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CENTRO UNIVERSITRIO CATLICA DE SANTA CATARINA

DISCIPLINA DE SANGUE E HEMODERIVADOS 7 FASE B

Victoria Cunha Farah

PORTIFLIO

Joinville
2017
SUMRIO

1. HEMODERIVADOS E HEMOCOMPONENTES 4
1.1 HEMOTERAPIA 4
1.1.1 Definio 4
1.1.2 Histrico 4
1.1.3 Hemoterapia no Brasil 5
1.1.4 Legislao 6
2. TRIAGEM SOROLGICA NA HEMOTERAPIA 6
2.1 TRIAGEM DOS DOADORES E ACONSELHAMENTO DOS INAPTOS 6
2.1.1 Princpios e diretrizes da Poltica Nacional do Sangue 6
2.1.2 Captao 7
2.1.3 Captao de doadores 8
2.2 TRIAGEM LABORATORIAL 10
2.2.1 Tcnicas e conceitos em sorologia 11
2.2.2 Anticorpos 12
2.2.3 Antgenos 13
2.2.4 Imunoensaios 13
3. FENOTIPAGEM DOS ANTGENOS ERITROCITRIOS 15
3.1 COLETA DE SANGUE 15
3.2 PROCESSAMENTO, ARMAZENAMENTO E DISTRIBUIO 20
3.2.1 Tcnica de PRP (Plasma Rico Em Plaquetas) 21
3.2.2 Buffy Coat 22
3.3 SISTEMA KELL 23
3.3.1 Aloimunizao 24
3.3.2 Doena Hemoltica Do Recm-Nascido 24
3.3.3 Anemia Hemoltica Auto-Imune 24
3.3.4 Sndrome de McLeod 25
3.3.5 Sindrome Duffy 25
3.4 SISTEMA KIDD 25
3.5 SISTEMA MNS 26

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3.6 SISTEMA SAN DIEGO 27
4. PESQUISA E IDENTIFICAO DE ANTICORPOS ERITROCITRIOS 28
4.1 IMUNO-HEMATOLOGIA 28
4.2 GRUPOS SANGUINEOS 28
4.2.1 Sistema ABO E Hh 29
4.2.2 Fentipos ABO 30
4.2.3 Subgrupos ABO 31
4.2.4 Associaes com doenas 31
4.2.5 SISTEMA Rh 32
4.2.5.1 Anemia Hemoltica Aloimune 34
4.2.5.2 Doena Hemoltica Perinatal 34
4.3 TESTE DE ANTIGLOBULINA HUMANA 35
5. GARANTIA DA QUALIDADE EM HEMOTERAPIA 38
5.1 HEMOTERAPIA E MEIO AMBIENTE 38
5.1.1 Gerenciamento de resduos 38
5.1.2 Classificao de resduos 39
5.2.2 Avaliao Externa da Qualidade 44
5.2.3 Comit transfusional 46
5.3 HEMOVIGILANCIA 47

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1. HEMODERIVADOS E HEMOCOMPONENTES

1.1 HEMOTERAPIA

1.1.1 Definio

A Hemoterapia (Cincia que estuda o tratamento de doenas utilizando o sangue


humano), tem origem com a descoberta da Circulao Sangunea em 1627 por Willian Harvey.
Representa uma atividade mdica essencial, e indispensvel, para o tratamento de suporte
que auxilia a cura de pacientes com doenas hematolgicas e no hematolgicas complexas.
O balano entre os riscos e benefcios das transfuses tem norteado as decises clnicas para
a aplicao das melhores evidncias cientficas na prtica transfusional. A primeira transfuso
foi realizada em 1667, em Paris, pelo mdico e professor de filosofia e matemtica Jean
Baptista Denis utilizando sangue de carneiro em um paciente com tifo que faleceu depois da
terceira transfuso.
Hemocomponentes: Ou Componentes Lbeis do Sangue so produtos obtidos a partir
do Sangue Total por meio de Processos Fsicos (centrifugao, congelamento).
Hemoderivados: So produtos obtidos a partir do Plasma por meio de Processos
Fsico-Qumicos, geralmente produzido em escala industrial. Ex: Albumina, Cola de Fibrina,
Complexo Protrombnico, Fator IX, Fator VIII, Fator VIII recombinante, Fator de von
Willebrand, Imunoglobulinas.

1.1.2 Histrico

Outras tentativas de transfuso heterloga, isto , com sangue de animais de espcies


diferentes, no tiveram sucesso, levando proibio da pratica na Europa durante 150 anos.
Apesar da proibio em 1788 (sc. XVIII) Pontice e Landois conseguiram realizar transfuses
homlogas, entre animais da mesma espcie. Aps experincias com animais, em 1818 James
Blundel conseguiu realizar, com sucesso, transfuses com sangue humano em mulheres com
hemorragia ps-parto. Em 1900, Karl Landesteiner, imunologista austraco, descobre o
sistema ABO, a classificao do sangue em grupo sanguneo, e quatro dcadas depois

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descoberto o fator Rh. Alexander Bogdanov, mdico russo, em 1924, comeou experimentos
com transfuso de sangue em busca da eterna juventude. Depois de 11 transfuses em si
mesmo, ele realizou o procedimento com o sangue de um paciente infectado com malria e
tuberculose, morrendo pouco tempo depois. Estas descobertas aliadas ao desenvolvimento
de tcnicas e equipamentos de conservao e refrigerao, permitiram organizao dos
bancos de sangue, sendo o primeiro criado em 1936 em Barcelona, durante a Guerra Civil
Espanhola, tendo se expandido durante a Segundo Guerra Mundial.

1.1.3 Hemoterapia no Brasil

A atuao de alguns mdicos pioneiros e com viso internacional da especialidade,


como Pedro Clvis Junqueira e Osvaldo Mellone, introduziram a hemoterapia no Brasil. Foi
inevitvel o aparecimento dos chamados banqueiros, profissionais mdicos e no-mdicos
relacionados aos bancos de sangue. A falta de controle governamental estimulou a
proliferao de bancos de sangue que colhiam sangue de doadores remunerados. Em 1940:
O Curso de Hematologia promovido por Walter Oswaldo Cruz, em Manguinhos, uma espcie
de ps-graduao da poca, no IOC. 1949: 1. Congresso Paulista de Hemoterapia promovido
por Carlos da Silva Lacaz e Oswaldo Mello onde foi lanada a base para a fundao da
Sociedade Brasileira de Hematologia e Hemoterapia.
Nas dcadas de 70 e de 80, algumas iniciativas foram fundamentais para que a
Hemoterapia brasileira ultrapassasse as barreiras do compadrio e do regionalismo. Em 1976,
o mdico hemoterapeuta Francisco Antoncio, do Hospital das Clnicas/FMUSP, a convite do
Ministrio da Sade percorreu diversos estados do Brasil e apresentou um relatrio sobre a
coleta e distribuio de sangue no territrio brasileiro, preconizando a implantao de
hemocentros pblicos. Em 1977 foi inaugurado o Centro de Hemoterapia e Hematologia de
Pernambuco HEMOPE o primeiro do Brasil. Em 1980, inaugurava-se o segundo
hemocentro, o do estado do Par HEMOPA. Em seguida vieram outros hemocentros em
vrias capitais. Em 1980, iniciou-se a doao voluntria no Brasil e a remunerao proibida.
A Lei 10.205, de 21 de maro de 2001, se no era perfeita, pelo menos atende os
interesses da maioria. A Cooperao Brasil-Frana e o Programa Nacional de Sangue e
Hemoderivados. Em 1961, Jnio Quadros envia um mdico para a Frana para comprar 02

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bancos de sangue e instal-los no Rio de janeiro e em So Paulo o que no aconteceu pela
renncia do Presidente. Mas foram concedidas 4 bolsas de especializao na Frana em
Hemoterapia. Surgimento dos hemocentros. Campanha de doao voluntria de sangue da
Sociedade Brasileira de Hematologia e Hemoterapia em 1980. A Constituio de 1988
estabelece que a assistncia sade livre iniciativa privada e no seu pargrafo 4 diz que a
lei dispor sobre as condies e os requisitos que facilitem a remoo dos rgos, tecidos e
substncias humanas para fins de transplante, pesquisa e tratamento, bem como a coleta,
processamento e transfuso de sangue e suas componentes, vedado todo tipo de
comercializao. Artigo legalizado em 2002.

1.1.4 Legislao

Portaria n 1376/1993 do Ministrio da Sade: Toda doao de sangue deve ser


altrusta, voluntria e no gratificada direta ou indiretamente, assim como o anonimato do
doador deve ser garantido; RDC 57 de 16 de dezembro de 2010; Portaria 1353 de 13 de junho
de 2011 DOU 1 de 14 de junho de 2011; Portaria 2712 de 12 de novembro de 2013; e Portaria
158 de 04 de fevereiro de 2016.

2. TRIAGEM SOROLGICA NA HEMOTERAPIA

2.1 TRIAGEM DOS DOADORES E ACONSELHAMENTO DOS INAPTOS

2.1.1 Princpios e diretrizes da Poltica Nacional do Sangue

I - Universalizao do atendimento populao;


II - Utilizao exclusiva da doao voluntria, no remunerada, do sangue, cabendo ao poder
pblico estimul-la como ato relevante de solidariedade humana e compromisso social;
III - Proibio de remunerao ao doador pela doao de sangue;
IV - Proibio da comercializao da coleta, processamento, estocagem, distribuio e transfuso
do sangue, componentes e hemoderivados;

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V - Permisso de remunerao dos custos dos insumos, reagentes, materiais descartveis e da mo
de obra especializada, inclusive honorrios mdicos, na forma do regulamento desta Lei e das Normas
Tcnicas do Ministrio da Sade;
VI - Proteo da sade do doador e do receptor mediante informao ao candidato doao sobre
os procedimentos a que ser submetido, os cuidados que dever tomar e as possveis reaes adversas
decorrentes da doao, bem como qualquer anomalia importante identificada quando dos testes
laboratoriais, garantindo-lhe o sigilo dos resultados;
VII - Obrigatoriedade de responsabilidade, superviso e assistncia mdica na triagem de doadores,
que avaliar seu estado de sade, na coleta de sangue e durante o ato transfusional, assim como no
pr e ps-transfusional imediatos;
VIII - Direito informao sobre a origem e procedncia do sangue, componentes e hemoderivados,
bem como sobre o servio de hemoterapia responsvel pela origem destes;
IX - Participao de entidades civis brasileiras no processo de fiscalizao, vigilncia e controle das
aes desenvolvidas no mbito dos Sistemas Nacional e Estaduais de Sangue, Componentes e
Hemoderivados;
X - Obrigatoriedade para que todos os materiais ou substncias que entrem em contato com o
sangue coletado, com finalidade transfusional, bem como seus componentes e derivados, sejam
estreis, apirognicos e descartveis;
XI - Segurana na estocagem e transporte do sangue, componentes e hemoderivados, na forma das
Normas Tcnicas editadas pelo Sinasan;
XII - Obrigatoriedade de testagem individualizada de cada amostra ou unidade de sangue coletado,
sendo proibida a testagem de amostras ou unidades de sangue em conjunto, a menos que novos
avanos tecnolgicos a justifiquem, ficando a sua execuo subordinada portaria especfica do
Ministrio da Sade, proposta pelo Sinasan.

