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EUR. J. Wood Prod. (2017) 75:1021–1024
DOI 10.1007/s00107-017-1192-9
BREVE ORIGINAL
Ensaio industrial para avaliar a eficácia da impregnação
por pressão de vácuo na eliminação do nemátodo da madeira do pinheiro
LuísÿFonseca1 ÿ· AndreiaÿSantos2 ÿ· SabrinaÿAmado2 ÿ· ManuelÿPedroso2 ÿ·
IsabelÿAbrantes1
Recebido: 28 de outubro de 2016 / Publicado online: 17 de maio de
2017 © Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2017
Resumo Um ensaio usando o método de célula cheia em uma
autoclave industrial foi realizado para avaliar a eficiência do
tratamento de impregnação à pressão a vácuo com um produto
comercial de preservação da madeira para eliminar o nematóide da
madeira do pinheiro, Bursaphelenchus xylophilus, de troncos e
seções de madeira de Pinus pinaster infectados . Após tratamento
e incubação da madeira, nenhum nematóide vivo foi detectado nos
troncos e cortes tratados. Este tratamento revelou
ser uma boa forma de eliminar os nemátodos da madeira e reduzir
o risco de disseminação do nemátodo da madeira do pinheiro.
1. Introdução
A introdução de pragas invasoras de plantas exóticas em áreas
não nativas levou ao desenvolvimento e aplicação de medidas de
quarentena de plantas. Muita pesquisa foi feita para fornecer
procedimentos fitossanitários apropriados contra a introdução e
disseminação de pragas de plantas exóticas. Numerosas pragas e
patógenos de plantas são transportados ao redor do mundo através
do comércio internacional de madeira. Algumas dessas pragas e
patógenos de plantas causaram perdas econômicas e ecológicas
significativas e são consideradas grandes ameaças às áreas florestais. eliminar o NMP da madeira em escala industrial, evitando o uso
O nematóide da madeira do pinheiro (PWN), Bursaphelenchus
xylophi lus, agente causal da doença da murcha do pinheiro é
considerado um organismo quarentenário pelos europeus e mediterrâneos
2013). Além disso, ensaios de laboratório realizados com vários
* Luís Fonseca
luis.fonseca@uc.pt
1 O objetivo deste estudo foi demonstrar a eficácia do VPI, com
CFE - Centro de Ecologia Funcional, Departamento de Vida
Sciences, University ofÿCoimbra, Calçada Martim de Freitas,
P 3000-456 Coimbra, Portugal
2
MTL - Treated Timber Ltd, Rua de Fonte Cova, 51, Apartado
4, Pÿ2426-908ÿMonteÿRedondo,ÿLeiria, Portugal
Plant Protection Organization (EPPO) e tem causado grandes
perdas em florestas de coníferas em todo o mundo (EPPO 2013).
Uma vez que o material lenhoso foi reconhecido como um dos
caminhos mais importantes para a dispersão do NMP, a Convenção
Internacional de Proteção de Plantas (IPPC) adotou o Padrão
Internacional para Medidas Fitossanitárias No. 15 (ISPM 15). De
acordo com esta Norma Internacional, todo material de embalagem
de madeira deve ser tratado por tratamento térmico (HT),
aquecimento dielétrico ou fumigação com brometo de metila (restrito
em muitos países). O HT é o tratamento mais utilizado mundialmente
e é realizado em fornos com a exigência de que a madeira atinja
um mínimo de 56 °C por 30 min a
o núcleo (FAO 2013). O HT nem sempre é eficaz para todos os tipos
de madeira e só é economicamente viável para peças de madeira
com menos de 50 mm, pois a eliminação de água é difícil em peças
mais grossas. Além disso, HT não deixa vestígios observáveis na
madeira facilitando falsificações e mau uso (Arcos et al. 2015).
Portanto, o IPCC identificou a necessidade de desenvolver e
implementar tratamentos alternativos ao HT. A impregnação sob
pressão a vácuo (VPI) com produtos comerciais de preservação da
