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ESPECTROFOTOMETRIA E FOTOMETRIA
N⁰ do Grupo:04
2⁰ Ano
Sala:11
Turma:C
Turno:Manhã
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Integrantes do Grupo N⁰ 4
3.Cláudia Basílio
Luanda-2023/2024
EPÍGRAFE
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FORMULAÇÃO DO PROBLEMA
A precisão dos resultados e a variação afetam as medições de absorbância e
transmitância em fotometria e espectrofotometria. Autores renomados, como James N.
Miller em "Espectrofotometria: Instrumentação e Métodos Analíticos" (2000), destacam
que a precisão é crucial para garantir a exatidão das análises espectrofotométricas.As
condições experimentais, como temperatura, umidade e estabilidade da fonte de luz,
podem afetar a absorbância e transmitância dos resultados levantando desafios para a
obtenção de resultados precisos. Como mitigar essas influências e desenvolver
protocolos robustos para garantir a confiabilidade das medições?
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JUSTIFICATIVA
A busca pela precisão nas medições de absorbância e transmitância em fotometria e
espectrofotometria é crucial para garantir a confiabilidade dos resultados. Autores
notáveis, como James N. Miller em "Espectrofotometria: Instrumentação e Métodos
Analíticos" (2000), ressaltam a importância da precisão para assegurar a exatidão das
análises espectrofotométricas. Deste modo Este estudo contribuirá para uma
compreensão mais profunda dos desafios analíticos enfrentados em ambientes
complexos, fornecendo informações críticas para aprimorar a confiabilidade das
técnicas espectrofotométricas e fotométricas.
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OBJETIVOS
Objetivo geral
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FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA
Espectrofotometria e Fotometria
Princípios Básicos:
Espectrofotometria:
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calibração para análises subsequentes.( James N. Miller,200 , Douglas A. Skoog e Donald
M. West).
Vantagens da Espectofotometria
Desvantagem da Especrofotometria
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Casos práticos de Espectofotometria e aplicações no laboratório
Fotometria:
A fotometria, por sua vez, engloba a medida da intensidade da luz emitida, transmitida ou
refletida pela amostra. Enquanto na espectrofotometria a ênfase está na absorção, a
fotometria abrange uma gama mais ampla de fenômenos, incluindo fluorescência,
luminescência e quimioluminescência. Este método é crucial em estudos que envolvem
reações químicas específicas, biomarcadores e análises qualitativas baseadas em
emissões luminosas.( Thomas L. Riedel,2010 , Jerome J. Workman Jr. e Art
Springsteen,2011 ).
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Tipos de espectofotometeia e fotometria
✓ Espectrofotometria de absorção
Espectrofotometria de emissão
Espectrofotometria de espalhamento
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A concentração é calculada com base na relação entre a absorbância e a
concentração conhecida da substância em questão.
3. Avaliação da Atividade Enzimática:
Vantagens da Fotometria
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4. Estética: A fotometria auxilia na criação de ambientes esteticamente agradáveis, através
do controle da intensidade e direção da luz.
Desvantagem da Fotometria
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Ou seja, a absorvância é uma medida da “quantidade” de luz que é absorvida pela
amostra.( Karl Lambert e August Beer , 1850).
T=Pλ/Poλ (1)
A=log(Pλ/Poλ)=−logT=log(1/T) (2)
. A=εlc (3)
m-3, no SI), l a distância percorrida pela radiação através da solução (m, no SI) e ε o
coeficiente de absorção molar da espécie em estudo (m2 mol-1, no SI).†
O referido coeficiente é uma medida da capacidade que uma espécie química tem de
absorver a radiação, para um determinado comprimento de onda. Na figura abaixo é
apresentado um esquema do princípio em que se baseia a lei de Lambert–Beer.
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✓ A radiação incidente deve estar colimada (raios paralelos entre si) e deve
atravessar a mesma distância durante a qual interage com as partículas existentes
em solução;
✓ A radiação deve ser monocromática, isto é, ser composta por apenas um
comprimento de onda selecionado (normalmente, correspondente ao
comprimento de onda para o qual a absorvância da espécie em estudo é máxima);
✓ O fluxo da radiação incidente não pode induzir processos que impliquem a
desestabilização dos átomos, moléculas ou iões, como por exemplo excitação
eletrónica que dê origem a fenómenos de fluorescência ou fosforescência.
Instrumentos espectrofotométricos
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Fluorímetro: Mede a fluorescência emitida por uma amostra quando excitada por luz de
uma determinada comprimento de onda.( Gregorio Weber, Lakowicz, Joseph R, Michael
J. Pelletier).
Componentes do espectofôtometro
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Mônocromador: Separa a luz em diferentes comprimentos de onda.( Gustav Robert
Kirchhoff,1857).
Detector: Mede a intensidade da luz transmitida pela amostra( Alexander Graham Bell,
J.J. Thomson).
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Fotometria de chama
Fonte de Chama: Uma chama controlada é gerada usando um gás combustível, como o
propano, e um gás oxidante, geralmente o oxigênio( Robert Bunsen 1811-1899, Gustav
Kirchhoff 1824-1887).
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Luz Emitida: Quando os átomos vaporizados retornam a estados fundamentais após a
excitação na chama, eles emitem luz. A intensidade desta luz é proporcional à
concentração do elemento na amostra(Robert Bunsen 1811-1899, Gustav Kirchhoff
1824-1887, Johann Balmer 1825-1898).
Filtro Monocromático: Um filtro é usado para isolar a luz emitida pelo elemento
específico, permitindo uma medição mais precisa.( Lord Rayleigh, Max Planck XIX é
XX).
Transmitância (T): Refere-se à fração de luz que passa através de uma amostra. É
expressa como uma porcentagem ou decimal e pode ser calculada pela seguinte
fórmula:T=I/0I×100. (Ludwig Boltzmann 1844–1906, A. Beer 1825–1863 , August
Beer 1825–1863, Pierre Bouguer 1698–1758 ) : Onde I é a intensidade da luz após passar
pela amostra, e é a intensidade inicial da luz.
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absorbância é calculada usando a seguinte relação: A=−log10(T) ou A=log10(I⁰/I).
(August Beer 1825–1863 , Pierre Bouguer 1698–1758).
Medição da absorbância
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interesse absorve mais intensamente. Isso é determinado pela curva de
absorbância da substância.
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Temperatura: Mudanças na temperatura da fonte de luz ou da amostra
podem influenciar a absorbância. Variações térmicas podem causar
alterações nas propriedades moleculares das substâncias em análise.
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Conclusão
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Bibliografia
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7. Noda, I., & Ozaki, Y. (2013). Near-infrared spectroscopy:
Principles, instruments, applications. Wiley-VCH.
Anexos
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Fluorímetro para laboratório. Espectrometro de absorção atômica
Esquema de um monocromador
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