Grupo de Disciplinas de Ecologia da Hidrosfera (GDEH)

Produo de Biodiesel a partir de leos vegetais virgens e usados, comparando transesterificao bsica e enzimtica

Andr da Silva Lopes Simas

Dissertao apresentada na Faculdade de Cincias e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa, para obteno do Grau de Mestre em Bioenergia.

Lisboa 2008

Ficha Tcnica

A presente dissertao foi preparada no mbito do Protocolo existente entre a Faculdade de Cincias e Tecnologia da UNL e o Instituto Nacional de Engenharia, Tecnologia e Inovao - Lisboa. Orientado por: Doutor Nuno Lapa (Professor Auxiliar da FCT-UNL) Doutora Ana Cristina Oliveira Justino (Investigadora Auxiliar do INETI)

ndice
Agradecimentos.......................................................................................................................................1 Dedicatrias.............................................................................................................................................2 Resumo.....................................................................................................................................................3 Abstract........................4 Simbologia e Anotaes..........................................................................................................................5 ndice de Figuras.....................................................................................................................................6 ndice de Tabelas....................................................................................................................................8

Captulo 1- Introduo..................................................................................................................11
1.1 leos orgnicos, vegetais e similares.............................................................................................16 1.1.2 leos alimentares e o seu uso................................................................................................20 1.1.2.1 1.1.3 Alteraes Quantitativos registadas de nos leos leos alimentares, usados sob processos no de fritura...........................................................................................................................................21 orgnicos contexto portugus.........................................................................................................................................22 1.2 Historial da utilizao de leos e seus derivados para a combusto nos motores Diesel......................................................................................................................................................24 1.3 O panorama do biodiesel na Europa.............................................................................................26 1.3.1 Biodiesel em Portugal............................................................................................................28 1.4 A produo de biodiesel - os processos.........................................................................................30 1.4.1Transesterificao cida.......................................................................................................35 1.4.2 Transesterificao alcalina..................................................................................................35 1.4.3 Transesterificao usando condies supercrticas..........................................................37 1.4.4 Transesterificao usando catalisadores heterogneos....................................................37 1.4.5 Transesterificao enzimtica............................................................................................38 1.5 Caractersticas gerais do biodiesel................................................................................................40 1.6 Vantagens e desvantagens decorrentes do uso do biodiesel........................................................42

Captulo 2- Materiais e Mtodos...............................................................................................45

2.1 Materiais.......................................................................................................................................46 2.1.1 2.1.2 2.1.3 Matrias- primas.........................................................................................................46 Reagentes e catalisadores...........................................................................................46 Equipamentos..............................................................................................................47

2.2 Metodologias de caracterizao de amostras de leos e biodiesel...........................................48 2.2.1 Preparao das amostras ..................................................................................................48 2.2.2 Determinao da quantidade total de matria em suspenso (contaminao total)..............................................................................................................................................49 2.2.3 Avaliao da estabilidade oxidao................................................................................50

2.2.4 Determinao do ndice de acidez.....................................................................................50 2.2.5 Determinao do ndice de iodo.........................................................................................51 2.2.6 Determinao do ndice de perxido..................................................................................52 2.2.7 Determinao do ndice de saponificao..........................................................................54 2.2.8 Determinao da quantidade de gua presente na amostra............................................55 2.2.9 Preparao de steres metlicos de cidos gordos para posterior anlise por cromatografia..............................................................................................................................55 2.2.9.1 Anlise Cromatogrfica.............................................................................................. 56 2.2.10 Determinao dos teores em mono, di e triglicridos e glicerol livre e total, num biodiesel........................................................................................................................................57 2.2.11 Determinao da massa volmica....................................................................................58 2.2.12 Determinao da viscosidade cinemtica........................................................................59 2.3 Metodologias de determinao da concentrao enzimtica....................................................59 2.3.1 Doseamento da enzima imobilizada..................................................................................60 2.3.2 Doseamento da enzima solvel..........................................................................................61 2.4 Metodologias de Produo de Biodiesel (B100).........................................................................62 2.4.1 Transesterificao qumica por catlise bsica................................................................62 2.4.1.1 Produo de biodiesel a partir de leo de colza........................................................62 2.4.1.2 Produo de biodiesel a partir de leo de soja..........................................................64 2.4.1.3 Produo de biodiesel a partir de leo usado............................................................64 2.4.2 Influncia do processo de secagem no teor em gua e na estabilidade oxidao do biodiesel........................................................................................................................................65 2.4.3 Transesterificao por catlise enzimtica.......................................................................66 2.4.3.1 Desenho composto central (a 4 variveis) para produo de biodiesel, a partir de leo de colza, usando enzimas.................................................................................................67 2.4.3.2 Escolha da enzima para posteriores ensaios de transesterificao........................69 2.4.3.3 Determinao das melhores condies reaccionais.................................................69 2.4.3.4 Produo de biodiesel a partir de leo de soja.........................................................70 2.4.3.5 Produo de biodiesel a partir de leo usado...........................................................70 2.4.3.6 Produo de biodiesel a partir de leo de girassol...................................................70

Captulo 3- Resultados e Discusso..........................................................................................72

3.1 Caracterizao dos leos vegetais..................................................................................................73 3.1.1 Caracterizao do leo de colza.....................................................................................73 3.1.2 Caracterizao do leo de soja.......................................................................................74 3.1.3 Caracterizao dos leos alimentares usados...............................................................75 3.2 Transesterificao bsica de diferentes leos vegetais................................................................76 3.2.1 Transesterificao do leo de colza...............................................................................77 3.2.2 Transesterificao do leo de soja.................................................................................78

3.2.3 Transesterificao de leos usados................................................................................79 3.3 Desenho composto central (a 3 variveis) para optimizao das condies de secagem do biodiesel..................................................................................................................................................82 3.3.1 Relao entre as condies de secagem e a estabilidade oxidao.................................................................................................................................................87 3.4 Transesterificao enzimtica de leos vegetais..........................................................................88 3.4.1 Escolha da enzima...........................................................................................................88 3.4.2 Desenho composto central (a 4 variveis) para produo de biodiesel por via enzimtica..............................................................................................................................................90 3.4.2.1 Determinao das melhores condies reaccionais..............................................99 3.4.3 Produo via enzimtica de biodiesel a partir de leo de soja...................................105 3.4.4 Produo via enzimtica de biodiesel a partir de leo usado....................................108 3.4.5 Produo via enzimtica de biodiesel a partir de leo de girassol............................112

Captulo 4- Discusso Global ...................................................................................................113 Captulo 5- Concluses ...............................................................................................................117 Captulo 6- Sugestes de trabalhos futuros ........................................................................120 Captulo 7- Bibliografia.............................................................................................................123 Captulo 8- Anexos........................................................................................................................126

Agradecimentos
Quero deixar aqui expresso o meu agradecimento a todos aqueles que de uma forma directa ou indirecta contriburam para o desenvolvimento deste trabalho final que culmina o meu mestrado em Bioenergia. Tenho, por este motivo, de comear por agradecer antes de mais ao Coordenador do Mestrado em Bioenergia, o Professor Doutor Santos Oliveira, da Faculdade de Cincias e Tecnologia da UNL, pela partilha dos seus conhecimentos e igualmente pelo seu apoio, incentivo, disponibilidade e amizade com que sempre me tratou. Quero igualmente agradecer ao Doutor Antnio Joyce, Director do Departamento de Energias Renovveis (DER), por ter aceite o meu estgio nos laboratrios da Unidade de Biomassa do DER, agradecimento igualmente extensvel Doutora Fernanda Rosa, Directora da Unidade de Biomassa do DER. Um especial agradecimento minha orientadora Doutora Ana Cristina Oliveira, do Departamento de Energias Renovveis do INETI, pela orientao deste meu estgio, pelo seu grande apoio, incentivo, dedicao, disponibilidade e conhecimentos que me transmitiu e igualmente pela sua gentileza e pela amabilidade com que sempre me tratou. Quero igualmente agradecer ao Professor Doutor Nuno Lapa, meu professor durante o mestrado e meu coordenador de dissertao na faculdade, pelos seus conhecimentos, cordialidade, incentivo, disponibilidade e orientao. No posso deixar de agradecer igualmente aos restantes professores que me acompanharam durante o ano curricular do mestrado; D. Lurdes, da secretaria do GDEH, assim como aos colegas que comigo interagiram e colaboraram, em especial minha querida amiga Ana Rita Brs. Um agradecimento a todos da Unidade de Biomassa do DER, do INETI, em especial Doutora Paula Passarinho e Doutora Paula Marques, pela disponibilidade, ajuda e pelas oportunas sugestes; Eng. Maria Helena, D. Graa Conceio pela simpatia e sempre pronta disponibilidade para ajudar; D. Natrcia e D. Cu, sempre com um sorriso e sempre prontas a limpar todo o material que sujei...e foi muito, muito mesmo! Um agradecimento Eng. Elvira Oliveira, do DEECA/LCC, pelas anlises de densidade e viscosidade. Um especial agradecimento a todos os colegas e amigos que fiz durante a minha permanncia no DER, com quem muito aprendi e convivi ao longo destes 2 anos, em especial Dora, ao Xavier, ao Paulo, ao Roberto, Ana Melo, Ana Marques, ao Sebastio e ao Tiago. Tambm um especial agradecimento Ins Santos, Rita Bancaleiro e Marisa Santos pela sua simpatia, cumplicidade, incentivo e pacincia em me aturar! E por fim um grande e muito especial agradecimento a toda a minha famlia, por me ter apoiado e incentivado, em especial minha Me e ao meu Pai, pelo seu incondicional apoio, carinho, incentivo, dedicao e sacrifcio demonstrados ao longo de toda a minha vida! 1

Dedicatrias
Quero dedicar este trabalho minha famlia, em especial minha me e sobrinha! minha me pelo seu incondicional apoio, carinho, amor, incentivo e dedicao! minha sobrinha porque o seu sorriso enternecedor e radioso representa tudo o que bom e auspicioso, relembrando que o futuro uma promessa por cumprir!

Resumo
Este trabalho visa o estudo da produo, escala laboratorial, de biodiesel a partir de leos vegetais virgens e usados, comparando as transesterificaes por catlise alcalina e enzimtica. Vrios leos foram caracterizados a fim de determinar as suas propriedades, nomeadamente as que possam ter mais influncia no biodiesel a partir deles produzido. Foi realizada a transesterificao alcalina destes leos, em condies previamente optimizadas por outros autores, tendo-se obtido um teor em steres de 98,6% com o leo de colza, de 94% com o leo de soja e de 87,5% a 94% com os leos usados. Para a transesterificao enzimtica foram testadas vrias lipases, tendo-se seleccionado a enzima imobilizada Lipozyme TL IM. O processo enzimtico de produo de biodiesel a partir de leo de colza foi optimizado, atravs de um desenho composto central a 4 variveis, tendo-se determinado como melhores condies, uma temperatura de 37C, a adio de 0,06% (m/m) de enzima pura, uma razo molar leo/metanol de 1/5 e a adio de 15% (m/m) de gua, que conduzia a um teor terico em steres na ordem dos 99%. Nestas condies, o teor em steres experimental obtido utilizando o leo de colza foi de 86,7%. Quando se utilizou o leo de soja e leos usados de fritura, em condies anlogas, obteve-se um teor em ster de 87,5% e de 79,6%, respectivamente, valores inferiores, em cerca de 10 %, em relao aos obtidos com a transesterificao bsica, tambm em condies de sistema descontnuo. Do estudo realizado pode-se concluir que a catlise qumica se apresentou mais favorvel, quer em termos de tempo de reaco quer de separao de fases, do que o processo enzimtico. O facto da recuperao do biocatalisador no ter sido possvel, devido ao granulado enzimtico se desfazer, foi mais um factor que contribuiu para que o processo enzimtico, desenvolvido neste trabalho, no se apresente como uma alternativa economicamente vivel aos processos tradicionais de produo de biodiesel.

Abstract
The aim of this work was the study of biodiesel production, at lab scale, by alkaline and enzymatic transesterification using virgin and frying oils. Different oils were characterized in terms of some parameters that have influence in the transesterification reaction and also in the quality of the final product. The alkaline transesterification of the oils was carried out, in conditions previously optimized by other authors, allowing to obtain a biofuel with an ester content of 98.6% with rapeseed oil, 94% with soybean oil and 87.5% to 94% with used frying oils. For the enzymatic transesterification several lipases have been tested, and the immobilized enzyme Lipozyme TL IM was selected for further studies. The enzymatic production of biodiesel from rapeseed oil was optimized through a central composite design of four variables. A reaction temperature of 37C, an enzyme addition of 0.06% (w/w), an oil/methanol molar ratio of 1/5 and a water addition of 15% (w/w) were the best conditions expected to generate a final product containing approximately 99% of esters. However, at these conditions, the experimental ester content obtained using rapeseed oil was 86.7%. In similar experiments with soybean oil and used frying oil, 87.5% and 79.6% of esters were, respectively, achieved. These yields were about 10% lower than those obtained by alkaline transesterification, also in discontinuous system conditions. It is possible to conclude from this study that the chemical alkaline transesterification was more favourable than the enzymatic transesterification, not only on the point of view of the reaction time, but also on the point of view of the separation of phases. Also the fact that the biocatalyst was not able to be recovered, due to the desaggregation of the granules, allowed to consider the enzymatic transesterification not economically viable when compared with the traditional processes.

Simbologia e Anotaes
ARESP - Associao da Restaurao e Similares de Portugal; B100 - Biodiesel a 100 %; B3 - Mistura combustvel de gasleo com 3 % de biodiesel; DG - Diglicrido; FAME - Fat acid metil ester (ster metlico de cidos gordos o vulgar biodiesel); FFAs - Free fatty acids (cidos gordos livres); Horeca - Sector que abrange os estabelecimentos de hotelaria, restaurao e cafetaria; INETI - Instituto Nacional de Engenharia, Tecnologia e Inovao; IPA, Lda - Empresa Inovao de Projectos em ambiente, Lda; ISP - Imposto sobre produtos petrolferos e energticos; M ou m - Massa do composto; MG - Monoglicrido; m/m - massa/massa; MSTFA - N-metil-N-trimetilsililtrifluoroacetamida; n.d. - no determinado (no foi realizado ensaio para quantificao); OGM - Organismo geneticamente modificado (transgnico); PNE - Plano Nacional Energtico; PM - Peso molecular; RME - ster metlico de colza; tep - tonelada equivalente de petrleo; TG - Triglicrido; v.n.d - valor no detectado (no foi detectado pelo aparelho).

ndice de Figuras
Figura 1 - Esquema dos trs tipos de glicridos em que R1, R2 e R3 representam grupos alquilo constitudos por tomos de carbono e de hidrognio (Felizardo, 2003).................................................17 Figura 2 - Esquema de um ster............................................................................................................17 Figura 3 - Produo de Biodiesel na Unio europeia a partir de 1992 at 2004 (http://www.energiesrenouvelables.org/observ-er/stat_baro/observ/baro167b.pdf)................................................................27 Figura 4 - Reaco de transesterificao de um triglicrido (triacilglicerol)........................................31 Figura 5 - Fluxograma do processo de sntese de biodiesel via transesterificao qumica alcalina (Junior et al., 2005).................................................................................................................................33 Figura 6 - Reactor com biodiesel de colza (fase superior) e o respectivo glicerol (fase inferior)...................................................................................................................................................77 Figura 7 - Ampola de decantao com biodiesel de soja (fase superior) e o respectivo glicerol (fase inferior)...................................................................................................................................................79 Figura 8 Reactor com biodiesel de OAU (1 lote) (fase superior) e o respectivo glicerol (fase inferior)...................................................................................................................................................80 Figura 9 - Ampola de decantao com B100 do OAU do 2 lote (fase superior) e o respectivo glicerol (fase inferior)..........................................................................................................................................80 Figura 10 - Biodiesel de leo alimentar usado (1 lote) - seco ( esquerda) e sem secagem ( direita).....................................................................................................................................................84 Figura 11- Efeito conjugado da presso e da temperatura na quantidade de gua esperada na amostra de biodiesel, aps 35 minutos de secagem no rotavapor........................................................................84 Figura 12 - Efeito conjugado da temperatura e do factor tempo, na quantidade de gua esperada, presso constante de 185 mbar, no rotavapor.........................................................................................85 Figura 13 - Efeito conjugado da presso e do factor tempo de secagem, sobre a quantidade de gua esperada, temperatura constante de 55C, no rotavapor......................................................................86 Figura 14 - Recta de calibrao da soluo padro de albumina de soro de boi...................................88 Figura 15 - Percentagem de transesterificao obtida ao longo do tempo, usando as vrias enzimas, nas condies do ponto mdio (T =37,5C; L= 70 mg; A= 6g; R= 5:1)................................................89 Figura 16 - Efeito conjugado da temperatura e da quantidade de lipase (assumindo a quantidade fixa no sistema de 8,76 g de metanol e 6 g de gua, durante 15 horas) na percentagem de steres obtidos.....................................................................................................................................................93 Figura 17 - Efeito conjugado da temperatura e da quantidade de metanol (assumindo a quantidade fixa no sistema de 70 mg de lipase e 6 g de gua, durante 15 horas) na percentagem de steres obtidos.....................................................................................................................................................94 Figura 18 - Efeito conjugado da temperatura e da quantidade de gua (assumindo a quantidade fixa no sistema de 70 mg de protena e 8,76 g de metanol, durante 15 horas) na percentagem de steres obtidos ....................................................................................................................................................95 Figura 19 - Efeito conjugado da quantidade de protena e de metanol (assumindo uma temperatura de 38C e a quantidade de 6 g de gua, durante 15 horas) na percentagem de steres obtidos ....................................................................................................................................................96 Figura 20 - Efeito conjugado da quantidade de gua e metanol ( assumindo uma temperatura de 38C e a quantidade de protena de 70 mg, durante 15 horas) na percentagem de steres obtidos ....................................................................................................................................................98 Figura 21 - Tubo de centrifugao com a soluo final da transesterificao do ensaio 4 (tabela 55): (A) antes da centrifugao; (B) depois da centrifugao......................................................................104 Figura 22 - (A) Erlenmeyer com os grnulos enzimticos (intactos); (B) Erlenmeyer com soluo transesterificada, sendo visvel os grnulos enzimticos desfeitos, no fundo......................................105 Figura 23 - Erlenmeyers com as solues finais da transesterificao dos ensaios 2, 14 e 12 (respectivamente 53,4%, 96% e 87,8% de FAMEs) (tabela 40), aps algum tempo de repouso..................................................................................................................................................105 Figura 24 - Erlenmeyers com as solues finais da reaco de transesterificao dos ensaios 2, 1 e 4 (tabela 55), respectivamente da esquerda para direita..........................................................................106 Figura 25 - Tubo de centrifugao com a amostra final da transesterificao do ensaio 1 (tabela 55), depois da centrifugao........................................................................................................................107

Figura 26 - Tubos de centrifugao com as amostras finais da transesterificao dos ensaios 1, 2 e 3 (tabela 56), depois da centrifugao.....................................................................................................108 Figura 27 - Erlenmeyers com as solues finais da reaco de transesterificao dos ensaios 1, 2 e 3 (tabela 58), respectivamente da esquerda para direita..........................................................................109 Figura 28 - Tubos de centrifugao com a soluo final da transesterificao do ensaio 2 (A) e do ensaio 3 (B), depois da centrifugao (tabela 58).................................................................................110 Figura 29 - Percentagem de steres da transesterificao enzimtica do OAU da Cantina do INETI, com e sem tratamento prvio de filtrao e secagem (dados da tabela 59)..........................................111 Figura 30 - Erlenmeyer com a soluo resultante da transesterificao durante 24 horas, do leo (seco) usado da Cantina do INETI (tabela 59) ...............................................................................................111 Figura 31 - Frascos contendo amostras do produto final da transesterificao do OAU (3 lote), sem qualquer processo de lavagem, filtrao ou centrifugao, ao fim de 1 semana em repouso. Ensaio (A) usando etanol (via catlise enzimtica); ensaio (B) recorrendo catlise enzimtica (com metanol) e ensaio (C) recorrendo catlise alcalina (com metanol)......................................................................116 Figura 32 - Eppendorfs com amostras, aps centrifugao, da transesterificao do leo usado (3 lote), por via enzimtica (A) e alcalina (B)..........................................................................................116

ndice de Tabelas
Tabela 1 - Classificao dos cidos gordos (Stern et al., 1983)............................................................18 Tabela 2 - Composio percentual dos principais cidos gordos saturados e insaturados, de alguns leos e gorduras (http://www.ccet.ufrn.br/~duarte/nomenclatura_acidos_carboxilicos.pdf)...........................19 Tabela 3 - Diferentes origens e modos de obteno de leos e gorduras (Parente, 2003).....................20 Tabela 4 - Vrios subsectores da FIOVDE (Guia Tcnico do Sector dos leos Vegetais, Derivados e Equiparados, 2001).................................................................................................................................22 Tabela 5 - Estimativas de produo de leos alimentares usados apresentadas por vrias fontes, expressas em toneladas/ano (IPA, 2004)................................................................................................23 Tabela 6 - Calendarizao da substituio de combustveis fsseis por combustveis alternativos, expressa em %, de acordo com a Directiva 2003/30/UE (Rosa, 2005)..................................................27 Tabela 7 - Panorama na Unio Europeia (UE25) relativamente ao biodiesel (adaptado de http://www.energies-renouvelables.org/observ-er/stat_baro/observ/baro167b.pdf)...........................27 Tabela 8 - Produtividade mdia nacional, comparativa (Rosa, 2005)...................................................28 Tabela 9 - Capacidade nacional instalada, em 2007, de produo de biodiesel, a partir de matriaprima importada (Rosa, 2007))...............................................................................................................29 Tabela 10 - Empresas nacionais produtoras de biodiesel a partir de leos usados, dados de 2007 (Rosa. 2007).......................................................................................................................................................29 Tabela 11- Consumo de combustvel em territrio nacional continental (unidade em tonelada), segundo dados da DGGE (http://www.dgge.pt).....................................................................................30 Tabela 12 - Comparao da transesterificao alcalina via metlica e etlica, (Parente, 2003; Freitas et al.; 2007; http://www.ciagri.usp.br/~simpol/downloads/10%20ULF%20UNICAMP.pdf)..............................33 Tabela 13 - Propriedades de alguns steres metlicos de leos vegetais (Joyce et al.,2002; http://www.biotecnologia.com.br/revista/bio32/biodiesel_32.asp;http://www.acsoja.org.ar/mercosoja2 006/Contenidos/Foros/usosind_03.pdf ).........................................................................................40 e 41 Tabela 14 - Principais falhas dos motores a diesel, com uso de biodiesel de baixa qualidade (Felizardo, 2003)...............................................................................................................................................41 e 42 Tabela 15 - Emisses de poluentes das misturas de biodiesel com diesel normal (http://www.ivig.coppe.ufrj.br/doc/biodiesel.pdf). ......................................................................................44 Tabela 16 - Comportamento do leo de colza e respectivo ster metlico (http://www.netresiduos.com/cir/index_a.htm).............................................................................................44 Tabela 17 - Parmetros estudados, em desenho composto central, para optimizao da secagem de biodiesel..................................................................................................................................................65 Tabela 18 - Planeamento dos ensaios relativos aos nveis -1/+1 e expanso -1,682/+1,682, assim como os respectivos valores a ensaiar....................................................................................................66 Tabela 19 - Parmetros estudados, no desenho composto central, para optimizao do sistema reaccional de transesterificao enzimtica............................................................................................67 Tabela 20 - Planeamento para os ensaios relativos aos nveis -1/+1 e expanso -2/+2, assim como os respectivos valores a ensaiar...................................................................................................................68 Tabela 21 - Planeamento dos ensaios do desenho composto central, incluindo a expanso, com os respectivos valores..........................................................................................................................68 e 69 Tabela 22 - Valores dos parmetros de caracterizao do leo de colza, do 1 lote (lote de Janeiro de 2006) e do 2 lote (lote de Maro de 2007)............................................................................................73 Tabela 23 - Composio, em percentagem, dos principais cidos gordos do leo de colza................74 Tabela 24- Valores dos parmetros de caracterizao do leo refinado de soja Valouro................75 Tabela 25 - Composio, em percentagem, dos principais cidos gordos do leo de soja..................75 Tabela 26 - Valores dos parmetros de caracterizao dos OAU do 1 lote (Maro de 2006), 2 lote (Maro de 2006) e 3 lote (Agosto de 2007)...........................................................................................76 Tabela 27 - Composio, em percentagem, dos principais cidos gordos dos OAUs..........................76 Tabela 28 - Valores dos parmetros de caracterizao do B100 de colza, proveniente do 1 lote (Janeiro de 2006)....................................................................................................................................78 Tabela 29 - Transesterificao qumica de leo de soja (Valouro).......................................................79 Tabela 30 - Valores dos parmetros de caracterizao do biodiesel de leos usados do 1 lote ( Maro de 2006), 2 lote (Maro de 2006) e 3 lote (Agosto de 2007)...............................................................81 Tabela 31 - Transesterificao qumica de leo usado do 3 lote (Cantina do INETI).........................82

Tabela 32 - Valores dos teores em gua e correspondente percentagem de gua retirada, em cada ensaio, comparando com o valor inicial de 2591 ppm....................................................................82 e 83 Tabela 33 - Respostas segundo o Algoritmo de Yates, para a secagem do biodiesel............................83 Tabela 34 - Efeito conjugado da temperatura e da presso, ao fim de 35 minutos, sobre a quantidade de gua esperada na amostra de biodiesel..............................................................................................84 Tabela 35 - Efeito conjugado da temperatura e do factor tempo, presso constante de 185 mbar, sobre a quantidade de gua esperada na amostra de biodiesel...............................................................85 Tabela 36 - Efeito conjugado da presso e do factor tempo, temperatura constante de 55C, sobre a quantidade de gua esperada...................................................................................................................86 Tabela 37 - Valores dos teores em gua e da estabilidade oxidao de cada sequncia, definida em desenho composto central.......................................................................................................................87 Tabela 38 - Enzimas e respectivas concentraes.................................................................................89 Tabela 39 - Percentagem de transesterificao obtida ao longo do tempo, usando as vrias enzimas, nas condies definidas no ponto mdio do desenho composto central.................................................89 Tabela 40 - Valores relativos percentagem de metil-steres de colza, em funo das condies reaccionais definidas em desenho composto central..............................................................................91 Tabela 41 - Respostas segundo o Algoritmo de Yates, para a transesterificao enzimtica................92 Tabela 42 - Percentagem de transesterificao terica, face ao efeito conjugado da temperatura e da quantidade de protena, assumindo a quantidade fixa no sistema de 8,76 g de metanol e 6 g de gua, durante 15 horas......................................................................................................................................93 Tabela 43 - Percentagem de transesterificao terica, face ao efeito conjugado da temperatura e da quantidade de metanol, assumindo a quantidade fixa no sistema de 70 mg de protena e de 6 g de gua, durante 15 horas......................................................................................................................................94 Tabela 44 - Percentagem de transesterificao terica, face ao efeito conjugado da temperatura e da quantidade de gua, assumindo a quantidade fixa no sistema de 70 mg de protena e de 8,76 g de metanol, durante 15 horas.......................................................................................................................95 Tabela 45 - Percentagem de transesterificao terica, face ao efeito conjugado da quantidade de protena e metanol, assumindo uma temperatura de 38C e uma quantidade de 6 g de gua, durante 15 horas........................................................................................................................................................96 Tabela 46 - Percentagem de transesterificao terica, face ao efeito conjugado da quantidade de gua e metanol, assumindo uma temperatura de 38C e a quantidade de protena de 70 mg, durante 15 horas........................................................................................................................................................97 Tabela 47 - Percentagem de transesterificao, tendo em conta a variao do parmetro temperatura, mantendo todos os outros parmetros como variveis controladas........................................................99 Tabela 48 - Percentagem de transesterificao tendo em conta a variao do parmetro protena, mantendo todos os outros parmetros como variveis controladas......................................................100 Tabela 49 - Percentagem de transesterificao tendo em conta a variao do parmetro metanol, mantendo todos os outros parmetros como variveis controladas......................................................101 Tabela 50 - Percentagem de transesterificao tendo em conta a variao do parmetro gua, mantendo todos os outros parmetros como variveis controladas............................................101 e 102 Tabela 51 - Condies iniciais optimizadas em desenho composto central, para 50 g de leo (colza)...................................................................................................................................................102 Tabela 52 - Condies optimizadas aps uma nova manipulao em desenho composto central para 50 g de leo (colza).............................................................................................................................. 102 Tabela 53 - Percentagem de transesterificao, do leo de colza, ao longo do tempo.......................103 Tabela 54 - Percentagem de transesterificao do leo de colza (50 g), ao fim de 15 e 20 horas......................................................................................................................................................104 Tabela 55 - Percentagem de transesterificao enzimtica (15 horas) do leo de soja (Valouro)...............................................................................................................................................106 Tabela 56 - Percentagem de transesterificao enzimtica (15 horas) do leo de soja Valouro, variando a quantidade de lipase e gua.................................................................................................107 Tabela 57 - Percentagem de transesterificao enzimtica (15 horas) do OAU proveniente da Cantina do INETI...............................................................................................................................................108 Tabela 58 - Percentagem de transesterificao enzimtica (15 horas) do OAU proveniente da Cantina do INETI, usando metanol e etanol......................................................................................................109 Tabela 59 - Condies da transesterificao enzimtica de leo usado (Cantina do INETI) e resultados sequenciais da transesterificao, com e sem filtrao e secagem.......................................................110

Tabela 60 - Resultados da transesterificao enzimtica, durante 15 horas, com a enzima solvel TL 100L, tendo como varivel independente o pH da soluo adicionada................................................112 Tabela 61 Comparao entre a transesterificao via alcalina (hidrxido de sdio) e enzimtica (http://ramses.ffalm.br/falm/dbt/professores/sachs/Bioquimica%20I/enzimas2.pdf;http://www.enq.ufsc .br/labs/probio/disc_eng_bioq/trabalhos_grad2005_2/enzimas/enzimas.ppt)......................................115

10

Captulo 1

Introduo

11

Durante milhares de anos o Homem utilizou as ditas energias renovveis, com especial predominncia no aproveitamento da energia dos recursos hdricos, elico e, sobretudo, no aproveitamento da biomassa para combusto, de uma forma directa ou indirecta. Pode dizerse que a energia se tem revelado ao longo dos tempos, um dos mais determinantes factores de desenvolvimento econmico e social, tornando-se assim um factor extremamente decisivo em muitos aspectos da vida das sociedades. Com o advento da Revoluo Industrial, no sculo XVIII, a procura por energia aumentou substancialmente com vista a manter o ritmo crescente da industrializao, que forosamente exigia mais energia e matrias primas. A prpria sociedade modificou-se e passou ela prpria a requerer um crescente consumo energtico para assegurar um igualmente crescente desenvolvimento e bem estar. Forosamente este progresso fez-se custa de uma procura desenfreada pelos chamados recursos energticos no renovveis, uma vez que estes eram facilmente obtidos e extrados e, sobretudo, possuam uma elevada densidade energtica que suplantava as formas energticas mais tradicionais e ditas renovveis. O carvo afigurou-se como a fora motriz da Revoluo Industrial, tendo-se dado progressivamente lugar de primazia, a partir da segunda metade do sculo XIX, ao petrleo. J no sculo XX o petrleo assumiu o protagonismo energtico, passando a ser considerado como o ouro negro. Os recursos energticos renovveis que nos primrdios haviam sido a principal fora motriz das civilizaes, foram claramente suplantados pelo petrleo, gs natural e carvo, todos eles recursos no renovveis. necessrio referir que a designao no renovvel parcialmente correcta, pois os combustveis atrs mencionados todos eles derivaram de biomassa e, actualmente, ainda est em progresso a formao de mais petrleo, gs natural e carvo. Simplesmente so processos geolgicos que demoram vrios milhes de anos (na ordem dos 100 a 300 milhes de anos) e, portanto, assume-se que estes recursos so no renovveis, pelo menos escala humana, pois o seu consumo suplanta claramente a sua formao, pelo que rapidamente estes mesmos recursos se esgotaro

(http://osverdestapes2.googlepages.com/carbono).

Os recursos energticos no renovveis, para alm de possurem um horizonte temporal bastante limitado, afiguram-se como formas de obteno de energia bastante agressivas para o ambiente, no que toca sua extraco, refinao e utilizao energtica, provocando significativos impactes ambientais, sobretudo ao nvel de poluio atmosfrica. Para alm dos aspectos atrs mencionados, estes recursos esto assimetricamente distribudos mundialmente, o que gera uma grande dependncia de muitos pases relativamente a outros e, frequentemente, cria focos de tenso e de instabilidade a nvel poltico, econmico e social, e comummentemente constituem o embrio de focos belicistas de menor ou maior escala. Por 12

estas razes os recursos energticos renovveis constituem uma fonte bastante vivel, segura e promissora na obteno de energia. Constituem recursos mais uniformemente distribudos geograficamente, so ilimitados e menos agressivos para o ambiente. Deste modo, cada vez mais as energias renovveis assumem um papel estratgico e potencial no futuro energtico, angariando igualmente novos fomentadores e utilizadores. importante referir que as tecnologias que fazem parte desta mudana j esto disponveis h bastante tempo. O que faltava, em concreto, era uma clara vontade poltica e empresarial em relao s energias renovveis, pois sempre existiram, e ainda subsistem, presses e lobbies relativamente aos combustveis fsseis, que de certa forma boicota(va)m o avano e a proliferao do recurso s fontes energticas endgenas renovveis. Com a constatao das inequvocas alteraes climticas e com o despertar da conscincia pblica sobre as consequncias nefastas que o uso intensivo dos combustveis fsseis esto a ter na Ecosfera, o Mundo uniu esforos e com o Painel Intergovernamental para as Alteraes Climticas (PIAC), assumiu-se a partir de ento uma postura mais congruente e decisiva em relao ao combate ao fenmeno do aquecimento global do planeta, um dos impactes mais gravosos do uso dos combustveis fsseis. Portugal, como pas que assinou o Tratado de Quioto, assumiu responsabilidades perante os restantes parceiros mundiais, no que concerne ao controlo e implementao de medidas de reduo da emisso de gases com efeito de estufa. Para alm do compromisso ambiental, necessrio frisar que actualmente se verifica que a situao energtica de Portugal se baseia numa excessiva dependncia energtica vinda do exterior. Cerca de 85 % da energia primria importada e deriva, na sua esmagadora maioria, de fontes energticas no renovveis
(http://www.janusonline.pt/2006/2006_1_2_10.html).

Mais concretamente, com base em dados de

2005, pode-se dizer que a dependncia energtica exterior nacional, nesse mesmo ano, cifrouse nos 87,2 %, representando o consumo de petrleo cerca de 58,7% do consumo total de energia primria (http://www.dgge.pt). Pode-se igualmente acrescentar, com base em dados estatsticos da Direco Geral de Energia e Geologia, que o consumo de energia final tem vindo a aumentar, tendo-se registado um aumento de 12,0% entre 2000/2005, verificando-se um aumento do consumo de 12,7% em relao ao petrleo, de 74,8% relativamente ao gs natural e de 19,2% em electricidade. Relativamente ao peso do consumo energtico, o sector dos transportes foi e continua ainda a ser o mais representativo, com cerca de 35,4% do consumo energtico, a indstria com cerca de 28,4%, o sector domstico cerca de 16,5%, os servios com cerca de 13% e 6,7% noutros sectores (onde se inclui a Agricultura, Pescas, Construo e Obras Pblicas) (http://www.dgge.pt).

