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Universidade Federal do Maranhão
Coordenação de Engenharia Química/CCET

Trabalho de Conclusão de Curso – TCC
ATIVIDADE LARVICIDA DO ÓLEO ESSENCIAL DE Hymenaea courbaril

L. (JATOBÁ) FRENTE AO Aedes aegypti
Discente: Walace Rodrigo de Almeida Ribeiro

Orientadora: Profª.DrªAudirene Amorim Santana
São Luís - MA
2019
Atividade larvicida do óleo essencial de Hymenaea courbaril L. (jatobá) frente ao Aedes aegypti
Introdução: Plantas Medicinais
A humanidade utiliza plantas com Conhecimento transmitido ao longo de

fins medicinais para o tratamento gerações.
de doenças há muito tempo. (ANTONIO et al., 2013)
(ANTONIO et al., 2013)
No Brasil, o uso das plantas

medicinais foi impulsionado,
principalmente, pela cultura indígena.
(MACIEL et al, 2012)
walace.ribeiro@hotmail.com
Introdução: Considerações sobre óleos essenciais
• De acordo com a resolução - RDC nº 2, de 15 de janeiro de 2007 da ANVISA, óleos essenciais (OE’s)
são produtos voláteis de origem vegetal obtidos por processo físico. (BRASIL,2007)
Os OE’s se originam do metabolismo

secundário das plantas.
(GONÇALVES et al.,2013; SILVA et al., 2003)
Possuem composição química

de enorme complexidade.
Eugenol
Limoneno
Destaca-se a presença de
terpenos e fenilpropanóides.
walace.ribeiro@Hotmail.com
Introdução: Considerações sobre óleos essenciais
Principal método de extração

A hidrodestilação em aparelho de
Clevenger, é um método onde ocorre o
Essas substâncias de origem vegetal aquecimento da amostra embebida em
surgem como alternativa promissora água, que atinge cerca de 100°C.
(ABDELLATIF; HASSANI, 2015)
de controle de vetores.
(SIMAS et al., 2004)
Introdução: Aspectos gerais sobre Hymenaea courbaril L. (Jatobá)
O jatobá (Hymenaea courbaril L.) pertence à

família Fabaceae e subfamília Caesalpinoideae. Conhecida popularmente pelos nomes
(FARIAS Et al.,2006)
Figura 1 – Árvore do Hymenaea courbaril L.
de jatobá, jataí, jataí-amarelo, jataí-
peba, imbiúva, dentre outros.
(LORENZI, 2002)
Introdução: Aspectos gerais sobre Hymenaea courbaril L. (Jatobá)

H. courbaril L. (jatobá), frutos e cascas
Propriedades biológicas comprovadas
Efeito antimicrobiano do OE
Sales et al. (2014)
Atividade do extrato de folhas e flores frente a

Trypanosoma cruzi, causador da doença de Chagas
Cavazzana Júnior et al. (2015)
Atividade antioxidante
(HABER, 2003; PEDAUYÉ, 2007)
Efeito larvicida com

literatura restrita
Introdução: Aspectos gerais sobre o Aedes Aegypti
Figura 3 - Mosquito Aedes aegypthi

• Em 1955, ocorre a sua erradicação no Brasil, no
entanto, houve a reintrodução por meio de
deslocamentos humanos marítimos ou
terrestres. (BRAGA; VALLE, 2007; PERES, 2016)
• Raramente são encontrados em ambientes

semi silvestres ou onde não há presença
intensa do homem. (CONSOLI;OLIVEIRA,1194)
• Além do vírus da dengue, a espécie Aedes

aegypti também transmite o vírus da febre
amarela urbana, chikungunya e zika.
(MASCHERETTI et al., 2013)
Introdução: : Aspectos gerais sobre o Aedes Aegypti

Figura 4 - Casos de dengue no país entre o período de 30 de
Dezembro de 2018 a 24 de Agosto de 2019
• De acordo com o Ministério da Saúde no

período de 30 de dezembro a 24 de agosto,
foram registrados 1.439.471 casos de dengue
em todo o país. (BOLD, 2019)
• A média é de pouco mais de 6 mil casos por

dia. (BOLD, 2019)
Introdução: : Aspectos gerais sobre o Aedes Aegypti
• No Brasil o método frequentemente utilizado para combater

o Aedes aegypti vem sendo até hoje o uso de inseticidas
químicos, como piretróides, fosforados e os organoclorados
(LIMA et al., 2003).
• A ocorrência cada vez maior de

