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ATIVIDADE LABORATORIAL:

Como distinguir as diferentes etapas da


mitose em células vegetais?

O ciclo celular é o conjunto de transformações que


decorrem desde que uma célula é formada até que essa
célula inicia o processo de divisão, de modo a originar
células-filhas. O ciclo celular compreende duas fases, a
interfase e a fase mitótica/divisão celular.
A fase mitótica divide-se também em duas etapas, a
mitose e a citocinese.
Na mitose dá-se a divisão celular - divisão de uma
célula-mãe em duas células-filhas. Em que estas células-
filhas são geneticamente iguais à célula-mãe (têm o
mesmo DNA). O período do ciclo celular durante o qual
ocorre a mitose é denominado por fase M, esta fase é a
mais curta do ciclo celular.
A mitose, por sua vez, divide-se também noutras fases:
a Prófase, a Metáfase, a Anáfase e a Telófase.

Na atividade laboratorial observamos a fase mitótica,


mais concretamente as diferentes etapas da mitose em
células vegetais (raízes da cebola - Alluim cepa) com a
utilização do microscópio ótico composto (MOC).
Sendo por esta razão, o objetivo da atividade
laboratorial a observação das etapas da mitose em células
vegetais.

Para a realização da atividade é necessário obter raízes


de cebola em crescimento, deste modo foram colocadas
cebolas num copo contendo água, com alguns dias de
antecedência.
As estruturas filamentosa serão observadas através da
utilização de corante (orceína acética), evidenciando que
estas estruturas apresentam elevada afinidade com certos
corantes.

Cromatídeo
Constituição Centrómero
de um
cromossoma:
Braço do cromatídeo

Cromossoma
Material:

Ápices radiculares de cebola


Orceína acética (1%)
Ácido clorídrico (HCl) (12%)
Fósforos
Vidro de relógio
Tesoura
Pinça
Molas de madeira
Lamparina de álcool
Agulha lanceolada
Fig.1 Cebola num copo com
Lâminas e lamelas de vidro
água e com a extremidade
Papel absorvente inferior em contacto com a
Microscópio ótico composto (MOC) água.

Procedimento:

1. Misturar num vidro de relógio, 9 botas de orceína acética


com 1 gota de HCl.
2. Cortar com a tesoura os ápices radiculares da cebola
(cerca de 5 mm).
3. Colocar os ápices no vidro de relógio que contém a
solução.
4. Pegar no vidro do relógio com a mola de madeira e
passar o sobre a chama da lamparina até que se soltem
vapores, mas evitando que a solução entra em ebulição.
5. Retirar, com a pinça, os ápices radiculares para uma
lâmina de vidro. Cortar cerca de 1 mm a partir da
extremidade, rejeitando o restante.
6. Colocar 1 gota de orceína acética, sobre o material, e
aguardar 3 minutos.
7. Colocar a lamela sobre o material e esmagar os tecidos
fazendo pressão, cuidadosamente, com o cabo da agulha.
8. Retirar o excesso de corante com papel absorvente.
9. Observar a preparação ao MOC.
10. Esquematizar a fotografar as figuras de mitose
observadas.

Fig.2 Realização do Fig.3 Realização do


procedimento apresentado procedimento apresentado
em 1. em 4.
Informações relevantes sobre algumas
substâncias utilizadas:

Orceína Acética Ácido clorídrico

A orceína acética é um O ácido clorídrico


corante formado por (HCl) é uma solução
orceína e ácido acético. aquosa de cloreto de
O ácido acético é um hidrogénio que
fixador que tem como dissolve as lamelas
função manter a medianas que unem
integridade das as paredes das
estruturas celulares. Já a células vegetais,
orceína cora os permitindo que se
cromossomas, fazendo separem e que se
com que estes se tornem mais visíveis.
destaquem das outras
estruturas e facilitando a
identificação ao
microscópio.
Resultados experimentais:

Metáfase

Fig.4 Célula na etapa de


metáfase do ciclo celular.

Anáfase
Fig.5 Célula na etapa de
anáfase do ciclo celular.

Telófase

Fig.6 Célula na etapa de


telófase do ciclo celular.
Discussão / Conclusão:

Na metáfase (identificada na fig.4) os cromossomas


atingem o seu máximo de condensação, ficando deste
modo ligados ao fuso acromático e concentrando-se no
pano equatorial da célula, (deste modo, os centrómeros
também se alinham no plano equatorial). Os
cromossomas permanecem nesta região durante
algum tempo devido á pressão exercida pelos
microtúbulos. Já, os cromatídeos encontram-se
voltados para cada um dos polos do fuso acromático.
No inicio da anáfase ocorre a separação dos
cromatídeos de cada cromossoma pela divisão dos
centrómeros, passando cada cromatídeo a constituir
um cromossoma independente. Assim, verificamos que
os cromatídeos (cromossomas filhos) migraram para os
polos, como visível na figura 5, em que cada polo
apresenta a mesma quantidade de cromossomas. Esta
migração para os polos é designada de ascensão polar,
devido ao encurtamento dos microtúbulos graças á
despolimerização da tubulina junto ao centrómero de
cada cromossoma.
Na ultima fase da mitose, a telófase, (identificada na
fig.6) houve uma reorganização do invólucro nuclear em
volta dos cromossomas presentes em cada polo, inicia-
se a divisão do citoplasma. Esta reorganização do
invólucro nuclear é acompanhada pela progressiva
reorganização dos nucléolos e da descondensação dos
cromossomas. Assim, são formados dois núcleos.

Agora podemos concluir que a mitose é um


processo de divisão nuclear, uma vez que o resultado
desta fase foram dois núcleos que terminaram de se
formar na última fase da mitose - telófase, devido á
reorganização do invólucro nuclear e divisão do
citoplasma. (Os dois núcleos formados têm a mesma
informação genética que os núcleos da etapa G1).

Podemos também concluir que a mitose consiste


na prófase, metáfase, anáfase e telófase, embora a
prófase não tenha sido observada.

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