CONTAGEM DE PLAQUETAS

Antonio Altair M. Oliveira Domenico H.G.P. Barbieri Lcia Helena M. Bruneri Primavera Borelli

PRINCPIO
Duas metodologias podem ser utilizadas para a contagem de plaquetas: a) Mtodos Diretos, em que a amostra a ser examinada diluda apropriadamente e a contagem realizada em cmara conta-glbulos ou em aparelho eletrnico e b) Mtodos Indiretos, nos quais as plaquetas so contadas em uma extenso sangunea e posteriormente relacionadas com o nmero de eritrcitos por mm3 de sangue. Devido s propriedades intrnsecas das plaquetas, ( alta capacidade de adesividade e de agregao e facilidade de se desintegrarem} alguns cuidados devem ser tomados para que se consigam resultados exatos e reprodutveis.Assim, com exceo da cmara conta- glbulos, pipetas de Thoma e/ou de Sahli e lminas, todo material usado (inclusive as seringas) deve ser de plstico ou siliconizado; o anticoaglante de escolha o EDTA em soluo a 8% e deve-se evitar a formao de espuma pela agitao da amostra. MTODOS DIRETOS Diversos so os recursos tcnicos utilizveis para a contagem direta das plaquetas: microscopia de contraste de fase, microscopia ptica comum e contagem eletrnica;os diluentes empregados podem ser o de Rees-Ecker, de Feissly, de Lutin mod., etc. Da conjuno destes diferentes recursos, vrias tcnicas foram propostas e dentre elas citaremos a de Rees-Ecker e a da Contagem com oxalato de amnio. LQUIDO DILUIDOR DE REES-ECKER: - Citrato de sdio (C6H5Na3O7.2H20)................................. - Formalina (38%)............................................................... - Azul de Cresil Brilhante.................................................... - gua destilada q.s.p.......................................................... 3,8 g 0,2 ml 0,1 g 120 ml

A soluo deve ser guardada em frasco mbar a 4. C e filtrada no momento do uso. LQUIDO DILUIDOR DE BRECHER: - Azul de Metileno 1%........................................................ 2 gotas - Oxalato de Amnia.......................................................... 1,0 g - gua destilada q.s.p......................................................... 100 ml Guardar em frasco mbar. Armazenar em geladeira

1. TCNICA DE REES-ECKER: a) preencher a pipeta de Thoma, para glbulos vermelhos, com sangue (colhido com EDTA) at a marca 0,5 e em seguida preencher com lquido diluente at a marca 101 (diluio 1/200). Caso se use sangue capilar, a pipeta de Thoma deve ser preenchida primeiramente com sangue at a marca 1. A seguir, completar com lquido diluente at a marca 101 (diluio 1/100).; b) agitar por 15 minutos (se possvel, em agitador mecnico); c) desprezar as primeiras gotas (s contm o corante) que fluem da pipeta e ento preencher a cmara de Neubauer, mantendo-a em cmara mida por 20 minutos e d) levar em seguida a cmara ao microscpio e efetuar a contagem das plaquetas no retculo central ( nos 25 quadrados: rea total de contagem = 1 mm2). Nesta tcnica, as plaquetas apresentam-se coradas em azul e refringentes. 2. TCNICA DE BRECHER: a) diluir o sangue colhido com EDTA a 1/200 com o lquido diluidor de Brecher; b) preencher a cmara de Neubauer e aps 3 minutos realizar a contagem como descrito em d).
CLCULO

O nmero de plaquetas encontrado multiplicado por 2.000 (para a diluio 1/200), obtendo-se assim, o nmero de plaquetas/mm3 de sangue.
VALOR NORMAL: 150.000 a 300.000 plaquetas/mm3 de sangue.

MTODOS INDIRETOS Como exemplo de mtodo indireto citaremos o mtodo de Fnio.

TCNICA:

a) colher o sangue com os cuidados recomendados; b) fazer a extenso e a colorao do modo habitual; contar as plaquetas existentes em, no mnimo, 10 campos (que contenham aproximadamente 200 eritrcitos / campo); c) contar o nmero de eritrcitos/mm3 de sangue(contagem global); d) a seguir, fazer o clculo relacionando o nmero de plaquetas contado, com o nmero de eritrcitos.

Por exemplo: em 10 campos de aproximadamente 200 eritrcitos (portando em 2.000 eritrcitos) contaram-se 75 plaquetas. O nmero de eritrcitos do paciente era de 5.000.000/mm3, assim o nmero de plaquetas/mm3 ser: 75 plaquetas .................................... 2000 eritrcitos x = ....................................... 5.000.000/mm3 (eritrcitos)
x = 375.000 plaquetas/mm3
VALOR NORMAL: 200.000 a 400.000 plaquetas/mm3