Organizadores:

Dr. Guilherme Barroso L. de Freitas

MSc. Renan Monteiro do Nascimento
 CARDIOLOGIA
TEORIA E PRÁTICA
Volume 01

Organizadores:

Dr. Guilherme Barroso Langoni de Freitas

MSc. Renan Monteiro do Nascimento
MSc. Guilherme Augusto G. Martins

Editora Pasteur
 2021 by Editora Pasteur
Copyright © Editora Pasteur

Editor Chefe:

Dr Guilherme Barroso Langoni de Freitas

Corpo Editorial:

Dr. Alaércio Aparecido de Oliveira GDr. Guilherme Barroso Langoni de Freitas

Dra. Aldenora Maria Ximenes Rodrigues
Bruna Milla Kaminski
Dr. Daniel Brustolin Ludwig
Dr. Durinézio José de Almeida
Dr. Everton Dias
Dr. Fábio Solon Tajra
Francisco Tiago dos Santos Silva Júnior
Dra. Gabriela Dantas Carvalho
Dr. Geison Eduardo Cambri
MSc. Guilherme Augusto G. Martins
Dra. Hanan Khaled Sleiman
MSc. Juliane Cristina de Almeida Paganini
Dr. Lucas Villas Boas Hoelz
MSc. Lyslian Joelma Alves Moreira
Dra. Márcia Astrês Fernandes
Dr. Otávio Luiz Gusso Maioli
Dr. Paulo Alex Bezerra Sales
MSc. Raul Sousa Andreza
MSc. Renan Monteiro do Nascimento
Dra. Teresa Leal

Dados Internacionais de Catalogação na Publicação (CIP)

(Editora Pasteur, PR, Brasil)

FR862c FREITAS, Guilherme Barroso Langoni de.

Cardiologia Teoria e Pratica / Guilherme Barroso Langoni de
Freitas- 1 ed. 1 vol - Irati: Pasteur, 2021.
1 livro digital; 467 p.; il.

Modo de acesso: Internet

https://doi.org/10.29327/537583
978-65-86700-34-3
1. Medicina 2. Cardiologia 3. Ciências da Saúde
I. Título.

