Citogenética

Citogenética molecular aplicada

ao diagnóstico clínico

Profa. Dra. Marilanda Ferreira Bellini

Laboratório de Citogenética e Biologia Molecular Humana
E-mail: marilanda.bellini@unesp.br
marilanda_bellini@yahoo.com

Objetivos
A o té rm in o d e s ta a u la o a lu n o d e v e rá s e r c a p a z d e :
– Id e n tifica r a e stru tu ra cro m o ssô m ic a ;

– C la ssifica r cro m o sso m o s d e a co rd o co m a ra zã o

q /p (m o rfo lo g ia );
– O rd e n a r o s cro m o sso m o s h u m a n o s d e a co rd o co m
g ru p o s d e cla ssifica çã o m o rfo ló g ica (ca rió tip o );
– E le n ca r o s d ife re n te s tip o s d e m a te ria is p a ra
o b te n çã o d e cro m o sso m o s;
– D e s cre ve r a s té cn ica s d e co lo ra çã o cro m o ssô m ica ;

– A p lica r té cn ica s d e cito g e n é tica n o d ia g n ó stico e

p ro g n ó stico d e p a to lo g ia s h u m a n a s.

1
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Citogenética
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
CITOGENÉTICA
C o n v e n c io n a l

G
Q
R CITO GENÉTICA
C
NOR

T GENE
CÉLULA
M o le c u la r
Características Herdáveis
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH Morfologia e Organização dos

mCGH Cromossomos
aC G H
CMA
C o n c lu in d o
3
B ib lio g r a fia S u g e r id a

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s
1956 1960 1970
C la s s ific a ç ã o F a
C a r ió tip o Tjio & Moorhead I I C S C
Levan S S G K G
C a r io g r a m a et al. H H H
A p lic a b ilid a d e H Y
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s
C ito g e n é tica C lá ssica C ito g e n é tica M o le cu la r
C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
C C B 1969 1986 1992 1996 2002
Q
A U A
R
Gall & Pinkel Kallioniemi Schröck Nakakuki
C R L N Pardue et al. et al. et al. et al.
NOR I T D
T Ó U E
M o le c u la r T R A
F IS H
I A M
M ic r o d is s e ç ã o
TC P S E
SKY O N
B a n d a m e n to C o lo r id o T
CGH O
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
4
B ib lio g r a fia S u g e r id a P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

2
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Cromossomos
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s
Braço
Cromossômico
C lá s s ic a

C o m p rim e n to C ro m o ssô m ic o
C o n v e n c io n a l
Curto (p)
G
Q
R

C
NOR

p +q
T
Braço
M o le c u la r Cromossômico
F IS H Longo (q)
M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o
Bandas
CGH Cromossômicas
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
5
B ib lio g r a fia S u g e r id a

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Cromossomos Humanos
C a r ió tip o

C a r io g r a m a 46 cromossomos
A p lic a b ilid a d e
Tijo & Levan, 1956
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
23 (origem paterna) 23 (origem materna)
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H
22 Autossomos 22 Autossomos
M ic r o d is s e ç ã o
TC
1 Sexual (X ou Y) 1 Sexual (X)
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH Cromossomos homólogos: semelhantes em tamanho,

mCGH
forma, com a mesma disposição de genes.
aC G H
CMA
C o n c lu in d o
6
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp ://u ria d ria n o .file s .w o rd p re s s .c o m /2 0 0 8 /0 7 /e s p e rm a to z o id e -e -o v u lo .jp g

3
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s Cromossomos Humanos
C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o Classificação
C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e Acrocêntrico Submetacêntrico Metacêntrico
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR 3,0 < q/p <∞ p 30% < q 1 ≤ q/p ≤ 1,7
T
M o le c u la r
1,7 < q/p ≤ 3,0
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
7
B ib lio g r a fia S u g e r id a

C ito g e n é tic a

Cromossomos Humanos
C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s
C A R IÓ T IP O x C A R IO G R A M A
P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a A u to sso m o s
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY S e xu a is
B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH
C o n s titu içã o O rg a n iza çã o
aC G H
CMA c ro m o ssô m ica cro m o ssô m ica
C o n c lu in d o

B ib lio g r a fia S u g e r id a 8

4
 Citogenética

Cariograma Grupo A Grupo B

6 maiores cromossomos Maiores submetacêntricos,
(Pares 1 a 3) após o 2
(Pares 4 e 5)
1 e 3 àmetacêntricos
2 àsubmetacêntrico

Grupo C
Submetacêntricos Grupo E
(Pares 6 a 12 + X) (Pares16 a 18)
16àmetacêntrico
Grupo D
Acrocêntricos 17 e 18 à
submetacêntricos
(Pares 13 a 15)
Região satélite
Grupo G
Grupo F
Menores Acrocêntricos
Menores metacêntricos
(Pares 21 e 22 +Y)
(Pares 19 e 20)
Região Satélite (exceto Y)
9

