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AVANÇOS NA IDENTIFICAÇÃO

DE LEVEDURAS PELO DNA


MITOCONDRIAL

MÁRIO LÚCIO LOPES


OBJETIVOS

• DEMONSTRAR QUE O DNA MITOCONDRIAL PODE


SER USADO COMO TÉCNICA COMPLEMENTAR PARA
IDENTIFICAÇÃO DE LEVEDURAS, JUNTO COM A
CARIOTIPAGEM

• RESOLVER CASOS DE IDENTIFICAÇÃO DE


LEVEDURAS
DNA
CROMOSSÔMICO X MITOCONDRIAL
DNA
CROMOSSÔMICO X MITOCONDRIAL
SITUAÇÃO A
SITUAÇÃO B
DNA MITOCONDRIAL
A B C D E

A = DNA PADRÃO (1Kb ladder)


B = PE2
C = CAT1
D = IZ1904
E = CAT1 (DNA sem digestão)
CARIOTIPAGEM
CAT-1
DNA MITOCONDRIAL
CAT-1
1Kb 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 PD DNA
S/D
ESTUDOS DE CASOS
CASO 1
CARIOTIPAGEM

USINA A 2006

CAT-1
1,0

0,8
INTENSIDADE

0,6

0,4

0,2

0,0
0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0
MOBILIDADE

CAT-1 ISO-1
CASO 1
DNA MITOCONDRIAL
1 2 3 4 5 6
1- CAT-1
2- ISO-1
3- ISO-1
4- ISO-2
5- ISO-2
6- DNA padrão
1,0

0,8
INTENSIDADE

0,6

0,4

0,2

0,0
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0
MOBILIDADE

ISO-1 ISO-2
1,0

0,8
INTENSIDADE

0,6

0,4

0,2

0,0
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0
MOBILIDADE

CAT1 ISO-1
1,0

0,8
INTENSIDADE

0,6

0,4

0,2

0,0
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0
MOBILIDADE

CAT-1 ISO-2
CONCLUSÕES

• ISO-1 E ISO-2 REPRESENTAM A MESMA


LINHAGEM

• DIFEREM DA CAT-1 NO PERFIL DO DNA


MITOCONDRIAL
CASO 2

USINA B - 2006
ISO-3
ISO-4

CAT-1
CASO 2
CÉLULAS OBSERVADAS AO MICROSCÓPIO
1,0

0,8
INTENSIDADE

0,6

0,4

0,2

0,0
0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0
MOBILIDADE

CAT-1 ISO-3 ISO-4


CASO 2
1 2 3 4 5 6 7 8 9 1- DNA padrão
2- CAT-1
3- CAT-1
4- ISO-3
5- ISO-4
6- ISO-4
7- ISO-4
8- ISO-4
9- CAT-1
1,0

0,8
INTENSIDADE

0,6

0,4

0,2

0,0
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0
MOBILIDADE

ISO-3 ISO-4
1,0

0,8
INTENSIDADE

0,6

0,4

0,2

0,0
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0
MOBILIDADE

CAT-1 ISO-3
1,0

0,8
INTENSIDADE

0,6

0,4

0,2

0,0
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0
MOBILIDADE

CAT-1 ISO-4
CONCLUSÕES

• APESAR DAS DIFERENÇAS DE


MORFOLOGIA DAS CÉLULAS, ISO-3 E ISO 4
REPRESENTAM A MESMA LINHAGEM

• NÃO DIFEREM DA CAT-1 NO PERFIL DO


DNA MITOCONDRIAL
AGRADECIMENTOS

Profa Maria do Carmo (ESALQ-USP)


Prof Luiz Carlos Basso (ESALQ-USP)
Silene C. Lima Paullilo (FERMENTEC)
Thaise Freiberger (FERMENTEC)
MUITO OBRIGADO !!!

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