2.1.2 Captao

Doao ainda hoje um problema de interesse mundial. Necessidade de estratgias


para captao de doadores de sangue a fim de manter estoques nos hemocentros e
candidatos a doadores de medula ssea. Estratgias para sensibilizar, conscientizar e educar
a populao para a doao voluntria, responsvel e habitual. O nmero de doadores no
acompanha o nmero de transfuso. Para doao de medula ssea, h grande dificuldade em

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encontrar um doador com o mesmo perfil de Antgenos Leucocitrios Humanos (HLA) do
paciente, sendo que no Brasil a probabilidade de 1/100.000.
Os servios de hemoterapia no Brasil esto vinculados Coordenao-Geral de Sangue
e Hemoderivados (CGSH), ao Departamento de Ateno Especializada (DAE) e Secretaria de
Ateno Sade (SAS), do MS. So regulamentados: Portaria no 1.353/2011, do MS, e
norteados pela RDC n56 e n57, de 16 de dezembro de 2010, da Anvisa. Normatizam os
procedimentos como a captao, a coleta, o processamento, a testagem, o armazenamento,
o controle de qualidade dos produtos, a distribuio, o transporte, o uso humano do sangue,
de seus componentes e derivados.
A legislao preconiza que a doao de sangue seja um ato voluntrio, annimo,
altrusta e no remunerado, direta ou indiretamente. O Setor de Captao de Doadores, tem
como misso captar doadores de sangue e igualmente cadastrar candidatos doao de
medula ssea. A captao a primeira atividade da hemoterapia Profissionais envolvidos:
servio social, pedagogia, enfermagem e comunicao social e coordenada, na maioria dos
hemocentros do Brasil, por assistentes sociais.

2.1.3 Captao de doadores

Estratgias para captar doadores: Projeto doador do futuro; Projeto coleta externa;
Projeto de captao de doadores em servios de sade; Projeto de incentivo doao
feminina (20-25% dos doadores); Projeto formao de multiplicadores; Envio de
correspondncias; Programa de comunicao e divulgao; Captao de doadores por meio
de parcerias com empresas.
Seleo de doadores: Transfuses so cada vez mais necessrias e no so isentas de
risco. No Brasil 2% da populao doa sangue. A seleo de doadores de sangue apresenta
etapas que tentam, na medida do possvel, determinar se o indivduo est em boas condies
de sade, livre de doenas que possam ser transmitidas pelo sangue doado e se ele capaz
de tolerar o procedimento. A doao de sangue de maneira voluntria, annima, altrusta e
sem receber qualquer remunerao ou benefcio, direta ou indiretamente.
Etapas da seleo de doadores de sangue: Cadastro; fornecimento de material
educacional; e triagem clnica. No cadastro, o servio poder utilizar e armazenar fotografias

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digitais, registros biomtricos, entre outros mecanismos, a fim de garantir uma identificao
segura que permita a ligao dos doadores de repetio aos registros de doaes anteriores,
cada vez que eles retornarem ao servio. Com as informaes cadastrais (Nome completo;
Sexo; Data de nascimento; Nmero e rgo expedidor do documento de identificao;
Nacionalidade/naturalidade; Filiao; Ocupao habitual; Endereo e telefone para contato;
Nmero do registro do candidato no servio de hemoterapia ou no programa de doao de
sangue; Data do registro de comparecimento) sempre anexar um documento com foto.
O material educacional ser fornecido ao candidato material educacional simples e de
fcil entendimento que descreva o processo de doao de sangue. Orientaes claras sobre
os requisitos mnimos para doao de sangue, alm de esclarecimentos sobre os riscos de
transmisso de doenas infecciosas pelas transfuses. importante que sejam fornecidos
endereos de locais que realizem testes laboratoriais de maneira segura e privativa a
candidatos que possam estar doando sangue somente para obter resultados de exames.
Fundamental o esclarecimento aos candidatos de quais as doenas sero testadas no sangue
doado, e as regras de notificao ao doador e aos rgos competentes de resultados
laboratoriais alterados. imprescindvel que o candidato seja informado sobre hbitos e
comportamentos que acarretam risco para o sangue doado para que reflita e possa excluir-se
do processo de doao. Enfatizar a importncia de dizer a verdade. Material para pessoas com
dificuldades audiovisuais.
A triagem clnica consiste em uma avaliao clnica e epidemiolgica do candidato,
atravs de um exame fsico sumrio e pela anlise de suas respostas ao questionrio que visa
avaliar sua histria mdica atual e prvia, seus hbitos e a existncia de fatores de risco para
doenas transmissveis pelo sangue. Ter idade entre 18 anos completos e 60 anos. De 16 e 17
anos, com o consentimento formal de seu responsvel legal e 60 anos, 11 meses e 29 dias, a
idade limite para sua primeira doao. Peso superior a 50kg, aparncia saudvel, e com
temperatura abaixo de 37C. Pulso regular e entre 50 e 100 batimentos por minuto. Presso
arterial sistlica no deve ser maior do que 180mmHg e sua presso diastlica no deve ser
superior a 100mmHg. Valores mnimos aceitveis de Hb=12,5g/dl ou Ht=38%, para mulheres
e Hb=13,0g/dl ou Ht=39%, para homens. Pele do local da puno deve estar ntegra, sem
leses e sem sinais sugestivos de mltiplas punes venosas ou presena de veias
esclerosadas ou cicatrizes por risco de contaminao de bactrias. Deve ser submetido a uma

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entrevista individual, confidencial e sigilosa, em termos compreensveis, realizada em local
que oferea privacidade, por profissional de sade de nvel superior, qualificado, capacitado,
sob superviso mdica. Deve ser mantido o registro da entrevista em meio eletrnico ou
impresso e somente devero ser coletadas bolsas de candidatos que tenham sido aprovados
na triagem clnica e realizado TCLE.
O questionrio especialmente importante para identificar riscos de doenas e
condies para as quais no so realizados testes laboratoriais ou para as quais os testes
existentes so incapazes de identificar estgios iniciais de infeces. O triador deve observar
o candidato quanto a seu aspecto geral, comportamento e reaes. O resultado do processo
de seleo dos candidatos doao de sangue deve lhes ser comunicado, devendo aqueles
considerados inaptos receberem explicaes claras do motivo da recusa, bem como serem
encaminhados para avaliao mdica especializada, se necessrio.
Triagem clnica para inaptos definitivos, quando o candidato no pode doar sangue
para outra pessoa; inapto temporrio, o candidato que se encontra impedido de doar sangue
para outra pessoa por determinado perodo de tempo; e inapto por tempo indeterminado,
aquele que se encontra impedido de doar sangue para outra pessoa por um perodo indefinido
de tempo, segundo as normas regulatrias vigentes.

2.2 TRIAGEM LABORATORIAL

A triagem laboratorial para doenas transmissveis por transfuso (DTT) uma das
ferramentas mais poderosas na garantia da segurana transfusional. Entretanto, importante
afirmar que, sozinha, ela no garantia de um hemocomponente seguro. Todos os processos
que envolvem a doao de sangue devem ser realizados de forma estruturada e padronizada,
com o objetivo de minimizar os riscos transfusionais.
Triagem laboratorial e todos os demais processos que envolvem a transfuso de
sangue so regulamentados: Portaria MS/GM n 1.353, de 14 de junho de 2011; RDC Anvisa
n 57, de 16 de dezembro de 2010; Portaria 2712 de 12 de novembro de 2013; Portaria 158
de 04 de fevereiro de 2016.
As demais padronizaes da instituio devem estar descritas em Procedimentos
Operacionais Padro (POP) que so baseados nas tcnicas descritas pelos fabricantes e nos

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conceitos de Boas Prticas. obrigatria a triagem laboratorial para DTT de todos os doadores
a cada doao. Devero ser pesquisadas as seguintes doenas: Hepatite B, Hepatite C,
Infeco por HTLV I/II, Vrus T-Linfotrpico Humano I e II, Infeco pelo Vrus da
Imunodeficincia Humana (HIV), Doena de Chagas, Sfilis, Malria (regies endmicas).
A utilizao de testes com alta sensibilidade, quantitativos e devem permitir, quando
necessrio, automatizao do processo. No Brasil, a triagem molecular para DTT realizada
para o HIV 1 e para Hepatite C. A maioria dos fabricantes utiliza tcnicas baseadas na reao
em cadeia da polimerase (PCR) para amplificar o material gentico dos vrus. A amplificao
do material gentico permite detectar uma quantidade muito pequena de vrus, antes do
aparecimento dos anticorpos, ou mesmo de antgenos. A tcnica molecular no substitui a
sorologia e deve ser utilizada obrigatoriamente associada a ela. Quando aplicada, obriga a
utilizao de algoritmos de liberao conjunta, para garantir a segurana transfusional. A
pesquisa de antgeno, os ensaios combinados (antgeno/anticorpo) e as tcnicas de
amplificao do material gentico tm o objetivo de diminuir o perodo de janela. Durante a
janela, existe chance de transmisso de doena, pois o vrus ou parasita est presente na
amostra e os testes so negativos. Neste perodo, os testes no tm sensibilidade analtica
suficiente para detectar a presena de anticorpos, antgeno ou material gentico.

