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UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA – UNESP

FACULDADE DE CIÊNCIAS E LETRAS


CAMPUS DE ASSIS

ROTEIRO DE AULAS PRÁTICAS DA DISCIPLINA

DE EMBRIOLOGIA COMPARADA

CURSO DE GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS

Docente: Dra. Isabel Cristina Cherici Camargo


I - IDENTIFICAÇÃO :

Disciplina: EMBRIOLOGIA COMPARADA


Natureza: obrigatória
Carga horária: 60 h/aula
Curso: Ciências Biológicas

OBSERVAÇÕES GERAIS :

- nas aulas práticas é necessário o uso do jaleco e do roteiro de aulas práticas (impresso
ou online).
- o aluno deverá participar das aulas práticas na sua respectiva turma (A ou B).
- não é permitido arrastar o microscópio na bancada ou retirar de seu lugar.

CUIDADOS COM O MATERIAL UTILIZADO :

Durante o semestre, o aluno terá à sua disposição o microscópio óptico e uma


caixa de lâminas (laminário), que são materiais valiosos. Assim, o aluno será o responsável
pelo microscópio e lâminas durante as aulas práticas. Ao utilizar o microscópio, tenha
sempre o cuidado de não mover com força as objetivas e parafusos, e não mover o
aparelho de um lado para outro. Quando utilizar o óleo de imersão, faça-o somente
quando solicitado e obrigatoriamente use a objetiva de 100x. Na sequência, limpe a
lâmina e objetiva. As lâminas deverão retornar sempre à caixa, em seu devido lugar
(conforme numeração) e deverão ser limpas com papel macio após o uso.

OBS: em cada unidade de estudo, leia primeiramente o texto referente à lâmina. Na


sequência, procure identificar na lâmina as estruturas que estão sublinhadas no texto. Use
as figuras (fotomicrografias) do roteiro como um guia de estudo. As figuras são
apresentadas ao término de cada unidade, previamente a outro assunto.
UNIDADE I - ESPERMATOGÊNESE

Lâmina - Testículo de mamífero (rato adulto)

Observe na menor objetiva que o órgão é revestido externamente por uma cápsula
fibrosa denominada de túnica albugínea. Internamente, há várias estruturas internas
denominadas de túbulos seminíferos, as quais mostram aspecto arredondado devido ao
corte transversal do órgão. Estes compõem o compartimento tubular dos testículos. Passe
para a objetiva de 10 e 20 vezes e reconheça o compartimento tubular e o compartimento
intersticial, este último ocupado por agrupamento de células entre os túbulos seminíferos.
Na objetiva de 40x, em diferentes secções tubulares, procure identificar as células abaixo
relacionadas, com base na morfologia e localização nuclear:
A) Espermatogônias: apresentam núcleo esférico e se alinham circularmente junto à
parede tubular.
B) Espermatócitos I: localizam-se acima das espermatogônias, em direção à luz tubular, e
apresentam o maior volume nuclear que as demais células germinativas.
C) Espermátides: localizam-se próximo à luz do túbulo e apresentam variadas formas
nucleares em função da etapa da espermiogênese em que se encontram. Isto permite
distinguir as espermátides redondas ou imaturas e as espermátides alongadas ou
maduras.
D) Espermatozoides: localizados no interior da luz dos túbulos seminíferos, exibindo
flagelo com aspecto de finíssimo filamento e núcleo intensamente condensado (de cor
escura).
F) Células de Sertoli: representam a linhagem não germinativa no interior do túbulo
seminífero. Sua população é infinitamente menor que a população de células
germinativas. Estão localizadas entre as espermatogônias, as quais apresentam núcleo
irregular com nucléolo evidente, que permite a identificação fácil da célula.

