CONTROLE DE

QUALIDADE DA ÁGUA
MSc. Daniele Oliveira Simão

Juazeiro-BA
2023
 ÁGUA

Água para uso farmacêutico

Diversos tipos de água empregados:

Formulação e Laboratórios de
Síntese de
produção de ensaios e
fármacos
medicamentos diagnósticos

Demais Limpeza de
aplicações utensílios,
relacionadas à equipamentos e
área da saúde sistemas.

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Tipos de Água
ÁGUA PURIFICADA

É a água potável que passou por algum tipo de tratamento

para retirar os possíveis contaminantes e atender aos
requisitos de pureza estabelecidos na monografia.

ÁGUA ULTRAPURIFICADA

É a água purificada que passou por tratamento adicional

para retirar os possíveis contaminantes e atender aos
requisitos de pureza estabelecidos na monografia.

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Tipos de Água
ÁGUA PARA INJETÁVEIS

É o insumo utilizado na preparação de medicamentos para

administração parenteral, como veículo, ou na solubilização
e diluição de substâncias ou de preparações.

ÁGUA ESTÉRIL PARA IRRIGAÇÃO

É preparada com Água para injetáveis estéril e
adequadamente envasada. Não contém substâncias
antimicrobianas ou adição de outras substâncias.

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Objetivo da Purificação
Evitar recontaminação

Retirada de
impurezas

Físico Químicas Biológicas Microbiológicas

Compostos
Partículas Insetos, algas, Bactérias,
inorgânicos e
sólidas visíveis parasitas fungos, vírus
orgânicos

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Métodos de Purificação
DEIONIZAÇÃO (TROCA IÔNICA)
• Utilizada para a remoção de íons indesejados
(desmineralização)
• Resina carregada de íons desejáveis (Na e Cl ou H e OH)
• Não produz água de alta pureza

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Métodos de Purificação
ULTRAFILTRAÇÃO
• Variedade de filtração destinada a remover sólidos físicos da água,
passando-o através de uma membrana semi-permeável.
• Os sólidos são capturados e descartados

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Métodos de Purificação
DESTILAÇÃO
• Remoção de impurezas não voláteis (minerais,
compostos orgânicos e microrganismos)
• Evaporação e condensação

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Métodos de Purificação
OSMOSE REVERSA
• Técnica mais empregada como etapa final
• Filtração acionada por pressão
• Membrana semipermeável atua como um filtro, permitindo que
apenas as moléculas de água passem enquanto retém os sais
dissolvidos, contaminantes e outras impurezas.

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Escolha do Método de Purificação

Qualidade da Qualidade da
água inicial água final

Combinação
de Tecnologias

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Água Purificada
• Deve estar isenta da adição de quaisquer substâncias
dissolvidas.
• Utilizada na preparação de medicamentos que não
requeiram água estéril nem apirogênica, destinados ao
uso não parenteral.

CARACTERÍSTICAS FÍSICAS
• Límpido
• Incolor
• Insípido
• Inodoro

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Ensaios de Pureza
1. Acidez ou Alcalinidade

Fenol SI: vermelho de fenol + NaOH + etanol

20 mL Água + 0,5 mL Fenol SI

• Amarela Neutro Alcalino
• Adiciona 0,1 mL NaOH 0,01 M Amarela Vermelho
• Adiciona 0,15 mL HCl 0,01 M

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Ensaios de Pureza
2. Carbono orgânico total
– Método para quantificar os átomos de carbono ligados por
covalência em moléculas orgânicas presentes em uma amostra
– Identificar a contaminação da água por impurezas orgânicas

– Fundamenta-se na oxidação completa

das moléculas orgânicas a CO2
– Calor, UV ou agentes oxidantes
– A quantificação do CO2 é feita por
detecção do gás produzido com IV ou pela
leitura da condutividade da solução.
– Máximo 0,5 mg/L

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Ensaios de Pureza
3. Condutividade da água
– Relacionada à capacidade de conduzir corrente elétrica
– É uma medida do fluxo de elétrons o qual é facilitado pela
presença de íons.
– Há uma relação de proporcionalidade entre o teor de sais (íons)
dissolvidos e a condutividade elétrica
– Esse parâmetro nos permite estimar o teor de sais presentes
na água
Ca2+
H+ SO4-
NH4+ Cl-

OH- Mg2+
NO3-

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Ensaios de Pureza
3. Condutividade da água

Condutivímetro
– Enxaguar a célula com pelo menos três porções da amostra.
– A determinação deve ser realizada em recipiente apropriado
– O valor obtido deve ser inferior a 1,3 μS/cm, na temperatura de
(25,0 ± 0,1) ºC.

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Testes de Segurança Biológica

1. Contagem do número total de bactérias heterotróficas
– Escolha dos parâmetros do teste deve considerar as condições
da água testada e dos métodos de purificação utilizados

– Meios de cultura
Alta Concentração de Nutrientes Baixa Concentração de Nutrientes
Ágar para contagem de placa (PCA) Ágar R2A
Heterotróficas Oligotróficas

– Temperatura: mais baixas (20-25ºC ou 25-30ºC)

– Tempo de incubação: mais longo
– Resultado: máx. 100 UFC/mL

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Testes de Segurança Biológica

1. Contagem do número total de bactérias heterotróficas

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Teste de Segurança Biológica

2. Pesquisa de coliformes totais e fecais

• Grupo de bactérias Gram-negativas pertencentes a família

Enterobacteriaceae.
• Utilizam a lactose como nutriente e produzem gás e ácido,
incubados a temperatura de 35-37 ºC por 48 horas

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Teste de Segurança Biológica

