Factores que influenciam a

actividade enzimtica

Actividade Experimental realizada no dia

30/04/2007 1
ndice

Introduo terica 3

Materiais utilizados 5

Objectivo 5

Procedimento 6

Registos 8

Discusso de resultados 9

Concluso 11

Bibliografia 12

Representao tridimensional de uma enzima

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Introduo terica
As enzimas

As enzimas so biocatalizadores, ou seja, so molculas, na sua maioria

protenas, que tm a capacidade de acelerar uma reaco, sem que
nela sejam consumidas.

A designao de biocatalizador advm do facto de serem compostos

orgnicos presentes no organismo (bio-) e como j foi referido
anteriormente, por aumentarem a velocidade das reaces (-
catalizador).

Ao actuarem como catalizadores diminuem a energia necessria para

desencadear uma reaco. S deste modo possvel acelerar a
velocidade da reaco tornando assim permissvel a ocorrncia de um
maior nmero de reaces num determinado espao de tempo.

Factores que condicionam a actividade enzimtica

Existem diversos factores que condicionam a actividade enzimtica

entre os quais destacamos:

 Temperatura

 PH

 Concentrao do Substrato

 Concentrao da Enzima

Temperatura:

A temperatura exerce influncia sobre a actividade enzimtica na

medida em que condicionamas ligaes intramoleculares da enzima:
Quando a enzima submetida a uma temperatura elevada as ligaes
qumicas rompem-se conduzindo a uma alterao da conformao da
3
enzima e, consquentemente, a uma alterao do centro activo. A
enzima sofre ento desnaturao, ao que corresponde uma perda de
actividade biolgica permanente (processo irreversvel).

As temperaturas baixas no constituem um processo irreversvel mas sim

reversvel uma vez que apenas causam a inactivao das enzimas.
Aquando do aumento de temperatura e como as enzimas no so
destruidas a actividade das mesmas restabelecida.

PH:

O PH interfere na actividade enzimtica uma vez que altera distribuio

de cargas elctricas da enzima influenciando a conformao do
centro activo e, consequentemente, a sua interaco com o substrato.
As enzimas possuem um PH ptimo acima ou abaixo dos valores dos
valores para os quais a actividade enzimtica diminui e acaba por
cessar.

Concentrao do Substrato:

O aumento da concentrao do substrato aumenta a actividade

enzimtica o que pressupe um aumento da velocidade da reaco,
desde que haja enzima disponvel h qual o substrato se ir ligar.
Quando deixa de haver enzima disponvel (saturao da enzima) a
velocidade da reaco no aumenta, mantm-se constante.

Concentrao da Enzima:

Com o aumento da concentrao da enzima d-se,

consequentemente, o aumento da actividade enzimtica e o aumento
da velocidade da reaco desde que haja substrato disponvel.
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5
Materiais utilizados 1 Pina;

1 Bisturi;
Material biolgico

1 Pipeta Volumtrica de 10
Fgado fresco;
mL;
Fgado congelado;
1 Almofariz com pilo;
Fgado cozido;
Areia Fina;
Perxido de hidrognio
1 Vareta;
(H2O2 10vol. gua
oxigenada); 1 Conta-gotas;

cido Clordrico (HCL a 1 Pipetador;

5%);
2 Caixas de Petri;
Hidrxido de Sdio (NaHO
Palitos;
a 10%);
Fsforos;
Equipamento de laboratrio
Banho-Maria.
8 Tubos de ensaio;

2 Suportes para tubos de

ensaio;

Objectivo

O objectivo desta actividade experimental estudar alguns factores

que influenciam a actividade enzimtica, nomeadamente o pH e a
temperatura.

6
Procedimento

Para a realizao desta actividade experimental o grupo teve por

base o procedimento experimental que se encontra na pgina 234
do manual, embora com algumas alteraes.

Comemos por numerar 6 tubos de ensaio.

Seguidamente esmagmos um pouco de fgado fresco, no

almofariz, misturado com areia, para facilitar o procedimento.

Aos 6 tubos foram adicionados 2 mL de H2O2, ou seja, gua

oxigenada.

No tubo 2 colocmos um pouco de fgado fresco,

previamente esmagado.

Introduzimos um palito com a ponta incandescente no tubo.

No tubo 3 colocmos um pouco de fgado cozido.

Introduzimos um palito com a ponta incandescente no tubo.

No tubo 4 colocmos um pouco de fgado congelado.

Introduzimos um palito com a ponta incandescente no tubo.

Colocmos os tubos com fgado cozido (3) e com fgado

congelado (4) durante 10 minutos, em banho-maria a 37C.

Aps os 10 minutos no banho-maria colocmos um palito com

a ponta incandescente nos tubos 3 e 4.

No tubo 5 colocmos um pouco de fgado fresco e 4 gotas de

HCL, ou seja, cido clordrico.

Ao realizarmos o procedimento anterior do modo descrito,

verificmos que no ocorreu a reaco esperada, isto porque
7
 primeiro o meio devia ter sido acidificado e s depois
colocado o fgado fresco.

Preparmos ento o tubo de modo correcto, ou seja,

colocando primeiro o cido e s depois o fgado fresco.

No tubo 6 colocmos 4 gotas de NaHO, ou seja, hidrxido de

sdio e colocmos tambm um pouco de fgado fresco.

Para finalizar colocmos nos tubos 5 e 6 um palito com a ponta

incandescente, de modo a verificar qual dos dois liberta mais
oxignio.

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Registos

Os registos vo ser apresentados separadamente entre cada

preparao (tubo):

Tubo 1: No tubo 1 no se verificam alteraes.

