EXPERIMENTO N.

1: Extrao da casena
Reagentes:
Leite
cido actico 2 M
Etanol
ter etlico
Tcnica:
1. aquecer 150 mL de gua destilada a 38 oC;
2. adicionar 50 mL de leite e misturar bem;
3. adicionar a esta soluo, gota a gota, a soluo de cido actico, at o
aparecimento de um precipitado abundante (gasta-se aproximadamente
0,7 mL do cido);
4. deixar sedimentar durante 20 minutos e decantar o sobrenadante;
5. adicionar ao precipitado 20 mL de etanol e misturar bem;
6. filtrar ou centrifugar a 3.000 rpm por 10 minutos e desprezar o filtrado, ou o
sobrenadante;
7. adicionar ao precipitado 5 mL de ter etlico e misturar por agitao;
8. decantar o sobrenadante e secar o precipitado (casena) em papel filtro.
EXPERIMENTO N. 2: Preparao de uma soluo de casena
Reagentes:
Casena
Hidrxido de sdio 1 M
cido actico 1 M
Tcnica:
1. colocar, em um frasco de Erlenmeyer, aproximadamente 1 grama da
casena obtida no experimento anterior;
2. adicionar 50 mL de gua destilada e ressuspender a casena;
3. adicionar 25 mL da soluo de hidrxido de sdio e agitar lentamente (para
evitar a formao de espuma) at a completa dissoluo da casena;
4. adicionar 25 mL da soluo de cido actico e agitar lentamente;
5. ajustar o pH para valores em torno da neutralidade (com o cido ou com a
base).
EXPERIMENTO N. 3: Determinao do ponto isoeltrico da casena
Reagentes:
Soluo de casena
cido actico 2 M
cido actico 1 M
cido actico 0,1 M
cido actico 0,01 M

Tcnica:
1. numerar 9 tubos de ensaio e distribuir os reagentes, conforme indicado:
Tubos
Reagentes (mL)
H2O destilada
c. actico 0,01 M
c. actico 0,1 M
c. actico 1 M
c. actico 2 M

4,0
0,5
-

4,4
0,1
-

4,3
0,2
-

3,7
0,8
-

3,5
1,0
-

2,5
2,0
-

0,5
3,0
-

2,0
2,7

1,2
3,5

2. adicionar, em cada tubo, 0,5 mL da soluo de casena preparada no

exerccio anterior e agitar lentamente, sem fazer espuma;
3. imediatamente aps a agitao verificar a turbidez e anotar, no quadro
de resultados, conforme a conveno indicada abaixo;
4. medir o pH em todos os tubos, com papel indicador cuja sensibilidade
seja em dcimos de unidade, ou com pHmetro porttil, anotando os
resultados no quadro respectivo;
5. discutir os resultados observados.

Tubos

Quadro de Resultados
2
3
4
5

pH
Turbidez
Conveno:

Turbidez

Intensidade crescente
0, x, xx, xxx, xxxx

QUESTIONRIO
1. Qual a propriedade da protena que permite identificar o seu ponto isoeltrico. Justifique a
resposta.
2. Descreva a evoluo da turbidez, em funo do tempo, no tubo identificado como o do
ponto isoeltrico.
3. A casena a principal protena do leite, constituindo aproximadamente 1/3 da protena
total no leite humano. Considerando que o pH deste leite de aproximadamente 6,6 e com
base no experimento desta aula, responda aos seguintes tens:
a) a casena solvel ou est precipitada no leite humano ?
b) o que aconteceria se ns acidificssemos o leite at um valor de pH que coincida
com o pI da casena ?
4. Embora seja proibido e torne o leite imprprio para o consumo humano, alguns produtores
inescrupulosos adicionam soda custica ao leite de vaca para evitar que ele coalhe. Esta
adio feita empiricamente mas voc pode explicar o fenmeno? Descreva-o.