FACULDADE DE ENGENHARIA QUMICA DEPARTAMENTO DE PROCESSOS BIOTECNOLGICOS

DISCIPLINA: EQ883 A - Bioengenharia II - 2010 5 Lista de exerccios

1. Projetar um reator de capacidade total de 1000 L, para operar em processo fermentativo (clulas aerbicas) em batelada, com agitao mecnica (clulas com alta resistncia ao cisalhamento) e de baixa viscosidade (durante todo o processo). Especificar as dimenses (dimetro e altura) deste reator, dimenses do impelidor (Rushton) e as chicanas. Qual o volume efetivo de processo deste reator? Qual seria o sistema de controle de temperatura a ser escolhido (interno, com serpentinas ou externo, do tipo camisa)? 2. Voc deve sugerir um tipo de reator para um processo fermentativo operando em modo batelada. Alm do tipo de reator, sugira tambm a melhor forma de agitao, aerao e disposio das chicanas. Justifique a sua resposta. As principais caractersticas deste processo so: a. Processo inicia-se em baixa viscosidade; b. Porm, como o produto de interesse um polissacardeo extracelular e medida que ocorre o crescimento microbiano ocorre elevao da viscosidade do caldo de fermentao, atingindo valores considerados de viscosidade mdia. 3. Quais as principais vantagens de se trabalhar com um reator do tipo de membranas? Justifique a sua resposta. 4. Quais as principais desvantagens em se trabalhar em um processo com clulas aerbicas, que produzem elevadas quantidades de CO2 e que sejam imobilizadas em um reator de leito fixo? Qual seria o reator mais apropriado para se trabalhar nestas condies? 5. Exemplifique uma aplicao prtica para a utilizao de um biorreator do tipo batelada alimentada. 6. Uma enzima michaeliana utilizada em um processo operando em modo batelada. Os parmetros cinticos desta enzima so: Km =10 mmol/L, Vmax = 50 mmol/L. Considere tambm que a reao global do tipo S P. Assuma que no h desativao e nem inibio enzimtica. a. Obter o balano de massa para este reator. b. Para So = 1 mol/L, obter o perfil da concentrao de substrato e da converso em funo do tempo. Calcular a produtividade de formao de produto para 90% de converso. c. Para So = 0,1 mmol/L, obter o perfil da concentrao de substrato e da converso em funo do tempo. Calcular a produtividade de formao de produto para 90% de converso. 1

d. Qual a principal diferena entre as condies estabelecidas no item b e c. Em termos operacionais e de produtividade (mol/L.s), qual a melhor condio para operar o reator batelada? e. E se So for 11 mmol/L, apenas explique como voc obteria o perfil da concentrao de substrato e da converso em funo do tempo. OBSERVAO: Para o seu aprendizado e para que voc possa utilizar ferramentas teis em sua vida de engenheiro, interessante que este exerccio seja resolvido utilizando a planilha EXCELL ou ferramenta equivalente. RESP.: b)Produtividade = 50 mmol/L.h; c) Produtividade = 0,18 mmol/L.h 7. Uma linhagem de Escherichia coli foi geneticamente modificada para produzir uma protena humana. Um biorreator de coluna de bolhas (Vr = 100 L) operando em modo batelada foi utilizado para a obteno desta determinada protena. A batelada iniciou-se com a inoculao de 12 g de clulas, com concentrao inicial de glicose de 10 g/L. A taxa mxima de crescimento da cultura de 0,9 h-1. Considere o rendimento da biomassa a partir do consumo de glicose como 0,575gg-1. Considerar que a protena est associada ao metabolismo energtico e que o consumo de substrato para atividades de manuteno no significativo. a. Obter o balano de massa para o reator operando em modo batelada para a biomassa e para o substrato. b. Estimar o tempo para que se alcance a fase estacionria. c. Qual ser a concentrao final de clulas se a fermentao terminada aps 70% de consumo de substrato? RESP.: b) 4,3h; c) 3,9h. 8. Clulas do tipo Nicotiana tabacum so cultivadas em condies de elevada densidade celular para a produo de um polissacardeo. Para tal, um reator do tipo tanque agitado utilizado, com o volume inicial de 100 L. A taxa especfica mxima de crescimento celular 0,18d-1 e o rendimento de biomassa a partir do substrato 0,5 gg-1. A concentrao de substrato limitante no meio inicialmente de 3% (m/v). O reator inoculado com 150g de clulas e opera em modo batelada at que a concentrao de substrato seja virtualmente esgotada. Nestas condies, inicia-se a alimentao de meio de cultura com a mesma concentrao de substrato que a operao em batelada, com uma vazo de 4 Ld-1. Considere que a formao de produto est associada ao metabolismo energtico e que o consumo de substrato para atividades de manuteno desprezvel. a. Estimar o tempo de processo operando em batelada e a concentrao de biomassa antes de se iniciar a operao em modo batelada alimentada. b. A operao em batelada alimentada conduzida durante 40 dias. Qual a massa final de clulas no reator? c. O fermentador est disponvel durante 275 dias por ano com um tempo de lavagem e set up de 24 h (entre o trmino de um processo e incio de outro). Qual a capacidade anual de produo de biomassa desta unidade ? RESP.: a) 13,3 d e 16,4 g/L; b) 4,04 kg; c) 19,45 kg.

