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DEPARTAMENTO DE FISIOLOGIA
opioidrgica
Ribeiro Preto
2012
1
UNIVERSIDADE DE SO PAULO
DEPARTAMENTO DE FISIOLOGIA
opioidrgica
Ribeiro Preto
2012
2
AUTORIZO A REPRODUO E DIVULGAO TOTAL OU PARCIAL DESTE TRABALHO, POR
QUALQUER MEIO CONVENCIONAL OU ELETRNICO, PARA FINS DE ESTUDO E PESQUISA, DESDE
QUE CITADA A FONTE.
FICHA CATALOGRFICA
90 p.
3
Banca Examinadora
Julgamento: Assinatura .
Julgamento: Assinatura .
Julgamento: Assinatura .
4
Agradecimentos
Aos meus pais devo a vida e por isso agradecer-lhes em primeira instncia se faz
oportuno. No s por isso, entretanto... O gosto e o suporte na busca pelo conhecimento
me foram incentivados e oferecidos durante toda minha trajetria. Portanto, Lucia Costa
Zugaib e Marcio Alves Cavalcanti so os principais responsveis por essa conquista.
Muito obrigado!
Minha irm Maria Zugaib Cavalcanti sempre ofereceu muito amor e admirao,
que me renderam vontade e fora para atingir meus objetivos. Minha filha Luiza, que
muito amo e me esforo para que conquistas como essa possam faz-la se orgulhar de
mim. .
minha av Edna, minha tia Ftima, minha tia Ceclia e meu tio Luciano, que
representaram o porto seguro para poder seguir o caminho que escolhi.
5
No menos importante agradeo a galera do baba de quinta-feira. Destaco o
brother Kpta pela afinidade de idias e pelos momentos de lazer proporcionados. Porm,
seria tudo mais difcil se no houvesse a fora de todos para formar essa equipe bi-
campe de futsal no CEFER.
Por fim, agradeo todos aqueles que por algum descuido no foram citados, mas
que tiveram sua participao nesses dois anos de mestrado.
6
1. Resumo .......................................................................................................... 8
2. Abstract ........................................................................................................ 10
3. Introduo .................................................................................................... 12
4. Objetivo ........................................................................................................ 22
6. Resultados ................................................................................................... 33
7. Discusso ..................................................................................................... 61
8. Concluses................................................................................................... 75
7
1. Resumo
vocalizaes, mas no pelo teste da formalina. Esse efeito foi bloqueado pela
administrao prvia de atropina (0,7 nmol /0,2 l) e de naloxona (2,7 nmol /0,2
carbacol pode ter sido mediada pelo sistema de opiides endgenos, tendo em
8
vista o bloqueio do seu efeito com naloxona. Alm disso, a estimulao opiide
9
2. Abstract
Pain is a multidimensional phenomenon which usually triggers
interpreted as an adaptive mechanism to defend the integrity of the body given its
species. Thus, the anterior cingulated cortex (ACC) has been widely described in
algesimetric tests of vocalization and formalin in guinea pigs to evaluate the time
(bicuculline and muscimol) and cholinergic (carbachol and atropine) beyond the
exacerbated the nociceptive behavior in both tests but different doses of muscimol
(0,5; 1 e 2 nmol / 0,2 l) did not change the responses. The effect of bicuculline
the ACC.
the vocalizations, but not by the formalin test. This effect was blocked by prior
both tests. We conclude that inhibition of GABAergic tone in the ACC exacerbates
10
have been mediated by endogenous opioid system in order blocking its effect with
11
3. Introduo
Fitzgerald, 2009). A definio mais utilizada atualmente diz que a dor uma
12
(Walters, 1994). Evidncias das propriedades funcionais, de mecanismos
regio posterior (Vogt, 2004; Vogt, 2009). Alm disso, possui um denso plexo
crtex cingulado anterior rostral e/ou caudal. Essa denominao aceita que o
sugerem que a regio referida como crtex cingulado anterior caudal possui
modulao de processos lgicos (Pastoriza et al, 1995; Fuchs et al, 1996; Lee et
memria nociceptiva, que surge como uma reao secundria dor. Um trabalho
Fields, 2004).
15
Registros autorradiogrficos e de hibridizao in situ demonstram a
diferentes nesse substrato neural (Bozkurt et al, 2005; Xie et al, 2009). Nesse
2005).
uma semana, com o animal sendo submetido a choques nocivos na pata, dentro
17
CCA (Farr et al, 2000). Provavelmente, estes sistemas de transmisso interagem
colinrgica.
da dor, tambm tem sido extensivamente investigado (Millan, 2002). Num nvel
CCA de ratos por meio de microdilise induz uma reduo nos nveis
antinocicepo.
autores inferem que esse efeito antinociceptivo tenha sido promovido por uma
do CCA. Adicionalmente, ratos com neuropatia, por ligadura do nervo que emerge
lugar, induzida por estimulao nociva foi reduzida, o que sugere a participao
resposta eliciada por estimulao nociva (LaGraize et al, 2006). Embora esses
estmulo.
