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Ceramics International 44 (2018) 3726–3733

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Cerâmica Internacional

página inicial da revista: www.elsevier.com/locate/ceramint

Biocompatibilidade e fotoluminescência de SiO2-Gd2O3 dopado com Sm3+ : um

T
promissor fósforo vermelho não tóxico para rastreamento de membrana plasmática

Leonardo Alves Rocha , Paulo Henrique Almeida Campos-Júnior , Jennifer Esbenshadeb,

Renato Luiz Siqueirac , Marco Antonio Schiavona , Jefferson Luis Ferraria,ÿ
aDepartamento de Ciências Naturais, Universidade Federal de São João del-Rei, Campus Dom Bosco, São João del-Rei, MG 36301-160, Brasil bDepartamento
de Engenharia de Materiais, Centro de Pesquisa, Tecnologia e Ensino em Materiais Vítreos, Universidade Federal de São Carlos, São Carlos, SP 13.565-905,
Brasil
c
Departamento de Química e Física, Universidade do Tennessee em Martin, Martin, TN, EUA

INFORMAÇÕES DO ARTIGO ABSTRATO

Palavras-chave: Compósitos SiO2-Gd2O3 dopados com Sm3+ foram obtidos pelo processo sol-gel, e a porcentagem ideal de Sm3+ foi
Processos sol-gel (A) avaliada para aplicações em bioimagem. Por XRD, observou-se a formação de materiais cúbicos de Gd2O3 , e TEM mostra
Nanocompósitos (B) que as partículas de Gd2O3 estão dispersas em uma rede de SiO2. Os espectros PLE confirmam as principais bandas de
Aplicações biomédicas (E) absorção na região do UV e a emissão mostra a excitação mais eficiente em 275 nm. Os resultados de PL revelam a
Imagem celular
incorporação de Sm3+ em estruturas de Gd2O3 e levam ao entendimento da eficiente transferência de energia entre Gd3+
e Sm3+ nos materiais. O mecanismo é proposto e discutido. A plotagem CIE mostra as coordenadas de cor nas regiões
laranja e vermelha, dependendo principalmente da fonte de excitação. As posições Sm3+ em Gd2O3 são discutidas usando
os resultados obtidos nos espectros de emissão. Os materiais apresentaram altos valores de vida útil, entre 1,53 e 1,82 ms.
Os fósforos mostram propriedades de ajuste e melhor desempenho como fósforos vermelhos quando excitados a 275 nm.
A viabilidade celular foi realizada e o material é atóxico. Os materiais foram avaliados como marcadores biológicos, e
apresentam fluorescência sob filtros de emissão de rodamina. SiO2-Gd2O3:Sm3+ demonstra um bom índice de viabilidade
e co-localiza com marcadores de células de membrana, mostrando um material promissor para rastreamento celular. O
material também demonstra potencial para direcionamento de câncer.

1. Introdução
Os fósforos consistem em materiais que possuem um fenômeno de luminescência,
emitindo luz quando estimulados por uma radiação de material hospedeiro de UV ou
um feixe de elétrons [1]. Os fósforos inorgânicos ativados por terras raras (RE3+) têm
um papel importante no desenvolvimento de dispositivos fotônicos baseados no
sistema RGB (vermelho/azul/verde). Eu3+, Ce3+/Eu2+ e Tb3+ são os mais utilizados
como ativadores/sensibilizadores fotoluminescentes para os componentes vermelho,
azul e verde, respectivamente [1].
O Eu3+, devido a sua emissão pura na região do vermelho e altos valores de
tempo de vida [2,3], é usado nos principais fósforos vermelhos como Y2O2S:Eu3+,
Y2O3:Eu3+ e YVO4:Eu3+, luminóforos vermelhos comerciais atuais [4] .
No entanto, esses materiais já são considerados inviáveis [2] e estudos para fósforos
vermelhos alternativos eficientes estão em desenvolvimento, tanto livres de terras
raras4 quanto contendo RE3+ [5]. Por causa disso, os fósforos baseados em Sm3+
mostraram resultados promissores [6].
O Sm3+ pode ativar a fotoluminescência em seu hospedeiro devido às suas
transições ff bem descritas [7]. As emissões na região do visível são
4 6 6 6 6 6
atribuído a 2 G5/2 ÿ HJ, J variando entre H11/2, H9/2, H7/2 e H5/
resultando em emissões em aproximadamente 700, 660, 610 e 580 nm, respectivamente
[8]. Devido às suas três bandas na região do vermelho, os materiais dopados com
Sm3+ podem resultar em fósforos vermelhos únicos. As emissões de Sm3+ podem
ser controladas pelo hospedeiro devido às transições serem permitidas por dipolo
elétrico [9], coordenadas de cores CIE distintas podem ser obtidas em diferentes
materiais contendo Sm3+ [6].
Hospedeiros Gd2O3 mostraram bons resultados no desenvolvimento de fósforo
devido a propriedades como sua rede fônon de baixa energia (600 cm-1 ), estabilidade
térmica e durabilidade química, alta absorção na região UV e compatibilidade com
dopante RE3+ [10-15]. Os materiais Gd2O3 dopados com Sm3+ são relatados na
literatura como tendo boas propriedades fotoluminescentes [10–13] devido à
possibilidade de transferência de energia entre o hospedeiro e o Sm3+, que foi
relatado como mais eficiente do que no Y2O3:Sm3+, um bom hospedeiro conhecido
[13].
Estudos anteriores mostram que essas propriedades melhoram quando partículas
dopadas com Gd2O3 são encapsuladas por SiO2, no qual o SiO2 atua na superfície
do Gd2O3 , reduzindo os defeitos superficiais, favorecendo maiores valores de vida útil