No compartimento intersticial, observe as células de Leydig, que aparecem dispostas


em grupos, com núcleo arredondado (em azul violáceo) e abundante citoplasma (em
róseo).
Lâmina - Testículo de anfíbio (sapo)

Retire da caixa a lâmina referente ao testículo de sapo. Esta lâmina contém três
secções histológicas de órgãos próximos uns aos outros: testículo, ovário e rim.
Identifique o testículo, com base na presença de estruturas arredondadas características
(túbulos seminíferos), as quais alojam diferentes tipos celulares.
O testículo de sapo apresenta túbulos seminíferos cuja disposição das células
germinativas em seu interior difere daquela vista no rato. No sapo, as células se dispõem
em grupos no interior dos túbulos, caracterizando os denominados cistos celulares.
Identifique no interior dos túbulos seminíferos cada um dos seguintes cistos: de
espermatogônias (com células de núcleo esférico e com cromatina levemente corada), de
espermatócitos I (com células de núcleo volumoso e esférico, geralmente exibindo figuras
da divisão meiótica), de espermátides redondas ou imaturas (com células de núcleo
esférico e pequeno, de coloração pálida), de espermátides alongadas ou maduras (com
células de núcleo alongado e moderadamente denso), e de espermatozoides (que
aparecem intensamente corados e se dispõem em “tufos”).
No interior dos túbulos seminíferos observe junto à parede tubular as células de
Sertoli, as quais são conhecidas como células gigantes do testículo e aparecem com o
núcleo geralmente ovalado e pálido.
Entre os túbulos seminíferos, no escasso espaço intersticial, observe as células de
Leydig, que se posicionam junto aos capilares sanguíneos.

Lâmina - Epidídimo de mamífero (macaco ou rato - ver na caixa a identificação)

Este órgão é formado por um único ducto (ducto epididimário), intensamente


enovelado, que ao ser seccionado, mostra aparência na lâmina como se fossem vários
ductos. Identifique duas porções anatômicas do órgão:
A) segmento inicial ou cabeça: o ducto apresenta diâmetro reduzido, com parede
(epitélio) alto e luz estreita, com a presença ou ausência de gametas na luz. Representa o
local de trânsito espermático.
B) segmento terminal ou cauda: o ducto se expande nesta região do órgão, o epitélio é
delgado, a luz é ampla e no seu interior há muitos espermatozoides. Este segmento
representa o local de estocagem de espermatozoides e de maturação espermática
primária.
I TA

TS

I
TS TS

Testículo de rato – túbulos seminíferos (TS), túnica albugínea (TA) e interstício (I)

T s
CL

Compartimento tubular (T) e intersticial (I) do testículo. Células de Leydig (CL) e


célula de Sertoli (S). Reconheça as células germinativas com base no texto.

Fonte: autora (direitos reservados, 2019)


TS
I

TS

TS

Testículo de sapo – túbulos seminíferos (TS) com cistos celulares no interior.


Interstício (I)

C1
C3
C2
2

C2
Z
C4

Cistos de espermatogônia (C1), espermatócito I (C2), espermátide redonda (C3),


espermátide alongada (C4) e espermatozoides (Z). Reconheça os demais tipos celulares
com base no texto.

Fonte: autora (direitos reservados, 2019)


Z

Segmento inicial do epidídimo - ducto com espermatozoides (Z) na luz

Segmento terminal do epidídimo – ducto com espermatozoides (Z) na luz

Fonte: autora (direitos reservados, 2019)


UNIDADE II - BIOLOGIA DOS ESPERMATOZOIDES

Lâmina - Sêmen humano

Focalizar o material em aumento de 10x, 20x e 40x. Nesta última objetiva já é


possível visualizar os gametas, sem o uso de óleo de imersão. Identificar os
espermatozoides normais, constituídos de cabeça, colo e flagelo. Procure também
identificar alguns espermatozoides com morfologia anormal, os quais apresentam formas
teratospérmicas, tais como: cabeça separada de flagelo, cabeça grande ou pequena,
cabeça ovalada, flagelo duplo ou curto, flagelo enrolado, etc.

Lâmina - Imprinting de testículo de rato

A técnica do imprinting ou decalque é muito utilizada nos laboratórios patológicos,


para diagnóstico rápido de tumores em mucosas. Esta técnica foi especialmente
empregada aqui com a finalidade de obter os espermatozoides diretamente do interior
dos túbulos seminíferos. Focalize as áreas mais claras da lâmina, onde não há acúmulo de
células tais como, células germinativas descamadas do epitélio germinativo, leucócitos e
gametas misturados. Identifique os espermatozoides, os quais apresentam longo flagelo e
núcleo condensado, em forma de vírgula ou foice (vide foto). Verifique que a estrutura
morfológica do gameta nesta espécie animal é diferente daquela observada no humano.

