BIOQUÍMICA EXPERIMENTAL – PRÁTICA 3 (11/10)

NOME: Luan de Moraes Pereira RA: 11097013

TURMA NOTURNO – GRUPO 5
As medidas da absorbância para determinar a velocidade da reação
enzimática foram realizadas inicialmente com 3 diluições: sem diluir, diluição de
10 vezes e diluição de 100 vezes do lisado original.
Para as 2 concentraçoes de lisado original ocorreu a saturação do
sensor do equipamento, sendo possível obter somente as medidas para uma
diluição de 100x, utilizando a curva padrão de p-nitrofenolato (y = 0,0061x +
0,0097, R = 0,9998) foi calculado o numerro de mols produzidas durante a
2

reação de acordo com a tabela 1

Tabela 1: nº de mols obtidos em fução dos volumes para uma diluição de
100 vezes.
A nº de
VOL LISADO ÁGUA VOL. NPαGLE TEMPO
TUBO (420 mols
(mL) (mL) (mL) (min)
nm) (ηmol)
Branco
0,00 0,20 0,20 20 0,00 0
lisado
1 0,20 0,00 0,20 5 0,12 18,08
2 0,20 0,00 0,20 10 0,29 45,95
3 0,20 0,00 0,20 15 0,53 85,30
4 0,20 0,00 0,20 20 0,74 119,72
5 0,20 0,00 0,20 25 1,02 165,62

A partir do gráfico de mols produzidos pelo tempo podemos obter a curva com
coeficiente angular de 7,377, sendo portanto a atividade enzimática de 7,37.10-9
µmol/min ou sete unidades de atividade (7U).

180
160 y = 7,377x - 23,721
R² = 0,9938
140
120
100
ηmol

80
60
40
20
0
0 5 10 15 20 25 30
Tempo[min]

Gráfico 1: atividade da enzima α-glicosidase utilizando curva padrão