Revista Mdica de Minas Gerais 2008; 18(2): 116-122

116
ARTIGO DE REVISO
Faculdade de Medicina Departamento de Propedutica
Complementar Universidade Federal de Minas Gerais
Av. Alfredo Balena, n190,
CEP: 30310-100
Belo Horizonte, Minas Gerais.
Endereo para correspondncia:
Roberta Oliveira de Paula e Silva
Rua Costa Monteiro, 568/202
Sagrada Famlia
Belo Horizonte/MG
CEP: 31030480
e-mail:betaops@gmail.com
RESUMO
A Eletroforese de Protenas Sricas (EPS) um mtodo simples, que permite separar pro-
tenas do plasma humano em fraes. Sua interpretao traz informaes teis ao mdico.
Assim, ela importante para a investigao e diagnstico de diversas doenas. O exame
consiste em aplicar a amostra do soro em um meio slido e submet-la a um potencial
eltrico. As protenas percorrem distncias diferentes, formando bandas denominadas:
albumina, alfa-1-globulina, alfa-2-globulina, betaglobulina e gamaglobulina. Essas bandas
so, em seguida, quantificadas. Observa-se diminuio da concentrao de albumina em
situaes que promovam sua perda, baixa ingesta protica ou elevado catabolismo. As
fraes alfaglobulinas apresentam nveis aumentados em processos inflamatrios, infec-
ciosos e imunes. O aumento da betaglobulina observado em situaes de perturbao
do metabolismo lipdico ou na anemia ferropriva. A ausncia ou diminuio da banda-
gama indica imunodeficincias congnitas ou adquiridas. O seu aumento sugere elevao
policlonal das imunoglobulinas associado s condies inflamatrias, neoplsicas ou
infecciosas, alm da elevao monoclonal observada no mieloma mltiplo e em outras
desordens linfoproliferativas, como a macroglobulinemia de Waldenstrm. O conhecimen-
to dos principais componentes de cada banda eletrofortica facilita o raciocnio clnico e
auxilia na identificao de padres eletroforticos, caractersticos de algumas doenas.
Palavras-chave: Eletroforese; Eletroforese das Protenas Sanguneas; Protenas
Sanguneas/anlise.
ABSTRACT
Seric proteins electrophoresis (SPE) is a simple method that allows the separation of the
human plasma proteins in fractions. Its interpretation gives useful information to the physi-
cian, which makes it an important tool for several diseases investigation and diagnosis.
The exam consists in applying the serum sample into a solid medium and put it under an
electrical potential. The proteins run different distances, forming bands named: albumin,
alpha-1-globulin, alpha-2-globulin, beta globulin and gamma globulin. These bands are
then quantified. It is noted a reduction of the albumin concentration in situations that pro-
mote its lost, low protein ingestion or high catabolism. The Alpha globulin fractions present
increased levels in inflammatory, infectious and immune processes. The increase of beta
globulin may be noted in situations of the lipid metabolism disorder or in the iron deficiency
anaemia. The absence or reduction of the band-gamma indicates congenital or acquired
immunodeficiency, while the increase suggests immunoglobulin polyclonal elevation related
to inflammatory , neoplasic or infectious conditions, besides the monoclonal elevation
typically noted in the multiple myeloma and other linfoproliferative disorders, such as
Waldenstrm s macroglobulinemia. The knowledge of each electrophoretic band main
components makes easy the clinical reasoning and helps in the identification of electropho-
retic patterns that characterize given diseases.
Key words: Electrophoresis; Blood Proteins Electrophoresis; Blood Proteins /analysis.
Seric proteins electrophoresis: clinical interpretation and
correlation
Roberta Oliveira de Paula e Silva
