NORMA DE HIGIENE OCUPACIONAL

MTODO DE ENSAIO

PRESIDENTE DA REPBLICA
Fernando Henrique Cardoso
MINISTRO DO TRABALHO E EMPREGO
Francisco Dornelles

FUNDACENTRO
PRESIDENTE DA FUNDACENTRO
Humberto Carlos Parro
DIRETOR EXECUTIVO
Jos Gaspar Ferraz de Campos
DIRETOR TCNICO
Joo Bosco Nunes Romeiro
DIRETOR DE ADMINISTRAO E FINANAS
Antonio Srgio Torquato
ASSESSOR DE COMUNICAO SOCIAL
Jos Carlos Crozera
DIVISO DE PUBLICAES
Elisabeth Rossi

Norma de Higiene
Ocupacional
Mtodo de Ensaio

Mtodo de Coleta e Anlise de Fibras em Locais de Trabalho

Anlise por Microscopia tica de Contraste de Fase

Equipe de elaborao:

Cristiane Queiroz Barbeiro Lima

Norma Conceio do Amaral

Este mtodo de avaliao est includo na srie de Normas de Higiene Ocupacional (NHOs),
elaborado por tcnicos da Coordenao de Higiene do Trabalho da FUNDACENTRO,
por meio do Projeto Difuso de Informaes em Higiene do Trabalho 1998/1999.

2001

APRESENTAO

A Coordenao de Higiene do Trabalho da FUNDACENTRO, por meio

do Projeto Difuso de Informaes em Higiene do Trabalho 1998/1999, vem
elaborando a srie de normas tcnicas denominadas Normas de Higiene
Ocupacional.
A avaliao ambiental nos locais de trabalho uma medida preventiva
importante, uma vez que pode indicar se determinadas condies de trabalho
traro prejuzos ou no sade dos trabalhadores, especialmente quando as
doenas causadas pelo trabalho manifestam-se somente aps longo tempo de
latncia, como o caso das doenas originadas pela maioria das fibras.
Com o objetivo maior de verificar a eficincia das medidas de controle
nos locais de trabalho que manipulam fibras foi desenvolvido este mtodo,
tendo como base as referncias internacionais existentes e a aplicao prtica.
Este mtodo traz detalhes dos procedimentos necessrios para coleta e
anlise de fibras e oferece ferramentas importantes para os trabalhos da
Higiene Ocupacional.

ROBSON SPINELLI GOMES

Gerente da Coordenao de Higiene do Trabalho

SUMRIO

1. Introduo

11

2. Objetivo

11

3. Campo de aplicao

11

4. Referncias normativas

12

5. Preciso analtica

12

6. Definies

12

7. Smbolos e abreviaturas

15

8. Princpio do mtodo

15

9. Interferncias

16

10. Materiais utilizados para coleta

18

11. Aparelhagem para coleta

18

12. Materiais utilizados para anlise

18

13. Aparelhagem para anlise

19

14. Densidade de fibras sobre o filtro

19

15. Limpeza de materiais e equipamentos

21

16. Preparao dos filtros para coleta

22

17. Procedimento de coleta

24

18. Transporte de amostras

25

19. Preparao de amostras para anlise

26

20. Procedimento de anlise

31

21. Clculo da concentrao para cada amostra

36

22. Expresso dos resultados

37

23. Notas de procedimento

37

24. Referncias bibliogrficas

38

25. Representao esquemticas dos procedimentos

40

ANEXOS
A. Procedimento para medio da rea til do filtro

41

42
C. Especificao e ajuste do microscpio
45
D. Especificao e utilizao da lmina HSE/NPL
49
E. Estratgia de amostragem
51
F. Controle da qualidade das contagens
57
G. Modelo de formulrio para Coleta de Amostras Ambientais
58
H. Modelo de formulrio para Observaes sobre o Estado das Amostras
59
I. Modelo de formulrio para Contagem de Fibras
60
J. Modelo de formulrio para Clculo de Resultados Finais das Contagens 61
B. Especificao e aferio do gratculo ocular de Walton-Beckett G-22

