C.S.B.Matosinhos., Rev. Bras. Crimin.

0(0), 0-0, 2000

v. 0, n. 0, p. 0-0, 2000
ISSN 2237-9223

DOI:

O papel da hematologia forense como agente colaborador nas

investigações periciais
C.S.B. Matosinhos a, *
a
Centro Universitário Metodista Izabela Hendrix, Minas Gerais (BH), Brasil

*Endereço de e-mail para correspondência: cristianbraz@outlook.com.br. Tel.: +55-31-986229798.

Resumo

Nos últimos anos a hematologia forense tornou-se um poderoso elemento nas investigações periciais. Diversas técnicas para detecção
de sangue são utilizadas nas investigações forenses como, por exemplo, o teste de Takayama, Kastle-Meyer e o luminol, sendo
cruciais na elucidação de crimes. Este estudo tem por objetivo detalhar as principais técnicas da hematologia forense utilizada nas
investigações. Para isso, foi realizada uma revisão de literatura sobre essas técnicas descritas. Devido aos diversos avanços
tecnológicos e os contínuos aprimoramentos das técnicas, observou-se uma grande ascendência dessa área, sendo cada vez mais
utilizada nas soluções de casos. Isso demonstra a enorme importância de trabalhos dentro deste contexto, visto que aprimoram o
desenvolvimento e a difusão de conhecimentos acerca da Hematologia forense.
Palavras-Chave: Perícia Criminal; Sangue; Hematologia forense; Testes de presunção; Tipagem sanguínea

Abstract

Forensic hematology has become a powerful element in criminal investigations in recent years. Several techniques for detecting
blood are used in forensic investigations, such as the Takayama test, Kastle-Meyer, and luminol, being crucial in the elucidation of
crimes. This study aims to detail the main techniques used in forensic hematology investigations. Therefore, literature was review
describing these techniques. Due to the various technological advances and the continuous improvement of techniques, there has
been a great ascendancy in this area, being increasingly used in case solutions. This demonstrates the enormous importance of works
in this context, as they improve the development and dissemination of forensic hematology knowledge.
Keywords: Forensic expertise; Blood; Forensic hematology; Presumptions tests; Blood typing

1. INTRODUÇÃO hematologia forense. Informações valiosas podem ser

A perícia criminal é um importante instrumento na
elucidação de crimes ou acidentes que envolvem morte.
Através de estratégias técnico-científicas é possível
identificar, com relativa precisão, se uma pessoa esteve ou
não na cena de crime a partir de uma simples impressão
digital ou através de vestígios biológicos deixados na cena
[1].
A sorologia forense é o estudo individualizado de
diversos fluidos corpóreos, como sangue, sêmen, saliva,
urina, vômito e matéria fecal, encontrados em cenas de
crime, estabelecendo relação direta, seja com a vítima ou
com o criminoso e possuindo relativa importância na
resolução de casos [2].
A ciência que está por trás de coletar, analisar, e
relacionar o sangue a casos criminais é denominada
obtidas em apenas uma única gota de sangue, podendo ser
crucial nas investigações periciais. Analisando a
composição química e suas características morfológicas, é
possível revelar o DNA dos envolvidos, características do
agressor como altura, força utilizada na agressão e ainda
determinar o local da agressão a partir dos padrões de
manchas observados [1].
O objetivo deste trabalho foi descrever e detalhar,
através de uma revisão bibliográfica, as principais
técnicas de hematologia forense utilizada nas
investigações periciais.