1
; Aline de Freitas Lopes
2
; Rosa Malena Delbone de Faria
3
1
Mdica Generalista, Mestranda em Patologia Geral pela
Faculdade de Medicina da Universidade Federal de Minas
Gerais
2
Mdica Generalista
3
Hematologista. Prof de Patologia Clnica do Departa-
mento de Propedutica Complementar da Faculdade de
Medicina da UFMG
Eletroforese de protenas sricas:
interpretao e correlao clnica
Revista Mdica de Minas Gerais 2008; 18(2): 116-122
117
Eletroforese de protenas sricas: interpretao e correlao clnica
ELETROFORESE
Todas as molculas de protenas so formadas
por uma cadeia de aminocidos, unidos entre si por
ligaes pepitdicas. Os aminocidos, por sua vez,
possuem uma estrutura em comum, contendo um
grupo amino e um grupo carboxil e o chamado gru-
pamento lateral. Este ltimo a estrutura que for-
nece identidade ao aminocido. A combinao de
diferentes aminocidos, bem como a quantidade de
aminocidos presentes em uma molcula de prote-
na, confere a ela peso e carga eltrica distinta.
1
A eletroforese uma tcnica de separao de
protenas utilizando-se de foras eletroforticas
e eletroendosmticas presentes no sistema. As
fraes separadas so visibilizadas a partir de co-
rante sensvel a protenas. Os resultados devem ser
sempre expressos sob forma percentual e de con-
centrao das diversas fraes e em forma grfica.
A amostra de soro humano, rica em protenas,
aplicada sobre um meio composto de acetato de
celulose ou gel de agarose e, em seguida, sofre
a ao de um potencial eltrico gerado por um
plo positivo (anodo) e outro negativo (catodo).
Esse potencial provoca a migrao das protenas
em direo ao anodo e, de acordo com o peso
molecular e carga eltrica deste, elas percorrem
distncias distintas, gerando diferentes bandas,
representadas por albumina e as globulinas alfa,
beta e gama. Em seguida, realizada a revelao
das fraes proticas corando-se as bandas, o que
gera o aspecto visto na Figura 2.
1,3,5,6
INTRODUO
As protenas so macromolculas compostas por
aminocidos, com ligaes covalentes entre si, po-
dem ser polares ou apolares, de acordo com o pH,
devido distribuio eltrica resultante das ligaes
covalentes ou inicas de seus grupos estruturais.
A EPS um mtodo laboratorial simples para
separar as protenas presentes no plasma huma-
no em fraes, de acordo com suas respectivas
cargas eltricas. Trata-se do teste de triagem mais
utilizado para investigao de anormalidades pro-
ticas presentes no sangue.
1-3
importante que o
mdico esteja apto a interpret-la, uma vez que in-
formaes teis podem ser inferidas com base no
seu resultado, trazendo valiosos subsdios para a
investigao diagnstica.
4
Existe, atualmente, elevado nmero de protenas
identificadas no soro, que diferem entre si estrutu-
ralmente e participam em vrios processos fisiolgi-
cos, tais como anticorpos, carreadores de molculas
e ons, enzimas, inibidores enzimticos, fatores da
coagulao, entre outras funes. A anlise das pro-
pores de suas fraes tem considervel valor na
abordagem de desordens agudas e crnicas, forne-
cendo informaes clinicamente teis. Alm disso, a
EPS pode ser uma ferramenta importante para moni-
torar pacientes por longos perodos, quando existem
alteraes especficas nos nveis de determinadas
protenas, como no mieloma mltiplo, sndrome ne-
frtica e cirrose, por exemplo (Figura 1).
1-3
Figura 1 - Algumas das principais protenas encotra-
das em cada banda eletrofortica
Albumina
Alfa 2 Globulina
Haptoglobina
Macroglobulina
Ceruplasmina
Imunoglobulina
Antitripsina
TBG
Alfafetoprotena
Alfa 1 Glicoprotena cida
Transferrina
Beta-lipoprotena
C3
IgG
IgM
IgD
IgA

