio com tampa em 4 a 8C, aps 48 horas, congelado a -20C. Transporte Isopor com gelo. Informaes Importantes A amostra dever ser encaminhada juntamente com pedido mdico assinado e carimbado. Mtodo Imunofluorescncia Indireta IgG e IgM.

48.2. TOXOPLASMOSE SOROLOGIA Seo de Imunoparasitologia Instrues de Coleta Transporte

Venopuno em tubo seco e limpo ou sistema a Isopor com gelo. vcuo. Informaes Importantes Material e Conservao para Envio A amostra dever ser encaminhada juntamente com 2 ml de soro. pedido mdico assinado e carimbado Aps separao do soro: tubo de ensaio com Mtodo tampa em 4 a 8C, aps 48 horas, congelado a 20C. Enzimaimunoensaio IgG e IgM.

49.

TRICOMICOSE NODULAR AXILAR TRICOMICOSE NODULAR AXILAR Seo de Micologia

Instrues de Coleta Recolher os plos das regies axilares e pubiana com auxlio de uma pina ou tesoura. Material e Conservao para Envio Temperatura ambiente. Transporte Placa de Petri estril.

Informaes Importantes Preferencialmente no utilizar medicao antifngica tpica ou sistmica por 07 dias antes da coleta. Recomenda-se tambm no utilizar creme algum na pele, unhas e cabelos, pelo menos um (01) dia antes do exame. No caso das unhas, as mesmas devero estar limpas e livres de esmaltes. Transporte Pesquisa direta.

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50.

TUBERCULOSE

50.1. TUBERCULOSE BIPSIA, FRAGMENTOS CUTNEOS E DE OSSOS. Seo de Micobactrias Instrues de Coleta Materiais colhidos asspticamente por profissional mdico. Material e Conservao para Envio Fragmentos cutneos e de ossos. Conservar em frasco esterilizado com gua destilada ou salina fisiolgica. Nunca utilizar formol. Enviar o mais rpido possvel ao LACEN, e na impossibilidade de envio imediato conservar sob refrigerao por no mximo 24 horas. Transporte Acondicionar os frascos contendo os fragmentos em sacos plsticos individuais utilizando suportes para mant-los na posio vertical. Colocar em caixa de isopor com gelo observando todas as Normas de Biossegurana. Informaes Importantes Em caso de pleuris o fragmento de pleura, deve ser colhido, sempre que possvel, pois apresenta positividade em cultura notriamente superior ao lquido pleural. Enviar ANEXO XIII. Mtodo a) Cultura: Bipsias, fragmentos cutneos e de ossos Se provenientes de rgos sem microbiota associada fragmentar em vidraria esterilizada e semear diretamente em meio de LweinsteinJensen, reservando uma parte do fragmento para descontaminao, caso seja necessrio. Descontaminar pelo NALC / NaOH 2%.

50.2. TUBERCULOSE INTESTINAL BIPSIA RETAL Seo de Micobactrias Instrues de Coleta Procedimento mdico. Material e Conservao para Envio Bipsia retal. A conduta de escolha a laparatomia, atravs da colonoscopia. Frasco contendo soluo fisiolgica ou gua destilada esterilizados. NUNCA utilizar formol. Conservar temperatura ambiente por no mximo 15 minutos ou sob refrigerao por at 24 horas. Transporte Acondicionar os frascos coletores em sacos plsticos individuais utilizando suportes para mant-los na posio vertical. Colocar em caixa de isopor com gelo observando todas as normas de biossegurana. Informaes Importantes No so mais usadas fezes para o diagnstico de tuberculose intestinal. A pesquisa atravs de fezes indicada apenas em pacientes com AIDS e deve ser criteriosamente avaliada pelo mdico. Enviar ANEXO XIII. Mtodo Cultura: Semeadura em meio de Lweinstein-Jensen aps descontaminao pelo mtodo de NALC / NaOH 2%.

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50.3.

TUBERCULOSE LQUIDOS ASSPTICOS (PLEURAL, ASCTICO, SINOVIAL, PERICRDICO E PERITONEAL). Seo de Micobactrias

Instrues de Coleta Colhidos asspticamente por pessoal mdico, no maior volume possvel e colocado em frasco esterilizado. Material e Conservao para Envio Semear 4 a 5 gotas imediatamente em meio de Lwnstein-Jensen e incubar a 37C. In natura - conservar sob refrigerao por no mximo 24 horas.

Transporte Aps semeadura em Lweinstein-Jensen o transporte deve ser feito em temperatura ambiente. In natura - transportar sob refrigerao. Informaes Importantes Por serem espcimes paucibacilares no so indicados para baciloscopia. Recomenda-se a semeadura direta do material em meio de cultura no momento da colheita para obter maior positividade. Por precauo deve-se semear metade da amostra diretamente em Lweintein-Jensen e conservar a outra metade sob refrigerao para o caso de ocorrer contaminao. Enviar ANEXO XIII. Mtodo Semeadura direta em meio de Lweinstein -Jensen.

50.4.

TUBERCULOSE MENINGEA LCR Seo de Micobactrias

Instrues de Coleta Procedimento mdico. Material e Conservao para Envio LCR. Devem ser coletados de 3 a 5mL de LCR em frasco tipo penicilina esterilizado. Enviar imediatamente ao laboratrio. Transporte Acondicionar os frascos coletores em sacos plsticos individuais utilizando suportes para mantlos na posio vertical em caixa de isopor com gelo observando as normas de biossegurana. Enviar ANEXO XIII.

Mtodo a) Baciloscopia: Na suspeita de meningite tuberculosa o LCR dever ser centrifugado a 2.500 rpm por 30 minutos. Se houver formao de fibrina a lmina para o exame baciloscpico deve ser realizada com essa poro. Colorao de Ziehl-Neelsen. b) Cultura: Centrifugao em frascos esterilizados, com tampa de rosca, por 15 minutos a 3000 x g Desprezar o sobrenadante e semear o sedimento diretamente em meio de Lweinstein-Jensen

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50.5.

TUBERCULOSE MILIAR SANGUE; ASPIRADO DE MEDULA SSEA Seo de Micobactrias

Instrues de Coleta a) Medula ssea: procedimento mdico. b) Sangue: colhido por profissional de laboratrio aps antissepsia adequada com lcool 70% seguido de soluo de iodo povidine ou PVPI 10% ou soluo degermante de clorexidina a 2%. A antissepsia deve ser feita em crculos concntricos, de dentro para fora. Se for usada alguma soluo de iodo a mesma deve ser retirada da pele com lcool 70% logo aps a colheita do material. Tanto o sangue como aspirado de medula ssea devero ser coletados com anticoagulante, de preferncia o Sulfato Polianetol Sdico por ser menos txico para as micobactrias, na proporo de 1,5 mL de SPS a 0,35% para 8,5 mL de sangue. Jamais usar o EDTA.

