UNIVERSIDADE ESTADUAL DE MARINGÁ

CURSO ENGENHARIA DE ALIMENTOS

DISCIPLINA: LABORATÓRIO DE BIOENGENHARIA

DOCENTE: ANA PAULA LARROSA

CURVA PADRÃO GLICOSE+ FRUTOSE

Acadêmicos: Geovana M. L. Santos RA:103602

Julia Maria Carvalho Alves RA:104385
Loyana Ribeiro Furlan RA: 83608
Vinícius Sanches Gregório RA:103888

Maringá, 2021
 1. INTRODUÇÃO

A Glicose é considerada um carboidrato classificado de monossacarídeo,

sendo C6H12O6 a sua formula molecular e chamada hexose por possuir seis
carbonos. Essa por sua vez tem a função de fornecer energia para os seres
vivos, como fonte de nutrientes para o funcionamento da célula, sendo utilizada
no processo de respiração celular. (SANTOS et al.)

Assim como a glicose, a frutose também é um monossacarídeo e a sua

formula molecular é idêntica a da glicose, diferenciando pelo grupo
característico, onde frutose pertence ao grupo cetona e glicose ao grupo
aldeído. Frutose é conhecida como açúcar das frutas com os carbonos
dispostos em anel (MEDEIROS et al., 2017).

Os açúcares redutores ou invertidos são capazes de se oxidarem na

presença de agentes oxidantes e são denominados dessa forma por possuírem
grupo carboxílico e cetônico livres, ou seja, livres para ocorrer alguma reação
na interação. As propriedades desses açúcares redutores são diferentes
quando comparados ao açúcar na forma não redutora, e em função dessas
propriedades a sua utilização nos alimentos (DORNEMANN, G. M. et al. 2016).

Neste trabalho utilizou-se o método descrito por Miller (1959), que detecta
esses carboidratos através do reativo DNS esse utilizado para determinar os
açúcares redutores, onde contém ácido 3,5-dinitrosalicílico como agente
oxidante. Esse teste baseia-se na reação entre o açúcar redutor e o ácido 3,5-
dinitrosalicílico (cor amarelo), que é reduzido a um composto colorido
avermelhado, o ácido 3-amino-5-nitrosalicílico, oxidando o monossacarídeo
redutor (Embrapa, 2013).

Dessa forma, a curva padrão é importante para qualquer amostra que se for
fazer um preparo, visto que, consegue se estimar qual é a concentração de
açucares redutores presente nos alimentos através da curva padrão. Portanto, o
objetivo da prática é determinar a curva padrão de glicose+ frutose com seu
ajuste por regressão linear.
2. RESULTADOS E DISCUSSÃO

Para a realização do experimento a concentração variou de 0 até 1 mg/ml e

calculou-se o volume da solução (ml) e o volume de água (ml), onde os
resultados estão expressos na Tabela 1:

Tabela 1. Volume solução e volume de água em suas respectivas

concentrações
Tubo Concentração Volume solução Volume água
(mg/ml) (ml) (ml)
1 0 0,0 4,0
2 0,1 0,4 3,6
3 0,2 0,8 3,2
4 0,3 1,2 2,8
5 0,4 1,6 2,4
6 0,5 2,0 2,0
7 0,6 2,4 1,6
8 0,7 2,8 1,2
9 0,8 3,2 0,8
10 0,9 3,6 0,4
11 1,0 4 0

Após a obtenção dos valores, e a partir do método DNS, as amostras

foram lidas a 540nm no espectrofotômetro. Os resultados obtidos das
absorbâncias estão expostos na Tabela 2:

Tabela 2. Absorbâncias feito em triplicatas

Tubo Concentração Absorbância Absorbância Absorbância
(mg/ml) 1 2 3
1 0 0 0 0
2 0,1 0,171 0,172 0,170
3 0,2 0,255 0,234 0,242
4 0,3 0,321 0,337 0,335
 5 0,4 0,414 0,414 0,434
6 0,5 0,547 0,544 0,549
7 0,6 0,602 0,604 0,605
8 0,7 0,695 0,725 0,743
9 0,8 0,800 0,797 0,794
10 0,9 0,891 0,888 0,892
11 1,0 0,988 0,993 1,002
Com os valores das absorbâncias feito em triplicata, fez-se uma média,
essa apresentada na tabela 3:

Tabela 3. Média das absorbâncias

Tubo Concentração Média das
(mg/ml) absorbâncias
1 0 0
2 0,1 0,171
3 0,2 0,244
4 0,3 0,331
5 0,4 0,421
6 0,5 0,547
7 0,6 0,604
8 0,7 0,721
9 0,8 0,797
10 0,9 0,890
11 1,0 0,994
Notou-se que a absorbância está de acordo com a Lei de Beer, onde o
limite de leitura é confiável, estando entre 0 até 1. Dessa forma, a partir do
método de DNS foi possível determinar os açúcares redutores e construir a
curva padrão de concentração de glicose+ frutose (mg/ml) pela absorbância,
utilizando todos os pontos, essa representada pela figura abaixo:
 Figura 1. Gráfico dos resultados da curva padrão Glicose+ Frutose

Portanto, através da curva padrão foi verificado que se obteve uma

equação da reta de regressão linear dos dados igual a y: 0,095x-0,0508 e o
coeficiente R2=0,9957. Umas das formas de avaliar a qualidade do ajuste do
método testado é através do coeficiente de determinação (R 2). Dessa forma,
este coeficiente indica quanto o método realizado foi capaz de explicar os dados
coletados, sendo que quanto mais próximo de 1, mais os dados representam o
modelo de regressão linear, ou seja, mais confiança se tem nos dados.

Como visto, a curva padrão obtida possui um coeficiente de

determinação de 0,9957 podendo assim ser utilizada para determinar futuras
concentrações de outras amostras em experimentos posteriores.

3.CONCLUSÃO
Esse trabalho proporcionou o entendimento e a construção da curva
padrão de glicose e frutose segundo o método de Miller. Analisando a curva
padrão e o coeficiente de determinação, podemos observar que o
comportamento apresentado teve linearidade entre a absorbância e a
concentração, desta forma os dados obtidos estavam corretos
4. REFERÊNCIAS
SANTOS, V. S. et al. Glicose

MEDEIROS, I. D. D. et al. Frutas Que Encantam e Curam, Vol. 1 página 60,

2017.

DORNEMANN, G. M. et al. Comparação de métodos para determinação de

açúcares redutores e não-redutores 2016.

VERAS, Flavio Protásio et al. Bioquímica Prática: Protocolos para análise de

biomoléculas e exercícios complementares. 2013.

Protocolo para determinação de açúcares totais em hortaliças pelo método de

DNS, Embrapa,2013.Disponível em:
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/81580/1/cot-85.pdf . Acesso
em: 02 de fev. de 2021