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Aplicabilidade:
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e Anomalias
A m o s tr a s Cromossômicas O que você
P r o c e d im e n to s
está fazendo
C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l
aqui?
G
Q
Alterações Microscopicamente
R
Visíveis
C
NOR

T
M o le c u la r
Estruturais Numéricas
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH Malformações congênitas

mCGH Incapacidade Intelectual
aC G H Distúrbios Cromossômicos Abortos Espontâneos
CMA
Infertilidade
C o n c lu in d o
10
B ib lio g r a fia S u g e r id a

5
 Citogenética

C ito g e n é tic a

Amostras
C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T 12ª a 15ª semana

M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA ≥16ª semana
C o n c lu in d o
11
B ib lio g r a fia S u g e r id a

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Amostras
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R
à Procedimentos
C
NOR
Citogenética
T
M o le c u la r
F IS H M e io d e cu ltu ra R P M I 1 6 4 0 (1 0 m L );
M ic r o d is s e ç ã o S o ro F e ta l B o vin o à 1 0 % .
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
12
B ib lio g r a fia S u g e r id a

6
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Amostras
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e Fragmentação
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s Mecânica e Enzimática
C lá s s ic a
Colagenase (0,125%),
C o n v e n c io n a l 37 o C , 5% de CO 2 /1h
G
Q ↓
R

C
Crescimento
NOR
(2 a 3 dias)
T Biópsia Meio de cultura Alfa-mem (10mL);
M o le c u la r
F IS H
Material de Aborto Soro Fetal Bovino à 10%.
M ic r o d is s e ç ã o (Placenta ou feto)
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH Procedimentos
Citogenética ß
aC G H
CMA
C o n c lu in d o
13
B ib lio g r a fia S u g e r id a

C ito g e n é tic a
Intérfase:
C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Amostras G1 = 14 a 24 horas
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
Cultura de Linfócitos S = 8 a 9 horas
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s (M oorhead et al., 1960) G2 = 2 a 3 horas
P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G 1h ou
Q
R

C
Centrifugação
NOR

T
5 mL de sangue
M o le c u la r
periférico em
F IS H seringa descartável Sedimentação
M ic r o d is s e ç ã o + anticoagulante hemácias
TC Transferir plasma +
SKY linfócitos + 5,0 mL de
B a n d a m e n to C o lo r id o
Meio de cultura RPMI
CGH 1640 + 10% de soro + 1%
mCGH
fitohemaglutinina
aC G H
CMA 70h, 37o C
C o n c lu in d o
14
B ib lio g r a fia S u g e r id a

7
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e • F ito h e m a g lu tin in a
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s
– P h a se o lu s vu lg a ris
C lá s s ic a – D e s d ife re n cia çã o
C o n v e n c io n a l

G – M ito g ê n ico
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

CMA
aC G H Fitohemaglutinina
C o n c lu in d o
15
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp s ://a lu n o s a n a lis e s c lin ic a s .w o rd p re s s .c o m /ta g /h e m a to lo g ia /

A c e s s o : 0 7 /0 9 /2 0 1 8

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
16
B ib lio g r a fia S u g e r id a P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

8
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Obtenção de Cromossomos
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e • C o lc h ic in a
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s
– C o lch iu m a u tu m n a le
C lá s s ic a – A lca ló id e
C o n v e n c io n a l

G – Im p e d e a fo rm a çã o d a fib ra d o fu so
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
17
B ib lio g r a fia S u g e r id a

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Procedimentos de Citogenética
C a r ió tip o

C a r io g r a m a Colchicina
A p lic a b ilid a d e 1,5 - 2h
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s
37o C
C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
800 a 1000 rpm
F IS H
5 min
M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o
3x
CGH 800 a 1000 rpm Solução Hipotônica Fixador
mCGH 5 min 37o C - 10 min Metanol: Ácido
aC G H
CMA KCl (0,075%) acético (3:1)
C o n c lu in d o
18
B ib lio g r a fia S u g e r id a

9
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Classificação por bandas
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e • C a ra c te riza ç ã o re a liza d a p o r té c n ic a s e s p e c ia is d e
A m o s tr a s tra ta m e n to e c o lo ra ç ã o à b a n d a s
P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q • P a d rã o d e fin id o d e s e g m e n to s c o ra d o s a o lo n g o
R

C d o c ro m o s s o m o
NOR
Banda
T C la r a
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o Banda

E s c u ra
CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
19
B ib lio g r a fia S u g e r id a

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Métodos de Coloração
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e • M étodos de C itogenética
A m o s tr a s – C onvencional (G iem sa)
P r o c e d im e n to s
– Banda G = descrim ina segm entos crom ossôm icos
C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l – Banda R = reversa de G
G
Q – Banda Q = Q uinacrina, Bandas brilhantes
R correspondem a bandas G escuras
C – Banda C = evidencia região centrom érica e
NOR
pericentrom érica
T
M o le c u la r – Banda N O R ( R O N ) = evidencia R egião O rganizadora
F IS H de N ucléolos.
M ic r o d is s e ç ã o
TC – Banda T = evidencia telôm eros
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o
• M étodos de C itogenética M olecular
CGH
mCGH – FISH
aC G H – SKY
CMA
C o n c lu in d o – CGH
20
B ib lio g r a fia S u g e r id a