CDD 610
CDU 61
413 | P á g i n a
INTRODUÇÃO
A aterosclerose e suas complicações
cardiovasculares são as maiores causas de
morte e invalidez nos países ocidentais
(LAURENTI, 1986). No Brasil, segundo
dados do Ministério da Saúde (2019), cerca de
300 mil indivíduos por ano sofrem Infarto
Agudo do Miocárdio (IAM), ocorrendo óbito
em 30% desses casos. Dados da Organização
Mundial da Saúde (2019), revelou que o
número de mortes por doenças cardíacas
aumentou de mais de 2 milhões desde o ano
2000 para quase 9 milhões em 2019,
representando 16% do total de mortes por
todas as causas (Organização Pan-Americana
da Saúde, 2020).
Essa doença consiste em um processo
crônico, progressivo e sistêmico, sendo
caracterizada por uma resposta inflamatória e
fibroproliferativa da parede arterial frente a
estímulos patológicos impostos à superfície
endotelial, como o acúmulo de partículas de
lipoproteínas de baixa densidade (LDL) na
camada íntima. As lesões ateromatosas podem
acometer diferentes territórios arteriais, sendo
responsáveis por 95% das coronariopatias
(JALDIN et al., 2006).
Dentre os fatores de risco para o
desenvolvimento da aterosclerose estão:
obesidade, tabagismo, hipertensão arterial
sistêmica, sedentarismo, Diabetes Mellitus
(DM) e a hipercolesterolemia (SANTOS et al.,
1998).
A etiologia pode ser primária, geralmente
causada por anormalidade genéticas e/ou
enzimáticas, ou secundária, quando
determinada por condições como DM,
hipotireoidismo, obesidade, estilo de vida
sedentário e maus hábitos alimentares
(LAURENTI, 1986).
Segundo a IV Diretriz Brasileira Sobre
Dislipidemias e Prevenção da Aterosclerose,
as dislipidemias podem ser classificadas em 4
subtipos: Hipercolesterolemia isolada,
hipertrigliceridemia isolada, hiperlipidemia
mista e hipoalfalipoproteinemia (FALUDI,
2017).
Diversos fatores protetores ao
desenvolvimento da dislipidemia vêm sendo
estudados. Destaca-se a ação dos ácidos
graxos poliinsaturados como o ômega-3,
ômega-6 e ômega-9, presentes em produtos
vegetais, como na semente de linhaça dourada,
e em óleos animais como os extraídos de
salmão ou de sardinha.
Os efeitos predominantes do ômega-3 são
considerados benéficos na prevenção de
doenças cardiovasculares, mentais e declínio
cognitivo (SHAHIDI et. al., 2018), além de
atuar na amenização de doenças inflamatórias,
incluindo obesidade, diabetes e síndrome
metabólica (CAPARROS et al., 2017).
No caso do Ômega-6, sua maior
concentração no organismo foi inversamente
associada à obesidade, resistência à insulina e
hipertensão arterial (KAIKKONEN et al.,
2021). Já o Ômega-9 atua como adjuvante na
redução do colesterol total e do LDL e no
aumento do HDL, além de ajudar na inibição
da agregação plaquetária (CANDELA et al.,
2011).
Produtos naturais como o óleo de peixe
rico em Ômega-3, a semente de linhaça rica
em fibras alimentares e Ômega-3 e Ômega-6 e
formulações comerciais, como é o caso do
Prevelip®, medicamento composto por uma
combinação de óleos de peixe e linhaça rico
em ômegas-3, 6, e 9, são produtos que correm
como meios dietéticos de suplementar os
níveis desses ácidos graxos poli-insaturados, e,
consequentemente, obter uma maior proteção
às doenças cardiovasculares.
414 | P á g i n a
 Sendo assim, o objetivo do presente estudo
foi avaliar os efeitos no processo
aterosclerótico da suplementação de óleo de
peixe, semente de linhaça dourada e Prevelip®
em animais recebendo dieta
hipercolesterolêmica no processo
aterosclerótico através da avaliação do ganho
ponderal, níveis de triglicerídeos, LDL e HDL,
o grau e número de lesões ateroscleróticas
presentes.
MÉTODO
Aspectos gerais, delineamento de grupos
e alocação de animais
O estudo consistiu-se em um ensaio
experimental, randomizado e controlado com
duração de 90 dias, utilizando o modelo
experimental Rattus novergicus albinus da
linhagem Wistar. Foram utilizados 40 animais
(20 machos e 20 fêmeas) com 05 meses de
vida, randomizados em 5 grupos de 8 animais
(4 machos e 4 fêmeas), e alocados em duplas
do mesmo gênero:
Grupo 01: dieta com ração comercial
comum (grupo controle negativo)
Grupo 02: dieta com suplementação
hipercolesterolêmica (grupo controle positivo)
Grupo 03: dieta hipercolesterolêmica
com óleo de peixe (Biogel®)
Grupo 04: dieta hipercolesterolêmica
com semente de linhaça dourada.
Grupo 05: dieta hipercolesterolêmica
com Prevelip®