19
contexto, a vocalizao tem sido apresentada na literatura como uma resposta
Lico, 1977; Harte et al, 2004). Alm disso, redes neurais de processamento da
central (Tjlsen et al, 1992). Esse mtodo no avalia o limiar de dor, mas permite
pata.
21
4. Objetivo
Verificar o envolvimento dos sistemas de neurotransmisso
da formalina.
22
5. Materiais e mtodos
5.1. Animais
No presente estudo, utilizamos cobaias macho (Cavia porcellus), pesando
23
estereotxicos utilizados para atingir o CCA foram 1,2 mm anteriormente ao
Banamine (Schering Plought, flunixina meglumina, 2,5 mg/Kg, 10 mg/ml, 0,2 ml)
preenchidas com gua destilada com uma pequena bolha separando os dois
para evitar refluxo. Aps esse perodo, a agulha foi retirada e o animal submetido
USA);
24
- Bicuculina antagonista especfico de receptores GABAA (Sigma St. Louis -
USA);
USA);
Louis - USA);
- Formalina.
0,9%), que foi usada tambm para controle do veculo das drogas microinjetadas.
- A formalina tambm foi diluda a 5% com soluo salina (NaCl 0,9%), a partir de
durao do pulso de 0,5 ms. Inicialmente a intensidade do estmulo foi de 0,5 volt
26
picos do registro grfico proporcional intensidade de vocalizao do animal.
Dessa forma, a mdia dos picos de cada resposta representa um ndice confivel
da magnitude de vocalizao.
do inicio do teste, para habituao numa caixa de acrlico (25 x 17 x 25 cm), onde
microinjeo das drogas testadas ou salina (NaCl 0,9%) no CCA. Um minuto aps
de vocalizao.
de vocalizao.
vocalizao.
vocalizao.
vocalizao.
28
5.7.2. Experimento II: Efeito do agonista preferencial de receptores
GABAa, muscimol e do antagonista bicuculina, microinjetados no
CCA sobre o teste da formalina
Grupo 1: Microinjees de soluo salina a 0,9 % (0,2 l) previamente ao teste
da formalina.
formalina.
formalina.
vocalizao.
vocalizao.
formalina.
formalina.
vocalizao.
formalina.
5.8. HISTOLOGIA
Aps a realizao do protocolo experimental, os animais foram anestesiados
na soluo de sacarose por 2 dias. Aps este tempo, foi realizado cortes de 40
Atlas de Rssner (1965), para cobaias. Foram considerados para anlise dos
bregma).
31
5.9. ANLISE DOS RESULTADOS
frmula:
dividido em janelas de cinco minutos. Para anlise desses dados foram feitas as
mdias dos grupos em cada janela de tempo e seus respectivos erros padro
A anlise estatstica dos dados foi realizada por meio de uma anlise de
32
6. Resultados
6.1. Experimento I
nociceptiva de vocalizao
nmol / 0,2 l) produziu um aumento significativo (F(280, 35) = 3,894; p < 0,001) na
33
em relao linha de base (Figura 2). Tambm no foi observada diferena
estudo.
34
Figura 1 Decurso temporal da mdia ( erro padro da mdia) do ndice de vocalizao
no perodo controle (LB) e aps os tratamentos com salina 0,9 % (Sal; n = 7), bicuculina
n=8) no CCA. As barras verticais representam o EPM. * representa p < 0,05 quando
35
Figura 2 - Decurso temporal da mdia ( erro padro da mdia) do ndice de vocalizao
no perodo controle (LB) e aps os tratamentos com salina 0,9 % (Sal; n = 7), muscimol
(Musc 0,5 nmol; n=8), muscimol (Musc 1 nmol; n=8) e muscimol (Musc 2 nmol; n=6) no
36
Figura 3 Representao esquemtica de seces do CCA de cobaias. Os crculos
(1 nmol); III muscimol (1 nmol) seguido de bicuculina (1nmol); IV muscimol (0,5 nmol),
37
Figura 4 Registro poligrfico da amplitude (mm) de vocalizao de um animal
representativo de cada grupo aps a microinjees no CCA de cobaias. (A) salina, (B)
38
Figura 5 - Registro poligrfico da amplitude (mm) de vocalizao de um animal
representativo de cada grupo aps a microinjees no CCA de cobaias. (A) salina, (B)
muscimol (0,5 nmol), (C) muscimol (1 nmol) e (D) muscimol (2 nmol). As barras
grupo e do stio de uma microinjeo localizada no crtex cingulado anterior (CCA). ACB
lateral.
40
6.2. Experimento II
lambidas e/ou sacudidas da pata que recebeu a injeo de formalina (Figura 7).
minutos, dos animais que foram tratados com bicuculina, quando comparados ao
promovido pelo tratamento com bicuculina no CCA tambm foi bloqueado neste
(Figura 7).
