1 in 1/100

5 in 1/10

TD 3 mL 20C

INFOTEC
20C
mL

20C
mL

.1

TD

.2

.9

USO CORRETO DE PIPETAS

A

Os instrumentos de medio so essenciais para qualquer laboratrio ou

indstria que necessita de medies corretas de volumes. A qualidade dos
resultados das anlises dependente da exatido com que so medidos os
volumes das amostras ensaiadas ou dos reagentes adicionados.
Estes instrumentos de medio devem ser escolhidos levando-se em
considerao sua aplicao. Mesmo os mais sofisticados instrumentos
automticos de anlise oferecem resultados confiveis somente quando o
material volumtrico empregado na preparao de reagentes e amostras for
suficientemente preciso e direcionado ao uso pretendido.
A calibrao e o uso adequado dos instrumentos de medio tm grande
influncia no resultado final de um ensaio. importante avaliar e reduzir, onde
for possvel, os erros sistemticos e aleatrios que possam influenciar o bom
desempenho do laboratrio.

PIPETAS

1 in 1/100

5 in 1/10

Pipetas so usadas para transferncia de volumes pr-estabelecidos de

um recipiente para outro. Para os diversos usos em laboratrios clnicos ou
laboratrios de anlise em geral, existem diversos tipos de pipetas, como as
pipetas de vidro e pipetas automticas (mecnicas e eletrnicas).
Pipeta Volumtrica ou Transferidora: planejada para medir um volume fixo de
lquido, constituindo-se de um bulbo cilndrico contendo um tubo estreito em cada
extremidade (Figura 1 A). A marca de calibrao do volume fica gravada na parte superior
do tubo. A parte inferior do tubo se afina gradualmente, de modo que o calibre interno
na extremidade da pipeta seja suficientemente fino para que o fluxo do lquido e a
drenagem incompleta no causem erros de medio alm da tolerncia especificada.
Estas pipetas so calibradas para utilizao em medida de amostras no viscosas.
A exatido da calibrao desta pipeta diretamente proporcional sua capacidade.

TD 3 mL 20C

Estas pipetas so planejadas para medidas de volumes pr-determinados e no

so consideradas exatas para medir amostras e padres.

MATERIAL VOLUMTRICO

20C
mL

20C
mL

.1

CUIDADOS NECESSRIOS PARA USO CORRETO DAS PIPETAS

No pipetar com a boca. Utilizar sempre um dispositivo para a pipetagem (Figura 2);
Utilizar pipetas ntegras, descartar as pipetas que apresentem pontas quebradas;
Utilizar pipetas limpas e secas;
Utilizar pipetas com volume total o mais prximo possvel do volume a ser medido;
Para medidas de solues viscosas, evitar que o lquido ultrapasse muito a marca
de medida, limpar a parte externa da pipeta e lavar a mesma vrias vezes na
soluo que ir receber o material pipetado;
Nas solues incolores coloca-se o menisco inferior na marca de calibrao enquanto
que nas solues coradas o acerto se faz na parte superior do menisco (Figura3);
Os olhos devem estar posicionados na altura da leitura do menisco (Figura 4);
Utilizar a pipeta sempre na posio vertical (tanto para aspirar como para
desprezar o lquido);
O fluxo do lquido deve ser contnuo.

Figura 2: Dispositivos auxiliares para pipetar.

TD

.2

.9

Figura 1: A
 : Pipeta Volumtrica; B: Pipeta Mohr (escoamento parcial);
C: Pipeta sorolgica (escoamento total)
Pipeta Graduada ou Medidora: Consiste em um tubo de vidro graduado
uniformemente em seu comprimento (Figura 1 B e 1C). Existem 2 tipos:
Pipeta graduada de escoamento parcial: calibrada entre duas marcas, apresenta
no topo duas linhas coloridas;
Pipeta graduada de escoamento total (sorolgica), graduada at a extremidade
inferior, apresenta no topo uma linha colorida.