10
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Coloração Convencional (Giemsa)
C a r ió tip o

C a r io g r a m a • Cromossomos corados homogeneamente;

A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s – C o n ta g e m d o s cro m o sso m o s
P r o c e d im e n to s
– C la ss ifica çã o e m 7 g ru p o s
C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l – A lte ra çõ e s G ro sse ira s
G
Q
• Alterações Numéricas
R • Alterações Estruturais
C
NOR
•P a re a m e n to cro m o ssô m ico d e 1 , 2 , 3 , 1 6 ,1 7 , 1 8 e Y .

T
Núcleo
M o le c u la r
F IS H
Metafásico
M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH Núcleo
mCGH interfásico
aC G H
CMA
Cultura de linfócitos Femininos, 44+XX,
C o n c lu in d o
Aumento final: 1000x
21
B ib lio g r a fia S u g e r id a

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Coloração Convencional (Giemsa)
C a r ió tip o

C a r io g r a m a • A lte ra ç õ e s E s tru tu ra is
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
Quebras e Gaps Cromatídicos Rearranjos Complexos
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC Cultura de Células CHO-k1
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o
Aumento final: 1000x
CGH
mCGH

aC G H
CMA Cromossomo Dicêntrico Cromossomo em Anel
C o n c lu in d o
22
B ib lio g r a fia S u g e r id a
B e llin i, M a n to v a n i 2 0 0 3 , h ttp ://g e n to x .b io .b r/? p a g e _ id = 9 2

11
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Banda G, GTG (Seabright, 1971)
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s – E n zim a : T rip sin a – d e sn a tu ra çã o d e p ro te ín a s .
P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a – C o ra n te : G ie m sa

Ou
C o n v e n c io n a l

G
Q
R – D e s n a tu ra çã o p o r C a lo r (ta m p ã o fo sfa to 0 ,0 6 M )
C
NOR – C o ra n te W rig h t
T
M o le c u la r
F IS H – D isc rim in a se g m e n to s cro m o ssô m ico s.
M ic r o d is s e ç ã o
TC • Bandas escuras (G+)à DNA rico em AT, genes
SKY pouco ativos, heterocromatina
B a n d a m e n to C o lo r id o
• Bandas claras (G-) à DNA rico em CG, genes muito
CGH ativos, eucromatina
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
23
B ib lio g r a fia S u g e r id a

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
24
B ib lio g r a fia S u g e r id a P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

12
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l
400 -500 b an d as
G
Q R esolu ção:
R

C ~ 6m ilh ões p b
NOR

T ~ 50gen es/b an d a
M o le c u la r
F IS H 5 -10 M b
M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
25
B ib lio g r a fia S u g e r id a P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a – h ttp ://w w w .u c m .e s/.../A V G /p ra c tic a s/ c a rio tip o /c a rio P .h tm

h ttp ://w w w .s c ie lo s p .o rg /s c ie lo .p h p ? p id = S 1 4 1 3 -8 1 2 3 2 0 0 2 0 0 0 3 0 0 0 1 3 & s c rip t= s c i_ a rtte x t,

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Banda G, GTG
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C Cultura de linfócitos Masculinos, 45+XY,

NOR
Trissomia do 21 – Síndrome de Down
T Aumento final: 1000x
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
Cultura de linfócitos Femininos, 44+XX,
mCGH
Aumento final: 1000x
aC G H
CMA
C o n c lu in d o
26
B ib lio g r a fia S u g e r id a B e llin i, P e ru q u e tti, O rc in i2 0 1 2 ,
h ttp ://w w w .p o lig e n e .c o m .b r/la b o ra to rio s _ flo ria n o p o lis _ a re a s _ a tu a c a o _ h u m a n a _ c ito g e n e tic a .a sp

13
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Banda G
C a r ió tip o

C a r io g r a m a – L e u ce m ia M ie ló id e C rô n ica (L M C )
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s – C ro m o sso m o P h ila d é lfia .
P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
27
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp ://w w w .u n e s p .b r/p ro p e /p ro jte c n /S a u d e /s a u d e 4 8 a .h tm ,
h ttp ://lig a d e p a to lo g ia u fc .b lo g s p o t.c o m .b r/2 0 1 1 /1 0 /le u c e m ia -m ie lo id e -c ro n ic a .h tm l

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s
Interpretação de Bandas e sub-bandas
C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
8q21.13
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH Cromossomo ® braço ® região ® banda ® sub-banda ® sub-sub-banda
aC G H
CMA 8 q q2 q21 q21.1 q21.13
C o n c lu in d o
28
B ib lio g r a fia S u g e r id a
P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a - w w w .p e d ia tria z u lia .c o m / C a s o s % 2 0 C lin ic o s .h tm