2.2.1 Tcnicas e conceitos em sorologia

Diversas tcnicas podem ser utilizadas para realizar a triagem sorolgica. Para tanto,
precisam apresentar uma caracterstica fundamental: altssima sensibilidade. Denominadas
de forma geral como Imunoensaios (IE), atualmente s os Ensaios Imunoenzimticos (EIE) e
os Ensaios Quimiluminescentes (QIA) conseguem garantir a sensibilidade analtica adequada
para a triagem sorolgica. A exceo desta regra a triagem para sfilis, que pode ser realizada
por meio de tcnicas de precipitao.
Os testes utilizados nos bancos de sangue so geralmente qualitativos ou
semiquantitativos para a deteco de anticorpos e antgenos. O princpio bsico desses
ensaios a formao do complexo antgeno-anticorpo. Em um teste em que se deseja
pesquisar a presena de anticorpo na amostra (analito), o reagente principal da reao ser o
antgeno correspondente ao anticorpo. O reagente principal fica aderido fase slida da

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reao. O reagente secundrio geralmente adicionado em um segundo passo, e tem o
objetivo de sinalizar a presena do analito pela formao de cor ou emisso de luz. Para que
todo o processo ocorra, outros reagentes como a enzima e o substrato tambm so utilizados.
A fase slida assim denominada porque est aderida placa, ou partcula de reao. Nos
QIA mais modernos, a fase slida est aderida a uma partcula que se torna fixa nos momentos
das lavagens por um mecanismo fsico. Comumente, so utilizadas partculas magnticas em
que o reagente primrio est aderido e que se tornam fixas por meio de um campo magntico.
A fase slida essencial para impedir que os reagentes e o complexo antgeno-anticorpo que
se forma durante a realizao dos testes sejam lavados, levando a resultados falso-negativos.

2.2.2 Anticorpos

Os anticorpos so imunoglobulinas (Ig) produzidas em resposta a estmulos


antignicos. So molculas heterogneas e com funes diferentes. Existem cinco classes de
Ig: IgG, IgM, IgA, IgE e IgD. Cada molcula de Ig possui uma cadeia pesada e uma cadeia leve,
k ou l. Sua estrutura composta por uma regio constante e uma regio varivel. A regio
varivel responsvel pela determinao da especificidade do anticorpo.
Os anticorpos podem ser classificados como policlonais e monoclonais. Anticorpos
policlonais so obtidos por meio da imunizao com um antgeno. Trata-se da resposta natural
de um organismo estimulao antignica. A avidez de um anticorpo policlonal pelo antgeno
especfico , em geral, mais forte que a de um nico anticorpo monoclonal. Anticorpos
monoclonais so obtidos por meio da estimulao clonal de clulas produtoras de Ig. Eles so
definidos como anticorpos homogneos direcionados a eptopos especficos.
Anticorpos monoclonais no tm a capacidade de reconhecer molculas inteiras, em
contraste com os policlonais, fator determinante para sua alta especificidade. Entretanto,
reconhecem antgenos diferentes como nicos, quando esses antgenos apresentam eptopos
semelhantes, o que pode levar a reaes falso-positivas. A utilizao de anticorpos
monoclonais em IE apresenta as seguintes vantagens: so reagentes bem definidos, estveis
e homogneos, o que garante pouca variao intra e inter-ensaio, pois a variao entre lotes
de produo diminui de forma importante; podem ser produzidos em quantidades ilimitadas;
e apresentam alta afinidade e especificidade para um determinado antgeno.

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2.2.3 Antgenos

Os antgenos so substncias capazes de produzir anticorpos correspondentes. Uma


protena ou um peptdeo viral, um hormnio, um hapteno ou uma sequncia de aminocidos
podem ser considerados antgenos. O HBsAg um exemplo de antgeno utilizado na triagem
e diagnstico da Hepatite B. Os antgenos podem ser naturais ou artificiais (recombinantes).
A utilizao de antgenos recombinantes tambm possibilitou grande aumento na
sensibilidade, especificidade e na reprodutibilidade das reaes.

2.2.4 Imunoensaios

Existem diversas padronizaes de IE, que variam consideravelmente de acordo com


os diferentes fabricantes dos kits. Tempo e temperatura de incubao so provavelmente os
fatores mais importantes na padronizao dos IE e devem ser seguidos exatamente como
determinados pelo fabricante. Outras questes que devem ser observadas so: conservao
dos kits, a temperatura do kit no momento de realizao dos testes e a temperatura ambiente
do laboratrio.
Os procedimentos de lavagem entre os passos de realizao dos IE podem influenciar
os resultados dos testes laboratoriais excesso ou falta de lavagem podem levar a resultados
falso-positivos e, o mais grave, resultados falso-negativos. de vital importncia que os testes
sejam validados e que a equipe seja treinada em cada ensaio. Somente a total padronizao
dos ensaios por meio da validao, do treinamento, das manutenes, calibraes e correes
dos equipamentos, pode garantir o mximo de segurana e qualidade dos processos.
Os dois tipos de IE mais comuns so os competitivos e os ensaios duplo sanduche. So
tcnicas muito sensveis, capazes de detectar quantidades muito pequenas de antgenos e
anticorpos. Nos ensaios competitivos, um excesso de antgeno, marcado com uma enzima ou
com uma partcula quimiluminescente, adicionado fase slida da reao e compete para
se ligar ao anticorpo a presente.
EIE competitivo quando a reao positiva, somente o analito (antgeno presente na
amostra) se liga fase slida. Nesta situao, no h mudana de cor nos ensaios enzimticos

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ou emisso de luz nos ensaios quimiluminescentes pois o analito presente na amostra vai se
ligar em todo anticorpo presente na fase slida da reao, no deixando stios de ligao
disponveis para o antgeno marcado. Quando a reao negativa no existe analito na
amostra, e somente o antgeno marcado se liga ao anticorpo da fase slida. Nesse caso, ocorre
mudana de cor ou emisso de luz.
Os ensaios competitivos tambm podem ser desenhados para a pesquisa de
anticorpos, e a fase slida, nessa situao, constituda por um antgeno. O ensaio enzimtico
duplo sanduiche, o antgeno presente na amostra se liga ao anticorpo da fase slida da reao.
Ao se adicionar um excesso de anticorpo correspondente a um stio de ligao diferente no
antgeno, ocorre a formao de cor ou emisso de luz indicando reao positiva. Os ensaios
tipo sanduche podem tambm pesquisar a presena de anticorpos na amostra, e utilizam,
nesses casos, um antgeno como fase slida. Atualmente, muitos ensaios fazem pesquisa
simultnea de antgenos e anticorpos. Nesse contexto, a fase slida formada por antgenos
e anticorpos (Ag/Ab) como reagentes.
O VDRL (Veneral Disease Research Laboratory) amplamente utilizado na triagem
sorolgica de sfilis nos bancos de sangue. um teste no treponmico, porque no possui
antgenos especficos do Treponema pallidum, agente transmissor da sfilis. O VDRL emprega
cristais de colesterol que so sensibilizados com lecitina e cardiolipina para a pesquisa de
anticorpos. Quando esses anticorpos esto presentes, h formao de flculos, determinando
resultado positivo, enquanto o negativo apresenta aspecto homogneo e sem agregados.
Os anticorpos detectados pelo VDRL aparecem de uma a quatro semanas aps o
aparecimento do cancro primrio e permanecem positivos por muitos anos, caso o paciente
no seja tratado. Esse teste utilizado na triagem da sfilis e no controle do tratamento. Os
testes no treponmicos apresentam sensibilidade de 78% a 86% na sfilis primria. Na sfilis
secundria, a sensibilidade dos testes chega a aproximadamente 100%. Com o passar dos anos
e a evoluo da doena, a sensibilidade diminui, sendo 95% e 71% durante a sfilis latente e
terciria, respectivamente. Resultados falso-positivos: doenas agudas, como hepatites e
outras infeces virais, na gravidez e cronicamente nas doenas do tecido conectivo (Lpus
Eritematoso Sistmico). Devem ser confirmados com testes treponmicos.
Sensibilidade: a probabilidade de um teste ser positivo na presena da doena, ou seja,
a capacidade de reao de um determinado ensaio quando um paciente est doente. Bancos

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de sangue utilizam testes com alta sensibilidade para detectar qualquer possibilidade de
infeco. Quando o resultado de um teste negativo e o indivduo est doente, ou tem a
possibilidade de transmitir a doena, o resultado um falso-negativo.
Especificidade: a probabilidade de um teste ser negativo na ausncia de doena, ou
seja, a capacidade de um teste ter um resultado negativo quando o paciente no est doente.
Aumento na sensibilidade de um determinado ensaio afeta negativamente sua especificidade.
Quando um ensaio definido para detectar todos os casos positivos de uma determinada
populao, ele tambm reativo para alguns casos negativos, resultado denominado falso-
positivo. Ou seja, no existe doena e o resultado do teste positivo. O Valor Preditivo Positivo
(VPP) e o Valor Preditivo Negativo (VPN) so de grande importncia. O VPP mede a
probabilidade de um paciente estar doente quando o seu teste positivo. Nos casos em que
o teste aplicado em uma populao que apresenta baixa prevalncia da doena, como no
banco de sangue, o VPP muito baixo e o VPN alto

3. FENOTIPAGEM DOS ANTGENOS ERITROCITRIOS

3.1 COLETA DE SANGUE

O procedimento de coleta deve ser realizado por profissionais de sade treinados, sob
a superviso de mdicos ou enfermeiros. Formas de coleta: Sangue total, doar componentes
especficos do sangue cuja coleta feita por afrese. Sala de coleta: Importante para que a
doao acontea de forma segura tanto para o doador quanto para o profissional que far o
seu atendimento. Normas sanitrias determinam os requisitos necessrios para este
ambiente. As cadeiras de doao devem ser confortveis. Aparelhos, como
homogeneizadores, seladoras, alicates de ordenha de tubos coletores, softwares e
equipamentos de informtica acrescentam segurana e qualidade aos procedimentos. Os
homogeneizadores devem ser calibrados sempre que necessrio e monitorados diariamente,
pois so importantes para garantir que o volume de sangue coletado esteja correto.
obrigatrio que o setor conte com local adequado e recursos para atendimento a doadores
com reaes adversas doao incluindo situaes de emergncia como crise convulsiva e