13

A dependncia energtica externa de Portugal bastante significativa e assenta sobretudo nos combustveis fsseis. Para agravar a situao, Portugal inteiramente dependente da importao desses combustveis, visto no haver explorao de gs natural e petrleo no nosso territrio, e as escassas minas de carvo estarem encerradas. Portugal por isso um pas fortemente influenciado pelas flutuaes do preo dos combustveis fsseis nos mercados externos, com a agravante de que infelizmente Portugal tem parcos recursos financeiros. O que a Portugal falta em combustveis fsseis endgenos teoricamente compensado com um enorme potencial em termos de energias renovveis, mas infelizmente o aproveitamento das energias renovveis ainda est bastante subaproveitado. A par da carncia e problemtica associada aos combustveis fsseis, que ainda comanda a nossa economia e gesto energtica, afigura-se um outro problema que tambm requer uma gesto cuidada e sustentada, quer sob o ponto de vista econmico, quer ambiental, trata-se da gesto dos resduos. A gesto dos resduos constitui ainda um dos desafios ambientais mais difceis de concretizar, que o pas enfrenta, pois apesar de haver legislao e compromissos, nomeadamente de ndole internacional, relativamente gesto dos resduos, Portugal ainda apresenta vrias fragilidades e ainda possui um longo caminho a seguir. necessrio definir o conceito de resduo, se bem que no haja uma definio nica, nem uma nica classificao para os diversos tipos de resduos existentes. Em termos genricos os resduos so substncias, produtos, ou objectos, que ficaram incapazes de utilizao para os fins para que foram produzidos, ou so subprodutos de um processo de produo, transformao ou utilizao e, em todos os casos, pressupem que o detentor tenha ou queira desfazer-se deles. Segundo a definio do Decreto Lei 310/95, da legislao portuguesa, considera-se resduo qualquer substncia ou objecto de que o detentor se desfaz ou tem inteno ou obrigao de o fazer.... Esta definio corresponde transposio para o Direito Portugus, da Directiva 75/442/EEC da Unio europeia. Existem diversas formas de classificar os resduos, pelo que se poder ter em conta a sua origem ou provenincia e/ou a sua natureza fsico-qumica. Infelizmente s em 1997, com o Decreto-Lei n. 239/97, Portugal estabeleceu as linhas mestras ligadas gesto de resduos, designadamente a sua recolha, transporte, armazenamento, tratamento, valorizao e eliminao, procurando minimizar os danos na sade e no ambiente. Nesse diploma foram consagrados como objectivos gerais da gesto a preferncia pela preveno ou reduo da produo e nocividade dos resduos, nomeadamente atravs da reutilizao e da alterao dos processos produtivos, por via da 14

adopo de tecnologias mais limpas, bem como da sensibilizao ambiental dos agentes econmicos/produtivos e dos consumidores. Instituiu-se igualmente que a gesto de resduos visa assegurar ao mximo a sua valorizao, quer material, quer energtica. Este paradigma, vlido para a generalidade dos resduos, coloca-se com maior acuidade no caso dos leos usados, na medida em que, tratando-se tambm de um resduo, a sua correcta gesto uma condio indispensvel para um desenvolvimento sustentvel e de qualidade. Infelizmente apenas parte do total de leos (incluindo os de origem vegetal, animal e mineral) utilizados em Portugal so recolhidos, sendo a maioria encaminhada para redes de esgotos, aterros ou despejada a cu aberto, em cursos de gua ou em terrenos. necessrio frisar que dentro do conjunto de leos usados, tidos como resduos, pode-se distinguir basicamente dois tipos: leos minerais - leos provenientes da refinao do petrleo e, portanto, compostos maioritariamente por hidrocarbonetos; leos orgnicos inclui os leos vegetais, extrados essencialmente de frutos e sementes oleaginosas, assim como os leos de origem animal. Os primeiros, devido sua composio qumica, so considerados, aps o seu uso, resduos perigosos, constituindo, por isso mesmo, um perigo para a sade humana e para a vida animal e vegetal. Deste modo, a gesto destes leos segue uma metodologia diferente daquela que seguem os leos vegetais e similares tidos como resduos no perigosos

(http://www.netresiduos.com/cir/index_a.htm).

Os leos vegetais e similares, nomeadamente os que so usados em frituras a nvel domstico e industrial, esto enquadrados dentro da fraco da biomassa. Segundo a Directiva 2001/77/EC de 27 de Setembro de 2001, considera-se Biomassa a fraco biodegradvel de produtos e resduos da agricultura (incluindo substncias vegetais e animais), da floresta e das indstrias conexas, bem como a fraco biodegradvel dos resduos industriais e urbanos. Devido s suas propriedades, estes resduos so considerados como potenciais combustveis
(http://www.netresiduos.com/cir/index_a.htm).

Devido s suas propriedades, a valorizao dos leos minerais usados e dos leos orgnicos usados diferenciada. Grande parte dos leos minerais podem ser regenerados ou ento usados em processos de incinerao (valorizao energtica). Enquanto que os leos orgnicos, com especial destaque para os leos vegetais, apenas podem ser valorizados energeticamente, quer de uma forma directa em processos de incinerao e queima, quer de forma indirecta, atravs do fabrico do designado biodiesel. O biodiesel no mais do que um combustvel renovvel, biodegradvel, sucedneo do leo diesel mineral. Este combustvel constitudo por uma mistura de steres metlicos ou etlicos 15

de cidos gordos, obtidos da reaco de transesterificao de triglicridos, presentes nos leos vegetais ou mesmo em gorduras animais, com um lcool de cadeia curta, geralmente o metanol ou o etanol (Knothe et al., 2005). Tendo em conta a situao energtica portuguesa, nomeadamente a forte dependncia sobretudo em relao aos combustveis fsseis, e tendo tambm em conta os graves impactes ambientais que derivam do uso destes mesmos combustveis, a valorizao (energtica) de resduos torna-se uma medida premente a tomar. A valorizao uma medida de extrema importncia na gesto dos resduos, pois conduz a uma melhoria ambiental e de sade pblica, assim como tem repercusses a nvel energtico, nomeadamente. Trata-se de valorizar aquilo que eram considerados resduos inteis e nefastos, permitindo o seu aproveitamento e, consequentemente, reduzir a dependncia relativamente aos combustveis tradicionais (combustveis fsseis), com as bvias repercusses atrs mencionadas. Para efeitos deste trabalho, uma especial ateno ir ser dada aos leos orgnicos usados, provenientes dos processos de fritura. Este um resduo que, at h bem pouco tempo, era subaproveitado em Portugal, mas que poder e dever ser usado como matria prima na obteno do biodiesel, um sucedneo ecolgico e vivel do diesel, permitindo deste modo diminuir os impactes ambientais derivados da m gesto do resduo em si e obter um combustvel endgeno e mais amigo do ambiente. Ao aproveitarmos este resduo estamos a gerir melhor e a minimizar trs importantes problemas, um problema de gesto de resduos, um problema energtico e outro referente s emisses poluentes, que contribuem nomeadamente para as alteraes climticas.

1.1 leos orgnicos, vegetais e similares

A grande heterogeneidade dos lpidos justifica a existncia de diversas classificaes; uma delas, porventura a mais simples, agrupa os lpidos em trs classes: lpidos simples, lpidos conjugados e lpidos derivados. Os lpidos simples compreendem os glicridos e as ceras, sendo que a esmagadora maioria dos lpidos, cerca de 97%, constituda pela fraco dos glicridos (Felizardo, 2003). Os glicridos so o resultado de uma unio entre uma molcula de glicerol e uma, duas ou trs cadeias de cidos gordos, sendo no fundo steres de glicerol. Caso o ster de glicerol possua apenas um cido gordo, toma a designao de monoglicrido (MG), no caso de possuir duas cadeias de cidos gordos um diglicrido (DG), se possuir trs um triglicrido (TG), tal como ilustrado na figura 1.

16

Figura 1 - Esquema dos trs tipos de glicridos em que R1, R2 e R3 representam grupos alquilo constitudos por tomos de carbono e de hidrognio (Felizardo, 2003). Na maioria dos casos os glicridos naturais so constitudos principalmente por triglicridos, numa proporo geralmente aproximada de 95% para os triglicridos e entre os 0,1 a 2% de diglicridos e monoglicridos (Felizardo, 2003). Os triglicridos so (tri)steres de glicerol (ou propanotriol) e cidos gordos e so habitualmente designados por leos ou gorduras, consoante se encontrem em estado lquido ou slido, temperatura ambiente (Morrison e Boyd, 1996). As ceras so igualmente steres, mas de monolcoois de elevado peso molecular. Daqui se depreende que um ster seja uma molcula derivada da condensao de um lcool com um cido. Na figura 2 ilustrado um esquema de um ster, no qual a letra R representa a cadeia carbonada do cido gordo e R`, a cadeia carbonada do lcool reagente.

Figura 2- Esquema de um ster Os cidos gordos que compem os steres podem ser saturados ou insaturados e, neste caso, possurem uma ou mais ligaes duplas. A saturao ou insaturao, juntamente com o comprimento das respectivas cadeias (entre 8 a 24 tomos de carbono) varia consoante a origem de onde se extrai o leo. Os cidos gordos so insolveis na gua devido ao facto da maior parte da molcula, formada por CH2-, ser hidrofbica e somente o radical carboxlico ser hidroflico. Esta particularidade qumica tem grande interesse, visto dependerem dela as propriedades fsicas essenciais do leo, como a viscosidade, o ponto de fuso, a estabilidade trmica e o ndice de cetano, permitindo assim prever, partida, o comportamento de um dado leo. Alm dos leos vegetais, extrados essencialmente a partir de frutos e de sementes de oleaginosas, tambm existe outro material glicerdico, como as gorduras de origem animal, que podem ser igualmente utilizadas e valorizadas, nomeadamente, na produo de biodiesel. Os leos podem-se classificar em vrios grupos, consoante os cidos gordos que neles predominam. Os grupos mais importantes so os que se indicam na tabela 1.

17

Tabela 1 - Classificao dos cidos gordos (Stern et al., 1983).

cidos gordos Saturados (ligaes simples) Grupo do cido lurico (C12H24O2) inclui leos com ndices de iodo entre 5 e 30 (exemplo: leo de coco); Grupo do cido palmtico (C16H32O2) inclui o leo de palma; Grupo do cido esterico (C18H36O2) so leos igualmente saturados, com ligaes simples. cidos gordos Insaturados Grupo do cido olico (C18H34O2) possuem apenas 1 dupla ligao e a maioria destes leos tem um ndice de iodo entre 80 e 110 (exemplo: azeite, amendoim, colza); Grupo do cido linoleico (C18H32O2) inclui leos com 2 duplas ligaes e com um ndice de iodo geralmente superior a 110 (exemplos: girassol, soja e algodo). Grupo do cido linolnico (C18H30O2) inclui leos com 3 duplas ligaes.

A distino dos leos com base no seu grau de saturao ou insaturao e no tamanho das molculas dos cidos gordos que os constituem permite, de uma forma bastante simples, a sua classificao (Morrison e Boyd, 1996). Os leos que possuam um elevado teor de cido linoleico e linolnico tendem a ser pouco resistentes oxidao, sendo por isso mais facilmente biodegradados. Apresentam igualmente um menor ndice de cetano, o que no favorece a sua capacidade de combusto. Os leos saturados do tipo palmtico e esterico so pouco fludos, mas so mais resistentes oxidao; encontram-se normalmente no estado slido, temperatura ambiente e possuem, regra geral, um ndice de cetano elevado (Ma e Hanna, 1999). A sua grande viscosidade, aliada sua maior resistncia oxidao, fazem com que perdurem no ambiente e sejam de difcil remoo e limpeza, tendo de ser aquecidos at ao seu ponto de fuso para remoo ou posterior valorizao (http://www.netresiduos.com/cir/index_a.htm). Como no presente trabalho se utilizaram leos de fritar, necessrio referir que a esmagadora maioria destes de origem vegetal. Em Portugal, os leos vegetais mais usados so os de girassol, soja e o azeite (INE, 2007). O leo de girassol, o mais usado em Portugal para os processos de fritura, considerado um dos melhores leos em termos nutricionais, devido, sobretudo, ao seu elevado contedo de cido linoleico, que est associado a um elevado ndice de iodo. Quanto mais elevado for o contedo de cido linoleico, maior ser o ndice de iodo. igualmente importante referir que o leo de soja tem uma composio mdia centrada em cinco cidos gordos: o cido palmtico, esterico, olico, linoleico e linolnico. Estes cidos gordos, cuja proporo relativa mantida sensivelmente constante aps as reaces de transesterificao, compem mais de 95% do teor de cidos gordos deste leo. Tal caracterstica verifica-se igualmente para a grande maioria dos leos orgnicos tanto de origem vegetal como animal (sendo estes uma minoria). No entanto, necessrio referir que a composio em cidos gordos dos diferentes leos e gorduras pode variar muito consoante a 18

fonte de onde so extrados, pois depende de um grande nmero de factores como sejam a prpria espcie e a variedade da planta, a natureza do solo onde cresceu, a altura do ano em que foi colhida e o clima a que esteve sujeita durante o seu desenvolvimento, entre outros factores. O mesmo se passa em relao s gorduras animais. Conforme a provenincia do leo, variaes na sua composio qumica so expressas por variaes na relao molar entre os diferentes cidos gordos presentes na estrutura (tabela 2). Tabela 2 - Composio percentual dos principais cidos gordos saturados e insaturados, de alguns leos e gorduras (http://www.ccet.ufrn.br/~duarte/nomenclatura_acidos_carboxilicos.pdf).
Saturados
Pf C Razo Ins/sat Cpri. C10:0 Luri. C12:0 Mirsti. C14:0 Palmti. C16:0 Esteri. C18:0 Oli. C18:1

Insaturados
Linolei. C18:2 Linolni. C18:3

Gorduras animais Sebo (bovino) Banha (suna) Manteiga (bovina) Gordura humana Gordura de baleia leo fgado bacalhau leos Vegetais leo canola leo coco leo milho leo algodo leo linho Azeite leo palma leo semente de palma leo amendoim leo soja leo girassol leo linhaa

1.0 30 32 15 24 1.3 0.6 0.9 2.0 1.1

3 2 -

3 5 -

3 2 11 8 8 8

24 26 27 25 12 17

19 14 12 8 3 -

43 44 29 35 35 22

3 10 2 9 10 5

-20 -1

15.7 0.1 6.7 2.8 9.0 5.1 1.0 0.2

6 4

47 48

18 1 1 16

4 9 11 22 3 13 45 8

2 3 2 3 7 3 4 3

62 6 28 19 21 71 40 15

22 2 58 54 16 10 10 2

10 1 1 53 1 -

-6

3 -16 -15 -24

6.2 5.7 7.3 10.0

11 11 7 6

2 4 5 3

48 24 19 19

32 54 68 24

7 1 47

PF C = ponto de fuso (C) leo de canola = leo de colza

A anlise da composio dos cidos constitui o primeiro procedimento para a avaliao preliminar da qualidade do leo bruto e/ou de seus produtos de transformao e isto pode ser obtido atravs de vrios mtodos analticos, nomeadamente atravs da cromatografia lquida de alta eficincia, da cromatografia em fase gasosa e da espectroscopia de ressonncia magntica. ainda necessrio distinguir entre os designados leos brutos e refinados. Um leo bruto aquele que resulta da fase final de extraco, sem sofrer qualquer outro processo adicional. 19

Estes leos podero ser utilizados sob esta forma para alguns fins, embora normalmente sejam sujeitos a um processo de refinao antes da sua venda, passando ento a designar-se por leos refinados. Devido ao processo de refinao, a composio de um leo refinado difere da de um leo bruto ou cru, pois enquanto que neste se encontram vrias substncias como vitaminas lipossolveis, lecitina, pigmentos, ceras, fitoesteris e enzimas, no processo de refinao so retiradas quase todas essas substncias. A vantagem da refinao que ao eliminarem-se estas substncias os leos aumentam a sua estabilidade de oxidao e no se deterioram to rapidamente, diminuindo igualmente a acidez e o rano. Em contrapartida em termos nutricionais, os leos refinados perdem parte do seu valor nutricional
(http://www.endurancebrasil.com.br/port/tecnicas/oleo_na_dieta_dos_cavalos.php).

Da tabela 2 possvel constatar que se podem distinguir basicamente dois tipos de gorduras/leos: as gorduras saturadas, que se encontram sobretudo em produtos de origem animal, e as no-saturadas ou insaturadas, que provm sobretudo dos vegetais e do peixe. Na tabela 3 explicitam-se os principais grupos de leos orgnicos, as suas origens e o modo como geralmente so obtidos. No colocado o grupo dos leos extrados dos esgotos pois estes geralmente constituem uma mistura de leos orgnicos com leos minerais e, por isso, a sua separao e valorizao bastante difcil e por norma no vivel. Tabela 3 - Diferentes origens e modos de obteno de leos e gorduras (Parente, 2003).
Grupo Origem Modo de obteno leos e gorduras animais leos e gorduras vegetais Matadouros, frigorficos Culturas perenes e industriais e curtumes temporrias, nomeadamente de oleaginosas Extraco com gua e Extraco mecnica, vapor extraco por solvente e mista leos residuais de frituras Uso domstico, comercial e industrial Recolha em recipientes apropriados (olees)

1.1.2 leos alimentares e o seu uso

Os nicos leos e gorduras utilizados na confeco e na produo de alimentos e raes so de origem orgnica, sendo portanto de origem vegetal e/ou animal. So tambm estes leos os nicos que podem dar origem ao designado biodiesel (http://www.netresiduos.com/cir/index_a.htm). Na alimentao humana, os leos tm vrios papis, conforme o uso a que se destinam. So usados como ingredientes em determinados alimentos, tais como maioneses, molhos, margarinas, etc. So empregues no tempero de determinados pratos, tais como saladas, etc, sendo igualmente utilizados no processamento de alimentos, em processos de fritura. No mbito deste trabalho, uma especial ateno ser dada a leos utilizados na alimentao humana, com particular incidncia para os leos que so usados nos processos de fritura por 20

imerso, uma vez que um processo que utiliza leos ou gorduras, sobretudo vegetais, como meio de transferncia de calor. O tempo de vida de um leo de fritar condicionado pelo prprio leo (origem), tempo de fritura e temperaturas atingidas, verificando-se, no entanto, que o tempo de utilizao do mesmo varia, muitas vezes, de um estabelecimento para outro, principalmente pela falta de fiscalizao que determine a troca do leo usado. vulgar a reutilizao abusiva de leos e muitas vezes a mesma pe em causa a sade pblica, uma vez que so reutilizados leos e estes, devido ao seu uso prolongado e intenso (tempo de fritura e temperaturas atingidas), apresentam profundas modificaes na sua estrutura qumica e nas suas propriedades fsicas, podendo eventualmente apresentar componentes carcinognicos
(http://www.netresiduos.com/cir/index_a.htm).

Este

uso

recorrente

de

leos

que

servem

continuamente nos processos de fritura, deve-se tentativa de se aumentar o tempo de utilizao dos leos, conduzindo a mais baixos custos de produo, aliada, por vezes, a uma falta de informao sobre as implicaes na sade pblica.

1.1.2.1 Alteraes registadas nos leos alimentares, sob processos de fritura

necessrio referir que muitas vezes aos leos e gorduras utilizados na alimentao so adicionadas substncias e aditivos que visam melhorar o seu aroma, paladar, durabilidade e acidez ou alcalinidade. Acontece que aps a utilizao destes leos na confeco de alimentos, por fritura, surgem, no intencionalmente, uma srie de elementos que podem alterar as suas caractersticas. Os leos podem ficar com partculas em suspenso, nomeadamente derivadas dos alimentos submetidos aos processos de fritura. Para alm da contaminao com restos de partculas dos alimentos, a prpria composio qumica do leo, por efeitos trmicos, pode ser alterada, dependendo da temperatura atingida, do tempo de fritura e das caractersticas do prprio leo (http://www.netresiduos.com/cir/index_a.htm). Os leos e gorduras sofrem reaces oxidativas hidrolticas com o passar do tempo. Todavia, quando utilizados repetidamente em fritura por imerso, essas reaces tendem a ser mais cleres e intensas (Neto, 2002). Nas reaces de hidrlise, os triglicridos reagem com gua dando origem ao glicerol e aos respectivos cidos gordos seus constituintes. Por vezes, estas reaces ocorrem por catlise cida ou alcalina, sendo que no caso da catlise alcalina, a reaco designada por saponificao, devido mistura de sais de sdio ou potssio (consoante a base) com cidos gordos que formam o sabo (Felizardo, 2004).

21

No caso de reaces de oxidao, o oxignio do ar reage espontaneamente com os cidos gordos insaturados do leo, sendo incorporado na molcula, dando origem a perxidos (Felizardo, 2004). Nos processos de fritura, as reaces de oxidao so particularmente mais significativas, sendo aceleradas pela alta temperatura do processo, e so as principais responsveis pela modificao das caractersticas fsico-qumicas e, consequentemente, organolpticas do leo (Maskan et al., 2003). O leo torna-se mais escuro, viscoso, a acidez aumenta e tende a desenvolver um odor desagradvel, vulgarmente chamado de rano. Efectivamente, possvel a purificao destes leos, com materiais adsorventes, mas a mesma no considerada vivel sob o ponto de vista econmico (Neto, 2002).

1.1.3 Quantitativos de leos orgnicos usados no contexto portugus

Em Portugal, a Federao Industrial dos leos Vegetais, Derivados e Equiparados (FIOVDE), lida com a produo de leos orgnicos (vegetais e animais) e com a sua valorizao nas vrias indstrias. Na tabela 4 ilustram-se os vrios subsectores que compem o sector dos leos Vegetais, Derivados e Equiparados (Guia Tcnico do Sector dos leos Vegetais, Derivados e Equiparados, INETI, 2001). Tabela 4 - Vrios subsectores da FIOVDE (Guia Tcnico do Sector dos leos Vegetais, Derivados e Equiparados, 2001).
Subsector Fabricao de leos vegetais brutos Sector dos leos Vegetais, Derivados e Equiparados Principais produtos leo de girassol, leos de soja, farinhas para raes leos e azeites refinados de Margarinas, cremes para barrar, banhas

Refinao de leos e gorduras Fabricao de margarinas e gorduras alimentares similares Fabricao de sabes, detergentes e Sabes, detergentes para loia e roupa glicerina Fabricao de produtos de limpeza, Ceras, graxas, produtos de limpeza de polimento e proteco cho, desengordurantes produtos de conservao da madeira Fabricao de perfumes, cosmticos e Produto para cuidar da pele, champs, produtos de higiene amaciadores, perfumes, after-shaves, dentfricos, cremes para a barba

Segundo o Centro de Informao de Resduos, faltam dados sobre os verdadeiros quantitativos nacionais de leos alimentares usados, assim como relativamente ao seu destino final. Com base nesta mesma fonte, segundo a Quercus, estima-se que sero produzidos anualmente em Portugal cerca de 125 mil toneladas deste resduo, dos quais apenas 3000 sero recolhidos (http://www.netresiduos.com/cir/index_a.htm). Todavia, salienta-se o facto de estes mesmos dados estarem certamente bastante desfasados da realidade, j que essa mesma 22

informao h vrios anos que se mantm inalterada, no sendo sequer indicado o ano de referncia. Deve ser no entanto referido que h outros estudos que apontam para outros valores quantitativos para esta fileira, sendo de salientar que, por vezes, as discrepncias so assinalveis uma vez que, usando metodologias diferentes, os resultados obtidos muitas vezes so dificilmente comparveis (IPA, 2004). Com base em dados que constam no relatrio Linhas de Definio estratgica do Sistema de Gesto dos leos Alimentares Usados- 2004, so apresentados 4 estimativas para os quantitativos de leos alimentares usados, com base em 4 entidades independentes (tabela5). Tabela 5 - Estimativas de produo de leos alimentares usados apresentadas por vrias fontes, expressas em toneladas/ano (IPA, 2004).
Total (t/ano) Fonte 125 000 Quercus * 51667 ARESP 14660 540 15 200 Pinto (2000) ** 48288 39508 540 88 336 IPA * A Quercus explicita que os dados apresentados no so da prpria instituio, mas o resultado das estimativas da Agncia de Energia (IPA, 2004). ** Relatrio de Ana Margarida Pinto- Introduction of Biodiesel in Portugal (2000) Sector Domstico HORECA Industrial

Ainda uma outra abordagem pode ser feita com base em dados de 1998, do INE, das estatsticas referentes aos Balanos de Aprovisionamento de Gorduras e leos Vegetais Brutos em Portugal. Estes dados apontavam para um consumo total anual de 22,1 kg de leos alimentares por habitante do territrio nacional. Todavia considera-se que tem havido uma tendncia de diminuio do consumo, numa mdia de 2 a 3%, ao ano (IPA, 2004). Considerando estes dados, relativamente ao ano de 2007, a capitao anual em Portugal ter sido na ordem dos 17 kg. Segundos dados do INE, de 2006, a populao residente em Portugal, era de 10599095, cifrando-se em Portugal Continental um total de 10110271 habitantes
(http://www.ine.pt/xportal/xmain?xpid=INE&xpgid=ine_main).

Em

termos

genricos

considerando um total arredondado de 10500000 residentes e uma capitao de 17 kg, os quantitativos de leos alimentares usados, no territrio nacional, seriam na ordem das 178500 toneladas. Considerando que apenas se poder considerar como efectivamente resduos susceptveis de valorizao cerca de 45% do total de leos consumidos, devido s vrias perdas (cerca de 40% so incorporados nos alimentos e 15% constituem perdas, tais como fugas, leo absorvido nos filtros de papel, etc (IPA, 2004)), o quantitativo terico de leos alimentares residuais ser na ordem das 80325 t/ano. Este valor por si s representa j um significativo manancial de matria-prima cuja gesto no tem sido a mais correcta, pois parte utilizada na indstria das raes, e, infelizmente, outra parte (talvez a maior fraco), 23

destina-se a ser despejada nas redes de esgotos ou em terrenos. Infelizmente prtica corrente a eliminao destes leos usados na rede de saneamento bsico, quer pelas empresas que lidam diariamente com estes produtos, quer por parte dos prprios cidados, a nvel

domstico. O sector domstico representa cerca de 54% do total do consumo de leos vegetais/produo de leos usados, o sector HORECA cerca de 45%, sendo a fileira ligada indstria, associada apenas a 1% (IPA, 2004). O quantitativo real de leos orgnicos usados no , portanto, consensual e poder at representar valores bastantes desfasados do contexto real actual portugus, uma vez que grande parte das empresas no divulga o verdadeiro quantitativo de resduos de leos orgnicos produzidos, por duas razes principais. Por um lado, prende-se com uma questo de impostos/tributao, pois uma maior produo de resduos, encarada como resultante de uma maior laborao e consequentemente de mais ganhos econmicos. Por outro lado, encontram-se as questes de obrigatoriedade na gesto resduos. Deste modo, torna-se difcil o estabelecimento de um balano mais preciso dos quantitativos de produo de leos e de produo de resduos resultantes da sua utilizao. Em anexo, no final do trabalho, figuram algumas tabelas referentes ao panorama nacional relativo produo, consumo e aprovisionamento de leos e gorduras. A maior parte das empresas ligadas produo e refinao de leos e outras gorduras e produtos similares, assim como empresas que produzem diariamente resduos de leos alimentares provenientes de processos de fritura (restaurantes, churrasqueiras, hotis, roulotes de comida, fbricas de aperitivos e produtos fritos, etc), aliada a uma maior densidade populacional, encontra-se essencialmente na Zona Litoral e na Zona Centro, sobretudo na regio da grande Lisboa e Vale do Tejo (INETI, 2001). Uma vez que nestas zonas que se aglomeram os grandes focos populacionais e industriais associados aos sectores atrs referidos, compreende-se que o possvel e desejvel aproveitamento destes leos para a produo de biodiesel, sob a forma da instalao de unidades industriais de produo, seja mais vivel e aconselhvel nas zonas onde se encontra a maioria do volume de matria prima necessrio. Aliado a este facto acresce o de ser igualmente nessas zonas que se encontram as unidades de produo e distribuio de gasleo, ao qual o biodiesel poder ser adicionado, assim como a maioria do mercado consumidor (INETI, 2001).

1.2 Historial da utilizao de leos e seus derivados para a combusto nos motores Diesel
Em 1895, Rudolf Christian Karl Diesel (1858-1913), um engenheiro francs de origem alem, concebeu o motor de ignio por compresso, que mais tarde foi denominado, em sua 24

homenagem, de motor Diesel. Os primeiros motores do tipo diesel eram de injeco indirecta atravs de pr-cmaras, o que permitia uma maior versatilidade e tolerncia quanto s caractersticas dos combustveis. Tais motores eram alimentados por petrleo filtrado, leos vegetais e at mesmo por leo de peixe. Todavia, eram motores de baixos rendimentos e a qualidade das emisses seria hoje inaceitvel, devido sua carga poluente. Curiosamente, durante a Exposio Mundial de Paris, em 1900, o motor diesel foi apresentado ao pblico, no funcionando com o diesel (leo inorgnico, refinado do petrleo), mas sim funcionando com leo de amendoim (Ma e Hanna, 1999). O combustvel especfico denominado como leo diesel surgiu somente com o advento dos motores diesel de injeco directa, sem pr-cmara. A disseminao desses motores deu-se na dcada de 1950, com a forte motivao dos seus maiores rendimentos, resultando em baixos consumos de combustvel. Alm dos baixos nveis de consumo especfico, os motores diesel modernos so menos poluentes que os vulgares motores movidos a gasolina, excepo da emisso de xidos azotados. Desde o seu incio, os motores diesel estiveram sempre equacionados para poderem funcionar recorrendo a combustveis lquidos orgnicos, nomeadamente a leos vegetais e similares; no entanto, o desenvolvimento da indstria petrolfera de combustveis permitiu ampliar a sua oferta e baixar os preos dos combustveis derivados do petrleo tornando essa alternativa desinteressante, excepto em circunstncias muito especiais, como as que ocorreram durante a Segunda Grande Guerra Mundial (1939-1945). De facto, a primeira patente de biodiesel, recorrendo a leo de amendoim e metanol, foi feita no Japo, na dcada de 1940, seguida de outras trs patentes norte-americanas, na dcada de 1950. Todavia necessrio referir que a reaco de esterificao de leos e a posterior transesterificao dos steres, no fundo a criao do biodiesel, foi descoberta por E. Duffy e J.Patrik, em 1853, muito antes sequer de Rudolf Diesel ter inventado o motor diesel (Gomes, 2006). A utilizao do designado biodiesel, um sucedneo ecolgico e orgnico do diesel, apresenta inmeras vantagens relativamente utilizao dos leos vegetais em bruto. Os leos vegetais apresentam rendimentos mais baixos e revelam alguns problemas, nomeadamente ao nvel da viscosidade, obrigando a diluir o leo em gasleo ou a efectuar-se o arranque a gasleo antes de se usar o leo, directamente. Verifica-se igualmente que existe uma srie de inconvenientes para o uso directo (a 100 %) de leos vegetais e similares nos motores diesel actuais (Ma e Hanna,1999; http://www.netresiduos.com/cir/index_a.htm): elevadas perdas de presso no sistema de alimentao de combustvel; formao de depsitos nos injectores e entupimento dos filtros de combustvel; desgaste do motor, provocado pelos cidos livres; espessamento do leo do crter e alteraes significativas das propriedades do leo de lubrificao; fumos; dificuldades 25

no arranque a frio; ms condies de lubrificao dos sistemas de injeco de combustvel, em particular a baixas temperaturas, e aumento do consumo. A queima do leo, no motor, revela-se bastante incompleta, deixando depsitos carbonosos e acumulao de gordura na zona superior da cmara de combusto, mbolo e segmentos, podendo entupir o injector, dificultando e limitando o normal funcionamento do motor. Estas limitaes, desde logo, impuseram srios condicionalismos utilizao directa destes leos em motores Diesel, particularmente do tipo de injeco directa, os mais comuns actualmente. Contudo, quando se faz reagir um leo vegetal com um lcool (metanol ou etanol), obtm-se um combustvel que revela ser um bom substituto do diesel e dos leos, pois apresenta melhores rendimentos e no apresenta os problemas que advm da utilizao directa de leos vegetais e similares (Gomez et al., 2000). Este combustvel, que no fundo consiste num ster metlico ou etlico, conforme o lcool que utilizado, conhecido, na Europa, por biodiesel. Apesar de j ter um relativo longo historial, actualmente ainda se procedem a variados estudos relativamente a este combustvel, quanto utilizao de matrias primas que lhe dem origem e s tecnologias e vias produtivas, procurando melhorar todo o processo e o produto final.

1.3 O panorama do biodiesel na Europa

No contexto europeu, tal como na maioria do resto do Mundo, o biodiesel geralmente sintetizado recorrendo-se a leos vegetais virgens, produzidos especificamente para o efeito (exemplo: colza, soja, girassol, etc.). No caso particular da Unio Europeia, desde 1992, esta opo teve origem, em grande medida, na necessidade de viabilizao, para fins no alimentares, da terra arvel colocada em pousio obrigatrio (setasside), por imposio da Poltica Agrcola Comum (Rosa, 2005). Dever salientar-se, contudo, que actualmente, face crescente procura de matria-prima, j existem muitos campos de cultivo permanente e intensivo, inteiramente dedicados s culturas energticas. A tendncia no sentido de aumentar ainda mais o nmero e a extenso de reas dedicadas s designadas culturas energticas. A produo de oleaginosas e outras espcies vegetais, para produo de biocombustveis tornou-se uma prtica cada vez mais profusa no seio dos vrios pases da UE e surgiu para colmatar a necessidade, igualmente imposta no seio da UE, de diversificar as origens de obteno de energia, nomeadamente recorrendo s fontes energticas renovveis, nas quais a biomassa tem um papel cada vez mais significativo. Convm salientar que a nvel europeu, de acordo com a Directiva 2003/30/UE, foi assumido que em 2020, os combustveis rodovirios convencionais teriam que ser substitudos em 8% por biocombustveis, segundo a calendarizao apresentada na tabela 6. Todavia, este valor j foi alterado e passou para 10%. 26

Tabela 6 - Calendarizao da substituio de combustveis fsseis por combustveis alternativos, expressa em %, de acordo com a Directiva 2003/30/UE (Rosa, 2005). Ano 2005 2010 2015 2020 Biocombustvel 2 5,75 7 8 Gs Natural 2 5 10 hidrognio 2 5 Total 2 7,75 14 23

A produo/utilizao de biocombustveis, em particular de biodiesel, tem vindo a crescer na UE, desde 1990 (figura 3). Em 2005, os principais responsveis pela produo de biodiesel foram a Alemanha (cerca de 50%) e a Frana. Como se pode ver na tabela 7, nos ltimos 2 anos houve um elevado aumento no consumo de biodiesel na UE25, tendo-se passado de um valor de 2,25 Mtep, em 2005, para aproximadamente 3,85 Mtep, em 2006. Tabela 7 - Panorama na Unio Europeia (UE25) relativamente ao biodiesel (adaptado de http://www.energies-renouvelables.org/observ-er/stat_baro/observ/baro167b.pdf). Ano Consumo de biodiesel (tep) * Capacidade instalada (t) 2004 2245093 4228000 2005 3849210 6069000 2006 * 1 tonelada de B100 corresponde a 0,9 tep Produo de B100 (t) 1933400 3184000

toneladas

Ano

Figura 3 - Produo de Biodiesel na Unio Europeia a partir de 1992 at 2004

(http://www.energies-renouvelables.org/observ-er/stat_baro/observ/baro167b.pdf)

27

1.3.1 Biodiesel em Portugal

Enquanto a indstria de produo de biocombustveis apresenta j uma significativa maturao e dimenso em diversos pases, nomeadamente entre os nossos parceiros da Unio Europeia, Portugal, embora dando passos cada vez mais rpidos e significativos neste domnio, ainda mostra alguma timidez e significativo atraso em relao a vrios outros parceiros europeus. O nosso pas encontra-se condicionado pela baixa produtividade da maioria das culturas com potencial energtico (tabela 8), nomeadamente na produo de oleaginosas, assim como por uma ausncia de excedentes de matria-prima, que alis insuficiente para a necessidade industrial nacional, nomeadamente de cariz alimentar (INETI, 2002). Tabela 8 - Produtividade mdia nacional, comparativa (Rosa, 2005). Pas Cultura Girassol Colza Portugal 0,8 t/ha 1 t/ha Frana e Alemanha 2,4 t/ha 3,3 t/ha Espanha 1,1 t/ha

Acresce-se que tambm no so devidamente e extensamente aproveitados os terrenos em pousio, por imposio da PAC, que poderiam ser utilizados para produo de culturas com fins energticos. Em concreto, relativamente s oleaginosas, no nosso pas este tipo de cultura de todo insuficiente para assegurar as necessidades nacionais em termos de leos. Deste modo so importadas significativas quantidades, quer de sementes para extraco de leo, quer do prprio leo (http://www.ine.pt/ine/acess/pub_detalhe.jsp?boui_aux=6209833). O biodiesel em Portugal est a ser produzido, na sua maioria, actualmente, a partir de leos virgens, o que faz com que o pas dependa e continue forosamente a depender de fornecimento de matriaprima importada e da flutuao dos seus preos no mercado internacional. Assim a aposta na reutilizao de leos orgnicos ser, sem dvida alguma, uma boa aposta, se forem estabelecidas estruturas logsticas necessrias e adequadas. No panorama nacional, existem j diversas empresas a operar no sector do biodiesel e existe um contnuo e crescente interesse nesta vertente. Entre as empresas j a operar na produo a partir de leos virgens esto a Iberol, a Torrejana, a Prio (Martifer) e a Biovegetal, embora haja outros grupos igualmente interessados (tabela 9). Em termos de empresas a operar com leos usados e gorduras animais destacam-se a Dieselbase, a Socipole, Space e a Biological, havendo outras empresas igualmente interessadas neste sector, destacando-se a Sunergy, Valouro e Avibon (Gomes, 2006). As tabelas 9 e 10 ilustram o panorama de produo de biodiesel a nvel nacional.

