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Projecto integrado

A Extração de Flavonoide a Partir de Resídios de Casca de


Frutas Cítricas: o caso da laranja
Índice

1.Introdução .................................................................................................................. 1
1.1.Problematização ...................................................................................................... 2
1.2.Justificativa ............................................................................................................. 3
1.3.Objetivos................................................................................................................. 4
1.3.1. Geral ................................................................................................................... 4
1.3.2. Específicos .......................................................................................................... 4
1.4. Hipótese ................................................................................................................. 4
2.Revisão da literatura................................................................................................... 5
2.1.Origem do termo “Flavónoide ................................................................................. 5
2.2.Revisão de Conceitos .............................................................................................. 6
2.1.A extração ............................................................................................................... 6
2.2. Flavonoides ............................................................................................................ 6
2.3.Cítricos ................................................................................................................... 7
3.Abordagem Metodológica .......................................................................................... 9
3.1.Tipos de Pesquisa .................................................................................................... 9
3.2.Quanto a natureza.................................................................................................... 9
3.3.Método de Pesquisa................................................................................................. 9
4.4.Quanto aos objectivos ........................................................................................... 10
4.5. Materiais Reagentes, equipamentos, Instrumentos ................................................ 11
4.6.Técnicas e instrumentos de recolha de dados ......................................................... 12
4.6.1.Técnicas de colecta de dados .............................................................................. 12
4.6.2.Desenho Experimental........................................................................................ 12
4.7.População e Amostra............................................................................................. 12
4.7.1.População ........................................................................................................... 12
4.7.2.Amostra ............................................................................................................. 13
5. Análise e discussão dos resultados .......................................................................... 13
6.Conograma das Actividades ..................................................................................... 14
7.Orçamento ............................................................................................................... 15
8.Referências .............................................................................................................. 16

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1.Introdução
O presente projecto de Integrado tem como tema “A Extração de Flavonoide a Partir de
Residios de Casca de Frutas Cítricas: o caso da laranja”. De facto, o tema em questão
evidencia a acçao do homem como um agente modificador do meio ambiente na medida
em que este faz o uso dos recursos naturais que a natureza oferece. Além disso, a acção
humana gera efeitos destrutivos e prejudiciais a própria Saúde, não só, mas também dos
outros seres que se encontram no habitat que a natureza dispõe. Embora, no meio desse
processo todas as Instústrias de alimentos e farmacêuticas desempenham um papel
revante na extração de substâncias com valor nutrucional e medicinal nas vidas dos seres
humanos.
De referir que o interesse das indústrias de alimentos e farmacêuticos compostos por alto
grau de pureza e que apresentam propriedades biológicas é crescente nos últimos anos.
Com maior razão, as exigências governamentais e do mercado consumidor têm sinalizado
para a importância do desenvolvimento de tecnologias que possibilitem o
reaproveitamento de resíduos, que sejam ambientalmente seguras e garantam a qualidade
dos produtos.
Nessa lógica, diversas Pesquisas vêm se desenvolvendo para melhorar a aplicação dos
resíduos agroindustriais. Entretanto, vários subprodutos são gerados durante o seu
processamento, como os óleos essenciais, farelo de polpa cítrica e outros produtos com
diferentes aplicações nas indústrias de tintas, cosméticos e de ração animal. De facto, o
uso dos resíduos de cascas de cítricos sem diferenciação em seus constituintes individuais
ainda é o principal modo de utilização, direcionado para uso na agricultura e como
auxiliar em ração animal.
Pode-se considerar a produção de suco como um processo vital por gerar uma grande
quantidade de resíduos com alto teor de fibra alimentar (Nunes, 2009).
Entre esses resíduos estão a casca, semente e polpa representando 50% do peso de cada
fruto com umidade de aproximadamente 82%. Entretanto, depois da produção de suco,
os resíduos sólidos e os restos líquidos de extração de sumo são tratados (Cutrale,2011).
Em termos de organização o presente projecto apresenta a presente nota introdutória,
seguido do Problema, a Justificativa, Objetivos, e a Hipótese. No que concerne ao
desenvolvimento do trabalho, o mesmo inclui a Área de estudo, a metodologia usada, a
discussão dos resultados, a conclusão, o Orçamento, o Cronograma das atividades e as
Referências Bibliográficas.