Material e Conservao para Envio Semear imediatamente em Lweinstein-Jensen e conservar em estufa a 37C ou temperatura ambiente at o envio ao LACEN que deve ser feito o mais rpido possvel. Transporte Aps semeadura transportar em temperatura ambiente. In Natura transportar sob refrigerao 4 C 8C. Informaes Importantes A pesquisa de micobactrias no sangue est indicada em casos de bacteremia, e, depois da medula ssea o material mais indicado para diagnstico em pacientes com Sndrome da Imunodeficincia Adquirida. Enviar ANEXO XIII. Mtodo Cultura: Semeadura direta em meio Lweinstein Jensen.

50.6.

TUBERCULOSE PULMONAR ESCARRO DE EXPECTORAO ESPONTNEA Seo de Micobactrias

Instrues de Coleta As amostras devem ser colhidas em local aberto, de preferncia ao ar livre ou bem ventilado. Coletar sempre duas amostras. A primeira no momento da consulta, a segunda, no dia seguinte ao levantar. Orientaes ao paciente: Ao despertar pela manh, lavar bem a boca, inspirar profundamente, reter o ar nos pulmes por um instante e lan-lo fora pelo esforo da tosse. Repetir a operao por trs vezes. Evitar colher saliva. Material e Conservao para Envio Escarro de Expectorao - mnimo de 02 amostras. O material deve ser coletado em potes plsticos, transparentes e de boca larga. Conservar em geladeira por at 07 dias ou em temperatura ambiente por 24 horas no mximo.

Transporte Manter sob refrigerao; Proteger da luz solar; Acondicionar de forma adequada para que no haja derramamento. Informaes Importantes Os frascos contendo as amostras devem ser firmemente tampados e em seguida colocados em sacos plsticos individuais com a tampa para cima. Usar suportes para conserv-los na posio vertical. Enviar ANEXO XIII. Mtodo a) Baciloscopia: colorao de Ziehl-Neelsen. b) Cultura: semeadura em meio de Lweinstein Jensen aps descontaminao pelo NALC/NaOH 2% ou semeadura em meio de Ogawa-Kudoh aps descontaminao com NaOH 4%, por 2 minutos no mximo.

50

50.7.

TUBERCULOSE PULMONAR ESCARRO DE EXPECTORAO INDUZIDA Seo de Micobactrias

Instrues de Coleta Amostra obtida aps a realizao de nebulizao com soluo salina hipertnica (5 mL de NaCl 3%), durante no mnimo 5 e no mximo 20 minutos, preferencialmente com nebulizador ultra-snico. Material e Conservao para Envio Expectorao induzida, mnimo de 02 amostras. Conservar sob refrigerao por at 24 horas.

Transporte Acondicionar os frascos coletores em sacos plsticos individuais utilizando suportes para mant-los na posio vertical. Colocar em caixa de isopor com gelo. Informaes Importantes Indicar a forma de obteno da amostra para que a mesma no seja confundida com saliva. Enviar ANEXO XIII. Mtodo Baciloscopia Concentrada: Colorao de Ziehl Neelsen aps centrifugao com hipoclorito de sdio a 5%. Cultura: Semeadura em meio de LweinsteinJensen aps descontaminao pelo mtodo de NALC/NaOH 2%.

50.8.

TUBERCULOSE PULMONAR LAVADOS: BRNQUICO, BRONCOALVEOLAR, TRAQUEOBRNQUICO Seo de Micobactrias

Instrues de Coleta So procedimentos mdicos que induzem a expectorao por vrios dias. Recomenda-se a colheita sucessiva destes materiais. Material e Conservao para Envio Lavados brnquicos, broncoalveolar, traqueobrnquicos. Quantidade de amostras: enquanto houver expectorao. Devem ser conservados sob refrigerao e processados de preferncia at 4 horas aps a colheita.

Transporte Acondicionar os frascos contendo o material biolgico em sacos plsticos individuais utilizando suportes para mant-los na posio vertical. Colocar em caixa de isopor com gelo observando todas as normas de biossegurana. Informaes Importantes Estas amostras devem ser indicadas para cultura. Enviar ANEXO XIII. Mtodo Baciloscopia: Colorao de Ziehl Neelsen aps concentrao por centrifugao. Cultura: Semeadura em meio de LweinsteinJensen aps descontaminao pelo NALC/NaOH 2%.

51

50.9.

TUBERCULOSE PULMONAR LAVADO GSTRICO Seo de Micobactrias

Instrues de Coleta A obteno deste espcime requer hospitalizao, pois colhido logo que o paciente acorda, antes mesmo de se levantar e comer. O procedimento realizado com sonda nasogstrica fina, injetando 10 a 15 mL de soro fisiolgico, e aps 30 minutos, feita a lavagem gstrica. Material e Conservao para Envio Colher no mnimo 02 amostras em dias consecutivos. Processar imediatamente aps a colheita. Se no for possvel o processamento imediatamente aps a colheita, coletar em frasco estril contendo soluo tampo de carbonato de sdio a 10%, cedido pelo LACEN ou, agregar carbonato de sdio, na proporo de 1 mg /1 ml de lavado.

Transporte Acondicionar os frascos contendo o material biolgico em sacos plsticos individuais utilizando suportes para mant-los na posio vertical. Colocar em caixa de isopor com gelo observando todas as normas de biossegurana. Informaes Importantes O carbonato de sdio usado com a finalidade de neutralizar a ao do suco gstrico sobre os bacilos. A no conservao adequada da amostra acarreta resultados falsos negativos na cultura. Agendar a coleta prviamente com o LACEN para que o laboratrio possa se organizar para processar o material imediatamente; Enviar ANEXO XIII. Mtodo a) Baciloscopia: Colorao de Ziehl Neelsen aps centrifugao. b) Cultura: Semeadura em meio de LweinsteinJensen aps descontaminao pelo NALC/NaOH 2%.

50.10. TUBERCULOSE PUS PROVENIENTE DE CAVIDADE ABERTA Seo de Micobactrias Instrues de Coleta Colher atravs de swab esterilizado. Material e Conservao para Envio Aps a colheita os swabs devem ser conservados em tubos de ensaio de aproximadamente 15 cm de altura, com tampa de rosca contendo 1 mL de gua destilada ou soluo salina esterilizados. Na impossibilidade de envio imediato ao LACEN conservar sob refrigerao por no mximo 24 horas. Transporte Acondicionar os tubos contendo os swabs em sacos plsticos individuais utilizando suportes para mant-los na posio vertical. Colocar em caixa de isopor com gelo observando todas as normas de biossegurana. Informaes Importantes Se for solicitado mais de um tipo de exame colher tantos swabs quanto forem as solicitaes. As baciloscopias devem ser realizadas no laboratrio local. Enviar ANEXO XIII. Mtodo a) Baciloscopia: Colorao de Ziehl-Neelsen b) Cultura: Semeadura em Lweinstein Jensen aps descontaminao pelo NALC.