Fonte: autora (direitos reservados, 2019)

Espermatozoide humano Espermatozoide de rato


UNIDADE III – OVOGÊNESE

Lâmina - Ovário de mamífero (cadela, rata ou coelha - ver na caixa a


identificação)

Focalize a lâmina em menor aumento, para ter uma visão geral da estrutura. Passe
depois para a objetiva de aumento médio e identifique:
a) região cortical - camada externa, onde estão localizados os folículos ovarianos.
Perifericamente, contornando e revestindo o órgão há o epitélio germinativo. Abaixo
deste há uma delgada camada fibrosa que constitui a túnica albugínea.
b) região medular - camada central, rica em vasos sanguíneos.
Na região cortical, identifique os folículos ovarianos, que são estruturas formadas
pela célula germinativa (o oócito ou ovócito), rodeada por células foliculares, em uma ou
mais camadas, dependendo do tipo folicular.
Identifique nas diferentes secções de ovários de mamífero em estudo os tipos
foliculares presentes:
* folículos primordiais e primários: localizados próximos à superfície do
ovário. São pequenos e caracterizam-se por apresentar o ovócito rodeado por uma única
camada de células foliculares achatadas (folículo do tipo primordial) ou células foliculares
arredondadas (folículo do tipo primário).
* folículos secundários: constituídos pelo ovócito rodeado por várias
camadas de células foliculares que constituem a denominada camada granulosa. Entre o
ovócito e a camada granulosa, está a zona pelúcida (de cor rósea pálida ou intensa, sem
células).
* folículo em crescimento ou pré-antral: caracterizado pela presença de
uma cavidade entre as células foliculares, denominada de antro folicular.
* folículo maduro ou antral ou pré-ovulatório: o antro é amplo e o folículo
atinge o grau máximo de maturação. O ovócito é rodeado pela corona
radiata (de células foliculares), preso à parede do folículo por meio de um
pedículo (o cumulus oophurus).
* folículo atrésico: é aquele que sofre degeneração (atresia) e desta forma
este tipo folicular é caracterizado morfologicamente por várias alterações
na sua estrutura, tais como, involução do ovócito, camada granulosa
delgada, desprendimento de células foliculares da camada granulosa e
presença destas no interior do antro, as quais exibem núcleos picnóticos
(fortemente corados e reduzidos).
Na lâmina de ovário de rata, há estruturas bem distintas dos folículos ovarianos,
denominadas de Corpo lúteo – estrutura celular compacta, arredondada, de diâmetro
variado, de cor rósea avermelhada e que faz saliência na superfície do ovário. Por se tratar
de uma espécie multípara, há vários corpos lúteos presentes em cada ovário.

Lâmina - Ovário de ave (pomba)

Observe a gônada em menor aumento e depois passe para o aumento médio.


Compare a estrutura ovariana de uma ave com a de um mamífero (lâmina anterior).
Observe a presença de vários folículos em crescimento e folículos maduros ou antrais, na
periferia do órgão. Identifique nos folículos maduros: a parede celular (camada granulosa)
e um citoplasma cortical ou ooplasma contendo grânulos de gema em seu interior. O
ovócito pode ou não estar presente na estrutura folicular.

Lâmina – Ovário de anfíbio (sapo)

Retire da caixa a lâmina referente ao testículo de sapo. Esta lâmina contém três
órgãos próximos uns aos outros: testículo, ovário e rim. Procure identificar o ovário.
Observe que este é constituído por estruturas arredondadas, de tamanho variável. Estas
estruturas são os folículos ovarianos. Identifique os dois tipos presentes: primordiais e
primários, com base na morfologia das células foliculares ao redor do ovócito. Observe
que o núcleo do ovócito é redondo, o nucléolo é evidente, a cromatina é condensada e
dispersa na periferia do núcleo e o citoplasma do gameta é abundante.
M C
F

F
F

Ovário de mamífero: medula (M), córtex (C) e folículos (F)

FC

FA
FS

FS o
o
p
pr

Destaque para os folículos primordiais (p), folículos primários (pr), folículos


secundários (FS), folículos em crescimento ou pré-antrais (FC) e folículos atrésicos
(FA). Ovócito (o). Identifique os componentes morfológicos de cada tipo folicular, com
base no texto.