ÿ Correspondência para: Universidade Federal de São João del-Rei, Departamento de Ciências Naturais, Praça Dom Helvécio, 74 - Fábricas, São João Del Rei, MG, Brasil.
E-mail: jeffersonferrari@gmail.com (JL Ferrari).

https://doi.org/10.1016/j.ceramint.2017.11.153 Recebido
em 6 de outubro de 2017; Recebido em forma revisada em 17 de novembro de 2017; Aceito em 21 de novembro de
2017 Disponível online em 22 de novembro
de 2017 0272-8842/ © 2017 Elsevier Ltd e Techna Group Srl Todos os direitos reservados.
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Fig. 1. Padrões XRD para Gd2O3-SiO2 dopado com Sm3+ obtidos a 1000 °C.
e protegendo os fósforos dos processos de oxidação [3]. A composição binária MOx-
SiO2 também pode ser utilizada para obtenção de filmes finos e materiais
vitrocerâmicos, e o encapsulamento por SiO2 possibilita a obtenção de fósforos com
boa biocompatibilidade, parâmetro importante para aplicações biológicas [16].
Fósforos biocompatíveis têm sido usados como marcadores biológicos, como
rastreadores celulares, permitindo obter informações sobre as propriedades da
membrana celular e suas interações com outras proteínas. Propriedades como
transdução de sinal óptico, alta sensibilidade e resposta rápida, boa fotoestabilidade,
bandas de emissão estreitas e grandes deslocamentos de Stokes tornam os materiais
contendo terras raras bons biomarcadores, e seus valores conhecidos de longa vida
útil podem ser explorados para esquemas de detecção retardada [ 17,18 ].
Este trabalho visa a obtenção de materiais SiO2-Gd2O3 dopados com Sm3+ pelo
processo sol-gel. O uso de Sm3+ como uma sonda estrutural é discutido com base
3727
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em resultados de luminescência. Um estudo sobre o processo de transferência de
energia é apresentado e avaliado como o mecanismo predominante que favorece a
emissão de Sm3+ nos materiais. A influência dos materiais na viabilidade celular é
avaliada, e sua aplicação como agente de rastreamento celular é discutida
2. Materiais e métodos
2.1. Preparação de compósitos Gd2O3-SiO2 dopados com Sm3+
Compósitos Gd2O3-SiO2 dopados com Sm3+ (0,1, 0,3, 0,5 e 1 mol%) foram
sintetizados pelo processo sol-gel, com razão molar entre Si4+ e Gd3+ de 70 e 30,
respectivamente [3]. Ortossilicato de tetraetila - TEOS (Sigma Aldrich - 98%) foi
utilizado como precursor. Gd2O3 (Sigma Aldrich - 99,99%) e Sm2O3 (Sigma Aldrich -
99,99%) foram dissolvidos em solução de ácido clorídrico (Vetec - 37%) e água
(proporção de HCl:H2O = 1 mL:10 mL, respectivamente), e o o solvente foi trocado
primeiro por água e finalmente por etanol anidro (Synth – 99,80%), resultando em
soluções etanólicas Sm3+ e Gd3+ . Essas soluções precursoras foram padronizadas
via titulação complexométrica utilizando ácido etilenodiamino tetraacético - EDTA
0,01 mol Lÿ1 (Dinâmica) em pH = 5,45.
Compósitos SiO2-Gd2O3 dopados com Sm3+ foram obtidos a partir de soluções com
concentração de 0,445 mol Lÿ1 de [Gd3++Si4+]. TEOS e HCl com razão molar de
50:1 foram adicionados a um béquer e o volume foi preenchido com
etanol para 10 mL (solução 1). Soluções contendo Gd3+ e Sm3+ foram adicionadas
a outro béquer e o volume foi diluído para 10 mL
(solução 2). Ambas as soluções foram mantidas sob agitação por 15 min e então
misturadas. A solução final foi mantida sob agitação em temperatura ambiente por
30 min para obtenção do sol. Os xerogéis foram obtidos por secagem em estufa a 60
°C por 24 horas. Os xerogéis obtidos foram pulverizados em um almofariz de ágata
seguido de um tratamento térmico da temperatura ambiente a 1000 °C durante 8 h
(taxa de aquecimento: 10 °C/min).
2.2. Preparação da suspensão de materiais SiO2-Gd2O3:Sm3+
Inicialmente uma massa de 100 mg de SiO2-Gd2O3:Sm3+ foi suspensa em 2 mL
em dimetilsulfóxido (Sigma Aldrich – 99,9%) e agitada por 30 min. Após a
homogeneização, a solução foi dispersa por sonicação por 45 min. A concentração
do material SiO2-Gd2O3:Sm3+ em solução foi de 50 mg mLÿ1 e, a partir dessa
solução homogênea, foram obtidas soluções com diferentes concentrações utilizando
solvente salino tamponado com fosfato – PBS (Ingamed, Paraná, Brasil).
2.3. Caracterização
A difração de raios X foi realizada operando um Shimadzu XRD 6000 com
radiação Cu Kÿ = 1,5418 Å, monocromador de grafite, com passo
Fig. 2. (a) Imagens TEM e (b) HRTEM para Gd2O3- SiO2
dopado com Sm3+ a 0,1 mol%.
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Fig. 3. Espectros de excitação obtidos para materiais SiO2-Gd2O3 dopados com Sm3+ .