41
A figura 8 mostra uma representao esquemtica do CCA, com os stios das
42
Figura 7 - Decurso temporal da mdia ( erro padro da mdia) do nmero de lambidas e
tratados com salina 0,9 % (Sal; n = 5), bicuculina (Bic 1nmol; n=8); muscimol (Bic 1nmol;
CCA. As barras verticais representam o EPM. * representa p < 0,05 quando comparado
43
Figura 8 - Representao esquemtica de seces do CCA de cobaias. Os crculos
44
6.3. Experimento III
- Efeito do agonista de receptores colinrgicos, carbacol e do
(2,7 nmol / 0,2 l), produziu antinocicepo avaliada pela reduo da amplitude
atropina (0,7 nmol / 0,2 l), no CCA, previamente ao tratamento com carbacol foi
(Figura 9). Alm disso, a microinjeo de atropina, per se, tambm no alterou a
45
Como forma de verificar se o efeito antinociceptivo promovido pela
46
Figura 9 - Decurso temporal da mdia ( erro padro da mdia) do ndice de vocalizao
no perodo controle (LB) e aps os tratamentos com salina 0,9 % (Sal; n = 7), carbacol
(CCh 2,7 nmol; n=8), atropina (Atr 0,7 nmol; n=7) e atropina 0,7 nmol previamente a 2,7
nmol de carbacol (Atr + CCh; n=9) no CCA. As barras verticais representam o EPM. *
representa p < 0,05 quando comparado com os grupos salina, carbacol, atropina e atropina
+ carbacol.
47
Figura 10 - Decurso temporal da mdia ( erro padro da mdia) do ndice de vocalizao
no perodo controle (LB) e aps os tratamentos com salina 0,9 % (Sal; n = 7), carbacol
(CCh 2,7 nmol; n=8) e naloxona 2,7 nmol previamente a 2,7 nmol de carbacol (Nal + CCh;
n=8) no CCA. As barras verticais representam o EPM. * representa p < 0,05 quando
48
Figura 11 - Representao esquemtica de seces do CCA de cobaias. Os crculos
(0,7 nmol); III carbacol (2,7 nmol); IV atropina (0,7 nmol) seguido de carbacol (2,7
nmol); V naloxona (2,7 nmol) seguido de carbacol (2,7 nmol). AP = plano ntero
49
Figura 12 - Registro poligrfico da amplitude (mm) de vocalizao de um animal
representativo de cada grupo aps a microinjees no CCA de cobaias. (A) salina, (B)
carbacol (2,7 nmol), (C) atropina (0,7 nmol), (D) atropina (0,7 nmol) previamente ao
carbacol (2,7 nmol), (E) naloxona (2,7 nmol) previamente ao carbacol (2,7 nmol). As
50
6.4. Experimento IV
- Efeito do agonista de receptores colinrgicos, carbacol e do
formalina
microinjeo de carbacol (2,7 nmol / 0,2 l) quanto de atropina (0,7 nmol / 0,2 l)
51
Figura 13 - Decurso temporal da mdia ( erro padro da mdia) do nmero de lambidas e
tratados com salina 0,9 % (Sal; n = 5), carbacol (CCh 2,7 nmol; n=8); atropina (Atr 0,7
52
Figura 14 - Representao esquemtica de seces do CCA de cobaias. Os crculos
(2,7 nmol); III atropina (0,7 nmol). AP = plano ntero posterior; CC = corpo caloso; V =
para cobaias.
53
6.5. Experimento V
- Efeito do agonista preferencial de receptores opiides, morfina e
nociceptiva de vocalizao
medidas repetidas, que o tratamento com morfina (4,4 nmol / 0,2l) no CCA das
Duncan evidenciou que este efeito ocorreu durante todo o decurso de tempo do
stios das microinjees dos grupos citados nessa etapa experimental. A figura 17
54
Figura 15 - Decurso temporal da mdia ( erro padro da mdia) do ndice de vocalizao
no perodo controle (LB) e aps os tratamentos com salina 0,9 % (Sal; n = 7), morfina
(Mor 4,4 nmol; n=9) e naloxona 2,7 nmol previamente a 4,4 nmol de morfina (Nal + Mor;
n=8) no CCA. As barras verticais representam o EPM. * representa p < 0,05 quando
55
Figura 16 - Representao esquemtica de seces do CCA de cobaias. Os crculos
(4,4 nmol); III naloxona (2,7 nmol) seguido de morfina (4,4 nmol). AP = plano ntero
56
Figura 17 - Registro poligrfico da amplitude (mm) de vocalizao de um animal
representativo de cada grupo aps a microinjees no CCA de cobaias. (A) salina, (B)
morfina (4,4 nmol), (C) naloxona (2,7 nmol) previamente morfina (4,4 nmol). As barras
57
6.6. Experimento VI
figura 18, os animais que receberam esse tratamento apresentaram uma reduo
que foi aplicada a formalina, utilizando o teste estatstico two way ANOVA para
58
Figura 18 - Decurso temporal da mdia ( erro padro da mdia) do nmero de lambidas e
tratados com salina 0,9 % (Sal; n = 5), morfina (Mor 4,4 nmol; n=8) e naloxona 2,7 nmol
previamente a 4,4 nmol de morfina (Nal + Mor; n=8) no CCA. As barras verticais
representam o EPM. * representa p < 0,05 quando comparado com os grupos salina,
59
Figura 19 - Representao esquemtica de seces do CCA de cobaias. Os crculos
(4,4 nmol); III naloxona (2,7 nmol) seguido de morfina (4,4 nmol). AP = plano ntero
60
7. Discusso
Nossos dados corroboram a idia de que o CCA influencia respostas
perifrico. Essa observao nos permite interpretar que esse tratamento tenha
61
pronociceptivo foi evidenciado pelo aumento na amplitude das vocalizaes
induzidas por um estmulo nocivo perifrico, bem como pelo nmero de lambidas
nesse substrato (Higashi et al, 1991; Wang et al, 2005). O efeito pronociceptivo da
animal reconhecer o estmulo nocivo (Wang et al, 2005; LaGraize e Fuchs, 2007).
