Matriz Extracelular e

plasticidade sináptica

Profa. Marcela
B. Echeverry
1
Lembrar
primeiro do
seguinte:

2 2
Glucose metabolism in nerve
terminals 3 3
 Proteínas da zona
Ativa
(dense pyramid )

https://en.wikipedia.org/wiki/Active_zone
4 4
 Excitatory/inhibitory balance

Autism spectrum disorder (ASD) and Schizophrenia

Bidirectional Control of Synaptic GABAAR Clustering by Glutamate and Calcium 5 5

 Técnica de impregnação Golgi

CA1

CA2

CA3

6
 Shear: pressão lateral

Nature Protocols
volume 13, pages3042–3064 (2018)
Fluorescence analysis of the calcein bound to
the calcium phosphate (​hydroxyapatite) allows
direct quantitation of extracellular matrix

Cells cultured in 3-D may more accurately

represent in vivo cellular behavior than planar
models due to differences in cytostructure,
cell-cell/cell-matrix interactions and access to
trophic factors

https://doi.org/10.1089/neu.2006.23.1304 7
 3D scaffolds for brain tissue regeneration: architectural
challenges

8
https://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/2018/bm/c8bm00422f/unauth#!divAbstract
Review Article
Neuron-Glia Interactions in Neural Plasticity: Contributions
of Neural Extracellular Matrix and Perineuronal Nets
http://dx.doi.org/10.1155/2016/5214961

9
10
Que é a matriz extracelular?
• O espaço extracelular (ECS, por sua sigla em inglês -
Extracellular Space) ou Extracellular matrix, é
completamente preenchido por diferentes fatores
tridimensionalmente
• A existência da ECS foi formalmente conhecida em 1971
• O cérebro não é apenas composto por neurônios e outras
células como as glias, mas também por um conjunto de
moléculas chamado Matriz Extracelular
• A ECS é secretada por diferentes tipos de células, em várias
circunstâncias, mas pode-se dizer que os astrócitos são
seus produtores mais proeminentes
• 20% do fluído cerebral

11
Qual é a função da matriz
extracelular?
• Durante o desenvolvimento, as moléculas do ECS
são expressas em altas quantidades e modulam
funções celulares como migração, proliferação,
diferenciação e adesão, através dos receptores
da membrana celular
• Durante a idade adulta, o ECS esta em níveis
basais e regula funções importantes como
integridade, arquitetura e homeostase do
tecido, plasticidade celular e estrutura da fenda
sináptica.
NEUROPLASTICIDADE E
PARTICIPA DO “CÉREBRO PENSANTE” 12
Por que devem saber de matriz
extracelular? delta (1–4 Hz), theta (4–8 Hz), alpha (8–13 Hz)
(which is sometimes divided into alpha 1 (8–
10 Hz) and alpha 2 (11–13 Hz)) and beta (more
The impact of music on the bioelectrical oscillations of the brain than 13 Hz). Another category of very high (30–
40 Hz) frequencies is referred to as gamma waves
Keywords: electroencephalogram, music, spectral power
ACTA MEDICA LITUANICA. 2018. Vol. 25. No. 2. P. 101–106
The study made to analyze the impact of music on the bioelectrical oscillations of the brain
revealed the following results:
➢ Indonesian musical study revealed that music prominently increases the alpha activity in the brain and
also cognitive processes. Imaging music elicits the posterior alpha activities because imaging has the
power to enhance the alpha activity of posterior areas of the brain.
➢ Long term music therapy on comatose patients did wonders by increasing the amount of higher
frequency waves (α + β) and it decreased the amount of lower frequency waves (δ and θ), which
resulted in decreasing their quantitative EEG value δ + θ/α + β (1) 8. As the amount of high frequency
waves increased, the brain starts its activity.
➢ Also, the research found that those patients who are suffering from unresponsive wakefulness when fed
with music therapy, it reduced the theta/beta ratio and theta power, while shifting the dominant
rhythm into the alpha band thus recovering brain integrity.
➢ It is strongly agreed that music activates the brain in unconsciousness people.
➢ In people suffering from major depression, schizophrenia, or anxiety symptoms, music therapy increases
alpha and reduces beta activity over time, thus reduces their anxiety levels and makes them come out of
their illness.
➢ The major advantage of music therapy with depression patients is – it increases the left frontotemporal
alpha power, as well as in the left frontocentral and the right temporoparietal theta power. This process
reduces their depression and helps them lead a happy life.
➢ Music therapy for patients with schizophrenia increased alpha activity in prefrontal, frontal, temporal,
and parietal lobes and brought them back to the original state. 13