Figura 3: Acerto do menisco. A: solues incolores; B: solues coradas.

Evitando a paralaxe.
A superfcie de um lquido
confinado
num
tubo
estreito exibe uma curvatura
marcante, ou menisco, que
consiste na interface entre o
ar e o lquido a ser medido.
Para acerto do menisco, seu
olho deve estar no nvel
da superfcie do lquido
para assim evitar um erro
devido paralaxe (Figura 4).
Paralaxe um fenmeno que
ocorre atravs da observao
errada do valor na escala
analgica do instrumento,
devido ao ngulo de viso.

Figura 4: A
 : posio correta para acertar o menisco. B e C posies erradas
para acertar o menisco.

PIPETAS AUTOMTICAS

1
FUNCIONAMENTO
DAS PIPETAS3 DE DESLOCAMENTO4DE AR
2

0
0

Quando o embolo pressionado em uma pipeta de deslocamento de ar, o pisto

As micropipetas so instrumentos de laboratrio utilizados para transferncia
dentro do instrumento se move para baixo expulsando o ar, que deslocado pelo pisto.
com preciso, de pequenos volumes de lquido.
O volume de ar deslocado pelo pisto equivalente ao volume de lquido aspirado.
Podem ser simples, que s empregam
uma ponteira
A
B (Figura 5B) ou Cmulticanal
O esquema
1
(Figura 5C), que permitem uso de vrias ponteiras simultaneamente, pipetando
1 o
2 abaixo demonstra como3 o pisto determina o volume
4 de ar deslocado
0
e subsequentemente
o volume de amostra aspirado.
mesmo volume em todas elas.
0
De modo geral so utilizadas para pipetar volumes de 1 a 1000 microlitros.
1
1
2
3
4
Existem dois tipos de pipetas: Pipetas de deslocamento de ar (Figura 5B e 5C) para
0
0
uso geral e Pipetas de deslocamento positivo (Figura 5A), para manuseio de lquidos Ajuste do Volume
Preparo para Aspirao
Aspirao da amostra
Transferncia
especficos (densos, viscosos ou volteis). Os dois tipos de pipetas so disponibilizados O volume desejado
O embolo pressionado
O embolo pressionado
Com a ponteira
outra vez. A Presso de
antes da aspirao da
introduzida na amostra,
em volumes variveis ou fixos.
ajustado. O pisto se
amostra. O pisto se
assim que o embolo
move para baixo e expele
liberado, criado um
um volume de ar
vcuo dentro da ponteira.
equivalente ao volume de
A presso atmosfrica
Ajuste do Volume
Preparo
paraaAspirao
Aspirao
da fora
amostra
amostra
ser aspirado.
ambiente
a
O embolo pressionado
Compenetrao
a ponteira do volume
O volume desejado
Ajuste do Volumeantes da aspirao
Preparo para
Aspirao
Aspirao
da
amostra
desejadonaatravs
do
da
introduzida
amostra,
ajustado. O pisto se
embolose pressionado assim
Comoada
ponteira
orifcio
ponteira.
O volume desejado

amostra.
OOpisto
que
embolo

move para a posico

daeaspirao
introduzida
amostra,
se
paraantes
baixo
expele da liberado,
criadona
um
apropriada. ajustado. O pistomove
amostra. O pisto se
assim que o embolo
move para a posico
um volume
de ar
vcuo liberado,
dentro da
ponteira.
move para baixo e expele
criado um
apropriada.
equivalente
volume
de
A presso
atmosfrica
umao
volume
de ar
vcuo
dentro da ponteira.
amostra aequivalente
ser aspirado.
ambiente
fora
a
ao volume de
A presso atmosfrica
do volume
amostra a ser aspirado. penetrao
ambiente
fora a
penetrao
desejado
atravs do
dovolume
atravs do
orifciodesejado
da ponteira.
move para a posico
apropriada.

ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
Transferncia
ponteira.
O embolo pressionado
Transferncia
outra vez. A Presso de
O embolo
pressionado
ar se
eleva dentro
da
outra vez. A Presso de
ponteira.
ar se eleva dentro da
O ar
comprimido
fora
o
ponteira.
lquido
para fora dafora o
O ar comprimido
ponteira.
lquido para fora da
ponteira.

orifcio da ponteira.

Modos de Pipetagem
A

As tcnicas
C de pipetagem mais frequentemente utilizadas so a pipetagem direta
e a pipetagem reversa. A seleo da tcnica de pipetagem deve ser determinada de
acordo com o mtodo requerido.
O modo de operao pode alterar significativamente os resultados de uma anlise,
1 Preparaodeterminar o melhor
2 Aspirao
portanto ao utilizar uma pipeta, fundamental
modo de operao
Imergir a ponteira no lquido*.
Segurar a pipeta prximo
dos fatores que influenciam
paraUm
a aplicao.
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira
pela presso
de ar.
PIPETAGEM
DIRETA

Figura 5: A
 - Pipeta de Deslocamento Positivo; B - Pipeta Deslocamento
de Ar (monocanal) e C - Pipeta Deslocamento de Ar (multicanal).

C UIDADOS NECESSRIOS PARA USO CORRETO DAS PA

Para o uso adequado das pipetas automticas, visando obter preciso e exatido,
necessrio primeiramente que as pipetas e ponteiras sejam de qualidade, que
se tenha suficiente experincia prtica em seu uso correto e que a manuteno e
Pisto com as orientaes do fabricante.
calibrao estejam em conformidade
Ponteiras de m qualidade podem ter rebarbas ou ondulaes no plstico que
retm lquidos, de modo que o volume pipetado no o volume dispensado. Outro
problema no uso de ponteiras de m qualidade a abertura no concntrica da
ponta da ponteira, afetando a distribuio
do lquido na ponteira.
Haste da pipeta
Nunca mover a pipeta da posio vertical quando estiver com lquido na ponteira.
Colcho
Ar na posio vertical e efetuar a aspirao do lquido lentamente,
Manter
a pipeta
dando uma pausa de uma frao de segundos aps a aspirao.
 recomendado que se faa um Ponteira
ambiente na ponteira com o lquido a ser pipetado.
Com isto se obtm melhor exatido e preciso da pipetagem. Sugerimos consultar
B
A
o manual da pipeta.
Para pipetagem de amostras viscosas e sangue total, sugerimos limpar com cuidado
a parte externa da ponteira e lavar a ponteira no lquido que vai receber a amostra.
Para prevenir
corroso do pisto, evitar aspiraes acidentais do lquido para
Amostra
dentro da pipeta. Se o lquido acidentalmente aspirado para dentro da pipeta, o
pisto deve ser imediatamente limpo com lcool isoproplico a 70% ou de acordo
com orientaes do fabricante.
Aps o uso as pipetas devem ser mantidas na posio vertical em estantes apropriadas.

PIPETAS DE DESLOCAMENTO DE AR
Pisto

O volume desejado

O embolo pressionado
antes da aspirao da

Com a ponteira
introduzida na amostra,

apropriada.

move para baixo e expele

um volume de ar
equivalente ao volume de
amostra a ser aspirado.

liberado, criado um
vcuo dentro da ponteira.
A presso atmosfrica
ambiente fora a
penetrao do volume
desejado atravs do
orifcio da ponteira.