madeira, comumente usados para proteger a madeira externa contra
fungos e insetos, também pode ser um tratamento válido para
subsequente do HT . Já foram obtidos resultados preliminares sobre
a sua eficácia na eliminação do NMP da madeira (Fon seca et al.
produtos comerciais de preservação de madeira usando blocos de
madeira pré-inoculados com NMP revelaram eficácia na eliminação
de NMP (Arcos et al. 2015).
um produto comercial de proteção da madeira, na eliminação do
NMP e outros nematóides da madeira de pinheiro bravo, Pinus
pinaster, naturalmente infectada, em escala industrial.
Vol.:(0123456789) 1 3
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2. Materiais e métodos
2.1 Material de madeira
Três troncos de pinheiro bravo naturalmente infectados com PWN (5
m de comprimento e 150 mm de diâmetro) e três troncos de madeira
redonda (400 mm de comprimento e 150 mm de diâmetro) sem casca
foram obtidos em uma área de floresta de pinheiro bravo infectada na
Península de Setúbal, Portugal Continental. A população de nema
tode em cada tronco e seção foi avaliada serrando discos de madeira
de 20 mm de espessura usando uma serra mecânica de madeira de
cada extremidade dos troncos (cinco repetições) e seções (três
réplicas). Os discos de madeira foram cortados em pedaços (100 g)
e os nematóides foram extraídos usando o método de bandeja de
Whitehead e Hemming. As amostras de madeira foram embrulhadas
em papel de seda e colocadas sobre uma tela plástica sobreposta a
uma bandeja plástica. A bandeja foi preenchida com água até que a
amostra de madeira estivesse completamente imersa.
Após 48 h, a amostra foi passada por uma peneira de 20 µm e a
suspensão resultante foi coletada para quantificação do nematoide.
Todos os nematóides presentes nas suspensões foram quantificados
e B. xylophilus foi identificado com base nos principais caracteres
morfológicos diagnósticos (EPPO 2013). O teor de umidade da
madeira em cada tronco e seção foi medido em três pontos usando
um medidor digital de umidade da madeira (GANN Hydromette HT
65, Alemanha), e o teor de umidade da madeira de cada tronco e
seção foi estimado usando a média dos três valores de medição.
Fig. 1 Método de célula completa
em uma autoclave industrial para
tratamento de impregnação sob pressão a vácuo
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2.2 Tratamento de impregnação por pressão a vácuo
Os troncos e seções foram submetidos ao full-cell
Método, Bethell Method, em autoclave industrial horizontal para
tratamento de VPI (Fig. 1) (Moldrup, Dinamarca) na empresa MTL-
Madeiras Tratadas, Lda (MTL.-Trated Timber Lda), Monte Redondo,
Leiria, Portugal).
Os troncos e seções foram submetidos a um vácuo inicial (25 min,
0 a -950 mbar), onde bombas de vácuo retiraram o ar da autoclave
industrial e da estrutura de madeira. Enquanto a autoclave estava
sendo inundada com o produto conservante de madeira comercial, o
vácuo foi mantido. Depois de encher a autoclave, um passo de
pressão (75 min, 12.500 mbar) foi processado e impregnado a solução
profundamente na madeira. Finalmente, uma etapa final de vácuo (8
min, 0 a -950 mbar) foi realizada garantindo que a madeira pudesse
ser transportada sem pingar para fora do sistema.
O produto conservante de madeira comercial usado neste ensaio foi
TANALITH® E NB composto de óxido de cobre (ÿ10–ÿ15% p/p), 2
aminoetanol (ÿ25–ÿ50% p/p) e tebuconazol (ÿ2,5% p /w) mais aditivo
AC3744 (Arch Timber Protection Ltd., Inglaterra).
2.3 Quantificação de nematóides após VPI