14
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Banda Q
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e • C o ra n te : Q u in a c rin a (flu o re s c e n te );
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s
• B a n d a s b rilh a n te s e o p a c a s ;
C lá s s ic a • B a n d a s b rilh a n te s c o rre s p o n d e m a b a n d a s G
C o n v e n c io n a l

G e s c u ra s (G + );
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
29
B ib lio g r a fia S u g e r id a
h ttp ://w w w .s lid e b o o m .c o m /p re s e n ta tio n s /2 2 0 0

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Banda R
C a r ió tip o

C a r io g r a m a • D e s n a tu ra ç ã o c o m s o lu ç ã o s a lin a e c a lo r;
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s • C o ra n te : G ie m s a
P r o c e d im e n to s
• B a n d a m e n to in v e rs o a o d e B a n d a G e B a n d a Q
C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l – B a n d a R e scu ra à B a n d a G cla ra , B a n d a Q o p a ca
G
Q – B a n d a R cla ra à B a n d a G e scu ra , B a n d a Q
R
b rilh a n te
C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
30
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp ://w w w .s lid e b o o m .c o m /p re s e n ta tio n s /2 2 0 0

15
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Banda C (Summer, 1972)
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e • S o lu ç ã o d e H id ró x id o d e B á rio e H C l + C o ra n te
A m o s tr a s G ie m s a .
P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a • E v id e n c ia m re g iã o q u e c o n te n h a m
C o n v e n c io n a l
h e te ro c ro m a tin a c o n s titu tiv a :
G
Q – c e n tro m é rica ,
R
C r o m o s s o m o d ic ê n t r ic o
C – p e rice n tro m é rica s ,
NOR
– Yq.
T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
31
B ib lio g r a fia S u g e r id a
h ttp ://d c 1 2 7 .4 s h a re d .c o m

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Banda RON (NOR)
C a r ió tip o
• C o ra n te : N itra to d e P ra ta
C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s
• A s b a n d a s N O R e v id e n c ia m re g iã o o rg a n iza d o ra d e
P r o c e d im e n to s n u c lé o lo .
C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
Impregnação pela prata nos
TC cistrons ribossômicos ativos
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o
na intérfase anterior
CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
32
B ib lio g r a fia S u g e r id a A m a b is & M a rth o , A n a lis a n d o c a rió tip o s h u m a n o s , 1 9 9 7 , B e llin i, P e ru q u e tti, 2 0 1 2

16
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Banda T
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e • A s b a n d a s T c o rre s p o n d e m a re g iõ e s te lo m é ric a s ;
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
33
B ib lio g r a fia S u g e r id a
h ttp ://w w w .telig a.n et/2 0 1 1 /0 8 /tecn icas-p ara-estu d o-d o s-cro m o sso m o s.h tm l

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Banda T
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e • Tamanho x Envelhecimento
A m o s tr a s • Células Somáticas
P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a • Telomerase
C o n v e n c io n a l

G
Q < Telômero à > idade célula
R

C
NOR

T
Síndrome Hutchinson-Gilford
M o le c u la r
F IS H Progérias
M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o
Envelhecimento
CGH
mCGH precoce
aC G H Síndrome Hutchinson-Gilford
CMA
C o n c lu in d o Síndrome Werner 34
B ib lio g r a fia S u g e r id a

17
 Citogenética

70’s
Cromossômicas
Alterações

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Citogenética Molecular
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s
• Perdas e ganhos cromossômicos;
P r o c e d im e n to s • Amplificações e deleções gênicas;
C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l • Identificação cromossômica;
G
Q
R
• Mapeamento;
C
NOR
• Rearranjos.
T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
36
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp ://w w w .a v e n s o n lin e .o rg /b lo g /c y to g e n e tic s-a n a ly s is-o f-c h ro m o s o m e s .h tm l/

A c e s s o e m 0 7 /0 9 /2 0 1 8

18
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
FISH
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H • T é c n ic a d e m a p e a m e n to fís ic o d e D N A e m q u e
M ic r o d is s e ç ã o u m a s o n d a d e D N A m a rc a d a c o m flu o ro c ro m o é
TC
SKY h ib rid iz a d a a o c ro m o s s o m o o u n ú c le o in te rfá s ic o e
B a n d a m e n to C o lo r id o v is u a liza d o e m m ic ro s c ó p io d e flu o re s c ê n c ia
CGH
mCGH

aC G H • R e s o lu ç ã o : 1 0 0 – 2 0 0 K b
CMA
C o n c lu in d o – 5 0 x m a io r q u e b a n d a m e n to d e a lta re so lu çã o
37
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp s ://w w w .c y to c e ll-u s .c o m /

A c e s s o : 0 7 /0 9 /2 0 1 8

S o n d a : S e g m e n to d e D N A e sp e cífico (1 0 0 -2 0 0 K b )