9. O crescimento da levedura Candida utilis em um quimiostato utilizando glicose como fonte de carbono inibido por acetato de sdio, sendo bem representado por:

m S
KS + S + I KS KI

onde [S] a concentrao de glicose (g/l) e [I] a concentrao de ons acetato (g/l). Para este sistema: Ks = 1 g/l; Se = 10 g/l; KI = 0,01 g/l; m = 0,5 h-1; YXS = 0,1 g clulas/g substrato

Considere que a alimentao estril e a taxa de morte celular desprezvel se comparada taxa de crescimento celular. Considere que o produto est associado ao metabolismo energtico e que o consumo de substrato para as atividades de manuteno desprezvel. a. Realize um balano de massa para a biomassa e outro para o substrato. b. Determine as concentraes efluentes de substrato e de clulas, em funo da taxa de diluio, na ausncia e na presena de 0,05 g/l de inibidor. c. Determine a produtividade celular, em funo da taxa de diluio, para o caso de inibio.

10. Dois reatores CSTR (quimiostatos) esto operando em srie para a produo fermentativa de um metablito secundrio. O volume de cada reator 0,5 m3 e a vazo volumtrica de alimentao 50 L.h-1. No primeiro reator ocorre o crescimento miceliar e no segundo reator ocorre a produo do produto de interesse (metablito secundrio). A concentrao de substrato na alimentao 10 g L-1. Os parmetros cinticos e de rendimento so: YXS = 0,5 kg kg-1 YPS = 0,85 kg kg-1 ms = 0,025 kg kg-1 h-1 max = 0,12 h-1 Ks = 1,0 kg.m3 qp = 0,16 kg kg-1 h-1

Assumindo que a sntese de produto desprezvel no primeiro reator e que o crescimento desprezvel no segundo reator, determine: a) Concentraes de clula e substrato que entram no segundo reator. b) A converso total de substrato. c) A concentrao final de produto. RESP.: a) X1 =2,2 kg.m-3; S1 = 5 kg. .m-3; b) 97%; c) 3,52 kg/m3.

11. Uma nova linhagem de levedura est sendo estudada para a produo de biomassa. Os dados a seguir foram obtidos utilizando um quimiostato. A fonte de Carbono foi utilizada como substrato limitante em concentrao de 800 mg/L. Utilizou-se excesso de oxignio. As condies de processo foram pH 5,5 e temperatura de 35oC. Utilizando os dados da tabela abaixo, calcular max, KS, o rendimento terico de biomassa em finco do substrato e ms. Assuma = { maxS/(Ks+S)-kd}. Considere kd=0,038h-1. Taxa de diluio (h-1) Concnetrao do Substrato Concentrao de clulas limitante (mg/L) (mg/L) 0.1 16.7 366 0.2 33.5 407 0.3 59.4 408 0.4 101 404 0.5 169 371 0.6 298 299 0.7 702 50 Resp.: ms = 0.06 h-1; YXS (terico) = 0.633 g X/g S; max = 0.8 h-1; Ks= 80 mg/L. 12. Considere um reator operando em modo batelada alimentada. Mostre que a concentrao de produto dada por: . Considere que o produto esteja associado energia do metabolismo, mais especificamente para as atividades de crescimento.