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Princípios Básicos

O texto fornece uma breve revisão dos princípios básicos em biologia molecular,
destacando a importância dos ácidos nucléicos DNA e RNA. Ele explica que o DNA é
utilizado em pesquisas sobre a estrutura do gene, enquanto o RNA é estudado para
entender a expressão gênica. Descreve a composição dos ácidos nucléicos, destacando
as bases nitrogenadas e os açúcares presentes em cada um. Também explica a estrutura
da dupla hélice do DNA e como as bases nitrogenadas se ligam por pontes de
hidrogênio. Além disso, aborda a função do mRNA na síntese proteica e como os códons
correspondem aos aminoácidos na formação das proteínas. Em resumo, o texto fornece
uma visão geral dos conceitos fundamentais em biologia molecular, dando as primeiras
explicações para discutir as aplicações das técnicas relacionadas.

Principais Técnicas

A técnica de PCR (Reação de Polimerização em Cadeia) é uma ferramenta fundamental


em biologia molecular, permitindo amplificar sequências específicas de DNA em
grandes quantidades. Desenvolvida por K. Mullis em 1985, ela envolve uma série de
ciclos nos quais o DNA é separado, copiado e replicado, resultando em uma
multiplicação exponencial da sequência alvo. A introdução da enzima Taq polimerase,
extraída de uma bactéria termofílica, foi um avanço significativo, permitindo a
amplificação do DNA em temperaturas elevadas sem a necessidade de reposição da
enzima a cada ciclo. A técnica de PCR tem várias aplicações, incluindo a amplificação de
segmentos de DNA para análise posterior, como o sequenciamento de DNA e a
identificação de polimorfismos genéticos. A técnica de PCR-RFLP (Polimorfismo de
Comprimento de Fragmento de Restrição) permite a comparação de indivíduos e a
detecção de mutações através da digestão do DNA amplificado com enzimas de
restrição, seguida por eletroforese em gel para visualização dos padrões de fragmentos.
O sequenciamento de DNA é essencial para determinar a composição de uma sequência
específica de nucleotídeos, utilizando a técnica de Sanger, que utiliza nucleotídeos
normais e didesoxinucleotídeos para interromper a síntese da fita de DNA em pontos
aleatórios, resultando em fragmentos de diferentes comprimentos que podem ser
alinhados para determinar a sequência de nucleotídeos. Essas técnicas são
fundamentais para o estudo da genética e biologia molecular, permitindo a
compreensão da estrutura e função dos genes e proteínas.

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