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1.1.Problematização
De acordo com as palavras de Gil (1999, pag.49), “o problema é qualquer questão não
solvida e que é objecto de discussão, em qualquer domínio do conhecimento”. Ora,
partindo dessa linha de visão, qualquer investigação “tem por ponto de partida uma
situação que suscita interrogações, um mal-estar ou uma inquietação, que pede uma
explicação ou pelo menos uma melhor compreensão” (Fortin, 2009b, p. 66).
De acordo com Qiu et al (2010), com o desenvolvimento do setor de fruticultura, o
aumento no número de indústrias do setor de alimentos e a intensificação do
processamento de frutas, surge o problema da produção de resíduos. Consequentemente
torna-se necessário o aproveitamento desses resíduos uma vez que o destino inadequado
está associado não apenas a problemas ambientais como também a perdas econômicas
(Cordenunsi et al., 2008).
Durante e após o processamento de suco de frutas cítricas através da separação do suco
com os demais componentes da fruta são gerados em maior quantidade resíduos sólidos
orgânicos que correspondem aproximadamente a 60-65% de casca, 30-35% de tecidos
internos e até 10% de sementes.
O grande problema que as indústrias enfrentam é o destino do grande volume de resíduos
sólidos e líquidos produzidos. Os resíduos orgânicos podem causar entupimento de
tanques, além de ser necessário um tratamento de efluentes ou uso de aterros sanitários
que representam um processo dispendioso para a indústria. As estratégias utilizadas
tradicionalmente para tratamento de resíduos cítricos, como incineração, aterro,
alimentação animal ou extração de pectina, são ineficientes dos pontos de vista ambiental
e energético, representando uma grande e imensurável perda do resíduo, além disso, em
alguns casos os residios são descartados ao meio ambiente sem o devido processamento
causando severos danos ao ambiente.
Sendo assim, com o intuito de eliminar/reduzir os níveis de subprodutos formados pelas
indústrias alimentares, concretamente, as de frutas e derivados e considerando os
impactos negativos ao meio ambiente surge a necessidade de valorização desses resíduos
através do uso de uma das técnicas de aproveitamento dos residios de Citrinos que é de
Extração de Flavonoide a Partir de Residios de Casca de Frutas Cítricas, como por
exemplo laranja, limão, lima, tangerina e toranja e outros.
Daí que, em detrimento das afirmações acima descritas surge a seguinte pergunta de
pesquisa: Qual é o Impacto da Extração de Flavonoide no meio ambiente a partir de
Residios da Casca de Frutas Cítricas?

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1.2.Justificativa
De acordo com Kobori & Jorge (2005), os resíduos descartados das indústrias de alimentos
poderiam ter uma finalidade benéfica ao homem e ao meio ambiente. Nessa perspectiva,
algumas frutas que possuem sementes são processadas para fabricação de alimentos e
posteriormente descartadas sendo que poderiam ser utilizadas para minimizar o seu
desperdício. Daí que, é de destacar o grande papel reservada as Indústrias nesse processo.
Visto que com o crescimento da produção dessas indústrias de transformação em todo o
mundo, crescem proporcionalmente a disponibilidade de grandes quantidades de
sementes Citrus que podem ser utilizadas com maior valor agregado (Akpata, Akubor,
1999).
Noutro posicionamento, Babbar e colaboradores (2011), aferem que os resíduos da
indústria de alimentos devem ser considerados como fontes potenciais de compostos
bioativos sendo de importância tanto para indústria de alimentos quanto farmacêutica
devido a sua capacidade antioxidante, baixo custo e a fácil disponibilidade.
Entretanto, além da possibilidade de ter alto valor agregado quando processados e
transformados em subprodutos como óleos vegetais, as frutas cítricas são dentre as
espécies arbóreas as frutas mais importantes do mundo.
Por outro lado, o alto cultivo deste gênero e o contínuo descarte representam um grande
problema ambiental, pois com o aumento da produção e uso esporádico destes resíduos
como ração animal e adubo faz com que a não reutilização dos mesmos represente uma
propensão de degradação microbiológica. (Akpata & Akubor, 1999).
De facto, na busca de soluções alternativas para o problema do descarte de resíduos,
muitas indústrias têm optado pelo uso de microrganismos como agentes redutores de
matéria orgânica desses materiais ou para eliminação ou redução de compostos tóxicos.
Resíduos de agroindústrias, como os das indústrias processadoras de sucos cítricos, têm
sido utilizados como substrato para a produção de pectinases fúngicas, metano e para
adsorção de corantes residuais (Tavares et al., 1998).
Dessa forma, uma utilização destes resíduos de maneira eficiente, econômica e segura
para o meio ambiente, torna-se importante especialmente devido à rentabilidade e aos
possíveis empregos que possam gerar.