Fig. 5. Esquema representando (a) absorção de um fóton por Gd3+ e transferência para Sm3+ e (b) níveis
de energia com possível mecanismo de transferência de energia entre Gd3+ e Sm3+ em
materiais.

Tabela 1
6
Razões percentuais para áreas de emissão Sm3+ 4G5/2 ÿ HJ (J = 5/2, 7/2, 9/2 e 11/2) em materiais SiO2-
Gd2O3 dopados com Sm3+ com excitação fixada em 275 nm.

4
Transição G5/2 ÿ 0,1% Sm3+ 0,3% Sm3+ 0,5% Sm3+ 1% Sm3+

6
H11/2 2.5 2.1 2.5 2.5
6
H9/2 11.9 13.9 15,5 17.7
6
H7/2 53.3 49,5 48,9 46,7
6
H5/2 32.3 34,5 33.1 33.1

na região entre 200 e 380 nm com largura de fenda de excitação e emissão de 3 nm e 2 nm,
respectivamente, e fixando o comprimento de onda G5/2 , o nível de energia de Sm3+ foi
4
obtido em temperatura ambiente usando uma emitido em 610 nm. O tempo de vida
excitação de fixação de lâmpada pulsada e emissão em 275 e 610 nm, respectivamente.

2.4. Análise de marcação celular

Para avaliar a viabilidade do SiO2-Gd2O3:Sm3+ como marcador celular, foi testada a

interação deste material com células humanas. Células de rim embrionário humano 293 (HEK

293) foram obtidas, descongeladas e cultivadas de acordo com as instruções do fornecedor

Fig. 4. Alteração do espectro de emissão: (a) comprimentos de onda de excitação e (b) Sm3+ con
centralização.
de 0,02° e região 2ÿ entre 10 e 80°. As amostras foram dispersas em álcool isopropílico (sob
ultrassom 1 min), a suspensão foi colocada em uma grade de cobre com um filme de carbono
de 200 mesh e analisada usando um FEI Tecnai G2 F20 HRTEM . Os espectros de emissão
foram coletados em um espectrofluorímetro HORIBA-Jobin Yvon Fluorolog 3, com fonte ex
citation na região do UV (230, 255, 275, 311 e 350 nm) utilizando uma lâmpada Xe de 450
W, e um fotomultiplicador foi utilizado como o detector na região do visível. Os espectros de
HEK293.2sus (ATCC®
CRL1573.3™, Virgínia, EUA) [19]. Após uma terceira passagem, as células isoladas foram
fixadas em Tampão Neutro de Formalina por 20 min (Sigma Aldrich - 10%). Em seguida,
essas células foram divididas em dois grupos: a) permeabilizadas com 1% de TRITON
X-100 (Sigma Aldrich - 10%) em PBS por 20 min e b) não permeabilizadas. Essas células
foram incubadas com SiO2- Gd2O3:Sm3+ 0,10 mg mLÿ1 durante a noite e lavadas três
vezes com PBS. Como controle negativo, algumas células foram incubadas com PBS.
Adicionalmente, foram utilizados marcadores nucleares bem descritos DAPI (Sigma Aldrich)
e membrana PKH67GL (Sigma Aldrich), também de acordo com as instruções do fornecedor.
Essas análises foram realizadas usando o microscópio ZEISS Axio Scope.A1 com HBO 50,
e as imagens foram capturadas usando o software ZEISS AxioCam MRc e AxioVision LE
4.8.1 em DAPI (BP 420–480 nm), FITC (BP 505–530 nm), e filtros de emissão de rodamina
(Meta 560–615 nm).

emissão foram coletados em temperatura ambiente na região entre 400 e 750 nm, com
largura de fenda de excitação e emissão de 3 nm e 2 nm, respectivamente, usando corte de
filtro abaixo de 399 nm. Os sinais de fotoluminescência foram coletados em um ângulo de
30° em relação à fonte de excitação usando o modo de face frontal (FFM). Os espectros de 2.5. Viabilidade de células HEK 293 com incubação de SiO2-Gd2O3:Sm3+
excitação foram coletados à temperatura ambiente
Células HEK 293 pós-descongeladas foram incubadas com SiO2-Gd2O3 contendo
Sm3+ a 0,1 mol% em diferentes concentrações de massa (0 - controle,

