MICROBIOLOGIA BSICA

CAPTULO 1: Introduo Microbiologia

Microbiologia como uma Cincia

Estuda a natureza fundamental e as propriedades dos microrganismos (Microbiologia Bsica).
O controle e o uso dos microrganismos de maneira benfica (Microbiologia Aplicada)
Principais temas de pesquisa usados na Microbiologia Bsica:

1. Caractersticas Morfolgicas - forma e tamanho da clula; composio qumica e

funo de suas estruturas internas.

2. Caractersticas Fisiolgicas - p.ex; a necessidade nutricional especfica e as condies

3.
4.
5.
6.
7.

fsicas necessrias ao crescimento e reproduo.

Atividades Bioqumicas - como os microrganismos quebram os nutrientes para obter
energia e como eles usam esta energia para a sntese de compostos da clula.
Caractersticas Genticas - a hereditariedade e variabilidade das caractersticas.
Potencial de causar doena - presena ou ausncia para o homem, animais e plantas
Caractersticas Ecolgicas - a ocorrncia natural dos microrganismos no ambiente e
sua relao com outros m.o.
Classificao - a relao taxonmica entre os grupos no mundo microbiano.

Principais campos de aplicao da microbiologia Aplicada (medicina, alimentos e laticneos,

agricultura, indstria e ambiente). Alguns exemplos:

1. Produo de vacina com mtodo mais econmico

2. Processos mais eficientes para o tratamento de esgoto
3. Sntese de numerosas substncias, desde mais simples, como o cido ctrico, a
antibiticos mais complexos, e enzimas

4. Utilizado como suplemento alimentar (protena de clula nica - SCP)

5. Produo de gs metano, utilizado como combustvel (pesquisa atual)
6. Biometalurgia - explora a atividade qumica de bactrias para extrair minerais de
minrios de baixa qualidade

7. Usados como "inseticidas biolgicos", no lugar de produtos qumicos; microrganismos

capazes de degradar poluentes

8. Microrganismos capazes de melhorar a capacidade de detergentes caseiros, em

remover manchas
9. Isero de genes bacterianos em plantas para matar insetos
10. Produo de enzimas bacterianas que dissolvem cogulos sanguneos; vacinas
humanas utilizando vrus de insetos; e testes laboratorias rpidos para diagnstico de
infeco viral (novas pesquisas da Engenharia Gentica-Microbiologia Mdica)
A clula
As clulas microbianas podem ser divididas em duas categorias com base em como a
substncia nuclear se apresenta dentro da clula: Clulas Eucariticas, apresenta um ncleo
separado do citoplasma por uma membrana nuclear; Clulas Procariticas, que apresentam
material nuclear sem membrana.
Todos os organismos, unicelulares (constitudos de uma nica clula), ou multicelulares (que
contm muitas clulas), apresentam as seguintes caractersticas:

1.
2.
3.
4.
5.
6.

reproduo
utilizao de alimentos como fonte de energia
sntese de substncias e estrutura celular
excreo de substncias
resposta a alteraes ambientais
mutaes (alteraes sbitas em suas caractersticas hereditrias), embora ocorram
raramente

Elementos diferenciais entre clulas procariticas e eucariticas:

Elemento
Grupos pertencentes
Tamanho da clula
Ncleo

Organelas envolvidas por

membrana
Flagelo
Glicoclice

Parede Celular

Membrana citoplasmtica

Ribossomos
Cromossomos (DNA)
Diviso Celular
Reproduo sexual
Relao G + C (%)

Origem da Vida

Clulas Procariticas
Bactrias, algas verdeazuis
tipicamente 0.2-2.0 m

Clulas Eucariticas
Algas, fungos, protozorios,
vegetais e animais
tipicamente 10-100 m
limitado por membrana
membrana nuclear e
nuclear e presena de
nuclolo ausentes
nuclolo
presentes : lisossomos,
complexo de Golgi, retculo
ausente
endoplasmtico, mitocndria
e cloroplastos
consiste de 2 protenas
complexo : consiste de
construdas em blocos
mltiplos microtbulos
presente em algumas
presente como uma
clulas que tem parede
cpsula ou camada limosa
celular
usualmente presente;
quimicamente complexa
quando presente
(parede celular bacteriana quimicamente simples
tpica inclue peptidoglicano)
presena de esteris e
no contm carboidratos e
carboidratos que servem
esteris
como receptores
80S (retculo
70S, distribuidos no
endoplasmtico); 70S
citoplasma
(mitocndria e cloroplasto)
cromossomo nico, circular, um ou mais cromossomos,
sem histona
linear, com histona
fisso binria
mitose
transferncia de DNA
envolve meiose
apenas por fragmentos
28 a 73
em torno de 40

Concluses do estudo da origem da vida :

1. origem nica das formas de vida

2. existem 3 linhas primrias de descendncia evolucionria: Eubactrias,
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.

Arqueobactrias e Eucaritos
h duas linhas de procaritos: Eubcterias e Arqueobcterias
tanto os cloroplastos como as mitocndrias - origem bacteriana
o relgio evolucionrio no constante para todos os microrganismos
as maiores divergncias entre as Arqueo e Eubactrias so das termoflicas
a fotossntese surgiu depois
os organismos mais primitivos so associados aos ambientes hidrotermais (gua + alta
temperatura)
os primeiros organismos deveriam ter duas propriedades: mecanismo de metabolismo
(energia) e mecanismo de replicao (hereditariedade)

Os primeiros organismos alm de anaerbios, deveriam ser organotrficos fermentativos

No surgimento da vida em aerobiose, imagina-se ter comeado com as cianobactrias, as
quais crescem produzindo molculas de oxignio (O2), as quais se decompem em tomos
(O), que reagiria com as novas molculas de oxignio produzidas, formando o oznio (O3).
Com a camada de oznio, surge proteo dos raios UV, e surgimento de microrganismos
aerbios.
Os organismos primitivos devem ter usados RNA como material gentico, tanto para
reproduo como para produo de enzimas.
Diviso dos Reinos (Antiga):

1.
2.
3.
4.
5.

Monera (procaritos) - microrganismos primitivos

Protista (algas, protozorios, fungos limosos)
Plantae (plantas verdes, algas superiores)
Fungi (fungos - bolores e leveduras)
Animalia (animais que ingerem alimentos)

Diviso dos Reinos (Atual):

1. Eubactrias (clulas procariticas)

2. Arqueobactrias (clulas procariticas) - microrganismos primitivos
3. Eucaritos (clulas eucariticas)
A teoria endosimbitica prope a maneira pela qual as clulas eucariticas tem evoluido:
origem das organelas eucariticas (cloroplastos e mitocndrias) a partir dos procaritos.
O Microscpico
O olho humano incapaz de perceber um objeto com um dimetro menor que 0.1 mm, a uma
-3
distncia de 25 cm. Os microrganismos tem dimenses de m (1m = 10 mm)
Os microscpicos so classificados dependendo do princpio no qual a ampliao baseada:
pticos (empregam dois sistemas de lentes, ocular e objetiva, atravs das quais a imagem
ampliada obtida) e eletrnicos (empregam um feixe de eltrons para produzir a imagem
ampliada)

A microscopia ptica a mais comumente utilizada no laboratorio de microbiologia. Em geral, o

microscpico ptico amplia o objeto at certo limite (1.000 a 2.000 vezes). Esta limitao
devida ao poder de resoluo.
Poder de Resoluo (P.R) - medida do menor objeto que pode ser visto ao microscpico
P.R = comprimento de onda ;
A.N
A.N. (Abertura Numrica) = n.sen
n = ndice de refrao; (teta) = semi ngulo do cone de luz que entra na objetiva.
Pode-se usar um meio (p.ex. leo de cedro) com o mesmo ndice de refrao do vidro da
lmina, para que os raios de luz deixem a lmina sem refrao, seguindo uma direo reta
para dentro da objetiva, aumentando assim o poder de resoluo (P.R.)

Principais caractersticas das objetivas do microscpio ptico :

Mxima
Ampliao
Dimetro
Dist. de Poder de
Distncia focal
Abertura
ampliao
linear da
aprox. do
trabalho resoluo
aprox.
aproximada(mm)
'Nmerica
objetiva
campo(mm)
aprox.(mm) (m)
(ocular 10x)
10x
(objetiva
seco de
16
1.5
0.25
4.50
2.0
100 vezes
pequeno
aumento)
40-45x
(objetiva
seco de
4
0.34
0.65
0.65
0.7
450 vezes
grande
aumento)
90-100x
(objetiva
1.8
0.15
1.25
0.13
0.4
1000 vezes
de
imerso)
A objetiva produz uma imagem real ampliada do objeto, a qual ainda aumentada em escala
muito maior pela ocular, sendo a mesma captada pelo olho humano

O Microscpico eletrnico possui grande vantagem diante do ptico, apresenta um poder de

resoluo 100 vezes maior, em virtude do comprimento de onda muito curto dos raios
o
o
-4
eletrnicos utilizados. possvel resoluo de objetos to pequenos quanto 10 A (1A =10
m). Produz aumentos teis de 200.000 a 400.000
Tipos de
Microscopia

Aumento
mx. til

Aspecto do Espcime

Aplicaes

coradas ou no, quando

determinao dos elementos grosseiros de
coradas geralmente
bactrias,leveduras,bolores,algas e protozorios
assumem a cor do corante
geralmente no coradas,
Microscopia ptica
microrganismos que exibem algum dado
1000 - 2000 aparecem brilhante sobre
Campo Escuro
morfolgico caracterstico em estado vivo
um fundo escuro
Microscopia ptica
no visualizado diretamente; diferenciao de componentes celulares com base
1000 - 2000
Ultravioleta
fotografado
em > ou < absoro da luz UV.
Microscopia ptica
1000 - 2000
Campo Luminoso

Microscopia ptica
brilhante e corado, corante
1000 - 2000
Fluorescente
fluorescente
Microscopia ptica
1000 - 2000
Controle de Fase
Microsc. Eletrnica

200.000 400.000

vrios graus de brilho

visto em tela fluorescente

tcnicas diagnsticas
exames de estruturas celulares em clulas vivas
de microrganismos maiores
(leveduras,algas,protozorios, e algumas
bactrias)
exames de vrus e da ultra estrutura das clulas
microbianas

Caractersticas distintivas dos principais grupos de microrganismos

Microrganismos

Caractersticas

1.Protozorios

eucariticos, unicelulares, ingerem partculas alimentares, no

apresentam parede celular rgida, no contm clorofila, alguns
movem-se por meio de flagelo ou cilios, e so amplamente
distribuidos na natureza (principalmente aquticos)

2. Algas

eucariticos, considerados semelhantes s plantas, contm

clorofila, podem ser uni ou multicelulares, apresentam parede
celular rgida, crescem em muitos ambientes diferentes (a maioria
aquticos)

3. Fungos

eucariticos, com parede celular rgida, uni ou multicelulares,

desprovidos de clorofila, absorvem nutrientes dissolvidos do
ambiente (no digerem alimentos) - so os bolores e leveduras

Bolores

fungos multicelulares, produzem estruturas filamentosas (hifas,

miclios...)

Leveduras

fungos unicelulares, apresentam formas variadas (esfrica a ovide;

elipside a filamentosos)

4. Bactrias

procariticos, carecem de membrana nuclear e outras estruturas

intracelulares organizadas observadas nos eucariticos, so
divididas em dois grupos: Eubactrias e Arqueobactrias

Eubactrias

apresentam vrias formas (esfrica, bastonete e espirilo) e

aparecem em formas agrupadas, variam de 0.5 - 5.0 m, so
unicelulares, algumas apresentam flagelos

semelhantes s eubactrias pelo microscpio, porm apresentam

diferenas importantes quanto sua composio qumica, hbeis
Arqueobactrias
em viver em ambientes no usuais (lagos salinos, piscinas
trmicas, fundo de pntanos)

5. Vrus

no so celulares como os citados acima, so muito menores (20 a

300 nm; 1nm=1/1000m) e mais simples em estruturas que as
bactrias, contm somente um tipo de cido ncleico circundante
por um envelope protico (DNA ou RNA), podem multiplicar-se
somente dentro das clulas vivas, apresentam-se sob vrias formas

CAPTULO 2 : Caracterizao dos Microrganismos

Uma populao microbiana, sob condies naturais, contm muitas espcies diferentes. Os
microbiologistas devem ser capazes de isolar, enumerar, e identificar os microrganismos em
uma amostra, para ento classific-los e caracteriz-los.
Isolamento e Cultivo de Culturas Puras
Os microrganismos na natureza normalmente existem em cultura mistas, com muitas espcies
diferentes ocupando o mesmo ambiente.
Ao determinar as caractersticas de um microrganismo, ele deve estar em cultura pura, ou
seja, em que todas as clulas na populao so idnticas no sentido de que elas se originaram
de uma mesma clula parental.
Em laboratrio, os microrganismos so cultivados ou desenvolvidos em material nutriente
denominado meio de cultura. O tipo de meio utilizado depende de vrios fatores :

1. consideraes sobre a origem do material a ser analisado

2. a espcie que se imagina estar presente nesta amostra
3. as necessidades nutricionais dos organismos
Tcnicas de isolamento de microrganismos:
O material a ser analizado colocado no meio de cultura - inculo - O processo de inoculao
pode ser feito mediante:

1. tcnica de esgotamento por meio de estrias superficiais - a amostra semeada na

superfcie do meio solidificado com uma ala de semeadura para esgotar a populao,
assim em algumas regies do meio, clulas individuais estaro presentes.
2. tcnica de semeadura em superfcie - uma gota da amostra diluida colocada na
superfcie do gar e com o auxlio de uma ala de semeadura de vidro (ala de
Drigalky) esta gota espalhada sobre o meio.
3. mtodo de pour-plate - a amostra diluida em tubos contendo meios liquefeitos (45
o
C). Aps homogeneizao so distribuidos em placas de Petri; e aps a solidificao
dos meios as placas so incubadas. As colnias se desenvolvero tanto acima quanto
abaixo da superfcie (colnias internas).
Em cada uma dessas tcnicas o objetivo diminuir a populao microbiana, assim as clulas
individuais estaro localizadas a uma certa distncia umas das outras. As clulas individuais,
se estiverem distante o suficiente, produziro uma colnia que no entra em contato com
outras colnias. Todas as clulas em uma colnia tem o mesmo parentesco. Para isolar uma
cultura pura, uma colnia individual transferida do meio para um tubo de ensaio.
Conservao das Culturas Puras
Uma vez que os microrganismos tenham sido isolados em cultura pura, necessrio manter as
culturas vivas por um perodo de tempo com o objetivo de estud-las.
Para armazenar por um perodo curto, as culturas podem ser mantidas temperatura de
o
refrigeradores (4 a 10 C)
Para armazenar por um perodo longo, as culturas so mantidas em nitrognio lquido (-196 oC)
o
ou em freezers (-70 a -120 C), ou ainda congeladas, e ento desidratadas e fechadas vcuo
em um processo denominado liofilizao
Alguns dos mais usados mtodos de conservao:

1.
2.
3.
4.

transferncia peridica para meios novos

sob camada de leo mineral
liofilizao
congelamento

As colees de culturas so bancos de microrganismos e outras clulas que esto disposio

de pesquisadores, professores, investigadores de patentes, e todo aquele que necessite
estudar um tipo particular de microrganismos - um conjunto de clulas de referncia de uma
coleo de cultura padro. As clulas so congeladas em cubas de nitrognio lquido ou
liofilizadas para resistir a qualquer variao que possa destruir a identidade da clula original.
Preparo dos Microrganismos para a Microscopia Luminosa
Existem dois mtodos gerais utilizados para preparar espcimes microbiolgicas para
observao por meio do microscpico luminoso.