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1.3.Objetivos
1.3.1. Geral
 Demonstrar a importância da reutilização de resíduos dos resíduos vindo da
indústria crítica;

1.3.2. Específicos
 Indicar os problemas ambientais causados pela indústria cítrica;
 Caracterizar os mecanismos de reaproveitamento dos resíduos;
 Descrever os meios da extração de Flavonoide a partir de resíduos da indústria
cítrica.

1.4. Hipótese
 Hipótese de Causa:
O descarte inadequado de resíduos da indústria cítrica tem trazido drásticos impactos ao
meio ambiente. Na indústria de suco de laranja concentrado, são gerados resíduos sólidos,
líquidos e gasosos, muitos dos resíduos sólidos são utilizados como matéria prima para
subprodutos, os resíduos líquidos são tratados em suas respectivas estações de
tratamentos, gerando lodo biológico no decorrer do tratamento e os resíduos gasosos são
tratados gerando cinzas proveniente da queima de biomassa nas caldeiras. O lodo, as
cinzas e os resíduos sólidos descartados (não aproveitados no processo de produção de
subprodutos) se descartado e/ou dispostos incorretamente podem acarretar graves
impactos ambientais.
 Hipótese de Solução
Os resíduos oriundos da indústria cítrica podem ser reaproveitados para fazer
desinfetantes, no caso das cascas de limão e da toranja, e antiparasitário que possibilite
eliminar as bactérias presentes nos vegetais e na água antes do consumo flavonoide pode
ser extraídos de resíduos de cascas de cítricos, têm particular utilização na indústria de
cosméticos, de aditivos alimentares e na indústria farmacêutica, na extração de álcool
para desinfeção de utensílios de cozinha e das mãos, na produção de entibecerias, na
desinfeção e proteção de alimentos,

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2.Revisão da literatura
2.1.Origem do termo “Flavónoide”
De acordo com De Wiel, et al (2001), o termo flavonóides foi atribuído a partir de 1952
por Geissman e Hinreier. Confere-se a estes compostos uma diversidade de atividades
farmacológicas que visivelmente não tem relação entre si.
A atribuição das diversas propriedades aos flavonóides, sem que houvesse um estudo
farmacológico prévio de seus respectivos mecanismos de ação e certificação da sua
biodisponibilidade, induziu ao desuso destes compostos por um longo período.
Entretanto, a Food and Drug Administration (FDA) aboliu do mercado dos EUA mais de
duzentos (200) preparados contendo flavonóides até que suas eficácias fossem
comprovadas. Devido às exigências, foram aprofundadas as pesquisas para doze (12)
reavaliar as propriedades e elucidar seus mecanismos de ação farmacológicos (Setchell e
Cassidy, 1999).
Posteriormente, a partir dos anos 80, voltou a existir o interesse por estas substâncias,
utilizando algumas de origem semissintéticas, obtidas a partir de flavonóides contidos em
frutas cítricas, com pequenas modificações estruturais. Assim, foram introduzidos na
terapêutica compostos como a hidrosmina, diosmina. Estes foram indicados para o
tratamento de distúrbios venosos causadores de varizes, hemorroidas e de outras
patologias vasculares (Wang, 2000).

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2.2.Revisão de Conceitos: Extração, Flavonoides e Cítricos
2.1.A extração
De acordo com Leal (2008), a extração é uma operação unitária que tem por objetivo a
separação de determinadas substâncias a partir de diversas matrizes, sólidas ou líquidas,
através de processos químicos, físicos ou mecânicos.
Nesse processo as tecnologias clássicas de extração, são baseadas no uso de um solvente
apropriado para remover compostos lipofílicos do interior do tecido celular. Por outro
lado, os métodos de extração de óleos essenciais e compostos bioativos variam conforme
a localização do óleo volátil na planta e com a proposta de utilização do mesmo.
De forma geral, a extração destes compostos pode ser realizada através de técnicas
convencionais como a enfleuragem, a prensagem a frio, a maceração, o ultrassom e a
extração em Soxhlet, a destilação direta e a destilação por arraste a vapor de água.
Assim, os principais solventes utilizados para a extração de óleos são: o hexano, o
benzeno, os álcoois metílico, etílico e propílico, a acetona, o pentano e diversos solventes
clorados. Após a extração, o solvente é removido por evaporação ou destilação à pressão
reduzida, obtendo-se um extrato denso e resinoso (Kitzberger, 2005), (Biscaia, 2007); e
(Aromalandia, 2008).