Após o tratamento com VPI mais incubação, a presença de nematóides
vivos foi avaliada usando o método da bandeja de Whitehead e
Hemming conforme descrito acima. Os três troncos foram cortados
em 10 discos de madeira de aproximadamente 100 mm de espessura,
com serra mecânica para madeira, acondicionados em sacos plásticos e
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transportado para o laboratório. A quantificação dos nematóides em
cada tronco foi estimada utilizando 500 g de madeira (cinco
repetições de 100 g) de cada disco de madeira (alburno e cerne)
após 15 dias e 30 dias de incubação a 25 °C.
No caso das três seções de madeira, elas foram cortadas em
pequenos pedaços de madeira e processadas após 15 dias de
incubação a 25 °C para quantificação do nematóide.
3 Resultados e discussão
O número de nematóides/g de material de madeira antes do VPI
(Tabela 1) estava de acordo com o protocolo técnico para testar
nematóides durante o desenvolvimento do tratamento, no qual as
densidades populacionais de nematóides devem refletir uma situação
normal de surto com a população de nematóides variando entre 100
e 20.000 nematóides/ g de madeira com mais de ÿ60% de estágios
juvenis de terceira dispersão, considerado o estágio de vida mais
resistente (Magnusson e Schroder 2009). Além disso, os troncos e
seções de madeira apresentaram teor de umidade inferior a 25%
(Tabela 1), ideal para o tratamento por pressão a vácuo.
Após o tratamento com VPI mais os períodos de incubação,
nenhum nematóide vivo foi detectado nos troncos e cortes tratados,
demonstrando 100% de eficácia contra NMP e outros nematóides
(Tabela 1).
No caso dos troncos, nem todo o material lenhoso foi analisado.
A triagem para a presença de nematóides vivos foi feita com 500 g
de madeira de cada disco. Em relação às seções, todo o material de
madeira foi
analisados após um período de incubação de 15 dias a 25 °C.
A quantificação dos nematoides após os períodos de incubação foi
feita para deixar a madeira secar e simular o armazenamento do
material lenhoso em indústrias.
Além disso, períodos de incubação foram usados para permitir que
qualquer nematóide vivo presente se reproduza maximizando a
probabilidade de detecção (EPPO 2013) e também para aumentar o
tempo de contato com o preservativo de madeira.
Vários produtos conservantes de madeira comerciais já foram
testados em ensaios de laboratório usando blocos de madeira
30×10×5 mm3 pré-inoculados com NMP e revelaram eficácia na
eliminação de NMP (Arcos et al. 2015). Os componentes do
preservativo de madeira utilizados neste ensaio industrial fazem parte
da composição de alguns produtos de preservação de madeira
testados por Arcos et al. (2015). Outros ensaios industriais devem
ser realizados usando outros produtos comerciais de preservação de
madeira.
A eficácia do tratamento VPI pode residir no efeito nematicida
sinérgico do produto preservativo de madeira, além do efeito físico
do vácuo e da pressão nos nematóides. Estudos laboratoriais
anteriores com seções de madeira naturalmente infectadas (75 mm
de comprimento/20 mm de largura) e lascas de madeira revelaram
que a própria alta pressão tem efeito na sobrevivência do nematóide.
Após o tratamento de alta pressão, a 5 e 15 MPa, nematóides vivos
foram detectados em pedaços de madeira e cavacos, mas a 30 MPa
nenhum nematóide foi detectado em pedaços de madeira e cavacos
(Fonseca et al.
2014). No presente ensaio industrial, a pressão máxima utilizada
(1,25 MPa) foi inferior a 5 MPa. Portanto, o efeito nematicida foi
principalmente devido ao conservante de madeira