D N A A lv o : cro m o sso m o o u re g iã o cro m o ssô m ica

38
h ttp s ://w w w .c y to c e ll-u s .c o m /s u p p o rt/w h a t-is-fis h

A c e s s o : 0 7 /0 9 /2 0 1 8

19
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s FISH
C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o (Fluorescence In Situ Hybridisation)
C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e • T ip o s d e S o n d a s :
A m o s tr a s C ro m o sso m o
P r o c e d im e n to s
C ó p ia in te iro
C lá s s ic a
Ú n ica A lfa -sa té lite (W C P )
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
s o n d a b e ta -sa té lite (sa té lite d o s a cro cê n tric o s D e G )
CMA s o n d a sa té lite clá ssica (h e te ro cro m a tin a 1 , 9 , 1 6 e Y )
C o n c lu in d o
39
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp s://w w w .re s e a rch g a te .n e t/fig u re /E x a m p le s-o f-d iffe re n t-ty p e s-o f-flu o re s c e n c e -in -s itu -h y b rid is a tio n -F IS H -

p ro b e s-a _ fig 1 _ 9 0 3 5 1 4 8 - A c e s s o e m 0 7 /0 9 /2 0 1 8

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s
c) lócus-especifica 4p16.3 centromérica 4p11-q11
C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q WCP 21 9q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o
Subtelomérica
CGH 1p 1q Telomérica
mCGH

aC G H f) Interphase-FISH locus-especifica gene SRY (sex determining

CMA region Y) em Yp11.31, centrômero X e heterocromatina Yq12
C o n c lu in d o
40
B ib lio g r a fia S u g e r id a G e n e tic s a n d M o le c u la r B io lo g y, 3 7 , 1 (s u p p l), 1 9 4 -2 0 9 (2 0 1 4 )

20
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s • Sondas Alfa- • Sondas

satélites Teloméricas
C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
(Centroméricas) – D e le çõ e s te rm in a is
A m o s tr a s
– E n u m e ra çã o d e – P e rd a s te lo m é rica s
P r o c e d im e n to s
C ro m o sso m o s – F u sã o cro m o ssô m ica
C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l – Id e n tifica çã o d e
G
a n e u p lo id ia s e
Q
R re a rra n jo s
C
NOR

T
M o le c u la r
C e n tro m é rica
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC Te lo m é ric a
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
41
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp ://w w w .n irs .q s t.g o .jp /E N G /c o re /rm d /0 5 .h tm l – A c e s s o : 0 7 /0 9 /2 0 1 8

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e • W h o le C h ro m o s o m e P ro b e (W C P )
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s
– Id e n tifica çã o d e a n e u p lo id ia s e re a rra n jo s
C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
42
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp s://w w w .h u m a n g e n e tic s .u n i-b o n n .d e /d e /d ia g n o s tik /m o le k u la re -z y to g e n e tik A c e s s o : 0 7 /0 9 /2 0 1 8

21
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s
• W h o le C h ro m o s o m e P ro b e (W C P )
C la s s ific a ç ã o – Id e n tifica çã o d e a n e u p lo id ia s e re a rra n jo s
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o A- Criança com anomalias congênitas: sonda do

TC
SKY
cromossomo 4; material extra, braço longo de um dos
B a n d a m e n to C o lo r id o cromossomos 4 (seta),
CGH
mCGH
B- Metáfase da mesma criança: sonda do cromossomo 9.
Dois cromossomos 9 normais; a parte extra do cromossomo
aC G H
CMA 4 identificada como tendo origem no cromossomo 9 (seta).
C o n c lu in d o
43
B ib lio g r a fia S u g e r id a P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
IM: +7 MN:
Q
R 17c verde
C TP53
NOR vermelho
T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o CG: +7 CG: del TP53

TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA UG: +8
C o n c lu in d o
44
B ib lio g r a fia S u g e r id a P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

22
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G MEGAESÔFAGO:
Q
R 60% aneuploidias: –
C 7,+7, +17
NOR
54,5% deleção TP53
T
M o le c u la r
F IS H CARCINOMAS:
M ic r o d is s e ç ã o
TC 100% aneuploidias
SKY
tri e tetra simultâneas;
B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH 100% deleção TP53

mCGH
70% amplificação
aC G H
CMA CCND1
C o n c lu in d o
45
B ib lio g r a fia S u g e r id a P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR
A- perda CDKN2A/ CEP9
T
M o le c u la r B- perda EGFR/CEP7
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o C- perda FHIT/CEN3
TC
SKY
D- ganho TP63/ perda
B a n d a m e n to C o lo r id o
PIK3CA
CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
46
B ib lio g r a fia S u g e r id a P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

23
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e • A p lic a ç õ e s
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s
– M a p e a m e n to d e g e n e s e se q u ê n cia s g ê n ica s;
C lá s s ic a – Id e n tifica çã o d e re a rra n jo s c ro m o ssô m ico s/
C o n v e n c io n a l