2.2. Flavonoides
Flavonoides constituem uma classe muito importante de pigmentos naturais encontrados
com grande frequência na natureza, unicamente em vegetais (Bobbio e Bobbio, 2001).
De facto, a estrutura básica dos flavonoides consiste de um esqueleto de 15 carbonos,
distribuídos em dois anéis aromáticos, ligados por uma cadeia de três átomos de carbono
e um átomo de oxigênio formando um heterociclo oxigenado (C6-C3-C6).
Para Manach et al (2004) em função do grau de oxidação e do padrão de substituição do
anel C (heterociclo), os flavonoides são divididos em 6 subclasses:
 Antocianinas,
 Flavonóis,
 Flavan-3-óis (catequinas e proantocianidinas),
 Flavonas
 Isoflavonas e flavanonas.
Entretanto, os Flavonóides compreendem um dos maiores e mais amplamente distribuído
grupo de metabólitos secundários nas plantas (Rice-Evans et al., 1997). Ora, são
encontrados em quase todas as plantas fotossintetizadoras, consequentemente todos os

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humanos os consomem através dos alimentos. Estes são divididos em vários subgrupos
em razão da formação de diferentes compostos e propriedades biológicas. Possuem
também distintas fontes de ingestão, logo existe diferença na biodisponibilidade destes
compostos no organismo o que acarreta em ações biológicas in vivo muitas vezes
diferenciadas (Erlund, 2002)
Estruturalmente, os flavonóides são substâncias aromáticas com 15 átomos de carbono
(C15) no seu esqueleto básico, sendo compostos fenólicos do tipo C6-C3- C6, onde os
dois anéis C6 são normalmente aromáticos (anéis A e B) e conectados por uma cadeia de
três carbonos que geralmente contém um heteroátomo de oxigênio (anel C) núcleo básico
dos flavonóides compostos por dois anéis aromáticos (A e B) e um anel intermediário
(C). Os subprodutos provenientes dos citrinos consideram-se relevantes pois são ricos em
ingredientes funcionais, entre os quais se destacam os flavonoides, fibras alimentares e
óleos essenciais

Subclasse dos Flavonóides

2.3.Cítricos
De acordo com Argudo (2004), as espécies cítricas são intensamente cultivadas e
apreciadas e seus frutos os mais consumidos em todo o mundo Os cítricos contêm uma
ampla variedade de nutrientes importantes além da vitamina C, como exemplo a vitamina
A, carotenos de várias classes (β-caroteno, luteína, zeaxantina, criptoxantina) folatos,
fibras, vitaminas do complexo B, elementos, principalmente cálcio, potássio, sódio e
fósforo. Além destes, contêm grupos de metabólitos considerados, não nutricionais ou

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bioativos, tais como os glucaratos, cumarinas, monoterpenos, triterpenos e outros
compostos.
Os principais flavonóides presentes nos cítricos são a aglomeração de pós-finos de
substâncias em pequenas unidades esféricas, hesperidina, naringina, dihidrochalconas e
flavonas polimetoxiladas (Santos, 2004). De facto, na casca das espécies cítricas estão
presentes, furanocumarinas, limonóides além de outros componentes da casca
(estabilizantes e a própria cascas para consumo direto) pectina, geléias, purês, gomos
(vendidos em latas ou sacos plásticos, prontos para comer). Nas sementes podem ser
obtidos biocidas, óleo comestível além de concentrado protéico. Outros produtos também
podem ser gerados a partir dos resíduos cítricos como álcool, vinho e vinagre (Ferreira,
2005).

