DESEMPENHO FERMENTATIVO DE Pichia

membranifaciens PARA PRODUÇÃO DE

ETANOL NA PRESENÇA DE INIBIDORES
DO PRÉ-TRATAMENTO ACIDO

Lucas Antoszczeszen Pironti

Orientadora Marcia Mutton
Bacharel em Ciências Biológicas
Introdução

 Matriz energética mundial

 Combustíveis fosseis (37%)

 Gases do efeito estufa

 Crise energética

 Soberania do Estado
 Consumidores mais exigentes
Introdução

 No Brasil, 48,4% da energia vem de fontes renováveis

 Programa pro álcool (1975)

 Incentivo estatal em tecnologia e inovação – indústria do etanol

 Cana de açúcar | Gastos | Biocombustível na gasolina

Introdução

 Brasil + EUA = 84% da produção mundial

 Diferentes matérias primas

 Consumidores mais conscientes

 Uso mais efetivo dos recursos e resíduos

Introdução

 Demanda biocombustíveis | Condições climáticas | Expansão da área de prod.

 Potencial de produção limitado

 Alternativas

 Etanol de segunda geração ( 50% + produtividade)

Introdução

 Diferença entre as tecnologias

 Brasil

 Pré-tratamento acido (ácido sulfúrico, Clorídrico, fosfórico e nítrico)

 Compostos inibidores | Passo de destoxificação

Introdução

 Ácidos orgânicos

 Furanos

 Compostos fenólicos

 Passo de destoxificação Gasto

Introdução

 Leveduras não convencionais

 Pichia membranifaciens

 Tolerância | Xiolose | Esgotamento

 Potencial candidato
Justificativa

 Projeções futuras

 Tecnologias capazes de aumentar o rendimento

 Leveduras tolerantes

 Viabilidade de implementação na indústria atual

Objetivos

 Eficiência fermentativa da Pichia membranifaciens

 Inibidores isolados ou em associação (furfural, hidroximetilfurfural, ácido fênico, ácido fórmico e ácido
levulinico)

 Avaliar a dosagem

 Verificar o comportamento fisiologico

Resultados esperados

 Determinar doses máximas dos inibidores

 Determinar a ação fisiológicas dos compostos isolados ou em associação

 Processo de destoxificação
Material e métodos

 Laboratório de tecnologia do açúcar e álcool e Microbiologia de Fermentações

 Departamento de Biotecnologia Agropecuária e Ambiental

Material e métodos

 Pichia membranifaciens LJ04

 Inoculo em placas de Petri, com YPXD

 Crescimento de biomassa
Material e métodos

 Mosto artificial

 Com maior concentração de Xilose (45g.L-1 ) do que glicose (25g.L-1 )

 Condição ideal de pH (3.5)

Material e métodos

 Fermentação em Erlenmeyer de 500ml a 37ºC, 150 rpm

 Viabilidade celular, brotamento e viabilidade dos brotos

 Alíquotas 0, 6, 12, 24
 Cromatografia liquida de alta eficiência

 Divisão em dois ensaios | Inibidores isolados | Inibidores em associação

Material e métodos

 Ensaio 1
 O delineamento experimental em um esquema fatorial (5x7x4+1) com 3 repetições

 T1 Inibidores
 T2 Concentrações (0,1; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5 e 3,0 g.L-1)

 Estudos anteriores
Material e métodos

 Sistema fatorial 25-2 com 3 repetições

Material e métodos

 Analises microbiológicas

 Tempo 0, 6, 12 e 24

 Câmera de Neubauer
Material e métodos

 Cromatografia liquida de alta eficiência

 Determinar concentrações

 Xilose, glicose, arabinose, glicerol, acido acético e etanol

Material e métodos

 Analise estatística com o programa AgroESTAT (Sistema para Análises Estatísticas de Ensaios Agronômicos )

 Teste de Tukey, se necessário com analise polinomial

Material e métodos
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