G p e q u e n a s d e le çõ e s;
Q – M o n ito ra m e n to d e in d ivíd u o s/p o p u la çõ e s e xp o sta s
R

C à m u ta g ê n ico s;
NOR
– E stru tu ra e o rg a n iza çã o d o s cro m o sso m o s
T
M o le c u la r – Id e n tifica çã o d e a lte ra çõ e s cro m o s sô m ic a s e m
F IS H e sp e rm a
M ic r o d is s e ç ã o
TC – D ia g n ó stico P ré -N a ta l e P ré -Im p la n ta çã o
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o – D ia g n ó stico d e n e o p la sia s
CGH – M o n ito ra m e n to d e p a cie n te s
mCGH

aC G H le u c ê m ico s/tra n sp la n te d e m e d u la ó sse a (d o a d o r

CMA d e se xo o p o sto )
C o n c lu in d o

B ib lio g r a fia S u g e r id a 47
P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH
• C ito g e n é tica co n ve n cio n a l: d ia g n ó stico e m 8 -1 5 d ia s
aC G H
CMA
• F IS H : re su lta d o rá p id o (2 4 -4 8 h ) c é lu la s líq u id o
C o n c lu in d o a m n ió tico n ã o cu ltiva d a s 48
B ib lio g r a fia S u g e r id a P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

24
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
N o rm a l Trisso m ia
Q do 21
R

C
NOR

T
M o le c u la r Trip lo X
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
Trip ló id e Te tra p ló id e
49
B ib lio g r a fia S u g e r id a
P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e • D ia g n ó s tic o P ré -im p la n ta ç ã o
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
3 sin a is ve rd e :
mCGH

aC G H b la stô m e ro co m trisso m ia d o 2 1
CMA
C o n c lu in d o
50
B ib lio g r a fia S u g e r id a P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

25
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e • E m e s p e rm a to zo id e s
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
51
B ib lio g r a fia S u g e r id a P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e • D ia g n ó s tic o d e N e o p la s ia s
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s
– Tra n slo ca çã o (câ n ce r d e p u lm ã o ) – g e n e A L K
C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC 2013: FDA
SKY aprovou a droga
B a n d a m e n to C o lo r id o
crizotinib (Pfizer)
CGH para portadores
mCGH
de fusão do gene
aC G H
CMA
ALK - t(2;5)
C o n c lu in d o
52
B ib lio g r a fia S u g e r id a J P a th : C lin R e s A p ril 2 0 1 7 ; 3 : 7 3 – 9 9

P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

26
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
(A-B) Amplificação CCND1 (C-D) Amplificação Her-2
mCGH (E-F) Polissomia 11 / CCND1 (G-H) Polissomia 17 /Her-2
aC G H
CMA
Mama à Terapia molecular: Herceptin (Trastuzumab)
C o n c lu in d o
53
B ib lio g r a fia S u g e r id a

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Microdisseção
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
54
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp ://w w w .a c c e s s e x c e lle n c e .o rg /R C /V L /G G /m ic ro D is s e c tio n .p h p

P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

27
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Territórios Cromossômicos
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
-posicionamento relativo dos TC
A m o s tr a s em posições preferenciais em
P r o c e d im e n to s
relação ao outros:
C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l -cr grandes → periferia do
G
Q -cr pequenos → interior do
R Genes ativos: encontrados no
C
NOR
interior e periferia do TC

T Regiões transcricionalmente
M o le c u la r
F IS H
ativas: encontradas em alças
M ic r o d is s e ç ã o estendidas para fora do TC
TC
SKY
a)Cr 12; 14; 15: linfócitos de Regiões não codificadoras e
B a n d a m e n to C o lo r id o
camundongo genes inativos (vermelho):
CGH
b-c) Intérfase: TC em podem ser encontradas na
mCGH
fibroblastos de camundongo
periferia ou interior do TC
aC G H d) Genes ativos x inativos
CMA
C o n c lu in d o
55
B ib lio g r a fia S u g e r id a P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r SKY
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
56
B ib lio g r a fia S u g e r id a

28
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s SKY
P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H 5 flu o ro c ro m o s
M ic r o d is s e ç ã o
TC
e su a s
SKY co m b in a çõ e s
B a n d a m e n to C o lo r id o
(4 0 0 -8 0 0 n m )
CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
57
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp ://w h a t-w h e n -h o w .c o m /g e n e tic s /a d v a n c e s-in -c y to g e n e tic-d ia g n o s is-g e n e tic s/

A c e s s o : 0 7 /0 9 /2 0 1 8

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
SKY
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
C a rió tip o n o rm a l
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s L im ita çã o :
C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l • C u ltivo ce lu la r – m e tá fa se s
G
Q • N ã o d e te cta
R

C
d e le çõ e s/d u p lica çõ e s e
NOR in ve rsã o
T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC C ro m o ss o m o s m a rca d o re s
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
58
B ib lio g r a fia S u g e r id a P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