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Fig. 6. Gráficos CIE 1932 para (a) material Gd2O3-SiO2 contendo 0,1% de Sm3+ quando comprimentos
de onda de excitação variados e (b) quando excitação fixa em 275 nm e concentrações variadas de Sm3+ .
0,05, 0,1 e 0,2 mg mLÿ1 ) em Meio Hepes (Ingamed, Paraná, Brasil),
suplementado com 10% de Soro Fetal Bovino (FBS, Ingamed, Paraná, Brasil).
Um teste de exclusão Trypan Blue (Sigma Aldrich) foi realizado em todas as
amostras em 6, 12, 24 e 48 h de incubação, a fim de determinar o número de
células viáveis presentes em uma suspensão celular [20] .
O número de células viáveis e inviáveis foi avaliado usando câmara de Neubauer
(Sigma Aldrich), e o índice de viabilidade foi calculado pela porcentagem de
células viáveis incubadas em cada concentração menos a porcentagem de
células viáveis no grupo controle· H2O2 foi usado como positivo controle da
citotoxicidade [21]. Finalmente, para avaliar a viabilidade de SiO2-Gd2O3
contendo Sm3+ a 0,1 mol% como rastreador celular, esse material (0,10 mg
mLÿ1 ) foi incubado com PKH67 fresco marcado por uma hora e posteriormente
essas células foram lavadas três vezes e incubadas por 24 h (meio Hepes
suplementado com 10% de FBS).
Em seguida, essas células foram avaliadas no microscópio ZEISS Axio
Scope.A1 conforme descrito anteriormente. Todos os testes de viabilidade
foram realizados em triplicata e os resultados obtidos foram analisados
estatisticamente por ANOVA seguida pelo teste de Newman-Keuls.
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Fig. 7. Curvas de decaimento de luminescência Sm3+ obtidas para materiais Gd2O3-SiO2 dopados com
Sm3+ .
3 Resultados e discussão
Os padrões XRD de Gd2O3-SiO2 dopado com Sm3+ (Fig. 1) mostram picos
muito bem definidos posicionados em 2ÿ = 20,08°, 28,58°, 33,12°, 47,52° e
56,40°. Esses picos foram indexados a (211), (222), (400), (440) e (622), planos
de reflexão hkl para Ia-3 (206) grupo espacial da fase cúbica Gd2O3 (cartão
JCPDS 00-012-0797 ) [22]. Não foram observados vestígios de fases de
impurezas, indicando a inserção efetiva de Sm3+ na matriz hospedeira SiO2-
Gd2O3 .
Usando o método de Scherrer (Eq. (1)), os tamanhos dos cristalitos foram
avaliados. Na equação, D é o tamanho do cristalito, K é o fator de forma (para
partículas esféricas K = 0,89), ÿ é o comprimento de onda dos raios X (1,5418
Å) e ÿ é a largura total na metade do máximo (FWHM) da maioria pico intenso
(plano (222) localizado em 2ÿ = 28,56°). Os valores de ÿ foram ajustados de
acordo com a Eq. (2), em que ÿinst e ÿexp são FWHM instrumentais e
experimentais dos picos, respectivamente. Os FWHM instrumentais utilizados
foram coletados a partir da difração de pó de silício padrão 99%, 325 mesh,
SHIMADZU [23].
Kÿ.
D = hkl
ÿ hkl cos ÿ (1)
ÿhkl= ÿ 2ÿexpÿ 2
instantes (2)
Os valores de tamanho de cristalitos obtidos foram 59, 63, 72 e 68 nm, para
materiais contendo 0,1, 0,3, 0,5 e 1 mol% de Sm3+, respectivamente. Como
mostrado em trabalhos anteriores, o tamanho do íon dopante afeta diretamente a
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Fig. 8. Imagens de fluorescência para células HEK 293 fixas contendo SiO2-Gd2O3:0,1 mol% Sm3+ (a) permeabilizadas e (e) não permeabilizadas. Coloração dupla com (c) DAPI ou (d) DAPI
e PKH67-GL (d e e). (f) Controle negativo. Barras em a, b, c e d = 20 µm, e = 10 µm.