28

Tabela 9 - Capacidade nacional instalada, em 2007, de produo de biodiesel, a partir de matria-prima importada (Rosa, 2007). Empresa Iberol Torrejana Biocombustveis Prio combustveis Biovegetal Tagol Enersis Ares Lusitani Capacidade produtiva (t/ano) 100 000 + 20 000 40 000 x 2 100 000 100 000 100 000 25 000 1 t/dia

Tabela 10 - Empresas nacionais produtoras de biodiesel a partir de leos usados, dados de 2007 (Rosa, 2007). Empresas Dieselbase Space Socipole Sunergy Fuels Valouro (gorduras animais) Avibom (gorduras animais) Capacidade de produo 3 t/dia 3000 t/ano 5000 t/ano 5000 t/ano 3000 t/ano 3000 t/ano Observaes A produzir A produzir A produzir A produzir Em licenciamento Em licenciamento

Salienta-se que o biodiesel produzido a partir de leos usados de fritura est a ser usado, essencialmente, em frotas cativas e particulares, enquanto que o biodiesel produzido a partir de leos vegetais puros est a ser vendido s companhias distribuidoras de combustveis, para mistura com gasleo (Rosa, 2005). Em relao meta portuguesa de substituio de combustveis fsseis rodovirios, o objectivo inicial para 2010 era de 5,75% derivar de biocombustveis (Rosa, 2005). Todavia, Portugal assume-se como um pas que est a apostar na recuperao em relao ao seu atraso ao nvel das energias renovveis, e, actualmente, o Plano Energtico Nacional pretende atingir, no horizonte de 2010, relativamente fileira dos biocombustveis rodovirios, a meta dos 10% (Porfrio, 2007). Partindo do pressuposto de se atingir esta audaciosa meta, as quantidades de biodiesel necessrio para a cumprir passariam a cifrar-se em cerca de 690000 t/ano, e as de bioetanol em cerca de 235000 (Porfrio, 2007). Assim sendo se percebe que a capacidade instalada, assente na sua esmagadora maioria na matria-prima de leos virgens, no poder sustentar esta meta. H projectos de substituir, significativamente, os designados biocombustveis de 1 gerao, por biocombustveis de 2 gerao, permitindo aumentar substancialmente a produo desta fileira. Estes novos biocombustveis so produzidos

directamente a partir da fraco slida de biomassa vegetal ou animal (Biomass to liquid BTL), usando processo biolgicos (bioetanol) ou atravs de gaseificao a altas temperaturas e presso (Porfrio, 2007). 29

O consumo nacional total de gasleo (rodovirio, colorido e de aquecimento) e de fuel, em 2005, cifrou-se acima das 7000000 toneladas (tabela 11). Tabela 11 - Consumo de combustvel em territrio nacional continental (unidade em tonelada), segundo dados da DGEG (http://www.dgge.pt). Gasleo rodovirio Gasleo colorido Gasleo p/ Aquec. Fuel 2000 4210092 369963 3015758 2001 4519473 422958 3033999 2002 4605085 447596 3404723 2003 4596662 324269 156743 2125234 2004 4725430 321963 200643 1928811 2005 4705017 308502 223540 2433896

Atendendo ao crescente aumento da procura e s novas metas propostas para o consumo de biocombustveis na vertente rodoviria, acrescentando, igualmente, o sector energtico, em concreto o fuel e gasleo de aquecimento, as potencialidades de crescimento da fileira do biodiesel so ainda mais significativas. Todavia, dois problemas bastante prementes condicionam, de algum modo, o crescimento da produo de biodiesel. Por um lado, a j referida baixa disponibilidade nacional de matrias-primas, por outro, as questes burocrticas ligadas ao licenciamento e a apoios e incentivos governativos, sobretudo ao nvel da iseno do ISP. Em relao legislao nacional, relativamente aos biocombustveis, necessrio referir o Decreto-lei n.66/2006 de 22 de Maro, que aborda a iseno dos biocombustveis do ISP, e que estabeleceu que a iseno entre 2006 at 2010, dever corresponder respectivamente a 2% (2006), 3% (2007) e 5,75% (de 2008 at 2010), relativamente percentagem anual de gasolina e do gasleo rodovirio consumido no ano anterior. Concede, todavia, total iseno aos pequenos produtores dedicados, reconhecidos ao abrigo do Decreto-lei 62/2006 (http://www.diramb.gov.pt/data/basedoc/TXT_LN_27584_1_0001.htm). Por sua vez, a portaria n. 1391-A/2006, de 12 de Dezembro, estabeleceu para o ano de 2007, a quantidade mxima de biocombustveis passveis de iseno do ISP e definiu os critrios de concesso da iseno (http://www.iapmei.pt/iapmei-leg-03.php?lei=5048). Em funo do evoluir da situao empresarial e poltica, novas portarias vo sendo esperadas, em virtude da necessria adequao e actualizao legislativa.

1.4 A produo de biodiesel - os processos

Para efeitos deste trabalho apenas sero explicitadas as vrias metodologias de produo de biodiesel de 1 gerao. Este biocombustvel assim designado porque foi o primeiro tipo de biodiesel a ser produzido, envolvendo reaces de transesterificao para a sua sntese. O designado biodiesel de 2 gerao um biocombustvel mais avanado e igualmente promissor, que resulta de reaces de hidrogenao de leos. 30

Tal como j foi anteriormente referido, o biodiesel um biocombustvel sucedneo do diesel. Em termos qumicos, este combustvel composto por steres metlicos ou etlicos, conforme o lcool usado (metanol ou etanol, respectivamente) durante a reaco de transesterificao. Segundo a National Biodiesel Board, entidade Norte-Americana responsvel pelo controlo e utilizao do biodiesel nos EUA, o biodiesel o derivado monoalquil-ster de cidos gordos de cadeia longa, provenientes de fontes renovveis como leos vegetais ou gordura animal, cuja utilizao est associada substituio de combustveis fsseis em motores de ignio por compresso (motores do ciclo Diesel) (http://www.biodiesel.org). conveniente explicar em que consiste a esterificao e mais propriamente a transesterificao. Esterificao os lcoois reagem com os cidos orgnicos e inorgnicos para formar derivados, designados vulgarmente por steres. Esta reaco lenta, podendo necessitar de vrios dias para se completar, mas pode ser acelerada pela presena de ies H+ que exercem uma aco cataltica. Por outro lado, uma reaco reversvel e, portanto, limitada pela reaco inversa, que se denomina hidrlise. Transesterificao ou alcolise os leos so essencialmente constitudos por triglicridos (tristeres) resultantes da esterificao de cidos gordos pelo glicerol. As reaces de esterificao que consistem na converso de um ster de cido gordo noutro ster do mesmo cido, so designadas por transesterificao. Assim, a transesterificao consiste em fazer reagir os triglicridos, na presena de um catalisador, com um monolcool que ir substituir o glicerol, formando-se ento trs molculas de ster a partir de cada molcula de triglicrido, tal como ilustra a figura 4. Salienta-se que em termos estritamente estequiomtricos so apenas necessrias 3 moles de lcool por cada mole de leo para originar 3 moles de steres de cidos gordos e 1 mole de glicerol (figura 4). No entanto, na prtica, utiliza-se um excesso de lcool de forma a deslocar o equilbrio qumico no sentido da sntese dos steres (Ma e Hanna, 1999). Geralmente a razo molar lcool:leo, em catlise alcalina, a via mais usualmente empregue, de 6:1.

Figura 4 - Reaco de transesterificao de um triglicrido (triacilglicerol) R representa a cadeia carbonada dos cidos gordos e R`, a cadeia carbonada do lcool. H+/OH- representa o catalisador cido ou alcalino, respectivamente. 31

A reaco de transesterificao a etapa da converso, propriamente dita, do leo ou gordura em steres metlicos ou etlicos de cidos gordos, que constituem o biodiesel. Este ltimo processo tem sido usado desde h muito tempo para se obter componentes para cosmticos, sabes, aditivos alimentares e outros produtos, a partir de leos e gorduras. Deste modo, a produo de biodiesel no efectivamente um processo inteiramente novo, uma vez que recorre a processos qumicos j conhecidos. O processo visa simplesmente a obteno primordial de um produto combustvel e no a glicerina como ocorria no passado. necessrio referir que se o processo de recuperao (pelo menos parcial) do catalisador e o aproveitamento dos subprodutos (glicerina) for optimizado, a produo de biodiesel pode ser obtida com custos bastante competitivos com o preo comercial do leo diesel. necessrio ter em conta que, enquanto combustvel, o biodiesel necessita de apresentar algumas caractersticas tcnicas que so extremamente importantes: a reaco de transesterificao deve ser completa, implicando uma total ausncia de cidos gordos livres remanescentes, e o biocombustvel deve ser de elevada pureza, sempre que possvel sem traos de glicerina, gua, catalisador e lcool. No caso do glicerol, este um subproduto da reaco, enquanto que a gua o resultado de uma secagem incompleta, sendo a presena de catalisador e lcool indicativos de um excesso destes elementos e/ou uma reaco incompleta. Salienta-se que os lcoois mais adequados para a transesterificao so os de cadeia curta, tal como o metanol, o etanol, o propanol, o butanol e o lcool amlico. Todavia destes, o metanol e o etanol so os mais amplamente utilizados, sendo que o metanol o mais vulgarmente utilizado por razes econmicas e inerentes ao processo. De facto, o metanol geralmente mais barato que o etanol e isento de gua, possuindo igualmente uma cadeia mais curta e uma maior polaridade. As suas caractersticas anidras reduzem a possibilidade de reaces de hidrlise, contrrias transesterificao. As suas reduzidas dimenses favorecem uma mais rpida e melhor reaco com os triglicridos, enquanto que a elevada polaridade facilita a posterior separao entre os steres e a glicerina (Felizardo, 2004). Todavia, sob o ponto de vista ambiental, o uso do etanol mais vantajoso, uma vez que se obtm por processos fermentativos de biomassa, sendo, portanto, do ponto de vista de emisses, considerado como neutro. Acresce-se a esta particularidade o facto do etanol no ser txico, ao contrrio do metanol. O metanol obtm-se, geralmente, a partir de fontes no renovveis, mais concretamente do petrleo e gs natural, devendo todavia frisar-se que pode ser obtido recorrendo a biomassa, por destilao, no sendo contudo um processo muito usual (Parente, 2003). A tabela 12 corresponde a uma sntese de comparao entre a transesterificao usual via metlica e etlica. 32

Tabela 12 - Comparao da transesterificao alcalina via metlica e etlica, (Parente, 2003; Freitas et al., 2007; http://www.ciagri.usp.br/~simpol/downloads/10%20ULF%20UNICAMP.pdf). Condies usuais mdias
Quant. de lcool necessrio por 1000 l de B100 produzido Preo mdio do lcool Temperatura de reaco Tempo de reaco Propriedades usuais Converso de leo para B100 Glicerina total no B100 Viscosidade, a 40C Separao da glicerina Potncia em comparao com o diesel Consumo em relao ao diesel

Vias alcolicas utilizadas metlica etlica

90 kg baixo 60C 45 min 97,5% 0,87% 3,9 a 5,6 - complexa 2,5% menor 10% maior 130 kg elevado 85C 90 min 94,3% 1,4% 7,2% superior ao ster metlico + complexa 4% menor 12% maior

O processo mais usualmente empregue na produo do biodiesel est sinteticamente representado no fluxograma da figura 4.

Figura 5 - Fluxograma do processo de sntese de biodiesel via transesterificao qumica alcalina (Junior et al., 2005) 33

Assim, a primeira etapa consiste na preparao da matria prima, mais concretamente do leo ou da gordura, que dever ser processada de forma a que esteja nas melhores condies para a reaco de transesterificao, para assim alcanar a maior taxa de converso possvel. A matria prima dever ter teores reduzidos de gua e acidez. A gua promove reaces de hidrlise, causando a saponificao em condies alcalinas, produzindo-se sabes. A saponificao no s consome o catalisador, mas tambm causa a formao de emulses, as quais criam dificuldade na separao e purificao do biodiesel (Zhang et al., 2003). Em relao acidez, esta dever ser mnima pois consome catalisador, caso este seja alcalino, promovendo igualmente reaces de saponificao. No que concerne, ainda, gua, tanto o catalisador como o lcool necessitam de ser anidros (<0,1% de humidade)

(http://www.ipt.br/atividades/servicos/chat/files/biodiesel_jgrp.pdf).

As formas de abaixar a acidez vo

desde a neutralizao e lavagem, passando pela destilao dos cidos gordos ou o uso de esterificao prvia com uso de catalisadores cidos, o que garante o mximo de uso da matria oleosa (http://www.ipt.br/atividades/servicos/chat/files/biodiesel_jgrp.pdf). A segunda etapa do processo conhecida como etapa de converso e consiste na reaco de transesterificao, na qual ocorre a transformao dos leos e gorduras em steres, constituintes do biodiesel. A fim de maximizar todo o processo usam-se condies reaccionais apropriadas e, normalmente, o uso de catalisadores empregue, para acelerar a alcolise. Segue-se uma terceira etapa, em que ocorre a separao de fases. Obtendo-se os steres a partir da fase leve, cuja purificao ocorre por um processo de lavagem, seguida de centrifugao e desumidificao, resultando no produto conhecido por biodiesel. Este deve obedecer s normas estabelecidas para o biodiesel como combustvel. O subproduto da reaco de transesterificao o glicerol, tambm designado por glicerina. O glicerol bruto obtido a partir da fase mais densa, submetido a um processo de destilao, eliminando-se os seus constituintes volteis e o lcool residual. A purificao do lcool realizada por destilao, obtendo-se o lcool desidratado, que pode ser reutilizado. A glicerina apresenta um elevado valor comercial, caso esteja na forma purificada, constituindo assim uma mais valia em termos ambientais e econmicos, ajudando a rentabilizar o processo da produo do biocombustvel (Parente, 2003). Existem diversas metodologias de produo de biodiesel, desde as mais comuns usando a via qumica alcalina e/ou cida, at s mais recentes usando biocatalizadores enzimticos ou condies supercrticas (Oliveira, 2004). Nas seces seguintes ser feita uma breve descrio das mesmas.

34

1.4.1 Transesterificao cida

A transesterificao cida, como o seu nome indica, utiliza cidos como catalisadores da reaco. Os catalisadores cidos mais usados so o cido sulfrico, o cido clordrico e cido trifluoroactico (Oliveira, 2004). O rendimento obtido nestes processos muito elevado (podendo alcanar os 99%), mas a reaco lenta, sendo necessrias temperaturas elevadas, por vezes at 100C, e mais de 3 horas para alcanar o referido rendimento (Felizardo, 2003). A grande vantagem deste tipo de transesterificao verifica-se quando a matria-prima apresenta uma elevada concentrao de cidos gordos livres, como acontece em muitos leos usados de fritura. A razo molar, geralmente empregue, de lcool:leo de 30:1, estando o limite de temperaturas entre os 55 e os 80oC. A fraco de catalisador na mistura, geralmente, est compreendida entre os 0,5 a 1 % (m/m) (Branco et al., 2007). Outro aspecto relevante que a catlise cida pode servir-se de leos crus, reagindo directamente com o lcool acidificado, em vez de leo refinado, como na catlise bsica, ou seja, permite que a extraco e transesterificao possam ocorrer no mesmo processo, desempenhando o lcool, dois papis: o de solvente extractor e de reagente da esterificao (Duarte et al., 2006).

1.4.2 Transesterificao alcalina

Como o prprio nome indica, este tipo de transesterificao utiliza bases como catalisadores, sendo usual a utilizao de hidrxido de sdio e hidrxido de potssio, usandose tambm carbonatos, como o de sdio e potssio (Oliveira, 2004; Felizardo, 2003). Tambm referido o uso de alcxidos como o metxido e o etxido de sdio, o propxido de sdio e o butxido de sdio, entre outros, sabendo-se que os mesmos resultam da dissoluo de bases em solues alcolicas, formando-se o referido alcxido e gua (Oliveira, 2004). Os alcxidos, nomeadamente o metxido de sdio, so os catalisadores mais activos, conduzindo a rendimentos bastante elevados num reduzido tempo de reaco, pouco mais de 30 minutos. No entanto, estes catalisadores so desactivados pela gua, pelo que necessitam que os teores de gua no lcool e no leo sejam muito baixos. A utilizao dos hidrxidos de sdio e potssio como catalisadores uma boa alternativa aos alcxidos, apesar de serem menos activos e terem o inconveniente de produzirem gua na sua reaco com o lcool, o que leva ocorrncia da hidrlise de alguns steres, com posterior saponificao dos cidos gordos livres, com as inerentes complicaes j anteriormente explicadas. Todavia, possvel alcanar as mesmas converses, necessitando-se apenas de 35

aumentar a quantidade de catalisador utilizado, alm de ter de se utilizar matria prima o mais anidra possvel (Felizardo, 2003). Os catalisadores carbonatados permitem obter rendimentos significativos, embora inferiores catalise bsica usando hidrxidos, apresentando, como principal vantagem, a reduo da formao de sabo, pois a reaco do lcool com o catalisador d origem a um bicarbonato em vez de gua, o qual no hidrolisa os steres. No entanto, a utilizao deste tipo de catalisador apresenta ainda baixas condies de reprodutibilidade (Felizardo, 2003). A transesterificao alcalina, usando hidrxidos ou alcoxidos, aquela que mais usualmente utilizada na produo de biodiesel, uma vez que , aproximadamente, 4000 vezes mais rpida do que a cida, usando a mesma quantidade de catalisador (Fukuda et al., 2001). A esta propriedade soma-se o facto de a catlise alcalina geralmente utilizar uma razo molar lcool:leo de 6:1, enquanto que para uma catlise cida, a razo pode alcanar os 30:1 (Oliveira, 2004). Todavia, por vezes a transesterificao cida, embora mais lenta, mais vantajosa quando os leos possuem elevados teores de cidos gordos e gua. Quando tal acontece, por vezes, faz-se uma catlise mista, na qual a catlise se inicia cida, ocorrendo a esterificao dos cidos gordos livres, levando sua diminuio, podendo ento seguir-se uma catlise alcalina, aumentando o rendimento em steres (Fukuda et al., 2001). Considera-se que o valor mximo aceitvel de cidos gordos livres para uma catlise estritamente bsica de 3% m/m. Com percentagens mais elevadas iriam ocorrer muitas reaces de saponificao, diminuindo a eficincia da converso. De todos estes catalisadores alcalinos, aquele que mais usualmente utilizado o hidrxido de sdio, somando-se s suas vantagens tcnicas/logsticas o seu reduzido preo enquanto catalisador. Geralmente, as bases utilizadas, sobretudo o hidrxido de sdio, so empregues numa razo compreendida entre os 0,5 a 1% (m/m) em relao massa de leo. Em relao temperatura, as melhores condies para converso situam-se entre os 55C e os 70C (Branco et al., 2007). Os principais inconvenientes centram-se no facto de a reaco ser fortemente endoenergtica, aliada grande interferncia/sensibilidade com a gua e cidos gordos presentes, que promove reaces de saponificao, alm disso pode ocorrer que o catalisador alcalino possa ficar no meio sendo necessrio a sua eliminao, implicando, igualmente, um tratamento posterior dos efluentes alcalinos.

36

1.4.3 Transesterificao usando condies supercrticas

Atravs da catlise sob condies supercrticas possvel obter steres idnticos aos de uma catlise alcalina, com uma taxa de converso maior, praticamente na ordem dos 100%, e num perodo de tempo muito mais curto, rondando os 4 minutos (Branco et al., 2007). Neste processo, a matria-prima reage com o lcool a alta presso (na ordem dos 45 MPa) e temperatura (na ordem dos 350oC), fazendo com que a mistura vaporize, proporcionando homogeneidade, fazendo com que hipoteticamente o solvente supercrtico assuma uma natureza hidroflica, com baixa constante dielctrica. Deste modo, os triglicerdeos apolares podem ser bem solvatados pelo fludo supercrtico, formando um sistema unifsico lcool/leo. A no utilizao de catalisadores qumicos torna mais fcil a separao dos produtos em relao catlise qumica, alm de ser aparentemente indiferente ao teor de gua e cidos gordos presentes. Porm, apresenta algumas desvantagens devido s altas temperaturas e presses requeridas, alm de grandes quantidades de metanol , rondando uma razo molar lcool:leo de 42:1. Deste modo, actualmente, ainda apenas uma tecnologia em estudo, no havendo grande competitividade econmica (Branco et al., 2007).

1.4.4 Transesterificao usando catalisadores heterogneos

Considera-se que um catalisador heterogneo ou de contacto se o mesmo se apresentar numa fase diferente da dos reagentes (Ramos et al., 2005). Deste modo, pelo menos teoricamente, permite uma mais fcil separao do catalisador aps o final da reaco
(http://www.ciagri.usp.br/~simpol/downloads/10%20ULF%20UNICAMP.pdf).

A utilizao da catlise

homognea recorrendo aos hidrxidos tem sido a mais amplamente utilizada, contudo apresenta o problema da difcil separao do catalisador no final da reaco e acarreta, ainda, alguns problemas de saponificao. Devido a este facto, os catalisadores heterogneos tm vindo a ser estudados como uma alternativa para diminuir os custos, simplificar e reduzir impactos no processo de separao, pois podem ser mantidos num leito fixo ou quando misturados com os reagentes podem ser separados dos produtos finais atravs de processos simples, como a filtrao (http://www.ciagri.usp.br/~simpol/downloads/10%20ULF%20UNICAMP.pdf). Contudo, o uso destes catalisadores, na sua maioria metlicos, tais como catalisadores de xido de cobalto, a ttulo de exemplo, ainda se encontram em fase laboratorial e necessitam, portanto de serem analisados nas suas vrias vertentes, quer em termos de eficincia, quer de custo e impactes ambientais (Rocha et al., 2006). Destaca-se, todavia, que a principal desvantagem deste tipo de catalisadores, em relao catlise alcalina, que requerem,

37

partida,

um

maior

tempo

de

reaco

temperaturas

mais

elevadas

(http://www.ciagri.usp.br/~simpol/downloads/10%20ULF%20UNICAMP.pdf).

1.4.5 Transesterificao enzimtica

Tal como o nome indica a transesterificao enzimtica utiliza enzimas como catalisadores da reaco. Enzimas so compostos orgnicos, geralmente de natureza proteica, que devido a serem sintetizados por seres vivos, so altamente versteis na catlise de vrios tipos de reaces, que ocorrem, normalmente, sob condies suaves, temperatura ambiente e a pH prximo da neutralidade. Cada enzima catalisa, geralmente, uma nica reaco qumica ou um conjunto muito restrito de reaces intimamente relacionadas, pelo que a formao de produtos secundrios residuais raramente ocorre. A especificidade para com o substrato muita elevada, sendo por vezes absoluta (Campos, 1998). Todavia a actividade enzimtica , geralmente, muito sensvel s condies reaccionais, podendo conduzir sua inactivao. Factores como a temperatura e o pH so extremamente relevantes, havendo deste modo valores ptimos e limites de tolerncia, que influenciam a sua actividade. Alteraes significativas de temperatura e/ou pH podem conduzir inactivao por alterao da conformao enzimtica (desnaturao), que como protena sensvel a estes factores (Campos, 1998). Tal como ocorre para a maioria das reaces qumicas, a velocidade das reaces com enzimas aumenta, geralmente, com a temperatura, dentro de um certo limite na qual elas so estveis e mantm a sua actividade. A termodesnaturao dependente da quantidade de gua associada com a protena (Turner et al., 2002). A concentrao de substrato igualmente um factor importante a ter em conta nas reaces enzimticas, pois com um aumento dessa mesma concentrao a velocidade reaccional aumenta at se atingir um mximo devido saturao, mantendo-se, a partir de ento, estvel (Campos, 1998). Como catalisadores, as enzimas tm vrias aces, pelo que de acordo com a Unio Internacional de Bioqumica e Biologia Molecular (IUBMB), estabeleceu-se uma nomenclatura na qual as enzimas so divididas em 6 classes (oxirredutases, tranferases, liases, isomerases, ligases e hidrolases) e estas em vrias subclasses. Embora existam vrias classes de enzimas, face natureza deste trabalho, um grupo enzimtico dentro das hidrolases merece uma especial ateno, as lipases, que so enzimas hidrolticas responsveis pela hidrlise dos grupos steres (Neto, 2002). Alm da hidrlise, as lipases podem tambm exercer actividade cataltica de interesterificao, esterificao, transesterificao, acidlise e glicerlise (Neto, 2002). Estas enzimas apresentam uma elevada especificidade pelo substrato, que supera, inclusivamente, a especificidade de todas as outras enzimas conhecidas (Duarte et al., 2006). 38

Tm tido uma ampla utilizao no sector alimentar, curtumes, cosmtica e, actualmente, face s suas propriedades, tm sido estudadas com interesse na transesterificao de leos, para produo de biodiesel, no havendo contudo, ainda, projectos implementados de carcter comercial. Contudo vrios estudos tm vindo a ser realizados, referentes optimizao das condies de reaco (solvente, temperatura, pH, enzima, etc.) (Duarte et al., 2006). Existe uma vasta panplia de lipases que podem ser utilizadas. A esmagadora maioria de origem microbiolgica (na sua maioria fungos). Entre as estirpes mais usadas citam-se a Mucor miehei, Candida antartica, Pseudomonas cepacia, Thermomyces lanuginosus, Geotrichum sp, Rhyzopus sp, Aspergillus sp, entre outros (Branco, 2007;

http://www.biotecnologia.com.br/revista/bio32/biodiesel_32.asp).

As enzimas podem ser utilizadas quer na forma aquosa (solvel) ou no aquosa (imobilizada), podendo-se adicionar opcionalmente solventes na reaco de transesterificao. A funo dos solventes emulsionar as gorduras, transformando o sistema de duas fases num de fase nica, o que facilita a aco cataltica (Oliveira, 2004). Em geral, as lipases so activas numa ampla faixa de valores de pH, apresentando, contudo, os melhores valores na gama de pH 5 a 9, com um mximo, frequentemente, situado entre os 6 e 8. Em relao s temperaturas, estas tambm tm uma significativa amplitude, mas a maioria apresenta como melhores valores, temperaturas entre os 30 e os 40C (Duarte, 2002). A aco enzimtica promove a hidrlise dos triglicridos em glicridos parciais e cidos gordos livres, ocorrendo depois a formao dos steres com o lcool e os cidos gordos livres.
(http://www.biotecnologia.com.br/revista/bio32/biodiesel_32.asp).

Deste modo, diferentemente da

catlise alcalina, os cidos gordos livres dos leos podem ser facilmente convertidos em steres na catlise enzimtica
(http://www.biotecnologia.com.br/revista/bio32/biodiesel_32.asp).

Apresenta ainda como vantagens, em relao transesterificao alcalina, o facto de decorrer a temperaturas mais brandas, na sua maioria entre os 30 e os 40C, no produzir produtos saponificados, a gua no interferir prejudicialmente no processo, apresentar um rendimento aceitvel, a recuperao de lcool ser fcil e no requerer lavagens do biodiesel. Por outro lado, apresenta como principais aspectos negativos o facto de requerer um elevado tempo de reaco, apresentar um rendimento inferior e o custo das enzimas ser elevado, s tornando vivel o processo se houver uma recuperao das mesmas, caso contrrio todo o processo fica comprometido (Duarte et al., 2006; Branco, 2007). Convm mencionar, todavia, que muitas vezes as enzimas apresentam uma elevada instabilidade em soluo, o que representa um obstculo recuperao do biocatalisador aps a sua utilizao (Duarte, 2006). Para permitir uma mais fcil recuperao e estabilidade do catalisador enzimtico necessrio imobiliz-lo, porque s deste modo possvel a sua recuperao eficaz e a sua reutilizao. A imobilizao 39

de enzimas consiste no confinamento das mesmas num determinado material, existindo vrios mtodos de imobilizao, entre os quais o mais usual a vertente da imobilizao fsica, na qual a lipase fica retida ou microencapsulada no interior de um gel insolvel, de fibras porosas ou materiais adsorventes (Neto, 2002). O suporte fsico de imobilizao aumenta a estabilidade da enzima e facilita a sua utilizao por longos perodos sem renovao do biocatalisador. Outra tcnica consiste na imobilizao no da enzima em si (extracelular), mas sim nas clulas suas produtoras, geralmente usando como suporte partculas porosas, as BSP (Biomass Support Particles). A escolha do suporte dependente de diversas caractersticas que so importantes nas suas aplicaes industriais. Entre esses factores est a resistncia microbiolgica, estabilidade trmica, durabilidade qumica e funcional, carcter

hidrofbico/hidroflico, facilidade de regenerao, capacidade de carga e o baixo custo. Geralmente so usadas como matrizes de imobilizao vidros porosos e seus derivados, matrizes de diatomceas, carvo activado, celulose, silicatos, polietileno e derivados, agarose, alginato, agar, etc (Neto, 2002).

1.5 Caractersticas gerais do biodiesel

O biodiesel um (bio)combustvel e, como tal, tem a propriedade de, ao reagir com um outro elemento, o oxidante (o oxignio), desencadear uma reaco exotrmica. Quimicamente uma mistura de vrios steres de cidos gordos, cuja proporo depende do leo que lhe serviu como matria-prima. Apesar de haver algumas diferenas a nvel qualitativo e quantitativo na amlgama de steres presentes nos vrios tipos de biodiesel, que, como foi referido, varia em funo do tipo de leo (tabela 2), as caractersticas fsicas e qumicas do biodiesel so, geralmente, bastante similares entre si, independentemente da natureza da matria prima e do agente de transesterificao. H, contudo, algumas excepes como, por exemplo, o biodiesel oriundo do leo de mamona, no Brasil, que foge um pouco dessa regra no que diz respeito viscosidade (Parente, 2003). Em seguida encontra-se a tabela 13, que ilustra algumas das principais propriedades de alguns steres metlicos de leos vegetais, resultantes de transesterificao alcalina. Tabela 13 - Propriedades de alguns steres metlicos de leos vegetais (Joyce et al., 2002;
http://www.biotecnologia.com.br/revista/bio32/biodiesel_32.asp;http://www.acsoja.org.ar/mercosoja2006/Conte nidos/Foros/usosind_03.pdf). Propriedade Densidade a 15 C (g/l) Viscosidade a 40 C (mm2/s) Diesel FAME de Palma FAME de Colza FAME de Girassol FAME de Soja FAME de Linhaa

825 2,31

874 4,4

882 4,2

885 4

884 (20C) 4,08 (37,8C)

891 3,7

40

Tabela 13 (continuao)
Propriedade Poder calorfico (MJ/l) ndice de cetano Ponto de colmatao do filtro frio (Vero) ( C) ndice de iodo C (%) H (%) O (%) S (%) Diesel ster metlico de Palma ster metlico de Colza ster metlico de Girassol ster metlico de Soja ster metlico de Linhaa

35,5 >48 5 86,6 13,4 0,17

32,4 59-70 52 76,3 12,4 11,3 -

32,8 51-59,7 -8 114 77,8 12,3 9,9 -

32,8 61,2 -4 129 77,2 11,9 10,9 -

33,5 45 a 56 131 77,2 11,9 10,9 -

33 52,5 183 77,5 11,6 10,6 -

Como combustvel, o biodiesel destina-se a ser queimado em motores diesel e como tal dever ter certas caractersticas e especificaes (que constam no EN 14214), pois caso contrrio poder comprometer o bom funcionamento do motor. Os problemas mais comuns que podem ocorrer neste tipo de motores, relativamente com a utilizao de biodiesel, encontram-se na tabela 14. Os maiores problemas que surgem da utilizao intensiva e continuada de biodiesel nestes motores, quando o biodiesel no de qualidade suficiente, so derivados dos cidos orgnicos, gua, perxidos e produtos de polimerizao, muitas vezes formados pela oxidao, sendo responsveis pelo ataque de peas do motor, reduzindo o seu tempo de vida (Felizardo, 2003). Deste modo, a qualidade do biodiesel fundamental, definindo o modo de funcionamento e o tempo de vida de um motor, sendo imprescindvel assegurar um produto de boa qualidade. Tabela 14 - Principais falhas dos motores a diesel, com uso de biodiesel de baixa qualidade (Felizardo, 2003).
Caractersticas do combustvel Metil steres de c. gordos Metanol livre Catalisador (alcalino) gua dissolvida no combustvel gua livre em mistura Efeito Falha

Causa corroso e rupturas dos Fuga de combustvel elastmeros Corri alumnio e zinco; baixa o corroso ponto de inflamao Compostos de Na e K; partculas Entupimento dos injectores slidas Formao de c. gordos Entupimento dos filtros Corroso e formao de depsitos Entupimento dos filtros e coquefao nos injectores Corroso; entupimento dos filtros e formao de depsitos

Corroso; permite a existncia de bactrias; aumenta a condutividade elctrica Corri metais no ferrosos; Glicerina livre, mono, di e ensopa os filtros de celulose; triglicridos sedimentao em parte mveis Promove a corroso do Zn; formao de sais de c. gordos e cidos gordos livres de outros compostos orgnicos

41

Tabela 14 (continuao)
Caractersticas do combustvel Alta viscosidade Impurezas slidas cidos corrosivos (frmico e actico) Produtos de polimerizao Efeito Falha

Gera excessivo calor, localmente Falhas em bombas e baixa nas bombas de distribuio; atomizao do combustvel maior tenso entre componentes Problemas de lubricidade Reduzido tempo de servio Produtos de envelhecimento Corri todas as partes metlicas Formao de depsitos Corroso Entupimento de filtros, formao de depsitos

Na Europa, os padres tcnicos de qualidade para o biodiesel esto estabelecidos pelas Normas EN 14214, enquanto que os Estados Unidos se regem pelas Normas ASTM D-6751 (Gomes, 2006). Existem igualmente normas de cariz tcnico que regulamentam as metodologias adequadas para determinao qualitativa e quantitativa das vrias propriedades do biodiesel, normas essas que foram utilizadas e seguidas na realizao dos ensaios experimentais neste trabalho (ver seco 2.2 - Metodologias de caracterizao de amostras de leos e biodiesel). Assim sendo, um biodiesel, para ser aceite e comercializado no espao da UE, dever cumprir todas as especificaes impostas pela Norma 14214, que pode ser consultada na seco dos anexos. Para alm do biodiesel ser um combustvel para transporte, usado puro ou em mistura com o diesel mineral, pode igualmente ser usado como combustvel para aquecimento (Zhang et al., 2003). Convm mencionar que o biodiesel, quando empregue de forma pura, sem mistura com diesel, designado pela sigla B100, pelo que consoante a percentagem com que usado e misturado no diesel toma a designao BX, em que X corresponde percentagem de biodiesel na mistura. Actualmente, a Galp comercializa uma mistura do tipo B3.