Shaping Synapses by the Neural Extracellular Matrix.
Maura Ferrer-Ferrer1 and Alexander Dityatev, 2018
Enhanced cortical and hippocampal
neuronal excitability in mice
deficient in the extracellular matrix
glycoprotein tenascin-R. Molecular
and cellular neurosciences14 25, 515–
523 (2004).
 • Os neurônios aumentam quando ativos e
encolhem quando dormentes. Portanto, o
tamanho do espaço entre eles é alterado.
• Durante o sono, os neurônios encolhem
drasticamente para permitir aumento do
ECS (até um 60%) com um aumento do
fluxo de fluido pelo espaço permitindo
intercambio entre fluído cérebro-espinhal
Vermelho é aumento do ECS com o intersticial, permitindo restaurar
funções fisiológicas como limpar a β-
amiloide

15
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3880190/
 ECS

ECS
AQP4: aquaporim 4, é um proteína canal prevalente
perto dos astrócitos e membrana dos vasos
sanguineos permitindo a saída de água Sistema linfático

O conjunto “glymphatic” (glia + linfático)

limpam os “detritos” neuronais
16
 Neuroimmunological Implications of AQP4 in
Astrocytes

• AQP4 plays an important role in neuroimmunological functions in injured mouse brain in

concert with the proinflammatory inducer osteopontin (OPN)
• two isoforms, which are cleaved by thrombin or matrix metalloprotease: a secreted form of
OPN (sOPN) and an intracellular form of OPN (iOPN)
• Involvement of AQP4 in communication between reactive astrocytes and reactive microglial
cells: Direct interaction between AQP4 and intracellular form of osteopontin (iOPN).
• Integrin receptors for secreted form of osteopontin (sOPN) might enable an indirect
interaction with AQP4.
17
Int. J. Mol. Sci. 2016, 17, 1306; doi:10.3390/ijms17081306
 Astrocytic water channel aquaporin-4 modulates brain plasticity in both mice
and humans: a potential gliogenetic mechanism underlying language-
associated learning
Molecular Psychiatry volume 23, pages1021–
1030 (2018)
doi:10.1038/mp.2017.113

18
Qual é a função da matriz
extracelular?
• Algumas moléculas como brevican, neurocan,
tenascina-R e a versican são apenas expressas no
SNC, de forma estável, e formam as chamadas Redes
Perineuronais (PNNs, por sua sigla em inglês –
Perineuronal Nets), que rodeiam as células
inibitórias (parvoalbumina (+)) ao longo do córtex
cerebral
• Após uma lesão do SNC, os astrocitos , microglia e
oligodendrócitos, aumentam a secreção de ECS e de
mielina, retornando o SNC a um estado em estágios
iniciais de desenvolvimento, onde a plasticidade
celular é um fator determinante 19
 PROGENITOR MARKER EXPRESSION AFTER
CNS DAMAGE
Astrocytes become reactive
following CNS damage

Influence of the extracellular matrix on endogenous

and transplanted stem cells after brain damage. 2014
•Frontiers in Cellular Neuroscience 8:219
DOI:10.3389/fncel.2014.00219

reactive astrocytes express CSPGs and

other ECM molecules

GFAP Vimentin Nestin (near the lesion)

progenitor markers

The extracellular matrix

after CNS damage
This environment can promote, but also inhibit
regeneration by affecting neurons, astrocytes,
20
and oligodendrocytes
 Hippocampal extracellular matrix alterations contribute to
cognitive impairment associated with a chronic depressive-like
state in rat
➢ Social defeat–induced persistent stress (SDPS) to induce a depressive-like state in
rats
➢ SDPS aumenta o número de interneurônios que expressam parvalbumin presentes na
PNN no hipocampo (CA1)

Redes Perineuronais (PNNs

chondroitin sulfate proteoglycans (CSPGs)
Social defeat–induced persistent stress (SDPS)
https://stm.sciencemag.org/content/9/421/eaai8753.full 21
Quais os componentes que
compõem a matriz extracelular?
• 4 grandes grupos: proteoglicanos, hialuronano, tenascina e
proteínas de ligação (NCAM - neural cell adhesion molecule)