1. Tcnica entre lmina e lamnula e gota pendente - utiliza uma suspenso de

microrganismos vivos em uma gota ou uma camada lquida. Estas preparaes (a
fresco) so especialmente teis quando a estrutura de um microrganismo pode ser
distorcida pelo calor ou agentes qumicos, ou quando o microrganismo no se cora
facilmente.
2. Tcnicas de Colorao - a camada fina do espcime seca e corada, assim os
microrganismos ficam fixados superfcie e apresentam-se corados para facilitar a
visualizao. Usadas para mostrar as vrias estruturas dos microrganismos, para
identificar e separar suas estruturas internas e para ajudar a identificar e separar
microrganismos similares.
As principais etapas do preparo de um espcime microbiano corado para exame microscpico
so:

1. Confeccionar um esfregao, ou uma camada fina do espcime sobre uma lmina de

vidro

2. Fixar o esfregao seco lmina, usualmente com o calor, para fazer aderir o
microrganismo lmina
3. Colorao com um ou mais corantes
Colorao Simples - a colorao de microrganismo com uma nica soluo de corante; ex: azul
de metileno para leveduras, ou bolores.
Colorao diferencial - envolve mais de uma soluo de corante; ex: colorao de lcool-cido
para bactria causadora da tuberculose; distingue esta bactria patognicica, por meio da cor
(vermelho, pelo corante principal), de outras bactrias (azul, pelo corante do fundo)
encontradas em amostras como saliva e escarro.
Colorao de Gram - neste processo, o esfregao bacteriano tratado com os reagentes na
seguinte ordem: o corante prpura cristal violeta, a soluo de iodo (substncia que fixa o
corante no interior da clula), o lcool (remove o corante de certas bactrias) e o corante
vermelho safranina.
Bactrias Gram-positivas, retm o corante cristal violeta e aparecem coradas em violeta-escuro
Bactrias Gram-negativas, perdem o cristal violeta quando tratadas com lcool, so ento
coradas com o corante safranina e aparecem coradas em vermelho
Informaes utilizadas para Caracterizar os Microrganismos

As tcnicas laboratoriais para caracterizar os microrganismos variam desde uma microscopia

relativamente simples anlise de material gentico encontrado na clula.
As principais categorias de informaes usadas para caracterizar espcies diferentes so :

1. Caractersticas Morfolgicas - tamanho, forma e arranjo das clulas

2. Caractersticas Metablicas - maneira pela qual o microrganismo desenvolve os
processos vitais

3. Caractersticas Antignicas - os anticorpos produzidos em animais de laboratrios

podem ser usados para detectar a presena de antgenos nicos em culturas
bacterianas e so usados para caracterizar os microrganismos
4. Caractersticas Patognicas - importante determinar se o microrganismo causa doena
(patognico) ou no causa doena (no-patognico)
5. Caractersticas Genticas - a maioria dos microbiologistas conta atualmente com
tcnicas que permitem realizar anlises genticas para classificar ou identificar os
microrganismos ou compreender a sua atividade. A sonda de DNA um exemplo de
procedimento gentico rpido e amplamente utilizado - uma fita de DNA de uma
espcie conhecida misturada com uma fita de uma espcie desconhecida. Se os
microrganismos so da mesma espcie, as duas fitas se combinaro, ou se ligaro.
Esta combinao aparece como uma fita dupla de DNA com um marcador ligado.
Classificao dos Organismos Vivos
Como fazer para determinar os nomes dos microrganismos e como catalog-lo de forma
sistemtica?
As denominaes especficas no mundo biolgico, surgem da sistemtica, que pode ser
descrita como "a cincia do desenvolvimento de um arranjo ordenado das espcies, dentro de
cada uma das principais categorias de organismos". Sistemtica = Taxonomia
A cincia da taxonomia inclui a classificao (arranjo), nomenclatura (nomes) e identificao
(descrio e caracterizao) dos organismos vivos.
Os organismos que compartilham certas caractersticas comuns, so agrupados em grupos
taxonmicos denominados taxa (singular txon). O txon bsico a espcie, que uma
coleo de cepas com caractersticas similares. Depois segue com :
ESPCIE-GNERO-FAMLIA-ORDEM-CLASSE-DIVISO-REINO
Regra dos nomes - SISTEMA BINOMIAL DE NOMENCLATURA

1. Cada espcie recebe um nome constitudo de duas palavras (ex. Neurospora crassa)
2. O primeiro trmo o nome do gnero e sempre se inicia com letra maiscula
3. A denominao do gnero uma palavra latina ou grega (um novo trmo composto de
razes latina ou grega, ou o nome latinizado de uma pessoa - masculino, feminino, ou
neutro)
4. Os nomes prprios dos microrganismo so sempre escrito em itlico
5. O segundo trmo do nome de um microrganismo, especfico (espcie), escrito em
letras minsculas e usualmente descritivo:
o adjetivo que modifica o nome (Bacillus albus - Bacillus branco)
o adjetivo sob a forma de participio presente de um verbo (Clostridium dissolvens
- que dissolve)
o substantivo no caso, possesivo que modifica o nome genrico (Salmonella
pullosum - Salmonella dos pintos)
o nome de carter explicativo (Bacillus radicicola - Bacillus habitante da raz)

Ocasionalmente, necessrio subdividir uma espcie em variedades. Tal atitude tomada

quando existem diferenas numa espcie, insuficientes para a criao de uma nova espcie,
como por exemplo; a amostra de Streptococcus lactis que produz um aroma de malte e que
designada de Streptococcus lactis var. maltigenes

CAPTULO 3: Estruturas das Clulas Procariticas e Eucariticas

Ultra-estrutura dos Microrganismos Procariticos

A maioria das bactrias (organismos procariticos) so unicelulares e apresentam uma forma
simples (esfrica, cilndricas ou espiraladas), apesar dos 3,5 a 4 bilhes de anos durante os
quais elas tem evoludo
Estrutura Geral de uma clula (bacteriana) procaritica tpica :

Flagelos e pelos

1. so estruturas externas parede celular. Filamentos finos e ocos, que se estendem a

partir da membrana citoplasmtica atravessando a parede celular, e que nem todas as
clulas possuem
2. os flagelos so usados para locomoo da bactria, pulsionando-a atravs do lquido
em aproximadamente 100m/seg (3000 vezes o seu comprimento). So mais longos
que a clula (medindo de 15 a 20m). A energia para mover os flagelos vem da fora
protomotiva
3. os pelos ou fmbrias no so usados para locomoo, so mais finos, menores, mais
retos e mais numerosos que os flagelos. So ocos e a maior parte deste tipo de
filamento est envolvido com a adeso superfcie
Glicoclice

1. um material viscoso (geralmente polissacardeos) que circunda algumas clulas

bacterianas. Chamado de cpsula quando se encontra organizado e acoplado parede
celular; e camada limosa se se encontra desorganizado e acoplado frouxamente
parede celular - esta ltima tende a ser solvel em gua deixando assim o meio
viscoso (como o caso da viscosidade do leite)
2. apresentam vrias funes :

aderncia (em pedras onde passa gua em grande movimento; em razes de plantas;
na superfcie lisa dos dentes humanos provocando a crie)
proteo (contra dessecamento)
evitar a adsoro e lise das clulas por bacterifagos

Parede celular

1. rgida, suportam altas presses, mantendo assim a forma caracterstica de cada

clula. Serve como uma barreira a algumas substncias prevenindo a evaso de certas
enzimas que poderiam causar danos clula
2. podem reter corantes, alguns antibiticos, sais biliares, metais pesados e enzimas
degradativas, em contra partida os nutrientes lquidos necessrios clula tem
passagem permitida
3. as paredes celulares so camadas de diferentes substncias que variam de acordo
com o tipo de bactria envolvida, diferindo em espessura e composio
Gram-Positivas :

1. membrana citoplasmtica:
o fosfolipdeos
o protenas
2. parede celular:
o peptidoglicano - polmero poroso e insolvel, em grande quantidade nestas
bactrias (50% ou mais do peso seco da clula), tornando a parede bem
espessa
o cido teicico - polmero de glicerol e ribitol fosfato; carregados negativamente
pode ajudar no trasporte de ons + para dentro e fora da clula; e no
armazenamento de fsforo. Se encontram ligados ao peptidoglicano ou
membrana citoplasmtica
o polissacardeos - ligados ao peptidoglicano
Gram-Negativas:

1. membrana citoplasmtica:
o fosfolipdeos
o protenas
2. parede celular - localizada no espao periplasmtico, ou seja, entre as membranas
citoplasmtica e externa.
o peptidoglicano - representa 10% do peso seco da clula
o lipoprotenas
3. membrana externa - presente apenas nestas bactrias, serve para distingui-las.
o lipopolissacardeos - tpicos destas bactrias, ocorrem somente na
membembrana externa; formados de lpideos, cerne de polissacardeo e
antgenos O. Podem atuar como um veneno (LPS ou endotoxina)
o trmeros de porina
Comparao entre as paredes celulares de bactrias Gram-Positivas e Gram-Negativas :

as paredes celulares das Arqueobactrias diferem das Eubactrias tanto em

composio qumica quanto na estrutura. Tais paredes contm protenas,
glicoprotenas ou polissacardeos completos. No contm peptidoglicono.
quando a parede de uma bactria Gram-positiva quase completamente destruda, por
enzimas, o resultado uma clula esfrica conhecida como PROTOPLASTO, a qual
permite a entrada de grande quantidade de gua, resultando em lise. As paredes das
Gram-negativas so mais resistentes a estas enzimas

Mecanismo de Colorao de Gram :

Membrana Citoplasmtica

o stio de atividade enzimtica especfica, e do transporte de molculas para dentro e

para fora da clula. uma barreira para a maior parte das molculas solveis em gua
e muito mais seletiva que a parede celular
composta primariamente de: 20 a 30% de fosfolipdeos e 50 a 70% de protenas, estas
podem fluir pelos fosfolipdeos
contm enzimas envolvidas :
no trasporte de molculas (permeases)
na produo de energia
sntese de parede celular

a fotossntese ocorre em invaginaes da membrana citoplasmtica, as quais fornecem

uma extensa rea para acomodar uma alta concentrao de pigmentos absorvidos da
luz

Difuso e Osmose atravs da Membrana Citoplasmtica

1. Difuso Simples - passivo e a clula no gasta energia para realiz-lo. O soluto se

movimenta do lado menos diludo para o mais diludo at o equilbrio. Ex. entrada e
sada de CO2 e O2
2. Difuso por meio de Permeases - transporte da maior parte de nutrientes para dentro
da clula. Requer gasto de energia pela clula
3. Osmose - passagem do solvente de uma soluo de baixa concentrao de soluto (alta
conc. de gua) para uma soluo com alta concentrao de soluto (ou baixa conc. de
gua). A fora com que a gua se move atravs da membrana a presso osmtica.
As clulas microbianas podem ser expostas a 3 tipos de condies osmticas :
o Isotnica - a concentrao total dos solutos a mesma em qualquer lado da
membrana
o Hipotnica - a concentrao do soluto mais baixa no interior da clula. A
gua entra na clula por presso osmtica. A maioria das clulas crescem
nesta condio
o Hipertnica - a concentrao do soluto mais alta no interior da clula. A gua
deixa a clula por presso osmtica
Estruturas Celulares Internas da Membrana Citoplasmtica (Citoplasma)
rea Citoplasmtica (poro fluida)

o citoplasma tem em torno de 80% de gua, alm de cidos nclicos, protenas,

carboidratos, lipdeos, ons inorgnicos, muitos compostos de baixo peso molecular, e
partculas com vrias funes :

1. Ribossomos - partculas densas, onde ocorre a sntese protica. Encontradas em todas

as clulas procariticas e eucariticas. Consistem em 2 subunidades de tamanhos
diferentes (50S e 30S), que juntas formam o ribossomo bacteriano 70S; S= unidade de
quo rpido a partcula sedimenta quando centrifugada em alta velocidade
2. Poli--hidroxibutirato (PHB) - material lipdico solvel em clorofrmio. Atua como uma
reserva de carbono e fonte de energia

3. Incluses - diferentes tipos de substncias qumicas que se acumulam formando

depsitos insolveis. Os grnulos e incluses no so comuns a todas as clulas
bacterianas
rea Nuclear

no apresenta ncleo delimitado por membrana, e ocupa uma poro prxima do

centro da clula - parece estar ligado ao sistema "membrana citoplasmticamesossomo"
nucleide - consiste em um nico cromossomo (DNA) circular. O cromossomo a
estrutura interna das clulas que fisicamente carrega a informao hereditria de uma
gerao para outra

Formas Latentes de Microrganismos Procariticos - Esporos e Cistos

Esporos

so formas inativas (no esto em crescimento), que podem viver em condies

desfavorveis, como dessecamento e calor, mas se expostas novamente em
condies ambientais apropriadas comeam a crescer e tornar-se clulas vegetativas
metabolicamente ativas
os esporos que se formam dentro da clula so chamados ENDSPOROS, e so
exclusivos das bactrias
possuem parede celular espessa, brilham muito com a luz do microscpico, e so
o
altamente resistente s mudanas ambientais - a maioria suportam ate 80 C/10min
o esporo contm o cido dipicolnico (DPA) no encontrados em clulas vegetativas,
responsvel por 5 a 10% do peso seco do endosporo, ocorre em combinao com
grande quantidade de clcio, e provavelmente contribui na resistncia ao calor
durante a esporulao ocorre um processo de desidratao, eliminando a maior parte
de gua do esporo, o que possivelmente tambm vem contribuir para a resistncia ao
calor
as bactrias Actinomicetes produzem outro tipo de esporo, o CONDIO, muito
resistente ao dessecamento mas no tanto ao calor. Este organismo pode produzir
muitos destes condios na extremidade de um filamento, assim que tais condios so
usados para a reproduo e para proteo
Endospros
produzidos no interior da
clula
1 por cada clula vegetal
resistentes ao calor e
dessecamento
utilizados para proteo

Condios
na extremidade de
filamentos
vrios so produzidos por
clula
mais resistentes ao
dessecamento
utilizado para reproduo e
proteo

Cistos

apresenta estrutura e composio qumica diferente dos endsporos, e no

apresentam alta resistncia ao calor. Ex. cistos presentes em Acetobacter

Ultra-estrutura dos Microrganismos Eucariticos - Fungos, Algas e Protozorios

A caracterstica predominante das clulas eucariticas o ncleo com cromossomos lineares,

envolvidos por uma membrana que no encontrada em procariotos
Funo de cada estrutura :
Flagelos e Clios

estruturas delgadas, ocas, utilizadas para locomoo, diferem dos das clulas
procariticas, no que a energia necessria para movimentar estes apndices prover da
hidrlise do ATP

Parede celular

encontradas nas plantas, algas e fungos, apresenta a funo de manter a forma da

clula e evitar que sofra lise pela presso osmtica
Eucariotos
plantas
fungos filamentosos
leveduras unicelulares
algas

Composio da Parede Celular

polissacardeos - celulose e
pectina
quitina e celulose
mananas - um polmero de
manose
celulose ou outro polissacardeo,
e CaCO3

Membrana Citoplasmtica

possui morfologia e funes semelhantes as das clulas procariticas, porm

apresentam caractersticas diferenciais destas clulas como :

1. a presena de esteris - principalmente colesterol - os quais entrelaam-se na

bicamada lipdica e conferem resistncia membrana citoplasmtica dos eucariotos
que no apresentam parede celular
2. a membrana citoplasmtica reforada por fibras de microtbulos formados pelas
protenas actina e miosina.
3. no possuem enzimas em sua membrana citoplasmtica envolvidas no metabolismo
gerador de energia
Organelas Celulares
So estruturas envolvidas por uma membrana com funes especficas tais como, a
fotossntese, respirao, sntese protica, etc. O citoplasma a "residncia" das organelas"
Ncleo

a caracterstica marcante do ncleo dos eucariotos a membrana nuclear, que

contm muitos poros grandes, atravs dos quais protenas e RNA podem passar para
o citoplasma
a membrana nuclear geralmente d origem ou contnua ao retculo endoplasmtico,
organela onde as protenas so sintetizadas
esfrico ou oval, a maior organela na clula eucaritica. Nele est contida as
informaes hereditrias da clula na forma de DNA
formado de 5 a 10% de RNA e o restante de protenas