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parada cardiorrespiratria. Nas unidades mveis de coleta esses aspectos tambm devem ser
observados. Fornecer lanche para os doadores.
Material de coleta: O sangue total coletado em sistema fechado, aprovado Anvisa,
estril, apirognico, resistente, que permita a troca de gases, previna a evaporao de lquidos
e que seja de uso nico. Formado por uma bolsa de coleta que contm uma soluo
conservante e anticoagulante e que est ligada a outras bolsas denominadas bolsas-satlites,
que podem ser em nmero de 1 a 3, formando um sistema de bolsas duplas, triplas ou
qudruplas, possibilitando seja posteriormente separado em seus componentes.
Sistema de bolsas: Bolsa coletora; Bolsa-satlite; Bolsa-satlite; Minibolsa para desvio
de fluxo e coleta de amostras; Agulha; Tubo coletor; Tubos de coleta de amostras. O sistema
de coleta deve possuir rtulo de identificao informando o nome do fabricante, o material
de que foi fabricado, a composio e o volume da soluo anticoagulante e o nmero do lote
de fabricao. Esses dados devem estar tambm disponveis em cdigo de barras para leitura
informatizada na coleta. O rtulo contendo os dados de identificao do sistema de coleta
deve ser atxico, resistente umidade, centrifugao e ao congelamento.
Checagem antes da coleta e estabelecimento de vnculos: Apenas o doador apto na
triagem deve passar por essa fase do processo de doao. O tipo de bolsa e o volume de
sangue a ser coletado so determinados pelo triador. Esse volume deve ser no mximo 8ml/kg
de peso para mulheres e 9ml/kg de peso para homens, que corresponde a 450ml 45ml por
doao aos quais podem ser acrescidos at 30ml para as amostras, nas quais sero realizados
os exames laboratoriais exigidos pelas normas tcnicas. A bolsa deve ser inspecionada antes
da sua etiquetagem para a coleta. Se anormalidades forem encontradas, a bolsa deve ser
segregada e o fabricante comunicado. Antes da coleta, devem ser estabelecidos vnculos entre
o doador, a bolsa de coleta e os tubos de amostras. O nome do doador no deve constar das
etiquetas das bolsas exceto quando destinadas doao autloga.
A doao autloga aquela em que o doador doa para si mesmo. Ocorre geralmente
quando o indivduo se encontra em boas condies de sade e vai ser submetido a uma
cirurgia eletiva com possibilidade de precisar de transfuso de sangue. Os critrios de seleo
para a doao autloga so menos estritos que os necessrios para um doador convencional
e as coletas devem ocorrer entre 30 dias e 72 horas antes da cirurgia. As coletas ocorrem da
forma usual, nas bolsas faz-se necessrio uma etiqueta complementar com o nome completo

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do doador/paciente, seu nmero de identificao, o local e a data prevista para uso. Na
doao autloga, permitida a coleta de sangue de doadores com peso abaixo do exigido
para doao e, nesses casos, com adequao da quantidade de anticoagulante da bolsa.
Identificao e preparo do doador: O momento do recebimento do doador para a
coleta do sangue importante, no sentido de deix-lo bastante vontade, seguro e relaxado
para que a doao transcorra sem problemas e depois porque se faz necessria muita ateno
a fim de evitar enganos e trocas nessa fase. necessrio que o profissional confirme os dados
do doador sendo recomendvel que apresente seu documento de identificao nesse
momento. O doador deve sentar-se confortavelmente na cadeira de doao. Uma vez
selecionada a veia, acomodado o doador e checada a sua identificao, o flebotomista dever
paramentar-se e preparar o material para a coleta. Os equipamentos de proteo individual
(EPIs) recomendados so avental de manga longa (de uso contnuo no setor), luvas de
procedimentos e protetor de face.
Antissepsia da pele: Embora seja impossvel garantir esterilidade da superfcie da pele
do doador, a antissepsia no local da flebotomia deve ser a melhor possvel para prevenir a
contaminao do sangue coletado. Solues com clorexidina a 2% ou a base de Iodo.
Alternativas para doadores que se declararem alrgicos.
Puno venosa e coleta de sangue: Selecionar uma veia na fossa antecubital que seja
proeminente, calibrosa e firme. Tentar conseguir o acesso venoso em uma nica puno,
evitando-se puncionar locais com leses dermatolgicas, ondulaes e cicatrizes de punes
anteriores. Aps a puno e o desvio da quantidade inicial do sangue para a bolsa acessria e
liberar para a bolsa coletora e misturado soluo anticoagulante (60 a 65ml) o que est
adequado para coleta de 450ml 50ml de sangue. Durante a coleta, as bolsas devero ser
continuamente homogeneizadas, preferencialmente, com auxlio de um homogeneizador,
sendo o tempo ideal de coleta de 12 minutos e nunca deve ultrapassar 15 minutos. Prevenir
reaes adversas doao: antes da coleta, deve ser oferecida ingesto de lquidos a todos
os doadores, e lanche leve queles que estiverem em jejum, hidratao e um lanche ao doador
e o ideal que ele permanea no mnimo 15 minutos no servio antes de sua liberao.
Acondicionamento da bolsa aps a coleta: As bolsas de sangue total, logo aps a
coleta, idealmente, devem ser resfriadas at a temperatura de 20C 2C utilizando sistemas
validados; no caso de preparo somente de concentrado de hemcias e plasma fresco

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congelado, este resfriamento no necessrio. As bolsas de sangue total devem ser
acondicionadas obedecendo aos seguintes critrios: Se forem destinadas ao preparo somente
de concentrado de hemcias (CH) e plasma fresco congelado (PFC), devem ser acondicionadas
a 4C 2C o mais brevemente possvel. Se forem destinadas ao preparo tambm de
concentrados de plaquetas, devem ser acondicionadas entre 20C e 24C at que os
hemocomponentes sejam produzidos.
Voto de auto excluso: recomendvel que os servios de hemoterapia ofeream ao
doador a possibilidade de participar do procedimento de auto excluso.
Reaes adversas doao de sangue total: A incidncia de reaes adversas em
doadores de sangue total, pode chegar a um tero das doaes. Os eventos mais comuns,
avaliados nessas condies, so a equimose (22,7%), a dor no brao (10%), a fadiga (8%) e a
reao vasovagal (7%). Reaes sistmicas: Fadiga; Reao Vasovagal: relativamente comuns
em doadores de sangue. Tratamento de acordo com sintomas. Possuem incidncia entre 2,5
(ocorrncia no servio de hemoterapia) a 7% das doaes; Reaes mais graves, com perda
da conscincia e convulses, so raras. Caracteriza-se por palidez cutneo-mucosa, sudorese,
sensao de frio ou calor, fraqueza, tonteira, cabea leve, falta de ar, nusea, vmito,
bradicardia, hipotenso, perda da conscincia, contraturas musculares, tetania, convulses e
perda do controle esfinctrico com consequente mico e/ou defecao involuntrias.
Doao por afrese: o processo pelo qual o sangue retirado de um indivduo,
doador ou paciente, com separao de seus componentes por um equipamento prprio,
retendo a poro do sangue que se deseja retirar e devolvendo os demais componentes a
doador/paciente. Incio do sculo XX, mas s na dcada de 1970 houve o desenvolvimento de
equipamentos capazes de realizar o procedimento de forma segura e em larga escala, o que
possibilitou sua ampla utilizao. No servio de hemoterapia, a afrese pode ser utilizada para
produo de hemocomponentes especficos, como tambm para remoo de clulas ou
plasma relacionados ao desenvolvimento de patologias e sua substituio por lquidos de
reposio ou clulas sadias, em procedimentos teraputicos. A afrese pode ser realizada por
vrios mtodos, dentre eles centrifugao e filtrao.
O mtodo de centrifugao o mais comum no Brasil. O princpio bsico desse mtodo
a diferena de densidade entre as clulas sanguneas e o plasma e das clulas entre si,
permitindo que os componentes sejam agrupados e coletados. A quantidade de

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anticoagulante utilizada determinada de acordo com o tempo do procedimento e volume
de sangue total processado e deve ser acompanhada durante toda a coleta para que no cause
efeitos adversos no doador. O volume sanguneo extracorpreo no dever superar 15% do
volume sanguneo total (volemia).
Vantagens: Menor exposio do paciente a doadores, resultando em menor risco
transfusional (contaminao infecciosa) e de aloimunizao. Desleucocitao pr-estocagem
por meio de filtros para leuccitos acoplados aos kits de coleta ou utilizao de mtodos
especficos de leucorreduo. Possibilidade de transfuso de plaquetas compatveis com
antgenos leucocitrios e plaquetrios. Menor risco de contaminao bacteriana. Melhor
padronizao dos componentes coletados. Melhor aproveitamento da coleta otimizando a
visita do doador ao servio com coleta de mltiplos componentes e possibilidade de maior
nmero de doaes.
Desvantagens: Seleo de doadores com critrios mais especficos, restringindo o
nmero de doadores. Maior tempo de coleta. Maior custo do procedimento. Necessidade de
melhor infraestrutura e pessoal tcnico com treinamento especifico para operar
equipamentos e para detectar/manusear efeitos adversos. Necessidade de aes especificas
para captao/atendimento ao doador. Limitao da utilizao em coletas externas.
Critrios especficos para coleta de hemocomponentes por afrese (plasma):
Intervalo mnimo entre procedimentos de 48 horas com no mximo 4 doaes no perodo de
2 meses e 12 doaes por ano. Monitoramento da dosagem de protena total srica e de IgG
e IgM a cada 4 meses para doadores com mais de uma doao em 4 semanas. O volume de
plasma por coleta no deve exceder 10ml/kg. Se houver perda acidental de hemcias durante
a doao de plasma superior a 200ml ou se houver doao de uma unidade de sangue total o
intervalo para uma nova doao por afrese deve ser de pelo menos 4 semanas.
Critrios especficos para coleta de hemocomponentes por afrese (plaquetas):
Intervalo mnimo de 48 horas com no mximo 4 doaes por ms e 24 por ano. Realizar
contagem de plaquetas no dia da doao ou nos trs dias anteriores. A contagem mnima de
plaquetas para doao de 150 x 103/L com estimativa de contagem no final do
procedimento de pelo menos 100 x 103/L. Se houver perda acidental de hemcias durante a
coleta de plaquetas superior a 200ml ou se houver doao de uma unidade de sangue total o
intervalo para uma nova doao por afrese deve ser de pelo menos 4 semanas.

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Critrios especficos para coleta de hemocomponentes por afrese (granulcitos):
Deve existir protocolo especfico para realizao desse procedimento no servio de
hemoterapia, especificando inclusive o uso de estimuladores da granulopoese e sua liberao
(GCSF e/ou corticosteroides) e hemossedimentantes. A coleta s poder ser feita com
contagem de leuccitos superior a 5 x 10/L. obrigatria a contagem de granulcitos.