FIGURAS
1

Modelos e montagem dos porta-filtros

23

Vedao do porta-filtro de alumnio

24

Fechamento do porta-filtro de alumnio

24

Transporte de amostras em pequenos frascos

26

Transporte de amostras em maleta de alumnio

26

Retirada do filtro amostrado do frasco

28

Retirada do filtro amostrado do porta-filtro

28

Colocao do filtro amostrado sobre a lmina

28

Sistema de vaporizao de acetona para

transparentar o filtro amostrado

29

10

Colocao da lamnula sobre o filtro

30

11

Armazenamento das lminas

31

12

Orientao de sentido nas contagens

32

13

Fibra totalmente dentro da rea do retculo

33

14

Fibra dentro e fora da rea do retculo

33

15

Fibra que cruza mais de uma vez a rea do retculo

34

16

Fibra com extremidade dividida dentro da rea do retculo

34

17

Fibras agrupadas dentro da rea do retculo

35

18 Fibras agregadas a material particulado

dentro da rea do retculo

35

PREFCIO

Este mtodo de ensaio vem sendo aplicado por tcnicos do Laboratrio

de Microscopia, Gravimetria e Difratometria de Raios X da
FUNDACENTRO desde 1987. Ele foi revisado para incorporar-se Srie
de Normas de Higiene Ocupacional (NHOs), juntamente com a evoluo de
novos conceitos e aplicao prtica.
A tcnica de microscopia tica de contraste de fase para anlise de
fibras no ar tem sido preferida em virtude de ser uma tcnica rpida e com
custo relativamente baixo, em comparao com outros mtodos.

NHO 04

1. INTRODUO

O extenso uso de fibras, sejam elas naturais, artificiais ou sintticas,

nos diversos processos industriais, proporcionou vrios estudos
epidemiolgicos sobre os efeitos sade dos trabalhadores que manipulam
diretamente esses materiais, assim como da populao potencialmente
exposta a eles. A exposio a poeiras contendo fibras pode implicar no
surgimento de doenas do sistema respiratrio.
Diante das vrias pesquisas em diversos pases, verificou-se a
necessidade de padronizao da metodologia de avaliao ambiental, de
modo a obter dados que pudessem ser comparados mais exata e
precisamente. Neste sentido, o Laboratrio de Microscopia da
FUNDACENTRO adaptou a metodologia de coleta e anlise de fibras por
microscopia tica de contraste de fase, recomendada pela Organizao
Mundial da Sade, em conjunto com as orientaes da Norma
Regulamentadora n- 15, Anexo 12 Limites de Tolerncia para Poeiras
Minerais Asbesto, de modo a tornar os resultados das avaliaes de fibras
nos locais de trabalho mais representativos e comparveis entre si.

2. OBJETIVO

Esta Norma prescreve um mtodo padronizado de coleta e anlise de

fibras, incluindo todos os tipos de amianto/asbesto, fibras vtreas (MMVF
Man Mineral Vitreous Fibers) e fibras cermicas. Tem a finalidade de
estimar a concentrao de fibras respirveis em suspenso no ar.

3. CAMPO DE APLICAO

Este mtodo se aplica verificao da presena e concentrao de

fibras respirveis no ambiente de trabalho, fornecendo subsdios para a
proposio de medidas de controle ou para a avaliao de sua eficcia.

Nota: Este mtodo no se aplica a avaliao de fibras orgnicas

(algodo, sisal, linho, rami e cnhamo).

11

NHO 04

4. REFERNCIAS NORMATIVAS

As normas relacionadas a seguir estavam em vigor no momento desta

publicao. Como toda Norma est sujeita reviso, recomenda-se utilizar
as edies mais recentes.
Na aplicao deste mtodo de ensaio pode-se consultar:
NHT 03 A/E/1984: Determinao de vazo de amostragem pelo
mtodo da bolha de sabo (FUNDACENTRO).
NBR 10562/1988: Calibrao de vazo, pelo mtodo da bolha de
sabo, de bombas de baixa vazo utilizadas na avaliao de agentes
qumicos no ar (ABNT).

5. PRECISO ANALTICA

5.1. A maioria dos mtodos que utilizam a tcnica de microscopia

tica de contraste de fase apresenta grande variabilidade nos
resultados intra e interlaboratoriais.
Sob controle estatstico do processo analtico, o coeficiente de
variao analtico em um laboratrio deve ser prximo de 20%,
se 100 fibras forem contadas. Para concentraes muito altas ou
muito baixas o coeficiente de variao maior.
5.2. A microscopia tica por contraste de fase no diferencia fibras.
Fibras maiores que 0,15 m de dimetro podem ser detectadas.