2
1

Figura 2 - Corrida eletrofortica normal

Revista Mdica de Minas Gerais 2008; 18(2): 116-122
118
Eletroforese de protenas sricas: interpretao e correlao clnica
ALFA-1 GLOBULINAS
Esse grupo constitudo por um conjunto de
vrias protenas, entre as quais a alfa-1-antitripsina,
protrombina, transcortina, globulina ligadora de
tiroxina e alfa-fetoprotena. Em geral, h aumento
dessa frao em processos inflamatrios, infeccio-
sos e imunes, de forma inespecfica.
1,2,6
A alfa-1-antitripsina corresponde a 90% do
pico normal de alfa-1-globulina. Essa protena
codificada por dois alelos co-dominantes de-
nominados M (mais comum) e Z. A homozigose
ZZ gera nveis insuficientes de alfa-1-antitripsina
e est relacionada ao surgimento de enfisema
panlobular grave, bem como uma forma rapida-
mente progressiva de cirrose, ambos de incio
ainda na primeira infncia (Figura 5). Assim,
As fraes so quantificadas por densitometria
ou eluio, gerando um grfico (Figura 3) no qual
as bandas podem ser comparadas, possibilitando
melhor evidncia de alguma anormalidade.
1,3,5,6
ALBUMINA
a protena mais abundante no plasma e cor-
responde a cerca de 60% da concentrao total
de protenas.
1
sintetizada exclusivamente no f-
gado e possui funes importantes no organismo,
como transporte de diversas substncias e manu-
teno da presso onctica.
1
Trata-se de uma das
menores molculas proticas e, em conseqn-
cia disso, tende a se perder na urina sempre que
ocorre dano aos glomrulos renais.
4
A hipoalbuminemia uma condio altamente
inespecfica e acompanha inmeras doenas.
4
Na
EPS, pode se apresentar com um pico menor, sig-
nificando queda em sua concentrao srica. Esse
fato est relacionado a fatores comuns a diversas
situaes, como sntese prejudicada (cirrose he-
ptica e hepatite viral), aumento do catabolismo
(infeco bacteriana grave, neoplasias malignas,
insuficincia cardaca congestiva, doenas infla-
matrias e infecciosas crnicas), ingesta protica
inadequada (desnutrio protica) e perdas (por
meio dos glomrulos renais e intestinos).
1,2
Os me-
nores nveis de albumina srica esto presentes na
sndrome nefrtica ou acompanhando as entero-
patias perdedoras de protenas
2
(Figura 4).
Outro aspecto relevante em relao ao estu-
do da albumina o fato de que, em raras situa-
es, pode-se encontrar mais de um tipo dessa
protena no soro humano, porm sem gerar ma-
nifestao clnica. Esse evento se reflete na EPS
como um aumento na largura da faixa corres-
pondente ou at mesmo na formao de duas
faixas distintas.
1,2
Albumina
Globulinas
1 2