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2. METODOLOGIA
A metodologia de pesquisa adotada para o
desenvolvimento do trabalho consiste em uma revisão
bibliográfica através de artigos científicos publicados em
periódicos nacionais e internacionais, utilizando as
plataformas como Scielo, Google acadêmico, PubMed e
Revista Brasileira de Criminalística.
3. HEMATOLOGIA FORENSE
3.1. Coleta de material biológico
Atualmente a identificação humana por DNA forense
é aceita em processos judiciais no mundo todo, sendo
possível através da coleta correta dos materiais biológicos
a identificação da vítima ou do autor do crime, por meio
da comparação de perfis genéticos ou marcadores
baseados em DNA [3]. São necessários critérios rigorosos
para a coleta dos materiais, visto que diversos fatores
podem influenciar diretamente na qualidade da amostra
como, por exemplo, quantidade reduzida da amostra,
degradação, exposição prolongada ao meio ambiente e
contaminação bacteriana. Esses materiais são
considerados evidências físicas e podem de forma
independente e objetiva, estabelecer o nexo causal de um
suspeito/vítima à cena de um crime, contestar um álibi, ou
direcionar para outra linha de investigação, alguns casos
podendo refutar testemunhas oculares ou não confiáveis.
A coleta de sangue deve ser realizada de forma criteriosa,
seguindo procedimentos importantes para a preservação
da amostra e do profissional, como por exemplo, o uso de
vestimenta adequada, luvas descartáveis, registro do
material coletado e embalagem correta de
armazenamento. [4]
3.2. Sangue
O sangue é uma das partes mais importantes no
sistema de transporte do corpo humano, possuindo como
função a distribuição de nutrientes, oxigênio e hormônios
para todo o corpo. É composto por elementos
corpusculares suspensos em um líquido amarelo claro
denominado plasma. O plasma representa cerca de 55%
do volume sanguíneo, sendo 90% da sua composição
água e os outros 10% são compostos por proteínas,
nutrientes, gases e produtos residuais formados durante o
metabolismo [5].
Os elementos figurados são formados por eritrócitos,
leucócitos e trombócitos. Os eritrócitos, são células
anucleadas, com o formato de disco bicôncavo e sua
principal função é o transporte de oxigênio através da sua
ligação a molécula de hemoglobina. Os leucócitos, ou
glóbulos brancos, são células nucleadas um pouco
maiores do que as hemácias, porém são menos numerosas
e apresentam como principal função a geração da resposta
imune no ser humano. Já os trombócitos, também
denominados de plaquetas, são pequenos fragmentos
anucleados em forma de disco, derivados de uma célula
chamada megacariócito e são responsáveis pela
coagulação do sangue [6].
As hemácias possuem em sua superfície uma
importante proteína de membrana denominada antígeno.
Esses antígenos são responsáveis pelo fenômeno da
fenotipagem sanguínea [7]. Em 1937 cientistas
descobriram mais de 100 antígenos e cerca de 23 tipos
sanguíneos [8]. Com os avanços da ciência, em 2014 a
sociedade internacional de transfusão de sangue
reconheceu a presença de 33 antígenos [9]. Alguns desses
antígenos são bastante raros, sendo assim a tipagem
sanguínea mais comum utilizada hoje em dia é o sistema
ABO, o qual foi descoberto por Lendsteiner em 1900. O
sistema ABO é formado pelo antígeno A, pelo antígeno B
e seus respectivos anticorpos. E através desse sistema
conseguimos definir 4 tipos sanguíneos (A, B, AB, O)
[10].
Sangue tipo A Sangue tipo B
Sangue tipo O Sangue tipo AB
Figura 1: Tipos de sangue definidos no sistema ABO. [10]
Os tipos sanguíneos não possuem a capacidade de
serem usados como provas para determinar um culpado,
visto que diversas pessoas possuem o mesmo tipo
sanguíneo. Entretanto, através da tipagem sanguínea é
possível inocentar um suspeito, caso ele possua uma
tipagem diferente da amostra encontrada na cena de crime
[8].
3.3. Testes de Presunção
Nas cenas de crime, o sangue fresco pode ser
facilmente identificado pelo perito responsável, porém
caso o sangue esteja seco ou não esteja visível, sua
identificação não é tão fácil assim. Nestes casos o perito
criminal pode conduzir os testes de presunção e assegurar
que a amostra coletada é realmente sangue. Os principais
métodos químicos utilizados para a identificação de
sangue são os testes de cristais, baseados na habilidade da
molécula heme em reagir com reagentes e os testes
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catalíticos, que se baseiam na propriedade catalítica da
molécula heme em quebrar o peroxido de hidrogênio [11].
3.3.1Cristais
O princípio básico do teste de cristais vem da
capacidade das moléculas heme presentes nas hemácias
em reagir com certas substâncias formando derivados da
hemoglobina como cristais de hematina, hemina e
hemocromogênio observados ao microscópio óptico.
Teichmann, em 1853, foi o primeiro a produzir cristais de
hemina e a partir disso o teste de cristais começou a ser
comumente utilizado na identificação de sangue. Porém,
esse teste não era muito eficaz, já que quando a amostra
era submetida a altas temperaturas, gordura, ou ferrugem
ocorria alguma alteração na composição do sangue, o
teste não era bem-sucedido. Sendo assim, isso deu
margem para pesquisadores estudarem melhor o método
de Teichmann, e em 1909, Donogany e Burker