1.6 Vantagens e desvantagens decorrentes do uso do biodiesel

O biodiesel, como qualquer outro produto, apresenta aspectos positivos e negativos. Contudo, considera-se que as vantagens decorrentes do seu uso so significativamente superiores e como tal apresenta-se como um combustvel de futuro e (mais) amigo do ambiente. Trata-se de um combustvel renovvel e as suas vantagens podem dividir-se, basicamente, em quatro vertentes: a vertente ambiental, a tcnica, a social e econmico-poltica. Sinteticamente, em relao vertente ambiental, permite a reduo da maioria dos poluentes emitidos, excepto os NOX, comparativamente com o diesel mineral, alm de no ser txico e ser biodegradvel e renovvel. A nvel tcnico, o biodiesel tem uma combusto mais completa que o diesel e apresenta uma maior lubricidade, o que favorece o funcionamento do motor. 42

Acresce-se o facto de o biodiesel apresentar um maior ponto de inflamao, o que diminui o risco de exploso associado ao transporte e armazenamento do combustvel (Oliveira, 2004). A nvel social, permite a criao de mais emprego nos sectores de investigao, tcnico/produo, agrcola e logstico associados, gerando igualmente mais riqueza e maior dinamizao e descentralizao de plos de produo e desenvolvimento. A nvel poltico, permite uma maior independncia energtica do exterior, estando igualmente associado s vantagens econmicas da decorrentes, uma vez que permite uma maior manuteno/reteno de receitas, diminuindo ainda encargos ambientais decorrentes da eliminao/tratamento de resduos e das emisses poluentes. Todavia, h aspectos menos favorveis que so apontados ao biodiesel. necessrio referir que consoante se trate de um metil-ster ou etil-ster, o balano de emisses diferente, porque se pode considerar o etil-ster, na sua combusto, como sendo de emisso zero de CO2, por recorrer a um lcool biolgico, ao contrrio do biodiesel que utiliza metanol, um lcool que deriva do petrleo. Contudo, salienta-se que mesmo assim, o biodiesel

independentemente da matria-prima e do agente de transesterificao menos poluente. Em termos de emisses, o biodiesel apresenta um valor superior, relativamente ao diesel, em relao aos xidos azotados, cetonas e aldedos (Felizardo, 2004). Outro aspecto negativo apontado que pode, de alguma forma, promover a desmatao, para a criao de novos campos de cultivo de oleaginosas, e pode criar um dfice de culturas alimentares ao fazer um desvio de matria para o sector energtico, conduzindo igualmente a uma subida dos preos no sector alimentar. Nesta vertente, o uso de leos alimentares residuais, embora com um peso simblico, pode e deve ser tomado em conta. Um outro problema associado ao biodiesel prende-se com a qualidade do mesmo, pois caso no esteja dentro das normas de qualidade poder, inclusivamente, prejudicar o motor, componentes plsticos e a pintura, devido, nomeadamente, aco dos cidos gordos livres. Acresce-se o facto que devido ao seu ligeiro menor poder calorfico, em relao ao diesel convencional, o consumo maior, sensivelmente 12% superior, havendo igualmente uma diminuio da potncia do motor, na ordem dos 4 % (Oliveira, 2004). Outro aspecto que condiciona o profuso uso do biodiesel o facto de o diesel se apresentar ainda a preos geralmente mais competitivos. Contudo, este aspecto ir esbater-se ao longo do tempo, sobretudo devido constante subida de preo do crude, actualmente ultrapassando a barreira dos 100 dlares (tendo j alcanado os 140 dlares), e a diminuio dos preos associados produo dos biocombustveis. Em baixo, figura uma pequena tabela (tabela 15) onde se ilustram as principais diferenas registadas ao nvel de emisses, entre as vrias misturas de biodiesel, comparativamente ao

43

diesel mineral, e uma outra (tabela 16) onde apresentado uma comparao entre o diesel normal, o leo (virgem) de colza e o respectivo ster metlico (biodiesel de colza). Tabela 15 - Emisses de poluentes das misturas de biodiesel (http://www.ivig.coppe.ufrj.br/doc/biodiesel.pdf).
Efeito do uso de Biodiesel reduo (R) versus aumento (A) (relativamente ao diesel) R R R A B100

com diesel normal

B20 B10 B5

Poluente Gases de efeito de estufa Enxofre Material particulado NOx Tabela 16 -

Percentual (%) 78 98 50 13 15 19 10 2,5 7,5 9,5 5 1,3 3,75 4,95 2,5 0,65

Comportamento

do

leo

de

colza

respectivo

ster

metlico

(http://www.netresiduos.com/cir/index_a.htm).

Resultados ponderados Potncia (kW) Rendimento efectivo (%) Monxido de carbono (g/kW) Hidrocarbonetos inqueimados xidos de Azoto (g/(kW.h)) Partculas (ndice de Bosch)

diesel 18,66 32,5 7,99 1,62 4,59 2,1

leo de Colza 18,37 30,3 12,31 4,35 4,89 1,5

ster metlico de Colza 18,64 31,7 2,73 1,43 5,31 0,9

44

Captulo 2

Materiais e Mtodos

45

2.1 Materiais 2.1.1 Matrias- primas

As matrias-primas utilizadas para a sntese de biodiesel foram leos vegetais virgens, nomeadamente, de colza, de soja e de girassol, e leos alimentares usados (provenientes de frituras). Foram utilizados dois lotes de leo de colza, provenientes de dois fornecedores distintos e em datas distintas. O primeiro lote, que foi utilizado nos primeiros ensaios, comeou a ser usado em Janeiro de 2006, e, aps esse leo ter sido todo utilizado, fez-se uso, nos ltimos ensaios (j em 2007), de um outro lote de leo de colza. O leo de soja utilizado era da marca alimentar Valouro, sendo 100 % de soja (refinado) e com a indicao de que provinha de OGM. O leo de girassol utilizado era refinado, da marca alimentar AAA. Os leos alimentares usados tiveram diferente provenincia. Nos dois primeiros ensaios utilizou-se uma mistura de vrios leos usados provenientes de vrios lotes. O terceiro leo alimentar usado foi proveniente da Cantina do INETI e datava de Agosto de 2007.

2.1.2 Reagentes e catalisadores

Na caracterizao das amostras (recorrendo s metodologias descritas na seco 2.2) e na sntese de biodiesel por trasesterificao alcalina, foram utilizados os seguintes reagentes: - n-heptano (pureza 99 %, Merck); - xido de clcio em p (pureza entre 96 a 100 %); - Iso-octano; - Metanol (pureza 99,8 %); - Sulfato de sdio anidro comercial, em p; - Hidrxido de potssio (pureza mnima de 86 %); - ter etlico (pureza 99,5 %); - Etanol Absoluto (pureza 99,5 %); - Fenolftalena; - cido Clordrico; - Hidrxido de sdio em pellets (pureza mnima 98 %); - Soluo metanlica de trifluoreto de boro (20 %); - Cloreto de sdio (pureza 99,97 %); - cido actico (pureza mnima de 99,8%); - Clorofrmio (pureza 98,5 %); 46

- Iodeto de potssio (pureza mnima de 99,5 %); - Tiossulfato de sdio aquoso (concentrao 0,1 mol); - Amido extra puro; - Metil heptadecanoato (pureza 99,7 %); - Soluo aquosa de Wijs. Na determinao concentrao/quantidade da enzima presente, quer na forma imobilizada, quer na forma solvel, para posterior utilizao na sntese de biodiesel recorrendo transesterificao enzimtica, utilizaram-se os seguintes reagentes: - Soluo de hidrxido de sdio 1 N - Carbonato de sdio anidro (pureza 99,8 %); - Tartarato duplo de sdio e potssio; - Sulfato de cobre anidro (pureza mnima 98 %); - Reagente de Folin-Ciocalteau. Em termos de enzimas (catalisadores) testadas e utilizadas nos vrios ensaios de transesterificao enzimtica, recorreu-se utilizao das seguintes lipases: - Lipozyme TL IM (lipase imobilizada); - Lipozyme RM IM (lipase imobilizada); - Novozym 435 (lipase imobilizada); - Lipozyme TL100L (enzima solvel); As amostras das enzimas foram gentilmente cedidas pela Empresa Novozymes (ficha tcnica de cada enzima, em anexo).

2.1.3 Equipamentos
Nos vrios ensaios utilizaram-se vrios materiais e equipamentos, tanto para a caracterizao dos vrios parmetros dos leos, do biodiesel e do teor enzimtico, bem como na sntese do prprio biodiesel. Segue-se uma listagem do material utilizado: - Rotavapor R110 (com controlo de rotao e temperatura), da marca Sotel; - Rotavapor R200 (com controlo de presso, rotao, tempo e temperatura), da marca Bchi; - Aparelho para determinao da estabilidade oxidao, Rancimat modelo 743, da marca Metrohm; - Centrfuga, Eppendorf Centrifuge 5415 D; - Centrfuga, marca Precision; - Centrfuga (com controlo de rotao e temperatura), modelo Avanti J-25I, marca Beckman; - Aparelho de determinao de pH, marca Inolab (WTW); 47

- Espectrofotmetro, modelo U-2000 Hitachi; - Placa de agitao marca Velp Scientific; - Cromatgrafo gasoso, modelo Varian CP-3800; - Aparelho Karl Fisher, para determinao da quantidade de gua, modelo KF Coulometer, marca Metrohm; - Balana de preciso (margem de erro: 0,1 mg), modelo Mettler Toledo; - Estufas, marca Memmert; - Banho termostatizado, marca Selecta; - Incubadora com agitao (com controlo de rotao e temperatura), marca Brunswick scientific; - Incubadora com agitao (com controlo de rotao e temperatura), marca Lab Line Instruments Orbit; - Placa de aquecimento, marca Heidolph; - Reactor para produo de biodiesel, marca Biolafitte BL06/1, com 5 L de capacidade; - Reactor para produo de biodiesel, marca Setric Genie Industrial, com 2 L de capacidade; - Montagem para refluxo - Filtros GFC, de 0,8 e 0,2 micras (m); - Densmetros 0,900-0,950 g/cm3 e abaixo destes valores; - Viscosmetros de 100 e 200 mm2/s; - Material corrente de laboratrio.

2.2 Metodologias de caracterizao de amostras de leos e biodiesel

Neste captulo so descritos sumariamente os mtodos utilizados na realizao dos vrios ensaios experimentais de caracterizao de amostras de leos e biodiesel.

2.2.1 Preparao das amostras

Foi necessrio proceder-se a uma secagem prvia dos leos para que depois se pudesse fazer alguns ensaios de caracterizao, nomeadamente a determinao do ndice de iodo e a preparao dos steres metlicos de cidos gordos a partir dos leos, para posterior anlise por cromatografia. Este tratamento de secagem foi realizado segundo a Norma Internacional ISO 661:2003, usando-se para tal o agente desumidificante sulfato de sdio anidro. O procedimento baseia-se em: 1. Homogeneizar a amostra a estudar; 2. Por cada 10 gramas de amostra (leo/gordura) adicionar entre 1 a 2 g de sulfato de sdio anidro (Na2SO4); 48

3. Levar a amostra estufa, a 50C (no mximo), durante 1hora; 4. Aps este processo, efectuar a filtrao da amostra a fim de retirar o agente desumidificante (sulfato sdio anidro). Efectuar a filtrao, usando papel de filtro (simples), dentro da estufa, a 50C; Aps este tratamento as amostras esto aptas a serem caracterizadas. A nvel industrial, geralmente, no se faz este tratamento preliminar de secagem para o biodiesel, pois um biodiesel de qualidade ao sair da unidade de produo j sofreu um processo sequencial de desumidificao pelo que, segundo a norma europeia EN 14214, dever apresentar valores de gua reduzidos (abaixo dos 500 ppm). Contudo, houve vrias amostras de metil steres, neste trabalho, que foram sujeitas a este procedimento de secagem.

2.2.2 Determinao da quantidade total de matria em suspenso (contaminao total)

Um dos parmetros a ser determinado, quer nos leos, quer no biodiesel, a quantidade de matria em suspenso. Este parmetro foi analisado segundo a norma europeia NF EN 12662, todavia a metodologia foi adaptada pelo DER/INETI, para esse fim. Em conformidade com a norma dever-se-: 1. Pesar cerca de 200 g, caso a amostra a analisar seja de biodiesel, ou cerca de 50g se a amostra for de leo (devendo a amostra j estar preparada de acordo com a metodologia descrita no tpico 2.2.1); 2. Colocar um filtro de 0,8 m, para anlises de biodiesel, ou GFC, para anlise de leos, numa estufa a 110C, durante 45 minutos; 3. Aps a ida estufa, colocar o filtro no excicador, durante 45minutos, ao fim dos quais se efectua a pesagem na balana de preciso; 4. Ao mesmo tempo que o filtro est no excicador, colocar a amostra a analisar numa estufa a 40C, durante 30 minutos; 5. Efectuar a filtrao sob vcuo, tendo o cuidado de humedecer previamente o filtro com heptano. O heptano fora antecipadamente filtrado, usando um filtro de 0,2 m; 6. Por fim, lavar o erlenmeyer que continha a amostra, com heptano, a fim de arrastar todas as partculas, filtrando igualmente; 7. No fim da filtrao, efectuar a secagem do filtro a 110C, durante 45 minutos, seguido de mais 45 minutos no excicador, ao fim dos quais se procede determinao do peso do filtro (com as impurezas). A determinao da quantidade de impurezas presentes na amostra efectua-se subtraindo ao peso do filtro ps-filtrao o peso do filtro antes da filtrao. 49

Quantidade de impurezas (mg) =

massa do filtro aps a filtrao (mg) - massa do filtro limpo (mg)

Percentagem de impureza existente = quantidade de impurezas (kg) x 100 / massa da amostra (kg) Quantidade total de matria em suspenso(mg/kg)= massa de impurezas(mg)/massa da amostra(kg) Segundo a EN 14214, a quantidade total de matria em suspenso num biodiesel designada de contaminao total, sendo expressa em mg/kg, devendo este valor ser inferior a 24 mg/kg.

2.2.3 Avaliao da estabilidade oxidao

A estabilidade oxidao foi avaliada tanto para os leos como para o biodiesel, sendo um parmetro bastante importante uma vez que traduz a estabilidade qumica dos leos e do biodiesel durante o seu contacto com o ar. A estabilidade oxidao foi determinada num aparelho Rancimat, avaliando o perodo de induo em ensaio, controlado, de oxidao acelerada a 110C, segundo a norma europeia NF EN 14112. O perodo de induo corresponde ao intervalo de tempo, em horas, que decorre entre o incio da medio e o momento em que se comeam a formar rapidamente produtos de oxidao. Um biodiesel de qualidade dever apresentar, segundo a norma EN 14214, uma estabilidade mnima de oxidao de 6 horas.

2.2.4 Determinao do ndice de acidez

O ndice de acidez um dos parmetros a ter em conta na anlise de um biodiesel, sendo que a metodologia seguida enquadra-se na que est regulamentada na norma portuguesa NP-903, para gorduras e leos alimentares. Foram realizados ensaios para determinao do ndice de acidez tanto dos leos como no biodiesel deles procedente. Este mtodo consiste na neutralizao dos cidos gordos livres contidos numa amostra e determina-se atravs da massa de hidrxido de potssio, expressa em miligramas, necessria para neutralizar os cidos gordos livres contidos numa grama da amostra, podendo esta ser de leo, gordura ou biodiesel. Segundo a norma EN 14214, o ndice de acidez de um biodiesel no poder ultrapassar os 0,5 mg KOH/g. Em conformidade com a metodologia, dever proceder-se da seguinte forma: Preparao dos reagentes: Mistura dissolvente- misturar igual volume de etanol absoluto e de ter etlico (varia a quantidade conforme o nmero de amostras a tratar) e depois neutralizar a soluo com uma 50

soluo de hidrxido de potssio (KOH) [0,1N], usando a soluo de fenolfatena, como indicador. Soluo aquosa de hidrxido de potssio [0,1N]- dissolver 0,281g de KOH em gua destilada, num volume de 50 ml. Estes valores podero ser alterados conforme os volumes necessrios. necessrio padronizar esta soluo com cido clordrico 0,1N, de modo a confirmar a normalidade da soluo de KOH. Mtodo: 1. Pesar, para um erlenmeyer, 20g de uma amostra de biodiesel ou de leo refinado, ou 10g caso o leo seja usado e, provavelmente, possua uma elevada acidez; 2. Adicionar 100 ml da mistura dissolvente e 3 gotas de indicador; 3. Proceder titulao com a soluo de KOH [0,1N], at surgir uma cor rosa/vermelha persistente; ndice de acidez (IA): Sendo: V volume do titulante (ml); m massa da amostra (g); N normalidade da soluo titulante; 56,11- corresponde massa molar do hidrxido de potssio (KOH)
*

IA (mgKOH/g) = (V KOH x N KOH x 56,11) / m

- corresponde massa molar do cido olico (282 g/mol) (V x N x 282*) / (10 x m)

Percentagem de cidos gordos livres (cido olico) =

2.2.5 Determinao do ndice de iodo

A determinao do ndice de iodo foi efectuada tanto em amostras de leos como de biodiesel, seguindo a metodologia regulamentada na norma europeia NF EN 14111. Esta metodologia consiste na reaco de um leo ou biodiesel com uma soluo de um halogneo. O halogneo, em excesso, vai converter posteriormente uma soluo iodada em iodo livre, atravs de uma reaco de oxi-reduo. A quantidade de iodo libertada determinada por titulao com uma soluo de tiossulfato de sdio. A quantidade de iodo que reagiu com a amostra determinada por diferena em relao a um ensaio branco (ensaio sem a amostra), e permite determinar o grau de insaturao do leo ou biodiesel.Entende-se por ndice de iodo a quantidade do halogneo, expressa em gramas de iodo, que reage com 100 g de amostra. Segundo a EN 14214 o ndice mximo de iodo num biodiesel no poder ultrapassar os 120. Em conformidade com a norma de determinao deste ndice, dever-se- proceder da seguinte forma: 51

Preparao dos reagentes: Soluo de iodeto de potssio adicionar 10g de KI a 100 ml de gua destilada (100g/l). Indicador de cozimento de amido adicionar 0,5g de amido a 30ml de gua fria, e depois a 100 ml de gua quente j a ferver. Depois disso a soluo deve ainda ferver durante mais 3 minutos. Soluo de tiossulfato de sdio [0,1N] Soluo Titrisol (soluo comercial para 0,1 mol), diluindo num litro de gua destilada. Solvente igual quantidade de ciclohexano e de cido actico glacial, dependendo o volume a preparar do nmero de amostras a analisar (cada amostra requer 20ml). Preparar na hotte. Mtodo: As amostras devero ter sido previamente secas (ver seco 2.2.1). 1. Pesar amostras de 0,13 a 0,15g e transferir para erlenmeyers de 500ml, com o auxlio de 20ml de solvente (processo efectuado na hotte); 2. Adicionar, de seguida, 25ml de reagente de Wijs (tambm na hotte); 3. Tapar o frasco erlenmeyer, agitar e colocar num local escuro durante 1 hora; 4. Aps uma hora de repouso, adicionar 20 ml de soluo de KI e 150 ml de gua destilada; 5. Titular com a soluo de tiossulfato de sdio, at a soluo adquirir uma colorao amarela clara. Adicionar ento 0,5 ml de indicador de cozimento de amido e continuar a titulao at desaparecer a colorao azul escura, sob agitao forte. O final da titulao corresponde a uma soluo de uma cor branca. 6. Efectuar dois ensaios por amostra e um ensaio em branco. ndice de iodo: Sendo: Vb volume do titulante gasto no branco (ml); Va volume do titulante gasto com a amostra (ml); N normalidade da soluo titulante; m massa da amostra (g); ndice de Iodo (gI2/100g) = ((Vb-Va)x N x 12,69) / m

2.2.6 Determinao do ndice de perxido

O ndice de perxido permite avaliar o grau de oxidabilidade de um leo ou de um biodiesel, e a sua determinao seguiu a metodologia 965.33 descrita na Official Methods of Analysis of the AOAC.

52

Entende-se por ndice de perxido a quantidade de substncias oxidantes (perxidos) presentes na amostra, expressa em miliequivalentes (meq) de perxido por quilograma de amostra, capaz de oxidar uma soluo de iodeto de potssio. Em conformidade com a norma de determinao deste ndice, dever proceder-se da seguinte forma: Preparao dos reagentes: Soluo de saturada de iodeto de potssio- dissolver um excesso de KI em gua destilada fervida. A quantidade deve ser suficiente para que por cada ensaio se utilize 0,5 ml desta soluo. Indicador de cozimento de amido adicionar 0,5g de amido a 30ml de gua fria, adicionando depois esta soluo a 100 ml de gua quente j a ferver, devendo ferver durante mais 3 minutos. Soluo de tiossulfato de sdio [0,1N] Soluo Titrisol (soluo comercial para 0,1 mol) diluindo num litro de gua destilada. Dever-se- igualmente preparar uma soluo mais diluda, com [0,01N]. Para tal, efectuar uma diluio de 1:10, usando gua destilada fervida, mas fria. Soluo de cido actico glacial e clorofrmio- misturar 3 partes de cido actico com 2 partes de clorofrmio. Para cada amostra a analisar ser necessrio adicionar 20ml desta soluo. Preparar na hotte. Mtodo: 1. Pesar em triplicado, para erlenmyers de 250 ml, tomas de 5g ( 0,05) de leo ou biodiesel; 2. Adicionar 30 ml da soluo de cido actico glacial e clorofrmio, agitando de seguida, adicionando mais 0,5 ml da soluo saturada de KI. Agitar e deixar repousar durante 1 minuto; 3. Adicionar 30 ml de gua destilada e 0,5 ml de indicador; 4. Titular com tiossulfato de sdio [0,1N]. Caso o volume gasto seja inferior a 0,5 ml, dever-se- repetir a titulao, usando a soluo de [0,01N]; 5. O final da titulao corresponde ao ponto em que a soluo adquire uma colorao amarela clara; 6. Efectuar ainda um ensaio em branco, devendo o volume de titulante gasto ser inferior a 0,1 ml de Na2S2O3 [0,1N]. No caso do branco, o final da titulao corresponde ao ponto em que a soluo passa de uma colorao branca para transparente. ndice de perxido (meq perxido/kg) = ((Va-Vb) x N x 1000) / m) 53

Sendo: Vb volume do titulante gasto no ensaio do branco (ml); Va volume do titulante gasto com a amostra (ml); N normalidade do tiossulfato de sdio; 1000- factor de converso para kg; m massa da amostra (g)

2.2.7 Determinao do ndice de saponificao

Entende-se por ndice de saponificao, a massa de hidrxido de potssio, expressa em miligramas, que necessria para transformar em sabes (sais de potssio) os cidos gordos e triglicridos presentes em 1 grama de amostra, quer seja leo, gordura ou biodiesel. O ndice de saponificao permite determinar de forma expedita o peso molar da amostra. Esta particularidade especialmente relevante em relao aos leos, permitindo os clculos estequiomtricos necessrios para as reaces de transesterificao qumica. A determinao deste parmetro seguiu a metodologia 920.160, descrita na Official Methods of analysis of the AOAC. Em conformidade com a norma, dever-se- proceder da seguinte forma: Preparao dos reagentes: Soluo alcolica de hidrxido de potssio - juntar, num almofariz, 40 g de KOH e 45 g de xido de clcio (CaO), reduzindo a mistura a p. De 1 litro de etanol absoluto, adicionar 100 ml ao almofariz e transferir para um balo volumtrico (de 1 litro), lavando o almofariz com vrias pores de etanol, transferindo igualmente para o balo, acabando por perfazer at 1 litro. Agitar e inverter vrias vezes ao longo do dia. No dia seguinte dever-se- proceder filtrao. Soluo de cido clordrico [0,5 N] usar soluo padro de Titrisol. Mtodo: 1. Pesar em triplicado, para bales esmerilados de 250 ml, tomas de 5 g de leo ou biodiesel; 2. Adicionar 50 ml da soluo alcolica de KOH, agitando de seguida, um pouco; 3. Adicionar reguladores de ebulio e fazer uma destilao de refluxo durante 30 minutos. No final deixar arrefecer totalmente; 4. Titular com HCl [0,5 N], em presena do indicador de fenolftalena, devendo a soluo adquirir uma colorao amarelo lmpido. 5. Fazer igualmente uma titulao de um branco.

54

ndice de saponificao (IS):

IS (mg KOH/g) = ((Vb-Va) x N x 56,1*) / m

Peso molar mdio (leo) (PM): Sendo:

PM (g/mol) =(56000 x 3) / IS

Vb volume do titulante gasto no branco (ml); Va volume do titulante gasto com a amostra (ml); N normalidade da soluo titulante; m massa da amostra (g);
*

- massa molar do hidrxido de potssio (56,1 g/mol)

2.2.8 Determinao da quantidade de gua presente na amostra

Utilizou-se a metodologia de Karl-Fisher para determinar a quantidade de gua presente nas vrias amostras. Em concreto, utilizou-se o aparelho Karl Fisher, modelo 831 KF Coulometer, da Metrohm. As amostras de leos e de biodiesel foram todas analisadas neste aparelho, determinando-se a quantidade de gua presente em cada amostra, em valores de ppm. Segundo a EN 14214, um biodiesel dever apresentar como valor mximo aceitvel de gua 499 ppm.

2.2.9 Preparao de steres metlicos de cidos gordos para posterior anlise por cromatografia
As amostras de leo foram derivatizadas utilizando o mtodo do trifluoreto de boro. A derivatizao feita para que depois se possa avaliar, quer qualitativamente quer quantitativamente, a composio do leo em termos de cidos gordos, atravs de cromatografia. A metodologia seguida foi a da norma EN ISO 5509, na qual se procede a uma saponificao dos glicridos, com hidrxido de sdio em metanol, seguido da converso dos sabes em steres metlicos, por reaco com um complexo metanlico de trifluoreto de boro. Em conformidade com a norma, dever proceder-se da seguinte forma: Preparao dos reagentes: Soluo metanlica de hidrxido de sdio [0,5M] - dissolver 2 g de NaOH em 100 ml de metanol. Soluo metanlica de trifluoreto de boro (20%) soluo comercial, que dever estar sempre acondicionada em frigorifico. Soluo saturada de NaCl - dissolver NaCl, em excesso, em gua destilada. 55

As amostras de leo devero estar previamente secas (metodologia descrita no tpico 2.2.1). Mtodo: 1. Pesar, em duplicado, para bales de destilao de 50 ml, tomas de amostra de 150 mg; 2. Adicionar 4 ml da soluo metanlica de NaOH e reguladores de ebulio; 3. Preparar um banho termostatizado, a 80C, numa hotte; 4. Preparar a coluna de destilao com refluxo; 5. Colocar o balo ligado coluna, mergulhando-o no banho termostatizado a 80C; 6. Quando entrar em ebulio, contar entre 5 a 10 minutos, agitando a cada minuto, at desaparecerem as gotas de matria gorda; 7. Adicionar 5 ml de trifluoreto de boro e manter em ebulio por mais 3 minutos ; 8. Adicionar 3 ml de iso-octano, retirando de imediato o balo, ainda acoplado coluna de destilao, do banho termostatizado; 9. No retirando o balo da coluna de destilao, adicionar 10 ml de soluo saturada de NaCl, retirando-se s depois o balo, adicionando de seguida mais 10 ml; 10. Agitar fortemente o balo, pelo menos durante 15 segundos, adicionando de seguida mais soluo saturada de NaCl, at se atingir o nvel base do pescoo do balo (ver-se a separao de fases, em que o iso-octano com os steres ser o sobrenadante); 11. Aps a separao de fases, retirar com uma pipeta o mximo da camada superior, tendo o cuidado de filtrar esta amostra, usando para tal uma pipeta Pasteur com algodo e sulfato de sdio anidro (para eliminar alguma gua que haja). Estando as amostras j derivatizadas e pretendendo-se fazer a anlise em termos do teor em steres, deve-se adicionar amostra recolhida (soluo de iso-octano com os metil steres) padro interno (PI) (metil heptadecanoato pureza 99%), numa proporo de 30 mg de PI para 3 ml de amostra. Aps a adio do PI, a amostra dever ser homogeneizada, aps o que estar apta a ser analisada cromatograficamente. Segundo a normativa EN 14214, o biodiesel dever apresentar um contedo em ster igual ou superior a 96,5%, em massa.

2.2.9.1 Anlise Cromatogrfica

Aps a derivatizao segue-se a anlise cromatogrfica, usando um cromatgrafo de fase gasosa. Atravs desta anlise ir determinar-se, qualitativamente e quantitativamente, a composio do leo, em termos de cidos gordos. O cromatgrafo dever estar programado para fazer as anlises de metil steres de cidos gordos.

56

Na anlise dos resultados obtidos, que figuram nos cromatogramas, necessrio ter ateno aos tempos de reteno e rea dos vrios metil steres de cidos gordos. Para avaliar qualitativamente e quantitativamente os vrios metil steres obtidos e inferir, deste modo, a percentagem de transesterificao obtida, proceder-se- da seguinte forma: Contedo em steres (C) em percentagem: Sendo: A - soma das reas Aei - rea do PI Cei - concentrao do PI (mg/ml) Vei - volume do PI (ml) c cido gordo (cada tipo) m - massa da amostra Percentagem de cada cido gordo: % do c = (A (do c) x 100)/ A
C= ((( A)-Aei)/ Aei ) x ((Cei x Vei)/m) x 100

2.2.10 Determinao dos teores em mono, di e triglicridos e glicerol livre e total, num biodiesel
importante determinar, num biodiesel, os teores de glicerol, assim como dos mono, di e triglicridos, uma vez que o glicerol um contaminante, e quanto maiores os valores em glicridos no biodiesel, menor ter sido o rendimento da transesterificao e, consequentemente, menor a qualidade do biodiesel. Estes parmetros so avaliados por cromatografia gasosa, seguindo a norma europeia EN 14105, segundo a qual o glicerol e os glicridos precisam de ser transformados em compostos silanizados mais volteis. Um biodiesel, segundo a EN 14214, dever apresentar valores de glicerina livre inferiores a 0,02% (em massa) e de glicerina total inferiores a 0,25%, sendo que os valores mximos aceitveis de mono, di e triglicridos so de 0,8%, 0,2% e 0,2%, respectivamente. A metodologia seguida permite avaliar os teores das substncias a determinar, sendo que os limites de deteco se situam nos 200 ppm no caso dos glicridos e 10 ppm para o glicerol livre. Para possibilitar a anlise cromatogrfica, o glicerol e os glicridos presentes na amostra a analisar devero ser previamente derivatizados com piridina e MSTFA, usando-se, como padro interno para o glicerol, uma soluo de 1,2,4-butanotriol de 5 mg/ml, em piridina, e uma soluo de tricaprina a 8 mg/ml, em piridina, como padro interno para a determinao dos glicridos. Anteriormente anlise cromatogrfica dever proceder-se a uma calibrao com uma mistura de referncia contendo glicerol, monoolena, diolena e triolena.

57

Teor de glicerol livre (GL): Sendo:

GL (% m/m) = ((

g )/m)

x100

g = valor mdio da massa de glicerol obtido nas leituras do cromatgrafo (mg) m = massa da amostra de biodiesel (mg)

Teor de glicridos (G): Sendo:

G (% m/m) = ((

g )/m)

x100

Mg = valor mdio da massa de cada glicrido obtido para a soma das reas dos picos detectados na gama relativa a cada uma das classes destes compostos (mg). Sendo que a frmula aplicada igual para os trs tipos de glicridos simples (mono, di e triglicridos)

Teor de glicerol total (GT): Sendo:

GT (% m/m) = GL+0,255xMG+0,146xDG+0,103xTG

GL= teor em glicerol livre (% m/m) MG = teor em monoglicridos (% m/m) DG = teor em diglicridos (% m/m) TG = teor em triglicridos (% m/m)

2.2.11 Determinao da massa volmica

A massa volmica, vulgarmente designada por densidade, um importante parmetro a avaliar tanto em leos como em biodiesel. Um biodiesel dever apresentar, em termos de densidade, em relao EN 14214, valores situados entre os 0,86 e os 0,9 g/cm3, a 15C. A metodologia seguida foi a que se encontra descrita na ISO 3675:1998. Nesta metodologia usa-se um densmetro, e em funo do material, pondera-se qual o melhor densmetro a utilizar. Normalmente, para amostras de biodiesel, usa-se um densmetro abaixo do intervalo 0,9-0,95 g/cm3. No caso de amostras de leos, poder usar-se o densmetro de 0,9-0,95 g/cm3. Em conformidade com a norma, dever proceder-se da seguinte forma: 1. Encher, com a amostra pretendida, uma proveta de 500 ml; 2. Inserir o densmetro e registar o valor obtido, lendo-se pelo menisco; 3. Registar, igualmente, a temperatura da amostra, usando um termmetro; 4. Efectuar os clculos, tendo em conta que necessrio ter em considerao a temperatura das amostras. Massa volmica_(densidade): M. volmica a 15 C (g/cm3) = d + 0,0723 (T-15)

58

Sendo: d =densidade medida temperatura T T = temperatura medida no ensaio ( C)

2.2.12 Determinao da viscosidade cinemtica

A viscosidade um importante parmetro, uma vez que determina a lubricidade do combustvel e condiciona o funcionamento do motor. Em concreto, a viscosidade referida como a resistncia de escoamento de um fludo, sob a aco da gravidade. Em relao aos valores que o biodiesel dever apresentar, em conformidade com a EN 14214, a viscosidade dever estar compreendida entre os 3,5 e os 5 mm2/s, a 40C. A metodologia seguida foi a que se encontra descrita na ISO 3104:1999. Em relao ao biodiesel, o viscosmetro mais adequado o de 100 mm2/s, enquanto que para os leos o de 200. Dever ter-se em conta que cada viscosmetro possui uma determinada constante, que entrar nos clculos. Em conformidade com a norma, dever proceder-se da seguinte forma: 1. Proceder crivagem da amostra, usando um crivo de malha de 75 m; 2. Fazer subir a amostra pelo lado mais fino do viscosmetro, enquanto se faz vcuo pelo lado de maior dimetro. Em seguida colocar num suporte prprio e depois colocar em banho termoestatizado a 40C. Esperar cerca de 15 minutos para que a prpria amostra atinja os 40C, s depois se podero fazer as leituras; 3. Fazer a contabilizao, usando um cronmetro, entre o tempo decorrido do escoamento da amostra entre o risco superior e o inferior (ler sempre pelo menisco). Viscosidade cinemtica (mm2/s) = Sendo: C= Constante do viscosmetro (mm2/s2) t = Tempo de escoamento (s) Cxt

2.1 Metodologias de determinao da concentrao enzimtica

Estavam disponveis, para os ensaios laboratoriais, as enzimas Lipozyme TL IM, Lipozyme RM IM, Novozyme 435 e a Lipozyme TL 100L, todas elas da marca Novozymes. As trs primeiras eram lipases imobilizadas (em granulado) e a ltima, uma lipase solvel. Antes de se efectuarem quaisquer ensaios e estudos de transesterificao enzimtica, foi necessrio proceder-se determinao da concentrao proteica de cada enzima, pois s deste modo se poderia saber, em concreto, as quantidades de enzimas a utilizar nos vrios ensaios 59

de transesterificao. Como as enzimas so protenas, o mtodo utilizado para determinar o seu teor proteico o mesmo que empregue na determinao do teor proteico de qualquer substncia, tendo sido utilizada a metodologia de Lowry. Este mtodo pode ser aplicado tanto em doseamento de protenas imobilizadas (em suporte inorgnico) como em protenas solveis. Segundo esta metodologia, as amostras proteicas so tratadas, sucessivamente, com uma soluo de hidrxido de sdio e de carbonato de sdio - sulfato de cobre tartarato, antes da adio do reagente fenlico de Folin-Ciocalteau. Aps a adio deste reagente, o teor proteico determinado colorimetricamente, a 750 nm, comparando com uma soluo padro de concentrao conhecida. A soluo proteica padro, utilizada nos ensaios, foi a albumina de soro de boi, a qual foi submetida a vrias diluies e posterior tratamento, tal como se faz com a protena solvel. Aps a anlise da densidade ptica, foi feita uma recta de calibrao, que permitiu inferir sobre a concentrao proteica, permitindo, deste modo, determinar o teor enzimtico de cada uma das enzimas.