6. DEFINIES
Para efeito deste mtodo, aplicam-se as seguintes definies:
6.1. rea til do filtro
toda a rea do filtro exposta ao depsito de poeira. A rea til
do filtro pode variar de acordo com o sistema de coleta utilizado
12

NHO 04

e, tambm, em virtude do desgaste do filtro. O procedimento

para a medio da rea til do filtro est descrito no Anexo A.
6.2. Campo de contagem
a rea circular interna pertencente ao gratculo de WaltonBeckett.
(Anexo B)
6.3. Estratgia de amostragem
A estratgia de amostragem consiste em um planejamento
cuidadoso para atingir o objetivo da avaliao quantitativa.
(Anexo E)
6.4. Fibra

um longo e fino filamento de determinado material.

6.5. Fibra respirvel
Entende-se por fibra respirvel aquela com dimetro inferior a 3
micrmetros, comprimento maior que 5 micrmetros, e relao
entre comprimento e dimetro igual ou superior a 3:1.
6.6. Filtro branco de lote
Filtro de membrana do mesmo tipo, porosidade e dimetro que o
filtro a ser utilizado para a coleta. um filtro usado
exclusivamente em laboratrio, como controle de contaminao
antes da preparao dos filtros para amostragem.
Uma amostra representativa de 4% do lote (caixas de 50 ou 100
unidades) de filtros deve ser preparada e contada conforme o
mtodo.

Quando a mdia dos resultados se encontrar acima de 5

fibras em 100 campos, o lote todo dever ser rejeitado.
6.7. Filtro branco de laboratrio
um filtro de membrana do mesmo tipo, porosidade e dimetro
que o filtro utilizado na coleta.
13

NHO 04

usado exclusivamente no laboratrio, como controle de

contaminao durante a preparao dos filtros amostrados.
Deve ser preparado ao mesmo tempo e da mesma forma que os
filtros amostrados.
Se a contagem do filtro branco de laboratrio exceder 10% da
contagem da amostra que apresentou o menor nmero de fibras
encontradas, todas as amostras que foram preparadas com este
filtro branco devem ser desconsideradas, para efeito da avaliao
da exposio ocupacional.
Nota: A utilizao dos resultados encontrados fica sob
apreciao do profissional responsvel pela coleta das amostras.

6.8. Gratculo
a marcao colocada no plano focal da ocular de um
instrumento tico; serve como referncia na limitao de rea
para anlise ou como dispositivo auxiliar de uma medida.

6.9. Plano do filtro

a rea na qual se verifica nitidamente a linha verde do filtro de
membrana.

6.10. Registros de campo

o registro de todos os dados ou ocorrncias observados

durante a avaliao ambiental no local de trabalho. Devem
ser tomados de maneira organizada e anotados em folhas
apropriadas, propiciando obter as devidas concluses.

6.11. Vazo de ar
o volume de ar em litros, que passa atravs do dispositivo de
coleta por unidade de tempo, em minutos.

14

NHO 04

7. SMBOLOS E ABREVIATURAS
7.1.

ABNT

7.2.

cm /min

7.3.

f/cm

fibras por centmetro cbico

7.4.

l/min

litros por minuto

7.5.

mm

milmetros

7.6.

NBR

Norma Brasileira

7.7.

NHT

Norma de Higiene do Trabalho

7.8.

micrmetros

7.9.

mm

Associao Brasileira de Normas Tcnicas

centmetro cbico de ar por minuto

milmetros quadrados

8. PRINCPIO DO MTODO
Este mtodo consiste em coleta e anlise de fibras, sendo:
8.1. Coleta
Trata-se de aspirar um determinado volume de ar com o auxlio
de uma bomba porttil, calibrada na vazo desejada, fazendo-o
passar atravs de filtro de membrana, onde as fibras so retidas.
8.2. Anlise
Tornar transparente o filtro de membrana com material coletado
sobre uma lmina de vidro, utilizando vapor de acetona, a fim de
permitir a passagem de luz do microscpio.
Adicionar triacetina para obter um ndice de refrao adequado
para a visibilidade das fibras.