Retculo Endoplasmtico

conectados s membranas nuclear e citoplasmtica, podem ter ribossomos ligados

(rugosos) ou sem ribossomos ligados (lisos)
no retculo endoplasmtico rugoso as protenas produzidas pelos ribossomos
presentes nestas organelas, so liberadas no citoplasma
o retculo endoplasmtico liso est envolvido na sntese de glicognio, lipdeos e
esterides

Complexo de Golgi

o centro de empacotamento ou distribuio da clula. Responsvel pelo "transporte

seguro" dos compostos sintetizados, para o exterior da clula, e tambm pela proteo
da clula ao ataque de suas prprias enzimas
no complexo de Golgi enzimas que foram sintetizadas no retculo endoplasmtico
rugoso (proteases, nucleases, glicosidases, sulfatases, lipases, e fosfatases) so
empacotadas dentro de organelas chamadas lisossomos
as protenas sintetizadas no R.E. rugoso, so levadas para o complexo de Golgi, onde
os aucares so adicionados a estas para produzir as glicoprotenas

Mitocndrias

local onde o ATP gerado durante a respirao aerbia. A membrana interna

altamente invaginada (cristas) - as quais aumentam a rea da superfcie disponvel
para a atividade respiratria
assemelham-se s clulas procariticas em vrios aspectos :
o mede em torno de 0.5 a 1.0 m de dimetro;
o contm seus prprios ribossomos, que tambm so 70S, em vez de 80S como
os presentes no citoplasma eucaritico;
o contm seu prprio DNA, o qual uma molcula nica, em fita dupla como nos
procariotos - este DNA carrega informaes genticas para a sntese de um
nmero limitado de protenas que so produzidas nos ribossomos
mitocondriais
o dividem-se para formar uma nova mitocndria, praticamente da mesma forma
que as clulas procariticas se dividem - se dividem independentemente do
ncleo celular, entretanto so incapazes de se dividirem se forem removidos
do citoplasma

Cloroplastos

presentes nas plantas e nas algas, tambm so organelas geradoras de energia. o

sitio das reaes fotossintticas
apresenta um DNA circular (como nos procariotos) o qual codifica protenas no
ribossomo destas organelas (70S) e enzimas necessrias para a utilizao de CO2 no
ar
a membrana interna dobra-se no estroma (citoplasma dos cloroplastos) para formar
pilhas de sacos em forma de disco ou fita chamadas tilacides - contm pigmentos
clorofila e carotenides
so capazes de se dividir por fisso binria no citoplasma como as mitocndrias

Formas Latentes dos Microrganismos Eucariotos - Esporos e Cistos

Esporos
Os fungos produzem esporos sexuais e assexuais. Algumas caractersticas destas formas
latentes de vida so :

os esporos sexuados so resultado de 2 clulas reprodutivas (gametas) em uma clula

fertilizada. So produzidos menos frequentemente e em menor nmero que os esporos
assexuados
os esporos assexuados so produzidos por hifas areas, e tem a funo de disseminar
a espcie. So especialmente estruturados para serem dispersos do talo-me. So
normalmente brancos quando rcem produzidos, e depois adquirem cores
caractersticas coma a idade
os esporos dos fungos terrestres podem ser recobertos por camadas espessas para
evitar ressecamento. Podem ser leves para serem carregados em correntes de ar

Cistos

Produzidos por muitos protozorios, podem apresentar funo de proteo ou de

reproduo para estes eucariotos

CAPTULO 4: Exigncias Nutricionais e o Meio Microbiolgico

Elementos Qumicos como Nutrientes

Os elementos qumicos principais para o crescimento da clula so : carbono, nitrognio,
oxignio, enxofre e fsforo
Carbono - C

todos os organismos requerem carbono de alguma forma. Em geral os compostos

orgnicos so os que possuem carbono
o carbono forma o esqueleto das 3 maiores classes de nutrientes orgnicos :
carboidratos, lipdeos, e protenas - estes fornecem energia para o crescimento da
clula e serve como unidade bsica do material celular
os heterotrficos utilizam compostos orgnicos como sua principal fonte de carbono,
obtendo tais molculas a partir do meio, ou ingerindo organismos autotrficos ou
mesmo heterotrficos
os autotrficos utilizam o CO2 como sua principal ou nica fonte de carbono

Nitrognio - N

todos os organismos necessitam em alguma forma, a parte essencial dos

aminocidos, que formam as protenas
as bactrias so mais versteis para usar o N que os organismos eucariotos. Algumas
bactrias podem utilizar o N2 (nitrognio atmosfrico) - fixao de nitrognio - e outras
podem utilizar compostos nitrogenados como : nitratos, nitritos e sais de amnia. E
algumas utilizam ainda compostos de nitrognio orgnico tais como os aminocidos e
peptdeos

Hidrognio (H), Oxignio (O), Enxofre (S) e Fsforo (P)

essenciais a todos os organismos.

H e o O fazem parte de muitos compostos orgnicos e da gua
S necessrio para a biossntese dos aminocidos cistena, cistina, e metionina
P essencial para a sntese de cidos nuclicos e ATP
alguns desses elementos so encontrados na gua ou na atmosfera gasosa do meio.
Os os inorgnicos como sulfatos e fosfatos, podem tambm suprir os principais
elementos necessrios ao microrganismo

Outros Elementos
muitos outros elementos essenciais so requeridos, porm em menor quantidade que
os citados acima - sdio, ferro, molibdnio, cobalto, zinco, cobre mangans
+
o sdio, Na , requerido pelas permeases da membrana que transporta o acar
melibiose em clulas de Escherichia coli
+2
o ferro, Fe , requerido pelas enzimas citocromo, catalases e succinil desidrogenases
(como cofator)
+2
+2
+2
+6
+2
alguns minerais, em pequenas quantidades (mg/l) como o Zn , Cu , Mn , Mo , Co
+6
so requeridos para ativar enzimas. O Mo por exemplo requerido pela nitrogenase,
a enzima que catalisa a converso do N2 para o NH3 (amnia) durante a fixao do N2

Classificao Nutricional dos Microrganismos

Grupo Nutricional

Fonte de Carbono

Fonte de Energia
compostos
inorgnicos

Exemplos
bactrias nitrificantes
Quimioautotrficos
CO2
do Fe, H e S
muitas bactrias,
Quimioheterotrficos compostos orgnicos compostos orgnicos fungos, protozorios
e animais
bactrias sulfurosas
verde e prpura,
Fotoautotrficos
CO2
luz
algas, plantas e
cianofceas
bactrias prpuras e
Fotoheterotrficos compostos orgnicos
luz
verdes no
enxofradas
Meios Utilizados para o Cultivo de Microrganismos
Os componentes comuns na estrutura do meio faro parte de uma destas categorias :

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.

nutrientes nitrognio-amnico - peptonas, infuses, extratos .....

fonte de energia - glicose ....
fatores de promoo de crescimento - sangue, soro, vitaminas, NADH ....
tampo fosfato, para manuteno de pH em meios de fermentao - sais de fosfato
acetatos e citratos solveis
-2
-2
+2
+2
+2
sais minerais e metais, para melhorar o crescimento - PO4 , SO4 , Ca , Mg , Fe ,
+2
Mn e metais
agentes seletivos - reagentes qumicos, antibiticos, e tinturas inibidoras
corantes indicadores, teis para indicar mudanas de pH no meio, durante e depois do
crescimento de microrganismos - fenol vermelho, vermelho neutro, bromocresol
prpura ....
agentes gelificantes - gar, gelatina ....

Caractersticas de alguns produtos complexos usados como ingredientes dos meios de cultura
Ingredientes

Agar

Caractersticas
uma mistura de 2 polissacardeos, obtido de algas marinhas, usado
o
para solidificar o meio; insolvel em gua fria, gelifica a <45 C. No
serve como nutriente para a maioria dos microrganismos e no
metabolizado durante seu crescimento

Extrato de
Carne

extrato aquoso de tecido muscular, concentrado sob a forma de pasta,

contm carboidratos, compostos orgnicos de nitrognio, vitaminas
hidrossolveis e sais

Sais Biliares

preparado de bilis de boi fresca, usado como agente inibidor seletivo

em bacteriologia

Casena

um digerido pancretico de casena, uma fonte importante de

nitrognio-amnico

Corantes

fazer uso somente daqueles certificados pela CSBS

Gelatina

um produto protico purificado, usado para solidificar o meio

Gelisato

um hidrolisado pancretico de gelatina que possue um contedo

escasso de cistina, triptofano e carboidrato

Infuses

usa-se infuses de corao de boi ou de bezerro, e de crebro

Neopeptona

digerido enzimtico de protinas, adequado p/ muliplicao de

organismos cuja cultura in vitro se considera difcil

Ox-Gall

constitudo por bilis fresca purificada; um agente inibidor

Peptona

um produto da digesto enzimtica da carne, solvel em gua e

formada por polipeptdeos, gua e oligossacardeos. Se trata de uma
peptona para uso geral

Fitona

peptona vegetal preparada por digerido de farinha de soja com

papana, til para culturas de organismos de multiplicao difcil

Polipeptona

mistura de peptonas (tripticase + thiotone) para uso em meios que

requerem ambas protenas

Proteose
Peptona

uma peptona especializada, preparada por digestivos de carne fresca

selecionada com papana, til para produo de toxinas microbianas

Soytona

hidrolizado anzimtico de farinha de sementes de soja, adequados

para meios que no h hidratos de carbono

Acares

todos devem ser quimicamente puros e adequados para fins

bacteriolgico

Tiotona

preparado por digestivo pptico de tecido animal; alto contedo de

enxofre, til nas anlises de formao do H2S

Tripticase

peptona derivada da casena por digesto pancretica, fonte rica em

nitrognio de aminocidos

Triptona

hidrolisado pancretico, fonte rica de nitrognio-amnico; destinado ao

isolamento de cultivo de organismos de difcil crescimento

Extrato de
Levedura

extrato aquoso de clulas de leveduras lisadas, fonte excelente de

substncias estimulantes do crescimento como vitamina B; contm
compostos orgnicos de N e C

gua

deve-se usar somente gua desmineralizada, que no txica aos

microrganismos

1. Meios para Cultivo de Bactrias

Os meios escolhidos para o cultivo de bactrias especficas normalmente imitam o habitat
normal das mesmas, assim:

para as bactrias que preferem os nutrientes encontrados no sangue - adiciona-se

sangue ao meio

se a glicose o constituinte comum de um nicho bacteriano - adiciona-se o acar ao

meio

Para aquelas bactrias que apresentam maiores exigncias nutricionais - fastidiosas - utilizase os meios complexos, citados acima na tabela, os quais contm uma grande variedade de
substncias orgnicas preparadas a partir de matrias naturais
Alguns exemplos de meios quimicamente definidos utilizados no crescimento de bactrias :

1. bactria quimioautotrfica :
fonte de nitrognio - (NH4)2SO4
fonte de carbono (na forma de CO2) - NaHCO3
tampo e ons essenciais - Na2HPO4 ; K2HPO4
ons essenciais - MgSO4.7H2O ; FeCl3.6H2O ; CaCl2.2H2O
solvente - H2O

2. bactria heterotrfica no fastidiosa :

fonte de energia e carbono - glicose (0.1%)
fonte de nitrognio, tampo e ons essenciais - NH4H2PO4
tampo e ons essenciais - KH2PO4
ons essenciais - MgSO4.7H2O
solvente - H2O

3. bactria heterotrfica fastidiosa :

fonte de carboidrato, nitrognio orgnico, vitaminas, sais - extrato de carne
fonte de nitrognio orgnico e algumas vitaminas - peptona
ons e requerimento osmtico - NaCl
solvente - H2O
2. Meios para o Cultivo de Fungos
Assim como as bactrias os fungos absorvem nutrientes em vez de inger-los. A adsoro
auxiliada por enzimas secretadas no meio, que quebram as molculas orgnicas em pores
menores que podem ser transportadas mais facilmente parta dentro da clula
Todos os fungos so heterotrficos. E podem crescer no laboratrio;

em uma mistura simples contendo acar, uma fonte de nitrognio inorgnico ou

orgnico e alguns minerais;
alguns necessitam de vitaminas;

e outros podem crescer somente em meio complexo que contenha uma grande
variedade de compostos orgnicos providos da peptona e extrato de carne.

Em geral, o meio utilizado para culturas de fungo tem : (1) uma concentrao maior de acar
que as bactrias - 4%; (2) e um pH menor - 3.8 a 5.6
Composio de um meio utilizado para o isolamento e crescimento de fungos em geral : gar
Sabourand
fonte de carbono, nitrognio - peptona
fonte de carbono e energia - glicose (em alta concentrao inibe o crescimento bacteriano)
agente solidificante - gar
solvente - H2O
3. Meios para o Cultivo de Algas
As algas utilizam luz para produzir energia, e requerem somente CO2, H2O e vrios ons
inorgnicos para crescer.
Os meios complexos para algas normalmente contm extrato de soja. Mais existem poucos
meios "prontos" como os existentes para bactrias e fungos
Meios com finalidades especiais - MEIOS ESPECIAIS
So utilizados quando se quer isolar, identificar ou contar os microrganismos, eles fornecem
informaes especficas sobre os microrganismos
Meios para Anaerbios

os primeiros cultivos de anaerbios foram em camadas profundas de meios

solidificado, assim podem crescer pois a camada de gar da superfcie exclui o
oxignio atmosfrico
a adio de um agente redutor ao meio remove o oxignio - MEIO REDUZIDO - ex.
tioglicolato de sdio
para anaerbios estritos, como as arqueobactrias produtoras de metano por exemplo,
o cuidado deve ser maior. Deve-se :
(1) ferver o meio para que a maior parte do oxignio dissolvido seja retirado
(2) adicionar o gs N2, livre de oxignio, nos tubos contendo o meio
(3) adicionar um agente redutor, p.ex. a cistena remove os ltimos traos de oxignio
(4) esterilizao do meio (recomendvel a utilizao de vlvula de selagem no topo do
frasco para prevenir a entrada de oxignio)
Meios Seletivos

serve para selecionar um microrganismo permitindo um tipo particular de

microrganismo ou suprimindo o crescimento de outros microrganismos. Exemplos :
gar sabourand para fungos; gar verde brilhante para Salmonella; o corante verde
brilhante adicionado ao meio inibe as bactrias Gram + comuns do trato intestinal; o
gar feniletanol inibe o crescimento de Gram-negativas, mais no das Gram-positivas

recentemente os antibiticos vem sendo adicionado aos meios, tornando-os seletivos

para os microrganismos resistentes estes agentes antimicrobianos
Meios Diferenciais

servem para diferenciar os vrios tipos de microrganismos em uma placa com gar.
P.ex. : se uma amostra de secreo da garganta semeada numa placa de gar
sangue, pode-se diferenciar as batrias hemolticas (produzem enzimas que lisam as
clulas vermelhas formando uma zona clara ao redor da colnia) das no hemolticas
(que no dissolvem as clulas vermelhas, e portanto no formam este halo ao redor
das colnias)
Meios Seletivos/Diferenciais

agem tanto como seletivos como diferenciais, so particularmente teis em

microbiologia de sade pblica, como na determinao da qualidade da gua ou na
identificao de causas de infeco alimentar
gar MacConkey - contm sais biliares e corante cristal violeta, os quais inibem o
crescimento de Gram+ e permitem o desenvolvimento de Gram-negativas, e ainda a
lactose, que distingue as Gram + (produtoras de cido a partir do acar tornando-as
vermelhas) das Gram-negativas (no produtoras de cido)
Meios de Enriquecimento

utilizados para selecionar microrganismo que est presente em determinado local, em

pequenas quantidades com relao populao. O meio favorece o crescimento da
espcie desejada, mas no o crescimento das outras espcies presentes em uma
populao mista
ao contrrio do meio seletivo, nenhum agente inibido utilizado para prevenir o
crescimento de microrganismos indesejveis
um exemplo so as bactrias que oxidam o fenol - que podem ser isoladas de
amostras do solo, utilizando um meio de enriquecimento, constituido de sais de
amnia, e fenol como nica fonte de carbono e energia - assim somente os
microrganismos capazes de oxidar o fenol estaro presente em grande nmero depois
de vrios cultivos seletivos
Meios de Estocagem

utilizado para a manuteno da viabilidade e das caractersticas fisiolgicas de uma

cultura, a qual pode exigir um meio diferente daquele timo para o seu crescimento - o
desenvolvimento rpido e luxuriante pode estar associado com a rpida morte celular.
Assim p.ex., a glicose, que favorece com frequncia o crescimento, tambm
desenvolve maior quantidade de cidos no meio, sendo prefervel omitir a glicose na
preparao de um meio de estocagem.