29
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
SKY
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o
E vo lu çã o ca rio típ ica :
CGH
mCGH
c é lu la s d e g ib ã o h ib rid iza d a s co m so n d a s h u m a n a s
aC G H ® v á ria s h o m o lo g ia s cro m o ssô m ica s
CMA
C o n c lu in d o
59
B ib lio g r a fia S u g e r id a P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Bandamento Colorido
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e • Permite a coloração
A m o s tr a s sub-regional dos
P r o c e d im e n to s cromossomos para
C lá s s ic a análise do cariótipo
humano
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR • Identificação de
T rearranjos
M o le c u la r
cromossômicos:
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
inversões, deleções,
TC duplicações,
SKY
inserções,
B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
translocações
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
60
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp s://w w w .m ic ro -s h o p .z e is s .c o m /? l= e n & p = u k & f= r& i= 5 0 0 7 & h = 2 5 & n = 0 & s d = 0 0 0 0 0 0 -0 5 2 8 -9 1 5 -u k

A c e s s o : 0 7 /0 9 /2 0 1 8

30
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Bandeamento Colorido
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
61
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp ://w w w .m is z a lo k .d e /L e c tu re s /L 1 6 _ F is h /F is h _ d .h tm 2 8 -9 1 5 -u k

A c e s s o : 0 7 /0 9 /2 0 1 8

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Bandamento Colorido
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o

SKY
TC
• m BAND do crom ossom o 15:
– 25 bandas coloridas: correspondem a
B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH uma resolução de 550 bandas
(complemento haplóide)
aC G H
CMA
C o n c lu in d o
62
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp ://w w w .m is z a lo k .d e /L e c tu re s /L 1 6 _ F is h /F is h _ d .h tm 2 8 -9 1 5 -u k

A c e s s o : 0 7 /0 9 /2 0 1 8

31
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Bandeamento Colorido
C a r ió tip o In v (6 ) (p 2 3 q 2 3 )
C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
63
B ib lio g r a fia S u g e r id a W a n , T . S ,; M a , T . S . M o le c u la r c y to g e n e tic s: a n in d is p e n s a b le to o l fo r c a n c e r d ia g n o s is. C h a n g G u n g

M e d ; 3 5 (2 ):9 6 -1 1 0 , 2 0 1 2 . h ttp s://w w w .n c b i.n lm .n ih .g o v/p u b m e d /2 2 5 3 7 9 2 5 .

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s CGH
C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o
(C om parative G enom e H ybridisation)
C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
64
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp ://ic g i.n o /D ia g n o s tic s /k a rio ty p in g -a n d -C G H

A c e s s o : 0 7 /0 9 /2 0 1 8

32
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s
CGH
C la s s ific a ç ã o
C a r ió tip o
(Com parative Genom e Hybridisation)
C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
65
B ib lio g r a fia S u g e r id a

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
mCGH
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH
Desvantagem: não detecta aberrações balanceadas
aC G H (translocações, inversão, inserção)
CMA
C o n c lu in d o
Resolução: >3Mb
66
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp ://u v m g g .w ik ia .c o m /w ik i/C G H

A c e s s o : 0 7 /0 9 /2 0 1 8

33
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
mCGH
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q G anho
R

C
NOR
P e rd a

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
67
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp s ://c o n g a n a t.u n in e t.e d u /IIIC V H A P /c o m u n ic a c io n e s/0 0 3 /in d e x .h tm

A c e s s o : 0 7 /0 9 /2 0 1 8

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
mCGH
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q G anho
R

C
NOR
P e rd a

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
68
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp ://w w w .lu c ia .c z/c s/fro n t-p a g e /lu c ia -c g h /

A c e s s o : 0 7 /0 9 /2 0 1 8

34
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
aCGH
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH Cromossomos metafásicos substituídos por sondas de DNA ou
CMA
aC G H
oligonucleotídeos ® chips DNA
C o n c lu in d o Resolução: 5- 10 Kb (0,5 Mb) 69
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp s ://fr.w ik ip e d ia .o rg /w ik i/F ic h ie r:A rra y _ c o m p a ra tiv e _ g e n o m ic _ h y b rid iz a tio n .s v g

A c e s s o :0 7 /0 9 /2 0 1 8

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
aCGH
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
G anho N o rm a l P e rd a
CMA
C o n c lu in d o
70
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp ://w w w .e n z o life s c ie n c e s .c o m /p la tfo rm s /g e n o m ic s /m ic ro a rra y /e n a b le -p ro v e n -c o n s is te n t-

a c g h /A c e s s o :0 7 /0 9 /2 0 1 8

35
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
aCGH
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e Cr 4
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R
Perda
C
4p16.3-p15.33
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY
Genes
B a n d a m e n to C o lo r id o
4p16.3-p15.33
CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
71
B ib lio g r a fia S u g e r id a G e n e tic s a n d M o le c u la r B io lo g y, 3 7 , 1 (s u p p l), 1 9 4 -2 0 9 (2 0 1 4 )