15

NHO 04

Colocar uma lamnula para proteo, e aguardar 24 horas para o

manuseio.
As fibras depositadas sobre o filtro de membrana so medidas e
contadas, e o resultado da concentrao expresso em fibras por
centmetro cbico de ar, calculado dividindo-se o nmero de
fibras respirveis contadas sobre o filtro pelo volume de ar amostrado.
Nota: A preparao de amostras com acetona e triacetina
recomendvel para fibras com ndice de refrao maiores que
1,51.
9. INTERFERNCIAS
Qualquer outra partcula pode interferir na anlise, desde que se
encontre dentro do critrio de contagem.
A variabilidade do valor estimado para a concentrao de fibras no ar
ocorre em razo de vrios fatores e erros cometidos durante os
procedimentos de coleta e/ou durante os procedimentos analticos. Os erros
podem ser sistemticos ou aleatrios. A aplicao de procedimentos
padronizados e de um Programa de Controle da Qualidade Laboratorial a
maneira adequada de controle de algumas fontes de erros deste mtodo.
(Anexo F)
9.1. Erros sistemticos
9.1.1. Coleta
Ajuste da vazo da bomba
Escolha da estratgia de amostragem
Contaminao do filtro durante a amostragem e o transporte
9.1.2. Anlise
Medio da rea til do filtro
Regra de contagem
16

NHO 04

Preparao da amostra
Tendncia do analista
Ajuste do microscpio
Contaminao de amostras

9.2. Erros aleatrios

9.2.1. Coleta
Variao da vazo da bomba de amostragem durante a coleta
de amostras
Flutuaes da concentrao da poeira ambiental
9.2.2. Anlise
Variao da contagem entre analistas
Distribuio das fibras sobre o filtro

10. MATERIAIS UTILIZADOS PARA COLETA

10.1. Pinas planas, sem estrias nas bordas e sem propriedades

magnticas
10.2. Porta-filtro ou dispositivo de coleta. Conjunto de duas peas
contendo um prolongamento (tubo) feito de material metlico
aberto e de plstico branco ou de polipropileno saturado com
carvo, com 25 mm de dimetro, que abriga e sustenta o filtro
de membrana e seu suporte (Figura 1.)
10.3. Filtro de membrana constitudo por nitrato de celulose ou uma
mistura de steres de celulose com tamanho de poro de 0,8 m
ou 1,2 m, dimetro de 25 mm, com quadriculado impresso
(Figura 4).

17

NHO 04

10.4. Suporte de celulose de 25 mm de dimetro

10.5. Etiquetas adesivas ou caneta de retroprojetor para identificao
dos dispositivos.
10.6. Fita de teflon (para vedao)
10.7. Detergente neutro P.A. (para limpeza dos dispositivos de coleta)

11. APARELHAGEM PARA COLETA

11.1. Bomba de amostragem
Instrumento porttil que fornea uma vazo de ar de at 6 l/min,
provida de um sistema de controle de vazo constante que funciona com
bateria recarregvel e blindada, para utilizao em ambientes onde se
presume que existe risco de exploso, e um sistema automtico de controle
de fluxo que lhes permita regular, de maneira instantnea, as variaes no
fluxo do ar aspirado, com uma preciso de 5%

12. MATERIAIS UTILIZADOS PARA ANLISE

12.1. Lminas de 76 mm 25 mm e 1 mm de espessura
12.2. Lamnulas de 32 mm 24 mm e 0,17 mm de espessura
12.3. Seringa de vidro hipodrmica
12.4. Agulhas 3 7 mm (22/gauge)
12.5. Etanol P.A. (para limpeza dos microscpios)
12.6. Canetas de retroprojetor (para identificao nas lminas)
12.7. Papel do tipo fotogrfico para limpeza de lentes
12.8. Acetona P.A.

18

NHO 04

12.9. Triacetina P.A. (triacetato de glicerina)

12.10.Caixas de madeira para armazenar as lminas preparadas

13. APARELHAGEM PARA ANLISE

13.1. Vaporizador de acetona eltrico (Figura 9).
13.2. Microscpio tico binocular de contraste de fase
(Vide especificaes no Anexo C.)