CAPTULO 5: Cultivo e Crescimento dos Microrganismos

Crescimento - o aumento ordenado de todos os componentes de um organismo. Morte - a

perda irreversvel da capacidade de reproduo, crescimento e diviso, por parte de um
organismo ou de uma clula
Condies Fsicas para o cultivo dos Microrganismos

A temperatura, os gases do meio, e o pH so os principais fatores fsicos, que juntos criam

condies timas para o crescimento celular
1. Temperatura :
De grande influncia no cresciemnto dos microrganismos - todos os processo de crescimento
so dependentes de reaes qumicas, as quais so afetadas pela temperatura
A temperatura na qual uma espcie de microrganismo cresce mais rapidamente a
temperatura tima de crescimento - em temperaturas mais favorveis para o crescimento, o
nmero de divises celulares por hora, chamada de taxa de crescimento, dobra para cada
o
aumento de temperatura de 10 C
Para qualquer microrganismo particular h 3 temperaturas importantes a conhecer : mnima,
tima e mxima (nesta ltima as enzimas so danificadas pelo calor e a clula para de crescer)
Os microrganismos podem ser divididos em 3 grupos de acordo com a variao de temperatura
na qual crescem melhor :
o

Psicrfilos - crescem em baixas temperaturas (15 - 20 C)

alguns morrem se expostos temperatura ambiente (25 C). A temperaturas muito alta
certas enzimas e a membrana citoplasmtica podem ser danificadas
existem bactrias, fungos, algas e protozorios que so psicrfilos. Em temperaturas
de 4-10 oC os microrganismos psicrfilos deterioram alimentos estocados por longo
perodos
so encontrados principalmente em guas frias e solos, tais como os oceanos e
regies polares. Alguns gneros so : Pseudomonas, Flavobacterium, Alcaligens.
o

Mesfilos - crescem em temperaturas moderadas (25 - 40 C)

a maioria dos microrganismos pertencem a este grupo. As bactrias saprfitas, os

fungos, as algas e os protozorios crescem no limite mnimo da variao de
o
temperaturas mesfilas (25 C), e os parasitrios de humanos e animais no limite
o
mximo dessa variao (40 C)
o

Termfilos - crescem a altas temperaturas (40 - 85 C)

podem ser encontrados em reas vulcnicas, em misturas de fertilizantes e em

nascentes quentes
a maioria so procaritos, nenhuma clula eucaritica cresce em uma temperatura
superior a 60 oC - a perda de funo da membrana citoplasmtica a baixa temperatura
pode ser o que determina a temperatura de crescimento mnima dos termfilos

2. Atmosfera Gasosa
Os microrganismos no seu habitat natural necessitam de quantidades variadas de gases tais
como : O2, CO2, N2, CH3 .
Alguns gases so utlizados no metabolismo celular; outros podem ter sido excludos de uma
cultura por serem txicos s clulas. O O2 e CO2, so os dois gases principais que afetam o
crescimento de clulas microbianas
De acordo com a resposta ao O2 os microrganimismos so divididos em 4 grupos :

Aerbios - requerem oxignio para o crescimento (padro: 21% de O2)

alguns aerbios podem crescer mais lentamente quando o O2 limitado. Se os

microrganismos crescem em meio lquido podem rapidamente utilizar o O2 dissolvido
na camada superficial do meio. Para evitar este problema, as culturas lquidas de
microrganismos aerbios so algumas vezes agitadas (shaker) para aumentar o
suprimento de O2 dissolvido e produzir um estoque celular maior num tempo de
incubao menor
existem alguns grupos de microrganismos que requerem nveis elevados de CO2 Neisseria gonorrhoea - 5 a 10% de CO2. Neste caso pode-se colocar a placa com meio
semeado com o microrganismos dentro de uma jarra hermeticamente fechada,
contendo uma vela acessa, a qual queimar enquanto tiver O2 suficiente para manter
esta combusto (C + O2 --- CO2), assim a atmosfera dentro da jarra vai conter uma
quantidade de O2 reduzida e uma concentrao de CO2 aumentada.

Facultativos - crescem na presena de O2 ou podem tambm crescer em anaerobiose

quando em condies de anaerobiose, obtm energia pelo processo metablico

chamado fermentao. Ex. genros da famlia bacteriana Enterobacteriacea
(Escherichia coli), leveduras (Saccharomyces cerevisae)

Anaerbios - aqueles que podem ser mortos pelo oxignio

no utilizam o O2 para reaes de produo de energia

alguns at toleram baixas concentraes de oxignio :
o Clostridium perfringens - altamente tolerantes ao O2
o Clostridium tetani - moderadamente tolerantes ao O2
o Methanobacterium - anaerbios estritos
a toxicidade do oxignio para os anaerbios :
o O2 + e ---- O2 (radical superxido) : podem causar danos s clulas (1)
+
o 2O2 + 2H ---- O2 + H2O2 (perxido de hidrognio) : podem destruir os
componentes vitais da clula (2)
o O2 - + H2 O ---- O2 + OH-2 + OH (hidroxila) : pode danificar quase todo tipo de
molcula encontrada em uma clula viva, inclusive o DNA (3)
Os microrganismos aerbios e facultativos, que crescem em aerobiose, e at alguns
microrganismos anaerbios, desenvolveram vrios mecanismos protetores contra
estas formas txicas de O2 :
(1) produo da enzima superxido dismutase - que elimina os radicais superxidos
convertendo-os rapidamente em perxido de hidrognio
(2) metabolizao do perxido de hidrognio por mais duas enzimas - catalase, que
converte o H2O2 em O2 e H2O; e a peroxidase que converte o H2O2 em H2O. Assim a
reao (3) no mais ocorre e os radicais OH no mais so formados

Cultivo de bactrias anarobias :

(1) uma incubadora - cmara de anaerobiose
(2) jarra de anaerobiose - este sistema inadequado para o cultivo de anaerbios
estritos

Depois que a jarra fechada o O2 presente removido em horas pela reao

catalisada pelo pldio :
O2 + 2H2 paldio 2H2O
Microaerfilos - podem utilizar oxignio nas reaes qumicas para a produo de
energia (1 a 15% de O2)

no suportam nveis de O2 de 21% presentes na atmosfera, como requerem os

aerbios, mais podem utilizar o O2 em nveis mais baixos
a tolerana moderada ao oxignio deve-se alta susceptibilade aos radicais perxidos
e o perxido de hidrognio que so formados nas culturas incubadas sob condies de
anaerobiose. Exemplo : Campylobacter jejuni (provoca diarria em humanos)

3. pH - Potencial Hidrogeninico
+

pH = - log {H }. Quanto > {H }, < pH, e mais cido

o pH timo normalmente bem definido para cada espcie. Encontra-se no valor

mediano de variao de pH sobre o qual o crescimento acontece, diferentemente da
tempertura tima
para o melhor crescimento do microrganismo num meio cido ou bsico, ele deve ser
capaz de manter o seu pH intracelular em torno de 7.5, no importando qual o valor do
pH externo. A maneira de obter o pH da clula viva nessa faixa, expulsando ou
absorvendo ons hidrognio (at um certo limite)
as variaes de pH podem ser mortal ao cultivo de microrganismo, isto pode ser
prevenido pela adio de um tampo ao meio
pH de alguns ambientes :
o guas de escoamento de solos vulcnicos e de minas : pH = 1 a 3
o guas de nascentes : pH = 10
o solos ricos em amnia : pH = 11
o oceanos : pH = 8; guas polares : pH = 6
Microrganismos
bactrias
fungos

pH timo
4a9
5a6

protozorios
algas

6.7 e 7.7
4 a 8.5

4. Outras condies

os microrganismos podem apresentar outras necessidades como : a luz, para os

organismos fotossintticos. Alm da funo ligada ao metabolismo celular e aos
nutrientes, a gua influencia o crescimento por meio da presso osmtica e da presso
hidrosttica
Presso Osmtica - fora com a qual a gua se move atravs da membrana
citoplasmtica de uma soluo contendo uma baixa concentrao de solutos para uma
contendo alta concentrao de soluto. As clulas podem estar em um meio:

(a) Isotnico - onde a concentrao de solutos em um meio igual quela no interior da clula.
No h movimento de gua para dentro e para fora da clula

(b) Hipertnico - onde a concentrao de solutos fora da clula maior que no interior. A gua
flui para fora da clula resultando na desidratao e contrao do protoplasto

(c) Hipotnico - a concentrao de soluto no interior da clula maior que fora dela. A gua flui
para dentro da clula, o influxo da gua fora o protoplasto contra a parede celular. Se a
parede for fraca, pode romper-se; o protoplasto pode inchar, e eventualmente rompe

Presso Hidrosttica - a presso exercida pelo peso da gua que permanece na superfcie
dela. Os microrganismos dependente de presso so chamados barfilos, estes
microrganismos morrem um meio com baixa presso hidrosttica pois contm vesculas de gs
que se expandem com grande fora na descompresso e rompem as clulas

Reproduo e Crescimento dos Microrganismos

O crescimento em uma cultura microbiana normalmente significa um crescimento no nmero
total de clulas devido reproduo dos organismos individuais na cultura
Dois fenmenos ocorrem : (1) o crescimento, ou reproduo das clulas individualmente; (2)
crescimento ou aumento na populao de uma cultura microbiana
Reproduo em Microrganismos Eucariticos

Na natureza a reproduo ocorre de duas maneiras :

(1) Reproduo Assexuada - basicamente resulta em novas clulas idnticas s
originais
(2) Reproduo Sexuada - permite a troca de material gentico e assim a gerao de
um novo ser

1. Reproduo Assexuada

apesar de no implicar em variao gentica mais eficiente que a reproduo

sexuada em propagar as espcies. Neste tipo de reproduo os novos indivduos so
produzidos por: (1) um organismo parental ou; (2) uma clula (organismos unicelulares)
a reproduo assexuada nos organismos eucaritos mais complexa que nos
procaritos, onde uma nica clula parental simplesmente se divide em duas clulasfilhas idnticas. Nos eucaritos deve ser precedida de MITOSE - uma forma de diviso
nuclear na qual todos os cromossomos da clula so duplicados e os dois novos
conjuntos se separam para formar os ncleos filhos idnticos. A clula ento se divide
em 2 clulas-filhas, cada uma recebendo um ncleo
Etapas da Mitose em detalhe :

(1) assim que as clulas entram em PRFASE os cromossomos condensa-se em estruturas

em forma de fitas e tornam-se visveis ao microscpico
(2) os cromossomos so duplicados, dispondo-se lado a lado, unidos no centro pelo
centrmero (um anel de protenas), ao mesmo tempo, os centrolos (cilndricos de microtbulos
protecos) migram para lados opostos da clula

(3) a medida que os centrolos se separam um fuso mittico comea a se formar entre eles. No
FINAL DA PRFASE os centrolos se movem para os plos opostos da clula com o fuso entre
eles. Durante esta fase, a membrana nuclear comea a desintegrar-se
(4) a membrana nuclear desaparece, e os cromossomos parecem estar acoplados pelos seus
centrmeros s fibras do fuso. O centrmero de cada cromossomo se divide e os dois
cromossomos-filhos em cada conjunto se separam completamente
(5) este o estgio mais curto da MITOSE, onde os cromossomos-filhos se move para um dos
lados da clula utilizando as fibras do fuso como guia
(6) marcada pela chegada dos dois conjuntos de cromossomos em um dos plos do fuso.
Uma membrana nuclear forma-se ao redor do agrupamento dos cromossomos em cada plo e
o cromossomo se alonga em fitas de cromatina tpica da INTERFASE (fase em que as clulas
se apresentam em estgio de repouso)
(7) todas as clulas derivadas da MITOSE de um organismo eucarito tem ento o mesmo
nmero de cromossomos e o mesmo tipo de genes das clulas parentais
2. Reproduo Sexuada

fuso de duas clulas sexuais diferentes (gametas) que so procedentes de dois pais
de sexos diferentes ou tipo de relao sexuada
a fuso de gametas denominada fertilizao e a clula resultante, de zigoto
na reproduo sexual tem-se :
(1) fuso de dois ncleos haplides
(2) formao de um zigoto (diplide)
(3) MEIOSE, resultando novamente em clulas haplides
(4) a fuso das clulas haplides completando o ciclo

O ciclo celular dos eucaritos

o
o
o

todas as clulas eucariticas perfazem um ciclo celular semelhante, com

exceo dos gametas.
a duraco do ciclo celular varia de um tipo de clula para outra.
as fases do ciclo pode ser resumida :

G1 - fase de crescimento - a clula cresce e sintetiza protenas

S - fase de sntese de DNA - a clula continua a crescer e a sntese de DNA ocorre no
ncleo at que a quantidade de DNA seja duplicada
G2 - fase de crescimento - o crescimento celular atinge o seu mximo
M - mitose - a sntese de macromolculas quase cessa e o ncleo sofre mitose
Reproduo em Microrganismos Procariticas
A maioria das bactrias se multiplicam pelo processo de reproduo assexuada - FISSO
BINRIA TRANSVERSA - onde as clulas dividem-se individualmente em 2 clulas-filhas de
tamanho aproximadamente igual

Alguns procariotos reproduzem-se assexuadamente por outros modelos de diviso celular :

(1) Brotamento - ex. Rhodopseudomonas acidophila

(2) Fragmentao - ex. Nocardia

(3) Formao de Exospros - ex. Streptomyces

Crescimento de uma cultura bacteriana

durante o crescimento ativo de uma cultura microbiana as populaes de clulas

crescem exponencialmente, aumentando por meio de uma progresso geomtrica (2n)
o intervalo de tempo requerido para que cada microrganismo se divida conhecido
como TEMPO DE GERAO, os quais so fortemente influenciados no somente pela
composio nutricional do meio mais tambm pelas condies fsicas de incubao
tempo de gerao: g = t/n ; t = intervalo de tempo particular, n = nmero de geraes
taxa de crescimento: R = n/t

Exemplos :
Escherichia coli: tg = 12.5 min; Mycobacterium tuberculosis: tg = 13 a 15 h
Curva de crescimento bacteriana tpica

Fase de
crescimento

(a) - Lag

(b) Exponencial
ou Log

(c) Estacionria

(d) - Morte

Taxa de
crescimento

zero

mxima ou
constante

zero

negativa

Medida de crescimento da populao

Caractersticas
nenhum aumento no nmero de clulas,
aumentam de tamanho, so sintetizadas
novas enzimas para as clulas se
adaptarem ao novo meio
condies de crescimento balanceado; as
clulas so uniformes em termos de
composio qumica e atividade
metablicas e fisiolgicas. Pico da atividade
e eficincia fisiolgica
acmulo de produtos metablicos txicos
e/ou exausto de nutrientes. Algumas
clulas morrem, outras crescem e se
dividem. O nmero de clulas viveis
diminue
acmulo adicional de produtos metablicos
inibitrios. A taxa de morte acelerada; o
nmero de clulas diminue de modo
exponencial. Tipicamente todas as clulas
morre em dias ou meses

os microbiologistas utilizam uma variedade de tcnicas para quantificar o crescimento

microbiano. Os mais comuns so :