Fonte: autora (direitos reservados, 2019)


O
A

Folículo pré-antral - ovócito (O) e camada granulosa (G) com células em mitose
(setas). Antro (A) em início de formação.

Folículo atrésico: ovócito em degeneração e núcleos picnóticos no antro.


Reconheça o tipo folicular com base no relato do texto.

Fonte: autora (direitos reservados, 2019)


CL

M CL

Corpos lúteos (CL) no córtex ovariano. Medula o ovário (M).

Fonte: autora (direitos reservados, 2019)

UNIDADE IV - CICLO SEXUAL

Lâmina - Útero de mamífero (rata ou cobaia)

Observe o órgão na objetiva de 10x e 20x e identifique suas diferentes camadas


histológicas:
A) endométrio ou mucosa: camada interna, formada pelo epitélio uterino (em
contato com a cavidade do órgão), e o estroma endometrial (rico em células, glândulas e
vasos sanguíneos). A glândula se diferencia do vaso sanguíneo por apresentar contorno
regular e revestimento (epitélio) mais espesso, geralmente de coloração violácea. O vaso
sanguíneo apresenta contorno variável, predominando o arredondado, e a parede é fina.
B) miométrio ou muscular: é a camada intermediária, constituída por fibras
musculares lisas, com duas orientações: circular e longitudinal.
C) perimétrio ou serosa: é a camada externa, delgada e formada por revestimento
epitelial e estroma fibroso.
E

Útero de rata – Endométrio (E); luz ou cavidade uterina (L).


Reconheça os demais constituintes morfológicos com base no texto.

Estroma endometrial com vasos sanguíneos (V) e glândulas (G)

Fonte: autora (direitos reservados, 2019)


P
M

Miométrio (M) e Perimétrio (P)

Fonte: autora (direitos reservados, 2019)

UNIDADE V - SEGMENTAÇÃO OU CLIVAGEM

Lâmina – Ovos de ouriço-do-mar

Nesta lâmina identifique: ovos não segmentados (célula ovo ou zigoto) e ovos
segmentados nas fases de 2, 4 e 8 blastômeros, e a fase de mórula. Poucos ovos na fase
de blástula estão visíveis no material. Muitos ovos já se encontram na etapa posterior do
desenvolvimento embrionário, a gastrulação.
G
G

Ovos de ouriço-do-mar em diferentes estádios de segmentação e a gástrula (G)


Reconheça cada estádio.

Fonte: autora (direitos reservados, 2019)

UNIDADE VI - GASTRULAÇÃO

Lâmina - Ovos de ouriço-do-mar

Utilizando-se a objetiva de 20x ou 40x, identifique entre os ovos em processo de


segmentação, aqueles que se encontram na fase de gastrulação (vide figura da Unidade
V). Na gástrula, identifique:
A) Arquêntero: tubo digestivo primitivo.
B) Blastóporo: corresponde à abertura do arquêntero para o meio externo. Esta
abertura corresponderá ao ânus na futura larva Pluteus.
C) Endoderma: revestimento da parede do arquêntero.
D) Ectoderma: revestimento externo do corpo da gástrula.
E) Mesoderma: folheto intermediário que compõe o corpo da gástrula.
Lâmina - Montagem total de embrião de galinha de 18horas de incubação

Identifique na lâmina a área pelúcida, de cor clara, interna, onde se encontra o


embrião no estádio de linha primitiva; e a área opaca, externa, de cor mais escura.
Na linha primitiva identifique seus constituintes morfológicos: a região alongada
mais clara entre as duas bordas escuras é denominada de sulco primitivo, e as bordas são
as bordas primitivas.
A região mais compacta na extremidade da linha primitiva é o Nó de Hensen ou nó
primitivo, que indica a futura posição cefálica do embrião.