14. DENSIDADE DE FIBRAS SOBRE O FILTRO

Nmero de fibras por milmetro quadrado de rea de filtro, D (nmero
de fibras/mm ) determinado pela seguinte frmula:
2

D=

nf/ng
(f/mm 2 )
Ag

onde
D = densidade de fibras sobre o filtro (f/mm)
nf = nmero de fibras contadas
ng = nmero observado de reas do gratculo
Ag = rea do gratculo (mm)
14.1. Densidade mnima de fibras
a densidade mnima admissvel de fibras sobre o filtro, que corresponde a 50 fibras/mm, aproximadamente 40 fibras/100 reas do gratculo
Walton-Beckett. Em situaes nas quais se espera uma concentrao muito
baixa, aceitvel uma preciso menor, sendo consideradas 20 fibras/mm,
ou seja, aproximadamente 16 fibras/100 reas do gratculo Walton-Beckett.
19

NHO 04

14.2. Densidade mxima de fibras

a densidade mxima admissvel de fibras sobre o filtro, que corresponde aceitao de at 650 fibras/mm , aproximadamente 5 fibras por
rea do gratculo.
2

Recomenda-se trabalhar com densidade entre 100 e 400 fibras/mm ,

para permitir maior reprodutibilidade dos resultados de contagem.

14.3. Clculo do tempo recomendado para coleta de

amostras, para o atendimento da faixa desejvel de
densidade de fibras sobre o filtro
A durao da coleta de uma amostra de poeira contendo fibras
pode ser determinada aplicando-se a seguinte frmula:

T = Auf

D
1

Cesp. Q

onde
T = tempo de durao da coleta para uma determinada amostra (min)
Auf = rea til do filtro (mm)
Ag = rea do gratculo (mm)
D = densidade de fibras desejada (f/mm)
Cesp. = concentrao mdia esperada por amostragem (f/cm)
Q = vazo (cm/min)

Notas:
O tempo de coleta de amostra inferior a 10 minutos no recomendvel.
A estimativa acima de cunho orientativo.

20

NHO 04

15. LIMPEZA DE MATERIAIS E EQUIPAMENTOS

15.1. Limpeza de materiais

15.1.1. As pinas metlicas devem ser limpas com lcool etlico e

leno de papel.
15.1.2. Os porta-filtros, lminas, seringas e agulhas devem ficar
de molho em gua com detergente neutro durante o tempo
necessrio para total limpeza. Enxaguar pelo menos 5 vezes
em gua corrente e 3 vezes em gua destilada. Secar os
porta-filtros em estufa, em temperatura de at 50 C.
15.1.3. As mangueiras plsticas usadas para coleta devem ficar de
molho em gua com detergente neutro durante o tempo
necessrio para total limpeza. Enxaguar pelo menos 5 vezes
em gua corrente e 3 vezes em gua destilada. Secar as
mangueiras utilizando uma bomba a vcuo ou em
temperatura ambiente.

15.2. Limpeza de equipamentos

15.2.1. Limpar a parte externa das bombas de amostragem ou do

vaporizador de acetona, utilizando uma flanela ou, quando
necessrio, um pano umedecido em gua e a seguir um
pano seco.
15.2.2. Limpar a parte externa do microscpio, sempre antes de
us-lo, com papel de limpeza.
15.2.3. Limpar os acessrios do microscpio, tais como oculares,
objetivas, telescpio, lminas etc., somente com papel
fotogrfico ou papel prprio para lentes.
15.2.4. Toda rea prxima ao microscpio deve ser mantida o
mais livre possvel de partculas.

21

NHO 04

16. PREPARAO DOS FILTROS PARA COLETA

16.1. Montagem dos filtros
16.1.1. Os filtros de membrana a serem utilizados na coleta de
amostras devem ser retirados cuidadosamente de sua
embalagem original, com o auxlio de uma pina, e
depositados sobre os corpos inferiores dos porta-filtros j
preparados com os suportes do filtro. Nesta etapa, deve-se
verificar possveis defeitos nos filtros e descart-los
(Figura 1).
16.1.2. Aps a montagem, fech-los utilizando um plugue ou
tampa azul na entrada dos filtros.

16.2. Seleo do filtro branco de lote

Escolher, ao acaso, 4% dos filtros da mesma embalagem (ou
embalagens). Prepar-los como descrito no item 19.
16.3. Codificao dos porta-filtros
Escolher um cdigo para cada embalagem original de 50 ou 100
filtros e identificar os porta-filtros com esse cdigo, de forma
crescente.
Estabelecer um cdigo para os filtros brancos de lote de cada
embalagem, para a verificao da contaminao dos lotes.
Exemplo:
Lote da embalagem A (filtros A-01 a A-49)
Lote da embalagem B (filtros B-01 a B-49)
So considerados aprovados os lotes com contaminao inferior
a 5 fibras em 100 campos, no havendo necessidade de correes
nos resultados da contagem.