3.2 PROCESSAMENTO, ARMAZENAMENTO E DISTRIBUIO

A doao concretiza-se no momento da coleta do sangue, que chamado de sangue


total (ST), que composto por hemcias, leuccitos, plaquetas e plasma. Seguindo o fluxo do
processo, aps a triagem clnica, o doador encaminhado para a sala de coleta e depois desta
etapa iniciado o processamento do sangue total. Na coleta, so utilizados conjuntos de
bolsas estreis de diversas configuraes, que contm uma soluo anticoagulante
(preservadora) e em alguns casos, alm do anticoagulante, possuem tambm uma soluo
aditiva que ficar em contato com as hemcias aps a separao.
As bolsas de coleta diferem quanto ao nmero de bolsas-satlites ou transferncia
acopladas bolsa matriz, diferenciando-se em bolsas duplas, triplas e qudruplas. As bolsas
convencionais so aquelas em que todas as suas bolsas-satlites ligam-se bolsa matriz por
sua parte superior. As bolsas top and bottom, as bolsas-satlites ligam-se matriz tanto pela
parte superior quanto pela inferior. Existem tambm bolsas de coleta que possuem filtros
acoplados para remoo de leuccitos tanto do sangue total quanto de hemocomponentes.
Os anticoagulantes so solues cujas funes so evitar a formao de cogulos e
manter a viabilidade dos constituintes do sangue, principalmente, das hemcias. Solues
aditivas, elas so compostas por substncias que contribuem para aumentar a sobrevida das
hemcias possibilitando que elas sejam utilizadas por um tempo maior. A soluo
anticoagulante fica na bolsa matriz que onde o ST ser recebido (60ml e 65ml). As solues
aditivas, podem estar presentes em diferentes posies dependendo da configurao das
bolsas, sendo seu volume de aproximadamente 100ml. Capacidade total da bolsa de 450ml.
As solues preservadoras mais utilizadas pelas indstrias de bolsas so: ACD, CPD,
CPDA1 e as associaes de CPD + soluo aditiva. Os principais constituintes das frmulas dos
anticoagulantes possuem funes diferentes que podem ser assim descritas: cido Ctrico

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diminui o pH; dextrose fonte de ATP; Citrato um anticoagulante; Fosfato previne quedas
no pH; Adenina fonte de ATP; Manitol conserva a membrana das hemcias.
Produo de hemocomponentes: Concentrado de hemcias (CH): composto
fundamentalmente por hemcias, contendo plasma, leuccitos e plaquetas em pequena
quantidade. Plasma fresco congelado (PFC): corresponde ao plasma com todos os fatores de
coagulao preservados. Concentrado de plaquetas (CP): composto por plaquetas e um pouco
de plasma e leuccitos. Plasma comum (PC): representa o plasma sem os fatores lbeis da
coagulao (fatores V e VIII). Crioprecipitado (Crio): composto por fibrinognio, fatores de
coagulao VIII e XIII, plasma e fator de Von Willebrand. Plasma isento de crio (PIC): o plasma
do qual foi retirado o crioprecipitado, portanto um plasma com baixa quantidade de fatores
de coagulao, em especial o pouco fator VIII. Plasma Fresco Congelado em 24 horas (PFC24):
o plasma separado entre 8 e 24 horas aps a coleta do ST e congelado em at duas horas.
Aps a separao, os hemocomponentes podem passar por outras etapas, como irradiao,
desleucocitao, aliquotagem, lavagem. J o plasma pode ser encaminhado para indstrias a
fim de serem produzidos os hemoderivados. Os hemocomponentes so obtidos por mtodos
fsicos a partir da separao do ST em camadas por um processo de centrifugao diferencial.
Os hemoderivados so medicamentos oriundos do processamento industrial.
Centrifugao: O processo de centrifugao de bolsas de sangue feito em centrfugas
refrigeradas que devem ser calibradas periodicamente e includas em programas de
manuteno preventiva e corretiva. A primeira etapa na preparao do hemocomponentes
a centrifugao primria do ST. A partir dessa centrifugao, sero obtidas uma unidade de
CH e uma unidade de plasma que ser fresco ou no, conforme o intervalo de tempo da coleta
ao processamento e ao congelamento completo do mesmo. Para a extrao de CH, plasma e
plaquetas, so utilizadas duas tcnicas de centrifugao: Para a extrao de CH, plasma e
plaquetas, so utilizadas duas tcnicas de centrifugao: PRP e Buffy Coat.

3.2.1 Tcnica de PRP (Plasma Rico Em Plaquetas)

Esta metodologia amplamente utilizada pelos servios de hemoterapia no Pas. A


metodologia do PRP consiste em centrifugar o ST temperatura de 20C em uma
centrifugao leve de 2.000 rpm por 3 minutos, de forma que haver a separao do sangue

21
em duas fases: a superior, que uma suspenso de plaquetas e plasma (PRP) e a outra que
fica no fundo da bolsa onde esto as hemcias e os leuccitos. Aps a extrao das fases, o
concentrado de hemcias estar pronto e o PRP dever ser centrifugado novamente,
temperatura de 20C 2C, desta vez, em uma centrifugao pesada (usualmente, 5.000
rpm por 7 minutos), para que as plaquetas sejam sedimentadas e seja possvel separar o
plasma do concentrado de plaquetas deixando no CP um volume de plasma (40ml a 70ml) no
concentrado de plaquetas suficiente para manter o pH do CP maior ou igual a 6,4 no ltimo
dia de armazenamento. Desvantagens: Grande formao de agregados nos concentrados de
plaquetas. Alto risco de contaminao dos concentrados de plaquetas com hemcias. Baixa
recuperao de plasma.

3.2.2 Buffy Coat

Na metodologia do buffy coat, o ST centrifugado entre 20C 2C a uma rotao alta,


2.800 rpm por 11,5 minutos. A estratificao do sangue feita em trs fases: na primeira
camada, no fundo da bolsa, ficam as hemcias. formada uma camada com leuccitos e
plaquetas, e em cima fica o plasma. Aps a extrao das fases, o plasma sobrenadante pela
parte superior da bolsa e as hemcias pela parte inferior da bolsa, preferencialmente
utilizando extrator automtico, o concentrado de hemcias e o plasma fresco estaro prontos.
O buffy coat permanece na bolsa. Desvantagem: a necessidade de utilizar apenas os
extratores automticos para a extrao dos hemocomponentes. Vantagens: Possibilita uma
maior retirada de plasma do CH devido presena de soluo aditiva nas bolsas top and
bottom, o que diminui as reaes transfusionais por presena de protenas plasmticas.
Possibilita recuperar um volume maior de plasma tambm devido presena da soluo
aditiva no CH. Menor risco de formao agregados nos concentrados de plaquetas.
Diminuio do nmero de leuccitos dos hemocomponentes devido na sua separao das
hemcias e plasma. Extrao das fases separadas na centrifugao Finalizada a
centrifugao, as caapas devero ser transportadas cuidadosamente at os equipamentos
que iro efetuar a extrao dos hemocomponentes.
Para efetuar a extrao dos hemocomponentes aps a centrifugao do ST, podem ser
utilizados dois tipos de equipamentos: Extrator manual de plasma: um dispositivo simples e

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Extrator automtico: um dispositivo eletrnico. Aps a separao dos hemocomponentes,
importante efetuar o registro do que foi produzido em sistemas de informao, de forma a
garantir a rastreabilidade do processo. Finalizao do processamento e armazenamento dos
hemocomponentes produzidos. Depois disso, as bolsas podero ser levadas para o
armazenamento no liberado enquanto aguardam a liberao dos resultados dos testes
sorolgicos, moleculares e imuno-hematolgicos. A seguir, o plasma dever passar por uma
inspeo a fim de avaliar se h alguma alterao de cor ou outras alteraes que impeam o
seu uso. Os casos mais comuns so: Cor avermelhada, indicando hemlise ou contaminao
com hemcias; Cor esverdeada, normalmente relacionada ao uso de contraceptivos orais;
Turvao, significando lipemia por presena excessiva de gorduras. Presena de fibrina. Caso
a bolsa de plasma esteja visualmente em condies de uso, ela dever ser pesada para avaliar
se o volume est dentro do valor padro que maior ou igual a 150ml.
Concluda a inspeo, o PFC dever ser congelado a -30C ou mais frio. Finalizado o
congelamento, o plasma dever ser armazenado, aguardando a liberao dos resultados dos
testes de triagem e de imuno-hematologia, para ento ser liberado para uso. O plasma poder
ser classificado: Plasma fresco congelado, que aquele cuja separao ocorreu em at seis
horas aps a coleta e o congelamento em at duas horas aps o processamento; Plasma fresco
dentro de (PFC24) 24 horas, que o plasma cuja separao ocorreu entre 8 e 24 horas e o
congelamento em at duas horas aps a separao. Os CP, dependendo da metodologia de
produo, aps a centrifugao, precisam ser deixados em descanso sobre uma bancada (1
hora) com a face onde est o rtulo voltada para a bancada a fim de desfazer os agregados
formados durante a centrifugao. importante inspecionar as bolsas para verificar as
possveis mudanas de colorao. Aps esses cuidados, as plaquetas devero ser armazenadas
entre 20C e 24C para aguardar os resultados dos testes.

3.3 SISTEMA KELL

Grande importncia na medicina depois dos sistemas ABO e Rh, pois os antgenos so
potentes imungenos. 1946: Descoberto aps a introduo do teste da antiglobulina. Foi o
primeiro antgeno descrito. Foi descoberto aps uma mulher ter dado luz uma criana com
DHRNP. Presentes tambm em rgos linfides, crebro, corao, msculo esqueltico,

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pncreas, testculos e clulas progenitoras mielides. O anti-K na maioria das vezes imune,
mas pode ocorrer de forma natural. O anti-k, descoberto em um caso de DHRN, um antgeno
imune. O sistema associa-se ao sitema Kx, o qual apresenta apenas um antgeno, o Kx.
Estrutura proteica: A glicoprotena que contm os antgenos Kell se liga ao antgeno Kx por
meio de pontes dissulfdricas. Composto pela protena Kell, uma glicoprotena tipo II de 93 kd
com 732 aa. Forte associao entre as glicoprotenas Kell e XK na membrana da hemcia.
Ausncia ou reduo da glicoprotena Kell resulta na elevao de XK.
Fentipo McLeod: perda de XK: enfraquecimento da expresso dos antgenos Kell.
Distribuio/frequncia dos antgenos: antgenos Kell esto presentes nos eritrcitos em baixa
densidade. Bem desenvolvidos ao nascimento. Imunognicidade: antgeno K (K1) 3 vezes
mais imunognico que c e E; 20 vezes mais imunognico que os demais antgenos, mas 6 vezes
menos que o D. Probabilidade de sensibilizao aps transfuso de uma unidade de sangue
K+ de 10%. Importncia clnica: Anticorpos do sistema Kell: Reao transfusional hemoltica;
Doena hemoltica do recm-nascido (DHRN); Sndrome de McLeod.