Preparao

Imergir
a ponteira no lquido*.
Aspirao
Liberar o embolo lentamente

Imergir
ponteira
no lquido*.
at aaposio
de Repouso.
Liberar
o embolo
lentamente
Esperar
um segundo
para
at permitir
a posio
de
Repouso.
que o lquido se
Esperar
um segundo
acomode
dentro dapara
ponteira.
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.

adequado
esvaziamento
daimersa na suavimente o embolo at a
*A poro
da ponteira
posio do 1 estgio.
ponteira
pelatem
presso
ar.
amostra
efeitodesignificativo

na impreciso das medies.Repouso

1 Estgio
Se a ponteira imersa
Repouso
2 Estgio
profundamente, gotculas
da
amostra
Estgioimersa na
*Aficaro
poro na
da1parede
ponteira
externaamostra
da ponteira
e
se
Estgio
tem2
efeito
significativo
somaro
volume das
transferido.
na ao
impreciso
medies.
Se a ponteira
no imersa
*A poro
da
naa
Seponteira
a ponteira
imersa
imersa
profundamente,
gotculasoda
umatem
profundidade
suficiente,
amostra
efeito significativo
ficaro
na parede
volumeamostra
transferido
ser
menor
na impreciso
das medies.
externa
da
ponteira e se
que o volume
selecionado.
Se a ponteira
imersa
somaro
ao volume
profundamente,
gotculas
da transferido.
Se a ponteira no imersa a
amostra ficaro
na parede
Volume
Poro imersa
uma profundidade
suficiente, o
externa(microlitro)
da ponteira
e se
(milmetros)
volume transferido
ser menor
somaro aoque
volume
transferido.
o
volume
selecionado.
0,1 - 1
1
Se a ponteira no imersa a
1 - 100
2-3
uma profundidade
suficiente,
o
Volume
101 - 1000
2Poro
- 4 imersa
volume transferido
ser menor
(microlitro)
> 1001
3(milmetros)
-6
que o volume selecionado.
0,1 - 1
1
2-3

- 1000 imersa2 - 4
Volume 101Poro
(microlitro) > 1001
(milmetros) 3 - 6

0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001

1
2-3
2-4
3-6

Transferncia

Colocar a ponta da ponteira a

3 Transferncia
um angulo
(10 a 45) contra
a parede
interna
do recipiente.
Colocar
a ponta
da ponteira a
Pressionar
o embolo
um angulo
(10 a 45) contra
suavemente
atinterna
o 1 estgio.
a parede
do recipiente.
EsperarPressionar
um segundo.
o embolo
suavemente at o 1 estgio.

Esperar um segundo.
3 Transferncia
Para o uso em amostras
aquosas de modo geral
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
utilizada a Pipeta de
a parede interna do recipiente.
Deslocamento de Ar, em
Pressionar o embolo
Haste da pipeta
conjunto com a ponteira
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
descartvel (Figura 6).
Colcho Ar
indicado
o
uso
de
1
1
2
3
4
0
ponteiras que se adaptem
0
Ponteira
perfeitamente s pipetas.
As ponteiras no devem ser
reaproveitadas, pois este
procedimento pode levar
a erros de pipetagem e a
Amostra
contaminaes de amostras
e reagentes.
Ajuste do Volume
Preparo para Aspirao
Aspirao da amostra
Transferncia
O pisto se
Figura 6:ajustado.
Sistema
da Pipetaamostra.
de Deslocamento
de
Arque o embolo
O pisto se
assim
move
para a posico

Repouso
Segurar a pipeta prximo
Um dos fatores que
influenciam Preparao
posio vertical. Pressionar
a preciso da pipetagem
o
1 Estgio
Segurarsuavimente
a pipeta prximo
Um dos fatores
que influenciam
o embolo at a
adequado
esvaziamento
da
2
Estgio
vertical.doPressionar
a preciso da
pipetagem
o de ar. posioposio
1 estgio.
ponteira
pela presso

1 - 100

Liberar o embolo lentamente

at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
dentro da ponteira.
2acomode
Aspirao

posio vertical. Pressionar

suavimente o embolo at a
posio do 1 estgio.
(ESGOTAMENTO
TOTAL)

O embolo pressionado
outra vez. A Presso de
ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.