22

NHO 04

23

NHO 04

16.4. Vedao do porta-filtro

16.4.1. Fechar os porta-filtros, j montados conforme as Figuras 2 e
3, vedando os encaixes com uma camada de fita de teflon
(porta-filtros de alumnio).

17. PROCEDIMENTO DE COLETA

17.1. Verificar se os porta-filtros j montados e codificados esto em
perfeito estado.
17.2. Verificar se os equipamentos e acessrios a serem usados em
campo so adequados.
17.3. Calibrar as bombas de amostragem para 1 l/min.
24

NHO 04

17.4. Montar o conjunto de amostragem de acordo com a estratgia de

amostragem escolhida (individual ou esttica). (Anexo E)
17.5. Retirar a tampa do porta-filtro ou plugue j instalado e ligar a
bomba de amostragem.
17.6. Anotar os dados em folhas de registro, tais como data, hora,
nmero do ponto, cdigo do filtro, cdigo da bomba,
observaes etc. (Anexo G)
17.7. O tempo da amostragem deve ser aquele determinado na
amostragem preliminar. (Anexo E)
17.8. Concludo o tempo da amostragem, desligar a bomba, fechar o
porta-filtro com plugue ou tampa vermelhos, para diferenciar
dos no utilizados (plugue azul).
17.9. Retirar o porta-filtro da mangueira cuidadosamente, invertendo-o
e armazenando-o em caixa de transporte apropriada, evitando
assim o desprendimento do material coletado sobre o filtro;
lev-lo para anlise.
Nota: Recomenda-se no reutilizar o dispositivo de coleta
durante um mesmo perodo de amostragem.
17.10. Finalizado o perodo de amostragem, verificar a vazo final das
bombas de amostragem (ver captulo 4).
Nota: Efetuar anlise das amostras que no foram invalidadas
durante a amostragem, ou seja, amostras de bombas que
apresentaram variao de vazo maior que 5% so consideradas
invlidas.

18. TRANSPORTE DE AMOSTRAS

18.1. Os filtros de membrana amostrados devem ser transportados, preferencialmente, nos prprios dispositivos de coleta, ou em outro
recipiente de vidro ou material no condutivo (vide Figura 4), em
um ambiente livre de poeira, com a ajuda de pinas apropriadas
de modo a evitar qualquer contaminao. Os dispositivos de
25

NHO 04

coleta ou vidros podem ser transportados em caixas ou maletas

apropriadas (vide Figura 5).
18.2. Os filtros de membrana devem ser transportados com a face
amostrada voltada para cima. Deve-se tomar todo o cuidado
possvel na identificao das amostras, para evitar a reutilizao
de um filtro amostrado por engano ou para no confundir
amostras.

19. PREPARAO DE AMOSTRAS PARA ANLISE

19.1. Colocar os porta-filtros amostrados em bancada limpa,
livre de contaminao de partculas.
26

NHO 04

19.2. Arrumar na capela um frasco contendo acetona e uma seringa

com agulha para aplicao da acetona no vaporizador. Colocar
no frasco somente a quantidade suficiente para ser usada no
preparo das amostras.
Cuidados:
a) O vapor de acetona altamente inflamvel e levemente txico.
b) Manusear a acetona, obrigatoriamente, em rea ventilada e/ou
com sistema de ventilao local exaustora (capela) adequado,
mantendo-a longe de qualquer fonte de ignio.
c) Manter o frasco com resduo de acetona dentro da capela ligada
at a total evaporao do lquido. Nunca retornar acetona P.A. ao
frasco original.
19.3. Despejar a triacetina em um frasco pequeno, em quantidade
suficiente para a preparao das amostras, e separar tambm
uma seringa com agulha para a adio da triacetina sobre a
lmina.
19.4. Separar a quantidade de lminas j limpas e secas a serem
utilizadas para a preparao.
Nota: As lminas de vidro devem ser pr-lavadas, deixando-as
de molho em gua contendo detergente neutro P.A., por
aproximadamente 4 horas, enxaguando-as 3 vezes em gua
corrente e 2 vezes em gua destilada. Secar as lminas em estufa
sob temperatura de at 50 C.
19.5. Separar uma caixa de lamnulas a serem utilizadas na preparao.
19.6. Conectar o vaporizador de acetona rede eltrica.
19.7. Colocar o filtro amostrado, com sua face quadriculada voltada
para cima, sobre a lmina limpa, com o auxlio de uma pina.
Nota: O filtro deve ser seguro pela pina, na borda ( 2mm ao seu redor).

