CECA

MÉTODOS EM NEMATOLOGIA VEGETAL

Profa. Maria de Fátima Silva Muniz

Conteúdo (Nematologia)

Período: 20/out – 01/12/2021

➢ Métodos em Nematologia

➢ Principais gêneros de fitonematoides

• Meloidogyne
• Heterodera
• Pratylenchus
• Scutellonema
• Radopholus
• Bursaphelenchus
• Aphelenchoides
• Ditylenchus
Data das avaliações
1ª - 10/11/21 5,0 pontos
Métodos em Nematologia
Meloidogyne
Heterodera
Pratylenchus
Scutellonema

2ª: 01/12/21 5,0 pontos

Radopholus
Bursaphelenchus
Aphelenchoides
Ditylenchus

Reavaliação:
Prova final:
 Abertura oral
Estilete

Bulbo mediano
Esôfago
Anel nervoso
Bulbo basal

Cutícula

Intestino

Ovário

Testículo
Vulva

Espículos
Ânus
Bursa
Cauda
Fêmea Macho
 AMOSTRAGEM E EXTRAÇÃO

▪ Estimar a população de nematoides na área

▪ Identificar espécies

▪ Indicar métodos de controle da doença

▪ Conduzir levantamentos e outras pesquisa

Amostragem
 Amostragem

✓Culturas anuais
no mínimo 10 sub-amostras/ha.
✓Culturas perenes

Melhor época:

✓Culturas anuais: florescimento

✓Culturas perenes: período de maior crescimento

vegetativo e emissão de raízes, que ocorre de 40 a 50 dias
após o início do período das chuvas.
• Profundidade de amostragem: até 20-30 cm (eliminar os
5 cm de solo iniciais)

•Misturar as sub amostras

•Amostra composta: 500-1000 g solo e 10-50 g raízes

•Acondicionar as amostras em sacos plástico (deixar à

sombra)

•Processar as amostras – 8 -10 dias após a coleta.

 Amostragem

✓Viveiros: no mínimo 10 mudas ao acaso/lote 1.000

mudas

✓Canteiros: 10 plantas/m2

✓Sementes: 500 sementes/lote

Amostragem
 Amostragem

Ficha informativa

▪Local
▪Data da coleta
▪Proprietário
▪Cultura atual
▪Culturas anteriores
▪Cultura futura
▪Procedência das sementes/mudas
Técnicas de
extração de
nematoides
 Extração

Extração de nematoides - Funil de Baermann (Baermann, 1917)

 Extração

Funil de Baermann
 Extração

Sacarose
454g/L

Extração de nematoides – Centrifugação (Jenkins, 1964)

 Extração

Na parte da centrifugação, a separação ocorre por diferenças de

densidades entre os nematoides, solução de sacarose e
partículas do solo.
•Densidade da água = 1,0 g.cm-3
•Densidade das partículas de solo = acima de 2,0 g.cm-3
•Densidade da solução de sacarose = 1,13 g.cm-3
•Densidade dos nematoides = 1,03 a 1,09 g.cm-3
 Extração

Malha da peneira com a respectiva abertura em m:

- 20 mesh = 850 m
- 40 mesh = 425 m
- 60 mesh = 250 m
- 100 mesh = 150 m
- 200 mesh = 75 m
- 325 mesh = 45 m
- 400 mesh = 38 m
- 500 mesh = 25 m
 Extração

Extração de nematoides de raízes – Coolen & D´Herde (1972)

 Extração

Pesar as raízes
 Extração

Fragmentar as raízes
 Extração
Colocar as raízes cortadas no interior do copo do
liquidificador e acrescentar água.
 Extração

Triturar na menor velocidade do liquidificador no tempo de 10 a 60 s

 Extração

06 07

Peneira de100
mesh

08

Peneira de
500 mesh
 Extração

caulim

sacarose

Extração de nematoides de raízes – Coolen & D´Herde (1972)

Observação direta do tecido vegetal

✓ Efetuar diretamente ao microscópio estereoscópico

✓ Galha (endoparasita sedentário)

 Avaliação da densidade populacional

❖ Contagem de nematoides – 2-3 alíquotas/amostra

❖ Diluição da suspensão
Quantificação de nematoides em lâmina de Peters

Área dos 24
quadradinhos X altura
do vão da Câmara =
volume de 1 mL
Limiar de dano para interações planta-nematoide

Nematoide Cultura Limiar de dano

Aphelenchoides besseyi Arroz 300 indivíduos/100

sementes
Ditylenchus dipsaci Cebola 10 indivíduos/400 cm3 solo

Heterodera glycines Soja (USA) 12 cistos viáveis/250 cm3

solo
Soja (Brasil) 1 cisto viável/100 cm3 solo
Meloidogyne arenaria Melancia 2-50 J2/100 cm3 solo
Meloidogyne incognita Alface 60 J2/100 cm3 solo
Radopholus similis Banana 3% de plantas tombadas
(Brasil)
Rotylenchulus Algodão 100 indivíduos/100 g solo
reniformes (USA)
Tylenchulus Citros (USA- 1600 J2/100 g solo
semipenetrans CA)

Ferraz & Brown (2002)

 Preparo de lâmina temporária
(montagem em água)
Microscópio estereoscópico
✓ Microscópio com objetiva invertida

Alfinete fino
entomológico
 Morte e fixação de nematoides

➢Temp: 55 – 65 ºC

➢Morte e fixação simultânea: aquecer o fixador (próximo

da ebulição)

➢Formaldeído 4%
IDENTIFICAÇÃO
 Estilete
- +
Não parasita planta Fitoparasita

Bulbo mediano do esôfago

Proeminente Ausente
Comprimento do corpo
Forma do corpo
Entumescido Curto (menor 1 Longo (maior 1 mm)
Vermiforme mm).Estilete Estilete longo, reto
curto, curvado
Meloidogyne
Heterodera Flanges do
Trichodorus estilete
Globodera Anelações

+ - + -
Xiphinema Longidorus
Criconemella Forma da cauda
Arredondada
Pontiaguda

Nódulos do estilete Comprimento do corpo

+ - Longo (maior 1 mm) Curto (menor 1 mm)

Hoplolaimus Aphelenchus Hemicycliophora Paratylenchus

Belonolaimus Ditylenchus Pratylenchus
Scutellonema Radopholus

Chave para alguns grupos de fitonematoides