Tubo 2: Verifica-se reaco.

Tubo 3: Tambm se verifica reaco , embora a reaco se d com

muito menor intensidade.

Tubo 4: A reaco demora a desencadear e lenta.

Tubo 5: No tubo houve um erro pois colocmos primeiro o fgado e

depois o cido clordrico.
Voltou ento a preparar-se o tubo 5, colocando desta vez primeiro o
cido clordrico e depois o fgado fresco, verificando-se a reaco
esperada.

Tubo 6: Neste tubo tambm se verifica reaco, embora com maior

intensidade.

9
Discusso de resultados

No tubo 1 no se verificam quaisquer alteraes, o que seria de

esperar, dado que este se constitui como controlo experimental e,
tambm, que h ausncia de enzimas, o que torna impossvel dar-se
qualquer reaco.

No tubo 2 a reaco que existe facilmente verificvel, uma vez que

o fundo do tubo fica quente e existe libertao de oxignio que
visvel pelo avivamento da chama. Neste tubo a reaco era
esperada, devido actuao das enzimas presentes no fgado
fresco. de salientar que o meio onde esta reaco ocorre neutro,
o que prova que os valores de pH neutros oferecem melhores
condies actuao da enzima catalase, bem como a
temperatura ambiente a que o fgado se encontra.

No tubo 3 tambm se verifica reaco, mas em menor intensidade, o

que pode ser explicado pelo cozimento do fgado, que inibe a
aco das enzimas presentes no mesmo, podendo, por vezes,
desnatur-las, o que pode levar ao cessar da sua actividade
biolgica.

No tubo 4 a reaco desenvolve-se lentamente, o que visvel pela

demora a acender a chama na ponta do palito. A demora da
reaco devida ao congelamento do fgado, que tambm inibe a
aco das enzimas. Aps se ter retirado o tubo 4 do banho-maria,
colocmos, novamente, o palito com a ponta incandescente. Aqui
verificmos o reavivamento imediato da chama, o que nos permite
afirmar que a inibio das enzimas atravs de temperaturas baixas
reversvel.

10
No tubo 5 houve um erro, pois colocmos primeiro o fgado e depois
o cido clordrico, o que no nos permite concluir nada, visto que j
se tinha dado uma reaco entre o fgado e o preparado colocado
no tubo.
Voltou ento a preparar-se o tubo 5, colocando desta vez primeiro o
cido clordrico e depois o fgado fresco, verificando-se a reaco
esperada.
A importncia do cido nesta preparao a de podermos inferir
algo acerca da relao entre os nveis de acidez e basicidade da
soluo e a actividade enzimtica. Verificou-se que o meio cido
no oferece boas condies para a aco das enzimas presentes no
fgado.

No tubo 6 verifica-se a reaco esperada, um pouco mais

rapidamente que no tubo 5. Esta reaco ocorre num meio bsico,
devido adio dehidrxido de sdio. Relativamente reaco
processada no tubo 2, podemos afirmar que, tanto o pH elevado
como o pH baixo condicionam a actividade da catalase sobre o
substrato.

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Concluso

Com esta actividade laboratorial podemos inferir que dois factores

que condicionam a actividade enzimtica so a temperatura e o pH.

Temperatura:
As temperaturas baixas (no caso do fgado congelado), bem como
as temperaturas elevadas (no caso do fgado cozido), influenciam a
actividade de enzimas como a catalase, inibindo-as de actuarem
sobre o amido. Quando as enzimas so sujeitas a temperaturas muito
baixas, a inactivao reversvel (aps o tubo 4 ser retirado do
banho-maria verificmos que deu-se reaco). Com relao s
enzimas que so submetidas a temperaturas elevadas conclui-se que
a sua inactivao irreversvel (aps se retirar o tubo 3 do banho-
maria notmos que no se processou nenhuma reaco).
pH:
O pH tambm influencia a actuao das enzimas sobre o substrato.
Conforme verificado, relativamente actuao da catalase, o pH
muito baixo (soluo cida, neste caso, o cido clordrico) e o pH
com valores muito elevados (base, neste caso, o hidrxido de sdio)
inibem a actuao desta enzima.

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 Bibliografia

Internet (Imagens e Documentos de pesquisa) e livros :

http://www.ufrgs.br/Alimentus/pao/ingredientes/ing_enzimas.htm

http://oblogdospelachos.blogaliza.org/files/2006/07/temperatura.
gif

http://www.thetropicaltank.co.uk/Images/phdiag.gif

http://pt.wikipedia.org/wiki/F%C3%ADgado

http://www.cdr.unc.br/cursos/Farmacia/tubo_ensaio.jpg

http://www.scibio.unifi.it/lezioni/figure/acido.jpg

http://www.pca.org.br/imagens/didiu/17lista_pca.jpg

http://tilz.tearfund.org/NR/rdonlyres/29824D15-95FE-4162-91EA-
DA0AAAF31BD2/0/A9.gif

http://www.emack.com.br/sao/webquest/sp/2004/terra_doente/_
borders/conclusao.jpg

Biologia 12 - Preparar os testes de avaliao, OSRIO, Lgia Silva,

Areal Editores

Biologia 12 - 12. Ano MATIAS, Osrio; MARTINS, Pedro; Areal

Editores

13
 Escola Secundria Poeta Joaquim Serra

Disciplina: Biologia

Docente: Prof. Ana Figueiredo

Actividade Experimental: Factores que influenciam a actividade

enzimtica

Hber Andr Pais Rodrigues, 12A n11

Joana Mendes da Cruz, 12A n13

Marisa Alexandra Cunha Tavares, 12A n16

Montijo, 10 de Maio de 2007

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