52

50.11. TUBERCULOSE PS PROVENIENTE DE CAVIDADE FECHADA Seo de Micobactrias Instrues de Coleta Quando proveniente de cavidade fechada o pus colhido atravs de puno por pessoal mdico. Deve ser enviado imediatamente ao laboratrio em frascos esterilizados. Se for solicitada a baciloscopia e cultura, dividir em 02 frascos. Material e Conservao para Envio Semeadura imediata em meio de LweinsteinJensen ou conservar sob refrigerao at o envio ao LACEN, que no deve ultrapassar 24 horas. Transporte Aps semeadura em LweinsteinJensen conservar em estufa 37C. In Natura conservar sob refrigerao, 4 a 8 C. Informaes Importantes Se houver solicitao de baciloscopia a mesma deve ser realizada no laboratrio local. Enviar ANEXO XIII. Mtodo Baciloscopia: Colorao de Ziehl-Neelsen. Cultura: Semeadura direta em meio de LweinsteinJensen conservando metade da amostra em geladeira para descontaminao, quando necessrio.

50.12. TUBERCULOSE RENAL - URINA Seo de Micobactrias Instrues de Coleta Colher a 1 urina do dia (mnimo de 40 mL), aps assepsia genital adequada com gua e sabo, em frasco estril, de boca larga, com tampa de rosca (No desprezar o primeiro jato). Material e Conservao para Envio Mnimo de 03 e mximo de 06 amostras em dias consecutivos. Conservar temperatura ambiente por um mximo 2 horas ou sob refrigerao 4C a 8C por at 24 horas. Transporte Tampar bem os frascos coletores, acondicion-los em sacos plsticos individuais utilizando suportes para mant-los na posio vertical. Colocar em caixa de isopor com gelo observando todas as normas de biossegurana. Informaes Importantes Orientar o paciente para no desprezar o 1 jato de urina porque justamente nesta poro que se encontram os bacilos. Independente do resultado da baciloscopia, SEMPRE realizar a cultura. Enviar ANEXO XIII. Mtodo Baciloscopia: Colorao de Ziehl Neelsen aps concentrao por centrifugao. Cultura: Semeadura em meio de LweinsteinJensen aps descontaminao pelo NALC / NaOH 2%.

53

50.13. TUBERCULOSE TESTE DE SENSIBILIDADE Seo de Micobactrias Instrues de Coleta As amostras devem ser colhidas conforme as orientaes j descritas e indicadas para Cultura e Teste de Sensibilidade. Devem vir acompanhadas do formulrio de solicitao devidamente preenchido. Material e Conservao para Envio Todas as amostras descritas anteriormente. Transporte Aps semeadura em LweinteinJensen ou Ogawa Kudoh transportar temperatura ambiente. Amostras in natura transportar sob refrigerao. Informaes Importantes O Teste de Sensibilidade est indicado em casos de retratamento aps falncia bacteriolgica ao esquema I; recidiva da doena; renicio aps abandono de tratamento; suspeita de resistncia primria; contatos de caso de tuberculose resistente; vigilncia epidemiolgica da TBMDR. Enviar ANEXO XIII. Mtodo Mtodo das Propores modificado conforme descrito por Canetti et al, 1969

51.

ZIGOMICOSE ZIGOMICOSE Seo de Micologia

Instrues de Coleta Zigomicose Sistmica: obter material por meio de aspirado da regio naso-orbitria e em caso de doena pulmonar, colher escarro. Pode-se colher tambm o sangue; Zigomicose Subcutnea: o material obtido cirurgicamente. Material e Conservao para Envio Enviar o mais rpido ao laboratrio, caso contrrio manter sob refrigerao (4C a 8C). A bipsia dever ser mantida em salina.

Transporte Frasco estril. Informaes Importantes No caso de sangue, considerar as informaes relatadas em CANDIDASE Sistmica e o restante dos espcimes clnicos em frasco estril. Transporte Pesquisa direta.

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BIBLIOGRAFIA CONSULTADA

BRASIL. Ministrio da Sade. Agncia Nacional de Vigilncia em Sade. Manual de Microbiologia Clnica para o Controle de Infeco em Servio de Sade (Mdulo 6): Deteco e Identificao de Micobactrias de Importncia Mdica. 1 Ed. 2004.

BRASIL. Ministrio da Sade. Centro de Referncia Helio Rocha. Manual de Bacteriologia da Tuberculose. 2. Ed. Rio de Janeiro, 1994.

BRASIL. Ministrio da Sade. Controle da esquistossomose operaes de campo, 1995

BRASIL. Ministrio da Sade. Controle de Vetores, procedimentos de segurana. Ministrio da Sade, Braslia; 2001. 1 edio, 204p.

BRASIL. Ministrio da Sade. Dengue: Instruo para pessoal de combate ao vetor manual de normas tcnicas. Ministrio da Sade, Braslia. 2001; 84p.

BRASIL. Ministrio da Sade. Diretrizes nacionais para a preveno e controle de epidemias de Dengue. Ministrio da Sade, Braslia. 1 edio, 2009. 157 p.

BRASIL. Ministrio da Sade. Guia de bolso Doenas infecciosas e parasitrias. Ministrio da Sade, Braslia. 7 edio; 2008, 372p.

BRASIL. Ministrio da Sade. Guia de vigilncia epidemiolgica. Ministrio da Sade, Braslia. 2005. 815p.

BRASIL. Ministrio da Sade. Manual de controle da Leishmaniose Tegumentar Americana, 2005.

BRASIL. Ministrio da Sade. Manual de normas sobre organizao e funcionamento de laboratrios de diagnstico da Doena de Chagas, 1980. 124 p.

BRASIL. Ministrio da Sade. Manual de vigilncia de epizootias em primatas no-humanos, 2005.

BRASIL. Ministrio da Sade. Manual de vigilncia e controle da Leishmaniose visceral, 2003.

55

BRASIL. Ministrio da Sade. Manual de vigilncia epidemiolgica de Febre Amarela, 1999.

BRASIL. Ministrio da Sade. Secretaria de Vigilncia em Saude. Departamento de Vigilncia Epdemiolgica. Laboratorial da Tuberculose e Outras Micobactrias. Manual Nacional de Vigilncia. Braslia-DF 2008.

BRASIL. Ministrio da Sade. Secretaria de Vigilncia em Sade. Programa Nacional de DST e Aids. Prevalncia e Freqncias relativas de Doenas Sexualmente Transmissveis (DST) em Populaes Selecionadas de Seis Capitais Brasileiras. Braslia: Editora MS, 2008.