(1) Contagem Microscpica - muito comum, aplicada para quantificar clulas em vacinas, leite e
culturas, e expresso em nmero de clulas/ml
(2) Contagem Celular Eletrnica - muito comum, aplicada para quantificar clulas em vacinas,
leite e culturas, e expresso em nmero de clulas/ml
(3) Contagem em Placa - muito comum, aplicada para quantificar clulas em vacinas, de leite,
culturas, solos e alimentos, expresso em UFC/ml (unidade formadora de colnia)
(4) Membrana Filtrante - aplicada para quantificar clulas em vacinas, de leite, culturas, solos e
alimentos, expresso em UFC/ml (unidade formadora de colnia)
(5) Turbidez - aplicado para ensaio microbiolgico, estimativa de unidades de absorbncia da
massa de clulas em caldo ou outras suspenses
(6) Contedo de Nitrognio - muito comum, aplicado para a medida indireta da massa celular,
expresso em mg de N/ml
(7) Peso Seco - muito comum, aplicado para a medida indireta da massa celular, expresso em
mg de N/ml
(8) Produtos Metablicos - aplicados a ensaios microbiolgicos e medidas indiretas da
atividade metablica (crescimento), expressa em quantidade do produto/ml
Cultura Contnua

usadas para simular o habitat natural de uma espcie microbiana para estudar sua
estabilidade gentica em relao ao tempo
nas indstrias, manter as clulas em fase de crescimento logartmico ativo cessar o
volume mximo de produtos desejados. Estes sistemas abertos ou CULTURAS
CONTNUAS podem ser obtidos assim :

o quimiostato um aparelho amplamente usado para o crescimento contnuo dos

microrganismos

Culturas Sincrnicas

as clulas se dividem todas ao mesmo tempo, mais pode se conseguir isto (por um
determinado perodo), por exemplo semeando uma cultura em uma temperatura

razovel para seu crescimento, mantendo-a nessa temperatura, onde elas

metabolizaro lentamente, mas no se dividiro. Quando a temperatura rapidamente
aumentada para a de crescimento timo da clula, estas sofrero divises
sincronizadas (ao mesmo tempo)
as culturas sincrnicas permitem aos pesquisadores estudar o cresciemnto microbiano,
a organizao e a morfognese durante estgios particulares do ciclo de diviso celular
na verdade no prtico analisar uma nica clula microbiana, por causa do seu
tamanho diminuto. Entretanto, se todos as clulas em uma cultura esto no mesmo
estgio de cresciemtno a informao que se pode extrair de toda a populao de
clulas pode ser extrapolada para fornecer informaes aplicveis a uma nica clula

CAPTULO 6: Controle dos Microrganismos

Controlar - destruir, inibir ou remover. Vrios sao os agentes fsicos e qumicos que podem ser
utilizados para manter os microrganismos em nveis aceitveis

processos usados : aquecimento, baixas temperaturas, radiao, filtrao e

dessecao. O mtodo de escolha depende do tipo de material que contm o
microrganismo : (1) meio de cultura; (2) produtos farmacuticos; (3) superfcie de
instrumentos cirrgicos; (4) sala de cirurgia de um hospital; (5) alimento de consumo
humano
substncias qumicas que matam os microrganismos, ou previnem o seu crescimento
so chamados de agentes ANTIMICROBIANOS (antibacterianos, antivrus,
antifngicos, antiprotozorios)

Antimicrobianos :

que matam os microrganismos - MICROBICIDA (bactericida, fungicida, viricida)

Esterilizao - destruio de todos os microrganismos presentes em um material, incluindo

esporos

que apenas inibem o crescimento dos microrganismos - MICROBIOSTTICOS

(fungisttico ou bacteriosttico)

aspectos fundamentais que se deve aplicar aos agentes fsicos e qumicos :

1. Padro de morte em uma populao microbiana

o critrio de morte de um microrganismo em Microbiologia baseado em uma nica

propriedade : a capacidade de se reproduzir. Assim a morte de um microrganismo
definida como a perda da capacidade de reproduo
a avaliao da eficincia de um agente microbicida pode ser testada cultivando uma
amostra do material tratado para determinar o nmero de sobreviventes

2. Condies que influenciam a atividade antimicrobiana

tamanho da populao microbiana - quanto maior mais tempo para morrer

concentrao do agente microbicida - quanto menor a concentrao mais tempo leva
para destruir
tempo de exposio ao agente microbicida - quanto maior o tempo de exposio maior
ser o nmero de clulas mortas
temperatura em que so expostos ao agente microbicida - quanto mais alta a
temperatura mais rapidamente a populao morta

natureza do material que contm os microrganismos - tempo de exposio menor meio fluido e pH 5.0
caractersticas dos microrganismos que esto presentes

3. Mecanismo de destruio das clulas microbianas

conhecendo o mecanismo de ao de um dado composto possvel predeterminar as

condies sob as quais atuar mais eficientemente, alm de tambm revelar que
espcies de microrganismos sero mais susceptveis quele agente
os possveis mecanismos esto associados com os principais aspectos estruturais :
alterao do estado fsico do citoplasma, inativao de enzimas, ou rompimento da
membrana ou parede celular - podem levar morte da clula

Agentes Fsicos
Altas Temperaturas : calor mido, calor seco, incinerao
1. Calor mido

mais eficiente que o calor seco para destruir os microrganismos - leva menos tempo e
a temperaturas menores
causa desnaturao e coagulao das protenas vitais, as enzimas, enquanto o calor
seco causa oxidao dos constituintes orgnicos da clula (queima lentamente)
os endosposporos bacterianos so as formas mais resistentes de vida
o

clulas vegetativas de bactrias - mortas de 5-10 min a 60-70 C

o

clulas vegetativas de fungos - mortas de 5-10 min a 50-60 C

o

esporos de fungos - mortas de 5-10 min a 70-80 C

o calor mido utilizado para matar os microrganismos pode ser na forma de : vapor,
gua fervente, gua aquecida a temperaturas abaixo do seu ponto de ebulio (100 oC)

(a) Vapor d'gua

o vapor d'gua sob presso a mais prtica e segura aplicao do calor mido. O
aparelho destinado a este fim a AUTOCLAVE, desenvolvida no sculo XIX

1 - vazo; 2 - cano de sada; 3 - sada; 4 - cmara de exausto; 5 - vapor para a cmara; 6 - vlvula de segurana; 7 manmetro; 8 - vlvula operadora; 9 - porta; 10 - maaneta; 11 - fecho de segurana; 12 - tela removvel; 13 - termmetro; 14 regulador de presso; 15 - injetor de ar de condensao automtica; 16 - revestimento de vapor; 17 - vapor; 18 - ar.

Procedimento do funcionamento da autoclave :

1. a cmara de parede dupla da autoclave primeiramente lavada com vapor fluente para
remover todo o ar
2. ento preenchida com vapor puro e mantida a uma determinada temperatura e
presso por um perodo especfico de tempo. essencial que todo o ar residual
inicialmente presente na cmara seja completamente substitudo por vapor d'gua - se
o ar estiver presente reduzir a temperatura interna da autoclave , e a temperatura e
no a presso no interior da cmara que mata os microrganismos
3. uma autoclave usualmente operada uma presso de 15 lb/pol2, na qual a
o
temperatura de vapor de 121 C. Leva mais tempo para um calor penetrar em um
material viscoso ou slido do que em um matterial fluido. Quanto maior o volume mais
tempo para o calor penetrar
Tempo de exposio (min, a 121 123 oC)

Recipiente
Tubos de ensaios
18 x 150 mm

12 - 14

32 x 200 mm

13 - 17

38 x 200 mm
Frascos Erlenmeyer
50 ml

15 - 20

500 ml

17 - 22

1.000 ml

20 - 25

2.000 ml
Garrafas de diluio, 100 ml
Frascos de soro, 9.000 ml

30 - 35
13 - 17
50 - 55

12 - 14

(b) gua Fervente

gua levada ao ponto de ebulio : 100 C

mata microrganismos vegetativos presente no lquido
os materiais ou objetos contaminados no so esterilizados com seguraa pos alguns
o
endosporos bacterianos podem resistir a 100 C por mais de 1 hora
gua em ebulio no considerado um mtodo de esterilizao
o

(c) Temperaturas abaixo do seu ponto de ebulio (100 C) - Pasteurizao

aquecimento lento a baixas temperaturas

mata as clulas vegetativas de patgenos, mais no esteriliza

2. Calor Seco

calor seco ou ar quente em temperaturas suficientemente altas levam os

microrganismos morte. Leva mais tempo que o calor mido
h materiais que no podem ser esterilizados por calor mido, neste caso o calor seco
o preferido

3. Incinerao

uma prtica de rotina : ala ou agulhas de semeaduras bacteriolgicas no bico de

Bunsen

Baixas Temperaturas

temperaturas abaixo de 0 C inibiro o metabolismo dos microrganismos em geral. No

mata, preserva-os como forma de latncia
o
o
o
Ex. freezer domstico: - 20 C; freezer: - 70 C; nitrognio lquido: -196 C

Radiaes

energia na forma de ondas eletromagnticas transmitidas atravs do espao ou atravs

de um material
as radiaes magnticas so classificadas de acordo com seus comprimentos de onda
: Quanto maior, menos energia (contedo energtico)
radiaes de alta energia (comprimento de onda baixo) podem matar as clulas,
inclusive microrganismos - raios X, gama e luz UV

Formas de Radiaes :

1. Radiao Ionizante
as radiaes de alta energia tem energia suficiente para causar ionizao das
molculas - rompendo as molculas em tomos ou grupo de tomos (H2O ---- H+ +
OH ) - e os radicais hidroxilas por exemplo so altamente reativos e destroem
compostos celulares como o DNA e protenas
exemplos: raios X e raios gama. Alm de microbicidas os raios de alta energia so
capazes de penetrar em pacotes de produtos e esterilizar seus interiores
so mais utilizados para esterilizar alimentos e equipamentos mdicos

2. Radiao No-Ionizante
a radiao UV tem um comprimento de onda entre 136 a 400 nm, que ao invs de
ionizar uma molcula excita os eltrons - resultando em uma molcula que reage
diferente das molculas no-irradiadas. O DNA sofre a maior avaria
a maior atividade bactericida ocorre no comprimento de onda prximo de 260 nm (mais
fortemente absorvido pelo DNA)
lmpadas especiais que emitem luz UV com comprimento de onda microbicida so
utilizadas para matar microrganismos - apenas os microrganismos da superfcie de um
objeto so mortos
Filtraes

as membranas filtrantes so teis para esterilizao, e separao de diferentes tipos

de microrganismos e para coletar amostras microbianas
tamanho dos poros que retem ou no os microrganismos :
bactrias - 0.5 a 1.0 m (geral)
leveduras - 1.0-5.0 m x 5-30 m

alguns tamanhos de poros comerciais : 0.25 m ; 0.45 m ; 0.5 m ; 1 m

Dessecao

clulas microbianas vegetativas quando dessecadas interrompem suas atividades

metablicas, levando a um declnio na populao total vivel
no processo chamado liofilizao os microrganismos so submetidos desidratao
extrema em temperaturas de congelamento mantidas em ampolas fechadas vcuo

Agentes Qumicos
Aplicao dos compostos qumicos

reduo do nmero de microrganismos na superfcie de material inanimado (assoalhos,

mesas, e utensilios domsticos)
em leses de pele para prevenir a infeco
eliminao de microrganismos patognicos da gua potvel e de piscinas

No existe um nico composto qumico que seja ideal para todos os propsitos. Assim
importante conhecer algumas propriedades para que se possa escolher o mais adequado:

1.
2.
3.
4.

as vantagens que o agente apresenta quando utilizados em determinadas situaes

as principais categorias de agentes qumicos antimicrobianos
algumas de suas caractersticas e suas utilizaes prticas
e como atuam nos microrganismos

Definio de Trmos
Esterilizante - um composto qumico que realiza uma esterilizao. Estril um termo
absoluto, ou seja, um material est estril ou no. No pode ser "parcialmente estril" ou
"quase estril"
Desinfetante - uma substncia qumica que mata as formas vegetativas de microrganismos
patognicos, mais no necessariamente suas formas esporuladas. Refere-se normalmente a
substncias utilizadas em objetos inanimados
Germicida - sinnimo do desinfetante; entretanto os microrganismos mortos por um germicida
no so necessariamente patgenos. So usados mais termos especficos como fungicida,
bactericida, etc
Anti-sptico - um composto qumico usualmente aplicado na superfcie do corpo humano
para prevenir a multiplicao dos microrganismos. Mata os microrganismos, ou inibe seu
crescimento e sua atividade metablica
Saneador - agente que mata 99,9% dos microrganismos contaminantes de uma rea. So
normalmente aplicados em objetos inanimados (copos, talheres, pratos e utenslios em
restaurantes), e tambm na limpeza de equipamentos de laticneos e industrias de alimentos
As normas de sade pblica determinam que em certos lugares, a populao microbiana no
deve exceder um nmero especfico. em atendimento a estas determinaes utiliza-se um
SANEADOR
Caractersticas de um agente qumico ideal

1. Atividade antimicrobiana - a capacidade de uma substncia de inibir ou

preferencialmente matar os microrganismos - Esta sempre a primeira exigncia

2. Solubilidade - a substncia deve ser solvel em gua ou outros solventes (lcool) em

quantidades necessria ao seu uso efetivo

3. Estabilidade - o armazenamento da substncia durante um perodo razovel no deve

4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.

resultar em uma perda significativa de ao antimicrobiana

Ausncia de toxicidade - no deve prejudicar o homem ou os animais
Homogeneidade - as preparaes devem ser uniformes em sua composio (os
componentes ativos devem estar presentes em cada aplicao)
Inativao mnima por material estranho - alguns compostos qumicos antimicrobianos
combinam facilmente com protenas, diminuindo a quantidade de substncia qumica
disponvel para agir contra os microrganismos
Atividade em temperatura ambiente ou corporal - no deve ser necessrio aumentar a
temperatura alm daquela normal encontrada no ambiente, onde os compostos
qumicos so utilizados
Poder de penetrao - a ao antimicrobiana limitada ao local de aplicao,
entretanto a ao na superfcie algumas vezes necessrias
Ausncia de poderes corrosivos e tintoriais - os componentes no devem corroer ou
desfigurar metais nem corar ou danificar os tecidos
Poder desodorizante - o desinfetante ideal deve ser inodoro ou apresentar um odor
agradvel
Capacidade detergente - um agente antimicrobiano que tem propriedades detergente
tem a vantagem de ser capaz de remover mecanicamente os microrganismos da
superfcie que esta sendo tratada
Disponibilidade a baixo custo - o produto deve ser facilmente encontrado e de baixo
custo

Principais Grupos de Desinfetantes e Anti-spticos :

1. Fenol e Compostos Fenlicos:

soluo de fenol 5% mata rapidamente as formas vegetativas dos microrganismos,

porm os esporos so muito mais resistentes
o fenol por ser txico e apresentar odor desagradvel no muito utilizado como
desinfetante ou anti-sptico. Tem sido substituido por vrios derivados qumicos, os
quais so menos txicos para os tecidos e mais ativos para os microrganismos.
Exemplos : lysol - desinfetante produzido a partir de uma soluo de sabo contendo ofenilfenol, o-benzil-p-clorofenol e xilenol, usado para desinfetar objetos inanimados
(assoalhos, paredes e superfcies de mesa, termmetro retal); hexaclorofeno - atua
como um bacteriosttico em bactrias Gram +, particularmente em estafilococos
mecanismo de ao : fenol e derivados, alteram a permeabilidade seletiva da
membrana, desnaturam e inativam protenas como enzimas, causando uma perda de
substncias intracelulares (lisam as clulas). Dependendo da concentrao utilizada
podem ser bacteriosttico ou bactericida