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3.Abordagem Metodológica
3.1.Tipos de Pesquisa
Na perspectiva teórica, pesquisa é definida como sendo um procedimento formal, com
método de pensamento reflexivo, que requer um tratamento científico e se constitui no
caminho para conhecer a realidade ou para descobrir verdades parciais (Lakatos &
Marconi, 2003).
3.2.Quanto a natureza
Este Projecto de pesquisa segue uma abordagem quantitativa e qualitativa. De acordo com
Gil (1999), o uso da abordagem Qualitativa propicia o aprofundamento da investigação
das questões relacionadas ao fenómeno em estudo e das suas relações, mediante a máxima
valorização do contacto directo com a situação estudada, buscando-se o que era comum,
mas permanecendo, entretanto, aberta para perceber a individualidade e os significados
múltiplos.
Por outro lado, a pesquisa quantitativa é caracterizada pelo emprego da quantificação,
tanto nas modalidades de colecta de informações, quanto no tratamento de delas por meio
de métodos estatísticos (Richardson, 1999).
O uso do método qualitativo, bem como quantitativo é crucial no presente estudo, pois
propicia o aprofundamento da pesquisa na obtenção dos resultados necessários para a
compreensão do problema em questão.

3.3.Método de Pesquisa
Na presente pesquisa será feito um estudo de caso e pesquisa de campo com vista a
analisar o Impacto da Extração de Flavonoide no meio ambiente a partir de Residios da
Casca de Frutas Cítricas.
De referir que, o estudo de caso é um método de pesquisa que utiliza, geralmente, dados
qualitativos, colectados a partir de eventos reais, com o objectivo de explicar, explorar ou
descrever fenómenos atuais inseridos em seu próprio contexto. Caracteriza-se por ser um
estudo detalhado e exaustivo de poucos, ou mesmo de um único objecto, fornecendo
conhecimentos profundos (Yin, 2009). Afere ainda o autor que o estudo de caso é útil
para investigar novos conceitos, bem como para verificar como são aplicados e utilizados
na prática elementos de uma teoria (Yin, 2009).

Ao passo que a pesquisa de campo é aquela utilizada com objectivo de conseguir


informações e ou conhecimento acerca de um problema, para o qual se procura uma
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resposta, ou de uma hipótese, que se queira comprovar, ou, ainda, descobrir novos
fenómenos ou as relações entre eles. Em consonância com o acima exposto, a presente
pesquisa prende-se essencialmente na colecta de informações relativos a. Razão pela qual,
qualquer informação subjacente ao tema, tem o seu devido tratamento e análise com vista a
responder o problema de pesquisa. (Lakatos & Marconi, 2003).

4.4.Quanto aos objectivos


Gil (1994), classifica a pesquisa quanto ao objectivo, em três categorias básicas:
 Pesquisas exploratórias: visam compreender um fenómeno ainda pouco
estudado ou aspectos específicos de uma teoria ampla;
 Pesquisas explicativas: visam identificar os factores que determinam ou
contribuem para a ocorrência dos fenómenos, explicando suas causas e;
 Pesquisa Descritiva: que consiste em descrever determinado fenómeno.

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4.5. Materiais Reagentes, equipamentos, Instrumentos
a) Materiais Reagentes
 A água Ultra purificada;
 O reagente dimetilsulfoxido;
 Acetonitrila;
 Mmetanol;
 Ácido acético e;
 Hidróxido de sódio.

b) Equipamentos
 Luvas;
 Botas;
 Máscaras
 Uniforme
 Laboratório de Ensaio

c) Instrumentos
 Descascador de Citrinos;
 O secador de leito fixo
 Espremedor de citrinos;
 Balança
 Faca;
 Tesoura
 Tubos de ensaio

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4.6.Técnicas e instrumentos de recolha de dados
4.6.1.Técnicas de colecta de dados
De acordo com Lakatos & Marconi (2003), é um conjunto de preceitos ou processos de
que se serve uma ciência ou arte; Ou seja, é a habilidade para usar esses preceitos ou
normas na aplicação prática. Para o presente estudo a técnica escolhida é a entrevista pelas
suas vantagens.
Para Gil (1997, p.90) “entrevista é a técnica em que o investigador se apresenta frente ao
entrevistado e lhe formula perguntas com objectivo de obtenção de dados que interessam
a investigação”.

Segundo Gil (1996, p.90), apresenta as seguintes vantagens:


 Não exige que a pessoa entrevistada saiba ler e escrever;
 Oferece flexibilidade muito maior e;
 Os dados obtidos são susceptíveis de classificação e quantificação.