Figura 3 - Grfico de corrida eletrofortica normal

Cirrose Heptica
1 2
A
+

Enteropatia Perdedora

1 2
A
Figura 4 - Perfil eletrofortico de entidades clnicas em
que h reduo da frao albumina. (A: al-
bumina; 1: alfa-1-globulina; 2: alfa-2-glob-
ulina; : betaglobulina e : gamaglobulina)
Revista Mdica de Minas Gerais 2008; 18(2): 116-122
119
Eletroforese de protenas sricas: interpretao e correlao clnica
bina seja rapidamente removido da circulao.
1,2
Aps quadro de hemlise intravascular, no qual
h importante gasto dessa protena, os nveis s-
ricos normais s so atingidos em torno de uma
semana. A diminuio de seus nveis ou a ausn-
cia de haptoglobina (fenmeno presente em algu-
mas populaes) repercute formando uma banda
mais clara na EPS.
2
A alfa-2-macroglobulina uma das maiores
protenas globulnicas presentes no plasma e sua
concentrao eleva-se em torno de 10 vezes ou
mais na sndrome nefrtica, quando so perdidas
as outras protenas de peso molecular mais baixo.
Nessa situao, pode atingir nvel srico igual ou
maior que a albumina, conforme a Figura 7.
BETAGLOBULINAS
Compostas por um grupo heterogneo de
protenas, das quais as principais so: beta-li-
poprotenas, transferrina e componente C3 do
complemento. A transferrina possui o mais r-
pido padro eletrofortico das betaglobulinas e
apresenta-se aumentada na anemia ferropriva,
na gravidez e no uso de anovulatrios.
1,2
O C3,
por sua vez, o componente com mais lenta
migrao e sua queda est relacionada s do-
enas glomerulares.
2
A ictercia obstrutiva, o hipotireoidismo, al-
guns casos de Diabetes mellitus e ateromatose
podem apresentar excesso de colesterol srico
e, conseqentemente, aumento das beta-lipo-
protenas. A diminuio dessa frao rara e,
em geral, utilizada como elemento de valor
prognstico, principalmente, nos processos de
evoluo crnica.
7
a EPS adequado mtodo de triagem perante
a suspeita de deficincia grave dessa protena.
Diante da ausncia da banda alfa-1 ou pico di-
minudo, necessrio completar a propedutica
com testes mais especficos.
1,2
ALFA-2 GLOBULINAS
A banda alfa-2 constituda por um grupo
variado de protenas, entre elas a haptoglobi-
na, a alfa-2-macroglobulina, a ceruloplasmina,
a eritropoetina e a colinesterase. Da mesma
forma que as alfa-1-globulinas, as protenas per-
tencentes a essa banda tambm se comportam
como protenas de fase aguda, aumentando
sua concentrao na presena de infeco, em
processos inflamatrios e imunes
1,2,6
(Figura 6).
A alfa-2-macroglobulina e a haptoglobina cor-
respondem maior parte dessa banda.
1,2
A haptoglobina migra mais lentamente em
comparao com a alfa-2-macroglobulina e tem
funo de se ligar hemoglobina circulante, per-
mitindo que o complexo haptoglobina-hemoglo-

Figura 5 - Perfil eletrofortico da deficincia de

alfa-1 antitripsina

Figura 6 - Perfil eletrofortico das protenas de
fase aguda
Sndrome Nefrtica
1 2
A

Figura 7 - Perfil eletrofortico da sndrome nefrtica

Revista Mdica de Minas Gerais 2008; 18(2): 116-122
120
Eletroforese de protenas sricas: interpretao e correlao clnica
PRINCIPAIS PADRES ELETROFORTICOS
DA FRAO GAMA
Pico policlonal - representa resposta imunol-
gica simultnea de diversos clones plasmocitrios
a determinado estmulo antignico, seja inflama-
trio, imune ou infeccioso, tais como tuberculose,
esquistossomose, calazar, sarcoidose, linfogranu-
loma venreo, sfilis, artrite reumatide, lpus eri-
tomatoso sistmico e politransfuso de componen-
tes sanguneos, entre outros. Este padro aparece
como aumento difuso da frao gama, represen-
tado pela presena de uma curva de base larga,
demonstrando a produo de todas as classes de
imunoglobulinas
1,2
(Figura10).
Pico monoclonal - consiste no aumento homo-
gneo e fusiforme da frao gama, que representa
a produo por um nico clone plasmocitrio de
um tipo especfico de imunoglobulina e, sendo
essas molculas idnticas entre si, apresentam a
mesma mobilidade eletrofortica, levando pro-
duo de uma curva de base estreita conhecida
como pico monoclonal
1,2
(Figura 11). A protena
monoclonal geralmente gera um pico na frao
gama, porm, este pode estar presente algumas
vezes na frao beta, quando a imunoglobulina
envolvida a IgA. Esse padro est associado s
gamopatias monoclonais que constituem um gru-
po de desordens caracterizadas pela secreo de
GAMAGLOBULINAS
Frao constituda por imunoglobulinas (Igs)
que so os anticorpos produzidos pelos plasmcitos,
quando estimulados por antgenos ou devido de-
sordem clonal maligna dessas clulas. H diferentes
classes de Igs, sendo que todas so formadas por
duas cadeias pesadas (G, A, M, D e E) e duas cadeias
leves (kappa ou lambda), como mostra Figura 8.
A banda eletrofortica da frao gamaglobul-
nica composta pelas cinco maiores classes de Igs
que, por ordem decrescente de concentrao no
plasma, so IgG, IgA, IgM, IgD e IgE (Tabela 1, Fi-
gura 9). Apenas a IgG apresenta migrao por toda
a banda da frao de gamaglobulinas. Assim, as
alteraes nessa banda refletem o que ocorre com
esta imunoglobulina.
2
A IgA encontra-se na rea de
juno com a frao betaglobulina. A IgM, por sua
vez, migra na regio localizada entre IgA e IgG e
detectada quando estimulada (infeces agudas).
Tabela 1 - Caractersticas das imunoglobulinas
Tipo de Ig Caractersticas
IgG Migrao por toda a frao gama
Representa 73% das Igs normais
Age contra antgenos bacterianos
IgA Migrao na juno das fraes beta e gama
Representa 19% das Igs normais
Proteo de mucosas e fluidos corporais
IgM Migrao na juno das fraes beta e gama
Representa 5% das Igs normais
Age na fase aguda de doenas infecciosas
IgD Funo desconhecida
IgE Reao de hipersensibilidade
Figura 8 - Estrutura esquemtica de imunoglobulina
Cadeira Leve
Cadeira Leve
Cadeira Pesada
2