BRASIL. Ministrio da Sade. Vigilncia e controle de moluscos de importncia epidemiolgica, 2008.

Consoli RAGB, Loureno-de-Oliveira R. Principais mosquitos de importncia epidemiolgica no Brasil. Rio de Janeiro: Fiocruz; 1994.

CRIESP - Cientia Virtus. Manual de Procedimentos. So Paulo: Lemos, 2008.

Fiocruz. Atlas dos vetores da Doena de Chagas no Brasil. Rio de Janeiro, RJ. Volumes I, II e III, 1998.

Forattini OP. Culicidologia Mdica. EDUSP: So Paulo, 2002.

Fundacentro. 2002. Programa de Proteo Respiratria; Recomendaes; Seleo e Uso de Respiradores. Mauricio Torloni Ministrio do Trabalho e Emprego, Braslia. 1 edio, 127p.

INSTITUTO HERMES PARDINI LTDA. Manual de Exames e Servios 2006 / 2007. Belo Horizonte - MG: Lastro, 2006.

OPAS/OMS. Manual para borrifao de inseticida de efeito residual para controle de vetores. 2006. 53p.

OPS, 2003. Zoonosis y enfermedades transmisibles comunes al hombre y a los animales. Washington, USA. Volumes I, II e III.

OPUSTIL, Carmem Paz; ZOCCOLI, Cssia Maria; TOBAUTI, Nina Reiko. Procedimentos Bsicos em Microbiologia Clnica. 2. Ed. So Paulo: Sorvier, 2004. 340 p.

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ANEXOS

ANEXO I .........AVALIAO DO ESPECTRO DE GOTAS

1/4

ANEXO II........AVALIAO DO ESPECTRO DE GOTAS LEITURA DE GOTAS

1/4

ANEXO III ......BOLETIM DE CAPTURA DE ARTRPODES

1/4

ANEXO IV ......DETECO DO DNA PR-VIRAL EM CRIANAS NASCIDAS DE MES SOROPOSITIVAS E GESTANTES COM SOROLOGIA INDETERMINADA NO BRASIL.

2/4

1/4

ANEXO V........FICHA DE ENCAMINHAMENTO DE MATERIAL PARA LEISHMANIOSE CANINA

Regional: _____________________________ Municpio: ______________________________ Data de entrada no LACEN: ____________ Nome ou N do co Proprietrio (Endereo) Dados Clnicos Leso de lceras Miise agresso Data da coleta RESULTADO ELISA IFI

Procedncia

Data: _____/_____/_____

Responsvel Tcnico: __________________________Responsvel do Laboratrio: ________________________

1/1

ANEXO VI ......FICHA DE ENCAMINHAMENTO EXAME CONFIRMATRIO

PARA

REALIZAO

DE

1/1

ANEXO VII .....FICHA DE LEISHIMANIOSE CANINA.

1/1

ANEXO VIII....FICHA DE PESQUISA DE FLEBOTOMNEOS BOLETIM DIRIO DE CAMPO

1/2

ANEXO IX ......FICHA DE SOLICITAO DE EXAMES GAL.

2/2

1/2

ANEXO X........FICHA QUANTIFICAO DE CIDO NUCLICO CARGA VIRAL HBV.

2/2

1/1

ANEXO XI ......FORMULRIO DE COLINESTERASE I (COLIN I)

RELAO DE EXAMES DE COLINESTERASE SANGUINEA - CONTROLE DE REALIZAO

Secretaria de Estado da Sade

MUNICPIO:
T E S T E (1 )

PERODO:
IN T E R P R E T A O (5 )

ANO:
IN T E R P R E T A O (5 )

NOME DO SERVIDOR

INSET. UTILIZADO (2)

USO DE EPI

RESULTADO INCIO (4)

RES. DA REPETIO (4) ATIVIDADE INIBIO

MOTIVO ATIVIDADE INIBIO SIM NO (3)

RECOMENDAO CHEFIA

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
(1) Tipo de Teste: 1 = Rotina; 2 = admisso; 3 = Retorno; 4 = Demisso (2) Inset. utilizado: 1=Temefs; 2=Malathion; 3=Fenitrothion; 4=Pirimifs; 5=Carbanato (5) Interpretao: 1 = Normal; 2 = Alterado (3) Motivo do no uso do EPI: 1 = Incomoda/Perdeu; 2 = No fornecido; 3 = Valid. vencida (4) Transformar o % de atividade em % de inibio

Responsvel pelo exame

Local

Data

1/1

ANEXO XII .....FORMULRIO DE ENVIO DE LMINAS PARA CONTROLE DA QUALIDADE.

1/1

ANEXO XIII....FORMULRIO DE SOLICITAO DE CULTURA E TESTE DE SENSIBILIDADE PARA MICOBACTRIAS

1/1

ANEXO XIV....FORMULRIO PARA SOLICITAO GENOTIPAGEM HIV FORMULRIO A

DE

EXAMES

DE

1/1

ANEXO XV .....FORMULRIO PARA SOLICITAO DE IDENTIFICAO DE MICOBACTRIAS NO TUBERCULOSAS

1/1

LABORATRIO DE SADE PBLICA DR. GIOVANNI CYSNEIROS ANEXO XVI ....INSTRUES DE COLETA PARA PESQUISA DIRETA PARA LTA.

Coleta de material para demonstrao direta do parasito Visando obter uma amostra vivel para um diagnstico confivel, alguns cuidados so necessrios: o primeiro deles o preparo do local de onde ser coletado o material (lceras recentes so mais ricas em parasitos). Deve ser feita uma limpeza vigorosa do local da leso com gua e sabo, retirando-se resduos de medicamentos ou outras substncias, seguida de antissepsia com lcool a 70%. Quando necessrio, pode-se fazer um pequeno boto anestsico com lidocana 1 ou 2%. Detalhamento da tcnica a) O esfregao realizado por escarificao da borda interna da lcera ou da superfcie de leso fechada, utilizando-se lminas de bisturi estreis ou estilete. (Figura 1).