27

NHO 04

19.8. Codificar a lmina conforme indicao no porta-filtro, utilizando

uma caneta de retroprojetor.

28

NHO 04

19.9. Inserir a lmina com o filtro no local indicado no vaporizador.

19.10. Injetar acetona no local indicado no vaporizador, movendo a

lmina vagarosamente atravs do fluxo de vapor at a total
transparncia do filtro. O filtro transparentado dentro de at 5
segundos. Evitar que gotas de acetona caiam sobre o filtro.
Nota: O vapor tem de ser forte o suficiente para o filtro no
enrolar ou distorcer.

29

NHO 04

19.11. Colocar sobre o filtro transparentado, com o auxlio de uma

seringa, 1 a 2 gotas de triacetina.
Notas:
a) O excesso de triacetina pode causar a migrao de fibras
para as bordas da lamnula e, eventualmente, pode desintegrar
o filtro.
b) A quantidade suficiente de triacetina no proporcionar
uma boa transparncia para as granulao deixadas pela
acetona, e o ndice de refrao no ser suficientemente bom
para uma perfeita visualizao das fibras mais finas ao
microscpio.
19.12. Colocar a lamnula sobre o filtro, para evitar o aparecimento de
bolhas de ar, mas no pression-la.

30

NHO 04

19.13. Colocar as lminas preparadas, na posio horizontal, em caixa

apropriada devidamente identificada, e aguardar 24 horas para que a ao
da triacetina se complete.
Notas:
a) Para acelerar o processo, aquece-se a lmina preparada por 15
minutos em estufa, a uma temperatura de 50 C.
b) Para a conservao da amostra, pincelar as bordas da lamnula com
esmalte incolor.

20. PROCEDIMENTO DE ANLISE

20.1. Limpar a bancada e o microscpio onde ser efetuada a
contagem.
20.2. Colocar uma amostra preparada no microscpio e ajust-lo.
(Anexo C)
20.3. Conferir o limite de deteco do microscpio e tambm do
analista por meio da lmina Test Slide. (Anexo D)
20.4. Substituir a objetiva de 40x pela objetiva de 10x, para examinar a
uniformidade do depsito de partculas, fazendo uma varredura
por toda a rea do filtro.
Nota: Descartar a amostra se a no-uniformidade for observada.
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20.5. Recolocar a objetiva de 40x e posicionar o campo de viso em

um dos extremos, superior ou inferior, da rea til do filtro.
20.6. Iniciar a contagem a partir deste ponto, seguindo uma linha
radial at o extremo oposto.

20.7. Deslocar o campo de viso para cima ou para baixo, continuando

a percorrer o filtro na direo contrria.
Notas:
a) Os campos de contagem devem ser escolhidos aleatoriamente,
mantendo-se uma distncia entre cada campo conforme a densidade
de fibras sobre o filtro, de forma a garantir que seja percorida a maior
rea til do filtro, obedecendo regra de contagem.
b) Cada plano deve ser focalizado e levemente desfocalizado (foco
fino), para a observao de possveis fibras finas que podem estar
encaixadas pouco abaixo ou pouco acima do plano do filtro.
c) So gastos aproximadamente 15 segundos para a obteno de uma
boa visualizao e contagem das fibras em cada campo.

20.8. Regra de contagem

A regra est em conformidade com a recomendao do Programa de
Harmonizao de Metodologia, promovido pela Organizao Mundial da
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Sade em janeiro de 1994. Baseia-se tambm no mtodo da Associao

Brasileira de Normas Tcnicas (ABNT), NBR 13158: Avaliao de agentes
qumicos no ar Coleta de fibras respirveis inorgnicas em suspenso no
ar e anlise por microscopia tica de contraste de fase Mtodo do Filtro
de Membrana.
20.8.1. Contar as fibras respirveis que cruzam os limites da rea
do gratculo da seguinte maneira:
20.8.1.1. Contar qualquer fibra respirvel que esteja
totalmente dentro dos limites da rea do
gratculo.

