Universidade Federal de Minas Gerais

Campus Regional de Montes Claros

Instituto de Cincias Agrrias
Engenharia de Alimentos

RELATRIO - PRTICA N O 02
MEDIDA DO AUCAR

Aluna: Diene Sara Lopes Souza

Professor: Igor Viana Brandi
Tcnico: Sandro Soares
Disciplina: Laboratrio de Engenharia Bioqumica

MONTES CLAROS MG
Agosto/2017
Introduo
Acares redutores so carboidratos que possuem seu grupo carbonlico livre,
capazes de se oxidar na presena de agentes oxidantes em soluo alcalina dentre os
acares redutores, duas hexoses particularmente importantes para a indstria,
especialmente a de alimentos, so a glicose e a frutose. (SANTOS et al, 2016)
Com o crescente avano tecnolgico, encontra-se cada vez mais em indstrias
novos equipamentos que do resultados mais eficazes e em menor tempo. Os mtodos
instrumentais esto sendo expandidos para a escala industrial e abrangem as mais diversas
anlises nas inmeras reas de atuao na indstria qumica. Um exemplo disso so os
mtodos espectrofotomtricos, como o caso do mtodo em estudo, o mtodo do DNS.
um mtodo rpido e prtico na determinao de acares redutores, e tem grande
aplicabilidade industrial (Scribed 2010).
No controle de qualidade envolve a caracterizao das matrias primas para fins de
processamento, e verificao se determinado produto est dentro dos parmetros e
padres exigidos pela legislao. Na indstria aucareira, serve para controlar se o acar,
a sacarose, quando hidrolisado sofreu processo de reduo, que no to facilmente
percebido no acompanhamento do processo. (Ebah 2014).
A espectrofotometria uma das ferramentas mais teis disponveis para a realizao
de uma anlise quantitativa. No procedimento bsico, um feixe de energia atravessa a
soluo, e sua absoro oferece informaes sobre a qualidade e quantidade dos
componentes presentes. Para as anlises espectrofotomtricas, a faixa do espectro de
radiao mais utilizada vai do ultravioleta ( = 200nm) at o infravermelho ( = 1000 nm),
passando pela faixa do visvel, que vai de 400 a 750nm. possvel obter comprimentos de
onda que sejam especficos, atravs da construo de uma curva de absoro espectral,
onde a substncia a ser analisada colocada no recipiente chamado de cubeta. Nele, os
comprimentos de onda do UV at o IV atravessam esse recipiente, e a absoro de cada
faixa medida. O comprimento de onda a ser ajustado no aparelho ser aquele onde tiver
ocorrido a maior absorbncia, pois, em resumo, se trata do pico de absoro de energia
pela molcula (Ebah 2012).
No mtodo utilizado, o cido 3,5-dinitrosaliclico reduzido a cido 3-amino-5-
nitroslico, enquanto o grupo aldedo (-CHO) do acar oxidado, tornando-se um grupo
carboxila (-COOH). O cido 3-amino-5-nitroslico possui colorao castanha, o que indica
a presena de acar redutor na amostra analisada. O cido 3-amino-5-nitroslico absorve
a luz a 540 nm, e sabendo dessa informao, possvel analisar a concentrao do acar
redutor na soluo de acar e cido 3-amino-5-nitroslico. (Ebah 2012).

Objetivo
Construir a curva padro de glicose, plotando absorbncia x concentrao e, atravs
de regresso linear, determinar a equao da curva e o coeficiente de correlao.

Materiais e Mtodos
Foram utilizados tubos de ensaio; Pipeta volumtrica; Pipetador; gua destilada;
Soluo padro de glicose; Reagente DNS; Banho Maria; Estante para tubos de ensaio;
Becker; e Espectrofotmetro.