Figura 1

Figura 2

b) A puno aspirativa pode ser realizada aps injeo de 3mL de soluo salina estril na borda da leso ou linfonodo, utilizando-se uma seringa de 5mL e agulha 25x8. c) Aps a exciso cirrgica, a tcnica de aposio em lmina (tambm denominada imprint ou touch preparation) pode ser realizada por meio da delicada compresso de fragmento de tecido, obtido por bipsia, sobre uma lmina de vidro. Uma boa execuo da tcnica requer que o fragmento seja previamente banhado em soluo salina estril e o excesso de sangue e lquidos absorvidos em gaze ou papel de filtro. d) O material obtido por qualquer das tcnicas deve ser distendido em lminas de microscopia previamente limpas, desengorduradas e secas. Se possvel, empregar lminas de borda fosca para melhor identificao do material. (Figura 2) e) A lmina com o esfregao ou imprint deve ser previamente fixada com cerca de 3mL de metanol durante trs minutos, visando preservar as estruturas celulares. Aps esse tempo, as lminas so deixadas na posio vertical para secarem.
Misso: Participar das aes de vigilncia em sade, realizando anlises laboratoriais com qualidade, coordenando a Rede Estadual de Laboratrios e gerando informaes para a melhoria da sade pblica.
Av. Contorno n 3.556 Jardim Bela Vista Goinia-GO CEP: 74.853-120 Fone: 62 3201 3888 Fax: 62 3201 3884 lacen.dirgeral@saude.go.gov.br

1/1

ANEXO XVII ..LAUDO MDICO PARA EMISSO DE BPA I CONTAGEN DE LINFSITOS T CD4/CD8.

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ANEXO XVIII ..........LAUDO MDICO PARA EMISSO DE BPA QUANTIFICAO DE CIDO NUCLICO CARGA VIRAL DO HIV.

1/1

ANEXO XIX.............LAUDO PARA SOLICITAO/AUTORIZAO PROCEDIMENTO AMBULATORIAL HCV MOLECULAR

Sistema nico de Sade Ministrio da Sade

DE

LAUDO PARA SOLICITAO/AUTORIZAO DE PROCEDIMENTO AMBULATORIAL

2 - CNES

fls.1/2

IDENTIFICAO DO ESTABELECIMENTO DE SADE (SOLICITANTE)

1 - NOME DO ESTABELECIMENTO DE SADE SOLICITANTE

IDENTIFICAO DO PACIENTE
3 - NOME DO PACIENTE 4 - N DO PRONTURIO

5 - CARTO NACIONAL DE SADE (CNS)

6 - DATA DE NASCIMENTO Masc.

7 - SEXO Fem.

8 -RAA/COR

9 - NOME DA ME
DDD

10 - TELEFONE DE CONTATO
N DO TELEFONE

11 - NOME DO RESPONSVEL
DDD

12 - TELEFONE DE CONTATO
N DO TELEFONE

13 - ENDEREO (RUA, N, BAIRRO)

14 - MUNICPIO DE RESIDNCIA

15 - CD. IBGE MUNICPIO

16 - UF

17 - CEP

PROCEDIMENTO(S) SOLICITADO(S) PROCEDIMENTO SOLICITADO

18 - CDIGO DO PROCEDIMENTO PRINCIPAL 19 - NOME DO PROCEDIMENTO PRINCIPAL 20 - QTDE.

PROCEDIMENTO(S) SOLICITADO(S) PROCEDIMENTO(S) SECUNDRIO(S)

21 - CDIGO DO PROCEDIMENTO SECUNDRIO 22 - NOME DO PROCEDIMENTO SECUNDRIO 23 - QTDE.

24 - CDIGO DO PROCEDIMENTO SECUNDRIO

25 - NOME DO PROCEDIMENTO SECUNDRIO

26 - QTDE.

27 - CDIGO DO PROCEDIMENTO SECUNDRIO

28 - NOME DO PROCEDIMENTO SECUNDRIO

29 - QTDE.

30 - CDIGO DO PROCEDIMENTO SECUNDRIO

31 - NOME DO PROCEDIMENTO SECUNDRIO

32 - QTDE.

33 - CDIGO DO PROCEDIMENTO SECUNDRIO

34 - NOME DO PROCEDIMENTO SECUNDRIO

35 - QTDE.

JUSTIFICATIVA DO(S) PROCEDIMENTO(S) SOLICITADO(S)

36 - DESCRIO DO DIAGNSTICO 37-CID10 PRINCIPAL 38-CID10 SECUNDRIO 39-CID10 CAUSAS ASSOCIADAS

40 - OBSERVAES

SOLICITAO
41 - NOME DO PROFISSIONAL SOLICITANTE 42-DATA DA SOLICITAO
45-ASSINATURA E CARIMBO (N REGISTRO DO CONSELHO)

43 - DOCUMENTO ( ) CNS ( ) CPF

44 - N DOCUMENTO (CNS/CPF) DO PROFISSIONAL SOLICITANTE

AUTORIZAO
46 - NOME DO PROFISSIONAL AUTORIZADOR 47 - CD. RGO EMISSOR 52 - N DA AUTORIZAO (APAC)

48 - DOCUMENTO ( ) CNS ( ) CPF

49 - N DOCUMENTO (CNS/CPF) DO PROFISSIONAL AUTORIZADOR

50-DATA DA AUTORIZAO

51 - ASSINATURA E CARIMBO (N DO REGISTRO DO CONSELHO)

53 - PERODO DE VALIDADE DA APAC a

IDENTIFICAO DO ESTABELECIMENTO DE SADE (EXECUTANTE)

54 NOME FANTASIA DO ESTABELECIMENTO DE SADE EXECUTANTE
VisioDocument

55 - CNES

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ANEXO XX ..............MANUAL DE COLETA DA QUANTIFICAO DO RNA VIRAL DO HIV-1 CARGA VIRAL

Manuseie todas as amostras como potencialmente infectantes.

INSTRUES PARA COLETA DA AMOSTRA E PREPARAO DO PLASMA: 1. Instrues de Coleta No necessrio qualquer preparao especial ou jejum do paciente para a coleta da amostra para a realizao do exame de carga viral. O manuseio correto das amostras imprescindvel para proteger o RNA viral do HIV-1 de degradao. Proceda a coleta do sangue total observando as precaues universais relativas puno venosa. Colete sempre 2(dois) tubos de 5 ml contendo EDTA por paciente (EDTA K3 ou K2 tampa de cor lils). Em recm-nascidos, caso haja necessidade dever ser utilizado tubos peditricos. OBS: No usar tubos de EDTA com gel. Nunca utilizar tubos de coleta reciclados. O sangue total colhido dever se conservado no tubo original antes da centrifugao: Por at 6 horas a temperatura ambiente (15 C at 25 C); Ou, mximo 24h, entre 2C a 8C (geladeira) O material utilizado para os testes de Carga Viral o PLASMA. 2. Preparao do Plasma Para obter o plasma, centrifugue os dois tubos de sangue total a 100 1300x G (padronizar a fora para centrifugao: G, rpm, ou RCF) Em seguida transfira o plasma para tubos de polipropileno, com tampa de rosca (ou em microtubos de polipropileno tipo eppendorf) livres de enzimas (RNAses ou DNAses), em alquotas de no mnimo 1100 1200 L com auxlio de uma ponteira com barreiras livres enzimas (RNAses ou DNAses), sem ressuspender as clulas. Se no for possvel fazer o teste no mesmo dia, armazene o plasma. OBS: no submeta o plasma a processos de filtrao ou centrifugao adicionais com o intuito de diminuir a turbidez. Separao s poder ser feita aps treinamento no LACEN. 3. Armazenamento do PLASMA O plasma dever ser conservado e/ ou armazenado: Por at 5 dias em temperatura entre 2C a 8 C (geladeira);

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Ou, perodo superior a 5 dias, prolongado ou indeterminado em temperatura entre -60 C a -80 C . Devem ser evitados os mltiplos congelamentos-descongelamento. Desta forma, recomenda-se que a amostra seja estocada em alquotas, com quantidade suficiente para a realizao do teste (1100 1200 L), evitando assim o processo de congelamento/descongelamento da amostra.