AP

NH LP

Embrião de galinha de 18 horas de incubação: área pelúcida (AP) com embrião na


fase de linha primitiva (LP) da gastrulação. Na extremidade da LP observe o Nó de
Hensen (NH). Reconheça as estruturas morfológicas descritas no texto.

Fonte: autora (direitos reservados, 2019)


UNIDADE VII - ANEXOS EMBRIONÁRIOS E PLACENTA

Lâmina - Cordão umbilical humano

Com o menor aumento, observe o aspecto geral do cordão umbilical, seccionado


transversalmente (aparência arredondada). Identifique a presença de três vasos
sanguíneos: uma veia (luz irregular) e duas artérias (luz arredondada). Em geral, o
diâmetro da artéria é menor do que da veia vitelina. Identifique ainda:
A) tecido conjuntivo mucoso: conhecido por geleia de Wharton, que preenche todo o
espaço entre os vasos. Apresenta células e fibrilas.
B) epitélio amniótico: é o revestimento externo do cordão umbilical, com células.
C) o resquício do alantoide: pequeno anexo embrionário, nas imediações dos vasos, de
aspecto circular concêntrico.

Lâmina - Cordão umbilical bovino

Focalizar a estrutura em menor aumento e identificar o epitélio amniótico, que


apresenta estruturas compactas e celulares denominadas de saliências epiteliais, as quais
aparecem em intervalos irregulares ao longo do epitélio amniótico. Observe a presença de
tecido conjuntivo mucoso, que preenche todo espaço interno do cordão umbilical, onde
estão inseridos quatro vasos sanguíneos (duas artérias e duas veias). As artérias estão na
periferia e as veias, na região central. Identifique também o pedículo alantoideano, com
luz irregular e revestimento celular, localizado entre os vasos sanguíneos.

Lâmina - Placenta de porca

Identifique a parte materna e a parte fetal (vide figura no roteiro). Na parte


materna (decídua basal), observe o endométrio que é constituído por:
A) epitélio uterino, que reveste internamente a parede do órgão; e, estroma endometrial
constituído por células, fibras, glândulas e vasos sanguíneos.
B) glândulas uterinas, localizadas no estroma endometrial, revestidas por epitélio com
células de núcleo esférico.
C) vasos sanguíneos maternos, com luz mais ampla que das glândulas e parede mais
delgada, localizados no estroma endometrial.
Identifique as estruturas que formam a parte fetal (cório):
A) epitélio coriônico ou trofoblasto, em contato com o epitélio uterino, caracterizando-se
assim, uma placenta do tipo epiteliocorial.
B) mesênquima fetal, de coloração clara, com presença de células mesenquimais e vasos
sanguíneos.
C) vasos fetais, de diâmetros variados, com luz evidente e parede delgada.
Notar que o epitélio uterino se encontra pregueado, em adaptação ao epitélio
coriônico. Observar a presença de duas camadas teciduais que também formam a parede
uterina: o miométrio e o perimétrio.

Lâmina - Placenta humana

Nesta lâmina, identifique as seguintes estruturas:


A) vilosidades coriônicas (porção fetal da placenta, que representa o cório): são
observadas com formas arredondadas, longitudinais ou oblíquas. Na periferia das
vilosidades há uma região de núcleos fortemente corados. É o sinciciotrofoblasto. Observe
ainda que internamente as vilosidades apresentam um tecido conjuntivo (mesênquima,
com células mesenquimais e pequenos vasos sanguíneos).
B) porção materna da placenta (representada pela decídua basal), com o estroma
endometrial constituído de vasos sanguíneos, glândulas e células deciduais (sendo estas,
observadas pelo seu núcleo esférico, citoplasma abundante e acidófilo).
Cordão umbilical humano

Cordão umbilical humano

Fonte: https://facweb.northseattle.edu/jlearn/BIOL_241_242/images/umbilical.JPG

TM

Fonte: autora (direitos reservados, 2019)

Cordão umbilical humano – destaque para a parede da artéria (A) e tecido conjuntivo
mucoso (TM). Reconheça na lâmina as demais estruturas com base no texto.
VF T
G
EU
M
E
VM

Placenta de porca – porção fetal à esquerda e porção materna à direita. Mesênquima


(M); trofoblasto (T), vaso fetal (VF); epitélio uterino (EU), estroma endometrial (E),
glândula (G) e vaso materno (VM).

