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A GUA COMO REAGENTE

A gua o suprimento do Laboratrio Clnico de menor custo. Talvez, por este motivo, sua qualidade
seja to negligenciada, apesar de ser um reagente importante e o mais utilizado.
A classificao da gua PURA pode ter diferentes significados, dependendo da situao.
gua PURA para uso domstico significa que ela livre de microrganismos patognicos e agentes
txicos, sendo prpria para o consumo humano.
gua PURA para uso farmacutico significa principalmente que ela livre de pirognios e
microrganismos.
No Laboratrio Clnico, a gua utilizada como reagente qumico e por isto a denominao gua
PURA significa que ela deve conter uma quantidade mnima de contaminantes (ons, matria
orgnica e microrganismos), capaz de atender a diferentes aplicaes.
Traos de ons ou metais aceleram ou inibem vrias reaes, principalmente as mediadas por
enzimas e prejudicam o desempenho de vrios reagentes, controles e calibradores.
O efeito das impurezas da gua nos diversos testes de laboratrio tem sido estudado
sistematicamente e existem evidncias de numerosas causas de erro. O cloro utilizado na gua
servida populao, na concentrao em torno de 1,0 mg/L, pode introduzir erros de at 25% na
determinao de cloretos e interfere com vrios procedimentos em bacteriologia e enzimologia.
Traos de metais aceleram ou inibem vrias reaes e podem introduzir erros significativos nas
medies de atividades enzimticas ou em procedimentos que utilizam enzimas como reagentes. A
dimenso do erro gerado pela impureza da gua depende em muito da concentrao do analito. Um
miligrama de sdio por litro de gua pode introduzir um aumento de 4,3 mEq/L na determinao de
sdio se a diluio utilizada for de 1:100, representando um erro de 3,1%, em uma concentrao de
sdio de 140 mEq/L. Por outro lado, 1,0 mg de potssio por litro de gua introduz um aumento de 2,5
mEq/L. Em uma amostra com potssio de 4,0 mEq/L, o erro de 62%.
Assim, a gua a ser utilizada no laboratrio deve ser purificada para que no produza interferncias
nos testes ou ensaios. Vrios so os processos de purificao que esto disponveis para utilizao
no laboratrio. Esta purificao consiste na eliminao de todas as substncias dissolvidas e
suspensas na gua.
Destilao - Processo de vaporizao e condensao de um lquido para purificar ou concentrar uma
substncia ou para separar uma substncia voltil de outras substncias menos volteis. o mtodo
mais antigo de purificao da gua.
Deionizao Neste processo a gua passa por um sistema contendo resinas insolveis, aninicas
e catinicas, onde os ons presentes na gua so trocados pelos ons presentes nessas resinas.
No caso das resinas de troca catinica, esta trocar seus ons hidrognio (H+) por contaminantes
catinicos, como clcio, magnsio, ferro, alumnio, mangans, cobre, zinco, cromo, nquel e outros
ctions metlicos e ctions diversos.
As resinas aninicas por sua vez trocam seus ons hidroxila (OH-) pelos contaminantes aninicos,
como clorato, clorito, cloreto, sulfato, sulfito, sulfeto, nitrato, nitrito, fosfato, fluoreto e outros nions,
alm da slica.
Osmose Reversa - Processo pelo qual a gua forada a passar por uma membrana
semipermevel que age como um filtro molecular. A membrana remove de 90 a 99% das impurezas
da gua.
Devido a sua capacidade de remoo de bactrias e pirognios, a osmose reversa frequentemente
combinada com a deionizao de modo a reduzir a frequencia de regenerao das resinas de troca
inica.
Filtrao atravs de Carvo Ativado Este processo remove o cloro por quimioabsoro e as
substncias orgnicas dissolvidas por adsoro. Geralmente o filtro de carvo ativado colocado nos
sistemas de purificao da gua antes da osmose reversa e antes da deionizao.
Ultrafiltrao - Utiliza uma membrana com poros ligeiramente maiores que os da membrana de
osmose reversa. utilizado para remover pirognios da gua purificada.

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Principais contaminantes e eficincia da purificao
A tabela a seguir relaciona os vrios procedimentos de purificao da gua e sua eficincia na
remoo dos principais interferentes.
Slidos Gases Matria
Partculas Bactrias
Ionizados Ionizados Orgnica
Destilao E/B P B E E
Deionizao E E P P P
Osmose Reversa B P B E E
Carvo Ativado P P E/B P P
Ultra filtrao P P B E E
Tabela 1: E = excelente; B = boa; P = pobre (remoo pequena ou nula)