P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Chromosomal Microarray (CMA)
C a r ió tip o • U s a d a p a ra id e n tifica r va ria çõ e s n o n ú m e ro d e có p ia s
C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e d o D N A (C o p y N u m b e r Va ria tio n s- C N V s ) e m re g iõ e s
A m o s tr a s a sso cia d a s a d o e n ça s
P r o c e d im e n to s
• D e s co b e rta d e n o va s sín d ro m e s C N V s e n o vo s g e n e s
C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l q u e ca u sa m u m e sp e ctro d e fe n ó tip o s: a u tism o ,
G e sq u izo fre n ia e d im o rfism o s
Q
R • S ín d ro m e s d e m icro d e le çã o (2 2 q 11 .2 S . D iG e o rg e ) –
C m icro d u p lica çã o (1 7 q 2 1 .3 1 )
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
72
B ib lio g r a fia S u g e r id a J o u rn a l o f P e d ia tric G e n e tic s V o l. 6 N o . 1 /2 0 1 7

P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

36
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Chromosomal Microarray (CMA)
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H • Id e n tific a çã o d e so b re p o siçã o d e C N V s e m in d ivid u o s
M ic r o d is s e ç ã o c o m u m a sín d ro m e co m p a tilh a d a é u sa d a id e n tifica r
TC
SKY u m a re g iã o crítica p a ra u m a sin d ro m e d e
B a n d a m e n to C o lo r id o m icro d e le çã o .
CGH • A m e n o r re g iã o d e so b re p o siçã o d a d e le çã o in d ica a
mCGH

aC G H re g iã o d e le ta d a n e ce ssá ria p a ra a m a n ife sta çã o d a

CMA s ín d ro m e
C o n c lu in d o
73
B ib lio g r a fia S u g e r id a J o u rn a l o f P e d ia tric G e n e tic s V o l. 6 N o . 1 /2 0 1 7

P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Chromosomal Microarray (CMA)
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC a C G H c o n tin u a tra n sfo rm a n d o a C ito g e n é tica :
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o
-fo rn e ce n d o a lta -re s o lu ç ã o
CGH
mCGH -te c n o lo g ia a va n ça d a p a ra m a p e a m e n to p re c is o e
aC G H
CMA
d e te cçã o d e a b e rra çõ e s cro m o ssô m ica s.
C o n c lu in d o
74
B ib lio g r a fia S u g e r id a h ttp ://w w w .e m p ire g e n o m ic s .c o m /s ite /te c h n o lo g y _ o v e rv ie w .p h p

P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

37
 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Concluindo
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
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B ib lio g r a fia S u g e r id a P ro fa . D ra . A n a E liz a b e te S ilv a

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Concluindo
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e
A m o s tr a s

P r o c e d im e n to s

C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l

G
Q
R

C
NOR

T
M o le c u la r
F IS H

M ic r o d is s e ç ã o
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o

CGH
mCGH

aC G H
CMA
C o n c lu in d o
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 Citogenética

C ito g e n é tic a

C ro m o s s o m o s H u m a n o s

C la s s ific a ç ã o
Bibliografia
C a r ió tip o

C a r io g r a m a
A p lic a b ilid a d e • BEIGUELMAN, B. Genética Médica, Citogenética Humana, 2ª
A m o s tr a s ed., vol.1, São Paulo:EDART; Rio de Janeiro: FENAME, 1977,
P r o c e d im e n to s 199p – Capítulos 2.
C lá s s ic a
C o n v e n c io n a l • GRIFFITHS, A.J.; MILLER, J.H.; SUZUKI, D.T.; LEWONTIN,
G R.C. & GELBART, W.M. Introdução à Genética. 8° ed., Rio de
Q Janeiro, Guanabara Koogan, 2006.
R

C • NUSSBAUM, R.L.; MCINNES, R.R. & WILLARD, H.F.

NOR Thompson e Thompson Genética Médica. 7ª ed.Elsevier, 2008.
T
M o le c u la r • OTTO, P.G.; OTTO, P.A.; FROTA-PESSOA, O. Genética
F IS H
Humana e Clínica, 2ª ed., São Paulo: ROCA, 2004, 360p.
M ic r o d is s e ç ã o Capítulos I.
TC
SKY

B a n d a m e n to C o lo r id o • READ, A.; DONNAI, D. Genética Clínica: uma nova abordagem.

Tradução: Maria Regina Borges-Osório, Porto Alegre: ARTMED,
CGH 2008, 448p. Capítulos 2, 4 e 7.
mCGH

aC G H
CMA • SNUSTAD, P.; SIMMONS, M.J. Fundamentos de Genética. 4ª
C o n c lu in d o ed., Rio de Janeiro, Guanabara Koogan, 2008.
77
B ib lio g r a fia S u g e r id a

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