Placenta humana – porção materna com destaque ao estroma endometrial com células
deciduais (em róseo avermelhado)

Fonte: autora (direitos reservados, 2019)


Placenta humana – porção fetal, com destaque às vilosidades coriônicas. Reconheça os
constituintes morfológicos com base no texto.

Fonte: autora (direitos reservados, 2019)

UNIDADE VIII - ORGANOGÊNESE RUDIMENTAR

Lâmina - Montagem total de embrião de galinha de 24 horas de incubação

Use a objetiva de menor aumento para ter uma visão geral do corte. Nesta fase do
desenvolvimento, o embrião representa o período da organogênese rudimentar.
Identifique as seguintes estruturas:
A) área opaca: periférica, contendo as ilhotas sanguíneas.
B) área pelúcida: área embrionária, de coloração mais clara que a área opaca e onde o
embrião está alojado.
C) borda neural: que são duas estrias escuras de ambos os lados, localizadas na região
cefálica do embrião.
D) sulco neural: entre as bordas neurais.
E) dobra cefálica- de ambos os lados, onde se pode notar uma estrutura em forma de
“asa”.
F) notocorda - localizada entre os somitos.
G) somitos - estruturas cuboides, de cada lado da notocorda.
H) linha primitiva – em regressão na parte caudal, devido ao avanço da notocorda.

Área opaca

BN SN

DC

N
Área pelúcida
So

Embrião de 24 horas de incubação em montagem total – borda neural (BN), dobra


cefálica (DC), sulco neural (SN), notocorda (N) e somitos (So).

Fonte: autora (direitos reservados, 2019)


N
o
So
LP

Embrião de 24 horas de incubação em montagem total. Destaque para: notocorda (N)


somitos (So) e linha primitiva (LP).

Fonte: autora (direitos reservados, 2019)

UNIDADE IX - ORGANOGÊNESE

Lâmina - Montagem total de embrião de galinha de 33 horas de


incubação.

Focalize a lâmina com a objetiva panorâmica e identifique as seguintes estruturas:


A) vesículas cerebrais primitivas: prosencéfalo, mesencéfalo e rombencéfalo.
B) vesículas ópticas: localizadas lateralmente na parede do prosencéfalo.
C) tubo endocárdico (coração): saliência lateral, no nível do rombencéfalo.
D) seios venosos: na base do tubo endocárdico, do lado esquerdo e direito.
E) somitos: blocos cuboides laterais à medula espinhal.
F) seio romboidal: local onde a linha primitiva está regredindo.
VO

PR

ME
VO
RO

TE

SV

Embrião de galinha de 33 horas de incubação em montagem total – vesículas


cerebrais primitivas (prosencéfalo – PR; mesencéfalo – ME; rombencéfalo – RO),
vesículas ópticas (VO), tubo endocárdico (TE) e seios venosos (SV).

So

Embrião de galinha de 33 horas de incubação – somitos (So) e medula espinhal (M)

Fonte: autora (direitos reservados, 2019)


UNIDADE X - MORFOLOGIA INTERNA DE FETO HUMANO

Lâmina - Feto humano

Analise a lâmina a olho nu (macroscopicamente) e faça o desenho do contorno do


corpo do feto. Procure identificar a região cefálica e o tronco fetal. No microscópio,
observe na objetiva de menor aumento a estrutura morfológica interna de alguns de seus
órgãos: coração, fígado, pulmão, cérebro, boca, olho e coluna vertebral.
(obs: esta lâmina não é a que está na caixa)

pulmão

coração

Morfologia interna do feto humano – destaque para o pulmão e coração

Fonte: autora (direitos reservados, 2019)


Morfologia interna do feto – destaque para o fígado

Fonte: autora (direitos reservados, 2019)

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