Uma combinao dos processos de purificao da gua para uso no Laboratrio Clnico consiste de:
Filtro inicial para reter partculas e bactrias; Filtro de carvo ativado para eliminar matrias orgnicas
e Sistema deionizador de leito misto ou separado para reter ons, acoplado ou no a um sistema de
osmose reversa.
O processo de deionizao e de osmose reversa, tem aplicao muito comum nos Laboratrios
Clnicos, mas o sistema deve ser monitorado para que possveis problemas sejam sanados. A
pequena sensibilidade no sistema de informao da qualidade da gua processada acarreta na
utilizao de gua imprpria. Contaminao com bactrias podendo deteriorar o sistema (resinas e
membranas). Liberao de silicatos, substncias alcalinas e potentes oxidantes, que interferem nas
reaes, principalmente as enzimticas.
A gua purificada para uso no Laboratrio Clnico, deve ser submetida ao controle da qualidade
devendo ser testada todas as vezes em que se obtiver um novo lote.
A gua de uso no laboratrio pode ser classificada em funo da concentrao de contaminantes
mais importantes.
Especificaes estabelecidas no momento da produo da gua:
NCCLS CLSI
Tipo I Tipo II Tipo III ARLC
Bactrias Heterotrficas (ufc/mL) < 10 < 1000 - < 10
Resistividade (M/cm a 25 C) > 10 >1 > 0,1 10
Condutividade (mS/cm a 25 C) < 0,1 <1 < 10 0,1
Silicatos (mg/L) < 0,05 < 0,1 <1 -
Carbono orgnico total (TOC) ng/g (ppb) - - - < 500
Partculas (micra) < 0,22 - - < 0,22
Tabela 2: ufc - unidade formadora de colnias; m - megaohms; S - microsiemens; NI No
Indicado; ARLC = gua Reagente para Laboratrio Clnico
Existe ainda uma especificao para a gua que usada em HPLC, cultura de clulas e tecidos,
anlise de cromossomas e testes de HLA, que denominada gua tipo Especial.
Cuidados devem ser tomados aps obteno de gua destilada ou deionizada, pois no tem sentido
obter uma gua de boa qualidade e contamin-la durante o processo armazenamento.
A gua de tipo I s existe nesta forma no momento de sua produo. Portanto, quando um reagente
requerer este tipo de gua, ele deve ser preparado imediatamente aps a produo da gua
purificada.
De modo geral, a gua deionizada se encontra em um estado antinatural e tem a tendncia a adquirir
um estado intermedirio entre o estado inicial e a purificao.
Os sistemas de armazenamento da gua de tipos II e III devem ser construdos com materiais que
no facilitem a contaminao qumica ou bacteriana.
O laboratrio deve seguir a RDC 302/2005 da ANVISA, que no item 6.2.7 descreve: O laboratrio
clnico e o posto de coleta laboratorial devem definir o grau de pureza da gua reagente utilizada nas
suas anlises, a forma de obteno, o controle da qualidade.

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Controle da qualidade da gua
A slica (contaminante fracamente ionizado) uma das primeiras substncias que podem eluir dos
leitos de resina de troca inica quando se aproximam da saturao. A liberao de substncias
fortemente ionizadas ocorre em seguida, aumentando a condutividade.
Para realizar o controle da qualidade da gua para uso no laboratrio, so indicados alguns testes:
1. Determinar a quantidade de silicato presente na gua. O silicato o primeiro elemento a
aparecer na gua quando a coluna est atingindo seu ponto de saturao e comea a se tornar
imprpria para utilizao. Para determinao qualitativa de silicatos na gua, a Labtest
disponibiliza o produto Silicato MA Ref. 603.
2. Medir a condutividade da gua. Condutividade a capacidade que a gua possui em conduzir
corrente eltrica, quanto maior a condutividade, maior a quantidade de ons presentes na gua. A
medida da condutividade deve ser realizada com um condutivmetro. Unidade: S= microsiemens.
3. Realizar o controle microbiolgico da gua. Dever ser feito mensalmente e sempre aps
manuteno do equipamento. O controle microbiolgico da gua definido como Unidades
Formadoras de Colnia por mL de gua (UFC/mL). Cada laboratrio dever ter seu procedimento
de coleta e medida
Para obter uma gua que contenha somente partculas menores que 0,22 , utilizar um filtro
com poro de dimetro nominal igual a 0,22 .

Criar um sistema de registro da condutividade, da absorbncia encontrada no teste do Silicato MA e

do controle microbiolgico com as datas de realizao. Repetir este teste de controle da qualidade da
gua, no mnimo semanalmente. Registrar todas as aes tomadas quando um dos parmetros se
apresentar fora da especificao desejada.

Absorbncia
Controle
Data Condutividade Silicato MA Ao aplicada
Microbiolgico
(< 0,010)

Armazenamento
De modo geral, como a gua purificada se encontra em um estado antinatural e tem tendncia a
retornar ao estado anterior purificao, devem-se tomar cuidados no armazenamento.
recomendvel obter a gua purificada na quantidade suficiente para um dia de trabalho.
Referncia
1- NCCLS C3-A3; Preparation and Testing of Reagent Water in the Clinical Laboratory.
2- CLSI C3-A4; Preparation and Testing of Reagent Water in the Clinical Laboratory.
3- RDC 302: 2005 - ANVISA; Regulamento Tcnico para Funcionamento de Laboratrios
Clnicos.
4- Instrues de Uso Silicato MA Labtest.

Frida Wilke Alves Basques

Edio: Outubro 2010

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