3.3.1 Aloimunizao

Principal complicao clnica associada ao sistema Kell podendo causar reao


hemoltica transfusional. Importante nos pacientes submetidos a regimes de transfuso
crnica. Responsvel por 30% do total de aloanticorpos detectados.

3.3.2 Doena Hemoltica Do Recm-Nascido

Aproximadamente 10% dos casos de anemia fetal e neonatal so causados por anti-K
Pode ser grave e apresenta-se mais como supresso da eritropoese do que por destruio
imune das hemcias fetais. 50% dos bebs acometidos requerem fototerapia associada ou
no a transfuso. A maioria destas crianas necessita de transfuses peridicas at a
eritropoese ser totalmente restabelecida. Plaquetopenia associada.

3.3.3 Anemia Hemoltica Auto-Imune

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Sabe-se que 1/250 casos de AHAI devido a anticorpos contra antgenos do sistema
Kell. Geralmente AC classe IgG a quente. Anti-K o mais frequente, mas Anti-Kpa e Anti-K13
tm sido descritos. Quadro clnico varivel, de leves a graves. Infeces virais e bacterianas,
causadas por agentes com estrutura semelhante do sistema Kell, poderiam ser responsveis
pelo processo auto-imune e pela inibio transitria da expresso dos antgenos Kell.

3.3.4 Sndrome de McLeod

Caracteriza-se pela ausncia da protena XK na membrana eritrocitria, fraca


expresso dos antgenos do sistema Kell, acantocitose, anemia hemoltica leve e herana
ligada ao sexo. Alteraes genticas decorrem de grandes ou pequenas delees, mutaes
de ponto e inseres no gene XK. Clinicamente: cardiopatia em 75% dos pacientes,
hepatoesplenomegalia em 40%, doena granulomatosa crnica, distrbios neurolgicos e
neuromusculares de incio na 4. Dcada de vida.

3.3.5 Sindrome Duffy

1950: Descrito sistema Duffy por Cutbush e cols. Durante a investigao de uma reao
transfusional hemoltica em paciente hemoflico politransfundido. Relevncia clnica:
pacientes transfundidos poderem desenvolver incompatibilidade transfusional e estar
relacionado com casos de DHPN. O produto do gene Duffy uma com 35 a 43 kDa que
expressa antgenos Duffy. Presentes em medula ssea, bao, rins, pncreas, msculo
esqueltico, pulmo, corao, clon de adultos, fgado fetal, placenta e crebro. Expressa em
clulas endoteliais de vrios tecidos, exceto fgado.
Aspectos funcionais: A glicoprotena Duffy quimiorreceptora nas hemcias para
diversas substncias, como quimiocinas (IL-8, Melanoma Growth Stimulating Activity (MGSA)
e receptora para o Plasmodium vivax e Plasmodium knowlesi, sendo essencial para a invaso
desses parasitas. Fentipo comumente encontrado em indivduos negros africanos, so
naturalmente resistentes malria pelos plasmdios citados.

3.4 SISTEMA KIDD

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1951: Descoberta de um novo anticorpo no soro da me de um recm-nascido com
doena hemoltica do recm-nascido. As denominaes Kidd e Jk derivam do nome da me e
das iniciais da criana. 1953: Aps 2 anos, foi detectado o anticorpo anti-Jkb em uma paciente
que desenvolveu reao hemoltica transfusional.
Estrutura protica e funo: A glicoprotena Kidd atravessa a membrana eritrocitria dez vezes
e apresenta cinco laos extracelulares. A protena Kidd expressa nos eritrcitos e nas clulas
endoteliais da medula renal. A protena integral e tem funo d.
Bases moleculares: o gene JK ou SLC14A1 composto por 11 xons e 30 kb. Os xons
4-11 codificam uma glicoprotena multipasso de 391 aminocidos, que atravessa 10 vezes a
membrana do eritrcito. Est localizado no cromossomo 18q11-q12. Distribuio e freqncia
dos antgenos: os antgenos Jka e Jkb esto bem desenvolvidos ao nascimento (so detectados
em torno da 7. a 11 semanas de gestao), e podem ser encontrados, alm de eritrcitos,
em clulas endoteliais do rim e transporte de uria, preservando a estabilidade osmtica e a
deformidade do eritrcito.
Imunogenicidade: apesar da moderada imunogenicidade dos antgenos, os anticorpos
Kidd (anti-Jka e anti-Jkb), esto envolvidos em severas reaes hemolticas imediatas e tardias,
em politransfundidos, e podem ocasionar DHPN no-severas. Fentipos raros: Jk (a-b-) raro,
originado de gene silencioso Jk em homozigose, ou de gene inibidor In (JK), no herdado no
mesmo locus Kidd e transmitido de maneira dominante.
Os anticorpos contra os antgenos do sistema Kidd podem induzir uma rpida e intensa
resposta anamnstica que responsvel por causar, principalmente, reaes transfusionais
hemolticas tardias e, raramente, doena hemoltica do recm-nascido e anemia hemoltica
auto-imune. Os anticorpos Kidd so geralmente IgG e fixam complemento.

3.5 SISTEMA MNS

Segundo sistema doe grupos sangneos a ser descoberto. S perde em complexidade


para o sistema Rh. So 38 antgenos do Sistema MNS reconhecidos pela International Society
of Blood Transfusion (ISBT). Em 1999, houve a incluso de mais 5 antgenos: ENEP, ENEH, HAG,

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ENAV e MARS. Expressos em 2 molculas hbridas. Os antgenos M, N, S, s e U so mais
importantes do sistema MNS.
Os antgenos MNS so expressos sobre as glicoforina A (GPA) e B (GPB), as quais so
ricas em cido silico e com passagem nica atravs da membrana do eritrcito. A poro
carboxiterminal (C) de cada glicoforina se estende para dentro do citoplasma da hemcia,
enquanto um segmento hidrofbico est embutido dentro da dupla camada lipdica. Um
segmento aminoterminal (N) se prolonga para o ambiente extracelular. As molculas de GPA
e GPB so sensveis a clivagem pela ao de proteases em diferentes posies.
Fentipos null: Polimorfismos dos genes GYPA e GYPB. Alguns esto representados
pela deficincia total ou parcial das GPA e GPB. Os genes que codificam os antgenos do
sistema MNS esto situados no cromossomo 4 (4q28-31). O Gene que codifica a GPA o GYPA
e o gene que codifica a GPB o GYPB. O gene GYPE foi descoberto posteriormente e est
presente no DNA de todos os seres humanos.
Antgenos de Baixa Freqncia: Apresenta grande nmeros de antgenos de baixa
freqncia. Anticorpos do Sistema MNS: Anti-M, Anti-N, anti-S, s e U. Anti-M: raramente
significado clnico; Anti-N: Pacientes submetidos a hemodilise podem apresentar autoanti-
N, estimulados pelo formaldedo utilizado na desinfeco dos equipamentos de dialise; Anti-
U: africanos, mas em outros povos raro.

3.6 SISTEMA SAN DIEGO

Primeiro antgeno descrito em 1955 em uma famlia da Venezuela, Diego e recebeu o


nome de antgeno Dia. Soro de uma mulher da famlia com DHPN. Seu par antittico o
antgeno Dib, s foi descoberto mais tarde. O Sistema do grupo sanguneo Diego, consiste de
21 antgenos, sendo 02 pares de antgenos antitticos. Apresenta um antgeno polimrfico em
pessoas de origem monglica e de alta frequncia em ndios. Foram descritas mais de dez
mutaes, todas raras. A sua funo est ligada ao transporte de nions de bicarbonato em
troca de cloreto atravs da membrana eritrocitria, revertendo o acmulo de bicarbonato nas
hemcias e facilitando seu transporte

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4. PESQUISA E IDENTIFICAO DE ANTICORPOS ERITROCITRIOS

4.1 IMUNO-HEMATOLOGIA

A imuno-hematologia responsvel pela anlise laboratorial deste sangue


proporcionando ao paciente maior segurana transfusional. Os testes imuno-hematolgicos
possuem a capacidade de detectar, na membrana da hemcia, os antgenos de grupos
sanguneos e, no soro ou plasma, os anticorpos dirigidos contra antgenos eritrocitrios.
Membrana da hemcia: Mosaico fluido composto de protenas, lipdios e glicdios.
Estes elementos esto organizados em uma dupla camada lipdica onde esto situados os
antgenos eritrocitrios.
Antgenos eritrocitrios: Substncias capazes de induzir o sistema imune formao
de um anticorpo e de se combinar com ele. Os antgenos podem ser acares ou protenas.
Ex.: antgenos do sistema ABO so carboidratos (acares) ligados a protenas ou lipdeos da
membrana. Os antgenos Rh, Duffy, Kidd e Diego so protenas que atravessam a membrana
da hemcia vrias vezes.
Anticorpos: So protenas plasmticas, imunoglobulinas, produzidas especificamente
pelo sistema imune em resposta a um determinado antgeno. Segundo suas caractersticas e
propriedades, podemos definir cinco classes de imunoglobulinas: IgG, IgM, IgA, IgE, IgD. Os
anticorpos da classe IgG so pequenos, conhecidos como monmeros. Os anticorpos IgM so
maiores e so conhecidos como pentmeros. Anticorpos naturais: anticorpos formados contra
antgenos no presentes no organismo e sem necessidade de contato prvio. Ex: ac sistema
ABO; Anticorpos irregulares: anticorpos formados a partir da exposio a um antgeno.
Ocorrncia no esperada. Ex: aloimunizao pelo sistema Rh; Anticorpos completos:
promovem aglutinao de hemcias em meio salino. IgM; Anticorpos incompletos: reagem
com antgeno, mas no promovem aglutinao de hemcias. IgG; Anticorpos frios: reagem
bem em temperaturas baixas 4 a 18C. IgM; Anticorpos quentes: reagem bem a
temperatura corporal. IgG