2. lcoois

em concentrao entre 70 e 90 % as solues de etanol so eficientes contra as

formas vegetativas dos microrganismos
no utilizado para esterilizar um objeto porque no mata os endosporos bacterianos
(Bacillus anthracis pode sobreviver no lcool por 20 anos)
o metanol no utilizado como agente bactericida - altamente txico. Quanto maior
for a cadeia de carbono do lcool maior suas propriedades bactericida, porm os
lcoois maiores como o proplico e isoproplico j no so mais solveis em gua
os lcoois proplicos e isoproplicos 40 a 80% so bactericidas para clulas
vegetativas. O lcool etlico 70% e o lcool isoproplico 90% (mais eficiente contra
vrus) so utilizados como anti-spticos de pele e como desinfetantes de termmetro
clnicos de uso oral, e de certos instrumentos cirrgicos
Mecanismo de ao : capazes de desnaturar protenas; como so solventes de
lipdeos, lesam as estruturas lipdicas da membrana das clulas microbianas

3. Halognios
iodo cloro e bromo - fortes agentes oxidantes e altamente reativos - destruindo os
componentes vitais da clula microbiana
(1) Iodo e compostos Iodados :

o iodo puro um elemento cristalino preto azulado com brilho metlico, pouco solvel
em gua mais altamente solvel em lcool e iodeto de potssio ou sdio

tradicionalmente usado como agente anti-sptico. um agente microbicida de alta

eficincia contra todos as espcies bacterianas. tambm esporicida, fungicida,
virucida e amebicida

usados principalmente para assepsia da pele. Tambm desinfecta pequenas

quantidades de gua; na sanitificao de utenslios de alimentao; desinfecta o ar
(vapores de iodo)
mecanismos de ao : destruio de compostos metablitos essenciais dos
microrganismos por meio de oxidao. Ex. inativao do aminocido tirosina

(2) Cloro e Compostos Clorados

o cloro na forma gasosa (Cl2) ou em combinaes qumicas representa um dos

desinfetantes mais largamente utilizados
o gs comprimido em forma lquida a escolha universal para a purificao de guas
de abastecimento, pblica, piscinas e estaes de tratamento de gua e esgoto.
pelo fato da dficil manipulao do cloro gasoso, se utiliza muito os compostos
inorgnicos clorados, como os hipocloritos e cloraminas, esta ltima mais estvel,
mais o cloro liberado num perodo maior que nos hipocloritos
para ser efetivo a concentrao do cloro deve atingir 0.5 a 1.0 ppm. Uma soluo de
hipoclorito 1% usada como desinfetante domstico; de 5 a 12% como alvejantes e
desinfetantes domsticos e como sanitificantes em instalaes de laticneos e
indstrias de alimentos
mecanismo de ao :
Cl 2 + H2O ------- HCl + HClO
HClO ------- HCl + O (poderoso agente oxidante que pode destruir subst. celulares)

*o cloro pode tambm combinar diretamente com as protenas celulares e destruir suas
atividades biolgicas
4. Metais Pesados e seus Compostos - Hg, Pb, Zn, Ag, Cu

antigamente a gua era armazenada em recipientes de prata (Ag) e cobre (Cu) pois as
pessoas notavam que ali a gua de beber era conservada
o HgCl2 era amplamente usado. Hoje tem sido substitudo por outros agentes menos
txico e e menos corrosivos

*ao oligodinmica - a capacidade de quantidade extremamente pequenas de certos metais,

particularmente a prata de exercer efeito letal sobre as bactrias - acredita-se que a atividade
desses ons metlicos se deve inativao de certas enzimas que se combinam com o metal

compostos contendo Hg orgnico possuem maior atividade antomicrobiana e menos

toxicidade que os inorgnicos - mercuriocromo, mertiolate
o sulfato de cobre efetivo como um algicida em resduos abertos de gua e piscinas,
tem tambm ao fungicida
mecanismo de ao : inativam as protenas celulares combinando-se com alguns
componentes da protena

Detergentes ou Surfactantes

compostos que diminuem a tenso superficial, utilizados para a limpeza de superfcies

a ao umectante deve-se ao fato de serem compostos anfipticos (possuem uma
parte polar e outra apolar), como por exemplo os sabes

Quimicamente os detergentes so classificados em :

1. Detergentes Aninicos - a propriedade detergente do composto reside na poro

-

aninica. Ex. sabo - [C9H19COO] Na

2. Detergentes Catinicos - a propriedade detergente do composto reside na poro
catinica. Ex. cloreto de cetilpiridnico - [Ar-N C16H33]+Cl3. Detergentes No-Inicos - no ionizam quando dossolvidos na gua. Ex. polissorbato
80; octoxinol. No so antimicrobianos

muitos detergentes antimicrobianos pertencem ao grupo catinico, dos quais os

COMPOSTOS QUATERNRIOS DE AMNIO so mais largamente usados
Compostos Quaternrios de Amnio
Estrutura Geral

so bactericidas (Gram-positivas e Gram-negativas) mesmo em concentraes muito

baixas
apresentam uma combinao de propriedades que fazem dele um excelente antisptico, desinfetante e sanificante :
1. baixa toxicidade
2. alta solubilidade em gua
3. alta estabilidade em soluo
4. no so corrosivos
largamente aplicados em assoalhos, paredes e outras superfcies em hospital,
enfermarias e outros estabelecimentos pblicos. E tambm em equipamentos em
instalaes de processamento de alimentos
mecanismo de ao : desnaturao de protenas das clulas, interferncias com os
processos metablicos, e leso da membrana citoplasmtica
Alguns desinfetantes, antispticos e detergentes mais comumente usados

Agente
Qumico

Concentrao
(%)

Nvel de
Atividade

Aplicaes

Compostos
Fenlicos

0.5 - 3.0

desinfeco de objeto
inanimado

intermedirio

lcoois

70 - 90

antisepsia da pele,
desinfeco de instrumento
cirrgico

intermedirio

Iodo

Compostos
Clorados
Compostos
Quaternrios
Compostos
Mercuricos

antisepsia da pele, pequenos

intermedirio
cortes, desinfeco da gua

0.5 - 5.0

desinfeco de gua,
superfcies no metlicas,
equipamento de laticnios,
materiais domsticos

baixo

0.1 - 0.2

saneamento ambiental de
superfcies e equipamentos

baixo

antisepsia da pele,
desinfeco de instrumentos

baixo

* alta - mata todas as formas de vida microbiana, inclusive os esporos bacterianos

intermedirio - mata o bacilo da tuberculose, fungos e vrus, mais no os esporos bacterianos
baixo - no mata esporos bacterianos, nem o bacilo da tuberculose ou os vrus em um tempo
aceitvel
Avaliao do poder antimicrobiano dos desinfetantes e anti-spticos

o agente qumico testado contra um microrganismo especfico (organismo-teste) usualmente Staphylococcus aureus representando os Gram + ou Salmonella
representando as Gram os 3 procedimentos amplamente usados no laboratrio so : (1) tcnica de diluio em
tubo; (2) tcnica de inoculao em placa; (3) tcnica de coeficiente fenlico

Esterilizantes Qumicos

so particularmente utilizados para a esterilizao de materiais medido sensveis ao

calor. Os principais so :

1. xido de Etileno

lquidos a temperaturas abaixo de 10.8 C, acima disso torna-se gs;

seus vapores so altamente irritantes para os olhos e a mucosa .
so inflamveis mesmo a baixa concentrao
tem um grande poder de penetrao; atravessa e esteriliza o interior de grandes
pacotes com objetos, roupas e mesmo certos plsticos - as seringas descartveis p.
ex.
apresenta a desvantagem de agir a baixa velocidade, necessitando de vrias horas de
exposio para ser eficiente
utilizados rotineiramente para a esterilizao de materiais mdicos e laboratoriais. No
programa espacial pelos cientistas americanos e russos para a descontaminao dos
compostos das naves espaciais
mecanismos de ao : inativa as enzimas e outras protenas que tem tomos de
hidrognio lbeis (grupos sulfidrilas

2. -Propiolactona

lquido incolor em temperatura ambiente; p.e = 155 C; no inflamvel; e causa

bolhas quando em contato com a pele e irritao nos olhos
bactericida, esporicida, fungicida e viricida
no apresenta poder de penetrao, mais considerado mais ativo contra os
microrganismos que os xidos de etileno. Ex. necessrio 2 a 5 mg/l de propiolactona para fins de esterilizao de material, contra 400 a 800 mg/l do xido de
etileno
desvantagem: alm de seu baixo poder de penetrao provavelmente apresente
propriedades carcinognica, o que torna seu uso como esterilizante restringido

3. Glutaraldedo

lquido oleoso, incolor; e 2% j tem um largo espectro de atividade antimicrobiana

efeito contra vrus, clulas vegetativas e esporuladas de bactrias e fungos
utilizado na medicina para esterilizar instrumentos urolgicos, equipamentos
respiratrios

4. Formaldedo

um gs que se mostra estvel somente em alta concentrao e temperatura

extremamente txico e seus vapores intensamente irritantes mucosa
em temperatura ambiente polimeriza-se formando uma substncia slida incolor
(paraformaldedo) que libera o formaldedo pelo aquecimento
o formaldedo em soluo utilizado para desinfeco de certos instrumentos. Na
forma gasosa pode ser utilizado para desinfeco e esterilizao de reas fechadas
mecanismo de ao : inativao de constituintes celulares (protenas e cidos
nuclecos)

Mecanismos de ao de vrios compostos qumicos antimicrobianos em clula bacteiana :

CAPTULO 7: Os Principais Grupos de Microrganismos

Eubactrias e Arqueobactrias
Caractersticas Morfolgicas da Bactrias
Embora existam milhares de espcies bacterianas diferentes, os organismos isolados
apresentam uma das trs formas :
1. Elipsoidal ou Esfrica (COCOS) - apresentam tipos e arranjos diferentes:

diplococos - dois cocos

estreptococos - vrios cocos arranjados em cadeias
ttrades - cocos arranjados em 4 - quadrado
estafilococos - cocos arranjados em cachos de uva
sarcina - cocos arranjados em forma cbica

2. Cilndricas ou Bastonetes (BACILOS)

diplobacilos - ocorrem em pares

estreptobacilos - ocorrem em cadeias

3. Espiraladas ou Elicoidais - ocorrem predominantemente como clulas isoladas

Exigncias Nutricionais para a maioria das Bactrias
limites: 4 - 9
pH :
timo: 6.5 - 7.5
limites 0 - 79 oC
Temperatura :
o

timo 20 - 37 C
Gases :

aerbias, microaerfila, facultativas ou

anaerbias

Luz :

alguns grupos fotossintticos

Concentrao de carbono
no meio :

0.5 - 1.0 %

Carbono :

autotrficos ou heterotrficos

Classificao

Existem dois grupos principais de bactrias : Eubactrias e Arqueobactrias. As diferenas

fundamentais entre estes grupos so :

1. Quanto composio da parede celular - eubactrias: peptidoglicano; arqueobactrias:

constituida de protenas ou polilissacardeo

2. Quanto estrutura qumica dos fosfolipdeos da membrana citoplasmtica eubactrias: cidos graxos de cadeia longa; arqueobactrias: contm lccois de cadeia
longa ramificada (fitanis)
3. Quanto sntese protica - eubactrias: o aminocido usado para iniciar a cadeia
protica sempre o formilmetionina; arqueobactrias: o aminocido a metionina
4. Alm do mais as arqueobactrias so notveis por formarem produtos finais incomuns
do metabolismo, que as eubactrias no podem produzir, como o gs metano, ou
ainda por habitar ambientes extremamente adversos que muitas eubactrias no
podem tolerar
1. Eubactrias
So divididas em dois grupos :

1. Com parede celular

Gram-Negativas ( 12 subgrupos )
Gram-Positivas ( 6 subgrupos )

2. Sem parede celular

Micoplasmas
Principais Caractersticas diferenciais do grupo das eubactrias :
GRUPOS

CARACTERSTICAS

Gram-Negativas

Espiroquetas

helicoidais, com flagelo, vivem na

gua,lodo,insetos,animais e humanos; vrias so
patgenas ao homem. Ex. Borella, Leptospira,
Spirochaeta

Bacilos aerbios ou
Microaerfilos

helicoidais, com flagelos ou no, vivem na gua,

solo, animais; alguns so patgenos ao homem. Ex.
Campylobacter

Cocos e Bacilos aerbios

bastonetes ou cocos, vivem na gua, solo; alguns

so patgenos ao homem e animal. Ex. Acetobacter,
Brucella, Xanthomonas, Rhizobium, Neisseria

Bacilos anaerbios facultativo

bastonetes retos ou vibries, vivem na gua, solo,

plantas intestino do homem e de animais; alguns
so patgenos. Ex. Enterobacter, Erwinia,
Escherichia, Proteus, Salmonella, Shigella, Vibrio,
Yersinia, Serratia

Bactrias anaerbias

bastonetes e cocos, vivem no trato intestinal e

causam infeces teciduais. Ex. Fusobacterium

Riqutsias e Clamdeos

bastonetes e cocos, muitas so patgenas ao

homem e animal, necessitam de hospedeiros vivos
para se desenvolverem. Ex. Coxella, Rickttsia

Fototrficas anoxignicas

bactrias prpuras e verdes, anaerbios,

fotossintticas, vivem em ambiente aqutico, no
patgenos. Ex. Rhodopseudomonas, Chlorobium

Fototrficas oxignicas

cianobactrias, fotossintticas, produzem O2, vivem

no solo e na gua, no patognicos. Ex. Anabaena,
Glocotricha

Bactrias deslizantes

bastonetes ou filamentos, sem flagelos, vivem no

solo e na gua, no patognicos. Ex. Beggiotoa

Bactrias com bainha

bastonetes em cadeia ou filamentos, envolvidas por

uma bainha tubular, saprfitas aquticas, no
patognicas. Ex. Crenothrix

Bactrias gemulantes e/ou

apendiculares

saprfitas aquticas e do solo, no patognicas. Ex.

