HISTOLOGIAMICRO

TECNICAS HISTOQUIMICAS E CITOQUIMICAS :

Célula + tecido + órgãos = pode ser feita analise in situ( fora do organismo) ou analise
in vitro( ambiente propicio para imitar o organismo humano).
In vitro = células em cultura ( desempenham as mesmas funções quando no interior do
organismo) ou fertilização (também há a manipulação de estruturas fora do
organismo).
Bioquímicos: extrações + purificações + centrifugações(separação de pesos
moleculares) + eletroforeses consiste na separação das proteínas com um gel)+
tecnologia de DNA e RNA (ex: PCR)

No meio in situ são realizadas as preparações citológicas + histoquímicas e

citoquímicas + autorradiografia + imunocitoquimica (usa anticorpos específicos para
detectar proteínas).
histoquímicas e citoquímicas= definir o conjunto de técnicas capazes de identificar
elementos celulares e extracelulares in situ a pratir de reações de substratos, ou seja
aquilo q eu desejo avaliar, com corantes específicos. Moléculas carreadoras aparecera
com cor. O uso de um corante para identificar um elemento biológico.

CORANTES:
Ácidos  corantes básicos  basófilos
Básico  corantes ácidos  acidófilos
Estruturas ácidas irão se corar com corantes básicos porque ocorre a atração por
cargas, ácidos possuem sinal positivo enquanto as bases possuem cargas negativas.

Coloração :hematoxilina(H) e eosina(E) = (HE)

hematoxilina(H)= básica  azul e violeta  est. Acidas  sbt. basofila
eosina(E)= corante acido  rosa est. Básicas  sbt. Acidófila
OBS: eosina colore quase que totalmente o citoplasma da célula.

Combinação de dois corantes nos permite identificar melhor as estruturas celulares,

porem de maneira geral e não especificamente.
Estruturas basófilas :
núcleo (DNA) é sempre roxo = afinidade grande coma a hematoxilina
ribossomos (RNA) + RER + material extracelular ( glicosaminoglicana presente em
cartilagens) = também tem carga negativa tem afinidade com a hematoxilina .
Estruturas acidófilas : coram-se intensamente com a eosina
Mitocôndrias + proteínas + filamentos citoplasmáticos + material extracelular
( maioria das fibras como o colágeno ou células musculares)+ grânulos de secreção.

OBS:
Pelo HE o musculo se cora com coloração rosa e os colágenos também ficam
semelhantes não deixando analisar certamente onde começa e termina cada estrutura,
assim aplicamos a técnica da tricomonia.

TRICOMICOS :
3 tipos de corantes diferentes = diferenciam colágeno e o musculo dentro do mesmo
corte
nomenclatura dos 3 tipos :
Mallory( colágeno = azul e musculo= vermelho)
Masson
Gômori

Fibras reticulares = coloração por empreguinação por metais

ex: prata e ouro
Fibras elásticas = coloração orceina ou resorcina –fucsina
Íons = Ca, P e Fe reações químicas em produtos insolúveis

OBS: ossos em formação possuem parte cartilaginosas

Cálcio é o ion mais escuro (preto no corte histológico )

Para identificar o DNA = reação de Feulgen

Ter uma ideia da presença dos núcleos , especificar as regiões com o material genetico

Reações enzimáticas faz com que surja um precipitado identificando aonde o tipo de
proteína se encontra.
fosfalases lisossomo (enzima fosfatase)
desidrogenases mitocôndrias
peroxidases  marcar outras moléculas (utilizada em marcações conjugadas).

OBS: Antígeno e anticorpos são identificados pelo método da histoquímica ou

citoquimica
proteínas = imunohistoquimica  lamina glicoproteica
tipo de marcação mais especifica identificação das delimitações

Polissacarídeos e oligossacarídeos
células caliciformes = produtoras de muco
acido periódico – schiff (PAS)
Aparecerá bem roxa nas fotos microscópicas

OBS: Todo local de muito carboidratos poderá ser feita a acoloração com o roxo
intenso

Sudan IV e sudan Black = lipídios

Não pode ser feito em cortes histológicos comuns
Xilol destrói todo o lipídio , é necessário que seja feito o processo de corte congelado.

OUTROS CORANTES:
BASICOS = azul de toluidina e metileno
ACIDOS = Orange G e fucsina acida