Parâmetros do cristalito Gd2O3 [24], e o resultado demonstra um aumento
no volume de uma célula a partir da inserção de Sm3+ na estrutura cristalina
do Gd2O3 . Devido a uma razão maior que 1 entre os raios iônicos Sm3+/
Gd3+, Sm3+ na estrutura cúbica de Gd2O3 ocupa sítios S6 [25], e porque
Sm3+ tem raios iônicos maiores que Gd3+ [26], isso pode causar distorções
na rede , promovendo a formação de cristais maiores.
Ao utilizar o sistema binário SiO2-Gd2O3, estudos revelam que em
temperaturas de até 1250 °C esses materiais apresentam a fase cúbica de
Gd2O3 [24]. A 1000 °C a fração SiO2 , que está presente, não é detectada
por XRD, pois está presente como uma fase amorfa [3]. A Fig. 2 mostra a
micrografia TEM do SiO2-Gd2O3 contendo Sm3+ a 0,1 mol%, e revela que
nos materiais o processo de densificação ocorre simultaneamente com a
cristalização do Gd2O3. Este resultado sugere que as partículas nanométricas
de Gd2O3 estão dispersas em SiO2 e esta morfologia pode resultar em
fósforos mais estáveis e biocompatíveis. Tian et ai. estudaram recentemente
o efeito do encapsulamento de Gd2O3 por SiO2 como um sistema core-
shell, e os autores concluíram que o encapsulamento fornece citotoxicidade
satisfatória, apoptose mínima in vitro e imunotoxicidade mínima in vivo [27].
Este encapsulamento pode aumentar o tamanho da partícula, bem como
resultar na passivação da superfície de Gd2O3 , reduzindo
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a ocorrência de toxicidade local ou sistêmica devido ao acúmulo tecidual.
Para materiais à base de Gd2O3, o Sm3+ apresenta a emissão atribuída
à transição 4 G5/2ÿ6 H7/2 a aproximadamente 610 nm [13,28].
Monitorando esta emissão, os espectros de excitação foram coletados e os
resultados são mostrados na Fig. 3. Os espectros de excitação revelam que
as principais absorções estão em 230, 245, 255, 275 e 311 nm. A banda
posicionada em 230 nm é atribuída à absorção do hospedeiro Gd2O3 ,
devido à transição da banda de valência para a banda de condução. As
8 6
e 311 nm são atribuídos à transição de bandas nos níveis 255,DJ,
275 S7/2 a G
6
IJ e 6 PJ, respectivamente [29], e esses resultados são reforçados pela
alta absorção de fótons UV pelo Gd2O3 [24]. A banda posicionada em 245
nm, não está relacionada à absorção de Gd2O3 , podendo estar associada
à transferência de carga O2-ÿSm3+ . A grande absorção na região do UV é
uma característica ideal para aplicações como conversão de energia e
marcadores biológicos.
A Fig. 4(a) apresenta os espectros de emissão coletados nas principais
bandas observadas nos espectros de excitação. A excitação em 230, 245,
4
255, 275 e 311 nm resultou em emissões de Sm3+ atribuídas às transições
G5/ 2ÿ6 HJ (onde J = 5/2, 7/2, 9/2 e 11/2). A excitação em 275 nm resulta
em fotoluminescência mais forte e bandas de emissão Sm3+ bem definidas .
Isso leva à conclusão de que a excitação neste
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Fig. 9. (a) Índices de viabilidade de células HEK293 incubadas com SiO2-Gd2O3 contendo
Sm3+ a 0,1 mol% (0,05, 0,1 e 0,2 mg mL-1) em 6, 12, 24 e 48 h. Culturas celulares em
controle (b e e), H2O2 controle positivo (c e f) e com 0,2 mg mLÿ1 de SiO2-Gd2O3:Sm3+ (d e
g) incubadas por 1 h. A porcentagem de células viáveis e inviáveis em cada grupo é mostrada
nos painéis HJ. As setas brancas indicam células vivas e as setas pretas indicam células