IgG
IgA
IgM
Figura 9 - Relao das imunoglobulinas com o padro
eletrofortico de protenas sricas

Figura 10 - Esquema ilustrativo de pico policlonal

Revista Mdica de Minas Gerais 2008; 18(2): 116-122
121
Eletroforese de protenas sricas: interpretao e correlao clnica
bao direta ou indireta na sua sntese, quando
h consumo dessa protena por diminuio da
ingesta ou perda atravs de proteinria ou via
enteral. As fraes alfaglobulinas apresentam-se
com nveis aumentados em todos os processos
inflamatrios, infecciosos e imunes.
1,2
O aumen-
to das betaglobulinas representa perturbao
do metabolismo dos lipdeos ou dificuldade na
excreo biliar, verificadas nas colestases. O au-
mento na taxa da betaglobulina encontrado, ge-
ralmente, nos casos de anemia ferropriva, por au-
mento da sntese de transferrina; e a queda dessa
frao pode ter valor prognstico nos processos
de evoluo crnica. A frao gamaglobulina
apresenta taxas aumentadas todas as vezes que
se verificar reao inflamatria, imune ou infec-
ciosa, lembrando que tal aumento se d de forma
policlonal. H tambm o aumento dessa frao
de forma monoclonal presente em doenas lin-
foproliferativas, tais como o mieloma mltiplo. A
hipogamaglobulinemia verificada em anoma-
lias congnitas ou em processos patognicos que
trazem a destruio do setor linfide.
7
de grande importncia mdica conhecer e
interpretar corretamente a EPS, uma vez que este
exame facilita o diagnstico de diversas doenas,
possui baixo custo e de fcil procedimento tc-
nico. Apesar de sua finalidade no ser identificar
protenas especficas (uma vez que cada frao re-
presenta um conjunto de diversas protenas), a pro-
posta o fornecimento dos componentes principais
de cada frao protica para facilitar o raciocnio
clnico e auxiliar no diagnstico de doenas que
possuem padres eletroforticos caractersticos.
REFERNCIAS
McPherson RA. Protenas especfcas. ln: Henry JB. 1.
Diagnsticos cnicos e tatamento por mtodos lbora-
toriais. 18
a
ed. So Paulo: Manole; 1999. p.245-60.
Larson PH. Serum proteins: diagnostic signifcance 2.
of electrophoretic patterns. Hum Pathol. 1974 Nov;
5(6):629-40.
Moura RA,Wada CS,Purchio A,Almeida TV.Tcnicas de 3.
laboratrio. 3
a
ed. So Paulo: Atheneu; 1998. p. 23-33.
Miller O, Gonalves RR. Laboratrio para o clnico. 6 4.
a
ed. Rio de Janeiro: Atheneu; 1988. p.19-49.
Burtis CA,Ashwood ER. Fundamentos de qumica cl- 5.
nica. 4
a
ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan; 1998.
p.96-102.
imunoglobulina monoclonal ou fragmento desta.
No mieloma mltiplo, principal entidade entre as
gamopatias monoclonais, fundamental a apli-
cao clnica da eletroforese de protenas sricas
como parte dos critrios diagnsticos.
1, 8-10
Hipogamaglobulinemia/ agamaglobulinemia
consiste na reduo do nvel das gamaglobulinas,
geralmente sem alterao pronunciada nas outras
regies da globulina. Esta configurao sugesti-
va da variante de cadeia leve do mieloma mltiplo
(cerca de 20% dos casos de mieloma, no qual o pico
monoclonal se encontra na eletroforese urinria e
no na srica, devido ao componente de cadeia
leve exclusivo). Esse padro tambm est presen-
te nas hipo ou agamaglobulinemias congnitas ou
secundrias, em que h ausncia de um ou mais
anticorpos especficos, que resulta em infeces
freqentes algumas vezes fatais.
11
(Figura 12).
CONCLUSES
Para se conseguir interpretar bem o resultado
de uma EPS, faz-se necessrio conhecer o signi-
ficado de cada banda das fraes proticas.
1
As-
sim, a albumina sofre alterao quando h pertur-