2.3.1 Doseamento da enzima imobilizada

Reagentes Soluo de hidrxido de sdio 1N Soluo de carbonato de sdio a 5% (5g/100 ml) Soluo de tartarato duplo de sdio e potssio a 2% (2g/100 ml) Soluo de sulfato de cobre a 1% (1g/100 ml) Reagente de Folin-Ciocalteau (diluio 1:2) Soluo-padro de albumina de soro de boi Em conformidade com a metodologia de Lowry, dever proceder-se da seguinte forma, para cada uma das enzimas imobilizadas: Mtodo: 1. Secar a enzima imobilizada, numa caixa de Petri, durante 3 h, a 100C, numa estufa; 2. Aps secagem, retirar a amostra, colocando-a no excicador, a fim de arrefecer sem ganhar humidade; 3. Pesar aproximadamente 25 mg da amostra, em duplicado, e adicionar 5 ml de gua destilada e 5 ml da soluo de NaOH. Agitar bem e colocar a soluo a ferver, durante 5 minutos, a fim de se efectuar a hidrlise proteica (enzima); 4. Arrefecer a amostra, retirando-se, posteriormente, 1,5 ml da soluo obtida (enzima hidrolisada), efectuando-se, de seguida, a sua centrifugao;

60

5. Retirar 1 ml (sobrenadante) da soluo enzimtica hidrolisada, j centrifugada, adicionando 5 ml de uma soluo preparada com 50 ml de soluo de NaCO3, 1 ml de tartarato e 1 ml de sulfato de cobre. Agitar bem e aguardar 10 minutos, aps os quais se dever adicionar 1 ml da soluo do reagente de Folin (diludo), agitando novamente; 6. Aguardar 30 minutos e fazer a leitura ptica da absorvncia, no espectrofotmetro, a 750 nm. Dever sempre fazer-se um ensaio de repetio (rplica) por cada enzima. Alm disso, necessrio fazer-se um ensaio em branco, sendo que em vez de se utilizar 1 ml da soluo enzimtica, utiliza-se 1ml de gua destilada. O teor de protena calculado usando a seguinte expresso: Teor proteico (mg/ mg suporte) = protena mg / peso da amostra (mg)

Na frmula o valor de protena mg, corresponde quantidade de protena pura, e obtido a partir da recta de calibrao.

2.3.2 Doseamento da enzima solvel

Reagentes: Soluo de hidrxido de sdio 1N Soluo de carbonato de sdio a 2% (2g/100 ml) Soluo de tartarato duplo de sdio e potssio a 2% (2g/100 ml) Soluo de sulfato de cobre a 1% (1g/100 ml) Reagente de Folin-Ciocalteau (diluio 1:2) Soluo-padro de albumina de soro de boi Mtodo: 1. Em dois bales volumtricos, um de 100 ml e outro de 200 ml, colocar 1 ml da soluo aquosa da enzima solvel, e perfazer o volume com gua destilada; 2. Retirar 0,5 ml da soluo enzimtica diluda e adicionar 0,5 ml de NaOH, agitando-se de seguida, aguardando depois 30 minutos; 3. Ao fim dos 30 minutos, adicionar 5 ml da soluo constituda por 50 ml da soluo de NaCO3, 0,5 ml de tartarato e 0,5 ml de sulfato de cobre. Agitar bem e aguardar depois, durante 10 minutos; 4. Adicionar 0,5 ml do reagente de Folin (j diludo), agitar e aguardar 30 minutos para se efectuar a leitura da absorvncia a 750 nm. 61

Dever fazer-se um ensaio de repetio (rplica); alm disso necessrio realizar-se, igualmente, um ensaio em branco. Com base na leitura da absorvncia determina-se a concentrao enzimtica usando a recta de calibrao, recorrendo a uma soluo-padro de albumina de soro bovino.

2.4 Metodologias de produo de Biodiesel (B100)

Neste captulo so descritos os vrios mtodos utilizados na transesterificao dos leos, ou seja a sua converso em metil steres de cidos gordos, isto , em biodiesel. So descritas as metodologias por catlise qumica alcalina e por via enzimtica, as duas vias utilizadas neste trabalho.

2.4.1 Transesterificao qumica por catlise bsica

As reaces de transesterificao qumica foram realizadas utilizando o hidrxido de sdio (NaOH), como catalisador, e o metanol, como lcool reaccional. A opo por este lcool deve-se ao facto de, em termos tcnicos e econmicos, a reaco via metlica ser muito mais vantajosa que a via etlica. Foi sintetizado biodiesel, atravs deste processo, usando trs tipos de leos: leo virgem de colza, leo refinado de soja e leo alimentar usado. necessrio, ainda, frisar que os ensaios de transesterificao decorreram, somente, aps a caracterizao prvia dos vrios leos.

2.4.1.1 Produo de biodiesel a partir de leo de colza

O leo de colza utilizado foi um leo cru, cujo lote datava de Janeiro de 2006. O objectivo foi produzir-se uma quantidade aproximada de 0,5 litros de biodiesel, para que se pudesse efectuar uma caracterizao deste, de forma a certificar-se que o combustvel apresentaria os seus vrios parmetros dentro da norma europeia EN 14214. Assim, utilizouse para transesterificao do leo de colza uma razo molar metanol:leo de 6:1 e 1% em massa de hidrxido de sdio, relativamente massa de leo utilizada. Estas condies so consideradas como optimizadas, e so as geralmente empregues na produo de biodiesel por via alcalina. quantidade de catalisador necessria para a reaco (1% m/m), foi ainda adicionada a quantidade de hidrxido de sdio necessria para neutralizar os cidos gordos livres presentes no leo (relacionado com o ndice de acidez).

62

2.4.1.1.1 Procedimento
Calculadas as quantidades de reagentes e de catalisador, necessrias reaco, adicionou-se num erlenmeyer, numa placa de agitao com aquecimento, o metanol e o hidrxido de sdio, em pastilhas, deixando a soluo a reagir, em sistema fechado, at o hidrxido se dissolver completamente, a uma temperatura de 50C e sob agitao. O leo foi pesado, colocando-se de seguida num reactor a 55C e a uma agitao de 150 rpm. Aps a total dissoluo do NaOH no metanol, formando uma soluo de metxido, adicionou-se esta soluo ao leo e deixou-se a reagir (transesterificao) durante 4 horas, a 55C e a 150 rpm.

2.4.1.1.2 Separao de fases

Efectuaram-se recolhas de amostra, de hora em hora, num total de 4 amostras (1h, 2h, 3h e 4h). Cada recolha, de 6 ml, foi distribuda por eppendorfs e centrifugada, durante 1 minuto e meio, a 8000 rpm. Depois de centrifugar, retirou-se, de cada eppendorf, a fase sobrenadante, que corresponde aos metil steres. Foi necessrio proceder-se, ainda, lavagem da fase recolhida. Para isso colocou-se cada amostra num erlenmeyer de 200 ml e adicionou-se 0,5 ml de gua destilada, aps o que se colocou na incubadora, durante 10 minutos, a 55C e a 150 rpm. Aps este tempo cada amostra foi centrifugada , em tubos de vidro de 50 ml de capacidade. No final de cada centrifugao conseguia-se discernir 2 fases: a sobrenadante, de cor amarela clara, correspondente aos metil-steres, e uma fase aquosa correspondente mistura de glicerol, gua e metanol. No final das 4 horas de reaco houve igualmente uma separao de fases, no reactor, procedendo-se recolha das duas fases obtidas. Em relao fase sobrenadante, colocou-se a mesma numa ampola de decantao a fim de melhor separar. Este um processo relativamente lento, mas que permite separar a fase aquosa, inferior (mistura de gua, glicerol, metanol e catalisador), a fim de minimizar interaces (oxidaes e hidrlises) que prejudiquem a qualidade final do biocombustvel final. Efectuou-se, depois, a pesagem das duas fases obtidas e a lavagem do biodiesel. Para isso foi necessrio adicionar uma quantidade de gua destilada numa proporo de 20 ml de gua destilada por cada kg de biocombustvel obtido, procedendo-se lavagem na incubadora, a 55C e a 150 rpm, durante 10 a 15 minutos. Aps a lavagem, colocou-se a mistura, novamente, numa ampola de decantao, tendo-se procedido a uma nova lavagem da fase superior. A fase superior final (fase orgnica dos steres) foi recolhida.

2.4.1.1.3 Eliminao de contaminantes no Biodiesel

Posteriormente, todas as fases sobrenadantes foram secas. As amostras sequenciais, devido ao seu reduzido volume, foram secas recorrendo a sulfato de sdio anidro. Em tal procedimento, 63

colocou-se numa pipeta Pasteur, um pouco de algodo e depois um pouco de sulfato de sdio, procedendo-se depois filtrao de cada amostra. Aps este tratamento, cada amostra dever apresentar um aspecto translcido, estando apta para caracterizao. A amostra final, obtida ao fim das 4 horas de transesterificao, foi seca ao rotavapor (modelo R200, da Bchi), de modo a eliminar contaminantes, como a gua e o metanol, obtendo-se um biocombustvel puro. As condies de laborao, em rotavapor, foram de 40C, iniciando-se o processo a uma presso de 350 mbar, baixando-se a presso para os 300 mbar, ao fim de 5 minutos, continuando-se a reduzir a presso, sequencialmente, em 45 minutos, at se atingir os 70 mbar.

2.4.1.2 Produo de biodiesel a partir de leo de soja

O leo de soja utilizado na transesterificao alcalina era um leo alimentar refinado. As razes molares utilizadas foram as mesmas que em relao ao leo de colza. Deste modo usou-se uma razo molar metanol:leo de 6:1 e hidrxido de sdio a 1% (m/m), calculando-se igualmente a quantidade adicional de catalisador, face acidez natural do leo. Os ensaios decorreram usando uma massa de leo de 50g, reagindo em erlenmeyer fechado, de 200 ml, numa incubadora a 55C e 150 rpm. Tal como descrito na seco 2.4.1.1.1, s depois de feita a soluo de metxido que a mesma foi adicionada ao leo, previamente aquecido, ficando a transesterificar durante 4 horas. Ao longo dessas 4 horas de reaco, houve recolhas sequenciais (2 ml), de hora em hora. As amostras recolhidas no chegaram a ser lavadas, tendo sido imediatamente centrifugadas. No caso da fase sobrenadante, correspondendo ao biocombustvel, apresentasse uma tonalidade opaca, o que indicava que a centrifugao no teria permitido uma separao eficiente do biocombustvel, a mesma foi seca recorrendo a sulfato de sdio anidro. Aps este tratamento, as amostras apresentavam um aspecto translcido, estando aptas para caracterizao.

2.4.1.3 Produo de biodiesel a partir de leo usado

Foram utilizados trs lotes diferentes de leos alimentares usados. As condies utilizadas foram as que esto descritas como sendo consideradas optimizadas para transesterificao de leos usados. Assim, a razo molar metanol:leo foi de 6:1, tendo sido utilizada uma relao de 1,2 % de massa de hidrxido de sdio, relativamente massa de leo, acrescida da quantidade de catalisador necessria para compensar a acidez natural do leo. Relativamente aos dois primeiros lotes utilizados, os ensaios de transesterificao, sensivelmente com 2 litros de leo, decorreram em reactores Biolafitte BL06/1, a 55C e a uma agitao de 150 rpm. O biocombustvel, aps as 4 horas de reaco, foi lavado e posto a 64

decantar em ampolas de decantao conforme descrito em 2.4.1.1.2, tendo sido igualmente realizadas recolhas sequenciais (10 ml). Em relao ao ltimo leo testado, da Cantina do INETI, a reaco de transesterificao, durante 4 horas, decorreu numa incubadora,

recorrendo a um erlenmyer fechado, de 250 ml, utilizando uma quantidade de 50 g de leo, mantendo as condies de transesterificao em termos de temperatura (55C) e agitao (150 rpm), procedendo-se igualmente a recolhas sequenciais (2 ml).

2.4.2 Influncia do processo de secagem no teor em gua e na estabilidade oxidao do biodiesel

Face aos trabalhos em desenvolvimento e em virtude de se pretender fazer uso do desenho composto central em ensaios sobre a transesterificao enzimtica, achou-se igualmente pertinente construir um desenho composto central para avaliar a influncia de vrios parmetros, controlveis no rotavapor, na diminuio do teor em gua do biodiesel e na sua estabilidade oxidao. O rotavapor utilizado permitia o controlo de trs variveis (independentes): temperatura, presso e tempo. Deste modo, pretendia-se analisar a actuao e interaco entre estes trs parmetros na secagem do biocombustvel. O desenho composto central teve 3 variveis independentes, cada varivel a 2 nveis (-1/+1), tendo sido expandido para os nveis extremos (-1,682/+1,682), pois deste modo a expanso permitiria aumentar as hipteses de resposta. Assim, o intervalo de nveis definido foi: -1,682 ; -1 ; 0 ; +1 ; +1,682 (tabelas 17 e 18). O ponto mdio (0) foi efectuado com triplicados, o que permitiu avaliar com maior preciso e representatividade os valores das determinaes. As quantidades de biodiesel utilizadas nos vrios ensaios de secagem foram de 50 g, tendo sido utilizado o biodiesel que foi produzido a partir do leo usado do 1 lote. Foram definidos como intervalos a estudar: Temperatura (T): de 40 a 70C; Tempo (t): de 10 minutos a 60 minutos; Presso (P): de 70 a 300 mbar; Tabela 17 - Parmetros estudados, em desenho composto central, para optimizao da secagem de biodiesel. Parmetro Temperatura (C) Presso (mbar) Tempo (minutos) -1,682 40 70 10 -1 46,1 116,6 20 Nvel 0 55 185 35 +1 63,9 253,4 49,9 + 1,682 70 300 60 65

Tabela 18 - Planeamento dos ensaios relativos aos nveis -1/+1 e expanso -1,682/+1,682, assim como os respectivos valores a ensaiar. Nvel (-1/+1) Nveis -1/+1
Sequncia Temperatura Presso Tempo

1 2 3 4 5 6 7 8 Ponto mdio

+ + + + 0

+ + + + 0

+ + + + 0

Valores a ensaiar Temperatura Presso Tempo (C) (mbar) (min) 46,1 116,6 20 63,9 116,6 20 46,1 253,4 20 63,9 253,4 20 46,1 116,6 49,9 63,9 116,6 49,9 46,1 253,4 49,9 63,9 253,4 49,9 55 185 35

Expanso (-1,682/+1,682) Sequncia 9 10 11 12 13 14 Nveis -1,682/+1,682 Valores a ensaiar Temperatura Presso Tempo Temperatura Presso Tempo (C) (mbar) (min) -1,682 0 0 40 185 35 +1,682 0 0 70 185 35 0 -1,682 0 55 70 35 0 +1,682 0 55 300 35 0 0 -1,682 55 185 10 0 0 +1,682 55 185 60

Aps a realizao dos vrios ensaios, de acordo com as condies definidas no desenho composto central, cada amostra foi analisada em termos de teor de gua e de estabilidade oxidao, a fim de avaliar a influncia conjugada desses mesmos factores, sobre estes parmetros que constam da norma EN 14214.

2.4.3 Transesterificao por catlise enzimtica

As reaces de transesterificao enzimtica, neste trabalho, foram realizadas recorrendo a vrias lipases, utilizando o metanol como lcool. Somente um ensaio foi realizado utilizando etanol. O biocombustvel sintetizado atravs deste processo cataltico foi obtido a partir de 4 tipos de leos: leo cru de colza, leo refinado de soja, leo refinado de girassol e leo alimentar usado. Os catalisadores, em estudo, foram as enzimas imobilizadas Lipozyme TL IM, Lipozyme RM IM, Novozym 435 e a enzima solvel Lipozyme TL 100L.

66

2.4.3.1 Desenho composto central (a 4 variveis) para produo de biodiesel, a partir de leo de colza, usando enzimas
Para se proceder optimizao da produo de biodiesel, usando enzimas, recorreu-se metodologia do desenho composto central, de modo a estudar o efeito sinergtico entre diferentes variveis no processo de transesterificao enzimtica. As variveis cuja interaco se pretendeu estudar foram a temperatura, a quantidade de lipase, a quantidade de gua e a razo molar metanol/leo. Deste modo, o desenho composto central teve 4 variveis independentes, cada varivel a 2 nveis (-1/+1), tendo sido expandido para os nveis extremos (-2/+2). O intervalo de nveis definido foi: -2 ; -1 ; 0 ; +1 ; +2 (tabelas 19, 20 e 21). O ponto mdio (0) foi efectuado com trs replicados. A tabela 19 representa o planeamento dos ensaios utilizando o desenho composto central e os respectivos valores. As quantidades de leo utilizadas para transesterificao foram de 50 g, por ensaio. Os ensaios foram realizados, inicialmente, com o leo de colza do primeiro lote. Posteriormente repetiram-se alguns ensaios, que aparentemente apresentavam valores mais dspares face s tendncias apresentadas, sendo que as repeties foram realizadas j com o segundo lote de leo de colza, uma vez que o primeiro fora totalmente utilizado. Os ensaios foram realizados em erlenmyers de 200 ml, numa incubadora orbital, a 150 rpm. O teor de steres obtidos na transesterificao foi determinado ao fim de 15 horas de reaco. Foram definidos como intervalos a estudar: Temperatura (T): de 25 a 50C; Quantidade de lipase pura (L): de 30 a 110 mg; Razo molar metanol:leo (R): de 3:1 a 7:1; Quantidade de gua (A): de 0 a 12 g Tabela 19 - Parmetros estudados, no desenho composto central, para optimizao do sistema reaccional de transesterificao enzimtica. Parmetro T- Temperatura(C) L- Quantidade de enzima (mg) R- Razo molar metanol:leo A- Quantidade de gua (g) -2 25 30 3:1 0 -1 31,2 50 4:1 3 Nveis 0 37,5 70 5:1 6 +1 43,7 90 6:1 9 +2 50 110 7:1 12

67

Tabela 20 - Planeamento para os ensaios relativos aos nveis -1/+1 e expanso -2/+2, assim como os respectivos valores a ensaiar. Nvel (-1/+1)
Sequncia T Nveis -1/+1 L R A T(C) Valores a ensaiar L (mg) R

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 Ponto mdio

+ + + + + + + + 0

+ + + + + + + + 0

+ + + + + + + + 0

+ + + + + + + + 0

31,2 43,7 31,2 43,7 31,2 43,7 31,2 43,7 31,2 43,7 31,2 43,7 31,25 43,7 31,2 43,7 37,5

50 50 90 90 50 50 90 90 50 50 90 90 50 50 90 90 70

4:1 4:1 4:1 4:1 6:1 6:1 6:1 6:1 4:1 4:1 4:1 4:1 6:1 6:1 6:1 6:1 5:1

A (g) 3 3 3 3 3 3 3 3 9 9 9 9 9 9 9 9 6

Expanso (-2/+2)
Sequncia T Nveis -2/+2 L R A T(C) Valores a ensaiar L (mg) R

1* 2* 3* 4* 5* 6* 7* 8*

-2 +2 0 0 0 0 0 0

0 0 -2 +2 0 0 0 0

0 0 0 0 -2 +2 0 0

0 0 0 0 0 0 -2 +2

25 50 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5

70 70 30 110 70 70 70 70

5:1 5:1 5:1 5:1 3:1 7:1 5:1 5:1

A (g) 6 6 6 6 6 6 0 12

Tabela 21 - Planeamento dos ensaios do desenho composto central, incluindo a expanso, com os respectivos valores.
Sequncia Condies de ensaio T L Metanol (C) (mg) (g) A (g) L (% m/m) Metanol (Razo molar )

1 2 3 4 5

31,2 43,7 31,2 43,7 31,2

50 50 90 90 50

7,14 7,14 7,14 7,14 10,7

3 3 3 3 3

0,1 0,1 0,18 0,18 0,1

4:1 4:1 4:1 4:1 6:1

A (% m/m)* 6 6 6 6 6

68

Tabela 21 (continuao)
T (C) Condies de ensaio L Metanol (mg) (g) A (g) L (% m/m) Metanol (Razo molar )

Sequncia

6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 1* 2* 3* 4* 5* 6* 7* 8* Pm

43,7 31,2 43,7 31,2 43,7 31,2 43,7 31,2 43,7 31,2 43,7 25 50 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5

50 90 90 50 50 90 90 50 50 90 90 70 70 30 110 70 70 70 70 70

10,7 10,7 10,7 7,14 7,14 7,14 7,14 10,7 10,7 10,7 10,7 8,93 8,93 8,93 8,93 5,3 12,5 8,93 8,93 8,93

3 3 3 9 9 9 9 9 9 9 9 6 6 6 6 6 6 0 12 6

0,1 0,18 0,18 0,1 0,1 0,18 0,18 0,1 0,1 0,18 0,18 0,14 0,14 0,14 0,2 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14

6:1 6:1 6:1 4:1 4:1 4:1 4:1 6:1 6:1 6:1 6:1 5:1 5:1 5:1 5:1 3:1 7:1 5:1 5:1 5:1

A (% m/m) 6 6 6 18 18 18 18 18 18 18 18 12 12 12 12 12 12 0 24 12

(% m/m) corresponde percentagem mssica em relao massa de leo em ensaio

2.4.3.2 Escolha transesterificao

da

enzima

para

posteriores

ensaios

de

Aps a determinao da concentrao enzimtica, usando o mtodo de Lowry, foi necessrio seleccionar qual a melhor enzima para ser usada nos processos de optimizao da transesterificao enzimtica. Para tal, recorreu-se comparao dos resultados finais de transesterificao, com cada enzima, obtidos nas condies reaccionais definidas como ponto mdio do desenho composto central: temperatura de 37,5C; quantidade enzimtica pura de 70 mg, razo molar metanol/leo de 5:1 e uma quantidade de gua de 6 g. Os ensaios foram realizados em erlenmyers de 200 ml numa incubadora orbital, a 150 rpm, utilizando-se 50 g de leo de colza (1 lote).

2.4.3.3 Determinao das melhores condies reaccionais

A partir das superfcies de resposta obtidas por aplicao da metodologia do desenho composto central, foi possvel determinar as melhores condies para a reaco de transesterificao, fazendo variar cada uma das quatro variveis, mantendo todas as outras em 69

valores constantes. Foi tido em considerao que os valores dos vrios parmetros apenas podem variar dentro dos intervalos definidos nos nveis do desenho composto central, pois s assim apresentam representatividade. Assim sendo, os limites estiveram compreendidos entre: Temperatura: 25 a 50C Quantidade lipase pura: 30 a 110 mg Quantidade de metanol: 5,3 a 12,5 g Quantidade de gua : 0 a 12 g

2.4.3.4 Produo de biodiesel a partir de leo de soja

Aps a determinao das melhores condies para a reaco de transesterificao, recorrendo ao leo de colza, usando o desenho composto central (ver captulo 2.4.3.1), ensaiou-se igualmente a transesterificao enzimtica com leo de soja, utilizando a enzima Lipozyme TL IM. As condies dos ensaios e respectivos resultados obtidos figuram no captulo 3.4.3.

2.4.3.5 Produo de biodiesel a partir de leo usado

Apenas foi sintetizado biodiesel por transesterificao enzimtica recorrendo ao terceiro lote de leos usados, proveniente da Cantina do INETI. As condies dos ensaios e os respectivos valores obtidos na transesterificao figuram no captulo 3.4.5.

2.4.3.6 Produo de biodiesel a partir de leo de girassol

Embora no estivesse prevista a utilizao de leo de girassol, no presente estudo, este leo foi utilizado, devido ao facto de terem ocorrido alguns problemas relativos

transesterificao com leo de colza (ver captulo 3.4.2). Assim, o leo de girassol serviu para testar algumas hipteses que se haviam colocado sobre a origem dos problemas que estavam a decorrer nos ensaios. O leo de girassol utilizado foi um leo refinado da marca alimentar AAA girassol. Para alm do uso da enzima imobilizada Lipozyme TL IM, foram igualmente realizados vrios ensaios recorrendo lipase solvel TL 100L. As condies reaccionais escolhidas para os ensaios foram idnticas s do ponto mdio do desenho composto central enzimtico, tendo-se recolhido amostras ao fim de 15 horas de reaco. Nessas condies, foram realizados quatro ensaios com a lipase solvel, em que a varivel independente em estudo era o pH da soluo

70

aquosa

adicionada, mantendo-se constante todos os outros parmetros. O objectivo era

determinar se havia influncias significativas do pH sobre a actividade enzimtica de transesterificao. Um dos ensaios realizou-se com recurso a uma soluo tamponizada de hidrogenoftalato de potssio, de pH=5. Tal soluo substitua a gua a adicionar ao sistema, tendo sido obtida recorrendo dissoluo de hidrogenoftalato de potssio, acertando-se o pH, com recurso a pastilhas de NaOH. Outros dois ensaios, foram levados a cabo com a adio de gua ultra-pura acertada a pH=6 e 7. Um ltimo ensaio, foi realizado com gua ultra-pura sem qualquer acerto de pH, portanto mantendo o seu pH original de 5,45. Dever ser referido que no foi registado o pH das solues finais (sistema leo/lipase/metanol/gua), uma vez que as sondas de pH disponveis no eram apropriadas para solues orgnicas.

71

Captulo 3

Resultados e Discusso

72

Neste captulo apresentam-se os resultados obtidos nos vrios ensaios realizados. Figuram os resultados quer ao nvel da anlise dos vrios leos, quer na quantificao da concentrao proteica das enzimas estudadas, assim como da produo e posterior anlise das vrias amostras de biocombustvel produzidas.

3.1 Caracterizao dos leos vegetais

Tal como foi mencionado no captulo 2.1.1, os leos utilizados nos vrios ensaios foram leos vegetais, agrupando-se em dois grupos: os leos virgens (colza, soja e girassol) e os leos alimentares usados (OAU), provenientes de frituras. Todos estes leos, excepto o leo de girassol, foram caracterizados de acordo com as metodologias referidas no captulo 2.2. Os parmetros analisados so de extrema importncia, uma vez que tm influncia directa no processo de transesterificao e, consequentemente, na quantidade e qualidade do produto final, o biodiesel.

3.1.1 Caracterizao do leo de colza

O leo de colza utilizado nos vrios ensaios foi proveniente de dois lotes diferentes. O primeiro lote foi de Janeiro de 2006 e o segundo, de Maro de 2007. Em ambos os lotes, o leo de colza possua uma cor amarela palha e um cheiro intenso caracterstico. Todavia, o primeiro lote apresentava um odor a rano mais evidente. As tabelas 22 e 23 so relativas aos parmetros qualitativos dos dois lotes de leo de colza. Tabela 22 - Valores dos parmetros de caracterizao do leo de colza, do 1 lote (lote de Janeiro de 2006) e do 2 lote (lote de Maro de 2007).
Parmetros Matria em suspenso ndice de acidez Quantidade de gua sem secagem Quant. aps secagem com Na2SO4 anidro Estabilidade oxidao ndice de perxido ndice de Iodo Fsforo ndice de Saponificao Peso molecular Teor em steres de cidos gordos (derivatizao) Massa volmica a 15 C Viscosidade Unidades mg/kg mgKOH/g ppm h meq perxido/kg gI2/100g mg/kg mg KOH/g g/mol % (m/m) kg/m3 mm2/s Valor mdio dos ensaios leo de leo de colza colza (1 lote) (2 lote) 144,8 126,1 2,27 3,62 1048 105 572 n.d. 10,81 12,10 0,53 n.d. 115 114 n.d 29 184 187,6 912,9 895,6 92,1 93,9 920,14 34,03 n.d. n.d.

73

Tabela 23 - Composio, em percentagem, dos principais cidos gordos do leo de colza.

cido gordo Miristico (C14:0) Palmtico (C16:0) Palmitolico (C16:1) Esterico (C18:0) Oleico (C18:1) Linoleico (C18:2) Linolnico (C18:3) Araquidico (C20:0) Eicosenico (C20:1) Behnico (C22:0) Lignocerico (C24:0) Nervnico (C24:1) leo de colza (1 lote) % do cido gordo 0,06 5,13 0,22 1,71 58,97 22,47 9,31 0,53 1,13 0,31 0,13 0,03 leo de colza (2 lote) % do cido gordo 0,06 4,62 0,07 1,84 62,95 19,53 9,08 1,51 0,04 0,30 v.n.d v.n.d

Da anlise das tabelas 22 e 23 verifica-se que ambos os lotes so muitos semelhantes nos vrios parmetros, havendo apenas uma diferena significativa no teor de gua, sendo o segundo lote menos hidratado. A acidez no segundo lote ligeiramente superior, traduzindose num teor de cidos gordos livres um pouco mais elevado. Da composio dos leos de colza analisados, em termos de cidos gordos, pode-se ver que o leo de colza constitudo na sua maioria, por cido oleico e apresenta um teor em cido linolnico que no compromete a utilizao deste leo para obteno de um biodiesel de boa qualidade. Tambm o valor do ndice de iodo se encontra dentro das especificaes exigidas para biodiesel (< 120 gI2/100g).

3.1.2 Caracterizao do leo de soja

O leo de soja utilizado era um leo alimentar refinado, da marca Valouro. Este leo possua uma cor amarela dourada, muito clara, e um aroma agradvel. A tabela 24 referente caracterizao do leo de soja, sendo notrio que este apresentava valores do ndice de acidez, de gua e de matria em suspenso muito reduzidos, o que era esperado visto ser um leo refinado e para consumo. Em relao ao ndice de saponificao, o valor obtido encontra-se dentro dos valores geralmente encontrados para este tipo de leos. No entanto, em termos de ndice de iodo, o leo de soja apresenta um valor de 132 gI2/100g o que indica que um biodiesel obtido a partir deste leo no ir ter este parmetro dentro das especificaes da norma europeia (< 120), o que apenas ser conseguido com mistura com biodiesel (ou leo) de outra origem. Este valor para o ndice de iodo deriva do facto do leo de soja ter um elevado teor em cido linoleico (tabela 25) .

74

Tabela 24 - Valores dos parmetros de caracterizao do leo refinado de soja Valouro.

Parmetros Matria em suspenso ndice de acidez Quantidade de gua Estabilidade oxidao ndice de Iodo ndice de Saponificao Peso molecular Unidades mg/kg mgKOH/g ppm h gI2/100g mg KOH/g g/mol Valor mdio dos ensaios 0,34 0,75 278 6,92 132 191,3 878,3

Tabela 25 - Composio, em percentagem, dos principais cidos gordos do leo de soja.

cido gordo Miristico (C14:0) Palmtico (C16:0) Palmitolico (C16:1) Esterico (C18:0) Oleico (C18:1) Linoleico (C18:2) Linolnico (C18:3) Araquidico (C20:0) Eicosenico (C20:1) Behnico (C22:0) Lignocerico (C24:0) leo de soja Valouro % do cido gordo 0,10 14,98 0,09 5,34 22,67 48,87 6,56 0,44 0,29 0,48 0,17

3.1.3 Caracterizao dos leos alimentares usados

Foram realizados vrios ensaios com OAU, decorrentes de frituras. Os dois primeiros lotes de leos usados resultaram de uma mistura prvia de vrios outros leos usados, que se encontravam disponveis nos laboratrios da unidade de Biomassa, do DER, mas cuja provenincia e data se desconhece. O terceiro OAU foi proveniente da Cantina do INETI e data de Agosto de 2007. Todos os leos tinham uma cor amarela/alaranjada, bastante intensa, e um forte aroma a leo usado, com um claro odor a rano. A tabela 26 relativa aos parmetros qualitativos dos trs lotes de leos alimentares usados, sendo notrio que os dois primeiros lotes so bastante similares. O terceiro lote apesar de possuir valores anlogos aos dois anteriores lotes, apresenta alguns parmetros mais dspares, sobretudo ao nvel da

quantidade de matria em suspenso, do teor em gua e da estabilidade oxidao. A alterao nestes parmetros no de estranhar atendendo a que provavelmente se tratavam de leos que fritaram diferentes tipos de alimentos e que podem ter sido sujeitos a diferentes temperaturas e tempos de fritura. Comparativamente a leos no sujeitos a frituras, como por exemplo o leo de colza analisado neste trabalho (tabela 22), os OAU apresentam valores de viscosidade superiores e valores para a estabilidade oxidao muito inferiores e que no vo 75

permitir obter um biodiesel dentro das especificaes da norma europeia relativamente a este parmetro (> 6h). Em termos de composio em cidos gordos (tabela 27), os trs leos so muito semelhantes, sendo essencialmente constitudos por cido linoleico (cerca de 53%) e por cido oleico (cerca de 29%). Tabela 26 - Valores dos parmetros de caracterizao dos OAU do 1 lote (Maro de 2006), 2 lote (Maro de 2006) e 3 lote (Agosto de 2007). Parmetros
Matria em suspenso ndice de acidez Quantidade de gua Estabilidade oxidao ndice de Iodo ndice de Saponificao Peso molecular Teor em steres de ci. gordos (derivatizao) Massa volmica a 15 C Viscosidade Unidades mg/kg mgKOH/g ppm h gI2/100g mg KOH/g g/mol % kg/m3 mm2/s Valor mdio dos ensaios dos leos usados 1 lote 2 lote 3 lote 546,29 520,54 411,69 1,37 1,73 1,01 784 796 1267 2,40 1,19 5,68 117 118 119 193 189,4 188,2 870,5 886,9 892,7 n.d n.d. 87,8 929,7 n.d. n.d 47,47 n.d. n.d

Tabela 27 - Composio, em percentagem, dos principais cidos gordos dos OAUs.

cido gordo Miristico (C14:0) Palmtico (C16:0) Palmitolico (C16:1) Esterico (C18:0) Oleico (C18:1) Linoleico (C18:2) Linolnico (C18:3) Araquidico (C20:0) Eicosenico (C20:1) Behnico (C22:0) Lignocerico (C24:0) Nervnico (C24:1) OAU do 1 lote % do cido gordo 0,14 10,06 0,12 3,96 29,27 53,47 1,45 0,33 0,30 0,64 0,07 0,17 OAU do 2 lote % do cido gordo 0,14 10,24 0,08 3,93 29,19 53,50 1,43 0,31 0,29 0,59 0,11 0,15 OAU do 3 lote % do cido gordo 0,15 10,22 0,12 3,96 29,34 53,20 1,38 0,33 0,30 0,65 0,10 0,28

3.2 Transesterificao bsica de diferentes leos vegetais

Este trabalho visava a sntese de biodiesel por transesterificao qumica alcalina e por via enzimtica, pretendendo a comparao entre ambas as vias. A matria-prima utilizada na sntese de biodiesel por transesterificao bsica, tal como j foi referido, incluiu o leo de colza, o leo de soja e leos alimentares usados. A caracterizao dos vrios parmetros tcnicos de qualidade de um biodiesel implica uma produo mnima de cerca de 0,5 litros em sistema descontnuo (batch). Todavia, nem todos 76

os metil-steres produzidos nos vrios ensaios foram obtidos nestes quantitativos, pelo que a caracterizao qualitativa mais detalhada apenas foi realizada em relao ao B100 de leo de colza, do primeiro lote, e ao B100 do primeiro e segundo lote de OAU. O parmetro fulcral que foi analisado em todas as amostras obtidas nos ensaios de transesterificao, foi o rendimento em metil-steres, dado que segundo a norma EN 14214, um biodiesel de qualidade tem de ter um teor em steres superior a 96,5%.