4. Transporte da Amostra Biolgica O transporte de amostra potencialmente infectante deve seguir normas nacionais e internacionais para envio e transporte de material biolgico, de acordo com as respectivas vias de transportes. Devem ser mantidas, obrigatoriamente, todas as caractersticas de constituio qumica e biolgica. Manter e preservar a amostra: temperatura controlada. No permitir aes de deteriorao. No permitir a desnaturao protica e GENMICA. Para o transporte da amostra (sangue total ou plasma) do ponto coletor ao laboratrio executor, a mesma dever ser acondicionada em caixa trmica com isolamento em poliuretano lavvel utilizada apenas para transporte de material biolgico tendo, tampa fixa com trava, ala de suporte, material atxico, de preferncia com termmetro de mxima e mnima para monitorar a temperatura. OBS: Nunca enviar amostras s sextas-feiras, sbados e domingos ou vsperas de feriados, sem autorizao do laboratrio executor.

4.1.Sangue Total Caso o procedimento no seja feito no local de coleta, os tubos com sangue total devero ser transportados ao laboratrio executor: No ultrapassando s 6 horas a temperatura ambiente (15C at 25C). Ou mximo 24h, entre 2C a 8 C (acondicionada com gelo reciclvel suficiente para manter os tubos com sangue total em temperatura controlada baixa temperatura). OBS: No acondicione o sangue total diretamente em contato com o gelo reciclvel, para evitar hemlise. NUNCA CONGELE O SANGUE. 4.2.Plasma Caso a separao do plasma seja feita no local de coleta, o mesmo deve ser transportado ao ponto executor o mais rpido possvel: Em temperatura 2C at 8C (temperatura de geladeira).

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OBS: gelo reciclagem suficiente para manter o plasma em temperatura controlada 2 C a 8 C (temperatura de geladeira). Sempre que possvel recomenda-se o transporte em gelo seco. OBS.: Contaminaes Para uma tcnica de amplificao de cidos nuclicos o termo contaminao pode assumir alguns sentidos diferentes: 1 Contaminao do tcnico pela amostra Toda e qualquer amostra de fluidos biolgicos deve ser tratada como de potencial risco infeccioso. 2 Contaminaes de uma amostra para outra No caso de uma tcnica de amplificao, cuidados para no respingar amostras nas luvas, nas bancadas e em qualquer material, so essenciais. Todo material utilizado tem que ser novo e estril, uma vez a menor contaminao por outra amostra pode ser amplificada e gerar um resultado falso. 3 Contaminaes por enzimas degradantes do material a ser analisado Uma das funes do DNA, nas clulas vivas, codificar a seqncia das protenas. A ligao entre o cdigo gentico e a protena funcionante o RNA. Para controlar a existncia do RNA, as clulas possuem uma enzima com funo especifica de degradar o RNA, a Rnase. Assim, a existncia e degradao da molcula de RNA tem que ser controlada de alguma forma pois, enquanto o RNA estiver presente no citoplasma celular, aquela clula produzir a protena codificada por ele continuamente. Nas clulas vivas, esta enzima fica armazenada de forma inativa at que seja necessria sua utilizao. Quando uma clula morre e se rompe, essa enzima se espalha na amostra, degradando o RNA, consequentemente, interferindo no resultado final dos testes para quantificao do RNA viral. Nos testes sorolgicos, isso no interfere mas, em um teste que visa detectar e quantificar o RNA viral, esse fato assume uma grande importncia. Assim sendo, todo o material a ser ulitizado deve ser sempre novo, estril e livres de enzimas (RNAses ou DNAses). No correto encostar as mos sem luvas limpas em qualquer material. Uma vez de luvas, deve-se evitar qualquer contato com a pele e cabelos para evitar contaminao das luvas e dos materiais a serem utilizados por Rnases provenientes de clulas rompidas presentes. Sempre que se faa necessrio troque as luvas.

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ANEXO XXI .............NORMAS PARA O ATENDIMENTO DOS EXAMES DE BIOLOGIA MOLECULAR PARA HEPATITE C

Normas para atendimento dos exames: PCR qualitativo, PCR quantitativo e Genotipagem para o vrus da Hepatite C.

Requisitos necessrios para atendimento ao paciente portador do vrus C:

a) Cpia da identidade; b) Cpia do CPF; c) Cpia do Comprovante de endereo; d) Carto SUS; e) Preenchimento de todos os campos da APAC no campo de solicitao, dever conter o cdigo especifico de cada exame como a seguir:

PCR qualitativo 0202030059; PCR quantitativo 0202031080; Genotipagem 0202030210.

f) Assinatura, CPF e carimbo do mdico responsvel; g) Cpia do resultado da sorologia do Anti-HCV.

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ANEXO XXII ...........PARECER DO MDICO GENOTIPAGEM HIV FORMULRIO B

DE

REFERNCIA

EM

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ANEXO XXIII ..........PORTARIA N 2472, DE 31 DE AGOSTO DE 2010

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ANEXO XXIV ..........PROTOCOLO DE COLETA, ACONDICIONAMENTO E TRANSPORTE DE AMOSTRAS CLNICAS PARA CULTURA DE BACTRIAS AERBIAS

1.

LIQUOR

1.1. Recomendaes gerais A puno de lquor um procedimento de urgncia, invasivo e que deve ser realizado no hospital por um profissional treinado. A paramentao deve ser adequada e realizada sob procedimentos de biossegurana. A puno lombar deve ser realizada preferencialmente antes da terapia antimicrobiana. 1.2. Material necessrio KIT MENINGITE CRIANA

Fichas de identificao da espcime / paciente. Duas (2) lminas de vidro para microscopia. Frasco tipo penicilina lacrado com gar chocolate. Dois (2) frascos tipo penicilina esterilizados com tampa de borracha lacrados. Seringas e agulhas esterilizadas. Gaze esterilizada, algodo, lcool 70%, povidine 10% ou lcool iodado. Lata de alumnio e vela. Etiquetas.