4.2 GRUPOS SANGUINEOS

28
O termo grupo sanguneo refere-se a um conjunto de antgenos com caractersticas
semelhantes. Em 1900, Karl Landsteiner descobriu o primeiro sistema de grupos sanguneos,
o sistema ABO. Com o aumento das pesquisas na rea, novos antgenos foram descobertos e
agrupados em outros sistemas. A International Society of Blood Transfusion (ISBT), um grupo
de trabalho com participantes de vrios pases, definiu uma classificao e nomenclatura
internacional para os antgenos de grupos sanguneos. Essa classificao est baseada em
princpios genticos e basicamente divide os antgenos em quatro grandes famlias: os
sistemas, as colees e duas sries conhecidas como 700 e 901.
Os sistemas de grupos sanguneos so constitudos por antgenos com caractersticas
genticas e bioqumicas semelhantes. At o momento foram descritos 30 sistemas de grupos
sanguneos. As colees so conjuntas de antgenos com caractersticas sorolgicas,
bioqumicas e genticas tambm semelhantes, porm no relacionadas aos sistemas de
grupos sanguneos at ento estabelecidos. As sries de antgenos so formadas por
estruturas antignicas conhecidas do ponto de vista sorolgico e agrupadas em dois grupos:
Antgenos de baixa frequncia na populao, quando menos de 1% da populao possui esses
antgenos (denominada srie 700) e Antgenos de alta frequncia, quando presente em mais
de 90% da populao (srie 901). A nomenclatura tradicional ainda muito utilizada em
bancos de sangue. Neste caso, os antgenos foram nomeados utilizando-se a primeira letra do
nome de pacientes ou do nome do pesquisador. Os demais antgenos de um mesmo sistema
foram identificados por uma letra sobrescrita como Le, Jk, Jkb e mais recentemente
sequncias numricas.

4.2.1 Sistema ABO E Hh

1900: Descoberto por Landsteiner. 1902: Von de Castello e Sturli descobriram o grupo
AB. Verificou-se que ocorria uma aglutinao dos glbulos vermelhos devido fixao de
anticorpos aso antgenos especficos localizados na membrana. Classificao da ISBT: Sistema
001, e seus antgenos A (ABO1), B (ABO2), AB (ABO3). O lcus ABO encontra-se no brao longo
do cromossomo 9 (9 q34.1-q 34.2), autossmico. O sistema ABO o mais importante.
Esse sistema deve ser estudado com seus associados Hh (H) e Lewis (LE), uma vez que
os antgenos tm a mesma origem bioqumica: so molculas complexas presentes nos

29
glicolipdios e glicoprotenas membranares de diversos tecidos, alm das hemcias. Os
produtos primrios so enzimas (glicosiltransferases) capazes de adicionar carboidratos sobre
uma estrutura precursora na membrana da hemcia.
Produo de uma cadeia precursora nos eritroblastos formada por D-galactose e N-
acetilglucosamina. A partir desta cadeia, o gene H codifica uma enzima chamada
fucosiltransferase que adiciona uma L-fucose galactose, formando o antgeno H. A partir
do antgeno H, so adicionados acares responsveis pelo sistema ABO. Sistema Hh (H)
classificado pela ISBT como 018 e possui um nico antgeno H (H1). O gene que codifica o
antgeno (FUT1) est localizado no cromossomo 19 q13. O gene que codifica o antgeno (FUT3)
est localizado no cromossomo 19 p13.3. Os antgenos do sistema ABO so produtos
secundrios dos genes ABO.

4.2.2 Fentipos ABO

A classificao dos fentipos ABO eritrocitrios correspondem a presena e/ou


ausncia dos antgenos A e/ou B na membrana da hemcia. Os indivduos formam
naturalmente anticorpos contra os antgenos que no possuem, que podem estar presentes
no soro e/ou plasma. Para determinao do fentipo ABO recomenda-se pesquisar os
antgenos (prova direta) e os anticorpos (prova reversa). 1910: Descrita pela primeira vez por
Epstein e Ottenberg. E posteriormente em 1924: por Bernstein. Cada indivduo herda um gene
ABO de cada progenitor, presentes na membrana da hemcia. Uma posio ou lcus em cada
cromossomo novo ocupada por um gene A, B ou O. O lcus ABO encontra-se no brao longo
do cromossomo 9, autossmico. Os genes A, B e O tm relao de codominncia. Os dois
herdados se expressam igualmente. O gene O considerado silencioso pois nenhum antgeno
detectvel produzido em herana desse gene.
Os antgenos ABO, H e Lewis podem estar presentes em secrees e outros fluidos
(saliva, lgrimas, urina, sucos digestivos, leite e lquido amnitico), tecidos epiteliais, rgos
como medula ssea e rins, linfcitos e plaquetas. Por isso so considerados de
histocompatibilidade.
Os processos de sntese dos antgenos ABO, H e Lewis ocorrem de maneira diferentes
nos eritroblastos e em clulas de outros tecidos. Os genes dos sistemas ABO, Hh e LE so

30
correlatos, mas independentes. A expresso dos genes ABO depende da ao de outro gene,
o gene H (FUT1), no crom. 19. O gene H apresenta-se em 99,99% da populao (istipo) sob a
forma homozigota HH ou heterozigota Hh. A forma hh (rara) e origina o fentipo Bombay (no
apresentam antgenos ABO e H e tem importncia transfusional). O gene Lewis (FUT3) no
ativo no eritroblasto. Portanto, os glicolipdios Lewis presentes na membrana eritrocitria, so
sintetizados fora dele e posteriormente adsorvidos membrana. A atividade da enzima
produzida pelo gene secretor (FUT2), 2-alfa-fucosiltransferase, a outra ligada ao carbono 2
da Gal , produzindo o antgeno H. A especificidade do antgeno Lewis b (Leb) , na verdade a
interao dos dois antgenos (Lea + H) nos indivduos lese.

4.2.3 Subgrupos ABO

As enzimas A e B produziro, ento, os fentipos ABO da maneira que nos eritroblastos


existem diferentes expresses (variaes quantitativas) dos antgenos A ou B. Subgrupos de A
e B resultam de alteraes genticas, mutaes da estrutura do gene produtor da
glicosiltransferase. Subgrupos de A: fentipos apresentam diferenas quantitativas e
qualitativas, embora sejam formados do mesmo acar. O gene A1 difere do gene A2 por uma
deleo de base na regio C-terminal, alm de uma mutao de ponto na posio 467 (C->T)
provocando a substituio de aminocidos (prolina por leucina) na glicosiltransferase
resultante. No subgrupo A3, temos hemcias com mais e com menos de 2 mil stios
antignicos, levando ocorrncia de campo misto" ou dupla populao. Subgrupos B so
raros e tm mecanismos genticos, moleculares e sorolgicos semelhantes aos subgrupos de
A. O acar imunodominante nos subgrupos idntico aos originais. Transfusionalmente no
importante distinguir-se os subgrupos, mas detect-los. Naturalmente produzidos.
Anticorpos ABO Estmulos seriam passivos, principalmente das bactrias que
colonizam o trato intestinal a partir do nascimento, pois possuem acares em suas
membranas celulares semelhantes aos dos antgenos A e B. Estmulos externos como poeira,
alimentos, tambm vo estimular a formao dos anticorpos anti-A e/ou anti-B, que passam
a ser classificados, como naturais e regulares e so misturas de IgM e IgG.

4.2.4 Associaes com doenas

31
lcera e gastrite duodenal: parecem afetar mais indivduos do grupo O, na proporo
de 1,35 para cada indivduo do grupo A. Maior patogenicidade do Helicobacter pylori.
Envolvem mecanismos auto-imunes de respostas. O antgeno Leb o provvel receptor par a
bactria no tecido gstrico.
Infeces: Pandemias histricas relacionadas com a distribuio dos genes ABO (peste
bubnica onde a Yersinia pestis expressa o antgeno H-like e como o O no expressa o H seria
mais susceptvel. Infeces por Pox vrus)
Fungos: a incapacidade gentica de secretar substncias ABO, foi associada com o
aumento da suscetibilidade infeco superficial por Candida albicans, em adultos. Indivduos
B e AB secretores parecem ser mais susceptveis infeco por E. coli no trato urinrio.
Malignidade de tumores: Alta incidncia de tumores em indivduos do grupo A. Clulas
tumorais frequentemente expressam neo-antgenos como antgeno A-like e o organismo no
reconheceria como no-prprio.
Desordens da coagulao: Grupo O, tendem a ter menor nvel plasmtico de fatores
V, VIII, IX e de VW que outros grupos. Indivduos do grupo A, apresentam alta incidncia de
tromboses, por apresentarem nvel maior de fatores de coagulao

4.2.5 SISTEMA Rh

1939 Levine e Stetson descobriram que a causa da eritroblastose fetal em um recm-


nascido era a atividade de anticorpos maternos contra antgenos das hemcias fetais.
Posteriormente, Levine e Katzin descreveram esse anticorpo como o mesmo que Landsteiner
e Wiener produziram por meio da imunizao de coelhos com hemcias de macacos Rhesus.
O antgeno foi denominado de fator Rh.
Os anticorpos especficos para os antgenos Rh esto normalmente envolvidos em
reaes transfusionais graves e em casos de doena hemoltica perinatal (DHPN), tornando
esse sistema, do ponto de vista da prtica transfusional, o segundo mais importante, aps o
sistema ABO. At o presente momento, 45 antgenos foram relatados como pertencentes a
esse sistema e so os responsveis por 99% dos problemas clnicos associados ao sistema Rh.