Ancalomicrobium

Quimiolitotrficas

obtm energia pela oxidao da amnia, nitrito,

compostos sulfurados, vivem no solo e gua, no
patognicos. Ex. Nitrobacter, Nitrosomonas

Gram-Positivas
Cocos

aerbios, facultativos ou anaerbios, saprfitas ou

parasitas, alguns so patognicos. Ex. Deinococcus,
Staphylococus, Streptococcus, Sarcina

Bactrias esporuladas

bastonetes ou cocos, formam endosporos, aerbios,

facultativos ou anaerbios, vivem no solo, gua,
insetos, animais, humanos, alguns so patognicos.
Ex. Bacillus, Clostridium

Bacilos regulares

aerbios ou facultativos, vivem no solo, gua,

produtos alimentcios, alguns causam doenas
humanas. Ex. Lactobacillus, Listeria

Bacilos irregulares

clulas exibem salincia (forma de Y ou V), aerbios

facultativos ou anaerbios, alguns so patognicos.
Ex. Actinomyces, Propionibacterium

Micobactrias

bastonetes aerbios, lcool-cido resistentes,

saprfitas ou parasitas, alguns patognicos ao
homem. Ex. Mycobacterium

Actinomicetos

aerbios do solo que formam miclio, hifas

ramificadas, multiplicam-se por fragmentao ou por
produo de esporos, alguns produzem antibiticos.
Ex. Nocardia, Streptomyces

Micoplasmas

assumem vrias formas, pois no tem parede

celular, no inibidos pela penicilina, possuem
esteris como os eucaritos, habitam na mucosa do
homem e de outros animais. Mycoplasma

2. Arqueobactrias
So divididas em dois grupos :

1. Com parede celular

Produtoras de metano
Bact;erias haloflicas extremas

Arqueobactrias dependente de enxofre

2. Sem parede celular

Termoplasmas
Principais Caractersticas diferenciais do grupo das arqueobactrias :
GRUPOS

CARACTERSTICAS

Metanognicas

anaerbias, produz grande quantidade de metano, cocos, Gram-,

vivem em lodoal, aude, brejos, estao de tratamento de gua
de esgoto. Ex. Methanosarcina, Methanobacterium,
Methanospirillum

Haloflicas
extremas

crescem em 17 a 23% de sal (gua do mar = 3% de NaCl), vivem

em lagos salgados (mar morto),tanques industriais que produzem
sal, alimentos salgados com sal, contm pigmento carotenide.
Ex. Bacteriorrodospsina

Dependentes de
enxofre

vivem em fonte de gua quente cidas, crescem a 50 ou 87 C,

no crescem em pH menor que 4.0 ou 5.5, aerbias, obtm
energia da oxidao do enxofre ou de acares e aminocidos.
Ex. Sulfolobus, Thermoproteus

Termoplasmas

ausncia de parede celular, temperatura tima: 55 a 59 C, pH

timo: 2, as clulas desintegram-se em pH 7

Eucaritos
Os microrganismos eucaritos podem ser divididos em 3 principais grupos : Fungos, Algas e
Protozorios. De um modo geral os microrganismos eucaritos so facinantes devido a seu
ciclo de vida complexo, sua morfologia varivel, seus mtodos alternativos de reproduo, seus
efeitos como agentes de doena e como fonte de interesse econmico e seu papel no
ambiente
Caractersticas Morfolgicas e Nutricionais dos microrganismos Eucaritos
Principais caractersticas que diferenciam os microrganismos eucaritos :
Microrganismos Arranjo Celular

Modo de Nutrio

Motilidade

Miscelnea

no-mvel

esporos
sexuais ou
assexuais

Fungos

unicelular ou
multicelular

quimioheterotrfico
pela absoro de
nutrientes solveis

Algas

unicelular ou
multicelular

fotoautotrfico pela
absoro de
nutrientes solveis

principalmente pigmentos
no-mvel
fotosintticos

unicelular

quimioheterotrfico
pela absoro ou
injesto de
partculas de
alimentos

principalmente
mvel

Protozorios

alguns
formam
cistos

1. Fungos

possuem parede celular, com algumas excees, diferentemente das clulas animais
no possuem clorofila (no-fotosintticos)

formam esporos que so dispersos por correntes de ar

Exigncias Nutricionais para a maioria das espcies

limites: 2 - 9
pH :
timo: 5.6
limites 0 - 62 oC
Temperatura :
o

timo 20 - 30 C
Gases :

aerbios estritos

Luz :

nenhum

Concentrao de carbono
no meio :

4%

Carbono :

heterotrficos

Classificao
Baseia-se primariamente em :

1. caractersticas dos esporos sexuais e corpos de frutificao presentes durante os

estgios sexuais
2. da natureza de seus ciclos de vida
3. caractersticas morfolgicas de seus miclios vegetativos ou de suas clulas
Os fungos so divididos em 3 grupos : Fungos Limosos, Fungos Inferiores Flagelados,
Fungos Terrestres
Fungos Limosos

apresentam tanto caractersticas de fungos como de protozorios, mais no so

considerados fungos tpicos nem protozorios tpicos
assemelham-se aos protozorios por no possuirem parede, apresentar movimentos
amebides e por nutrir-se por injesto de partculas.
assemelham-se aos fungos por formar corpos de frutificao e esporngios
divididos em duas classes principais :
o Acrasiomycetes ou Celulares - clulas amebides, se alimentam de bactrias e
se agregam para formar corpos de frutificao que produzem esporos; ex.
Dictyostelium discoideum
o Myxomycetes ou Acelulares - multicelulares, plasmdio sem parede que se
transforma em esporngio altamente organizado; ex. Physarum polycephalum

Fungos Inferiores Flagelados

incluem todos os fungos, com exceo dos limosos, que produzem clulas flageladas
alimentam-se pela absoro de nutrientes
a grande maioria so filamentosos
divididos em quatro classes principais :
o Chytridiomycetes - clulas mveis com 1 nico flagelo chicoteante localizado
na extremidade posterior; ex. Allomyces macrogynus
o Hyphochytridiomycetes - clulas mveis com 1 nico flagelo do tipo falso,
localizado na poro anterior; ex. Rhizidiomyces arbuscula

Plasmodrophoromycetes - clulas mveis com 2 flagelos chicoteantes

anteriores desiguais, parasitas obrigatrios em plantas superiores, estgio
vegetativo como plasmdio; ex. Plasmodiophora brasicae
Oomycetes - clulas mveis com 2 flagelos inseridos lateralmente; ex.
Saprolegnia ferax

Fungos Terrestres

so os mais conhecidos. Incluem as leveduras, bolores, orelhas de pau, fungos em

forma de taa, ferrugem, carvo, bufa-de-lobo, e cogumelos
todos caracterizam-se pela nutrio atravs da absoro
com exceo das leveduras, que so geralmente unicelulares, a maioria produz um
miclio bem desenvolvido constitudo de hifas septadas ou no
no possuem clulas mveis
a reproduo assexuada ocorre atravs de brotamento, fragmentao e produo de
esporangispors ou condeas. A reproduo sexuada culmina na produo de
zigosporos, ascosporos e basidiosporos
divididos em quatro classes principais :
o Zygomycetes - reproduo sexual por gamentagial, zigoto: zigosporo com
parede celular espessa, reproduo vegetativa por meio de esporangisporo
no interior de esporngio, ex. Rhizophus stolonifer, Mucor rouxii
o Ascomycetes - esporos sexuais produzidos endogenamente em um asco,
reproduo vegetativa por condeos. ex. Saccharomyces cerevisiae,
Neurospora crassa
o Basidiomycetes - esporos sexuais produzidos exogenamente em basdios
(clulas em forma de clava), engloba os fungos comestveis, ex. Agaricus
bisporus
o Deuteromycetes - reproduo sexual desconhecida, reproduo vegetativa por
meio de condeos que se originam de conidiforos, ex. Candida albicans

Em geral aqueles fungos que possuem todos os estgios sexuais so conhecidos como :
FUNGOS PERFEITOS, enquanto aqueles que no possuem todos os estgios sexuais
conhecidos so chamados FUNGOS IMPERFEITOS ou DEUTEROMICETOS. Quando passase a conhecer estes estgio sexual o organismo ento reclassificado numa das outras 3
classes. Um exemplo so algumas espcies de Aspergillus, Penicillium e Candida, que j
foram reclassificados dos Deuteromycetes para os Ascomycetes
2. Algas

so fotoautotrficas (algumas crescem heterotroficamente), quando crescem

fotosintticamente produzem oxignio e utilizam CO2 como nica fonte de carbono
vivem em ambientes marinhos ou de gua doce

Classificao :
So geralmente classificadas conforme as seguintes caractersticas :

1. natureza e propriedade de pigmentos - clorofila a, b, c; carotenides; etc

2. natureza dos produtos de reserva e armazenamento - amido, gorduras, leos,
laminarina, crisolaminarina, paramilon
3. tipo, nmero de insero e morfologia de flagelos
4. composio qumica e caractersticas fsicas da parede celular - celulose, pectina,
cidos algnicos, compostos pcticos, ou sem parede celular
5. morfologia e caractersticas das clulas e flagelos
Divididas em 6 grupos principais :

1.
2.
3.
4.
5.
6.

Algas Verdes
Algas Marrons
Algas Vermelhas
Algas Douradas
Algas Dinoflageladas
Algas Euglenides

Importncia Econmica

para a fertilidade do solo - assim como certas bactrias as algas verdes, marrons e
vermelhas fixam o N2 atmosfrico
para a sntese de vitaminas - o caroteno produzido por algumas algas o precursor da
vitamina A. Os peixes que injerem algas produtoras de vitamina D liposolveis
armazenam a vitamina nos seus rgos, assim o peixe se torna fonte da vitamina
direta ao homem e animal
algas como alimentos - a alga vermelha cultivada no Oriente como produto alimentar;
o gar empregado em muitos alimentos comuns do homem, como agente de
clarificao dos sucos de frutas
algas e doenas - poucas so patognicas, algumas liberam toxinas que so letais aos
peixes; Prototheca cauna causam doenas ao homem e animal

Liquens

so organismos compostos, resultantes da associao de algas e fungos

crescem em rochas, cascas de rvores, podem crescer em baixas temperaturas
existentes nas elevadas altitudes e nos ambientes polares
a maior parte dos fungos liquenizados fazem parte dos Ascomycetes, e as algas
liquenizadas da classe das Algas Verdes
sempre uma nica espcie de fungo associada a uma nica espcie de alga
reproduzem-se predominantemente por processos vegetativos

A alga fornecem carboidratos e vitaminas ao fungo e fungo fornece gua e sais minerias s
algas
3. Protozorios

so microrganismos com caractersticas semelhantes a animais, incluindo locomoo,

ingesto de alimentos, e ausncia de parede celular rgida
presentes em gua doce e marinhas, no solo, ou podem ser simbiticos dentro ou
sobre hospedeiros

Exigncias Nutricionais para a maioria dos protozorios :

limites: 3.2 - 8.7
pH :
timo: 6.0 - 8.0
o

Temperatura :

timo 16 - 25 C

Luz :

alguns efetuam a fotosntese

Os principais grupos de especial interesse na microbiologia :

1. Flagelados - reproduo assexuada por fisso binria, reproduo sexuada conhecida

em alguns grupos, autotrficos e/ou heterotrficos, formas amebides com ou sem

flagelos, 1 ou muitos flagelos comensais, simbiticos e parasitas, ex. Leishmania,

Trypanosomas, Giardia, Trichomonas
2. Amoeba - a maioria so de vida livre, corpos nus ou com esqueleto externo ou interno,
movimento amebide, alimentao por meio de pseudpodes, reproduo assexuada
por fisso binria, reproduo sexuada, quando presente, por gametas flagelados, ex.
Amoeba
3. Ciliados - o maior filo, todos possuem clios como organela de locomoo, muitos
possuem boca, presentes dois tipos de ncleos : macroncleo, que controla o
metabolismo, e microncleo que controla a reproduo, reproduo assexuada por
fisso binria, reproduo sexuada nunca envolve a formao de gamentas livres, so
amplamentes distribuidos : guas doces, salgadas, em solos; 1/3 das espcies so
parasitas, e as outras de vida livre, ex. Didimium, Paramecium

CAPTULO 8: Metabolismo Microbiano

Metabolismo de todos os organismos - crescimento e reproduo

Ciclo do dixido de carbono (CO2) e Oxignio (O2)

Autotrficos - podem usar o CO2 da atmosfera como nica fonte de carbono (bactrias
fotossintticas e plantas), a partir da qual constroi todas suas biomolculas contendo carbono
Heterotrficos - no podem usar o CO2 da atmosfera, podem obter carbono a partir de um
ambiente na forma de molculas orgnicas complexas como a glicose (animais superiores e
muitos microrganismos)
Ciclo do Nitrognio na biosfera

As bactrias fixadoras de nitrognio fixam aproximadamente 193.000.000 de toneladas de

nitrognio por ano. So necessrias 10 molculas de ATP (adenosina trifosfsto) para fixar 1
molcula de nitrognio

A amnia (NH3) necessria para todos os seres vivos, que utilizam para a biossntese de
aminocidos, nucleotdeos
Catabolismo e Anabolismo
Catabolismo - a quebra de macromolculas em pequenos compostos
Anabolismo ou Biossntese - sntese de macromolculas a partir de compostos pequenos

Esquema Geral

Bioenergtica

Termodinmica Bioqumica - estudo das alteraes energticas que acompanham as reaes

bioqumicas
Os sistemas biolgicos so essencialmente isotrmicos, e usam energia qumica para
propulsionar os processos da vida, e os sistemas biolgicos seguem as Leis Gerais da
Termodinmica :

1. a energia total de um sistema mais a energia de seu meio circundante permanence

constante (lei da conservao da energia)
2. a entropia total de um sistema deve aumentar se um processo ocorre
espontaneamente. A entropia a distribuio ao acaso do sistema, extenso desordem

para manter os processos vitais todos os organismos devem obter energia livre do seu
ambiente
G = E - TS onde ;
G = alterao de energia livre do sistema;
G negativo - reao exergnica (perda de energia livre);
G positivo - reao endergnica (anabolismo)
E = alterao total na energia interna da reao - ENTALPIA
S = alterao da ENTROPIA
T = temperatura absoluta

nos autotrficos o processo exergnico simples, a reao procede espontneamente;

p. ex. as plantas verdes utilizam energia da luz solar
os heterotrficos obtm energia livre do seu metabolismo ao desdobramento de
molculas orgnicas complexas de seu meio ambiente. Em todos esses processos o
ATP desempenha um papel central na transferncia de energia livre dos processos
exergnicos (catabolismo) para os endergnicos (anabolismo)

Grupo Fosfato de Transferncia e ATP

4-

3-

ATP + HOH ------ ADP + Pi - + H

Fosfatos de alta energia atuam como a "moeda energtica" da clula

a maioria dos organismos obtm energia da degradao, isto , da quebra de

nutrientes ou substncias qumicas
durante o catabolismo a energia liberada das molculas dos nutrientes e
armazenada temporariamente em um "sistema de armazenamento de energia" at
sua utilizao. Este sistema serve tambm como um "sistema de transferncia de
energia" quando ela necessria para a sntese de constituintes da clula

Oxidao Biolgica

a respirao o processo pelo qual as clulas obtm energia na forma de ATP, a partir
de reaes controlada do hidrognio com o oxignio para formar a gua.
a maior parte da energia derivada da oxidao respiratria capturada no interior da
mitocndria. Este sistema mitocondrial (gerao de energia a partir de um intermedirio
de alta energia, o ATP) chamado FOSFORILAO OXIDATIVA
a fosforilao oxidativa capacita os organismos aerbios a captar uma poro muito
maior de energia livre disponvel dos substratos, em comparao com os anaerbios
fosforilao oxidativa - sntese de ATP - transferncia de eltrons para oxignio - nos
eucaritos ocorre na mitocndria
fotofosforilao - sntese de ATP - luz - nos eucaritos ocorre nos cloroplastos
Transporte dos equivalentes redutores atravs da cadeia respiratria

Principais fontes de energia dos microrganismos

1. quimiotrficos - obtm energia por degradao de nutrientes ou substratos qumicos ( a

energia liberada e armazenada, e os produtos finais acumulados)

2. quimioheterotrficos - so organismos quimiotrficos, que degradam compostos

orgnicos para obter energia

3. quimioautotrficos - so organismos quimiotrficos, que degradam compostos

inorgnicos para obter energia

4. fototrficos - utilizam luz como fonte de energia. Possuem certos pigmentos que
absorvem a luz e armazenam sua energia
Energia Qumica
A energia existe sob vrias formas. A energia qumica a utilizada universalmente pelos
organismos vivos

Energia qumica a energia contida em ligaes qumicas das molculas de nutrientes

especiais. Quando estas ligaes so quebradas durante a degradao de um nutriente a
energia qumica liberada

os compostos de transferncia de energia mais utilizados pelas clulas so aqueles

capazes de transferir grande quantidade de energia, chamados compostos de
tranferncia de alto nvel energtico - o mais importante a adenosina trifosfato (ATP)

Produo de ATP pelos microrganismos

Fosforilao a adio de um grupo fosfato a um composto. O ATP formado pela adio de
um grupo fosfato ao ADP. Existe trs vias gerais nas quais isto pode ocorrer :

1. Fosforilao ao nvel do substrato - processo no qual o grupo fosfato de um composto

qumico removido e adicionado diretamente ao ADP

1. Fosforilao Oxidativa - processo no qual a energia liberada pela oxidao de

compostos qumicos (nutrientes) utilizada para a sntese de ATP a partir de ADP.
Todas as reaes de oxidao liberam energia, e os microrganismos captam para a
sntese do ATP
1. a energia liberada por uma srie integrada de reaes de oxidao
sequenciais denominada sistema de transporte de eltrons
2. a energia armazenada temporariamente em forma de fora protomotiva
3. a fora protomotiva fornece energia para a sntese de ATP a partir do ADP
Sistema de Transporte de Eltrons
o

uma srie integrada de reaes de oxidaes sequenciais que libera energia

gradativamente, em vrias etapas, as quais a clula vai utilizando

O doador de eltrons ou composto reduzido pode ser um nutriente que foi

absorvido pela clula ou um composto resultante da quebra de um nutriente, e
aceptor final de eltrons ou composto oxidado, obtido do ambiente em que a
clula esta presente
os organismos aerbios utilizam o oxignio; aps receber os eltrons do ltimo
sistema O/R e o oxignio reduzido a gua. Os organismos anaerbios
utilizam compostos qumicos como o nitrato, o sulfato, ou cido fumrico
o sistema de transporte de eltrons est localizado na membrana
citoplasmtica nas bactrias e na membrana interna da mitocndria nas clulas
eucariticas