mortas. Barras em b, c e d = 50 µm, enquanto e, f e g = 10 µm.
6 dupla com marcadores nucleares e de membrana bem estabelecidos (c) DAPI, a
comprimento de onda, atribuído à absorção pelo níveis IJ de Gd3+, faça um
eficiente processo de transferência de energia, favorecendo a fotoluminescência Sm3+ .
A Fig. 4(b) mostra a excitação de fixação do espectro de emissão em 275 nm, para todos os materiais
contendo Sm3+. Todos os materiais apresentaram fotoluminescência intensa de Sm3+, atribuída às
transições 4 G5/2ÿ6 H11/2, 4 G5/2ÿ6 H9/2, G5/ 2ÿ6 H7/2 e 4 G5/2ÿ6 H5/2 a 705, 654, 610 e 580 nm,
respectivamente. As bandas nos espectros de emissão apresentaram uma divisão, um efeito causado pela
interação do campo cristalino, resultando em divisão nos subníveis 2J+1 [30]. Este efeito também pode ser
atribuído a Sm3+ que pode ocupar dois sítios de simetria diferentes na estrutura Gd2O3 (C2 e S6).
Os resultados obtidos nos espectros de emissão revelam a eficiente transferência
de energia entre Gd3+ e Sm3+. Esses resultados confirmam a dopagem de Sm3+ na
estrutura de Gd2O3 e, com base nos níveis de energia de Gd3+ e Sm3+ [31,32], o
mecanismo de transferência de energia é proposto e representado na Fig. 5. O
mecanismo está intimamente relacionado a Gd3+ e Dy3+, com a excitação mais
eficiente em 275 nm [24], devido aos níveis de energia IJ de Gd3+ e os níveis de
6 sistemas core-shell baseados em Gd2O3@SiO2, onde a baixa citotoxicidade foi
dopante (4 I9/2 proximidade entre Sm3+).
Quando os materiais são excitados a 275 nm, o Gd3+ absorve eficientemente os
8 6
fóton, excitando o elétron de [30]. A partir S7/2 para o mais enérgico
deste estado, a proximidade energética com nível de energia
de Sm3+ causa uma transferência de energia entre Gd3+ e Sm3+. De
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4
o nível Sm3+ 4I9/2 , decaimentos não radiativos ocorrem em nível de energia G5/2 ,
6 6 6 6
e a partir disso ocorre o decaimento radiativo paraH11/2, H7/2
os níveis de energia e H5/2 ,
H9/2,
resultando em emissões de Sm3+ em aproximadamente 705, 654, 610 e 580 nm,
respectivamente.
4 6 4 6
O G5/2 ÿ H5/2 e As transições G5/2 ÿ H7/2 podem ser usadas como
referência sobre a localização do Sm3+ em uma estrutura cristalina, uma vez que essas
4
transições apresentam caráter de dipolo magnético [33]. O G5/2 ÿ
6
A transição H9/2 (ÿJ = 2) apresenta alto caráter de dipolo elétrico, podendo ser
utilizada como sonda estrutural devido a sua hipersensibilidade. Conforme discutido
nos resultados estruturais, o Sm3+ tende a ocupar sítios S6 na estrutura do Gd2O3 ,
devido à razão dos raios iônicos Sm3+/Gd3+ apresentar um valor 4 G5/2ÿ6 HJ (J = 5/2,
razões percentuais para as áreas de emissão 7/2, 9/2 e maior que 1 [25] . As
11/2) podem ser mostradas claramente como a principal emissão, bem como o local
predominante que o Sm3+ ocupa na estrutura [30], e neste sentido foi calculado para
todos os materiais. Os resultados 4 G5/2ÿ6 H7/2 apresentados na Tabela 1 confirmam
intensidade de emissão, e revelam baixas mudanças nas razões com a alta
concentrações variadas de Sm3+ . Esses resultados confirmam que o Sm3+ ocupa
preferencialmente os sítios S6 na estrutura do Gd2O3 .
Usando espectros de emissão, os diagramas CIE 1932 também foram plotados
para estudar a cromaticidade de materiais dopados com Sm3+- . Os diagramas de