3.2.1 Transesterificao do leo de colza

O biodiesel de colza obtido por transesterificao qumica alcalina derivou do leo de colza do primeiro lote, cuja caracterizao figura na tabela 22. As condies reaccionais que permitiram a sua produo esto descritas no captulo 2.4.1.1.1, figurando os resultados obtidos na tabela 28. A separao de fases no reactor foi bastante rpida, permanecendo a fase dos steres (biocombustvel) como sobrenadante, enquanto que o glicerol, mais denso, ocupava o nvel inferior (figura 6). O biodiesel obtido apresentava uma colorao amarela clara, ligeiramente opaca, logo aps a sua sntese e separao. Porm, aps a secagem, em rotavapor, adquiriu uma colorao amarela clara translcida e um agradvel aroma, bastante diferente do leo original. O glicerol obtido apresentava um aspecto viscoso e uma colorao acastanhada opaca. Em termos volumtricos, o glicerol, representou 20 a 25 %, relativamente ao volume total obtido no processo (biodiesel e glicerol), correspondendo em termos mssicos a cerca de 25 a 28 % do total.

Figura 6 - Reactor com biodiesel de colza (fase superior) e o respectivo glicerol (fase inferior)

77

Tabela 28 - Valores dos parmetros de caracterizao do B100 de colza, proveniente do 1 lote (Janeiro de 2006).
Parmetros Matria em suspenso ndice de acidez Quantidade de gua: - sem secagem - aps 1 secagem no rotavapor (40C, 45 min) - aps nova secagem no rotavapor (55C, 40 min) Estabilidade oxidao ndice de Iodo ndice de Saponificao Peso molecular Metil steres: - 1h - 2h (tempo de reaco de transesterificao) - 3h - 4h Unidades mg/kg mgKOH/g ppm h gI2/100g mg KOH/g g/mol Valor mdio 12,22 0,08 1493 855 211 6,82 110 189 887 95,6 98,4 98,6 94,5

% (m/m)

Como se pode constatar da anlise da tabela 28, o biodiesel de colza difere bastante do leo que lhe deu origem (tabela 22), sobretudo ao nvel da quantidade de matria em suspenso, do ndice de acidez e da estabilidade oxidao. Nos dois primeiros parmetros, a descida bastante acentuada e revela uma melhoria em relao matria-prima, resultado quer do processo reaccional quer de purificao, permitindo obter um biodiesel dentro dos requisitos da norma europeia no que respeita a estes parmetros, o que tambm conseguido em relao ao teor em gua (< 500 ppm) . Todavia, assiste-se a uma descida na estabilidade oxidao sem, contudo, comprometer a exigncia da EN14214. Ao nvel da transesterificao, ao fim de 2 horas de reaco, alcanou-se um teor de metil-steres que supera o teor mnimo exigido pela EN 14214.

3.2.2 Transesterificao do leo de Soja

O biodiesel de soja, produzido por via alcalina, apenas foi avaliado em termos de rendimento de transesterificao, no tendo sido efectuadas mais caracterizaes suplementares. O biodiesel produzido seguiu as condies reaccionais descritas no captulo 2.4.1.2. A separao de fases, mais uma vez, foi rpida, ficando os metil-steres como sobrenadante, em relao ao glicerol (figura 7). Em termos de aspecto, este biodiesel apresentava uma suave colorao amarela clara, translcida, aps secagem, e um agradvel aroma. Em relao ao volume, o biodiesel correspondia a cerca de 78 % do volume total de produto final (biodiesel e glicerol), representando o glicerol os restantes 22 % do volume. 78

Figura 7 - Ampola de decantao com biodiesel de soja (fase superior) e o respectivo glicerol (fase inferior) A tabela 29 refere-se aos resultados obtidos na transesterificao do leo de soja, nas condies tidas como optimizadas, sendo observvel que o melhor resultado foi obtido ao fim de trs horas de reaco. No entanto, nas condies experimentais utilizadas (razo molar metanol:leo de 5,5:1 e 1,06% de catalisador), o teor mais elevado obtido (94%) fica aqum do que seria expectvel para um leo virgem e igualmente inferior ao teor mnimo exigido pela EN 14214. Todavia, salienta-se que a razo metanol:leo utilizada foi ligeiramente menor do que era suposto utilizar-se (6:1), considerada como optimizada. Tabela 29 - Transesterificao qumica de leo de soja (Valouro).
Parmetros Temperatura: 54,5C leo soja: 50,01g Metanol: 10,93 g NaOH: 0,53 g Tempo de reaco(h) 1 2 3 4 % de metil-steres obtidos 90,2 90,3 94,0 91,8

3.2.3 Transesterificao de leos usados

Realizaram-se vrios ensaios de transesterificao alcalina com trs diferentes lotes de OAU. A caracterizao desses mesmos lotes figura na tabela 26, encontrando-se descritas no captulo 2.4.1.3. as condies reaccionais que permitiram a obteno dos vrios metil-steres, tendo sido essas mesmas condies, idnticas nos trs lotes.

79

Os dois primeiros lotes de OAU foram transesterificados em reactores (figura 8), enquanto que a reaco de transesterificao do terceiro lote ocorreu, em erlenmyer, numa incubadora. Aps a reaco de transesterificao, em todos os casos, a separao de fases foi relativamente rpida (figura 9). Em termos de aspecto e caractersticas fsicas visveis, os trs tipos de biodiesel obtidos eram muito semelhantes, apresentando uma colorao amarela intensa, ligeiramente opaca, antes de ser desumidificados com sulfato de sdio anidro, mas com um aspecto translcido quando desumidificados.

Figura 8 - Reactor com biodiesel de OAU (1 lote) (fase superior) e o respectivo glicerol (fase inferior)

Figura 9 - Ampola de decantao com B100 do OAU do 2 lote e o respectivo glicerol (fase inferior) 80

Em termos volumtricos, o biodiesel correspondia a cerca de 75 % do volume total do produto final (biocombustvel e glicerol). Em relao a caractersticas organolpticas, o biodiesel de OAU apresentava um odor caracterstico, embora ligeiramente diferente do leo que lhe dera origem, e diferente de um biodiesel proveniente de leo virgem. O glicerol obtido, como subproduto, apresentava uma colorao castanha/laranja, intensa e escura, e um odor pronunciado, com um travo a rano. A tabela 30 refere-se aos resultados obtidos na transesterificao dos vrios OAUs, nas condies tidas como optimizadas. Tabela 30 - Valores dos parmetros de caracterizao do biodiesel de leos usados do 1 lote ( Maro de 2006), 2 lote (Maro de 2006) e 3 lote (Agosto de 2007).
Parmetros Matria em suspenso ndice de acidez Quantidade de gua sem secagem Estabilidade oxidao ndice de Iodo Massa volmica a 15 C Viscosidade Metil steres: - 1h - 2h (tempo de reaco) - 3h - 4h Unidades mg/kg mgKOH/g ppm h gI2/100g kg/m3 mm2/s Valor mdio dos ensaios do B100 dos OAU 1 lote 2 lote 3 lote 43,7 42,9 40,2 0,086 0,11 n.d. 2591 2603 1267 2,40 1,36 3,55 121,5 119,9 n.d. 888,2 n.d. n.d 4,135 n.d. n.d 93,1 94,4 94,1 94,4 92,9 93,4 94,3 92,9 87,1 85,8 87,5 86,5

% (m/m)

Da anlise da tabela 30 verifica-se que as caractersticas do combustvel obtido diferem substancialmente do leo que lhe deu origem. As maiores diferenas verificam-se em relao matria em suspenso, ao ndice de acidez e viscosidade, que no biodiesel obtido significativamente menor comparativamente ao leo que serviu de matria-prima, e que se encontram dentro das especificaes da norma europeia. Em relao ao teor em steres, os valores obtidos so inferiores a 96,5%, o que para leos usados de fritura no de todo de estranhar, dada a elevada probabilidade de existirem outras substncias presentes que no so passveis de ser transesterificadas. Deve ser mencionado que todos os leos, antes de se proceder sua transesterificao, eram sujeitos a um processo de filtrao e secagem. Por lapso, em relao ao leo usado do 3 lote (Cantina do INETI), no primeiro ensaio no se procedeu a este processo prvio de preparao do leo, constando os resultados obtidos na tabela 31. Posteriormente repetiu-se o ensaio procedendo usual filtrao e desumidificao, figurando os resultados na tabela 30 (B100 de leo usado (3 lote)).

81

Tabela 31 - Transesterificao qumica de leo usado do 3 lote (Cantina do INETI).

Tempo de reaco % de metil-steres (h) 1 86,9 Temperatura: 55C leo usado: 50g 2 87,7 Metanol: 10,75 g 3 86,2 NaOH: 0,63 g 4 86,4 Observao: o leo usado no foi sujeito a qualquer processo de filtrao e secagem. Parmetros

Da anlise dos resultados da tabela 30 e da tabela 31, relativamente ao OAU do 3 lote, verifica-se que, neste caso, o tratamento preliminar de filtrao e secagem que antecedeu a reaco de transesterificao no condicionou significativamente os resultados da catlise. Tal, justificado uma vez que, quer o teor em gua, quer a matria em suspenso no leo, no apresentavam valores muito elevados.

3.3 Desenho composto central (a 3 variveis) para optimizao das condies de secagem do biodiesel
Tal como j foi referido no captulo 2.4.2, procedeu-se construo de um desenho composto central para a optimizao do processo de secagem, do biocombustvel, em rotavapor. Esse desenho composto central conjugava o efeito de trs variveis independentes, a temperatura, a presso e o tempo, tendo-se avaliado a sua influncia, quer no teor em gua, quer na estabilidade oxidao do biodiesel, obtido a partir do leo alimentar usado do primeiro lote. O teor inicial de gua presente no biodiesel, logo aps as lavagens e antes de qualquer processo de secagem, foi de 2591 ppm. A tabela 32 apresenta as condies de secagem em rotavapor e as respectivas percentagens de gua retirada. O biodiesel aps secagem apresentava-se translcido (figura 10). Tabela 32 - Valores dos teores em gua e correspondente percentagem de gua retirada, em cada ensaio, comparando com o valor inicial de 2591 ppm.
Variveis independentes T (C) P (mbar) t (min) 46 117 20 1 64 117 20 2 46 253 20 3 64 253 20 4 46 117 50 5 64 117 50 6 46 253 50 7 64 253 50 8 55 185 35 pont.mdio Sequncia Varivel dependente Teor em gua (ppm) 1061,8 605,6 2081,1 2230,3 830,8 491,6 1243,9 1702,2 1439,4 % de gua retirada 59,0 76,6 19,7 13,9 67,9 81,0 52,0 34,3 44,4

82

Tabela 32 (continuao)
Variveis independentes T (C) P (mbar) t (min) 55 185 35 pont.mdio 55 185 35 pont.mdio 40 185 35 9 70 185 35 10 55 70 35 11 55 300 35 12 55 185 10 13 55 185 60 14 Sequncia Varivel dependente Teor em gua (ppm) 1440,6 1496,8 1358,8 1470,5 424,7 2192,9 1931,9 1513,2 % de gua retirada 44,4 42,2 47,6 43,2 83,6 15,4 25,4 41,6

Face aos resultados obtidos, possvel concluir que existe uma efectiva interaco entre os trs factores em estudo, variando a eficcia na secagem entre os 13,9 % e os 83,6 %. A melhor condio reaccional, em termos de secagem, foi a que decorreu durante 35 minutos, temperatura de 55C e a uma presso de 70 mbar (0,07 atm). Em termos genricos, pode-se afirmar que com o aumento da temperatura, assim como com o aumento do tempo de reaco, a eficincia na secagem aumenta. Em termos de presso do sistema, quanto menor a presso, maior a eficincia na secagem. Todavia, o desenho composto central construdo permitiu uma anlise muito mais detalhada e profunda de cada parmetro e da interaco entre eles. As respostas obtidas foram analisadas segundo o algoritmo de Yates, de modo a determinar a relevncia de cada factor e as suas interaces. Como se pode analisar da tabela 33, com base nos valores do algoritmo obtidos, o parmetro com maior relevncia na secagem do biodiesel foi a presso, seguindo-se o tempo e depois a temperatura. Em termos de interaco entre dois factores em simultneo, o binmio temperatura/presso foi o que se mostrou mais relevante, seguido do binmio presso/tempo e por ltimo o binmio temperatura/tempo. Tabela 33 - Respostas segundo o algoritmo de Yates, para a secagem do biodiesel. Efeito (parmetros) Presso Tempo Temperatura Interaco temperatura/presso Interaco presso/tempo Interaco temperatura/tempo Interaco temperatura/presso/tempo Valor obtido pelo Algoritmo de Yates [1066,978] [-427,538] [-46,9925] [350,7175] [-255,078] [106,5325] [48,0425]

O desenho composto central apresentou um coeficiente de determinao (R2) que correspondeu a 0,965, revelando uma boa correlao entre os dados. Quanto mais prximo o coeficiente estiver do valor 1, melhor ser a representatividade. Com base nos coeficientes polinomiais obtidos por regresso mltipla linear, obteve-se a seguinte equao: Teor em gua (ppm) = 500,59 +18,84T + 4,17P - 25,27t - 0,78T2 - 0,02P2 + 0,21t2 + 0,39Tt + 0,29tP - 0,13Pt 83

onde T representa a temperatura, P a presso e t o tempo. Com base nesta equao, construram-se vrias tabelas (tabelas 34, 35 e 36) representativas do efeito conjugado dos vrios factores, na quantidade de gua esperada no final do processo de secagem, atendendo a que a quantidade inicial era de 2591 ppm. Os valores escolhidos como constantes correspondem, em todos os casos, ao valor do ponto mdio do desenho composto central.

Figura 10 - Biodiesel de leo alimentar usado (1 lote) - seco ( esquerda) e sem secagem ( direita) Tabela 34 Efeito conjugado da temperatura e da presso, ao fim de 35 minutos, sobre a quantidade de gua esperada na amostra de biodiesel.
70 620,7 553,3 446,9 301,5 117,2 0 0 100 851,2 826,7 763,3 660,9 519,6 339,3 120,1 130 1043,8 1062,3 1041,9 982,5 884,1 746,8 983,3

40 45 50 55 60 65 70

Presso (mbar) 160 190 220 1198,7 1315,7 1395,0 1260,1 1420,2 1542,4 1282,7 1485,7 1650,9 1266,3 1512,3 1720,4 1210,9 1499,9 1751,0 1116,6 1448,5 1742,7 983,3 1358,3 1695,4

250 1436,5 1626,9 1778,3 1890,8 1964,4 1999,1 1994,8

280 1440,1 1673,5 1868,0 2023,5 2140,0 2217,6 2256,3

300 1421,6 1683,6 1906,7 2090,9 2236,1 2342,3 2409,7

Temperatura (C)

2500 2000 quantidade de gua (ppm) 1500 1000 500 0 70 130 190 250 60 70 Quantidade de gua (ppm) 2000-2500 1500-2000 1000-1500 500-1000 0-500

300 40

50

Presso (mbar)

Temperatura (C)

Figura 11- Efeito conjugado da presso e da temperatura na quantidade de gua esperada na amostra de biodiesel, aps 35 minutos de secagem no rotavapor 84

A figura 11 representa a superfcie de resposta dos resultados expressos na tabela 34, relativos ao efeito conjugado da presso e da temperatura na quantidade de gua esperada no biodiesel. Da sua anlise constata-se que para um tempo de secagem de 35 minutos, quanto menor a presso do sistema, menores seriam as quantidades de gua remanescentes. O aumento de presso diminui a eficincia de secagem. A baixas presses, o aumento da temperatura permite uma secagem mais eficaz, enquanto que a presses mais elevadas (>160 mbar) parece ter um efeito menos efectivo. Todavia, h alguns pontos em que tal no se verifica, mas a tendncia do sistema parece ser esta. necessrio referir, mais uma vez, que os valores que figuram nas tabelas representam a quantidade de gua remanescente, expectvel, da secagem do biodiesel, que inicialmente apresentava um teor de gua de 2591 ppm. Os valores assinalados com a cor azul indicam as condies que permitiriam obter um biocombustvel aceitvel em termos de teor de gua (<500 ppm), segundo a norma EN 14214, atendendo a que inicialmente o valor era de 2591 ppm. necessrio referir que o quantitativo de gua, na tabela, nas condies de 65C e 70C, presso de 70 mbar, aparece como zero (a vermelho) pois o desenho composto central indicava valores negativos e tal no seria possvel. Tabela 35 Efeito conjugado da temperatura e do factor tempo, presso constante de 185 mbar, sobre a quantidade de gua esperada na amostra de biodiesel.
10 2330,3 2123,0 1957,4 1833,3 1750,9 1710,0 1710,8 20 2094,9 1912,5 1771,8 1672,7 1615,2 1599,3 1625,1 Tempo (minutos) 30 40 1885,0 1700,9 1727,7 1568,4 1611,9 1477,6 1537,7 1428,4 1505,2 1420,8 1514,3 1454,9 1565,0 1530,5 50 1542,4 1434,9 1369,0 1344,8 1362,1 1421,1 1521,8 60 1409,5 1327,0 1286,1 1286,8 1329,1 1413,0 1538,6 Temperatura (C)

40 45 50 55 60 65 70

2500 Quantidade de gua (ppm) 2000 1500 1000 500 0 10 40 55 20 30 40 Tempo (minutos) 70 50 60 quantidade de gua (ppm) 2000-2500 1500-2000 1000-1500 500-1000 0-500 Temperatura (C)

Figura 12 - Efeito conjugado da temperatura e do factor tempo, na quantidade de gua esperada, presso constante de 185 mbar, no rotavapor 85

A figura 12 representa a superfcie de resposta dos resultados expressos na tabela 35, relativos ao efeito conjugado da temperatura e do factor tempo, na quantidade de gua esperada, presso constante de 185 mbar, no rotavapor. Da anlise verifica-se, antes de mais, que tais condies do sistema (presso a 185 mbar) no permitem uma secagem suficiente do biocombustvel de forma a enquadrar-se na norma EN 14214. Verifica-se que para tempos de reaco abaixo dos 30 minutos, o aumento da temperatura tem um efeito positivo na eficincia da secagem. Verifica-se, igualmente, que o aumento do tempo de exposio s condies reaccionais permite uma diminuio do teor de gua, independentemente da temperatura do sistema. Todavia, a partir dos 30 minutos e acima dos 55C, a tendncia parece inverter-se diminuindo a eficcia de secagem. Tabela 36 Efeito conjugado da presso e do factor tempo, temperatura constante de 55C, sobre a quantidade de gua esperada. Tempo (minutos) Presso (mbar)
10 20 30 40 50 60 70 224,1 219,7 241,0 287,8 360,4 458,6 100 712,8 667,6 648,1 654,2 686,0 743,5 130 1152,8 1066,9 1006,6 972,0 963,1 979,8 160 1544,2 1417,6 1316,6 1241,2 1191,5 1167,5 190 1887,1 1719,7 1577,9 1461,8 1371,4 1306,6 220 2181,3 1973,2 1790,7 1633,8 1502,6 1397,1 250 2427,0 2178,1 1954,8 1757,3 1585,3 1439,0 280 2624,0 2334,4 2070,4 1832,1 1619,4 1432,4 300 2728,4 2411,6 2120,5 1855,0 1615,1 1400,9

3000,0 2500,0 2000,0 1500,0 1000,0 500,0 70 130 0,0 190 250 30 50 Tempo (minutos) 300 10 Quantidade de gua (ppm) Quantidade de gua (ppm) 2500,0-3000,0 2000,0-2500,0 1500,0-2000,0 1000,0-1500,0 500,0-1000,0 0,0-500,0

Presso (mbar)

Figura 13 Efeito conjugado da presso e do factor tempo de secagem, sobre a quantidade de gua esperada, temperatura constante de 55C, no rotavapor A figura 13 representa a superfcie de resposta dos resultados expressos na tabela 36, relativos ao efeito conjugado da presso e do factor tempo de secagem, sobre a quantidade de gua esperada, temperatura constante de 55C, no rotavapor. Da anlise verifica-se que com o aumento da presso, o sistema responde com uma diminuio na eficincia de secagem. Com 86

o aumento do tempo, assiste-se basicamente a uma diminuio dos quantitativos de gua, excepto para valores muito baixos de presso (<100 mbar) em que parece ter um efeito inverso. A uma presso de 70 mbar e a uma temperatura de 55C, o mais curto espao de tempo de exposio o mais aconselhvel, sendo que todos os valores da coluna dos 70 mbar se encontram abaixo do mximo admitido na norma EN 14214, respeitante quantidade de gua num biodiesel.

3.3.1 Relao entre as condies de secagem e a estabilidade oxidao

Aps a realizao dos ensaios e a determinao da quantidade de gua presente em cada amostra, determinou-se igualmente a estabilidade oxidao, a fim de se analisar as possveis implicaes que o processo de secagem pudesse ter na estabilidade oxidao do biodiesel (tabela 37). Tal como j foi referido, o biodiesel que serviu de base para este estudo foi o obtido a partir do primeiro lote de OAU. O teor mdio de gua que o biodiesel apresentava, logo aps a lavagem, era de 2591 ppm, apresentando uma estabilidade oxidao de 2,4 horas. Tabela 37 - Valores dos teores em gua e da estabilidade oxidao de cada sequncia, definida em desenho composto central.
Variveis independentes Sequncia 1 2 3 4 5 6 7 8 Ponto mdio1 Ponto mdio2 Ponto mdio3 9 10 11 12 13 14 T (C) 46 64 46 64 46 64 46 64 55 55 55 40 70 55 55 55 55 P (mbar) 117 117 253 253 117 117 253 253 185 185 185 185 185 70 300 185 185 t (min) 20 20 20 20 50 50 50 50 35 35 35 35 35 35 35 10 60 Variveis dependentes Teor em Est. oxidao (h) gua (ppm) 1061,8 2,33 605,6 2,48 2081,1 2,38 2230,3 2,49 830,8 2,44 491,6 2,35 1243,9 2,53 1702,2 2,19 1439,4 1440,6 1496,8 1358,8 1470,5 424,7 2192,9 1931,9 1513,2 2,38 2,38 2,38 2,33 2,29 2,28 2,27 2,26 2,25

87

Em termos de estabilidade oxidao, os vrios ensaios no se mostraram significativamente diferentes, apresentando apenas pequenas diferenas em relao ao valor inicial da estabilidade, que era de 2,4 horas. Aparentemente, o processo de secagem, em rotavapor, no influencia a estabilidade oxidao do biocombustvel. Deve-se salientar, no entanto, que a estabilidade oxidao apresentada muito inferior que minimamente aceitvel num biodiesel, segundo a norma EN 14214, que corresponde a 6 horas. Salienta-se, igualmente, que o biodiesel estudado, em termos de estabilidade oxidativa, era de um OAU, que pela sua prpria natureza apresenta, j por si, valores de estabilidade muito baixos.

3.4 Transesterificao enzimtica de leos vegetais

Figuram neste captulo os resultados da anlise do teor proteico/enzimtico de cada lipase, assim como os resultados dos diversos ensaios de transesterificao enzimtica dos vrios leos vegetais.

3.4.1 Escolha da enzima

Tal como foi indicado no captulo 2.3, procedeu-se determinao do teor enzimtico em relao s lipases disponveis. A determinao do teor enzimtico, calculada a partir da determinao proteica, fez-se segundo a metodologia de Lowry, com recurso densidade ptica determinada por espectrofotometria. Construiu-se uma recta de calibrao (figura 14), recorrendo a uma soluo-padro de albumina de soro bovino.
0,2 0,15 0,1 0,05 0 0 -0,05 Absorvncia (nm ) 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 y = 0,5433x - 0,0029 R2 = 0,9962

Figura 14 - Recta de calibrao da soluo padro de albumina de soro de boi A recta de calibrao obtida apresentou um ptimo coeficiente de correlao (R2 = 0,9962), muito perto de 1, o que demonstra uma reduzida disperso dos dados experimentais em torno 88

Quantidade de protena (mg)

da recta. A partir da equao da recta de calibrao e sabendo os valores de absorvncia obtidos para cada enzima testada, determinou-se a concentrao enzimtica de cada amostra (tabela 38). Tabela 38 - Enzimas e respectivas concentraes. Enzimas imobilizadas Lipozyme RM IM Novozym 435 Lipozyme TL IM Enzima Solvel Lipozyme TL 100L Teor proteico/enzimtico (mg/mg suporte) 0,0475 0,0578 0,0982 Teor proteico/enzimtico (mg/ml soluo) 22,47

Ao determinar-se a concentrao de todas as enzimas disponveis para os ensaios, tornou-se possvel proceder aos ensaios comparativos, em termos de rendimento de transesterificao. Deste modo, testaram-se as vrias enzimas usando as condies reaccionais do ponto mdio, definidas em desenho composto central (ver captulo 2.4.3.2), que corresponderam a um ensaio com 50 g de leo (colza), a uma temperatura de 37,5C, com uma quantidade enzimtica pura de 70 mg, uma razo molar metanol:leo de 5:1 e uma quantidade de gua de 6 g (12% m/m). Os resultados obtidos figuram na tabela 39 e na figura 15. Tabela 39 Percentagem de transesterificao obtida ao longo do tempo, usando as vrias enzimas, nas condies definidas no ponto mdio do desenho composto central.
Enzima Lipozyme TL 100L Novozym 435 Lipozyme TL IM Lipozyme RM IM 1h 66,7 n.d 51,8 n.d 3h 85,1 n.d 60,5 0,37 % de Transesterificao 5h 7h 98,5 95,5 n.d 3,85 88,1 91,5 0,34 0,37 21 h 98,8 3,97 98,0 0,48 24 h 95,9 3,79 94,5 0,52

Enzimas

% de transesterificao

120 100 80 60 40 20 0 1h 3h 5h 7h 21h 24h Tempo (h) Lipozyme TL100L Novozym 435 Lipozyme TLIM Lipozyme RMIM

Figura 15 Percentagem de transesterificao obtida ao longo do tempo, usando as vrias enzimas, nas condies do ponto mdio (T =37,5 C; L= 70 mg; A= 6 g; R= 5:1) 89

De acordo com estes resultados, apenas duas lipases apresentaram valores de transesterificao prximas do valor mnimo admitido num biodiesel, segundo a EN 14214 (96,5%). Deste modo, apenas se mostrava com relevante interesse a enzima imobilizada Lipozyme TL IM e a enzima solvel Lipozyme TL 100L. Como os ensaios de transesterificao enzimtica visavam a optimizao do processo, tornava-se imperioso que a enzima usada pudesse ser reutilizada, pois esse um dos aspectos que viabiliza o processo a nvel industrial. Das duas enzimas cujos rendimentos foram aceitveis, apenas a enzima Lipozyme TL IM podia ser reutilizada uma vez que se apresentava na forma imobilizada. A Lipozyme TL 100L apenas poderia ser encarada como aceitvel nos ensaios, caso fosse imobilizada, o que no se propunha no presente trabalho. Ambas as lipases apresentam rendimentos muito semelhantes e provem do mesmo organismo, o fungo Thermomyces lanuginosus, dai a designao TL. Deste modo, optou-se por se realizarem todos os ensaios experimentais relativos transesterificao enzimtica recorrendo lipase imobilizada Lipozyme TL IM.

3.4.2 Desenho composto central (a 4 variveis) para produo de biodiesel por via enzimtica
Como j foi referido no captulo 2.4.3.1, construiu-se um desenho composto central para optimizao do processo de transesterificao enzimtica, conjugando o efeito de quatro variveis independentes: temperatura, quantidade de gua, quantidade de protena e razo metanol:leo. Os ensaios para o desenho composto central foram realizados usando leo de colza e a lipase Lipozyme TL IM. O tempo reaccional nos vrios ensaios foi de 15 horas, sendo que a quantidade de leo em cada ensaio foi sempre de 50 g. Deve ser mencionado que inicialmente o desenho composto central foi elaborado usando o leo do primeiro lote. Todavia, esse mesmo leo foi totalmente consumido nestes ensaios, tendo alguns ensaios posteriores de repetio sido realizados com o leo do segundo lote. Salienta-se que, tal como se pode constatar no captulo 3.1.1, as diferenas qualitativas entre ambos os leos no eram significativas, pelo que se considerou que no haveria problema na utilizao do novo lote. Na tabela 40 encontram-se os valores percentuais obtidos de metil-steres de colza, em funo das condies reaccionais definidas em desenho composto central, onde a varivel T corresponde temperatura, L a quantidade de protena (lipase), M a quantidade de metanol e A a quantidade de gua.

90

Tabela 40 - Valores relativos percentagem de metil-steres de colza, em funo das condies reaccionais definidas em desenho composto central.
Ensaio 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 1' 2' 3' 4' 5' 6' 7' 8' pm pm pm Variveis independentes TC L (mg) M (g) A (g) 33 50,19 7,01 3 44 50,04 7,01 3 33 90,15 7,11 3 44 90,09 7,06 3 33 50,08 10,51 3 44 49,99 10,55 3 33 90,03 10,53 3 44 90,02 10,54 3 33 50,44 7,05 9 9 44 50,05 7,01 33 90,22 7,02 9 44 89,98 7,02 9 33 50,35 10,55 9 44 49,99 10,54 9 33 89,99 10,5 9 44 90,16 10,5 9 25 70,11 8,77 6 48 70,01 8,82 6 38 30,14 8,78 6 38 110,20 8,76 6 38 70,08 5,3 6 38 70,27 12,27 6 38 70,08 8,78 0 38 70,12 8,77 12 38 70,20 8,77 6 38 70,19 8,78 6 38 70,07 8,76 6 Varivel dependente % de steres 71,8 53,4 75,2 5,0 40,0 29,0 43,0 21,2 80,1 88,2 86,7 87,8 92,6 96,0 96,1 97,0 95,0 20,75 89,2 95,0 74,0 63,5 0,28 91,5 94,3 91,3 93,0 Valor terico esperado % de steres 78,1 40,3 72,4 16,1 49,0 23,2 52,8 8,82 87,8 83,6 97,0 74,4 86,0 94,5 100,0 95,0 80,8 48,7 93,6 90,1 73,6 63,7 0 91,9 87,9 87,9 87,9

necessrio referir que na tabela 40, os valores de temperatura de 33 e 38C, indicados, no desenho composto central correspondiam, respectivamente, a 31 e 37,5C. Deve ser

mencionado que o valor ilustrado na tabela 40, relativamente quantidade de protena, corresponde quantidade de lipase pura. Em termos de lipase imobilizada (enzima + suporte), em cada ensaio, os valores adicionados foram sensivelmente 10 vezes superiores, uma vez que a concentrao enzimtica era de 0,0982 mg/mg suporte. Nesta tabela, que ilustra a percentagem efectiva de metil-steres obtidos nos vrios ensaios e os valores tericos expectveis em funo do desenho composto central, pode constatar-se que existe uma elevada correlao e representatividade, sendo que em 74% dos valores a correlao entre os dados da mesma ordem de grandeza e apenas diferem entre eles (real e terico) em menos de 10%. O prprio coeficiente de determinao (R2 = 0,908) foi relativamente elevado. Os resultados obtidos permitem concluir que existe uma efectiva interaco entre os parmetros 91

em estudo (variveis independentes), tendo o rendimento de transesterificao variado entre 0,28 e 97%. A melhor condio reaccional, em termos de resultados experimentais obtidos, foi a que decorreu a uma temperatura de 44C, usando cerca de 90 mg de protena, 10,5 g de metanol e 9 g de gua destilada, obtendo-se um rendimento em metil steres de 97%, valor muito prximo do teoricamente previsto (95%). Todavia, com as condies reaccionais de temperatura de 33C, 90 mg de protena, 10,5 g de metanol e 9 g de gua destilada, obteve-se um rendimento de 96%, sendo expectvel, contudo, um valor um pouco superior (100%). De referir que, nestas condies, no ensaio 15, da tabela 40, est indicado o valor de 100, uma vez que no desenho composto central surgia um valor (105,3%) superior a um rendimento de 100%, o que no seria possvel. No ponto (7`), o problema colocou-se ao contrrio, ao apresentar um valor negativo (-0,7%), optando-se por assumir-se o valor 0%. Em termos genricos pode afirmar-se que com o aumento da temperatura, mantendo a quantidade de gua no sistema com valores baixos, os rendimentos de transesterificao diminuem. Todavia, com teores elevados de gua no sistema, a temperatura no parece ter muito efeito. Teores significativos de gua no sistema induzem a um aumento da percentagem de transesterificao. Contudo, um aumento da quantidade de metanol induz a uma reduo nos teores de metil-steres. Variando apenas a quantidade de enzima, as diferenas nas percentagens de transesterificao no so significativas. Todavia, o desenho composto central construdo permite uma anlise muito mais detalhada e profunda de cada parmetro e da interaco entre eles. As respostas obtidas foram analisadas segundo o algoritmo de Yates e tal como se pode analisar na tabela 41, o parmetro com maior relevncia correspondeu quantidade de gua, seguido da temperatura, da quantidade de protena e por ltimo da razo molar metanol:leo. Em termos de interaco entre dois factores, o binmio temperatura/gua foi o que se mostrou mais relevante, seguido do binmio metanol/gua, do binmio temperatura/protena, do binmio protena/gua, do binmio temperatura/razo molar (metanol/leo) e, por ltimo, do binmio protena/razo molar (metanol/leo). Tabela 41 - Respostas segundo o Algoritmo de Yates, para a transesterificao enzimtica.
Efeito (parmetros) gua Temperatura Protena (lipase) Razo molar metanol/leo Interaco temperatura/gua Interaco razo molar/gua Interaco temperatura/protena Interaco protena/gua Interaco temperatura/razo molar Interaco protena/razo molar Valor obtido pelo Algoritmo de Yates [48,2375] [-13,4875] [-4,8875] [-4,1625] [16,8625] [13,8875] [-9,0125] [7,5625] [6,3625] [4,8125]

92

Os coeficientes polinomiais, obtidos por regresso mltipla linear, permitiram obter a seguinte equao: Percentagem de metil-steres = - 51,52 + 9,90T + 0,23L + 1,44M 13,63A 0,195T2 + 0,0025L2 1,58M2 1,17A2 0,04TL + 0,32TM + 0,51TA + 0,07LM + 0,06LA + 1,32MA onde T corresponde temperatura, L quantidade de protena, M ao metanol e A gua. Em seguida, figuram cinco tabelas (tabelas 42, 43, 44, 45 e 46), com as respectivas representaes grficas (figuras 16, 17, 18, 19 e 20), representativas do efeito conjugado dos vrios factores, observando-se o seu efeito relativamente ao rendimento em metil-steres (valores tericos expectveis). Os valores apresentados pressupem, sempre, uma quantidade fixa de leo de 50 g, por ensaio. Tabela 42 Percentagem de transesterificao terica, face ao efeito conjugado da temperatura e da quantidade de protena, assumindo a quantidade fixa no sistema de 8,76 g de metanol e 6 g de gua, durante 15 horas.
Protena (mg) 50 70 71,7 80,8 86,5 91,4 91,5 92,2 86,8 83,2 72,3 64,5 48,1 36,1

25 30 35 40 45 50

30 64,6 83,6 92,8 92,4 82,1 62,1

90 91,9 98,2 94,8 81,6 58,7 26

110 100 100 99,4 82 54,8 17,9

0-10 20-30 40-50 60-70 80-90

Temperatura (C)

10-20 30-40 50-60 70-80 90-100

Percentagem de steres

100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 30 45 50 70 35 40 110 25 30

Temperatura (C)

Protena (mg)