Esgotamento

Deslocar a ponta da ponteira

para
regio da parede
4 outra
Esgotamento
interna
do recipiente.
Deslocar
a ponta da ponteira
Pressionar
o
at
o 2
para outraembalo
regio da
parede
estgio,
deslizando
a ponteira
interna
do recipiente.
na parede
para
remover
o o 2
Pressionar
o embalo
at
estgio,
restante
da deslizando
amostra. a ponteira
na parede para remover o
restante da amostra.

Esgotamento

Deslocar a ponta da ponteira

para outra regio da parede
interna do recipiente.
Pressionar o embalo at o 2
estgio, deslizando a ponteira
na parede para remover o
restante da amostra.

Repouso

Liberar o embolo suavemente

posio Repouso.
5at aRepouso
Liberar o embolo suavemente
at a posio Repouso.

Repouso

Liberar o embolo suavemente

at a posio Repouso.

1
Um dos fatores que influenciam
a preciso da pipetagem o
adequado
esvaziamento
da
PIPETAGEM
REVERSA
ponteira pela presso de ar.

Preparao

Aspirao

Imergir a ponteira no lquido*.

Segurar a pipeta prximo
Liberar o embolo lentamente
posio vertical. Pressionar
at a posio de Repouso.
suavimente o emboloPARCIAL)
at a
(ESGOTAMENTO
Esperar um segundo para
posio do 2 estgio.
permitir que o lquido se
acomode
dentro da ponteira.
1 Preparao
2 Aspirao

Para pipetagem Repouso

de amostras viscosas
1 Preparao
Segurar a pipeta prximo2
Um dos fatores que influenciam

Esquema de funcionamento da pipeta de deslocamento positivo:

1

1
0
0

Imergir a ponteira no lquido*.

Aspirao
1 Estgio
Liberar o embolo lentamente
posio vertical. Pressionar
a preciso
da pipetagem o
2 Estgio
aat
ponteira
node
lquido*.
Segurar a pipeta
prximo

Um dos fatores que

influenciam
a posio
Repouso.
suavimente
o embolo
atImergir
a
adequado
esvaziamento da
embolo
lentamente
posio
vertical.
Pressionar
um
segundo para
a preciso da pipetagem
o presso de
posio
do 2 estgio. Liberar oEsperar
ponteira pela
ar.
at
a
posio
de
Repouso.
permitir
que
o
lquido se
adequado
esvaziamento
daimersa na suavimente o embolo at a
*A poro
da ponteira
acomode
dentro
da ponteira.
Esperar um
segundo
para
posio do 2 estgio.
ponteira
pelatem
presso
designificativo
ar.
Repouso
amostra
efeito
permitir que o lquido se
na impreciso das medies. 1 Estgio
acomode
dentro
da
ponteira.
Se a ponteira Repouso
imersa
2 Estgio

profundamente, gotculas da
1 Estgio
amostra ficaro
na parede
*A2poro
da ponteira imersa na
Estgio
externa da ponteira
se efeito significativo
amostra etem
somaro ao volume
transferido.
na impreciso
das medies.
Se
a ponteira
na
imersa
Se a ponteira
no
imersa
a
*A poro
da ponteira
imersa
profundamente,
gotculas
da
umatem
profundidade
suficiente,
o
amostra
efeito
significativo
amostra
ficaro
na parede
volume transferido
ser menor
na impreciso
das medies.
externa
da ponteira e se
que o volume
selecionado.
Se a ponteira
imersa
somaro ao volume transferido.
profundamente, gotculas
da no imersa a
Se a ponteira
amostra ficaro
parede
profundidade
Volumenauma
Poro
imersasuficiente, o
volume
transferido
externa (microlitro)
da ponteira
e se
(milmetros) ser menor
quetransferido.
o volume selecionado.
somaro ao volume
0,1 - 1
1
Se a ponteira no imersa a
1 - 100
2-3
Volume o Poro imersa
uma profundidade
101 - 1000 suficiente,
2
- 4 (milmetros)
(microlitro)
volume transferido
> 1001 ser menor
3-6
0,1 - 1
1
que o volume selecionado.
1 - 100
101 - 1000

Volume
(microlitro)

Poro
imersa
> 1001
(milmetros)

0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001

1
2-3
2-4
3-6

Ajuste do Volume

Ajustar o volume
desejado.
O pisto semove para a
posico apropriada.