1.3. Coleta e semeadura Preparar todo o material necessrio, retirando o meio de cultura da geladeira para adquirir a temperatura ambiente e fazendo identificao dos frascos adequadamente. Preparar o paciente. Realizar a anti-sepsia adequada da pele do paciente, no local da puno com lcool 70%, PVPI ou lcool iodado. Puno lombar volume mnimo de 5 ml de lquor. Gotejar imediatamente 5 a 10 gotas da amostra no tubo ou frasco contendo o gar chocolate, e 1 gota em cada lmina de vidro. Manter a cadeia assptica. Dividir o restante da amostra coletada em 2 frascos esterilizados (teste do ltex e citoqumico). Obs: Os frascos para teste do ltex e citoqumico devem ser mantidos a temperatura ambiente por at 3 horas ou a 4 C quando o tempo exceder 3 horas.

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Colocar o frasco com gar chocolate j semeado com o lquor dentro da lata de alumnio com vela acesa e algodo umedecido. Fechar a lata hermeticamente. Manter a lata de alumnio a temperatura ambiente ou em estufa a 37 C por no mximo 18 horas. Obs: As amostras de lquor destinadas para a anlise microbiolgica NO PODEM ser armazenadas na GELADEIRA. 1.4. Transporte Encaminhar a amostra, as lminas coradas e no coradas, para controle de qualidade do exame bacterioscpico, e o frasco com gar chocolate semeado o mais rpido possvel para o LACEN. Estes devem estar embalados em saco plstico e enviados em caixa de isopor sem gelo. 2. SANGUE

2.1. Recomendaes gerais Procedimento de urgncia. Paramentao adequada e realizao dos procedimentos de biossegurana. Recomenda-se que a coleta do sangue seja realizada preferencialmente antes da terapia antimicrobiana. Recomenda-se que a coleta do sangue seja por puno venosa (evitar coletar via cateter). Puno arterial no aumenta a positividade da hemocultura. Cuidado ao fazer a anti-sepsia, se no for feita de forma adequada, pode haver o isolamento de microrganismos contaminantes 2.2. Material necessrio

Frasco BHI + SPS

Frasco BACTEC

Fichas de identificao da espcime/paciente. Seringas e agulhas descartveis. Escalpe n 2. Garrote. Gaze esterilizada, algodo, lcool 70% e povidine a 10%. Frasco caldo BHI (RN, criana ou adulto) ou frasco para hemocultivo BACTEC (criana ou adulto automao). Etiquetas.

2.3. Coleta e Semeadura

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Preparar todo o material necessrio, retirando o meio de cultura da geladeira para adquirir a temperatura ambiente e fazendo a identificao dos frascos adequadamente (nome do paciente, data e hora da puno e nmero da amostra). Preparar o paciente. Desinfetar com lcool 70% a tampa do frasco contendo o caldo de cultura e colocar uma gaze ou algodo embebido em lcool 70% protegendo-a. Escolher a veia adequada, garrotear e realizar a anti-sepsia da pele do paciente, primeiramente com algodo embebido em lcool 70% e em movimentos concntricos (de dentro para fora), em seguida com algodo embebido em povidine 10% tambm em movimentos concntricos. Deixar secar e puncionar sem apalpar. Em criana coletar de 1-3 mL de sangue e inocular 2mL no frasco contendo 20mL de caldo BHI ou inocular 3mL de sangue em frasco BACTEC Pds Plus (criana automao); em adulto coletar 2,5 - 5mL de sangue e inocular 5mL no frasco contendo 50mL de BHI ou inocular 8 - 10mL de sangue em frasco BACTEC (adulto automao); e em recm-nascidos coletar 1mL de sangue e inocular no frasco contendo 10mL de caldo BHI ou inocular 1 - 3mL de sangue em frasco BACTEC Pds Plus (criana - automao). Homogenizar imediatamente para evitar coagulao. Manter o frasco inoculado a temperatura ambiente (BACTEC ou F rasco caldo BHI) ou incubar em estufa a 37 C por no mximo 18 horas (Frasco caldo BHI). Obs: Os frascos semeados com o sangue destinado para a anlise microbiolgica NO PODEM ser armazenados em GELADEIRA. 2.4. Sugesto para o nmero de amostras a ser coletadas
Condio Clnica Protocolo

2 a 3 hemoculturas consecutivas, preferencialmente antes da terapia Sepse, osteomielite, meningite, artrite, antimicrobiana. Coletar as amostras sem pneumonia e pielonefrite necessidade de intervalo intercalando os stios da puno. 2 a 3 hemoculturas com intervalo de 15 a Febre de origem desconhecida, endocardite ou 20 minutos entre as coletas. Se as culturas outra bacteriemia ou fungemia contnua forem negativas nas primeiras 24 horas, repetir o procedimento. De preferncia, utilizar frascos com Pacientes em uso de terapia antimicrobiana inibidores de antibiticos e colher antes da prxima dose. 2.5. Transporte Aps a inoculao do sangue os frascos devem ser mantidos sobre a bancada em temperatura ambiente at o momento do envio. Encaminhar o mais rpido possvel para o LACEN em temperatura ambiente, embalados individualmente e em caixa de isopor sem gelo.

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2.6. Observaes Amostras colhidas em frascos de equipamentos automatizados que tenham sido acondicionados em estufa ou geladeira at ser transportadas para o LACEN podem gerar resultados falsos negativos; A coleta simultnea de um mesmo local, de mais de dois frascos, deve ser interpretada como sendo uma nica hemocultura; O volume de sangue coletado uma das variveis mais crticas para positividade do exame. Quanto mais o volume coletado aproximar-se do mximo permitido (8mL para adultos e 3mL para crianas), maior ser a probabilidade de positividade;

3. 3.1.

SORO Recomendaes gerais

Procedimento de urgncia. Paramentao adequada e realizao dos procedimentos de biossegurana. Recomenda-se que a coleta do soro seja realizada quando no for possvel a coleta de lquor ou quando h suspeita de meningococcemia. Mtodos utilizados para diagnstico: aglutinao do ltex, CIE e PCR. 3.2. Coleta Procedimento de coleta igual ao do sangue total, s que este dever ser colocado em tubo estril sem anticoagulante para obteno do soro. 3.3. Transporte Encaminhar o mais rpido possvel ao LACEN, at 1h em temperatura, acima desse tempo mant-lo resfriado ou congelado.

4. RASPADO DE LESES 4.1. Recomendaes gerais Procedimento de urgncia. Paramentao adequada e realizao dos procedimentos de biossegurana. Recomenda-se que a coleta do raspado de leses seja realizada quando h suspeita de meningococcemia com aparecimento de petquias. Mtodos utilizados para diagnstico: bacterioscopia (Gram) e cultura em gar chocolate (quando houver quantidade considervel de amostra).