Tabela 1 Comprimento, peso e teor de umidade da madeira de troncos e cortes de pinheiro bravo utilizados no ensaio industrial. Número de Bursaphelen chus xylophilus
(PWN) e outros nematóides presentes em troncos e cortes de P. pinaster antes e após tratamento e períodos de incubação

Comprimento/ Teor de umidade antes do tratamento Após tratamento e incubação

peso (m/Kg) da madeira (%)
15 dias/25°C 30 dias/25°C

PWN Outros nematóides PWN Outro PWN Outro

(a) Troncos Nº nematóides/100 g

1 18.7 70,380±9483 2438±693 0 0 0 0
2 5/8 23.7 74,992±21,799 2358±318 0 0 0 0
3 24.3 36,594±2201 1056±464 0 0 0 0

Comprimento/ Teor de umidade antes do tratamento Após tratamento e

peso (cm/g) da madeira (%) incubação

15 dias/25°C

PWN Outros nematóides PWN Outros

(b) Seções Nº nematóides/100 g

A 40/852 19.5 38,105±9443 1050±191 0 0
B 40/1159 17.4 32.850±1237 600±14 0 0
C 40/1309 19.3 28.485±13.969 470±99 0 0

a: Dados do número de nematoides são médias de cinco repetições±desvio padrão b: Dados do

número de nematoides são médias de três repetições±desvio padrão

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produto que foi impregnado no núcleo do tronco por vácuo e
pressão. No entanto, pesquisas adicionais devem ser
realizadas em troncos de pinus naturalmente infectados
usando diferentes combinações de vácuo e pressão para
avaliar o real efeito do vácuo e da pressão na sobrevivência
do nematoide.
4. Conclusão
O tratamento de impregnação por pressão a vácuo com um
produto conservante de madeira comercial, além de conferir
proteção à madeira externa contra fungos e insetos, foi
eficiente na eliminação de B. xylophilus e outros nematóides
da madeira de P. pinheiro bravo em escala industrial, evitando
a aplicação de HT . Os resultados obtidos centram-se na
investigação aplicada e oferecem valor acrescentado à gestão
do NMP num mercado global de madeira internacional.
Acknowledgements This research was partially financed by MTL-Madeiras
Tratadas, Lda. (MTL.-Treated Timber Ltd.), Monte Redondo, Leiria, Portugal
and FCT (Fundação para a Ciência e Tec nologia)/MEC (Ministério da
Educação e Ciência) through national funds and the co-funding by the
FEDER, within the PT2020 Part nership Agreement and COMPETE 2020,
within the project UID/ BIA/04004/2013 and Instituto do Ambiente, Tecnologia
e Vida (IATV). Luís Fonseca is funded by FCT post-doctoral fellowship
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(SFRH/BPD/101325/2014) financiado por financiamento nacional do MEC e
pelo Fundo Social Europeu através do POCH (Programa Operacional Capital
Humano).
Referências
Arcos SC, Robertson L, Conde M, Llinares F, Navas A, Troya MT (2015)
Eficácia de conservantes comerciais de madeira contra Bur
saphelenchus xylophilus, um organismo quarentenário na Europa. Eur
J Wood Prod 73: 643–649.
EPPO (2013) Protocolos de diagnóstico para pragas regulamentadas:
Bursaphelen chu sxylophilus. (Organização Europeia e Mediterrânea
de Proteção de Plantas) Boletim EPPO 43:61–69.
FAO (2013) Padrões internacionais para medidas fitossanitárias: diretrizes
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internacional. (Organização para Agricultura e Alimentação) ISPM No. 15.
Roma
Fonseca L, Santos A, Amado S, Pedroso M, Abrantes I (2013) Impregnação
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Fonseca L, Santos MD, Queirós RP, Abrantes I, Saraiva JA (2014)
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pinheiro (Bursaphelenchusxylophilus) em madeira de Pinus pinaster
por alta pressão. Eur J Wood Prod 72: 825–827.
Magnusson C, Schroder T (2009) Protocolo técnico para testar nematóides
durante o desenvolvimento do tratamento. Reunião Internacional do
Grupo de Pesquisa em Quarentena Florestal, setembro de 2008,
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