por bicuculina, nos dois testes algesimtricos, foi bloqueada pela administrao
GABA, anulou o efeito promovido pela bicuculina, mas no foi capaz de impedir
(Tjlsen et al, 1992). interessante salientar que nesse teste existem algumas
64
apresentam duas fases bem definidas, relacionadas com diferentes aspectos da
Oliveira e Hoffmann, 1995; Guimares e Prado, 1999; Harte et al, 2011). Ratos
CCA tambm pode ter sido dependente de sua interao com o sistema de
transmisso opioidrgico.
modelos expostos.
Essa caracterstica temporal possui uma caracterstica mais prxima com uma
formalina.
67
A microinjeo de naloxona no CCA, previamente ao tratamento com
Gallagher et al, 2008). Ainda no que se refere possvel interao entre esses
sinpticas do CCA, bem como 60% dos seus neurnios opiides, nas camadas
teste de vocalizao foi mediada por opiides. Com base na literatura podemos
com morfina por via sistmica (Hao et al, 2005). Ainda no que se refere aos
que os permite modular aferencias, eferncias e circuitos locais (Vogt et al, 1995).
sendo mediados pela ativao dos receptores opiides (LaGraize et al, 2006).
69
pela aplicao prvia de naloxona. Embora, o tratamento com carbacol no tenha
hiptese acerca da interao entre esses sistemas. Conforme exibido nas figuras
bem como trabalhos com estimulao eltrica e leso do CCA, mostraram que
71
alta intensidade e/ou memrias negativas (Vogt, 2009). Nesse mbito, respostas
(LeBars, 2001).
Borscz, 1995). Nosso modelo de vocalizao deve ser compreendido como uma
72
predador e, quando emitido, pode ativar o sistema de analgesia endgena (Leite-
Panissi et al, 2000). Desse modo o CCA parece tambm influenciar a estratgia
funcionamento dessa estrutura numa situao real requer a correlao dos dados
73
seu agonista, no foi capaz de alterar as reaes comportamentais secundrias
induzidos pela formalina. Sugerimos que esse efeito tenha sido mediado pela
investigados, sugerindo que sua ativao seja importante para mediar analgesia
74
8. Concluses
Evidenciamos que os padres de comportamento se diferenciaram em
evidenciando que esta antinocicepo pode ter sido mediada pelo sistema de
experimentais.
75
9. Referncias Bibliogrficas
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81
10. Apndice
10.1 Tabelas
Cobaia LB 2 5 15 30 45 60 75
1 0 0 0,5 0,6 0,6 -0,3 0 0,5
2 0 0 0 0,1 -0,1 -0,3 0 0
3 0 -0,3 -0,4 -0,3 -0,7 -0,4 -0,3 -0,4
4 0 0 0,6 0,5 -0,5 0,1 0 0,6
5 0 0 0,1 0,1 0,1 0,1 0 0,1
6 0 0 0 0 0,1 -0,1 0 0
7 0 -0,1 0 0 0 -0,3 -0,1 0
Mdia 0,00 -0,06 0,11 0,14 -0,07 -0,17 -0,06 0,11
DPM 0,00 0,11 0,34 0,31 0,43 0,21 0,11 0,34
EPM 0,00 0,04 0,13 0,12 0,16 0,08 0,04 0,13
Cobaia LB 2 5 15 30 45 60 75
1 0,00 0,56 0,81 1,20 0,77 0,35 -0,15 -0,23
2 0,00 2,18 1,80 2,58 0,71 0,96 -0,56 -0,92
3 0,00 0,72 0,06 1,07 0,85 0,55 0,55 0,42
4 0,00 3,20 0,89 3,96 1,28 2,78 0,94 0,83
5 0,00 0,66 1,12 0,96 0,82 0,03 -0,50 -0,42
6 0,00 1,35 1,35 0,69 1,69 2,14 2,14 2,14
7 0,00 0,21 0,08 -0,26 -0,63 -1,00 -1,00 -1
8 0,00 3,37 2,21 4,14 5,43 3,85 2,97 0,34
Mdia 0,00 1,53 1,04 1,79 1,37 1,21 0,55 0,15
DPM 0 1,23 0,75 1,59 1,77 1,59 1,40 1,03
EPM 0 0,43 0,26 0,56 0,62 0,56 0,49 0,36
82
Tabela III. Valores individuais do ndice de vocalizao durante a aplicao do
estmulo nocivo perifrico, nos diferentes tempos (minutos) aps a microinjeo de
muscimol (1 nmol / 0,2 l), seguido de bicuculina (1 nmol / 0,2 l) no CCA.