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4.2. Material necessrio Fichas de identificao da espcime / paciente. Duas (2) lminas de vidro para microscopia. Frasco tipo penicilina lacrado com gar chocolate. Um (1) frasco tipo penicilina esterilizado com tampa de borracha lacrados. Seringas e agulhas esterilizadas e/ou swab estril. Gaze esterilizada, algodo, lcool 70%, povidine 10% ou lcool iodado. Lata de alumnio e vela. Etiquetas.

4.3. Coleta e Semeadura Preparar todo o material necessrio, retirando o meio de cultura da geladeira para adquirir a temperatura ambiente e fazendo a identificao adequadamente. Preparar o paciente. Descontaminar as margens e a superfcie da leso com soluo fisiolgica e soluo de povidine 10%. Coletar o material localizado na parte mais profunda da leso por aspirao com seringa ou swab estril. Colocar o material em frasco estril (quando coletado quantidade considervel) e/ou fazer semeadura no tubo ou frasco contendo o gar chocolate (cultura), e confeccionar esfregao em lmina de vidro(Gram). Manter a cadeia assptica. Colocar o frasco com gar chocolate j semeado dentro da lata de alumnio com vela acesa e algodo umedecido. Fechar a lata hermeticamente. Manter a lata de alumnio a temperatura ambiente ou em estufa a 37 C por no mximo 18 horas. Amostras coletadas com swab: coloc-lo dentro do tubo com meio de transporte Stuart, ou seme-la diretamente em gar chocolate e em seguida fazer o esfregao em lmina. 4.4. Transporte Encaminhar a amostra, as lminas coradas e no coradas, para controle de qualidade do exame bacterioscpico, e o frasco com gar chocolate semeado o mais rpido possvel para o LACEN. Estes devem estar embalados em saco plstico e enviados em caixa de isopor sem gelo.

5.

OUTROS LQUIDOS CORPORAIS (LQUIDO PLEURAL, PLEURAL, ABSCESSOS INTERNOS, LQUIDO ASCTICO)

DERRAME

5.1. Recomendaes Procedimento mdico. Paramentao adequada e realizao dos procedimentos de biossegurana. Recomenda-se que a coleta do material biolgico seja realizada preferencialmente antes da terapia antimicrobiana.

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5.2. Material Necessrio

Frasco BHI + SPS

Frasco BACTEC Pds Plus

Fichas de identificao da espcime/paciente. Seringas e agulhas descartveis. Gaze esterilizada, algodo, lcool 70% e povidine a 10%. Frasco contendo 20ml de caldo BHI ou frasco para hemocultivo BACTEC Pds Plus. Etiquetas

5.3. Coleta e Semeadura Coletar em frasco estril, inocular de 1 a 2mL da amostra diretamente frasco de hemocultura (Caldo BHI) ou frascos de hemocultura( BACTEC Pds Plus). Conservar em temperatura ambiente por at 12 horas.Caso no dispor do meio de cultura para cultivo acondicionar a amostra em frasco estril, em temperatura ambiente em at 2 horas. 5.4. Transporte Encaminhar os frascos inoculados ou o frasco contendo a amostra, o mais rpido possvel para o LACEN e temperatura ambiente, embalados individualmente e em caixa de isopor sem gelo.

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ANEXO XXV............RECOMENDAES PARA COLETA E TRANSPORTE DE AMOSTRAS BIOLGICAS PARA CONTAGEM DE LINFCITOS T CD4/CD8/CD45

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ANEXO XXVI ..........RELAO DOS INSETICIDAS INIBIDORES COLINESTERASE SANGUNEA, USO, PROGRAMA E PERIODICIDADE.

DA

Inseticida / Formulao (2) Temefs G

Grupo Qumico Fosforado

Atividade

Programa (1)

Periodicidade

Uso como larvicida Uso como adulticida espacial (U BV) Uso como adulticida residual e espacial (UBV) Uso como adulticida espacial (U BV) Uso como polvilhamento e pulverizaes

Dengue Dengue e Malria Dengue e Malria

Quatro (4) meses

Malathion GT

Fosforado

UBV: 30 dias

Fenilthion GT e PM Pirimifs-metil CE Bendiocarb Carbaril Propoxur (PS/PM)

Fosforado

UBV: 30 dias, Residual: 60 dias

Fosforado

Dengue

30 dias

Carbamato

Peste Bulbnica

60 dias

(1) Deve-se considerar a indicao atual de cada um destes programas de controle (2) G = Granulado, GT = Grau Tcnico, CE = Concentrado Emulsionvel, PM = P molhvel, PS = P seco

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ANEXO XXVII .........FICHA DE INVESTIGAO EPDEMIOLGICA

FICHAS Animais Peonhentos Aids Adulto Aids Criana Atendimento Anti-rbico Botulismo Chagas Clera Coqueluche Criana Exposta ao HIV por Transmisso Vertical Dengue Difteria DRT Acidente Trabalho Biolgico DRT Acidente Trabalho Grave DRT Cncer DRT Dermatoses DRT LER / DORT DRT PAIR DRT Pneumoconioses DRT Transtornos Mentais Epizootia Esquistossomose Exantematica Febre Amarela Febre do Nilo Febre Maculosa Febre Tifide Gestante Sfilis Gestante HIV Hansenase Hantavirose Hepatite Influenza Intoxicao Exgena LV Leptospirose LTA Malria Meningite Notificao Individual Investigao Surto Surto DTA Planilha Surto Ficha Concluso Peste PFA Raiva Rotavrus Sfilis Congnita SRC Ttano NeoNatal Ttano Acidental Tracoma Tuberculose Violcia Domstica, Sexual e/ou Outras

Observao: as fichas esto disponveis para download no site do Ministrio da Sade endereo http://dtr2004.saude.gov.br/sinanweb/index.php

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ANEXO XXVIII .......SINAN FICHA DE INVESTIGAO DOENA DE CREUTZFELDT JAKOB

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ANEXO XXIX ..........SOLICITAO GESTANTES (Pr-Viral)

DE

TESTE

MOLECULAR

PARA

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ANEXO XXX............TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE ESCLARECIMENTO DST/AIDS. (Pro-Viral)

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ANEXO XXXI ..........TERMO DE CONSENTIMENTO PS-INFORMATIVO

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ANEXO XXXII .........TERMO / PROTOCOLO / FICHA DE ENCAMINHAMENTO DE AMOSTRAS BIOLGICAS

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ANEXO XXXIII .......TEGUMENTAR HUMANA FORMULRIO DE ENVIO DE LMINAS PARA CONTROLE DA QUALIDADE