1 Experimento
Para realizar o experimento Utilizamos: 1 Tubo: (branco) 1mLde gua como
amostra em lugar da soluo de glicose e 0,5 m/L do reagente DNS, aps foram realizados
os mesmos procedimentos dos tubos da curva padro.
Outros 5 tubos de ensaio que foram separados e numerados em seguida adicionou
em cada tubo a amostra de glicose padro visando as seguintes concentraes: 1g/L 0,8
g/L 0,6g/L 0,4g/L e 0,2g/L, ou seja, adicionou 1m/L no 1 tubo; 0,8m/L no 2 tubo, 0,6m/L
no 3 tubo, 0,4m/L no 4 tubo, e 0,2m/L no 5 tubo depois completou-se o volume dos
tubos, com H2O, a 1m/L: 0 m/L no 1 tubo; 0,2m/L no 2 tubo; 0,4m/L no 3 tubo; 0,6m/L no
4 tubo e 0,8m/L no 5 tubo, logo aps em cada um dos tubos foram adicionadas 0,5m/L do
reagente DNS, ento esses tubos foram levados ao banho Maria durante 5 minutos a uma
temperatura de 100C, em seguida, foram retirados e resfriados em gua corrente. Depois
adicionou a cada tubo 8,5m/L de gua destilada para elevar o volume a 10m/L. em seguida
os tubos foram homogeneizamos no vortex e levados para o espectrofotmetro,
devidamente calibrado com gua, para ler as cores no comprimento de onda de 540nm
(=540nm)
2 Experimento
Foi realizada a diluio do suco de uva, nas propores de 1:10, 1:100, 1:1000 e
1:10000, adicionamos ento 9m/L de gua em um tubo e acrescentamos 1m/L de suco, a
partir desse tubo passamos 1m/L para os outros tubos e assim foram feitas as diluies
seriadas, logo aps pegamos 1m/L de cada tubo e acrescentamos 0,5 m/L do reagente
DNS, ento os tubos foram aquecidos em banho Maria durante 5 minutos e uma
temperatura de 100C, depois foram retirados resfriados em gua corrente, em seguida
acrescentamos 8,5m/L de gua destilada para elevar o volume a 10m/L, homogeneizamos
e levamos para o espectrofotmetro.

Resultado e Discusso

A prtica realizada teve como objetivo a determinao de aucares redutores atravs

do aquecimento da amostra, contendo um reagente, no caso o cido dinitrosaliclico (DNS).
Esse cido possui originalmente colorao amarelada, e quando reage com o grupo aldedo
do acar, forma um composto castanho-alaranjado.

Para determinar a curva de absoro, foi ligado o espectrofotmetro e colocado o

contedo dos tubos em uma cubeta que foi inserida no interior do equipamento, s que
antes o tubo 1 (branco) foi usado para calibrar/zerar o equipamento nos diferentes
comprimentos de onda () a serem analisados antes da leitura de absorbncia dos outros
tubos, aps a leitura os resultados foram anotados e atravs do Excel foi construdo o
grfico
 O grfico demonstra a equao obtida pela plotagem dos dados, e o seu coeficiente
de correlao linear:

Curva padro da glicose

0.09
0.08 y = 0.072x + 0.0078
R = 0.9874
0.07
0.06
Absorbncia

0.05
0.04
0.03
0.02
0.01
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2
amostras (g/L)

Fonte: Prprio autor

Aps a leitura da absorbncia do suco de uva, foi possvel calcular a concentrao

de acar (1:10) atravs da equao da reta (equao 1) obtida atravs da curva padro,
em seguida para encontrar o valor de x, substitumos o valor de y da equao da reta pela
absorbncia da diluio 1:10 que foi igual a 0,250 (equao 2)
(1) Y=0.072x + 0,0078
(2) 0,250= 0,072x +0,0078

Aps a realizao dos clculos encontrou-se 33,64% de concentrao de acar,

sendo este valor divergente do apresentado no rtulo do produto que consta um teor de
11,5% de carboidratos por 100m/L, esta diferena pode ser atribuda a erros durante o
procedimento e ao equipamento utilizado.
Concluso
O mtodo do DNS considerado um mtodo barato e conveniente, entretanto a sua
especificidade baixa, podendo haver muitos interferentes durante a identificao da
reao. Desta forma necessrio para cada anlise construir uma curva padro para poder
minimizar estes possveis interferentes.

Referncias
1- DETERMINAO de acares redutores mtodo DNS, 2014. Disponvel em:
<http://www.ebah.com.br/content/ABAAAg6NkAF/05-determinacao-acucares-redutores-
metodo-dns>. Acesso em: 28 ago. 2017.

2- FUNDAMENTOS e aplicaes da espectrofotometria, 2012. Disponvel em:

<http://www.ebah.com.br/content/ABAAAfbDkAC/relatorio-instrumental> Acesso em: 28
ago. 2017

3- RELATRIO de bioqumica determinao de aucares redutores DNS, 2009.

Disponvel em: <https://pt.scribd.com/doc/62380016/2%C2%BA-Relatorio-de-Bioquimica-
Determinacao-de-Acucares-Redutores-DNS>. Acesso em: 28 ago. 2017.

4- SANTOS, ngela Alves dos et al. Dosagem de acares redutores com o reativo DNS
em microplaca. Braz. J. Food Technol. Campinas, v. 20, e2015113, 2017. Disponvel em
<http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1981-
67232017000100402&lng=pt&tlng=pt>. Acesso em: 28 ago. 2017. Epub 26-Jan-
2017. http://dx.doi.org/10.1590/1981-6723.11315.