2-3
2-4
3-6

4 Re-aspirao
5 Finalizao
Transferncia
Se a ponteira for utilizada
Se a ponteira no for mais
Colocar a ponta
da
ponteira
a
3 Transferncia
4 Re-aspirao
5 Finalizao
para a mesma amostra,
utilizada na mesma amostra,
um angulo (10 a 45) contra
a ponteira
for utilizada
Se a ponteira
noat
for mais
Colocar
a ponta da ponteira
a
manter
o Se
embolo
na posio
pressionar
o embolo
o 2
a parede interna
do recipiente.
para
a
mesma
amostra,
utilizada
na mesma
amostra,
um angulo (10 a 45) contra
do 1 estgio para a imerso
estgio
desprezando
o resduo
Pressionar o embolo
manter o embolo na posio
pressionar o embolo at o 2
a parede interna do recipiente.
subsequente
e
retomar
a
em
um
recipiente
de
descarte.
suavemente at
o 1 estgio.
do 1 estgio para a imerso
estgio desprezando o resduo
Pressionar
o embolo
operaosubsequente
na fase 2. e retomar a
Descartar
a ponteira.
Esperar um segundo.
em um
recipiente de descarte.
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.

Transferncia

Colocar a ponta da ponteira a

um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.

operao na fase 2.

Re-aspirao

Se a ponteira for utilizada

para a mesma amostra,
manter o embolo na posio
do 1 estgio para a imerso
subsequente e retomar a
operao na fase 2.

Descartar a ponteira.

Finalizao

Se a ponteira no for mais

utilizada na mesma amostra,
pressionar o embolo at o 2
estgio desprezando o resduo
em um recipiente de descarte.
Descartar a ponteira.

RESDUO

RESDUO

PIPETAS DE DESLOCAMENTO POSITIVO

Para uso em amostras que tem sua pipetagem dificultada (viscosa, densa,
voltil, radioativa, corrosiva) indicado o uso de pipetas de deslocamento positivo.
Neste tipo de pipeta a amostra tem contato direto com o embolo que faz parte do
pisto descartvel (Figura 7).
RESDUO

Haste da pipeta

Haste da pipeta

Pisto descartvel

Pisto descartvel

Capilar descartvel

Haste
da pipeta
Capilar
descartvel
Amostra

FiguraAmostra
7: Sistema da Pipeta de Deslocamento Positivo
Pisto descartvel
Capilar descartvel
As pipetas de deslocamento positivo funcionam como uma seringa. No existe
colcho de ar entre o pisto descartvel e a amostra. Devido a ausncia do colcho
de ar para expandir ou contrair, a fora de aspirao permanece constante durante
toda a operao, no sendo afetada pelas propriedades fsicas da amostra.
Este tipo de pipeta permite medir amostras com alta viscosidade e alta
densidade como mercrio e pasta de dente.

Amostra

Preparo para Aspirao

O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e
expele um volume de ar
equivalente ao volume
de amostra selecionado.

Aspirao da amostra
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, um vcuo
parcial criado dentro
da ponteira.A presso
atmosfrica ambiente
fora a penetrao do
volume desejado
atravs do orifcio da
ponteira.

Transferncia
O embolo pressionado
novamente. A Presso
de ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.