descobriram que a piridina poderia ser usada para a
produção de cristais de hemocromogênio para a detecção
de sangue [10].
A piridina quando utilizada sozinha apresentava
resultados falso negativo. Pensando nisso, em 1912,
Takayama desenvolveu uma solução contendo 10% de
hidróxido de sódio, piridina, solução saturada de dextrose
e água destilada, que quando submetida a uma amostra
que continha moléculas heme e ao calor, formam cristais
de piridina ferroprotoporfirina de cor rosada. A forma
desses cristais varia de acordo com o quão fresco é a
amostra, mas comumente apresentam formato de bastão
ou pena e agrupam-se em feixes, podendo também
aparecer em forma de agulha, quando submetido a
amostras de sangue já decomposto. Esta técnica é
conhecida até hoje como método de Takayama. [11].
Figura 2: Cristais de hemocromogênio em formato de bastão. [11]
3.3.2 Catalíticos
Os testes catalíticos são baseados na atividade
catalítica do grupo heme da hemoglobina. A quebra do
peróxido de hidrogênio produz uma espécie de oxidante
que oxida o substrato presente, gerando uma mudança de
cor ou fluorescência. Os substratos mais utilizados são a
fenolftaleína (reagente de Kastle-Meyer), luminol (3-
aminoftalhidrazida), ortotoluidina e verde malaquita. No
passado era comum o uso da benzidina (reagente de
Adler-Ascarelli), porém caiu em desuso já que a
benzidina possui capacidades cancerígenas [12].
3.3.2.1 Fenolftaleína (teste de Kastle-Meyer)
O teste de Kastle-Meyer é um dos testes mais
utilizados na detecção de sangue, sendo um teste rápido e
eficaz na sua detecção. Este teste requer duas soluções
para a identificação de sangue. A primeira solução é de
peróxido de hidrogênio de vinte volumes. A segunda
solução é composta por fenolftaleína, hidróxido de
potássio e água destilada. O teste se baseia na mudança de
cor da amostra devido a uma oxidação catalisada pela
hemoglobina. Em uma amostra de sangue, a hemoglobina
irá decompor o peróxido de hidrogênio em água e
oxigênio. O oxigênio liberado irá oxidar a fenolftaleína
promovendo a mudança de cor, deixando a amostra em
um tom rosa, evidenciando ao perito a presença de
sangue.
Figura 3: Resultado positivo do teste de Kastle-Meyer. [1]
3.3.3.2 Luminol
O luminol é um teste de quimiluminescência muito
utilizado em laboratórios forenses, e se baseia na
oxidação do reagente luminol, que ao oxidar forma íons
de aminoftalato em um estado excitado, que emite luz
quando o elétron retorna ao estado fundamental. A reação
é muito rápida e requer escuridão total para a observação
da luminescência [13].
Quando se trata de locais onde o sangue não está
visível, pois a cena de crime pode ter sido limpa, utiliza-
se o luminol. A vantagem da utilização desse reagente é
que ele é capaz de reagir com quantidades ínfimas de
sangue, mesmo que já tenha se passado longos períodos,
além de fornecer um rápido resultado. A sensibilidade do
teste pode chegar a 1/1.000.000.000 [11].
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Assim como em outros testes catalíticos, o luminol
não pode ser considerado específico para sangue, já que o
seu resultado pode dar positivo ao reagir com enzimas
vegetais, agentes oxidantes e metais. Cabe a um usuário
experiente de luminol distinguir essas reações daquelas
dadas pelo sangue, uma vez que existe diferença no brilho
e na duração da quimiluminescência da amostra [14].
Em um estudo realizado por Sergio Quispe (2014),
onde o luminol foi aplicado em diferentes amostras,
como, papelão, roupas de algodão, madeira, metal, entre
outros (Fig. 4, 5 e 6) demonstraram a eficácia do luminol
na detecção de manchas de sangue e a sua colaboração
para as investigações forense. Atualmente, estão
disponíveis no mercado kits com a solução do luminol
pronta, facilitando os profissionais na revelação das
manchas de sangue [15].
Figura 4: A esquerda é a amostra de papel carbono com manchas de
sangue humano de 6 anos atrás vista a luz natural. A direita é a
observação em ambiente escuro da reação de quimiluminescência logo
após a aplicação do luminol. [15]
Figura 5: A esquerda é um calçado esportivo com manchas de sangue
humanas e que foi submetido a 3 lavagens com detergente. A direita o
mesmo calçado em ambiente escuro logo após a aplicação do luminol.
[15]
Figura 6: A esquerda é uma serra metálica com manchas de sangue
humano, logo após ser exposta a diversos produtos de limpeza por 4
meses. A direita é a mesma serra logo após a aplicação do reagente
luminol. [15]
4. CONCLUSÕES
De acordo com a pesquisa realizada, verificou-se que
ao longo do tempo a hematologia forense obteve diversos
avanços nas técnicas hematológicas, contribuindo
consideravelmente na elucidação de casos periciais, já que
através do seu uso correto por um profissional experiente,
é possível identificar se a amostra obtida é ou não sangue.
Além de conseguir visualizar possíveis manchas de
sangue em locais onde houve limpeza, podendo assim
estabelecer de forma independente e objetiva a identidade
da vítima e a ligação do suspeito com o caso.
AGRADECIMENTOS
Eu gostaria de expressar a minha gratidão aos meus
professores, meu orientador Dr. Hudson Andrade, meus
amigos, minha namorada e a todos que me ajudaram em
todo esse processo.
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