Preparação da ração
No período entre o nascimento até o tempo
zero (T0) do experimento, os animais
receberam água e ração comum para a espécie.
A partir do T0 até o último dia do experimento
(T90), cada grupo passou a receber
diariamente 10 g de ração para cada 100 g de
peso do animal, da sua dieta específica e água
ad libido.
Os ratos do grupo 01 foram alimentados
com ração comercial comum (Nuvilab®). Os
animais do grupo 02 foram alimentados com
dieta comestível hipercolesterolêmica
contendo para cada 150 g de ração, 12,5 g
gema de ovo desidratada (Mizumoto
Alimentos®) e 13,5 ml de óleo de milho
(Liza®). Além da dieta hipercolesterolêmica,
os grupos 03, 04 e 05 receberam
respectivamente óleo de peixe rico em ômega-
3 (Biogel®) na quantidade de 1,0 g/kg de peso
por dia, sementes de linhaça dourada trituradas
(ricas em fibras e ômega-3 e 9) na quantidade
de 8,0 g/kg de peso por dia e Prevelip®
(formulação comercial contendo óleo de peixe
e óleo de linhaça) na quantidade de 1,0 g/kg de
peso por dia. As dietas dos grupos 02, 03, 04 e
05 foram preparadas semanalmente, na quantia
de 16 kg por vez, misturando-se manualmente
os ingredientes de cada dieta com 7 g/kg de
ração de gel de confeiteiro (Mix®) no intuito
de tornar a consistência das rações preparadas
mais próximas à ração comercial. A seguir, a
massa foi submetida à peletização manual com
formas plástico e posterior secagem natural.
Controle do peso, eutanásia e coleta de
material biológico
Os animais foram pesados três vezes por
semana, em dias alternados, do T0 ao T90. No
T90 todos os animais foram anestesiados com
injeção intraperitoneal de cloridrato de
ketamina associado com cloridrato de xilazina.
Após jejum de 12 horas realizou-se coleta de
0,8ml de sangue por punção cardíaca para a
análise das concentrações séricas de
triglicerídeos, LDL e HDL. Foi utilizado os
métodos de enzima imunoensaio para a análise
das concentrações de LDL e HDL e de
415 | P á g i n a
calorimetria para a análise de triglicerídeos das
amostras coletadas.
Após a coleta de sangue, os animais foram
eutanasiados com dose letal de anestésico. A
seguir, procedeu-se a laparotomia xifo-púbica,
para dissecção e ressecção dos segmentos
arteriais. Foram retiradas as artérias: aorta
torácica, aorta abdominal, porção final da aorta
abdominal e bifurcação das artérias ilíacas,
artérias renais e artérias carótidas (Figura
44.1A-B). As peças foram imersas em solução
de formaldeído a 10% para estudo histológico.
Figura 44.1 Ilustração dos segmentos arteriais
removidos
Legenda: Fotografias do pós-operatório dos segmentos
arteriais removidos. Peça contendo as artérias carótidas
e aorta abdominal.
Análise histopatológica
Após individualizados, cada segmento
vascular foi subdividido em fragmentos. De
cada bloco, retiraram-se 10 cortes histológicos
escalonados, que então foram corados com
Hematoxilina e Eosina (HE).
O conteúdo das lâminas de cada segmento
arterial de cada animal foi avaliado por um
médico patologista sem conhecimento prévio
da divisão dos grupos, o qual avaliou o grau de
alterações histológicas de acordo com a
classificação padronizada pelo comitê de
lesões vasculares da American Heart
Association (STARY et al., 1994) em:
macrófagos isolados (células espumosas);
visualização de acúmulo de lipídios
intracelular;
alterações do tipo II além da presença de
pequenos reservatórios de lipídios;
das alterações encontradas no tipo II além da
presença de núcleo lipídico extracelular;
presença de centro lipídico e camada fibrótica,
ou múltiplos núcleos de lipídios e camadas
fibróticas, ou principalmente calcificadas, ou
principalmente fibróticas;
cada): hematoma-
hemorragia, trombo e defeitos de superfície.
Figura 44.2. Ilustração dos segmentos arteriais
removidos.
Legenda: Fotografia do pós-operatório dos segmentos
arteriais removidos. Peça contendo as artérias aorta
abdominal, renais e ilíacas.
As lesões Tipos 1 e 2 são consideradas
iniciais, as do tipo 3 intermediárias e as dos
Tipos 4, 5 e 6 avançadas. No caso de terem
416 | P á g i n a
sido encontradas lesões ateroscleróticas de
diferentes graus em dois ou mais cortes da
mesma peça, foi considerado o grau de lesão
mais alto e caso não fossem encontradas
lesões, foi considerado o grau de lesão tipo 0.
Após a leitura do patologista, os resultados
foram anotados pelos autores nas fichas de