Figura 16 - Efeito conjugado da temperatura e da quantidade de lipase (assumindo a quantidade fixa no sistema de 8,76 g de metanol e 6 g de gua, durante 15 horas) na percentagem de steres obtidos

93

Na tabela 42, relativa ao efeito conjugado da temperatura e da quantidade de protena, os dois valores que se encontram a verde, com o valor de 100 (%), efectivamente no desenho composto central correspondiam a valores percentuais de metil-steres acima de 100, pelo que se colocou o valor mximo terico. A figura 16 representa a superfcie de resposta dos resultados expressos na tabela 42. Da sua anlise verifica-se que um aumento da temperatura positivo na transesterificao, at um valor de 35C, a partir do qual a percentagem de metil-steres decai, devido, provavelmente, desactivao da lipase por efeito da temperatura, que ocorre nas condies reaccionais referidas na tabela 42. Verifica-se, igualmente, que para valores de temperatura iguais ou inferiores a 35C, se assiste a um aumento no teor em steres acompanhando o aumento na quantidade de lipase utilizada. Tabela 43 Percentagem de transesterificao terica, face ao efeito conjugado da temperatura e da quantidade de metanol, assumindo a quantidade fixa no sistema de 70 mg de protena e de 6 g de gua, durante 15 horas.
7 85,7 93,4 91,3 79,6 58,0 26,8 8 84,1 93,4 93,0 82,8 62,9 33,3 Metanol (g) 9 10 79,4 71,5 90,3 84,1 91,5 86,9 83,0 79,9 64,6 63,2 36,6 36,7 Temperatura (C) 11 60,5 74,6 79,0 73,7 58,6 33,7 12 46,2 62,0 68,0 64,2 50,8 27,5

25 30 35 40 45 50
90-100 80-90 70-80 60-70 50-60 40-50 30-40 20-30 10-20 0-10

100 90 Percentagem 80 70 de steres 60 50 40 30 20 10 0 7 8 9 10 11 Metanol (g) 12 25 35 45

Temperatura (C)

Figura 17 - Efeito conjugado da temperatura e da quantidade de metanol (assumindo a quantidade fixa no sistema de 70 mg de lipase e 6 g de gua, durante 15 horas) na percentagem de steres obtidos

94

Da anlise da figura 17, que representa a superfcie de resposta dos resultados expressos na tabela 43, correspondendo ao efeito conjugado da temperatura e da quantidade de metanol na percentagem de transesterificao, verifica-se um aumento na percentagem de

transesterificao medida que a temperatura aumenta at aos 35C, independentemente do teor de metanol presente. Para temperaturas superiores, a quantidade de metil-steres decai. Para temperaturas inferiores a 35C, medida que o teor em metanol aumenta no sistema, a percentagem de steres formados decai, devido, provavelmente, a efeitos de inibio da lipase pelo lcool. Esse decrscimo mais acentuado a partir de uma quantidade de metanol de 9 g, correspondendo, sensivelmente, a uma razo molar metanol:leo de 5:1. Tabela 44 Percentagem de transesterificao terica, face ao efeito conjugado da temperatura e da quantidade de gua, assumindo a quantidade fixa no sistema de 70 mg de protena e de 8,76 g de metanol, durante 15 horas.
0 32,3 27,5 12,9 0 0 0
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0

25 30 35 40 45 50
90-100 80-90 70-80 60-70 50-60 40-50 30-40 20-30 10-20 0-10

2 57,9 58,2 48,7 29,5 0,6 0

4 74,1 79,5 75,2 61,1 37,3 3,7

gua (g) 6 80,8 91,4 92,2 83,2 64,5 36,1

Temperatura (C)

8 78,2 93,9 99,8 96,0 82,4 59,1

10 66,2 87,0 98,0 99,3 90,9 72,7

12 44,8 70,7 86,9 93,3 89,9 76,9

Figura 18 - Efeito conjugado da temperatura e da quantidade de gua (assumindo a quantidade fixa no sistema de 70 mg de protena e 8,76 g de metanol, durante 15 horas) na percentagem de steres obtidos A figura 18 representa a superfcie de resposta dos resultados expressos na tabela 44, correspondendo ao efeito conjugado da temperatura e da quantidade de gua na percentagem de transesterificao. Da sua anlise, verifica-se um aumento da percentagem de 95

25

Percentagem de steres

6 gua (g)

10

35

12

Temperatura (C)

45

transesterificao at temperaturas na ordem dos 35C, valor a partir do qual se regista um imediato decrscimo, na maioria dos casos. At uma temperatura de 35C, medida que a quantidade de gua aumenta, at 8 g (16% m/m), a percentagem de transesterificao aumenta tambm. Ensaios sem adio de gua ao sistema conduzem a reduzidos teores em metilsteres, sendo que na tabela se encontram assinalados vrios valores a zero (vermelho), valores esses que eram negativos em desenho composto central. Estes dados mostram que necessrio ter uma dada quantidade de gua no sistema para que a lipase funcione da melhor forma. No entanto, para quantidades muito elevadas de gua, observa-se um decrscimo no teor em steres, indicando que a reaco de hidrlise estar presente com maior relevncia, prejudicando o desvio do equilbrio da reaco para a formao dos produtos (steres). Tornase evidente que a quantidade de gua no sistema e a temperatura so parmetros muito importantes no rendimento em steres metlicos. Tabela 45 Percentagem de transesterificao terica, face ao efeito conjugado da quantidade de protena e metanol, assumindo uma temperatura de 38C e uma quantidade de 6 g de gua, durante 15 horas.
7 96,1 89,8 85,4 83,1 82,7 8 95,9 91,0 88,1 87,1 88,1 Metanol (g) 9 10 92,6 86,1 89,1 84,0 87,6 83,8 88,0 85,7 90,4 89,5 Protena (mg) 11 76,5 75,7 77,0 80,2 85,4 12 63,7 64,3 66,9 71,5 78,1

30 50 70 90 110

90-100 80-90 70-80 60-70 50-60 40-50 30-40 20-30 10-20 0-10

Percentagem de steres

100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 7 8 9 10 11 12 30 50 70 90 110

Metanol (g)

Protena (mg)

Figura 19 - Efeito conjugado da quantidade de protena e de metanol (assumindo uma temperatura de 38C e a quantidade de 6 g de gua, durante 15 horas) na percentagem de steres obtidos

96

A figura 19 representa a superfcie de resposta dos resultados expressos na tabela 45, correspondendo ao efeito conjugado da quantidade de protena e de metanol na percentagem de transesterificao. Da sua anlise verifica-se que para valores abaixo dos 9 g de metanol (razo molar metanol:leo de 5:1), se obtm uma diminuio da percentagem de transesterificao, com o aumento da quantidade de lipase, embora para quantidades superiores de metanol, o aumento de lipase induza a um aumento da transesterificao. Regista-se, tambm, um aumento do teor em metil-steres, com o aumento de metanol, at um valor de cerca de 9 g, independentemente da quantidade de enzima adicionada, efeito que depois se inverte, mostrando haver inibio da lipase pela presena de elevadas concentraes de metanol. Para uma quantidade fixa de gua no sistema e uma temperatura de 38C, a influncia da quantidade de lipase adicionada parece estar relacionada com a quantidade de lcool presente no ensaio. Assim, para valores de metanol inferiores a 9 g, verifica-se um decrscimo da percentagem de steres com o aumento da concentrao de lipase, provavelmente devido a ter-se menores volumes de fase aquosa e, portanto, uma maior concentrao da preparao enzimtica, havendo limitaes transferncia de massa. Para os valores de metanol mais elevados, o comportamento o oposto, o que poder estar relacionado com o maior volume de fase aquosa e, portanto, uma maior disperso de lipase imobilizada e maior facilidade de contacto para a reaco. Os ensaios correspondentes utilizao de uma razo molar de 5:1 (aproximadamente 9 g de metanol) mostram no ser muito dependentes da quantidade de enzima presente no meio reaccional. As melhores condies de rendimento verificam-se at aos valores de 9 g de metanol e at ao valor de 50 mg de lipase pura, correspondendo a cerca de 500 mg de lipase imobilizada. Tabela 46 Percentagem de transesterificao terica, face ao efeito conjugado da quantidade de gua e metanol, assumindo uma temperatura de 38C e a quantidade de protena de 70 mg, durante 15 horas.
Razo molar 0 4:1 10,9 5:1 5,6 5:1 0 6:1 0 6:1 0 7:1 0 2 45,2 42,5 36,7 27,7 15,6 0,2 4 70,0 70,0 66,8 60,5 51,0 38,3 gua (g) 6 85,4 88,1 87,6 83,8 77,0 66,9 8 91,5 96,8 98,9 97,8 93,6 86,2 10 88,2 96,1 100 100 100 96,0 12 75,4 86,0 93,4 97,6 98,6 96,5

Metanol (g)

7 8 9 10 11 12

97

90-100 Percentagem 80-90 70-80 60-70 50-60 40-50 30-40 20-30 10-20 0-10

de steres 100

0 2 4

gua (g)

8 10 12

Figura 20 - Efeito conjugado da quantidade de gua e metanol (assumindo uma temperatura de 38C e a quantidade de protena de 70 mg, durante 15 horas) na percentagem de steres obtidos A figura 20 representa a superfcie de resposta dos resultados expressos na tabela 46. Da sua anlise, constata-se que o sistema sem gua apresenta valores muito reduzidos de metilsteres, sendo que os valores assinalados a cor vermelha apresentavam valores negativos, em desenho composto central, pelo que se assumiu o valor zero. Na ausncia de gua parece haver perda da actividade cataltica da lipase, provavelmente por remoo da camada de hidratao da enzima por parte do lcool. O aumento at 10 g de gua conduziu a um aumento da transesterificao para todos os valores de metanol. Valores muito baixos ou muito elevados de metanol induzem a reduzidos teores em steres no sistema, excepto para valores mais significativos de gua, sendo que o excesso de gua, com valores acima dos 10 g, tem um efeito negativo. Este efeito pode estar relacionado com a competio gua/lcool para a reaco, uma vez que a lipase pode levar a cabo tanto reaces de sntese como hidrlise. Os valores assinalados na tabela 46, com a cor azul, assumindo o valor 100, na realidade correspondiam, em desenho composto central, a valores acima de 100% de transesterificao obtida. Mais uma vez se verifica a grande importncia que o teor de gua exerce no sistema em termos de resultado na quantidade de metil-steres produzidos. As melhores condies parecem estar enquadradas entre valores de gua compreendidos entre 8 e 10 g, ou seja entre 16 e 20% m/m, e de metanol entre 8 e 11 g, que corresponde a razes molares aproximadas de 5:1 e 6:1, respectivamente. Nestas condies, os valores esto quase todos acima dos 96,5% em FAMEs, valor mnimo segundo a norma EN 14214. Deve ser referido que embora grande parte dos ensaios, para o desenho composto central, tenham sido realizados utilizando o leo de colza do 1 lote, houve necessidade de recorrer ao leo de colza do 2 lote para finalizar o estudo. No entanto, os resultados obtidos, neste caso, em termos de rendimento de 98

9 10 11 12 Metanol (g)

90 80 70 60 50 40 30 20 10 0

transesterificao mostraram-se anormalmente baixos. Ponderou-se a hiptese de a lipase ter perdido a sua capacidade cataltica, apesar de a embalagem ter sido aberta h relativamente pouco tempo e ter permanecido sempre devidamente acondicionada em frigorfico; outra hiptese seria o lcool ter hidratado e perdido parte das suas propriedades; outra seria o leo em causa apresentar uma qualidade muito baixa, que levaria a rendimentos de transesterificao igualmente baixos; ou mesmo ter havido alteraes do pH da gua utilizada e isso prejudicar a reaco. De modo a esclarecer a situao, realizaram-se vrias experincias com a lipase, recorrendo a outro leo (leo de girassol) (ver captulo 3.4.5) e a outro lote de lcool, tendo-se concludo que o problema estava associado ao lote de metanol que estava a ser utilizado. Os ensaios para o desenho composto central puderam, ento, prosseguir.

3.4.2.1 Determinao das melhores condies reaccionais

Tal como foi indicado no captulo 2.4.3.3, procurou-se determinar qual a melhor condio reaccional para a transesterificao enzimtica, tendo em conta a manipulao do desenho composto central, procurando recriar determinadas condies (tabelas 47, 48, 49 e 50). Foi tido em considerao que os valores dos vrios parmetros apenas poderiam variar dentro dos intervalos definidos nos nveis do desenho composto central, pois s assim apresentariam representatividade. A quantidade de leo, definida para cada ensaio, seria sempre 50 g. Tabela 47 Percentagem de transesterificao, tendo em conta a variao do parmetro temperatura, mantendo todos os outros parmetros como variveis controladas.
Varivel independente Temperatura (C) 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 Variveis controladas Protena (mg) Metanol (g) gua (g) Varivel dependente % de transesterificao (terica) 64,6 69,2 73,4 77,2 80,6 83,6 86,2 88,5 90,3 91,8 92,8 93,5 93,8 93,7 93,2 92,4 91,1

30

8,76

99

Da anlise da tabela 47 verifica-se que o melhor valor de temperatura para a reaco de transesterificao, nas condies reaccionais definidas, de 37C. A eficincia na transesterificao aumenta dos 25C at aos 37C, temperatura a partir da qual se regista um decrscimo no rendimento. notrio que at aos 37C, se verifica, em mdia, um aumento de eficincia na ordem dos 2,46 %, por cada grau clsio de aumento de temperatura. A partir dos 37C, assiste-se a uma diminuio do rendimento, todavia essa diminuio pouco significativa, na ordem dos 0,68%, por cada grau clsio de aumento de temperatura. Tabela 48 Percentagem de transesterificao tendo em conta a variao do parmetro protena, mantendo todos os outros parmetros como variveis controladas.
Varivel independente Protena (mg) 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100 105 110 Variveis controladas Temperatura Metanol (C) (g) gua (g) Varivel dependente % de transesterificao (terica) 93,8 92,9 92,1 91,4 90,8 90,4 90,0 89,8 89,8 89,8 89,9 90,3 90,7 91,2 91,9 92,7 93,6

37

8,76

Da anlise da tabela 48, verifica-se que em termos de quantidade de lipase, o melhor valor, tendo em conta as condies reaccionais, de 30 mg. Acima deste valor, at 70 mg, assiste-se a um decrscimo no rendimento da transesterificao. A partir dos 70 mg o rendimento vai aumentando com o aumento da quantidade de enzima disponvel, aproximando-se o rendimento, aos 110 mg, do obtido com as 30 mg. Deste modo, o melhor valor de lipase a utilizar seria o de 30 mg, quer em termos de rendimento quer pela economia de enzima que significaria.

100

Tabela 49 Percentagem de transesterificao tendo em conta a variao do parmetro metanol, mantendo todos os outros parmetros como variveis controladas.
Varivel independente Metanol (g) 5 5,5 6 6,5 7 7,5 8 8,5 9 9,5 10 10,5 11 11,5 12 12,27 Variveis controladas Temperatura Protena (C) (mg) gua (g) Varivel dependente % de transesterificao (terica) 88,2 91,5 94,0 95,8 96,8 96,9 96,3 94,9 92,7 89,6 85,8 81,3 75,9 69,7 62,7 58,6

37

30

Da anlise da tabela 49 verifica-se que em termos de quantidade de metanol, o melhor valor, tendo em conta as condies reaccionais, de 7,5 g. Valores crescentes at aos 7,5 g de metanol traduzem-se num aumento do teor em steres, valor a partir do qual o rendimento decresce significativamente, numa clara inibio por excesso de lcool. Tabela 50 Percentagem de transesterificao tendo em conta a variao do parmetro gua, mantendo todos os outros parmetros como variveis controladas.
Varivel independente gua (g) 0 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5 5 5,5 6 6,5 7 Variveis controladas Temperatura Protena (C) (mg) Varivel dependente

37

30

Metanol % de transesterificao (terica) (g) 36,6 52,5 59,6 66,1 72,0 77,3 82,1 7,5 86,2 89,8 92,7 95,1 96,9 98,1 98,75

101

Tabela 50 (continuao)
Varivel independente gua (g) 7,5 8 8,5 9 9,5 10 10,5 11 11,5 12 Variveis controladas Varivel dependente

Temperatura Protena Metanol % de transesterificao (terica) (C) (mg) (g) 98,8 98,8 97,1 95,4 93,1 37 30 7,5 90,2 86,7 82,6 77,9 72,7

Da anlise da tabela 50 verifica-se que em termos de quantidade de gua, o melhor valor, tendo em conta as condies reaccionais, de 7,5 g. bastante explcita a grande relevncia do parmetro gua no rendimento da transesterificao, tendo em conta a diferena de valores que se encontra entre os dois extremos em estudo, indo dos 36,6%, at, aproximadamente, os 99%. No final, aps a anlise de todos os valores obtidos no desenho composto central, ilustrados nas vrias tabelas (da 47 50) determinou-se, teoricamente, as condies optimizadas. Essas mesmas condies figuram na tabela 51. Tabela 51 - Condies iniciais optimizadas em desenho composto central, para 50 g de leo (colza). Variveis independentes Temperatura gua Protena Metanol (C) (g) (mg) (g) 37 7,5 30 7,5 Varivel dependente % de transesterificao (terica) 98,8

Todavia, aps a determinao destas condies (tabela 51) era ainda pertinente proceder-se a um novo e mais minucioso estudo de ensaios em torno destes valores, a fim de se averiguar se seria possvel obterem-se melhores rendimentos. O ponto de partida seria as condies ilustradas na tabela 51, procedendo-se a pequenas variaes, analisando-se o seu efeito. A tabela 52 ilustra os valores que se obtiveram aps nova modelao. Tabela 52 - Condies optimizadas aps uma nova manipulao em desenho composto central, para 50 g de leo (colza). Variveis independentes Temperatura gua Lipase (C) (g) (mg) 37 7 30 37 7,5 30 39 7,5 30 Metanol (g) 7,5 8 8 Varivel dependente % de transesterificao (terica) 98,8 99,2 99,6 102

Desta nova manipulao (tabela 52) considerou-se que as condies que permitiam um rendimento de 99,2% eram mais desejveis que as que permitiam um rendimento de 99,6%, uma vez que a diferena no era significativa e permitia uma poupana energtica (menor temperatura requerida no processo). Deste modo, ficaram definidas como condies optimizadas para a transesterificao enzimtica recorrendo enzima Lipozyme TL IM: Temperatura: 37C Quantidade protena: 30 mg Quantidade de metanol: 8 g Quantidade de gua: 7,5g Em termos molares, a quantidade de metanol (8 g) corresponderia, sensivelmente, a 0,25 moles, enquanto que a quantidade de leo de colza utilizada (50 g), corresponderia a 0,05 moles; o que corresponderia a uma relao molar metanol:leo de 5:1. Em relao proporo de enzima pura necessria (30 mg), esta seria 0,06 % (m/m). A adio de gua (7,5g) corresponderia a 15% (m/m). Os vrios ensaios de transesterificao que se seguiram, usaram estas mesmas condies, tidas como optimizadas. De modo a validar os resultados obtidos pela metodologia do desenho composto central, realizou-se um ensaio, nas condies optimizadas, utilizando o leo de colza (tabela 53). A reaco de transesterificao foi seguida ao longo de 15 horas, com o objectivo de se avaliar o tempo de equilbrio, ou seja, o tempo ao fim do qual a reaco estaria completa. Tabela 53 Percentagem de transesterificao, do leo de colza, ao longo do tempo.
Parmetros Temperatura: 37C leo soja: 50 g Lipase: 30 mg Metanol: 8 g gua: 7,5 g Tempo de reaco (h) 2 5 7 15 % de metil-steres 50,6 57,8 62,2 86,7

Da tabela 53 constata-se que houve um aumento do rendimento em steres com o tempo decorrido do ensaio. Todavia era expectvel que ao fim das 15 horas de reaco o rendimento fosse na ordem dos 99 %, tal como era esperado em funo dos dados tericos obtidos pelo desenho composto central (tabela 52), para o qual se considerou um tempo de reaco de 15 horas. Como isso no se verificou, achou-se pertinente repetirem-se alguns ensaios (tabela 54), procedendo-se a duas recolhas, uma ao fim de 15 horas de reaco e outra ao fim de 20 horas, de modo a avaliar se j se tinha atingido o equilbrio da reaco ao fim das 15 horas.

103

Tabela 54 Percentagem de transesterificao do leo de colza (50 g), ao fim de 15 e 20 horas.

Ensaio 1 ensaio 2 ensaio 3 ensaio 4 ensaio Temp. gua Lipase Metanol % de FAMEs obtida % de FAMEs obtida (C) (ml) (mg) (g) ao fim de 15 h ao fim de 20 h 37 8 40 8 89,9 % 91,9 % 37 7,5 30 8 86,7 % 89,1 % 44 9 90 10,5 91,4 % 44 3 90 7 7,3 % -

De acordo com os dados da tabela 54, as recolhas ao fim de 15 horas revelaram, na sua maioria, rendimentos inferiores aos expectveis. Nem mesmo nos ensaios ao fim de 20 horas de transesterificao foram obtidos os rendimentos esperados, face ao desenho composto central. Face aos resultados obtidos nas 15 e 20 horas, pode-se concluir que as diferenas so mnimas e que, aparentemente, o equilbrio reaccional est atingido ao fim de 15 horas de reaco. necessrio frisar que em todos os ensaios de transesterificao enzimtica com o leo de colza, independentemente das condies reaccionais, verificou-se, em menor ou maior escala, que as amostras obtidas apresentavam um aspecto de uma matriz emulsionada de cor amarela, havendo alguma dificuldade na separao de fases (figura 21(A)). A separao de fases s era eficaz aps centrifugao, verificando-se a deposio da lipase no fundo, sobrepondo-se uma matriz emulsionada e por fim a fase orgnica relativa ao biocombustvel, que dependendo dos ensaios era maior ou menor (figura 21(B)). Verificou-se, igualmente, que o granulado da preparao enzimtica (imobilizada) (figura 22(A)) se desfazia, na esmagadora maioria dos ensaios (figura 22(B)) .

(A)

(B)

Figura 21 - Tubo de centrifugao com a soluo final da transesterificao do ensaio 4 (tabela 55): (A) antes da centrifugao; (B) depois da centrifugao 104

(A)

(B)

Figura 22 (A) Erlenmeyer com os grnulos enzimticos (intactos); (B) Erlenmeyer com soluo transesterificada, sendo visvel os grnulos enzimticos desfeitos, no fundo

necessrio referir que nos vrios ensaios, constatou-se que, geralmente, quanto maior a percentagem de metil-steres obtidos no final da reaco de transesterificao, menor era a quantidade da matriz emulsionada e maior a fraco do biocombustvel, assim como melhor era a separao de fases (figura 23).

Figura 23 - Erlenmeyers com as solues finais da transesterificao dos ensaios 2, 14 e 12 (respectivamente 53,4%, 96 e 87,8% de FAMEs) (tabela 40), aps algum tempo de repouso

3.4.3 Produo via enzimtica de biodiesel a partir de leo de soja

Tal como referido no captulo 2.4.3.4 foram realizados diversos ensaios de transesterificao enzimtica do leo de soja Valouro, usando a lipase imobilizada Lipozyme TL IM. A

105

quantidade de leo utilizada em cada ensaio foi sempre de 50 g. Os resultados figuram nas tabelas 55 e 56. Tabela 55 Percentagem de transesterificao enzimtica (15 horas) do leo de soja Valouro.
Ensaio 1 ensaio 2 ensaio 3 ensaio 4 ensaio Temperatura (C) 30 37 37,5 44 Lipase (mg) 30 30 70 90 Metanol (g) 9 8 8,8 10,5 gua (g) 8 7,5 6 9 % de metil-steres 85,3 87,5 91,6 91,5

Os resultados obtidos com o leo de soja ficaram aqum do que era expectvel em funo do desenho composto central (tabela 40). Todavia, necessrio frisar que esse mesmo desenho composto central foi construdo utilizando leo de colza, que apresentava caracterstica distintas do leo de soja. As condies optimizadas, utilizadas no 2 ensaio da tabela 55, foram igualmente estudadas e determinadas em funo do leo de colza. Em particular, atendendo a que o peso molecular do leo de soja inferior ao do leo de colza, a quantidade de metanol adicionada teria de ser superior (8,9 g) para se alcanar a razo molar optimizada de 5:1. Todavia, os resultados confirmam, uma vez mais, os resultados procedentes do algoritmo de Yates e o efeito conjugado dos vrios parmetros (ver captulo 3.4.2). Todos os ensaios apresentaram um aspecto emulsionado no final de transesterificao, assim como o granulado enzimtico se desfez (figura 24). As solues obtidas tinham uma colorao branca bege, e aps centrifugao era distinta a separao de fases em que no fundo se encontrava a lipase, seguindo-se uma matriz coloidal e, o biocombustvel, como sobrenadante, com uma colorao amarela esbranquiada muito suave (figura 25).

Figura 24 - Erlenmeyers com as solues finais da reaco de

transesterificao dos ensaios 2, 1 e 4 (tabela 55), respectivamente da

esquerda para direita

106

Figura 25 - Tubo de centrifugao com a amostra final da transesterificao do ensaio 1 (tabela 55), depois da centrifugao

Tabela 56 Percentagem de transesterificao enzimtica (15 horas) do leo de soja Valouro, variando a quantidade de lipase e gua. Ensaio 1 ensaio 2 ensaio 3 ensaio 4 ensaio Temperatura (C) 30 30 30 30 Lipase (mg) 30 30 32 32 Metanol (g) 11 11 11 11 gua (g) 8 6 8 6 % de metil-steres 92,8 53,8 92,7 38,6

A tabela 56, referente a ensaios em que se variou a quantidade enzimtica e a quantidade de gua, comprova, mais uma vez, que a quantidade de gua um importante parmetro na transesterificao enzimtica. Mantendo constantes os parmetros quantidade de lipase, leo, metanol e temperatura e fazendo variar apenas a quantidade de gua, verifica-se que este parmetro afecta significativamente o teor em steres. A diminuio de gua conduz a uma diminuio efectiva no teor em FAMEs. Estes resultados reforam as tendncias observadas no desenho composto central (ver captulo 3.4.2). Verificou-se, novamente, que aps a reaco de transesterificao, as vrias amostras (tabela 56) apresentavam o aspecto de uma emulso. Aps centrifugao, os ensaios n. 2 e n. 4 apresentavam, contudo, uma boa separao de fases, das quais a fraco relativa ao biocombustvel era significativa (figura 26). No entanto, dever mencionar-se que em embora em termos quantitativos o biocombustvel, nestes dois ensaios, fosse significativo, em termos qualitativos o teor em steres foi muito insatisfatrio, abaixo dos 54%.

. 107

Figura 26 - Tubos de centrifugao com as amostras finais da

transesterificao dos ensaios 1, 2 e 3 (tabela 56), depois da centrifugao

3.4.4 Produo via enzimtica de biodiesel a partir de leo usado

Tal como descrito no captulo 2.4.3.5, apenas foi sintetizado biodiesel a partir de leo usado, por transesterificao enzimtica, recorrendo ao ltimo lote de leo usado (lote da Cantina do INETI, de Agosto de 2007). As condies dos ensaios e os respectivos valores obtidos na transesterificao figuram nas tabelas 57, 58 e 59. Tabela 57 Percentagem de transesterificao enzimtica (15 horas) do OAU proveniente da Cantina do INETI.
Condies reaccionais com 50 g de leo Temperatura Lipase Metanol gua Ensaio % de metil-steres (C) (mg) (g) (g) 37,5 30 8 7,5 79,6 1 ensaio 37,5 70 8,8 6 83,8 2 ensaio Observao: o leo usado no foi sujeito a qualquer processo de filtrao e secagem.

Da tabela 57, constata-se que o rendimento obtido foi inferior ao previsto pelo desenho composto central. Dado que o desenho composto central (ver captulo 3.4.2) foi construdo usando como matria-prima o leo virgem de colza, as concluses retiradas em relao a outros leos possuem sempre um factor de erro associado. No presente caso, o facto de se estar a utilizar OAU pode ter bastante influncia atendendo s diferentes substncias que possam estar presentes, devido fritura de diferentes alimentos. Esses compostos podero exercer efeitos inibitrios na lipase. Estes resultados (tabela 57) no foram muito diferentes dos obtidos por transesterificao qumica com o mesmo leo (3 lote), com e sem filtrao e secagem (tabela 30 e 31). 108

Tabela 58 Percentagem de transesterificao enzimtica (15 horas) do OAU proveniente da Cantina do INETI, usando metanol e etanol.
Condies reaccionais com 50 g de leo Temperatura Lipase ensaio lcool (g) gua (g) (C) (mg) 8,8 43 70 6 1 ensaio (metanol) 8 43 30 7,5 2 ensaio (metanol) 43 30 8 (etanol) 7,5 3 ensaio Observao: o leo usado foi sujeito a filtrao e secagem.

% de steres 83,7 90,4 69,6

Da tabela 58 destaca-se o ensaio n. 3, em que o lcool utilizado foi o etanol. Este ensaio permitiu constatar que, comparando com o ensaio com metanol, se obtm valores de teores em steres bastante inferiores. Salienta-se, no entanto, o facto de no ensaio com o etanol, a quantidade de 8 g de lcool para reagir com 50 g de leo, corresponder a uma razo molar de 3:1, o que insuficiente para que a reaco pudesse decorrer da melhor forma. Atendendo a isso, e com base nos resultados do desenho composto central, pode-se constatar que o valor obtido no caso do etanol at se encontra dentro da ordem de grandeza esperada quando utilizando metanol, nas mesmas condies. igualmente importante referir que o ensaio, usando o etanol, apresentava um aspecto muito mais emulsionado e de separao de fases mais difcil (figura 27).

Figura 27 - Erlenmeyers com as solues finais da reaco de transesterificao dos ensaios 1, 2 e 3 (tabela 58), respectivamente da esquerda para a direita Os ensaios (1 e 2), utilizando o metanol, no s tiveram um aspecto menos emulsionado e com melhor separao de fases, ainda no erlenmyer, como aps centrifugao, essa diferena relativamente ao ensaio com etanol, foi mais evidente (figura 28 (A e B)).

109

(A)

(B)

Figura 28 - Tubos de centrifugao com a soluo final da transesterificao do ensaio 2 (A) e do ensaio 3 (B), depois da centrifugao (tabela 58) Tabela 59 - Condies da transesterificao enzimtica de leo usado (Cantina do INETI) e resultados sequenciais da transesterificao, com e sem filtrao e secagem.
Parmetros Temperatura: 37,5C leo usado: 50 g Metanol: 8,8 g gua: 6 g Lipase: 70 mg Tempo (h) 1 3 5 7 15 21 23 24 OAU no filtrado nem seco OAU filtrado e seco % de metil-steres 23,6 n.d 46,1 42,8 52,0 54,9 56,7 61,3 83,8 83,7 n.d 82,9 82,5 83,6 84,5 83,2

A tabela 59, cuja representao grfica ilustrada na figura 29, contempla a transesterificao do 3 lote de OAU, estudando o efeito da varivel independente relativa realizao de filtrao e secagem prvia do leo. Salienta-se o facto de a quantidade de metanol utilizado ter correspondido, face ao peso molecular do leo, a uma razo molar de 4,5:1, que atendendo s condies optimizadas (razo molar 5:1) era inferior. Os resultados desta tabela confirmaram dados anteriores (ver captulo 3.2.3) que apontavam para que a filtrao e secagem prvia dos leos no condicionasse significativamente os resultados da catlise, desde que o teor em gua e matria em suspenso no leo tambm no apresentasse valores muito elevados. Pode-se referir, igualmente, que o limite temporal da reaco foi de 24 horas, superior aos ensaios anteriores em que o limite fixado era de 15 horas, apresentando valores semelhantes. Salienta-se que quanto maior o tempo de reaco necessrio, menos aliciante 110

industrialmente se torna o processo, tendo sempre que haver um compromisso entre tempo e qualidade/quantidade.
Percentagem de steres obtidos 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 5 10 15 20 25 30 Tempo de reaco (h)
a partir de OAU no filtrado nem desumidificado a partir de OAU filtrado e desumidificado

Figura 29 - Percentagem de steres da transesterificao enzimtica do OAU da Cantina do INETI, com e sem tratamento prvio de filtrao e secagem (dados da tabela 59) Da anlise dos dados ilustrados na figura 29, verifica-se um incremento na percentagem em FAMEs, ao longo do tempo, sendo observvel que em ambos os casos (com e sem filtrao e secagem) o equilbrio da reaco foi atingido ao fim de 15 horas de reaco. Mais uma vez, tal como em todos os outros ensaios anteriores, a soluo final obtida nos ensaios de transesterificao enzimtica, apresentava um aspecto de uma emulso (figura 30) mas, ao fim de pouco tempo em repouso, formavam-se trs fases: a fase sobrenadante (fase orgnica, do biocombustvel), com uma colorao laranja de aspecto lmpido; uma fase intermdia que apresentava um aspecto de uma emulso; e a fase inferior de cor esbranquiada e que correspondia aos grnulos enzimticos parcialmente desfeitos.

Figura 30 - Erlenmeyer com a soluo resultante da transesterificao durante 24 horas, do leo (seco) usado da Cantina do INETI (tabela 59)

111

3.4.5 Produo via enzimtica de biodiesel a partir de leo de girassol

Tal como referido no captulo 3.4.2, procedeu-se realizao de alguns ensaios com o leo de girassol, com o objectivo de se testar se os problemas que estavam a ocorrer na transesterificao com o leo de colza eram do prprio leo ou tinham outra origem. Os resultados demonstraram que o problema no estava associado ao leo mas ao metanol empregue. Achou-se pertinente proceder a ensaios assumindo como varivel em estudo o pH. O leo utilizado nestes ensaios foi o de girassol. Utilizou-se a lipase solvel TL 100L. As condies de transesterificao foram: temperatura (37,5C); lipase solvel (2,7 ml); metanol (8,9 g); soluo aquosa (3,3 g); leo (50 g). Os resultados desses ensaios figuram na tabela 60. Tabela 60 - Resultados da transesterificao enzimtica, durante 15 horas, com a enzima solvel TL 100L, tendo como varivel independente o pH da soluo adicionada.
Amostra Soluo a pH 5 Ensaio com gua (ultra-pura) a pH 5,45 Ensaio com gua (ultra-pura) a pH 6 Ensaio com gua (ultra-pura) a pH 7 % de metil-steres 90,3 89,7 90,3 91,8

Tal como se pode constatar com a anlise da tabela 60, a diferena de pH da soluo adicionada ao sistema de transesterificao, em pouco influencia a prpria reaco de transesterificao, sendo as diferenas de rendimento em steres pouco significativas. Salienta-se que os valores de pH mencionados so de valores associados soluo aquosa adicionada e no ao valor do pH da soluo final para a reaco de transesterificao (soluo aquosa + metanol + leo + lipase). necessrio salientar que caso o leo tivesse uma elevada acidez livre, seria perfeitamente natural que pudesse condicionar o pH da mistura leo+metanol+soluo aquosa+lipase. Neste caso, a actividade cataltica enzimtica poderia, eventualmente, ser seriamente condicionada. necessrio, contudo, frisar que em geral as lipases so activas numa ampla faixa de valores de pH, apresentando, no entanto, os melhores valores na gama de pH 5 a 9, com um mximo, frequentemente, situado entre os 6 e 8. Todavia, salienta-se o facto de apesar de o leo de girassol no ter sido analisado no era de esperar uma elevada acidez livre, uma vez que se tratava de um leo refinado para consumo humano.