Cobaia LB 2 5 15 30 45 60 75
1 0 -0,04 -0,3 -0,07 0,38 0,23 0,64 0,04
2 0 -0,13 0,1 -0,26 -0,27 -0,22 0,14 0,11
3 0 0,21 -0,21 0,02 0,33 -0,21 0,046 -0,3
4 0 0,06 0,01 0,07 -0,12 -0,13 -0,13 0,14
5 0 -0,12 0,06 -0,13 -0,11 -0,11 -0,1 0,22
6 0 0,008 -0,14 0,2 0,04 -0,14 -0,03 0,01
7 0 0,25 0,1 0,28 0,31 0,31 0,08 0,32
8 0 -0,01 -0,003 -0,13 0,07 0,45 0,03 -0,003
Mdia 0 0,02 -0,047 -0,002 0,078 0,0225 0,084 0,067
DPM 0 0,13 0,150 0,181 0,240 0,264 0,241 0,184
EPM 0 0,04 0,053 0,06 0,085 0,093 0,085 0,065
Cobaia LB 2 5 15 30 45 60 75
1 0,00 0,00 -0,88 -1,00 -1,00 -1,00 -1 -0,01
2 0,00 -0,26 -0,62 -0,94 -1,00 -0,84 -0,96 0,03
3 0,00 0,02 -0,06 -0,72 -1,00 -0,72 -0,79 0
4 0,00 -0,36 -0,70 -0,02 -0,04 0,02 0,10 0,24
5 0,00 0,16 0,07 0,09 0,45 0,09 0,06 -0,11
6 0,00 -0,02 -0,24 -0,12 -0,13 -0,29 -0,96 -0,23
7 0,00 1,14 1,14 1,27 0,57 1,23 0,49 0,035
8 0,00 0,00 0,00 0,01 0,00 0,00 -0,22 -0,42
Mdia 0,0 0,1 -0,2 -0,2 -0,3 -0,2 -0,4 -0,1
DPM 0,0 0,5 0,6 0,7 0,7 0,7 0,6 0,2
EPM 0,0 0,2 0,2 0,3 0,2 0,3 0,2 0,1
83
Tabela V. Valores individuais do ndice de vocalizao durante a aplicao do
estmulo nocivo perifrico, nos diferentes tempos (minutos) aps a microinjeo de
muscimol (1 nmol / 0,2 l) no CCA.
Animais LB 2 5 15 30 45 60 75
1 0 0,10 -0,08 -0,35 -0,13 -0,28 -0,81 -1,00
2 0 0,13 0,65 -0,66 -0,58 -0,21 -0,33 0,00
3 0 0,04 -0,57 -0,84 -1,00 -0,62 -0,75 0,25
4 0 -0,09 0,29 0,50 -0,35 -0,03 -0,35 -0,03
5 0 -0,57 -0,18 -0,52 0,06 -0,004 -0,13 -0,28
6 0 -0,71 -0,72 -0,22 0,16 -0,11 -0,39 -0,2
7 0 -0,22 -0,43 -0,27 -0,34 -0,5 -0,62 -0,55
8 0 0,4 0,27 0,19 0,1 0,28 0,1 0,05
Mdia 0,0 -0,1 -0,1 -0,3 -0,3 -0,2 -0,4 -0,2
DPM 0,0 0,4 0,5 0,4 0,4 0,3 0,3 0,2
EPM 0,0 0,1 0,2 0,2 0,1 0,1 0,1 0,1
Cobaia LB 2 5 15 30 45 60 75
1 0 -0,15 -0,41 0,11 -0,25 -0,13 -1 -0,3
2 0 -0,06 -0,04 -0,007 -0,41 -0,04 -0,51 -0,19
3 0 -1 0,21 0,33 -0,03 0,27 -0,17 0,1
4 0 0,35 0,25 0,21 0,21 -0,8 -0,16 -0,75
5 0 -0,1 -0,2 -1 -1 -1 -1 -1
6 0 0,05 -0,21 -0,01 -0,01 -0,22 -0,24 -0,52
Mdia 0 -0,15 -0,07 -0,06 -0,25 -0,32 -0,51 -0,44
DPM 0 0,45 0,26 0,48 0,43 0,48 0,40 0,40
EPM 0 0,18 0,11 0,20 0,17 0,20 0,16 0,16
84
Tabela VII. Valores individuais do ndice de vocalizao durante a aplicao do
estmulo nocivo perifrico, nos diferentes tempos (minutos) aps a microinjeo de
carbacol (2,7 nmol / 0,2 l) no CCA.