análise microscópica de cada animal, onde
registrou-se, por segmento estudado, a
presença de lesão vascular de acordo com a
classificação da American Heart Association.
Análise Estatística
Os resultados de variáveis quantitativas
foram descritos por médias, medianas, valores
mínimos, valores máximos e desvios padrões,
e de variáveis qualitativas por frequências e
percentuais. Para a comparação de dois grupos
em relação às variáveis quantitativas foi
considerado o teste não-paramétrico de
MannWhitney e para comparação de mais de
dois grupos foi utilizado o teste não-
paramétrico de Kruskal-Wallis. Para avaliação
da associação entre duas variáveis qualitativas
dicotômicas foi considerado o teste exato de
Fisher. A correlação entre duas variáveis
quantitativas foi analisada estimando-se o
coeficiente de correlação de Spearman.
Valores de p<0,05 indicaram significância
estatística. Os dados foram analisados com o
programa computacional Statistica v.8.0.
RESULTADOS E DISCUSSÃO
O estudo tomou como base a espécie
Rattus novergicus da linhagem Wistar pela
facilidade de obtenção, de alocação e de
cuidados desses animais. A definição da
duração do experimento foi feita avaliando o
tempo necessário para a indução de um estado
de hipercolesterolemia associado ao
desenvolvimento de lesões ateroscleróticas,
optando-se então pelo período de 3 meses. Na
fase inicial do estudo houve a morte de 1 rato
do Grupo 1, sobrando 39 ratos para análise.
A decisão de estudar os segmentos
vasculares escolhidos se baseou na maior
facilidade de retirada do material visto se
tratarem de vasos de grande e médio calibre
e na prevalência de acometimentos dos
mesmos sítios nos humanos
(DEPARTAMENTO DE ATEROSCLEROSE
DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE
CARDIOLOGIA, 2007; JALDIN et al., 2006;
PRIM et al., 2011).
Peso
A média do peso final nos Grupos 1 ao 5
foi respectivamente, 322,7 g, 348 g, 343,6 g,
344,8 g e 338 g (p = 0,933). O ganho de peso
durante o estudo em cada grupo foi
respectivamente, 11,16%, 18,2%, 17,58%,
21,19% e 15,27%.
Durante todos os tempos do estudo, a
média de peso dos machos se mostrou maior
quando comparado à média das fêmeas, sendo
o ganho de peso dos machos significativo nos
grupos 3 e 5 (p = 0,029), e quando avaliado o
ganho ponderal total (desde o T0 até T90)
houve um aumento superior no gênero
masculino de todos os grupos (p=0,029),
ilustrado no Gráfico 44.1. Entretanto, ao
estudar o ganho de peso entre os grupos, a
diferença se mostrou insignificante.
417 | P á g i n a
Gráfico 44.1 Gráfico do ganho de peso ao longo do experimento por gênero
Concluindo, foi encontrada diferença
significativa apenas quando comparando
machos e fêmeas do mesmo grupo, sendo
significativo nos grupos com dieta
suplementada com óleo de peixe (Grupo 3) e
Prevelip® (Grupo 5), o que levanta a hipótese
de que cada suplementação afeta de forma
diferente os gêneros.
Perfil lipídico
O nível de HDL se mostrou superior no
grupo 3 (38,8 mg/dl) quando comparado aos
grupos 4 (29,3 mg/dl) e 5 (30,1 mg/dl), e o
grupo 2 (45,8 mg/dl) apresentou maiores
níveis que os grupos 1 (35,7 mg/dl), 4 e 5,
conforme demonstrado na Tabela 44.1.
Na análise dos níveis de triglicerídeos e
LDL não foi encontrada nenhuma diferença
significativa em sua redução, assim como
entre os gêneros nos grupos 1, 2 e 5. Já no
grupo 3, os valores de LDL nos machos se
apresentaram superiores aos das fêmeas, assim
como os níveis de triglicerídeos do sexo
masculino quando comparado ao feminino no
grupo 4.
Ao correlacionar os dados de peso (no
T90) com o perfil lipídico, observou-se que o
grupo 1 apresentou maiores níveis de LDL
quanto maior o peso do animal (p = 0,007), e
no grupo 4 maiores níveis de triglicerídeos
quanto maior o peso do animal (p = 0,035).
Concluindo a análise do perfil lipídico,
salienta-se que o estudo dos níveis de HDL
reconhecido como fator protetor para o
desenvolvimento de processos
cardiovasculares (DEPARTAMENTO DE
ATEROSCLEROSE DA SOCIEDADE
BRASILEIRA DE CARDIOLOGIA, 2007)
mostrou diferenças entre os grupos. Os
maiores níveis de HDL foram encontrados na
parcela que recebeu apenas a dieta
hipercolesterolêmica (grupo 2) e associada ao
óleo de peixe (grupo 3) em comparação aos
grupos que receberam suplementação com
semente de linhaça dourada e Prevelip®.
418 | P á g i n a
Tabela 44.1 Comparação dos níveis de HDL entre os grupos