2. Pesquisa de coliformes totais e fecais
Método de fermentação em tubos múltiplos

Checagem
• 24h
• 48h

Agitar
Negativo: sem crescimento e gás
Agitar
Positivo: crescimento e gás
Teste confirmatório
Profª Daniele Simão
 ÁGUA

Teste de Segurança Biológica

2. Pesquisa de coliformes totais e fecais
Método de fermentação em tubos múltiplos
Teste confirmatório

1 ou + Incubar à 35ºC
alçadas 48 horas

Formação de gás
TESTE POSITIVO
Caldo lactose bile COLIFORMES TOTAIS
Positivo verde brilhante

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Teste de Segurança Biológica

2. Pesquisa de coliformes totais e fecais
Método de fermentação em tubos múltiplos
Fase completa

1 ou + Incubar à 44ºC
alçadas 24 horas

Caldo lactose bile
verde brilhante
POSITIVO
Crescimento
Formação de gás
Caldo EC ou EC-MUG TESTE POSITIVO
COLIFORMES FECAIS

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Teste de Segurança Biológica

2. Pesquisa de coliformes totais e fecais
Método de filtração em membrana
• Membrana: 47 mm e poro 0,45 mcm
• Após a filtração, lavar a membrana com 20-30 mL de água estéril
3x
• Incubar a membrana em meio de cultura (MacConkey, endo C,
eosina azul de metileno
• 35ºC por 24 horas
• Observar se houve crescimento

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Teste de Segurança Biológica

3. Pesquisa de Pseudomonas aeruginosa
Método de filtração por membrana estéril

200 mL
amostra 41,5 ºC
72 horas

0,8 -2,2 mm de diâmetro

Borda clara
Ágar M-Pa-C Centro acastanhado a verde escuro

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Água Purificada X Ultrapurificada

Testes Água Purificada Água Ultrapurificada

Condutividade Máx. 1,3 mcS/cm Máx. 0,055 mcS/cm

Carbono Total Orgânico Máx. 0,5 mg/L Máx. 0,5 mg/L

Contagem do número total de bactérias Máx. 100 UFC/mL Máx. 10 UFC/100 mL

heterotróficas

Pesquisa de coliformes totais e fecais Negativo Negativo

Pesquisa de Pseudomonas aeruginosa Negativo Negativo

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Água para injetáveis

• Preparação de medicamentos para administração parenteral, como
veículo, na dissolução ou na diluição de substâncias ou de
preparações.
• Fabricação de princípios ativos de uso parenteral
• Lavagem final de equipamentos, tubulação e recipientes usados em
preparações parenterais
• Limpeza de certos equipamentos

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Água para injetáveis

MÉTODO DE PRODUÇÃO
• Destilação
• Método equivalente ou superior
• Retirada de contaminantes químicos, microrganismos e
endotoxinas bacterianas

CARACTERÍSTICAS FÍSICAS
• Límpido
• Incolor
• Insípido
• Inodoro
Profª Daniele Simão
 ÁGUA

Ensaios de Pureza
1. Acidez ou Alcalinidade
2. Carbono orgânico total
3. Condutividade da água
4. Contaminação por partículas: partículas sub-visíveis

A contaminação de injetáveis por partículas é a presença

de materiais insolúveis, estranhos e móveis que não
sejam bolhas de ar.

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Ensaios de Pureza
4. Contaminação por partículas: partículas sub-visíveis
Método 1 - Contagem de partículas por bloqueio da luz
• Determina o tamanho e o número de partículas
• Realizado em condições de contaminação limitada,
preferencialmente, em capela de fluxo laminar

1. Homogeneizar a amostra por meio de 25 inversões consecutivas

lentas e suaves do recipiente
2. Eliminar as bolhas deixando a amostra em repouso por dois
minutos
3. Transferir quatro porções de 5 mL ou +
4. Determinar o número de partículas com
tamanho igual ou maior que 10 e 25 μm.

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Ensaios de Pureza
4. Contaminação por partículas: partículas sub-visíveis
Método 1 - Contagem de partículas por bloqueio da luz

Resultado

Volume do recipiente Partículas = ou > 10 μm Partículas = ou > 25 μm

> 100 mL Até 25 por mL Até 3 por mL

= ou < 100 mL Até 6000 por recipiente Até 600 por recipiente

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Teste de Segurança Biológica

1. Contagem do número total de bactérias heterotrófica
Cumpre o teste. No máximo 10 UFC/100 mL.

2. Pesquisa de coliformes totais e fecais

Cumpre o teste. Negativo.

3. Pesquisa de Pseudomonas aeruginosa

Cumpre o teste. Negativo.

4. Endotoxinas bacterianas

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Teste de Segurança Biológica

4. Endotoxinas bacterianas
Detectar ou quantificar endotoxinas de bactérias gram
negativas presentes em amostras

Reagente principal: LAL (lisado de amebócito Limulus)

• Obtido a partir do sangue do Caranguejo-ferradura
• Limulus polyphemus
• Tachypleus tridentatus

Profª Daniele Simão

 ÁGUA

Teste de Segurança Biológica

4. Endotoxinas bacterianas

TÉCNICA DE COAGULAÇÃO EM GEL

Amostra Negativo
POSITIVO: COM gel

Amostra + endotoxina Positivo

LAL
Água + endotoxina 37ºC por 1 h
Positivo
NEGATIVO: SEM gel
Água Negativo

Profª Daniele Simão

 Referências
BRASIL. Agência Nacional de Vigilância Sanitária.
Farmacopeia Brasileira, 6ª ed., 2019. Agência Nacional de
Vigilância Sanitária, RDC nº 166, de 24 de Julho de 2017.

BRASIL. Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Guia de

Qualidade para Sistemas de Purificação de Água para Uso
Farmacêutico. Brasília, 2013.

Profª Daniele Simão