112

Captulo 4

Discusso Global

113

Segundo dados bibliogrficos, a utilizao da catlise alcalina, recorrendo ao hidrxido de sdio, tem o inconveniente de produzir gua na sua reaco com o lcool, o que leva ocorrncia da hidrlise de alguns steres, com posterior saponificao dos cidos gordos livres e o dificultar da separao de fases. Para minimizar estes problemas aconselhvel que a matria-prima se apresente o mais anidra possvel (Felizardo, 2003). Todavia, constatou-se, em ensaios recorrendo a leo usado (3 lote), com teores de gua de 1200 ppm, que o processo de filtrao e secagem, no condicionava, aparentemente, os resultados da catlise alcalina e, tambm, enzimtica. Deve-se salientar, contudo, que o teor em gua (1200 ppm 0,12% m/m) tambm no era muito elevado. Relativamente aos ensaios enzimticos, um aspecto que , igualmente, muito salientado a sensibilidade das enzimas s condies reaccionais, podendo mesmo conduzir sua inactivao. Factores como a temperatura e o pH so extremamente relevantes, havendo deste modo valores ptimos e limites de tolerncia que influenciam a actividade cataltica enzimtica. Geralmente as lipases so activas numa ampla faixa de valores de pH, apresentando, contudo, os melhores valores na gama de pH 5 a 9, com um mximo, frequentemente, situado entre os 6 e 8 (Duarte, 2002). Em ensaios em que se adicionaram solues aquosas com diferentes valores de pH, variando de 5 a 7, verificou-se que a diferena de pH da soluo adicionada ao sistema de transesterificao no influenciou significativamente a prpria reaco de transesterificao, tendo as diferenas de rendimento em metil-steres sido pouco significativas. Salienta-se, contudo, que se tratava de pH da soluo adicionada e no da soluo final para a reaco de transesterificao, alm de que o intervalo estudado estava perfeitamente enquadrado com os intervalos de tolerncia enzimtica. Contudo, necessrio frisar que, caso o leo tivesse uma elevada acidez livre, seria perfeitamente natural que pudesse condicionar o pH da mistura final e inibir a actividade cataltica enzimtica. Todavia, apesar do leo de girassol no ter sido analisado, a sua acidez certamente seria reduzida por se tratar de um leo refinado de consumo alimentar. Em relao temperatura, as lipases tambm possuem uma significativa amplitude, mas a maioria apresenta como melhores valores, temperaturas entre os 30 e os 40C (Duarte, 2002), o que se veio provar igualmente com a lipase em estudo, a Lipozyme TL IM, cujo valor ptimo de temperatura pareceu ser de 37C. Ambos os processos de transesterificao estudados (via qumica alcalina e via enzimtica), segundo dados bibliogrficos, apresentam vantagens e desvantagens relativamente um ao outro. A tabela 61 compara e destaca as principais diferenas entre os dois processos de transesterificao.

114

Tabela 61 Comparao entre a transesterificao via alcalina (hidrxido de sdio) e enzimtica(http://ramses.ffalm.br/falm/dbt/professores/sachs/Bioquimica%20I/enzimas2.pdf;http://www.enq.u

fsc.br/labs/probio/disc_eng_bioq/trabalhos_grad2005_2/enzimas/enzimas.ppt).

Caracterstica Especificidade ao substrato Natureza da estrutura Sensibilidade temperatura e pH Condies de temperatura de reaco Custo de obteno do catalisador (isolamento e purificao) Natureza do processo Formao de subprodutos Separao catalisador/ produtos Facilidade de converso de cidos gordos livres em steres Requer a presena de solventes Estabilidade do preparado Tempo necessrio Interferncia da presena de gua Recuperao do excesso de lcool Toxicidade do catalisador Reutilizao do catalisador Quantidade necessria de catalisador (forma pura) Rendimento da reaco (em steres)

Transesterificao Qumica alcalina Enzimtica (hidrxido de sdio) elevada moderada a baixa complexa simples elevada Baixa a moderada Suaves Elevadas (geralmente entre 30 a 40C) (acima de 50C) elevado Batch baixa simples elevada Facilita a reaco baixa elevado (acima de 15 horas) baixa elevada baixa elevada e fcil (na forma imobilizada) Baixa (abaixo dos 0,5%) mdio a elevado moderado contnuo elevada difcil Baixa no elevada baixo (3 a 5 horas) elevada baixa elevada nula elevada (1% m/m) elevado

Alguns dados obtidos, nos ensaios que figuram neste trabalho, mostram divergncias face ao que exposto na tabela 61. De facto, onde se obteve a melhor e mais rpida separao glicerol/biodiesel foi sem dvida nos ensaios via catlise alcalina (figuras 31 e 32). Salientase que em todos os ensaios de alcolise por via enzimtica, independentemente do leo, obteve-se no final uma matriz coloidal que dificultava a separao e reduzia a fraco sobrenadante, que constitua o biocombustvel propriamente dito. Igualmente importante foi o facto de, em praticamente todos os ensaios, independentemente das condies reaccionais, o suporte da enzima imobilizada, no final de 15 horas de ensaio, se ter destruturado, deixando de ter a forma granulada. Deste modo, a reutilizao enzimtica tornava-se impossvel, inviabilizando o processo a nvel industrial, pelo menos nas condies testadas. Todavia, convm mencionar que mesmo a nvel de outros ensaios laboratoriais, muitas vezes as enzimas apresentam uma elevada instabilidade em soluo, o que representa um obstculo recuperao do biocatalisador aps a sua utilizao (Duarte, 2006). Um importante dado a reter que o catalisador enzimtico requerido em menores quantidades relativamente ao catalisador alcalino, que no caso concreto deste trabalho 115

representou uma quantidade aproximadamente 17 vezes inferior (1% m/m para o processo alcalino e de 0,06% m/m para a lipase (pura) Lipozyme TL IM). Todavia, devido impossibilidade de reutilizao perde-se esta grande vantagem do processo enzimtico em relao ao alcalino.

Figura 31 - Frascos contendo amostras do produto final da transesterificao do OAU (3 lote), sem qualquer processo de lavagem, filtrao ou centrifugao, ao fim de 1 semana em repouso. Ensaio (A) usando etanol (via catlise enzimtica); ensaio (B) recorrendo catlise enzimtica (com metanol) e ensaio (C) (A) (B) (C) recorrendo catlise alcalina (com metanol)

Figura 32 - Eppendorfs com amostras, aps centrifugao, da transesterificao do leo usado (3 lote), por via enzimtica (A) e alcalina (A) (B) (B)

116

Captulo 5

Concluses

117

O tema de trabalho da presente dissertao assentou no estudo comparativo da produo de biodiesel a partir de leos vegetais virgens e usados, atravs da transesterificao alcalina e enzimtica. Foi realizada a caracterizao de vrios leos (colza, soja e OAUs), etapa imprescindvel para a realizao dos ensaios de transesterificao, uma vez que as caractersticas qualitativas dos leos determinam a qualidade/quantidade de biodiesel que se poder obter. Os ensaios de transesterificao alcalina, dos vrios leos, foram realizados segundo condies previamente optimizadas por outros autores: razo molar metanol:leo de 6:1; catalisador hidrxido de sdio a 1% m/m, adicionando-se ainda uma quantidade adicional em funo do ndice de acidez, que se destina a neutralizar os cidos gordos livres presentes no leo; temperatura de reaco de 55C e uma agitao constante de 150 rpm, durante 4 horas. Os rendimentos de transesterificao obtidos foram de 98,6% com o leo de colza, 94% com o leo de soja e de 87,5% a 94% com os leos usados. Estes ensaios foram tambm analisados atravs do rendimento em metil-steres ao longo do tempo, tendo-se determinando que os melhores resultados foram obtidos ao fim de 3 horas de reaco. Procedeu-se, tambm, realizao de estudos adicionais sobre a influncia que o processo de secagem, em rotavapor, pode ter na estabilidade oxidao do biodiesel. As variveis independentes em estudo foram a presso, temperatura e tempo. Aparentemente, o processo de secagem, em rotavapor, no influenciou a estabilidade oxidao do biocombustvel. Em termos de secagem, o parmetro com maior relevncia revelou-se como sendo a presso, seguindo-se o tempo e depois a temperatura. Em funo dos intervalos estudados, que permitiram uma eficcia na secagem entre os 13,9% e os 83,9%, a melhor condio reaccional foi a que decorreu durante 35 minutos, temperatura de 55C e a uma presso de 70 mbar. Em termos genricos, os resultados obtidos permitiram concluir que o aumento da temperatura assim como do tempo de reaco, conduzem a um aumento na eficincia da secagem. Em termos de presso do sistema, quanto menor a presso, maior a eficincia na secagem. Em relao transesterificao enzimtica foram testadas vrias lipases comercialmente disponveis: Lipozyme RM IM, Novozym 435, Lipozyme TL IM e Lipozyme TL 100L, sendo as trs primeiras enzimas imobilizadas e a ltima solvel. Da anlise da actividade de transesterificao das vrias enzimas, a lipase Lipozyme TL IM foi seleccionada para a continuao dos ensaios, uma vez que apresentava valores de transesterificao acima do valor mnimo admissvel num biodiesel, segundo a EN 14214 (96,5%), alm de poder ser reutilizada, pelo menos teoricamente, uma vez que se apresentava na forma imobilizada. A concentrao da lipase Lipozyme TL IM era de 0,0982 (mg/mg suporte). 118

Foi elaborado um desenho composto central, usando leo cru de colza, no qual se estudou o efeito de quatro variveis independentes: temperatura, quantidade de gua, quantidade de catalisador enzimtico e razo molar metanol:leo. Da sua anlise verificou-se que o parmetro com maior relevncia, na obteno de metil-steres, correspondeu quantidade de gua, seguido da temperatura, da quantidade de lipase e por ltimo da razo molar metanol:leo. Em termos genricos, os resultados demonstraram que com o aumento da temperatura, mantendo a quantidade de gua no sistema com valores baixos, os rendimentos de transesterificao diminuam. Todavia, com teores elevados de gua, a temperatura no parecia ter muito efeito. Teores significativos de gua no sistema conduziam a um aumento da percentagem de transesterificao, contudo, o oposto verificava-se em relao ao metanol. Constatou-se, igualmente, que variando apenas a quantidade de enzima, as diferenas na percentagem de transesterificao no eram significativas. Aps os vrios ensaios e modelao em desenho composto central, definiu-se que as melhores condies tericas reaccionais, com a lipase em estudo (a 15 horas e a 150 rpm) deveriam ser as seguintes: uma temperatura de 37C, a adio de 0,06% (m/m) de enzima pura, uma razo molar metanol:leo de 5:1 e a adio de 15% (m/m) de gua. Nestas condies, dever-se-ia obter um rendimento terico de transesterificao na ordem dos 99%. Em ensaios posteriores, reproduzindo estas mesmas condies experimentais, obtiveram-se, todavia, rendimentos inferiores: 86,7% no caso do leo de colza, 87,5% no caso do leo de soja e de 79,6% usando o leo alimentar usado (3 lote). Estes resultados da transesterificao enzimtica foram, cerca de 10% inferiores aos obtidos com a catlise alcalina. Face a tudo o que foi exposto pode-se sintetizar e concluir que a catlise qumica se apresentou mais favorvel, em relao ao processo enzimtico, em grande medida devido ao tempo de reaco e separao de fases. Acrescentando-se o facto da recuperao do biocatalisador no ter sido possvel, devido ao granulado enzimtico se desfazer, contribuindo para que este processo utilizando a Lipozyme TL IM no se tenha mostrado competitivo.

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Captulo 6

Sugestes de trabalhos futuros

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Este trabalho visou o estudo da produo de biodiesel a partir de leos vegetais virgens e usados, comparando transesterificao por catlise alcalina e por via enzimtica. A catlise alcalina seguiu a metodologia e estequiometria normalmente seguida, nomeadamente a nvel industrial, que j se encontra optimizada. Porm, os ensaios relativos catlise enzimtica tiveram que ser projectados e delineados de raiz, usando para tal a metodologia do desenho composto central. De facto, na transesterificao enzimtica que ainda h muitas possibilidades a explorar e necessrio um maior nmero de pesquisas nesse sentido. Neste trabalho foram estudadas quatro enzimas, trs imobilizadas e uma solvel. Das quatro enzimas testadas, apenas duas apresentavam resultados satisfatrios de transesterificao, acima dos 96,5% em metil-steres. Ambas as lipases so provenientes do mesmo fungo, o Thermomyces lanuginosus, sendo a Lipozyme TL IM a enzima imobilizada e a Lipozyme TL 100L a solvel. Destas duas enzimas, efectivamente, a que apresentava melhor rendimento (embora a diferena fosse mnima) era a enzima na forma solvel, todavia para ensaios de transesterificao e produo de biodiesel necessria a recuperao da enzima para que o processo seja vivel, sendo que uma enzima solvel no , deste modo, a melhor opo. Desta forma, optou-se por utilizar a enzima imobilizada. Ponderou-se a possibilidade de se proceder a ensaios de imobilizao usando a lipase solvel Lipozyme TL 100L, tentando testar vrios suportes e verificar a sua eficincia em termos de transesterificao. Todavia, devido escassez de tempo, no foi possvel realizarem-se tais ensaios. Contudo, seria muito interessante testarem-se vrios tipos de suporte de imobilizao e testar, deste modo, a eficincia de transesterificao da enzima, assim como a possibilidade da sua reutilizao. Este foi, alis, um aspecto no qual a enzima imobilizada testada (Lipozyme TL IM) revelou no ser vivel pois no era possvel a sua recuperao e

consequentemente a sua reutilizao. Este aspecto refora a necessidade de se testarem novos suportes de imobilizao que viessem a suprimir esta lacuna apresentada pela enzima testada. Outro ponto interessante seria procederem-se a estudos mais exaustivos sobre o tempo de reaco, com intervalos de recolha mais reduzidos, a fim de se estabelecer com maior preciso o ponto de equilbrio da reaco de transesterificao. Um dos pontos interessantes do trabalho seria a reutilizao da lipase imobilizada em ensaios sucessivos de transesterificao, a fim de ser averiguar quantas vezes seria possvel a sua reutilizao sem perder eficcia. No entanto, tal no foi possvel dado que no final da reaco se observava a formao de uma matriz que impedia qualquer tentativa de recuperao da enzima, com sucesso, para posterior (re)utilizao, alm de que o prprio granulado enzimtico desfazia-se, impedido a recuperao da lipase.

121

Considera-se que seria interessante investigar melhor o efeito da agitao, pois embora a mesma seja necessria para homogeneizar o meio, criando-se as condies para uma transesterificao mais eficaz, tambm se coloca a questo de se saber se a mesma no ter tido (a maior) responsabilidade pela desagregao/destruio dos grnulos enzimticos imobilizados. Pelo que seria vantajoso estudar o seu efeito conjugado em termos de rendimento de transesterificao e estabilidade dos grnulos enzimticos; procurando encontrar um compromisso entre rendimento de reaco e estabilidade dos grnulos. Considera-se que seria tambm importante a realizao de mais ensaios recorrendo a outras enzimas, assim como a mais tipos de leos, uma vez que permitiriam obter mais e valiosas informaes sobre o processo e a sua viabilidade. De facto, provavelmente, a enzima seleccionada neste estudo, no seria a mais eficaz, sendo igualmente possvel que a presena de um solvente ajudasse a melhorar o rendimento. Todavia, tambm de referir que a presena do solvente iria encarecer o processo, alm de que a sua utilizao acarretaria cuidados especiais (em particular se for um solvente inflamvel e/ou nocivo para a sade humana e ambiente). Pretendia-se ao mximo a simplificao do processo, juntamente com a minimizao de custos associados, obviamente associado com o melhor rendimento. Porm, seria interessante procederem-se a ensaios com recurso a solventes, a fim de averiguar o seu efeito, sabendo contudo que a funo dos solventes emulsionar as gorduras, transformando o sistema de duas fases, num de fase nica, o que facilita a aco cataltica. Outro aspecto igualmente pertinente seria a realizao de ensaios recorrendo adio faseada do metanol, uma vez que outros estudos apontam para vantagens neste sentido, nomeadamente na adio em 3 passos. Neste trabalho houve muitos parmetros que no foram caracterizados quer em leos quer no biodiesel deles produzido, devido escassez de tempo para proceder a todos os ensaios requeridos. As normas EN 14214 definem todas as caractersticas que um biodiesel dever apresentar, a fim de ser aceite e comercializado. Deste modo, imperioso proceder-se a uma total caracterizao dos leos e dos biocombustveis deles derivados.

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Captulo 7

Bibliografia

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Branco, Altherre; Nasato, Daniel Schiochet; Colpani, Gustavo Lopes; Trabalho de Engenharia Bioqumica da Universidade Federal de Santa Catarina Biodiesel; 2007 Campos, Lus S. ; Entender a Bioqumica O Metabolismo fundamental em animais e plantas; Escolar editora; 1998 Duarte, Fernanda; Hoffmann, Davi; Tobouti, Patrcia Lie; Trabalho de Engenharia Bioqumica da Universidade Federal de Santa Catarina - Produo Enzimtica de Biodiesel; 2006 Felizardo, Pedro Miguel Guerreiro; Produo de Biodiesel a Partir de leos Usados de Fritura; 2003 Felizardo, Sara Alexandra Machado ; Relatrio de estgio FCUL/INETI - Utilizao de leos de fritura para a obteno de um biocombustvel; 2004 Ferrari, Roseli; Scabio, Ardalla; Oliveira, Vanessa da Silva; Oxidative stability of biodisel from soybean oil fatty acid ethyl esters; Sci. Agric. (Piracicaba, Braz.), v.62, n.3, p.291-295, Maio/Junho; 2005 Freitas, Carlos; Penteado, Maurcio; Apresentao da Trace Consultoria: Via tecnolgica para produo de biodiesel a partir sebo bovino ; So Paulo, 20 Maro; 2007 Fukuda, Hideki; Kondo, Akihiko; Noda, Hideo; Biodiesel fuel production by transesterification of oils; Journal of Bioscience and Bioengineering, vol.92, 5; 405-416; 2001 INETI; Guia Tcnico do Sector dos leos Vegetais, Derivados e Equiparados, 2001 Instituto Nacional de Estatstica (INE); Estatsticas Agrcolas 2006; 2007 IPA, Lda.; Linhas de Definio estratgica do sistema de Gesto dos leos Alimentares Usados; 2004 Joyce, Antnio; Gonalves, Helder; Silva, Lus; Forum Energias Renovveis em PortugalUma contribuio para os objectivos de Poltica Energtica e Ambiental; ADENE/INETI; 2002 Junior, Edgar; Paraizo, Aline; Paraizo, Janana; Trabalho de Engenharia Bioqumica da Universidade Federal de Santa Catarina - Produo de Biodiesel; 2005 Knothe, Gerhard; Dunn, Robert; Bagby, Marvin; Biodiesel: The use of Vegetable Oils and Their Derivatives as Alternative Diesel Fuels; National Center for Agricultural Utilization Research, U.S. Department of Agriculture; Knothe, Gerhard; Gerpen, Jon Van; Krahl, Jurgen; The Biodiesel Handbook; Amer Oil Chemists Society; 2005 Ma, Fangrui; Hanna, M.; Biodiesel production: a review; Bioresource technology; 1999 Margarida Pinto, Ana. 2000. Introduction of Biodiesel in Portugal. Final Report of NTBNETPhase IV / Task 6 (Draft Version). CCE Centro para a Conservao de Energia. Verso Electrnica Morrison, R.; Boyd, R.; Qumica Orgnica 13 edio; Fundao Calouste Gulbenkian; 1996

124

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Captulo 8

Anexos

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Fonte: Estatsticas agrcolas www.ine.pt/ngt_server/attachfileu.jsp?look_parentBoui=6210222&att_display=n&att_download= y Balanos de aprovisionamento de sementes e frutos oleaginosos em Portugal
Portugal Rubricas Anos Total de sementes e frutos oleaginosos 2003 291 1.203 2004 328 1.122 2005 357 1.265 (Po) Girassol 2003 18 227 2004 14 229 2 2005 274 (Po) Soja 2003 x 933 2004 x 837 2005 x 930 (Po) Azeitona 2003 232 14 2004 263 17 2005 294 11 (Po) Outros gros e frutos oleaginosos (a) 2003 41 29 2004 51 39 2005 61 50 (Po) 38 22 25 13 6 1 13 2 2 9 11 10 3 3 12 1.456 1.428 1.597 232 237 275 920 835 928 237 269 295 67 87 99 -5 17 -10 12 -13 40 -19 26 -46 2 4 -4 1.461 1.410 1.606 220 250 235 939 809 974 235 265 299 67 86 98 Produo utilizvel Comrcio internacional Entrada Sada Recursos disponveis Unidade: 10 Variao de existncias
3

t
Utilizao interna Total Da qual: Alimenta Transforma o animal o industrial 80 133 120 // // // 80 133 120 // // // 1.345 1.242 1.449 218 248 232 850 668 845 216 246 281 61 80 91 Capitao (kg)

2003 - 2005 Grau de autoaprovisiona -mento (%) 19,9 23,3 22,2 8,2 5,6 0,9 // // // 98,7 99,2 98,3 61,2 59,3 62,2

2,4 2,3 2,3 // // // // // // 1,8 1,8 1,7 0,6 0,6 0,7

(a) Inclui: amendoim (no para consumo directo), copra, palmiste, colza, bagao de azeitona, grainha de uva, germn de milho, crtamo, linho, rcino, algodo e outros gros e frutos oleaginosos.

Balanos de aprovisionamento de gorduras e leos vegetais brutos

Portugal Rubricas Anos Total de gorduras e leos vegetais 2003 39 158 2004 45 163 2005 (Po) 46 204 leo de girassol 2003 8 35 2004 6 33 2005 (Po) 49 1 leo de soja 2003 x 12 2004 x 12 2005 (Po) x 16 Azeite 2003 29 62 2004 36 62 2005 (Po) 43 62 Outras gorduras e leos vegetais brutos (b) 2003 2 49 2004 3 56 4 2005 (Po) 77 133 145 192 16 24 44 86 75 88 22 27 31 9 19 29 64 63 58 27 15 6 69 49 70 69 71 74 42 40 52 28 15 39 -17 -10 -18 28 10 28 5 6 6 12 9 23 276 276 279 134 131 127 41 39 42 64 65 68 37 41 42 Produo utilizvel (a) Comrcio internacional Entrada Sada Recursos disponveis Unidade: 10 Variao de existncias
3

t
Utilizao interna Total Da qual: Transformao Consumo industrial humano 39 35 36 13 10 8 11 8 9 // // // 15 17 19 213 219 224 120 120 118 14 17 20 64 65 68 15 17 18 Capitao (kg)

2003 - 2005 Grau de autoaprovisionamento (%) 14,1 16,3 16,5 6,0 4,6 0,8 0,0 0,0 0,0 45,3 55,4 63,2 6,8 7,4 8,7

20,4 20,9 21,2 11,5 11,4 11,2 1,4 1,6 1,9 6,1 6,2 6,4 1,4 1,6 1,7

(a) De acordo com a metodologia comunitria apenas se considera produo utilizvel a produo interna obtida por transformao de matrias primas nacionais. (b) Inclui: amendoim (no para consumo directo), copra, palmiste, colza, bagao de azeitona, grainha de uva, germn de milho, crtamo, linho, rcino, algodo e outras gorduras e leos vegetais.

Tabela de especificaes tcnicas para o Biodiesel

Tickell, Joshuva; From the Fryer to the Fuel Tank; Tickell Energy Consulting; 2002

Exemplo de uma impresso dos resultados obtidos na anlise cromatogrfica de uma amostra de metil-steres, obtidos a partir do leo da Cantina do INETI (amostra de leo que no foi sujeita a filtrao e secagem) (ver tabela 59)

Cromatograma dos resultados obtidos na anlise cromatogrfica de uma amostra de metil-steres, obtidos a partir do leo da Cantina do INETI (amostra de leo que no foi sujeita a filtrao e secagem) (ver tabela 59)

matriz

Desenho composto central (a 3 variveis) para optimizao das condies de secagem do biodiesel
Ensaio cont. Em gua 1061,75 1 605,55 2 3 2081,13 2230,28 4 830,8 5 491,58 6 1243,94 7 1702,24 8 1358,75 #1 1470,48 #2 424,7 #3 2192,95 #4 1931,86 #5 1513,16 #6 B1 1439,36 B2 1440,6 B3 1496,8 Ao 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 temperatura 46 64 46 64 46 64 46 64 40 70 55 55 55 55 55 55 55 presso 117 117 253 253 117 117 253 253 185 185 70 300 185 185 185 185 185 tempo temp.^2 presso^2 tempo^2 temp.*tempo temp.*presso presso*tempo 20 2116 13689 400 920 5382 2340 20 4096 13689 400 1280 7488 2340 20 2116 64009 400 920 11638 5060 20 4096 64009 400 1280 16192 5060 50 2116 13689 2500 2300 5382 5850 50 4096 13689 2500 3200 7488 5850 50 2116 64009 2500 2300 11638 12650 50 4096 64009 2500 3200 16192 12650 35 1600 34225 1225 1400 7400 6475 35 4900 34225 1225 2450 12950 6475 35 3025 4900 1225 1925 3850 2450 35 3025 90000 1225 1925 16500 10500 10 3025 34225 100 550 10175 1850 60 3025 34225 3600 3300 10175 11100 35 3025 34225 1225 1925 10175 6475 35 3025 34225 1225 1925 10175 6475 35 3025 34225 1225 1925 10175 6475

Page 1

matriz

Coef. pol. Ao temperatura presso tempo temp.^2 presso^2 tempo^2 temp.*tempo temp.*presso presso*tempo 500,5944774 18,84146038 4,165952207 -25,26859763 -0,778857936 -0,02099778 0,212243143 0,394564815 0,286533905 -0,12503799

Valor (y^) esperado 1111,27758 653,768889 2073,69157 2317,61789 904,546348 660,10266 1356,80535 1813,79666 1298,84992 1298,41878 301,503736 2090,85976 1902,59288 1310,46583 1473,87739 1473,87739 1473,87739 1383,29

valor (y) experim. 1061,75 605,55 2081,13 2230,28 830,8 491,58 1243,94 1702,24 1358,75 1470,48 424,7 2192,95 1931,86 1513,16 1439,36 1440,6 1496,8 1383,29

SQ resid SQ fact SQ corr SQlof (y-y^)^2 (y^-ymed)^2 (y-ymed)^2 (yrep-y^)^2 2452,981 2325,0613 55,33017 7627,9064 5438,5239 28399,887 12738,586 12444,888 3588,019 29605,064 15177,319 10422,417 856,56456 41084,928 1191,45 1107,3845 525,4462 65436,706 508817,84 499294,87 903515,48 213940,68 499822,01 105,64193 199552,58 4655,8305 4714,8539 1135460,4 523851,97 286770,22 3205,569 11404,919 11404,919 11404,919 93228,59 579933,38 509862,3 745108,07 287600,07 766506,5 15164,339 112329,83 69,448413 10690,821 888086,8 682055,36 318972,41 21338,323 5223,8821 5404,6653 16826,352 120855,25 648268,31 377944,09 737362,06 307330,15 638109,14 10427,403 125937,44 25622,429 25760,642 1339612,4 399347,86 196845,62 22038,642 223,72342 223,72342 223,72342

SQexp (y-yrep)^2 157744,009 728240,357 387145,284 594996,25 394534,734 935746,676 46216,4004 59204,6224 10034,0289 133,6336 1069611,01 538800,041 223672,244 2941,9776 382,5936 335,6224 1434,8944

medias=

Y med exp= 1367,0836 Y replicados= 1458,92

SQ fact= SQ corr= R^2= R= SQ res= SQ lof= SQ exp= SQ lof/4= SQ exp/5=

4883359,4 5058401,1 0,9653958 0,9825456 175041,76 4976132,6 5151174,4 1244033,2 1030234,9

GL=10-1=9 GL=17-1=16

GL=17-3=14+1=15 GL=15-10=5 GL=17-15=2 1,548E+12 1,061E+12 F= 1,45811378 <19.296

Page 2

Desenho composto central (a 4 variveis) da transesterificao enzimtica do leo de colza

Termo Independente A B C D A^2 B^2 C^2 D^2 Agua^2 9,00 9,00 9,00 9,00 9,00 9,00 9,00 9,00 81,00 81,00 81,00 81,00 81,00 81,00 81,00 81,00 36,00 36,00 36,00 36,00 36,00 36,00 0,00 144,00 36,00 36,00 36,00 AB T*lipase 1656,215 2201,804 2975,029 3964,112 1652,650 2199,644 2971,140 3961,087 1664,642 2202,237 2977,298 3958,926 1661,401 2199,644 2969,519 3967,137 1752,663 3360,399 1145,414 4187,534 2662,928 2670,393 2662,928 2664,421 2667,780 2667,034 2662,555 Varivel Resposta Ensaio Ao T Lipase Metanol Agua 33 50,1883 7,01 1 71,800 1 3 44 50,041 7,01 2 53,400 1 3 33 90,1524 7,11 3 75,200 1 3 44 90,0935 7,06 4 5,000 1 3 33 50,0803 10,51 5 40,000 1 3 44 49,9919 10,55 6 29,000 1 3 33 90,0345 10,53 7 43,000 1 3 44 90,0247 10,54 8 21,200 1 3 33 50,4437 7,05 9 80,100 1 9 44 50,0508 7,01 10 88,200 1 9 33 90,2211 7,02 11 86,700 1 9 44 89,9756 7,02 12 87,800 1 9 33 50,3455 10,55 92,600 1 13 9 44 49,9919 10,54 14 96,000 1 9 33 89,9854 10,5 15 96,100 1 9 44 90,1622 10,5 16 97,000 1 9 25 70,1065 8,77 95,000 1 25 6 48 70,0083 8,82 50 20,75 1 6 38 30,1425 8,78 3' 89,2 1 6 38 110,198 8,76 4' 95 1 6 38 70,0771 5,3 5' 74 1 6 38 70,2735 12,27 6' 63,5 1 6 38 70,0771 8,78 7' 0,28 1 0 38 70,1163 8,77 8' 91,5 1 12 38 70,2047 8,77 pm (ponto md) 94,3 1 6 38 70,1851 8,78 pm 91,3 1 6 38 70,0672 8,76 pm 93 1 6 Quantidade de leo de colza (cr) usada em cada ensaio: 50g

T^2 Lipase^2 Metanol^2 1089,00 2518,8688 49,14 1936,00 2504,1026 49,14 1089,00 8127,4534 50,55 1936,00 8116,8316 49,84 1089,00 2508,0360 110,46 1936,00 2499,1902 111,30 1089,00 8106,2167 110,88 1936,00 8104,4482 111,09 1089,00 2544,5663 49,70 1936,00 2505,0857 49,14 1089,00 8139,8543 49,28 1936,00 8095,6088 49,28 1089,00 2534,6672 111,30 1936,00 2499,1902 111,09 1089,00 8097,3763 110,25 1936,00 8129,2244 110,25 625,00 4914,9243 76,91 2304,00 4901,1628 77,79 1444,00 908,5682 77,09 1444,00 12143,6561 76,74 1444,00 4910,7938 28,09 1444,00 4938,3632 150,55 1444,00 4910,7938 77,09 1444,00 4916,3015 76,91 1444,00 4928,7051 76,91 1444,00 4925,9474 77,09 1444,00 4909,4174 76,74

Valor (y^) AC T*Metanol 231,33 308,44 234,63 310,64 346,83 464,20 347,49 463,76 232,65 308,44 231,66 308,88 348,15 463,76 346,50 462,00 219,25 423,36 333,64 332,88 201,40 466,26 333,64 333,26 333,26 333,64 332,88 AD BC BD CD Coeficientes Polinomiais esperado % de steres 78,11752294 40,37353433 72,40664883 16,17641177 49,06222644 23,26295813 52,84295613 8,821015994 87,8540138 83,60889712 97,08897522 74,47474296 86,08566675 94,53139753 105,297645 95,08300465 80,83743467 48,72731514 93,60145269 90,16954865 73,65999375 63,7107027 -0,70318508 91,98628068 87,94875425 87,93566226 87,96842269 Y med exp= Y med replicados=

valor (y) experimental % de steres 71,800 53,400 75,200 5,000 40,000 29,000 43,000 21,200 80,100 88,200 86,700 87,800 92,600 96,000 96,100 97,000 95,000 20,75 89,2 95 74 63,5 0,28 91,5 94,3 91,3 93 66,34708333 92,86666667

T*Agua lipase*metanol 99,00 351,8202 132,00 350,7875 99,00 640,9835 132,00 636,0598 99,00 526,3439 132,00 527,4146 99,00 948,0636 132,00 948,8604 297,00 355,6280 396,00 350,8563 297,00 633,3524 396,00 631,6287 297,00 531,1448 396,00 526,9146 297,00 944,8469 396,00 946,7032 150,00 614,8342 288,00 617,4733 228,00 264,6508 228,00 965,3367 228,00 371,4084 228,00 862,2557 0,00 615,2766 456,00 614,9203 228,00 615,6955 228,00 616,2251 228,00 613,7890

lipase*agua metanol*agua 150,5650 21,030 150,1230 21,030 270,4572 21,330 270,2804 21,180 150,2409 31,530 149,9757 31,650 270,1036 31,590 270,0741 31,620 453,9933 63,450 450,4575 63,090 811,9903 63,180 809,7804 63,180 453,1093 94,950 449,9271 94,860 809,8688 94,500 811,4599 94,500 420,6391 52,620 420,0498 52,920 180,8548 52,680 661,1895 52,560 420,4623 31,800 421,6409 73,620 0,0000 0,000 841,3961 105,240 421,2284 52,620 421,1106 52,680 420,4034 52,560

Ao T Lipase Metanol agua T^2 Lipase^2 Metanol^2 agua^2 12 13 14 23 24 34

-51,5194007 9,902551766 0,230567428 1,439627923 -13,62793703 -0,194922929 0,00247358 -1,586422604 -1,174241849 -0,042308609 0,321387548 0,512080833 0,06952178 0,062849379 1,31935391 2,072523184 -198,329382

SQ resid (y-y^)^2

SQ fact

SQ corr

SQlof (ymedrep-y^)^2

SQexp (y-ymedrep)^2

(y^-ymed)^2 (y-ymed)^2

39,9111 169,6888 7,8028 124,9122 82,1239 32,9136 96,8838 153,2392 60,1247 21,0782 107,9308 177,5625 42,4365 2,1568 84,5967 3,6749 200,5783 782,7302 19,3728 23,3333 0,1156 0,0444 0,9667 0,2365 40,3383 11,3188 25,3168

138,5432 674,6252 36,7183 2517,0963 298,7663 1856,2418 182,3615 3309,2484 462,5481 297,9702 945,0639 66,0589 389,6117 794,3556 1517,1463 825,7532 209,9703 310,4562 742,8006 567,5099 53,4787 6,9505 4495,7385 657,3684 466,6322 466,0667 467,4823

29,7343 167,6270 78,3741 3763,4646 694,1688 1394,8046 545,0863 2038,2591 189,1427 477,5500 414,2412 460,2276 689,2156 879,2955 885,2361 939,6013 820,9896 2079,0940 522,2558 820,9896 58,5671 8,1059 4364,8595 632,6692 781,3656 622,6481 710,3780

217,5372 2755,5289 418,6123 5881,3952 1918,8290 4844,6762 1601,8974 7063,6714 25,1267 85,7063 17,8279 338,2629 45,9820 2,7713 154,5292 4,9122 144,7024 1948,2824 0,5399 7,2744 368,8963 850,0702 8755,3172 0,7751 24,1859 24,3148 23,9928

443,8044 1557,6178 312,1111 7720,5511 2794,8844 4078,9511 2486,6844 5136,1111 162,9878 21,7778 38,0278 25,6711 0,0711 9,8178 10,4544 17,0844 4,5511 5200,8136 13,4444 4,5511 355,9511 862,4011 8572,2908 1,8678 2,0544 2,4544 0,0178

SQ fact= SQ corr= R^2= R= SQ res= SQ lof= SQ exp= SQ lof/4= SQ exp/3=

22756,5632 25067,9513 0,90779509 0,95278282 2311,38808 37525,6175 39837,0056 9381,40437 13279,0019

GL=10-1=9 GL=17-1=16

GL=17-3=14 GL=14-10=4 GL=17-14=3 88010748 176331890 F=

0,49911986 <9,1172

F0,05;4;3= 9,1172