Cobaia LB 2 5 15 30 45 60 75
1 0 0,6 -1 -1 -1 -0,67 -0,62 -0,93
2 0 -0,09 -0,25 -0,72 -0,43 -0,13 -0,01 -0,35
3 0 -0,63 -0,1 -0,61 -0,26 -1 -0,69 -0,84
4 0 1,5 -0,01 -0,02 -0,33 -0,33 -0,4 -0,3
5 0 0,8 0,77 0,03 -1 -0,74 -0,65 -0,69
6 0 -0,34 -0,34 -0,29 -0,26 -0,28 -0,4 -0,19
7 0 -0,03 0 -0,34 -0,01 0,33 0,33 0
8 0 -0,37 -0,23 -0,55 -0,35 -0,56 -0,86 -0,43
Mdia 0 0,18 -0,14 -0,43 -0,45 -0,42 -0,41 -0,46
DPM 0 0,72 0,49 0,35 0,36 0,41 0,39 0,33
EPM 0 0,25 0,17 0,12 0,12 0,14 0,13 0,11
Cobaia LB 2 5 15 30 45 60 75
1 0 0,08 0,32 0,17 0,36 0,33 0,10 -0,10
2 0 -0,15 -0,11 -0,01 -0,24 -0,27 -0,24 -0,36
3 0 0,23 -0,04 -0,63 0,10 -0,17 -0,35 0,06
4 0 0,18 -0,50 0,00 0,04 0,26 0,17 0,00
5 0 -0,42 0,29 0,21 0,71 0,75 0,52 0,65
6 0 -0,001 0,28 0,36 0,01 0,01 0,01 0,01
7 0 -0,15 -0,07 0,08 -0,37 -0,23 -0,3 -0,31
Mdia 0,0 -0,1 0,0 0,0 0,0 0,1 0,0 0,0
DPM 0,0 0,2 0,3 0,3 0,4 0,4 0,3 0,4
EPM 0 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,0
85
Tabela IX. Valores individuais do ndice de vocalizao durante a aplicao do
estmulo nocivo perifrico, nos diferentes tempos (minutos) aps a microinjeo de
atropina (0,7 nmol / 0,2 l), seguido de carbacol (2,7 nmol / 0,2 l) no CCA.
Cobaia LB 2 5 15 30 45 60 75
1 0 -0,027 0,02 0,3 0,12 0,07 0,23 0,05
2 0 -0,036 -0,027 -0,027 -0,027 -0,027 -0,027 -0,01
3 0 -0,07 -0,07 -0,001 0,17 0,26 0,08 0,1
4 0 0,021 0,22 -0,027 -0,027 -0,027 -0,027 -0,1
5 0 -0,005 -0,01 -0,02 -0,005 0,004 0,16 0,16
6 0 -0,32 -0,44 -0,16 -0,32 -0,06 -0,04 -0,31
7 0 -0,07 0,03 0,25 -0,1 -0,1 -0,1 -0,05
8 0 -0,12 0,17 0,14 0,18 -0,09 -0,08 -0,07
9 0 -0,02 0,2 -0,02 -0,03 0,16 -0,01 0,2
Mdia 0 -0,071 0,010 0,048 -0,004 0,021 0,020 -0,003
DPM 0 -0,071 0,010 0,048 -0,004 0,021 0,020 -0,003
EPM 0 -0,023 0,003 0,016 -0,001 0,007 0,006 -0,001
Cobaia LB 2 5 15 30 45 60 75
1 0 -0,08 0,14 -0,12 0,15 -0,08 0,13 -0,08
2 0 -0,01 -0,07 -0,007 -0,01 -0,02 0,09 -0,09
3 0 -0,002 0,14 -0,02 0,05 -0,02 -0,02 -0,24
4 0 0,005 -0,002 -0,002 -0,01 0,24 0,24 0,13
5 0 -0,03 0,01 0,19 0,01 -0,06 0 -0,003
6 0 -0,005 0,032 -0,005 -0,005 -0,05 -0,04 -0,03
7 0 0,043 0,043 0,06 0,06 0,06 0,05 -0,01
8 0 0 0,09 0 -0,01 -0,02 -0,03 -0,03
Mdia 0 -0,009 0,047 0,012 0,029 0,006 0,052 -0,043
DPM 0 0,034 0,072 0,087 0,056 0,103 0,097 0,103
EPM 0 0,012 0,025 0,030 0,019 0,036 0,034 0,036
86
Tabela XI. Valores individuais do ndice de vocalizao durante a aplicao do
estmulo nocivo perifrico, nos diferentes tempos (minutos) aps a microinjeo de
morfina (4,4 nmol / 0,2 l) no CCA.