1. Os proteoglicanos compreendem um grupo importante

chamado lecticanos, que através de diferentes configurações
genéticas, compõe o neurocan, agrecan, brevican e versican,
quatro das moléculas principais e mais complexas do ECS
Lecticanos:- desempenham funções importantes durante o
desenvolvimento e lesão do SNC, sendo fatores que guiam a
uma estruturação e organização das células; - ajudam na
reparação da mielina; - configuração tridimensional

22
 Embriões de
camundongos
E18.5

Ausente em cérebro mas presente em cartilagem

23
 Proteoglicanos e “specific chondroitin
sulphate proteoglycans” (CSPGs)

• Proteoglicanos e “specific
chondroitin sulphate
proteoglycans” (CSPGs)
• cadeias de carboidratos
ligados a uma grande
proteína

Estrutura das Redes

Perineuronais (PNNs): HAS-
hialuronano é secretado pela
membrana do neurônio

24
Proteoglicanos e “specific chondroitin sulphate
proteoglycans” (CSPGs)
https://www.nature.com/art
icles/s41598-017-05790-3 • Os CSPGs estão
envolvidos na
estabilidade das
memórias na
amígdala e ajudam às
redes perineurais a
manter a estabilidade

Mysterious ‘holes’ in neuron net

may help store long-term
memories
http://www.sciencemag.org/news
/2015/10/mysterious-holes-
neuron-net-may-help-store-long-
term-memories
25
Quais os componentes que
compõem a matriz extracelular?

2. Hialuronano (hyaluron): principal componente do tecido

cartilaginoso ou conetivo, interage com os Lecticanos por
meio das proteínas de ligação, se expressa sobre todo
durante o neurodesenvolvimento
3. Tenascinas: -glicoproteínas; - importantes: Tenascina-C
(TnC), Tenascina-R (TnR); -formação de cicatriz fibrosa; -
funções de sinalização celular através de canais de sódio
e cálcio para regular as funções da membrana e,
especialmente, no caso da TnR do axônio; - TnR é
expressa principalmente por oligodendrocitos e
interneurônios; - TnC é expressa principalmente por
astrócitos e tem função de inibição

26
27
Outros
componentes

Em cultura celular são essenciais: fibronectin (cola biológica), laminin, or collagen type IV

Moléculas típicas do SN: Reelina (envolvida na esquizofrênia:

http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0101-
60832013000100006), hialuronano, tenascina, proteoglicano: specific
chondroitin sulphate proteoglycans (CSPGs), laminina (cerca de 20
glicoproteínas, entrelaçada com a rede de colágeno tipo IV nas
membranas basais), e o maior receptor de ECS: receptor integrina
28
• Integrina - um dos
principais receptores da
membrana, liga-se à
matriz, especificamente
às moléculas reelina,
tenascina,
proteoglicanos de
condroitina (CSPGs) e
lamininas.
• Moléculas do ECS são
produzidas dentro das
células e depois vão
para matriz e ancoram
os neurônios e facilitam
a organização do SN
29
 Moléculas típicas do SN:
Reelina (envolvida na
esquizofrênia:
http://www.scielo.br/scielo.p
hp?script=sci_arttext&pid=S0
101-60832013000100006),
hialuronano, tenascina,
proteoglicano: specific
chondroitin sulphate
proteoglycans (CSPGs),
laminina (cerca de 20
glicoproteínas, entrelaçada
com a rede de colágeno tipo
IV nas membranas basais), e o
Reelin and Neuropsychiatric Disorders maior receptor de ECS:
https://www.frontiersin.org/articles/10.3
389/fncel.2016.00229/full
receptor integrina
30
 Modelo teórico para ligar o estresse pré-natal, reelin e prejuízo cognitivo PFC
Schizophrenia and reelin: a model based on prenatal stress to study
epigenetics, brain development and behavior
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4787713/ 31
Quais são as três partes básicas
da matriz extracelular?
1) A membrana basal, ou lâmina basal: é
uma folha sólida de moléculas que separa
os astrócitos e neurônios das células
endoteliais circundantes. Ela entra em
contato com a pia-máter no SNC. Consiste
em colágeno, complexos de laminina,
fibronectina, distroglicana e perlecan.
Formam a BHC

32
Quais são as três partes básicas
da matriz extracelular?

2) Redes Perineurais (PNNs, por sua

sigla em inglês – Perineuronal Nets):
consistem de uma malha de
moléculas grandes, incluindo
proteoglicanos, tenascina e proteínas
ligando que cobrem o corpo e
dendritos do neurônio. Estabilizam
sinapses. A quebra produz alterações
no equilíbrio dos neurônios
excitatórios e inibitórios envolvidas
nas convulsões (epilepsia).