CALIBRAO

Micropipetas so instrumentos de alta preciso constitudos por

diversos componentes mecnicos sujeitos ao desgaste aps uso prolongado
ou disfuno resultante de uso inadequado.
Como a medio de volume um passo crtico em qualquer laboratrio
analtico, onde um pequeno erro de pipetagem pode causar um erro
significativo no resultado, essencial a verificao da calibrao dos
instrumentos volumtricos nas mesmas condies em que so utilizados
no laboratrio.
A verificao da calibrao consiste em estabelecer a relao entre
o valor indicado pelo instrumento e o valor efetivamente medido.
essencialmente um conjunto de medies e, como tal, no altera o
desempenho do instrumento.
A verificao da calibrao deve ser realizada nas seguintes situaes:
Aps uma manuteno e troca de peas;
Quando a pipeta sofre uma queda ou outro dano;
Mudana no controle da qualidade do sistema analtico;
De acordo com orientaes do fabricante.
A freqncia da verificao da calibrao depende do quanto a pipeta
utilizada e da qualidade e condio deste uso. A freqncia pode ser
definida tambm com base em resultados anteriores e na criticidade da
medida.
importante que na verificao da calibrao cada laboratrio
estabelea os limites aceitveis de acordo com suas aplicaes. Estes
limites geralmente so informados pelo fabricante da pipeta.

Os trs mtodos mais comuns de calibrao de pipetas
automticas so: gravimtrico, titrimtrico e fotomtrico.
O mtodo gravimtrico consiste na determinao da massa de
lquido escoado ou contido no instrumento a calibrar, tendo em conta a
temperatura, umidade, presso atmosfrica e coeficiente de expanso e
que posteriormente convertida em volume atravs de frmulas adequadas
descritas na literatura. Esta tcnica deve ser realizada por laboratrio de
calibrao especializado.
O mtodo titrimtrico consiste na medio de uma quantidade
conhecida de NaOH em relao ao volume dispensado pela pipeta. O volume
dispensado pela pipeta determinado sem interferncia da temperatura,
umidade ou presso atmosfrica. necessria uma rigorosa padronizao
das solues envolvidas.
O mtodo fotomtrico consiste em medies de diferentes diluies
de amostras e conseqente leitura fotomtrica destas medies. um
procedimento que pode ser facilmente implantado no laboratrio.
Anlise dos resultados da calibrao
Aps a calibrao, deve ser feita a anlise para verificar se o
instrumento cumpre os critrios de aceitao estabelecidos para cada um
dos pontos calibrados, com base em especificaes do prprio laboratrio
ou especificaes do fabricante, tendo em vista que os erros detectados na
calibrao no devem invalidar ou afetar significativamente seu uso nos
ensaios.
Para fazer a aceitao deve ter-se sempre em conta a incerteza da
calibrao, usando para tal a equao:
|erro| + |incerteza| |EMA|
EMA Erro mximo aceitvel.
O laboratrio deve definir a freqncia da calibrao e os limites
aceitveis, deve registrar todas as calibraes realizadas e devidas aes.
Observao
A calibrao das pipetas, por si s, no garante a qualidade de seu
uso. As pipetas tm que ser mantidas em bom funcionamento atravs de
um programa de manuteno adequado, incluindo limpeza, lubrificao,
substituio de vedantes e ajuste. Aps a calibrao, necessrio
verificar se o instrumento cumpre os limites estabelecidos, em funo das
necessidades especficas do laboratrio e do uso a que o instrumento se
destina, tendo em conta a incerteza da calibrao. Para manter a confiana
at a prxima manuteno e calibrao deve instituir-se um programa de
verificaes intermdias.

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Bibliografia
1. Fabiana Barino, Mrcio Biasoli; Curso Calibrao de Instrumentos, Controlab;
2. Manual de Pipetas Eppendorf;
3. Manual de Pipetas Pipetman;
4. EN-ISO 8655-6:2002;
5. NP EN ISO/IEC 17025;
6. Info Qualidade A Manuteno das pipetas fundamental; Isabel Farias, dez 2009;
7. RDC 302:2005 - Regulamento Tcnico para Funcionamento de Laboratrios Clnicos;
8. Norma PALC.
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Edio: Frida Wilke - Setembro/2010
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