Cobaia LB 2 5 15 30 45 60 75
1 0 -1 -1 -1 -0,71 0,25 -1 -0,56
2 0 0,4 -0,42 -1 -0,78 -0,93 -0,55 -0,85
3 0 -0,6 -0,22 -0,27 -0,6 -0,86 -0,6 -0,2
4 0 -1 -1 -1 -1 -0,78 -1 -1
5 0 -0,96 -0,77 -0,57 -0,38 -0,38 -0,15 -0,67
6 0 -0,6 -0,61 -0,62 -0,66 -0,78 -1 -1
7 0 -0,39 -0,57 -0,29 -1 -0,6 -1 -1
8 0 0,022 -0,89 -0,73 -0,66 -1 -1 -0,66
9 0 -0,35 -1 -1 -1 -1 -1 -1
Mdia 0 -0,49 -0,72 -0,72 -0,75 -0,67 -0,81 -0,77
DPM 0 0,48 0,28 0,30 0,21 0,40 0,30 0,27
EPM 0 0,16 0,09 0,10 0,07 0,13 0,10 0,09
Cobaia LB 2 5 15 30 45 60 75
1 0 0,03 0,06 0,07 0,06 0,07 0,07 0,08
2 0 -0,16 -0,28 -0,1 0,17 0,13 0,11 0,18
3 0 0,1 0,02 0,06 -0,23 0,04 0,04 -0,24
4 0 0,1 -0,17 -0,08 0 -0,08 -0,34 0,11
5 0 0,05 0,06 -0,05 -0,04 -0,6 -0,007 0,01
6 0 0,18 0,07 -0,08 -0,53 -0,09 -0,09 0,07
7 0 0,18 0,06 0,11 0,14 0,14 0,18 0,11
8 0 -0,56 -0,09 -0,31 -0,27 -0,23 0,07 0,06
Mdia 0 -0,01 -0,03 -0,04 -0,08 -0,07 0,00 0,04
DPM 0 0,24 0,13 0,13 0,23 0,24 0,16 0,12
EPM 0 0,08 0,04 0,04 0,08 0,08 0,05 0,04
87
Tabela XIII. Valores individuais do nmero de lambidas e sacudidas, aps a administrao de formalina (5% / 0,5 l) na pata,
medido em diferentes intervalos de tempo (minutos) aps a microinjeo de salina (NaCl 0,9% / 0,2 l) no CCA.
88
Tabela XIV. Valores individuais do nmero de lambidas e sacudidas, aps a administrao de formalina (5% / 0,5 l) na
pata, medido em diferentes intervalos de tempo (minutos) aps a microinjeo de bicuculina (1 nmol / 0,2 l) no CCA.
Cobaia 0-5 5 - 10 10 - 15 15 - 20 20 - 25 25 - 30 30 - 35 35 - 40 40 - 45 45 - 50 50 - 55 55 60
1 85 118 167 135 135 136 102 89 101 79 75 70
2 276 90 26 59 27 25 65 71 20 72 81 75
3 245 82 74 41 33 33 1 60 39 34 22 28
4 180 68 52 106 15 14 55 19 23 18 38 28
5 163 0 0 34 55 31 0 34 43 21 33 31
6 93 29 3 99 104 2 17 62 43 48 52 37
7 134 26 21 27 8 4 0 5 7 3 6 0
8 121 13 53 24 42 56 18 74 127 84 104 64
Mdia 162,12 53,25 49,5 65,62 52,37 37,62 32,25 51,75 50,37 44,87 51,37 41,62
DPM 69,03 42,04 53,98 42,14 44,70 43,42 37,69 29,27 41,79 30,71 33,04 25,79
EPM 24,40 14,86 19,08 14,89 15,80 15,35 13,32 10,35 14,77 10,86 11,68 9,12
89
Tabela XV. Valores individuais do nmero de lambidas e sacudidas, aps a administrao de formalina (5% / 0,5 l) na
pata, medido em diferentes intervalos de tempo (minutos) aps a microinjeo de muscimol (1 nmol / 0,2 l) no CCA.
Cobaia 0-5 5 - 10 10 - 15 15 - 20 20 - 25 25 - 30 30 - 35 35 - 40 40 - 45 45 - 50 50 - 55 55 60
1 112 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
2 73 0 0 0 0 0 32 29 17 12 7 3
3 81 0 0 0 0 0 0 20 23 6 1 2
4 106 8 0 11 26 0 0 0 0 7 7 5
5 79 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
6 26 6 0 0 0 0 0 2 22 0 0 0
7 153 6 26 16 0 0 0 0 3 6 7 0
8 166 11 20 28 25 19 20 17 11 14 2 9
Mdia 99,5 3,87 5,75 6,87 6,37 2,37 6,5 8,5 9,5 5,62 3 2,37
DPM 45,27 4,42 10,76 10,57 11,80 6,71 12,45 11,68 10,07 5,44 3,38 3,24
EPM 35,17 1,37 2,03 2,43 2,25 0,83 2,29 3,00 3,35 1,98 1,06 0,83
90
Tabela XVI. Valores individuais do nmero de lambidas e sacudidas, aps a administrao de formalina (5% / 0,5 l) na
pata, medido em diferentes intervalos de tempo (minutos) aps a microinjeo de muscimol (1 nmol / 0,2 l), seguido de
bicuculina (1 nmol / 0,2 l) no CCA.
Cobaia 0-5 5 - 10 10 - 15 15 - 20 20 - 25 25 - 30 30 - 35 35 - 40 40 - 45 45 - 50 50 - 55 55 60
1 192 13 9 0 0 0 6 7 8 17 13 9
2 62 9 25 38 55 17 11 31 18 13 3 4
3 122 4 5 18 72 79 52 66 74 78 76 68
4 158 4 2 11 3 6 9 5 4 3 8 10
5 151 24 19 6 8 14 4 11 5 13 32 29
6 132 21 16 5 6 0 5 1 20 21 25 34
7 180 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0
8 166 12 0 4 2 8 14 12 5 21 17 19
Mdia 145,37 10,87 9,5 10,25 18,37 15,5 12,62 16,62 16,75 20,75 21,75 21,62
DPM 40,82 8,42 9,48 12,68 28,33 26,46 16,49 22,18 24,15 24,37 24,41 22,16
EPM 14,43 2,97 3,35 4,48 10,01 9,35 5,83 7,84 8,54 8,61 8,63 7,83
91
Tabela XVII. Valores individuais do nmero de lambidas e sacudidas, aps a administrao de formalina (5% / 0,5 l) na
pata, medido em diferentes intervalos de tempo (minutos) aps a microinjeo de carbacol (2,7 nmol / 0,2 l) no CCA.