populações resistentes de mosquitos, tem
estimulado a busca por inseticidas de
origem vegetal (ISMAN, 2006; NAVARRO-SILVA et al.,
2009).
Objetivos
Objetivos
3.1. Objetivo geral
• Avaliar a atividade larvicida do óleo essencial extraído das cascas do fruto de Hymenaea courbaril L.
(jatobá) frente as larvas de Aedes aegypti.
3.2. Objetivo específicos
• Determinar os parâmetros físico-químicos do óleo essencial de H. courbaril L.;
• Verificar a toxicidade do óleo essencial frente a Artemia salina Leach;
• Quantificar o teor de fenólicos totais presentes no óleo essencial;
• Avaliar atividade larvicida do óleo essencial frente às larvas do mosquito Aedes aegypti.
Material e Métodos
O presente trabalho foi desenvolvido no Laboratório de Pesquisa e Aplicação de Óleos Essenciais
(LOEPAV/UFMA) da Universidade Federal do Maranhão (UFMA).
Material e Métodos: Material vegetal
Coleta em outubro de 2019, região de Palmeiras – MA.
Identificadas pelo Herbário Ático Seabra da Universidade

Federal do Maranhão, sob o registro de n°1079.
Secagem em estufa de secagem de ar convectiva a 45 ºC/24 h.
Material e Métodos: Extração do óleo essencial
Extração do óleo essencial foi por hidrodestilação (100 ºC/3h).
Foram utilizados 597,5 g da amostra de casca de jatobá com a

proporção 1:10 de água destilada.
Foi seco por meio da percolação com Na2SO4 (Sulfato de sódio

anidro) e centrifugado.
Rendimento
onde:
V ∗d V = volume total do óleo extraído (mL)
% R = d = densidade do óleo (g/mL)
m m = massa do vegetal (g)
Material e Métodos: Caracterização físico-química
As propriedades físico-químicas do óleo essencial foram determinadas de acordo com a

Farmacopeia Brasileira e IAL:
Densidade
Solubilidade em etanol (70% v/v)
Índice de refração
Cor e aparência
Material e Metódos: Toxicidade
Bioensaio de letalidade frente a Artemia salina Leach.

Laboratório de Pesquisa e Aplicação de Óleos Essenciais (UFMA)
Padrão positivo
K2Cr2O7
Classificação da
CL50 de toxicidade
Dolabela (1997)
Análise
estatística
Reed- Muench (1938)
Curva de acumulados
vivos e mortos
Intersecção CL50
Solução OE 24h – leitura das larvas vivas e mortas
Intervalo de confiança
10.000 mg. L-1
Meyer et al. (1982)
Pizzi (1950)
Material e Métodos: Teste Larvicida

Figura 6 - Armadilha utilizada para a
coletas dos ovos do Aedes aegypti
• Através de armadilhas denominadas

ovitrampas.
Palhetas de Eucatex
• As armadilhas foram inspecionadas

semanalmente para a substituição
1 mL de levedo de
das palhetas e recolhimento dos
cerveja e 300 mL
ovos e encaminhados para o de água corrente
Laboratório de Pesquisa e Aplicação
de Óleos Essenciais.
Figura 7 - Larvas Aedes aegypti
• Os ovos do Aedes aegypti foram colocados par

eclodir a temperatura ambiente em um aquário
circular de vidro contendo água mineral
• A identificação da espécie seguiu a

metodologia proposta por Forattini (1962).
• As larvas obtidas foram alimentadas com ração

de gato conforme a metodologia de Silva (1995)
até atingirem o terceiro e quarto estádio, idade
em que foram feitos os experimentos.

+ 10 larvas no quatro estágio
Classificação da
CL50 da atividade
larvicida
Cheng et al. (2003)
Análise
estatística
Reed- Muench
100 mg L-1 (1938)
Curva de acumulados
vivos e mortos
70 mg L-1
Solução OE 100 mg L
-1 50 mg L-1
Pizzi (1950)
Diluída em DMSO 10%
20 mg L-1
10 mg L-1
Material e Métodos: Compostos fenólicos totais
• A determinação dos compostos fenólicos totais do OE foi realizada com adaptação do método de
Folin-Ciocalteu (WATERHOUSE, 2012).
+5 mg do OE
+1 mL de Etanol A solução formada foi

levada ao banho-maria
a 50 ºC por 5 min.
+500 µL de Folin-Ciocalteu
+2,0 mL de Carbonato de Sódio a 20%
• Realizada a leitura em espectrofotômetro manual, em

comprimento de 760 nm.
• A curva padrão foi expressa em mg L-1 de ácido tânico.
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Resultado e Discussão: Avaliação dos parâmetros físico-químicos
Tabela 2 - Parâmetros físico-químicos do óleo essencial (OE) de H. courbaril