33
Quais são as três partes básicas
da matriz extracelular?

3) Matriz intersticial: -que é densa; -não está

aderida às membranas basais ou redes perineurais; -
inclui: proteoglicanos, hialuronano, tenascinas,
proteínas de ligação, colágenos, e laminina e
fibronectina

34
 Entender
os mecanismos
neuroplásticos

Astrócito
RTK: receptor de tirosine quinase
NCAM: neural cell adhesion molecule
VDCC: voltage-dependent calcium channels Filamento
de actina
http://jonlieffmd.com/blog/another-form-of-neuroplasticity-by-
switching-glutamate-nmda-subunits
35
 Metaplasticidade e ECS
• Metaplasticidade: forma de plasticidade sináptica persistente;
LTP ou LTD (long-term potentiation or depression)
(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/8658594)
• Pode envolver receptores NMDA e AMPA de glutamato
• De dentro da célula, o aumento de
cálcio desencadeia a plasticidade
sináptica. Reelina, fora da célula,
regula os receptores críticos de
glutamato NMDA. Ela ajuda na
migração de neurônios e formação
do córtex e do córtex cerebelar
controlando a ordem de chegada
das células para formar as camadas.
Reelina continua a ser um fator
Estimula
crítico na função das sinapses.
actina
-VLDLR : very-low-density-lipoprotein receptor
-APOER2: apolipoproteína E receptor 2 – RECEPTOR DE
REELINA
-LVDCC: L-type voltage-dependent Ca2+ channel

Grande conclusão: que LTP e LTD também depende de um receptor de reelina36

 Mecanismos de indução de plasticidade sináptica

Extracellular Matrix
Molecules, their Receptors,
and Secreted Proteases in
Synaptic Plasticity

➢ Indução de LTP e LTD é mediada por um aumento de Ca2+ intracelular devido à

ativação de NMDARs e dependente de voltagem do tipo Canais tipo L-Ca2 + (L-
VDCCs).
➢ Dependendo do nível de concentração de Ca2+ intracelular: ativa CaMKII, ou
proteína fosfatases, como PP2B.
https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/dneu.20958 37
Manutenção da sinapse e ECS

Enzimas “metallic” ou
“Matrix metalloproteinases”
conhecidas como MMPs,
cortam moléculas do ECS
permitindo que mais sítios da
integrina fiquem disponíveis
e por tanto interatuem com
os filamentos de Actina e
posteriormente mais
receptores podem ser
expostos na membrana
neuronal

38
Re-mielinização e MMPs

• MMPs: ajudam a reparar os

danos logo após a lesão cerebral
com o aumento da MMP2 que
esta relacionada com redução de
cicatrizes, redução da perda de
células neuronais
• Durante a mielinização e re-
mielinização após uma lesão, as
MMPs cortam laminina, CSPGs e
Morte receptores de integrinas. Uma
Divisão celular enzima particular MMP9 é
celular Diferenciação
celular necessária para a re-mielinização
e limpa os CSPGs.

39
Casting a net on dendritic spines: the extracellular matrix and
its receptors.
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Casting+a+Net+on+Den
dritic+Spines%3A+The+Extracellular+Matrix+and+its+Receptors

40
Links que recomendo
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4185430/
https://www.nature.com/articles/nrm3904
https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1002/dneu.20963
https://www.hindawi.com/journals/np/2014/321209/
https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fphar.2012.00120/full
https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1002/dneu.20958
http://jonlieffmd.com/blog/another-form-of-neuroplasticity-by-
switching-glutamate-nmda-subunits
http://jonlieffmd.com/blog/new-type-of-neuroplasticity-involving-
changes-in-neurotransmitters
http://jonlieffmd.com/blog/astrocytes-control-synapse-function
http://jonlieffmd.com/blog/extra-cellular-matrix-is-critical-to-
neuroplasticity
https://onlinelibrary.wiley.com/doi/pdf/10.1002/dneu.2095

41
OBRIGADA

42