4.6.2.Desenho Experimental

Recepção dos frutos Remoção manual das cascas e cortes

Secagem das cascas em forno Moagem e peneiragem

4.7.População e Amostra
4.7.1.População
É o conjunto definido de elementos que possuem determinadas características. De um
modo geral, fala-se de População como referência ao total de habitantes de um
determinado lugar. Nesse contexto o universo da presente pesquisa, dada a aptidão que
os mesmos possuem no discernimento e capacidade de fazer frente às questões colocadas.
(Gil, 2002).

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4.7.2.Amostra
É subconjunto do universo ou da população, por meio do qual se estimam as
características desse universo ou população. As amostras a serem estudadas no presente
Projecto serão cascas e polpas de frutos cítricos habitualmente consumidos tais como:
 Laranja (Citrus sinensis),
 Limão (Citrus limon),
 Lima (Citrus aurantifolia),
 Tangerina (Citrus reticulata),
 Clementina (Citrus clementina) e
 Toranja (Citrus paradisi).

População Amostra
 5 Laranjas (Citrus sinensis), 5 Cascas e polpas
 5 Limões (Citrus limon), 5 Cascas e Polpas
 5 Lima (Citrus aurantifolia), 5 Cascas e Polpas
 5 Tangerinas (Citrus reticulata), 5 Cascas e Polpas
 5 Clementina (Citrus clementina) e 5 Cascas e Polpas
 5 Toranjas (Citrus paradisi). 5 Cascas e Polpas

5. Análise e discussão dos resultados


Os resultados serão apresentados e discutidos pelos teores de compostos bioativos.
Entretanto será feita a avaliação da atividade antioxidante das cascas e polpas dos
diferentes citrinos, bem como os resultados da análise sensorial a serem realizadas, após
elaboração após o cumprimento de todas as etapas desde o desenho experimental até a
extração do flanavoides. Entretanto a agua será utilizada como solvente extrator. Além
disso, Os ensaios prévios serão realizados com a finalidade de caracterizar os flavonoides
dos citrinos a serem utilizados como matéria-prima neste estudo. Além disso serão
definidos os parâmetros de processo da extração, como quantidade de amostra a ser
utilizada para a formação do leito de extração, o tempo de extração e vazão de solvente.

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6.Conograma das Actividades
Descrição das actividades a realizar Agosto Setembro Outubro

1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4

Escolha do tema de pesquisa X

Revisão de literatura (bibliográfica) X X

Definição dos capítulos (sumário preliminar) X X

Justificativa, objectivos, problematização, metodologia X X

Fundamentação teórica: redacção dos capítulos X X

Colecta de dados X X X

Tabulação, análise dos dados e elaboração da síntese X X

Ajustes metodológicos, conceituais e analíticos X X

Redacção final, revisão linguística; X X X X

Entrega do trabalho final X

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7.Orçamento
N. Nome do material Preço Unitário Quant Valor Obs
1 Laranja 5mt 20
2 Limão 5mt 20
3 Tangerina 5mt 20
4 Lima 20mt 20
5 Toranja 20MT 20
6 Computador 15000MT 1
7 Maquina calculador 500MT 1
8 Tubo de ensaio 4
9 Água 2000MT 100L
10 Água Ultra purificada; 800MT 20L
11 Hidróxido de sódio.
12 Ácido acético
13 Acetonitrila
14 Luvas 250 mt 4
15 Botas 1500 mt 3
16 Mascaras 300 mt 30
17 Uniformes 500 mt 3
18 Descascador 150 mt 4
19 Facas 30 mt 4
20 Tesouras 25 mt 5
21 Plásticos 10mt 50

26,695MT
Subtotal
Total

15
8.Referências
Tavares, V. B; Siviéri, K; Ceron, C. R; Silva, R; Trabuco,. Utilização de resíduo líquido
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citrinum : depuração biológica do resíduo e produção de enzima. Revista Química Nova.
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AKPATA M.I.; AKUBOR, P.I Composição química e funcionais selecionadas


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NUNES, Smolarek A Importância do Aproveitamento dos Resíduos Industriais da


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acessado em Setembro/2021.

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Procedimentos Básicos. 7ª edição. São Paulo. Atlas Editora, 2003

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editor. S.Paulo

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