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U N IV E R S ID AD E F E D E R AL D O C E AR

C E NT R O DE C I NC I AS
D E P AR T AME NT O D E B IO LO G I A
M IC R O B IO L O G I A G E R AL
EST UDO DIRIGIDO
MACRO E MICROC ULT IVO DE BOLORES
G AB R IE L A AL V E S V AL E NT I M

1. Diferencie: cogumelos, bolores e leveduras.


Os fungos so organismos eucariticos e hetertrofos, com parede celular de quitina e que utilizam o
glicognio como reserva energtica. Estes organismos podem apresentar-se em trs morfotipos:
leveduras, bolores e cogumelos. As leveduras so organismos fngicos unicelulares, com tamanhos
consideravelmente maiores que os das bactrias e que se reproduzem por simples diviso celular
(brotamento). Os bolores so fungos formados por uma rede de filamentos que so chamados de hifas. As
hifas so constitudas por paredes celulares que envolvem a membrana plasmtica. Estas hifas podem
apresentar septos, sendo chamadas de septadas, ou no, sendo classificadas como hifas cenocticas. O
conjunto de hifas chama-se miclio. Os fungos filamentosos, ou bolores, podem se reproduzir de forma
sexuada, atravs da fuso de gametas unicelulares, clulas haploides ou hifas especializadas. A
reproduo pode ser, ainda, assexuada, atravs do crescimento de hifas areas contendo estruturas
reprodutivas que liberam esporos. O cogumelo originado a partir da fase reprodutiva sexuada de um
grupo de fungos conhecidos como basidiomicetos. Neste grupo a reproduo acontece a partir da fuso
de miclios de linhagens sexuais diferentes, gerando um miclio dicaritico. Este inicialmente um miclio
que se diferencia em uma pequena estrutura subterrnea com forma de boto. Esta estrutura se expande
at formar o basidiocarpo adulto, que o cogumelo. Na face inferior do cogumelo esto as lamelas onde
os basdios realizam a fuso de dois ncleos, formando basdios com ncleos diploides. Aps uma diviso
meitica destes basdios so originados quatro basidisporos haploides, geneticamente distintos, que
sero dispersos pelo vento.
2. Que caractersticas dos fungos podem ser observadas atravs do macrocultivo em placa?
O macrocultivo em placa constitui o cultivo da colnia fngica sobre o meio de cultura em uma placa de
Petri. Alguns esporos de uma cepa fngica so colocados sobre o meio para se desenvolver. Este tipo de
cultura permite a observao das caractersticas morfolgicas da colnia, como cor do anverso, cor do
verso, cor da borda, cor difundida no meio de cultura, formato da borda, textura e relevo da colnia. Podese observar tambm o ritmo de crescimento da colnia, relacionando o tamanho da colnia com o tempo
de cultivo.
3. Que caractersticas dos fungos podem ser observadas atravs do microcultivo em lmina?
A tcnica do microcultivo consiste na montagem de uma lmina com um cubo de meio de cultura e uma
lamnula. O cubo de meio inoculado com esporos de um fungo e incubado. Este sistema mantido

dentro de uma placa de Petri estril, com um algodo ou papel filtro que deve ser mantido mido.
Diariamente a lamnula deve ser retirada do sistema e colocada sobre uma lmina contendo um corante,
como, por exemplo, azul de algodo. Atravs da observao da impresso das hifas na lamnula do
microcultivo possvel observar as caractersticas das hifas e estruturas reprodutivas, como ascsporo,
conidiforos e esporangiforos. A observao destas estruturas essencial para a identificao
taxonmica da cepa fngica.
4. D o nome, a composio/Litro e o pH dos 2 meios de cultura mais utilizados para o cultivo de
fungos.
Os dois meios de cultura mais utilizados para o cultivo de fungos so o Sabouraud Dextrose Agar e o Agar
Dextrose Batata. O meio de cultura Sabouraud Dextrose Agar um meio no seletivo para cultura e
manuteno de fungos. Este meio constitudo por 40,0g/L de dextrose, 10,0g/L de peptona e 15,0g/L de
gar, possuindo pH de aproximadamente 5,6. O meio de cultura Agar Dextrose Batata indicado para o
isolamento e enumerao de leveduras e bolores. Ele composto por 200,0g/L de infuso de batatas,
20,0g/L de dextrose e 15,0g/L de gar, possuindo pH de cerca de 5 ou 5,6, a depender do fabricante.
5. Explique o processo bioqumico da produo de po.
Um organismo muito utilizado no processo de panificao a levedura Saccharomyces cerevisiae, que
possui a funo de produo e liberao de CO2 na massa dos pes. Quando este organismo privado
do oxignio ele realiza o processo conhecido como fermentao. A fermentao uma forma de
catabolismo anaerbico onde um composto orgnico tanto doador quanto aceptor de eltrons. Durante a
gliclise o ATP sintetizado por fosforilao em nvel de substrato. A glicose fosforilada pelo ATP,
originando glicose-6-fosfato, que convertida em frutose-6-fosfato. Uma segunda fosforilao leva a
produo de frutose-1,6-bifosfato. Esta ltima clivada em duas molculas: o glicoceraldedo-3-fosfato e o
di-hidroxiacetona-fosfato. O di-hidroxiacetona-fosfato pode ser convertido em gliceraldedo-3-fosfato, que
sofre

oxidao

em

cido-1,3-bifosfoglicrico.

Nesta

reao,

enzima

gliceraldedo-3-fosfato

desidrogenase reduz a coenzima NAD+ para NADH. Simultaneamente, cada molcula de gliceraldedo-3fosfato fosforilada pela adio de uma molcula de fosfato inorgnico. A sntese de ATP ocorre quando
uma molcula de cido-1,3-bifosfoglicrico convertido em cido 3-fosfoglicrico e cada molcula de
fosfoenolpiruvato convertida em piruvato. O NADH produzido durante a gliclise deve ser novamente
oxidado a NAD+ para que a gliclise prossiga. Isso ocorre por meio da reduo do piruvato pelo NADH a
etanol, com a produo de dixido de carbono (CO2). O CO2 liberado faz com que a massa dos pes
aumente de tamanho e o outro produto da fermentao, o lcool, volatilizado durante o cozimento.