Cobaia 0-5 5 - 10 10 - 15 15 - 20 20 - 25 25 - 30 30 - 35 35 - 40 40 - 45 45 - 50 50 - 55 55 - 60
1 65 9 3 11 10 16 11 6 20 39 31 28
2 96 6 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
3 110 32 12 8 10 15 16 2 6 15 25 14
4 140 0 13 7 4 2 3 4 48 25 17 9
5 167 54 7 11 19 20 20 18 11 13 9 15
6 139 173 5 16 3 0 0 2 7 6 21 23
7 149 30 45 67 47 49 37 29 16 57 55 54
8 30 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Mdia 112 38 10,62 15 11,62 12,75 10,875 7,62 13,5 19,37 19,75 17,87
DPM 46,44 57,73 14,72 21,71 15,64 16,84 13,14 10,41 15,62 20,07 18,13 17,62
EPM 39,59 13,43 3,75 5,30 4,11 4,50 3,84 2,69 4,77 6,85 6,98 6,31
92
Tabela XVIII. Valores individuais do nmero de lambidas e sacudidas, aps a administrao de formalina (5% / 0,5 l) na
pata, medido em diferentes intervalos de tempo (minutos) aps a microinjeo de atropina (0,7 nmol / 0,2 l) no CCA.
Cobaia 05 5 10 10 15 15 20 20 25 25 30 30 35 35 40 40 45 45 50 50 55 55 60
1 172 33 36 14 29 25 17 33 18 10 47 30
2 110 2 5 9 36 48 35 34 31 19 6 3
3 109 84 34 45 26 12 30 26 28 43 20 28
4 109 15 2 0 2 18 12 12 13 18 12 10
5 175 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0
6 150 37 33 37 44 58 51 43 38 34 36 42
7 169 12 0 33 78 83 65 41 51 22 30 19
8 150 5 7 0 0 22 27 22 21 12 4 0
Mdia 143 23,5 14,62 17,25 26,87 33,25 29,62 26,87 25 19,75 19,37 16,5
DPM 29,37 28,01 16,50 18,43 26,88 27,48 21,01 13,71 15,69 13,61 16,89 15,76
EPM 10,38 9,90 5,83 6,51 9,50 9,71 7,43 4,84 5,54 4,81 5,97 5,57
93
Tabela XIX. Valores individuais do nmero de lambidas e sacudidas, aps a administrao de formalina (5% / 0,5 l) na
pata, medido em diferentes intervalos de tempo (minutos) aps a microinjeo de morfina (4,4 nmol / 0,2 l) no CCA.
Cobaia 05 5 10 10 15 15 20 20 25 25 30 30 35 35 40 40 45 45 50 50 55 55 60
1 54 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
2 37 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
3 38 0 0 3 6 5 4 11 6 8 7 8
4 27 0 0 1 0 0 2 1 2 5 2 1
5 5 0 0 1 3 16 2 0 0 0 0 0
6 25 0 0 0 3 0 0 0 0 0 4 3
7 42 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
8 44 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Mdia 34 0 0 0,62 1,5 2,62 1 1,5 1 1,62 1,62 1,5
DPM 14,92 0 0 1,06 2,26 5,68 1,51 3,85 2,13 3,11 2,61 2,82
EPM 5,27 0 0 0,37 0,80 2,00 0,53 1,36 0,75 1,10 0,92 1
94
Tabela XX. Valores individuais do nmero de lambidas e sacudidas, aps a administrao de formalina (5% / 0,5 l) na
pata, medido em diferentes intervalos de tempo (minutos) aps a microinjeo de naloxona (2,7 nmol / 0,2 l), seguido de
morfina (4,4 nmol / 0,2 l) no CCA.
Cobaia 05 5 10 10 15 15 20 20 25 25 30 30 35 35 40 40 45 45 50 50 55 55 60
1 85 24 7 9 40 42 6 9 21 24 29 29
2 131 8 0 0 0 0 0 0 0 0 8 4
3 115 23 19 9 8 33 40 51 45 42 21 18
4 107 1 7 17 7 19 12 16 16 19 27 22
5 125 1 0 0 0 0 16 23 21 19 3 21
6 93 4 16 8 19 22 27 25 24 23 25 12
7 112 18 15 16 28 30 18 24 17 19 28 27
8 114 29 14 28 31 32 31 27 25 19 16 12
Mdia 110,25 13,5 9,75 10,87 16,62 22,25 18,75 21,85 21,12 20,62 19,62 18,12
DPM 15,27 11,30 7,32 9,32 15,15 15,40 13,29 14,97 12,43 11,40 9,76 8,40
EPM 5,40 3,99 2,58 3,29 5,35 5,44 4,70 5,29 4,39 4,03 3,45 2,97
95