20.8.1.2. Contar como fibra respirvel qualquer

fibra que tenha uma parte do seu
comprimento dentro e outra parte fora dos
limites da rea do gratculo.

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20.8.1.3. Contar fibras respirveis que cruzam mais de

uma vez os limites da rea do gratculo se as
suas extremidades estiverem dentro da rea do
gratculo.

20.8.1.4. Contar como 1 fibra respirvel aquela que

apresenta a extremidade dividida e se
encontra, inteiramente, no interior do
gratculo; o dimetro deve ser medido na sua
parte no dividida.

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20.8.1.5. As fibras agrupadas devem ser contadas

individualmente se puderem ser identificadas
de forma isolada. No podendo ser
identificadas individualmente, as fibras
agrupadas devem ser contadas como 1 fibra,
se no conjunto obedecerem definio de
fibras respirveis.

20.8.1.6. Contar um nmero suficiente de campos para

atingir 100 fibras. Contar, no mnimo, 20
campos e, no mximo, 100.
20.8.1.7. Fibras agregadas a outras partculas devero
ser contadas como fibras independentemente
do dimetro da partcula agregada, desde que
apresentem os parmetros da definio de
fibra respirvel.

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20.8.1.8. Desprezar o campo que tiver mais de 1/8 de

sua rea ocupada por aglomerados de
partculas. Selecionar outro campo e no
considerar o campo desprezado no total de
campos contados.

Nota: Depsitos no aleatrios de poeira

sobre o filtro levam a erros grosseiros que
no podem ser estimados. Devem ser,
ento, contados, no mnimo, 20 campos,
para assegurar que as divergncias no
depsito da poeira no interfiram na
estimativa da concentrao ambiental.
20.9. Anotar o valor encontrado no formulrio de contagens. (Anexo I)
21. CLCULO DA CONCENTRAO PARA CADA AMOSTRA
21.1. Para o clculo da concentrao de fibras para cada amostra, aplicar a seguinte frmula:

C=

nf 1 1 Auf

(f/cm 3 )
ng Q t Ag

onde

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C = concentrao de fibras (f/cm)

nf = nmero de fibras contadas
ng = nmero observado de reas do gratculo
Q = vazo de ar utilizada na calibrao (l/min) t = tempo total da
amostragem (min)
Auf = rea til do filtro (mm)
Ag = rea do gratculo (mm)
21.2. Esta frmula pode ser simplificada e expressa da seguinte
maneira:

C = D

Auf
( f / cm 3 )
V

onde
D = densidade de fibras (f/mm)
Auf = rea til do filtro (mm)
V = volume de ar (cm)

22. EXPRESSO DOS RESULTADOS

22.1. Os valores de concentrao em fibras por centmetros cbicos de
ar devem ser apresentados com 1 algarismo decimal.
23. NOTAS DE PROCEDIMENTO
23.1. Todos os resultados, tanto os de contagem das fibras como os de
concentrao de fibras por centmetros cbicos de ar, devem ser
acompanhados das observaes de amostragem e anlise que se
fizerem necessrias para a perfeita interpretao dos dados
fornecidos.
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23.2. As amostras que apresentarem material desprendido do

filtro devem ser invalidadas para efeito da avaliao da
exposio ocupacional. Os resultados dessas amostras
podem servir para uma estimativa da concentrao de
fibras no ar ou clculo de um tempo de amostragem mais
adequado para alcanar a faixa recomendvel de densidade
de fibras sobre o filtro.
23.3. As amostras que apresentarem material desprendido do filtro
devem ser acompanhadas das seguintes observaes, em cada
caso:

material despendido do filtro

perda de material na abertura do porta-filtro
perda de material durante a preparao para anlise
amostra aderida ao porta-filtro
23.4. Os valores da concentrao de fibras por centmetro cbico de ar
das amostras invalidadas devero ser fornecidos com um nmero
inteiro, sem algarismos decimais, para concentraes superiores
a 1 f/cm , e com um algarismo decimal para concentraes
inferiores a 1 f/cm.
3

24. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

24.1. ASBESTOS INTERNATIONAL ASSOCIATION. Reference

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filter method). AIA, 1982. Health and Safety Publication.
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24.3. BECKETT, S. T. The effects of sampling practice on the

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25. REPRESENTAO ESQUEMTICA DOS PROCEDIMENTOS
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