Figura 11 - Esquema ilustrativo de pico monoclonal

Figura 12 - Esquema ilustrativo de hipoglobulinemia/
agamaglobulinemia
Revista Mdica de Minas Gerais 2008; 18(2): 116-122
122
Eletroforese de protenas sricas: interpretao e correlao clnica
Faria RMD, Silva CMF, Magalhes GHR. Mieloma Mlti- 12.
plo- caractersticas clnicas ao diagnstico. Rev Bras
Hematol Hemoter. 2005, 27 (supl 2) :1-188, 165-166.
Hungria VTT,Maiolino A,Martinez G.Estudo retrospec- 13.
tivo do Mieloma Mltiplo em centros brasileiros- As-
pectos epidemiolgicos- Resultados preliminares.Rev
Bras Hematol Hemoter. 2005, 27(Supl 2):1-188, 164.
International Myeloma Working Group. Criteria for 14.
the classifcation of monoclonal gammopathies, mul-
tiple myeloma and related disorders: a report of the
International Myeloma Working Group. Br J Haema-
tol. 2003; 121:749-57
Smith A, Wisloff F, Samson D Guidelines on the diag- 15.
nosis and management of multiple myeloma 2005. Br
J Haematol. 2005; 132:410-51.
Kyle RA, Rajkumar SV. Monoclonal gammopathies of 16.
undetermined signifcance: a review. Immunol Rev.
2003; 191:112-39.
Guimares RX, Guerra CCC. Clnica e laboratrio: in- 6.
terpretao clnica de provas laboratoriais. 3
a
ed. So
Paulo: Sarvier; 1983. p.147-64.
Lima AO.Mtodos de laboratrio aplicados clnica.6 7.
a
ed Rio de Janeiro: Guanabara Koogan; 1985. p.220-32.
Raikumar SV. MGUS and Smoldering Multiple Mye- 8.
loma: update on pathogenesis, natural history, and
management. Hematology: Am Soc Hematol Educ
Program. 2005;340-5.
Joo MM,Menezes FL,Saavedra JA.Mieloma Mltiplo: 9.
a propsito de um caso raro de gamapatia biclonal
IgD/lambda Abordagem diagnstica e atitudes tera-
puticas. Rev Soc Port Md Intern. 2002; 9 (3):167-76.
Dispenzieri A, Kyle RA Multiple myeloma: clinical fe- 10.
atures and indications for therapy. Best Pract Res Clin
Haematol. 2005;18(4):553-68.
Ravel R. Laboratrio Clnico. 6 11.
a
ed. Rio de Janeiro:
Guanabara Koogan; 1997.p.301-22.