Aula prática

Preparo e esterilização de meios

de cultura
 Composição aproximada de elementos químicos
de uma célula bacteriana (E. coli)
ELEMENTO FONTE % PESO SECO
C CO2, açúcares, ácidos orgânicos, etc. 50
O O2, atmosfera, H2O 20
N N2, NO3, NH3, aas, bases nitrog. 14
H H2, atmosfera, H2O, comp. orgânicos 8
P Fosfato inorgânico (PO43-) 3
S Sulfato, H2S, sulfetos metálicos 1
K Solo, sais 1
Na Solo, sais 1
Ca Solo, sais 0,5
Mg Solo, sais 0,5
Fe Solo, sais 0,2
Outros Solo, sais 0,3
 MEIOS DE CULTURA
Podem ser classificados quanto a:
1) Característica física:
• Sólido • Líquido

• Semi-sólido
 2) Composição química:
• Sintético ou quimicamente definido: todos os
componentes e quantidades são conhecidos.
• Complexo: contém componentes cuja composição
não é precisa.
Exemplos: extrato de carne, extrato de levedura,
peptona, sangue, leite, etc.

3) Função:
• Diferencial: permite a distinção de colônias.
• Seletivo: contém agente inibidor que impede o
desenvolvimento de determinado microrganismo.
• Meio de enriquecimento: aumenta o número de
determinado microrganismo em uma amostra.
• Meio redutor: apresenta menor tensão de O2.
EXEMPLOS:
Meio diferencial – Ágar Sangue

Colônia não
hemolítica

Colônia
hemolítica

Colônia não
hemolítica
 Meio seletivo e diferencial – Chromagar

 Diferenciar espécies de Candida

(C. albicans, C.glabrata, C. tropicalis, C. krusei)

Meio seletivo e diferencial para enterobactérias –
Ágar EMB

Lactose Colônia típica de

negativo Escherichia coli

Brilho verde
Lactose metálico e
positivo lactose positivo
Fatores do ambiente que afetam o
crescimento microbiano

a) Atmosfera
b) Temperatura
c) pH
d) Disponibilidade de água
Efeito da atmosfera de incubação –
presença ou ausência de O2

a) Aeróbios obrigatórios

b) Anaeróbios obrigatórios

c) Anaeróbios facultativos

d) Microaerófilos

e) Aerotolerantes

Escherichia coli
 Cultivo de micro-organismos
anaeróbios:

Jarra de anaerobiose Câmara de anaerobiose

 Métodos utilizados para a
esterilização de meios de cultura e
outros materiais usados em
microbiologia
Funcionamento de uma autoclave
Cabine de segurança microbiológica – Fluxo laminar

 Esterilização por
radiação UV: ar e
superfície.

 Manipulação
asséptica de culturas
e materiais.
 Esterilização de substâncias
termolábeis por sistemas de filtração
Diâmetro do poro 0,22 m