L
Parâmetros físico-químicos OE H. Courbaril
Densidade (g mL-1) 0,9182
Solubilidade (EtOH 70%) 1:9
Aparência Límpido
Cor Amarelo
Índice de refração (nD 25°C) 1.500
Rendimento (% m/m) 0.46
Mercês (2014) Ribeiro & Seravalli (2004) IAL, 1985

Rendimento - Faixa de 0,003 a Medida de densidade do óleo Grau de saturação
0,6% para a espécie em estudo está relacionada ao grau de das ligações
ligações duplas ou triplas
Resultado e Discussão: Toxicidade

Figura 8 - Gráfico do percentual de mortos versus logaritimo (log) da
dose, segundo o método de Pizzi (1950)
70
Log 75% Log 25%
60
3,67 1,67
f(x) = 25 x − 16.6666666666667
50 R² = 0.986842105263158
% Mortalidade
Diferença dos Log

40
2,00
30
Média dos Log
20 2,67
10
0
1 1.2 1.4 1.6 1.8 2 2.2 2.4 2.6 2.8 3 ± 2,02
Log C
Resultado e Discussão: Toxicidade

Figura 9 - Gráfico log da concentração versus os acumulados de mortos
e vivos, segundo o método Reed-Muench (1938)
Log da intersecção
25 das curvas
Acumulados mortos
Acumulados Vivos 2,55
20
Concentração (CL50)
Acumulados
15 354,8 mg L-1
10 ATÓXICO
Dolabella (1997)
5
A toxicidade de uma planta é tida como a
capacidade do produto estudado causar
0 algum desequilíbrio, um dano grave ou
1 1.2 1.4 1.6 1.8 2 2.2 2.4 2.6 2.8 3
mesmo levar a morte.
Log concentração
(ALVES, 2014)
Resultado e Discussão: Fenólicos Totais
Figura 10 - Gráfico curva padrão ácido tânico
Tabela 5 - Quantificação de
fenólicos totais (mg EAT g-1)
OE H. courbaril L
Fenólicos totais
490,353 mg EAT g-1
Veggi et al. (2014)

335,0 mg EAT g-1
Os compostos fenólicos estão

relacionados com a quantidade de
antioxidantes das plantas, por isso a
quantificação dos mesmos é importante.
(SILVA et al., 2010)
Resultado e Discussão: Larvicida

Figura 11 - Gráfico do percentual de mortos versus logaritimo (log)
da dose, segundo o método de Pizzi (1950)
100
f(x) = 46.5796004041516 x + 4.29579172857038
R² = 0.964305029905615 Log 75% Log 25%
90 %Mortalidade
1,52 0,44
80
% Mortalidade
Diferença dos Log

70 1,07
60
Média dos Log
0,98
50
40
1.00 1.10 1.20 1.30 1.40 1.50 1.60 1.70 1.80 1.90 2.00 Intervalo de confiança
Log Concentração ± 3,20
Resultado e Discussão: Larvicida

Figura 12 - Gráfico log da concentração versus os acumulados de
mortos e vivos, segundo o método Reed-Muench (1938)
Log da intersecção
50 das curvas
45 Acumulados mortos 1,22

Acumulados Vivos
40
35 Concentração (CL50)
16,60 mg L-1
Acumulados
30
25
20 CHENG et al. (2003)
15 Bom larvicida
10
CL50 < 100 mg L-1
Aguiar (2010)
5
CL50 = 14,8 ± 0,4 mg L-1
0
1.00 1.10 1.20 1.30 1.40 1.50 1.60 1.70 1.80 1.90 2.00
Ação do OE justificada pela sua
Log concentração composição química
Conclusão
Conclusão
• OE de H. courbaril L. apresentou atividade larvicida eficiente contra as larvas de Aedes aegypti.