cromaticidade obtidos são mostrados na Fig. 6. Os resultados mostram as coordenadas
CIE, onde quando os comprimentos de onda de excitação são aumentados de 230 para
275 nm, observa-se um deslocamento da região laranja para a vermelha. Não há
mudanças significativas observadas para a cromaticidade quando as quantidades de
Sm3+ são variadas.
As curvas de decaimento obtidas para todos os materiais, detectadas em 610 nm
com excitação fixada em 275 nm, são mostradas na Fig. 7(a). Essas curvas foram
4
ajustadas como um primeiro decaimento exponencial e o foi Decaimento da vida útil G5/2
estimado. Os valores obtidos, conforme mostrado na Fig. 7(b), estão entre 1,53 e 1,82
ms, e apresentaram uma tendência de redução do tempo de vida com o aumento das
concentrações de Sm3+ . Os valores obtidos neste trabalho são superiores aos valores
relatados na literatura para os fósforos Gd2O3 dopados com Sm3+ [11,13,34], indicando
que os compósitos obtidos apresentaram melhor desempenho luminescente do que os
fósforos Gd2O3 dopados com Sm3+ . Esses resultados mostram que o material SiO2-
Gd2O3 contendo Sm3+ a 0,1 mol % apresenta propriedades que favorecem seu uso
como rastreador celular [17,18].
A Fig. 8 mostra que SiO2-Gd2O3 contendo Sm3+ a 0,1 mol% foi capaz de interagir
e marcar células HEK 293 fixadas que foram (a) permeabilizadas e (b) não
permeabilizadas. Como pode ser observado, este material interage com células (a)
permeabilizadas e (b) não permeabilizadas e foi detectado em um filtro de emissão de
rodamina, apresentando intensa fluorescência vermelha. Além disso, na coloração
sobreposição confirma que a marcação ocorre na região da membrana. A Fig. 8(d e e)
revela que o material mostra o mesmo comportamento da marcação da membrana
celular verde fluorescente PKH67GL [35]. SiO2-Gd2O3:Sm3+ co-localiza com PKH67,
indicando que este material pode ser usado como um marcador de membrana celular.
4
As interações de membrana ocorrem principalmente devido a dois fatores: i) o
crescimento de cristais Sm3+-Gd2O3 em partículas de SiO2 leva a um aumento nos
tamanhos de fósforo, que resulta em não permeabilidade no núcleo da célula, e ii) SiO2
contém uma série de As ligações –OH na superfície das nanopartículas, que podem se
ligar a biomateriais, preferencialmente em regiões de membrana [36].
Para avaliar a biocompatibilidade dos materiais SiO2-Gd2O3:Sm3+ , foram
utilizados ensaios de citotoxicidade utilizando células HEK293 incubadas. A Fig. 9(a)
mostra que o índice de viabilidade das células HEK293 incubadas com SiO2-
Gd2O3:Sm3+ não apresenta alterações estatisticamente significativas até
concentrações de 0,2 mg mLÿ1 . Resultados semelhantes foram relatados para
atribuída ao revestimento de partículas de óxido de gadolínio por uma casca de sílica
[37]. Conforme discutido neste trabalho, durante o processamento do material, partículas
de Gd2O3 foram cultivadas em uma rede de sílica e a formação desses sistemas
níveis de IJ
4 homogêneos de vitrocerâmica resulta em materiais com baixa toxicidade, similarmente
I9/2
observado para materiais core-shell.
O mesmo procedimento foi feito usando H2O2 como controle positivo para
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Fig. 10. Imagens de fluorescência sob diferentes filtros para células vivas HEK em coloração tripla com SiO2-Gd2O3 contendo Sm3+ a 0,1 mol%, DAPI e PKH67GL. Barras a e b = 20 µm, c e d
= 10 µm.