Legenda: Média maior do nível de HDL no grupo 2 (dieta hipercolesterolêmica) quando comparado ao 1, 4 e 5
(verificando-se relevância com p = 0,026, p < 0,001 e p = 0,001 respectivamente) e no grupo 3 (submetidos à
suplementação com óleo de peixe) quando comparado aos grupos 4 e 5 (com p=0,004 e p = 0,020 respectivamente).
N, número da amostra estudada; Média, valor médio do HDL no grupo em questão.

Lesões ateroscleróticas Figura 44.3 Imagem de artéria com lesão inicial tipo 1

De todas as regiões vasculares estudadas, a

que apresentou maior número de lesões
independentemente do grau foi a aorta
abdominal (22,72% das lesões), que em
conjunto com os segmentos aorta torácica e
bifurcação da aorta abdominal em artérias
ilíacas, representaram 50% das lesões. As
carótidas foram o sítio de 31,81% das lesões,
seguido das artérias renais com 18,19% das
lesões ateroscleróticas, sendo a artéria renal Legenda: Na seta demonstra-se célula espumosa na
esquerda o segmento menos afetado (6,06% camada intimal do vaso. Coloração HE. Aumento de 40
das lesões) vezes

Ao avaliar o grau das lesões, 95,5% se

Figura 44.4 Imagem de artéria com lesão inicial tipo 2
apresentaram como lesões iniciais (Figura
44.3-4) e 4,5% como intermediárias (Figura
44.5), não havendo lesões de grau avançado.
Quando comparado os dados entre os
grupos, constatou-se diferença significativa
apenas no segmento da aorta abdominal, onde
nenhum animal do grupo 1 apresentou lesão e
62,5% dos animais dos grupos 4 e 5 foram
afetados (p=0,026). Uma vez analisado os
gêneros dos ratos, o único resultado relevante
se mostrou entre os sexos do grupo 3, no qual
a totalidade dos machos apresentou algum tipo Legenda: Na seta demonstra-se macrófago com
depósito intracelular de gordura. Coloração HE.
de dano na bifurcação das artérias ilíacas, em Aumento de 40 vezes.
contraste com a ausência de fêmeas com esse
sítio lesionado (p = 0,029).
419 | P á g i n a
Figura 44.5 Imagem de artéria com lesão intermediária
tipo 3
Legenda: Presença de depósito gorduroso difuso no
espaço intercelular da camada íntima. Coloração HE.
Aumento de 40 vezes.
A correlação do peso e perfil lipídico com
as variáveis de lesões ateroscleróticas
mostraram dados relevantes no grupo 3, onde
os maiores níveis de LDL corresponderam à
presença de lesão em aorta abdominal
(p=0,036) e o maior peso, em conjunto com os
maiores níveis de LDL, se associaram à
presença de lesão em bifurcação da aorta
abdominal em ilíacas (p=0,029). Ademais,
Tabela 44.2 Comparação do número de segmentos afetados das fêmeas nos grupos
Legenda: Teste não-paramétrico de Kruskal-Wallis, com relevância em valores de p < 0,05. Houve relevância
estatística na comparação dos Grupos 3 e 2 (p = 0,049), Grupos 3 e 4 (p = 0,019) e dos Grupos 3 e 5 (p = 0,036). N,
número da amostra estudada; Média, porcentagem média de segmentos arteriais acometidos nas fêmeas por grupo.
outras correlações não apresentaram
significância.
Contrastando os gêneros de cada grupo, as
fêmeas do grupo 2 apresentaram mais
territórios acometidos (32,1%) que os machos
(0%) (p = 0,029), ao contrário do grupo 3
onde os machos apresentaram mais órgãos
afetados (57,1%) que as fêmeas (10,7%)
(p = 0,029). Avaliando apenas os sexos
femininos dos grupos em relação ao total de
segmentos vasculares afetados por indivíduo,
constatou-se que no grupo 3 as fêmeas
apresentaram menos segmentos arteriais
acometidos (10,7%) que nos grupos 2 (32,1%),
4 (35,7%) e 5 (35,7%), como demonstrado na
Tabela 44.2.
Na avaliação somente do sexo masculino
dos grupos em relação ao total de segmentos
vasculares acometidos por animal, notou-se
que no grupo 3 os animais apresentaram maior
número de lesões que os demais grupos, e o
grupo 2 apresentou menor número de lesões
que os demais grupos, observado na Tabela
44.3.
420 | P á g i n a
Tabela 44.3 Comparação do número de segmentos afetados dos machos nos grupos