Comprovando assim a sua potencialidade e representando uma alternativa interessante no controle
das larvas de Aedes aegypti.
• O OE apresentou uma CL50 de acordo com o descrito na literatura, sendo este classificado
como atóxico pelo critério utilizado.
• O teor de fenólicos totais obtidos auxilia na avaliação do potencial antioxidante do OE e

incentiva-se futuramente a análise do OE por Cromatografia Gasosa acoplada a espectrometria
de massas.
REFERÊNCIAS
BIZZO, H. R.; HOVELL, A. M. C.; REZENDE, C. M. Óleos essenciais no Brasil: aspectos gerais,
desenvolvimento e perspectivas. Quím. Nova, São Paulo, v. 32, n. 3, p. 588-594, 2009.
FORATTINI, O.P. Culicidologia médica: identificação, biologia e epidemiologia. São Paulo:

EDUSP; 2002. 864 p.
GONÇALVES, A. L.; ALVES FILHO, A.; MENEZES, H. Produção e composição do óleo essencial
de alfavaquinha (Ocimum selloi Benth) em resposta a dois níveis de radiação solar. Revista
Brasileira de Plantas Medicinais, v. 6, n. 1, p. 8-14, 2003.
PIZZI, M. Sampling variation of the fifty percent end-point, determined by the Reed-Muench
(Behrens) method. Human Biology, 22: 151-191, 1950.
REED L.J. & MUENCH H. 1938. A simple method of estimating fifty percent end points.
American Journal of Hygiene, v. 27, n. 3, p. 493-497, 1938.
OBRIGADO

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ATIVIDADE LARVICIDA DO ÓLEO ESSENCIAL DE Hymenaea courbaril

Discente: Walace Rodrigo de Almeida Ribeiro

A humanidade utiliza plantas com Conhecimento transmitido ao longo de

No Brasil, o uso das plantas

Os OE’s se originam do metabolismo

Possuem composição química

Principal método de extração

O jatobá (Hymenaea courbaril L.) pertence à

Introdução: Aspectos gerais sobre Hymenaea courbaril L. (Jatobá)

Propriedades biológicas comprovadas

Atividade do extrato de folhas e flores frente a

Efeito larvicida com

Introdução: Aspectos gerais sobre o Aedes Aegypti

Figura 3 - Mosquito Aedes aegypthi

• Raramente são encontrados em ambientes

• Além do vírus da dengue, a espécie Aedes

Introdução: : Aspectos gerais sobre o Aedes Aegypti

• De acordo com o Ministério da Saúde no

• A média é de pouco mais de 6 mil casos por

Introdução: : Aspectos gerais sobre o Aedes Aegypti

• No Brasil o método frequentemente utilizado para combater

• A ocorrência cada vez maior de

3.1. Objetivo geral

3.2. Objetivo específicos

• Determinar os parâmetros físico-químicos do óleo essencial de H. courbaril L.;

• Verificar a toxicidade do óleo essencial frente a Artemia salina Leach;

• Quantificar o teor de fenólicos totais presentes no óleo essencial;

Material e Métodos: Material vegetal

Coleta em outubro de 2019, região de Palmeiras – MA.

Identificadas pelo Herbário Ático Seabra da Universidade

Secagem em estufa de secagem de ar convectiva a 45 ºC/24 h.

Material e Métodos: Extração do óleo essencial

Extração do óleo essencial foi por hidrodestilação (100 ºC/3h).

Foram utilizados 597,5 g da amostra de casca de jatobá com a

Foi seco por meio da percolação com Na2SO4 (Sulfato de sódio

Material e Métodos: Caracterização físico-química

As propriedades físico-químicas do óleo essencial foram determinadas de acordo com a

Solubilidade em etanol (70% v/v)

Material e Metódos: Toxicidade

Bioensaio de letalidade frente a Artemia salina Leach.

Material e Métodos: Teste Larvicida

• Através de armadilhas denominadas

• As armadilhas foram inspecionadas

Material e Métodos: Teste Larvicida

Figura 7 - Larvas Aedes aegypti

• Os ovos do Aedes aegypti foram colocados par

• A identificação da espécie seguiu a

• As larvas obtidas foram alimentadas com ração

Material e Métodos: Teste Larvicida

Material e Métodos: Compostos fenólicos totais

+1 mL de Etanol A solução formada foi

+2,0 mL de Carbonato de Sódio a 20%

• Realizada a leitura em espectrofotômetro manual, em

• A curva padrão foi expressa em mg L-1 de ácido tânico.

Resultado e Discussão: Avaliação dos parâmetros físico-químicos

Tabela 2 - Parâmetros físico-químicos do óleo essencial (OE) de H. courbaril

Mercês (2014) Ribeiro & Seravalli (2004) IAL, 1985

Resultado e Discussão: Toxicidade

Diferença dos Log

Resultado e Discussão: Toxicidade

Resultado e Discussão: Fenólicos Totais