citotoxicidade [21]. Esses dados são mostrados nos painéis da Fig. 9(b–j), nos quais as
células no controle (9b) e as células contendo 0,2 mg mLÿ1 de SiO2-Gd2O3:Sm3+ (9d)
mostram viabilidade semelhante, e em ambas as células são predominantemente ao
vivo, conforme mostrado nos painéis 9(e e g), respectivamente, e também nos painéis 9(h e j). eficiente, resultando em materiais com intensa fotoluminescência e maior
Os resultados positivos de viabilidade em células HEK293 levam à conclusão de
que o material SiO2-Gd2O3:Sm3+ pode ser usado no rastreamento de células, inclusive
com células vivas. A Fig. 10 mostra os resultados de fluorescência obtidos para o material
em células HEK293 vivas, e os resultados são semelhantes aos observados em células
HEK293 fixadas. O material foi capaz de rotular a célula
membranas de HEK293 vivo, e mostra fluorescência sob um filtro de emissão de
rodamina. As imagens de sobreposição confirmam que SiO2-Gd2O3:Sm3+ co-localiza
com PKH67GL [35], mostrando que a biocerâmica obtida pode ser usada como um
rastreador celular.
4. Conclusões
Gd2O3-SiO2 dopado com Sm3+ foi obtido por um processo sol-gel com sucesso.
TEM e XRD evidenciaram que após o processamento a fase cúbica de Gd2O3 foi
formada, e essas partículas cristalinas foram cultivadas em uma rede de SiO2. Os
parâmetros de rede revelaram resultados compatíveis indicando a incorporação do Sm3+
na estrutura do Gd2O3 , e o Sm3+ ocupando preferencialmente os sítios S6 na estrutura
do Gd2O3 . Os espectros de excitação revelam bandas de excitação na região do UV e,
por fotoluminescência, a excitação a 275 nm revela a transferência de energia mais
eficiente entre Gd3+ e Sm3+. A emissão Sm3+ mais intensa em 610 nm, atribuída
para o A transição 4 G5/2ÿ6 H7/2 foi influenciada diretamente nas
coordenadas de cor CIE, e os materiais mostram ser uma alternativa de
fósforo vermelho. Neste sistema, a dopagem a 0,1 mol% se mostra
tempo de vida (1,82 ms), propriedades que favorecem aplicações biológicas em fluores
Materiais SiO2-Gd2O3:Sm3+ apresentam baixa citotoxicidade, atribuída ao
encapsulamento de partículas por SiO2, resultando em biocerâmicas que se mostram
tão boas como marcadores de membrana para células fixas ou vivas em microscopia de
fluorescência, demonstrando que podem ser utilizadas como rastreadores celulares. O
material mostra uma aplicação potencial em imagens e direcionamento de câncer.
Agradecimentos
Este trabalho contou com o apoio da Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal
de Nível Superior (CAPES); Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais
(FAPEMIG); Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
(Projeto: 470157/2013-5 e 305968/2014-9). Este trabalho é um projeto de pesquisa em
colaboração de membros da Rede Mineira de Química (RQ-MG) apoiado pela FAPEMIG
(Projeto: CEX - RED-00010-14).
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