Legenda: Teste não-paramétrico de Kruskal-Wallis, com relevância em valores de p < 0,05. Houve relevância
estatística quando comparados os Grupos 3 e 1 (p = 0,010), Grupos 3 e 2 (p < 0,001), Grupos 3 e 4 (p < 0,001) e
Grupos 3 e 5 (p = 0,015). N, número da amostra estudada; Média, porcentagem média de segmentos arteriais
acometidos nos machos por grupo.

Comparando o número total de lesões e a proveniente da gema de ovo (JALDIN et al.,

porcentagem de segmentos acometidos por
animal com as demais variantes do estudo,
demonstrou-se que:
Nos grupos 2 e 4, o número de lesões e
a porcentagem de segmentos lesionados foi
maior em animais com menor peso, podendo
estar relacionado ao fato de que os indivíduos
com menor peso foram as fêmeas;
No grupo 3, o número de lesões e a
porcentagem de segmentos lesionados foi
maior nos animais com maior peso no T90,
maior ganho de peso no T90 e maiores níveis
de LDL;
No grupo 5, o número de lesões e a
porcentagem de segmentos lesionados foi
maior nos indivíduos com menores níveis de
HDL.
A análise do padrão de lesões nos
segmentos vasculares no estudo entrou em
consenso com a literatura, mostrando como
principal sítio acometido a aorta abdominal
(JALDIN et al., 2006; PRIM et al., 2011).
Quando observado o tipo de lesão, os
resultados apontaram para outra concordância
com a literatura, prevalecendo lesões iniciais
no caso de dieta contendo 0,15% de colesterol
2006). Tais resultados foram diferentes aos
obtidos por Prim (2011) que encontrou em sua
maioria lesões intermediárias após
administração da dieta hipercolesterolêmica
padrão contendo 1% de colesterol.
Em relação a aterosclerose, não foi
encontrada diferença significativa entre os
grupos em relação ao número total de
segmentos vasculares afetados por animal e
entre os tipos de lesões encontrados em cada
grupo, corroborando com os dados da
literatura (JALDIN et al., 2006; PRIM et al.,
2011).
Resultados significativos foram
encontrados quando comparando indivíduos
do mesmo gênero entre os grupos, de forma
que para as fêmeas o óleo de peixe se mostrou
como fator protetor em relação ao número de
segmentos vasculares afetados por animal,
apresentando valores próximos aos do grupo
controle. Na avaliação dos machos, o óleo de
peixe atuou como fator de risco para o
aparecimento de lesões ateroscleróticas por
apresentar uma maior quantidade de lesões por
animal quando comparados aos Grupos 1
421 | P á g i n a
(p = 0,010), 2 (p < 0,001), 4 (p < 0,001) e 5
(p = 0,015).
CONCLUSÃO
Os resultados demonstraram que os
machos apresentaram maior ganho de peso
durante o estudo. Os níveis de HDL foram
maiores no grupo com dieta suplementada com
óleo de peixe em relação aos grupos
suplementados com linhaça dourada e
Prevelip®. As lesões ateroscleróticas
verificadas encontravam-se em sua maioria
ainda em estágio inicial. O segmento vascular
mais acometido foi a aorta abdominal. Para as
fêmeas, a suplementação dietética com óleo de
peixe se mostrou um fator protetor em relação
ao número de segmentos afetados por animal
quando comparado aos grupos com dieta
hipercolesterolêmica e suplementada com
semente de linhaça dourada e Prevelip®. Já
para os machos, o ômega-3 mostrou-se como
fator de risco, com maior número de
segmentos vasculares acometidos comparado
aos demais grupos. Poderia ser de interesse
científico a realização de mais estudos para
avaliar as diferenças entre a suplementação de
ácidos graxos poli-insaturados entre os
gêneros, visto a observação de diferenças
significativas importantes no presente estudo,
mesmo que em uma amostra de 4 animais.
422 | P á g i n a
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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