Observe que a energia liberada a cada passo na srie sequencial de oxidao,

porm apenas em algumas etapas a quantidade de energia liberada suficiente para a
produo de ATP. Mas esta energia ainda deve ser primeiramente estocada na forma
de fora protomotivas antes de ser utilizada para produzir ATP
Fora Protomotiva

8. a energia liberada do sistema de transporte de eltrons utilizada pela clula

para bombear prtons para fora da clula tornando assim o lado externo da
membrana altamente cido e o lado interno com cargas negativas
(concentrao de prtons pode ser 100 vezes maior de um lado da membrana)
9. esta distribuio desigual de prtons e cargas eltricas atravs da membrana
representa uma importante forma de energia potencial - FORA
PROTOMOTIVA - que utilizada na sntese de ATP
10. existem canais dentro de molculas das enzimas adenosina trifosfatase
(ATPase), a qual atravessa a membrana, atravs dos quais os prtons fluem
para o lado onde esto menos concentrados (como se abrisse uma barragem).
Este fluxo de prtons pode ser utilizado pela clula para realizar trabalho de
fosforilao do ADP para produzir ATP

1. Fotofosforilao - processo no qual a energia da luz utilizada para a sntese de ATP a

partir de ADP. Utilizada pelas cianobactrias, algas e plantas verdes, de um modo
geral, a fotofosforilao ocorre da seguinte maneira :
1. a luz utilizada para produzir a fora protomotiva
2. a fora protomotiva promove ento a sntese do ATP
Processo :
(1) quando a luz absorvida pelas molculas de clorofila presentes no fotosistema I
(PSI), a energia luminosa conduz as molculas a um estado de excitao - liberao de
um eltron de cada molcula (os quais so utilizados para reduzir NADP (nicotinamida
adenina difosfato) a NADPH2
2 Chl (PSI) 2e- ( NADP + 2H+ a NADPH2 )
(2) similarmente a luz absorvida pela clorofila de PSII, causando a liberao de
eltrons desse fotosistema. Esses eltrons passam ao longo do sistema de transporte
de eltrons e alcanam a Chl+ de PSI :
-

2 Chl (PSII) 2e (O/R)1 2e (O/R)1 2e (O/R)1 2e (2 Chl (PSI)+ a 2 Chl (PSI) )

A diferena do sistema de transporte de eltrons descritos para a fosforilao oxidativa

+
que nesse sistema, o doador Chl (PSII) e o aceptor final de eltrons Chl (PSI) so
fornecidos pela prpria clula e no pelo meio ambiente
Vias de Degradao de Nutrientes
Gliclise ou Via de Embden-Meyerhof
A oxidao de glicose a cido pirvico, usualmente o primeiro estgio no catabolismo de
carboidratos. Muitos microrganismos utilizam esta via, bem como os animais e as plantas.

A decomposio da glicose a cido pirvico pela via de Embden-Meyerhof apresenta algumas

importantes caractersticas :

1.
2.
3.
4.

duas molculas de ATP so necessrias para converte a glicose a frutose 1,6-difosfato

um total de 4 molculas de ATP so produzidas por fosforilao nvel do substrato
a produo lquida de ATP por molcula de glicose = 2
no processo geral 1 molcula de glicose resulta em 2 de cido pirvico

5. duas molculas de NADH so formadas

A ltima caracterstica um aspecto importante da gliclise, pois a clula possui quantidade
limitada de NAD - utilizada para oxidar as molculas de gliceraldedo-3-fosfato. Assim que deve
existir um meio de regenerar continuamente o NAD a partir de NADH para permitir que a
gliclise continue.
Os seres vivos usam 2 mtodos para regenerar o NAD a partir de NADH : FERMENTAO e
RESPIRAO
Fermentao
um processo independente do oxignio, no qual o NADH2 que produzido durante a gliclise
(ou outra via de degradao) utilizado para reduzir um aceptor orgnico de eltrons
produzido pela prpria clula
Exemplo :
Leveduras --- crescem em meio contendo glicose sob condies de anaerobiose --fermentao alcolica
Leveduras utilizam acetaldedo como aceptor final
2 c. pirvico ---- 2 acetaldedo + 2 CO2
2 acetaldedo + 2 NADH2 --- 2 etanol + 2 NAD
Streptococcus lactis utilizam o prprio cido pirvico como aceptor final
2 cido pirvico + 2 NADH2 ---- 2 cido ltico + 2 NAD
A fermentao um processo pouco eficiente na produo de energia pois os produtos finais
ainda contm grande quantidade de energia qumica
Respirao
um processo de regenerao de NAD utilizando o NADH2 como doador de eltrons para um
sistema de transporte de eltrons.
Se o O2 o aceptor final de eltrons ento temos uma RESPIRAO AERBIA. E se o NO3
ou SO4 forem os aceptores finais de eltrons ento temos a RESPIRAO ANAERBIA
A respirao apresenta uma grande vantagem sobre a fermentao : no somente o NAD
regenerado mas o sistema de transporte de eltrons produz uma fora protomotiva que pode
ser dirigida para a sntese adicional de molculas de ATP
Fermentao alcolica por leveduras

Respirao aerbica por leveduras

Vias Alternativas
Muitas bactrias utilizam outras vias em adio a gliclise para a oxidao de glicose. As vias
alternativas mais comuns so : (1) Via das Pentoses Fosfato; (2) Via de Entner-Doudoroff
Via das Pentoses

a glicose tambm pode ser oxidada via ciclo das pentoses, com liberao de um par de
eltrons que podem entrar na cadeia respiratria.
primeiras reaes do ciclo das pentoses :

Glicose ATP a ADP Glicose 6-fosfato - 2H 6-fosfo-glicnico - 2H e CO2 Ribulose 6-fosfato

um fator importante desta via que se produz importantes intermedirios usados na

sntese de cidos nuclicos; glicose, a partir de dixido de carbono em fotossntese; e
certos aminocidos. Tambm importante pela produo da coenzima reduzida NADPH
a partir de NADP. Apenas uma molcula de ATP produzida para cada molcula de
glicose oxidada
algumas bactrias que utilizam a via das pentoses - Bacillus subtilis, Escherichia coli,
Leuconostoc menseteroides e Enterococcus feacalis

Via de Entner-Doudoroff

para cada molcula de glicose a via de Entner-Doudoroff produz 2 molculas de

NADPH e uma molcula de ATP para ser utilizada nas reaes de biossntese
encontrada em algumas bactrias Gram-negativas, incluindo Rhizobium, Pseudomonas
e Agrobacterium. Geralmente no encontrada entre as Gram-positivas

Transporte de Nutrientes para o interior das Clulas

A maioria dos nutrientes so transportados atravs da membrana citoplasmtica por protenas
especiais : protenas carreadoras.
No entanto molculas de gua e alguns nutrientes solveis em lipdeos (constituintes da
membrana) podem passar livremente atravs da membrana por um processo chamado difuso
simples. Mais a maioria no entra na clula por este tipo de transporte. Existem 2 transportes
mediados por carreadores : difuso facilitada e transporte ativo. Os 3 tipos de transporte de
nutrientes para o interior da clula :

1. Difuso Simples - entra livremente at um equilbrio do meio externo com o meio

interno. No requer energia metablica

2. Difuso Facilitada - as molculas dos nutrientes se ligam inicialmente protena

carreadora. No requer energia metablica e tambm ocorre um movimento de
molculas de uma maior concentrao para uma menor, at que a concentrao do
lado interno e do lado externo estejam em equilbrio
3. Transporte Ativo - a maioria dos nutrientes so transportados para dentro da clula
assim. Ocorre no sentido de uma baixa para uma alta concentrao - a clula pode
concentrar altos nveis de nutrientes que so adequados para as atividades
metablicas, nveis que podem ser centenas de vezes maior dentro da clula que
aqueles existentes fora dela. Requer consumo de energia metablica
Utilizao da Energia para processos Biosintticos
Em geral :

as vias biosintticas comeam com a sntese das unidades estruturais necessrias

para a produo de substncias mais complexas
as unidades estruturais so ento ativadas, usualmente com a energia de molculas de
ATP. Esta energia necessria para estabilizar as ligaes covalentes que
subsequentemente iro ligar as unidades estruturais
as unidades estruturais ativadas so unidas uma a outra para formar substncias
complexas que se tornam parte estrutural ou funcional da clula

Utilizao da Energia :
1. Biossntese de Compostos Nitrogenados

Aminocidos e Protenas - um dos mais importantes aminocidos que um

microrganismo necessita produzir o cido glutmico
Nucleotdeos e cidos Nuclico

Fixao de N2 :
N2 + 6 e- + 6 H+ + 16 ATP --------- 2 NH3 + 16 ADP + 16 fosfatos
2. Biossntese de Carboidratos

Polissacardeos - peptidoglicano, celulose, amido,....

3. Biossntese de Lipdeos

cidos graxos de cadeia longa

Fosfolipdeos

4. Outros Processos

Transporte de nutrientes para o interior da clula

Motilidade
Esquema geral de como uma bactria pode sintetizar as macromolculas
(em um meio com glicose + NH3SO4 + outros sais inorgnicos)

CAPTULO 9: Gentica Microbiana

A gentica o estudo das semelhanas - Hereditariedade - e diferenas - Variabilidade

Cromossomos de Clulas Procariticas e Eucariticas
Um cromossomo uma estrutura densa no interior da clula que carrega fisicamente
informaes hereditrias de uma gerao para outra
Diferenas entre os cromossomos de clulas procariticas e eucariticas :
Clulas Procariticas

Clulas Eucariticas

1. contm somente um cromossomo

2. consiste de uma nica molcula

1. h mais do que um cromossomo

de DNA de fita dupla na forma

circular
3. no possui membrana nuclear
4. enrolado, espiralado e de forma
altamente compacta - cerca de
1200 vezes maior que o tamanho
da clula

2. cada cromossomo consiste em

por clula
uma nica molcula longa de DNA
de fita dupla enrolado em
agregados de protenas histonas
em intervalos regulares
3. possui membrana nuclear
4. apresenta forma linear, e a
molcula de DNA cerca de 10

vezes mais longa

Alm do cromossomo uma clula bacteriana pode conter uma ou mais estrutura de DNA
chamados PLASMDIOS - molculas de DNA de fita dupla menores que os cromossomos e
que podem replicar-se independentemente destes
Uma clula que contm somente um de cada tipo de cromossomo um organismo chamado
HAPLIDE. J que as bactrias tem 1 nico cromossomo, elas necessariamente so
haplides. J a maioria das clulas eucariticas so DIPLIDES - contm 2 de cada tipo de
cromossomo
Replicao do DNA
Nas Bactrias

1. cromossomo circular (molcula de DNA de dupla fita)

2. as duas fitas so desenroladas pela enzima DNAgirase (em um local especfico da
molcula de DNA) formando duas forquilhas de replicao. Cada fita (separadas) serve
de modelo para a fita nova, que se forma em complementariedade com a clula
parental: Adenina com Timina (A-T); Guanina com Citosina (G-C). A enzima DNA
polimerase assegura esta complementariedade pela adio de nucleotdeos fita nova
complementar parental
3. a medida que vai desenrolando vai formando as outras fitas
4. as duas fitas novas j esto quase separadas
5. as duas fitas se separam
Nos Eucaritos
A diferena que a replicao do DNA se inicia em vrios pontos do DNA linear
O Gene
Um segmento de DNA que contm a sequncia de nucleotdeos para a produo de uma
determinada protena. Uma vez que as clulas produzem milhares de protenas, uma molcula
de DNA contm milhares de genes, um para cada protena - um gene uma enzima
A forma pela qual as clulas usam a informao no gene para produzir uma determinada
protena :

1. a informao no gene (DNA) copiada para uma molcula de cido ribonuclico (RNA
mensageiro - mRNA) por um processo chamado transcrio
2. o mRNA carrega as informaes transcritas da regio nuclear da clula para os
ribossomos no citoplasma
3. os ribossomos ento executam a traduo, um processo em que a informao no
mRNA utilizada para sintetizar uma protena correspondente a partir de aminocidos
Variabilidade nos Microrganismos
Variabilidade est associada com duas propriedades fundamentais de um organismo :

1. Seu Gentipo - representa o potencial hereditrio total de uma clula, refere-se a toda
capacidade gentica de um organismo encontrado no DNA - clula bacteriana (DNA
cromossmico e DNA plasmdico); clulas eucariticas (DNA cromossmico e DNA das
mitocndrias; no caso de algas e plantas DNA dos cloroplastos)

2. Seu Fentipo - representa a parte do potencial gentico que est atualmente sendo
expressa por uma clula com determinadas condies - uma cor particular, ou o
tamanho de uma colnia bacteriana, utilizao de compostos qumicos especficos
(fonte de energia pelas leveduras); presena de cpsulas que pode ou no ser
produzidas por certas bactrias dependendo de seu meio ambiente
1 nico gentipo pode resultar em muitos fentipos
Alteraes Fenotpicas
O fentipo de um organismo pode ser influenciado tanto por : (1) condies ambientais; (2)
pelo gentipo
Exemplo :
Bactrias do gnero Azomonas :

na presena de sacarose ---- formam grandes colnias viscosas

na ausncia de sacarose ---- formam pequenas colnias no viscosas

Embora a bactria seja "sempre" potencialmente capaz de produzir o material viscoso - a

presena ou ausncia do acar que determina se esta caracterstica ser expressa
Alteraes Genotpicas
Pode ser resultante da (1) Mutao; ou (2) Recombinao
Mutao

mutante - a clula ou o organismo que carrega o gene mutante

tipo selvagem - o organismo parental com o gene normal
para selecionar o mutante p.ex. pode-se adicionar antibiticos ao meio - os selvagens
morrero e os mutantes (resistentes ao antibitico) sobrevivero

Os tipos de mutaes mais comuns :

1. Mutao Pontual - resulta de uma substituio de um nucleotdeo por outro em um

gene (num ponto s)

2. Mutao por Deslocamento - ocorre com a adio ou perda de um ou mais

nucleotdeos no gene - mutao de insero e de deleo
Recombinao
Leva a uma nova combinao de genes nos cromossomos. Nas bactrias este processo pode
ocorrer devido tranferncia de genes cromossmicos de uma clula para outra. H trs tipos
diferentes de transferncia de gene bacteriano :

1. Transformao - a clula receptora adquire os genes de uma molcula de DNA livre

presente no meio

2. Transduo - o DNA da clula doadora transportado por um vrus (bacterifago) para

a clula receptora

3. Conjugao - dependente do contato clula-clula; pode envolver a transferncia de

um plasmdio, como o plasmdio F em Escherichia coli

Plasmdio - uma pequena molcula de DNA normalmente circular, auto-replicativa, que no

faz parte do cromossomo bacteriana. Alguns carregam genes para resistncia a antibiticos, ou
para enzimas que degradam substncias qumicas complexas, ou ainda so
bacteriocinognicos
Regulao da Expresso Gnica
Uma clula contm mais de 1000 enzimas diferentes, e cada uma com efetiva atividade
cataltica para algumas reaes qumicas. O controle prprio do metabolismo celular
acompanhado pela regulao das enzimas - regulando a atividade das enzimas ou a sntese
delas

1. Induo Enzimtica - uma protena repressora (ligada regio operadora de um

operon) inativada na presena de um indutor (lactose) - permitindo a ligao da RNA
polimerase ao promotor e a transcrio do operon
2. Represso pelo produto final - neste caso o repressor inativo e no impede a
transcrio do operon; entretanto se o produto final da via metablica particular est
presente, o repressor ativado, ligando-se na regio do operon e impedindo a
transcrio do operon