32
O sistema Rh o maior e o mais complexo sistema de grupo sanguneo e o segundo em
importncia na medicina transfusional. Os principais antgenos do sistema so D, C/c e E/e.
Esses antgenos possuem alta capacidade imunognica, ou seja, estimulam o sistema
imune induzindo a formao de anticorpos que podem ocasionar a doena hemoltica
perinatal e reaes transfusionais. Alm das nomenclaturas para grupos sanguneos, citadas
na introduo, ainda existem duas outras formas para designar os fentipos do sistema Rh,
descritas por Fisher-Race e Wiener. Importante enfatizar que ambas so muito utilizadas na
prtica transfusional.
Os termos Rh positivo e Rh negativo referem-se presena ou ausncia do antgeno D
na membrana da hemcia. O RhD fraco refere-se a uma expresso bastante reduzida do
antgeno D na membrana. Indivduos portadores deste antgeno devem ser considerados
como RhD positivos. O antgeno D composto de vrios constituintes. Quando parte do
antgeno D est ausente, denominam-se D variantes. Indivduos portadores de algumas
variantes podem ser sensibilizados e produzirem anticorpos anti-D.
O sangue de todos os doadores e pacientes deve ser tipado rotineiramente para o
antgeno D, utilizando tcnicas e soros capazes de detectar os D fracos e D variantes de
importncia clnica. Importante assegurar que receptores de sangue RhD negativos sejam
identificados e recebam apenas o concentrado de hemcias RhD negativos. O antgeno D
altamente imunognico. Estima-se que uma quantidade de 1ml a 10 ml de glbulos vermelhos
D positivos administrados a um indivduo D negativo, pode levar esse indivduo a desenvolver
anti-D em 80%. A gravidez subsequente com criana (feto) D positivo, induz imunizao
secundria da me, na qual o anticorpo IgG atravessar a barreira placentria, produzindo o
DHPN. Com o advento da imunoglobulina anti-D (RhoGam), observou-se importante reduo
desses casos.
Bioqumica: Os antgenos Rh so exclusivamente eritrocitrios, no sendo
encontrados em leuccitos ou plaquetas, e surgem precocemente j em torno da 10. semana
de vida intra-uterina. Apesar de contar com mais de 45 antgenos conhecidos, os mais
importantes transfusionalmente so os antgenos D, C, c, E, e responsveis por quase 99% dos
problemas clnicos associados ao sistema.
Gentica: Apenas 2 genes estruturais, no cromossomo 1p34-p36, controlam a
produo das protenas no-glicosiladas Rh: Gene RHD, que no possui alelos, codifica a

33
produo da protena RhD que carreia o antgeno D. Gene RHCE, que possui vrios alelos
(RHCe, Rhce, DHCE), codifica a produo da protena RhCE (ce). Antgeno D: Pode variar devido
alteraes qualitativas e quantitativas. D normal: o antgeno D um mosaico de subunidades
ou eptopos. Possui todos os eptopos (cerca de 30). D fraco: antigamente chamado de Du,
definia as hemcias que reagiam somente com o soro anti-D em fase de antiglobulina.
Hoje sabe-se que depende da qualidade do reagente e da tcnica empregada. Trata-
se de uma variao quantitativa produzida por uma variao qualitativa do antgeno D. A
menor expresso da protena RhD na membrana eritrocitria se deve a alteraes qualitativas
na sua poro intramembranar (no reconhecida pelos anticorpos). Indivduos com esse
fentipo no produzem anti-D casos recebam transfuso de hemcias D normal. Estima-se
que na populao seja aproximadamente 1% sendo mais comuns em negros. D parciais ou D
categoria: Caracterizados pela ausncia de um ou mais eptopos do antgeno D, que foram
substitudos por eptopos da protena CcEe. Essas trocas foram promovidas por mutaes a
de ponto missense ou rearranjos gnicos entre genes RHD e RHDE, alterando
qualitativamente a protena RhD na poro extracelular. Algumas categorias j determinadas
molecularmente: DI, II, III, IV, V, VI, VII, DMH, DHR, DFR, DCS, entre outros.

4.2.5.1 Anemia Hemoltica Aloimune

Processo hemoltico causado devido a presena de anticorpos produzidos por outro


indivduo. Mais comum: Transfuses sanguneas por incompatibilidade dos sistemas
antignicos eritrocitrios. Doena hemoltica do Recm-Nascido.

4.2.5.2 Doena Hemoltica Perinatal

A doena hemoltica perinatal (DHPN) ou eritroblastose fetal um distrbio


generalizado que pode afetar o concepto de forma grave. Incidncia de 01/2.419 nascimento.
Vem caindo a cada dcada devido profilaxia com as imunoglobulinas. Incompatibilidade do
sistema ABO de 40% a 50%. Incompatibilidade do sistema Rh de 5%. A DHPN pode ocorrer
por 2 mecanismos imunolgicos: Aloimunizao materna: Por incompatibilidade com
antgenos de grupos sanguneos do feto ou por incompatibilidade ABO entre os antgenos ABO

34
fetais e os anticorpos naturais e regulares maternos. AC so de classe IgG e, assim, podem
atravessar a barreira placentria e recobrir os eritrcitos fetais, acelerando sua destruio,
antes e depois do nascimento.
Fisiopatologia Por aloanticorpos maternos: a me produz um aloanticorpo contra
um antgeno eritrocitrio fetal herdado geneticamente do pai, que est ausente nos glbulos
vermelhos maternos; por anticorpos regulares ABO: decorre de estmulos inespecficos por
ocasio de vacinas, processos gastroentricos e da absoro de substncias grupo-especficas
do tipo A e/ou B existentes no lquido amnitico da gestante de feto incompatvel e secretor.

4.3 TESTE DE ANTIGLOBULINA HUMANA

1908: Moreschi, demonstrou pela primeira vez, mas no houve divulgao. 1945:
Coombs, Mourant e Race descreveram o teste de antiglobulina humana indireta. Detectava a
presena de anticorpos no aglutinantes do Sistema Rh no soro, utilizando como reagente o
soro antiglobulina humana. Os mesmos autores demonstram tambm a sensibilizao de
hemcias por anticorpos anti-D na DHPN utilizando a tcnica da antiglobulina direta (TAD).
A utilizao do soro antiglobulina humana, na avaliao eritrocitria, pode ser
considerada como a mais importante descoberta da medicina transfusional depois do sistema
de grupo sanguneo ABO. Teste de antiglobulina direto e Teste de antiglobulina indireto.
Teste de antiglobulina direto (TAD ou Coombs Direto): Pesquisa a presena de
hemcias sensibilizadas por anticorpos e/ou fraes de complemento.
Teste de antiglobulina indireto (TAI, PAI ou Coombs Indireto): Pesquisa a presena de
anticorpos no soro/plasma. Realizado para pesquisa e identificao de anticorpos irregulares
e testes de compatibilidade pr-transfusional. A sensibilidade do teste pode ser aumentada
por procedimentos que modificam a 1a. Etapa da reao (sensibilizao das hemcias), como
a adio de albumina ou outras macromolculas ao meio, meio de baixa fora inica (LISS), ou
tratamento enzimtico.
Mtodo simples, que permite detectar hemcias revestidas in vivo por
imunoglobulinas e/ou fraes do complemento. A realizao do teste depende do soro
antiglobulina humana (AGH) que pode ser obtido a partir da sensibilizao de animais com
globulinas humanas, ou pela tcnica de hibridoma, que a metodologia mais utilizada

35
atualmente. Soros AGH poliespecficos, geralmente, contm anticorpos com atividade anti-
IgG e anti- C3d, sendo a reatividade contra anti-IgM, anti-IgA e outras fraes do complemento
como C3b, C4b e C4d facultativa. O TAD se caracteriza pela reao de hemcias, previamente
lavadas, diretamente com o soro AGH.
As antiglobulinas se combinam preferencialmente com a poro Fc das molculas de
anticorpos ligadas s hemcias e os stios Fab formam pontes entre os anticorpos produzindo
aglutinao. Clulas que no apresentam anticorpos ligados, no so aglutinadas. As hemcias
devem ser previamente lavadas, pois a AGH tambm reage com os anticorpos humanos e
molculas de complemento livres no soro podendo acarretar resultados falso negativos. Pode
detectar de 200 a 400 molculas de IgG/hemcia e 400 a 1100 molculas de C3/hemcia. O
teste deve iniciar com AGH poliespecfico, sendo que nos testes positivos, a investigao deve
continuar com reagentes monoespecficos e com a tcnica de eluio do anticorpo, visando a
melhor caracterizao da protena ligada membrana da hemcia.
A eluio caracteriza-se por remover anticorpos da membrana de hemcias
sensibilizadas atravs de diferentes tcnicas como, calor, congelamento solventes orgnicos
(metileno, clorofrmio, ter, xileno) e meio cido (glicina-HCl/EDTA, digitonina cida).
Permitir concentrar pequenas quantidades de IgG, que a princpio no eram detectadas
atravs do TAD. Possibilita caracterizar se as protenas removidas reconhecem antgenos da
membrana da hemcia.
As amostras, para realizao do TAD, devem ser coletadas preferencialmente com
anticoagulante EDTA (cido etilenodiaminotetractico), evitando a ligao in vitro de
hemcias com as fraes de complemento C3d e C4d. O TAD demonstra a ligao in vivo de
hemcias com anticorpos, utilizando o soro antiglobulina humana (AGH). Sensibilizao in
vivo: os anticorpos se ligam s hemcias nos vasos sangneos do indivduo dentro do
organismo. Sensibilizao in vitro: os anticorpos se ligam s hemcias durante os testes em
laboratrios.
Teste de antiglobulina humana direto: Permite detectar hemcias sensibilizadas in vivo
por anticorpos e/ou fraes do complemento. indicado nas investigaes de anemias
hemolticas auto-imunes; hemcias do recm-nascido com ictercia (anemias hemolticas
aloimunes); reaes transfusionais; e anemias hemolticas induzidas por Drogas (penicilinas,
cefalosporinas, metildopa. TAD positivo no significa que os eritrcitos tenham sobrevida

36
diminuda. Fatores podem influenciar o seu reconhecimento pelos macrfagos e sua retirada
da circulao (subclasses de IgG, o arranjo das molculas ligadas membrana e capacidade
do sistema fagoctico do paciente). TAD positivo: Considerar a anlise da histria clnica,
avaliao laboratorial de hemlise, para definir investigao imunolgica eritrocitria.
Pacientes com TAD positivo sem evidncias de de destruio eritrocitria, no existe a
necessidade de prosseguir a investigao imunolgica eritrocitria, exceto quando houver
indicao de transfuso. Pode ser encontrado em pacientes recentemente transplantados,
transfundidos (nos ltimos 3 meses) e recebendo imunoglobulina intravenosa. TAD negativo,
no exclui possibilidade de hemlise (2 a 4%)- limitao do teste.
Teste de antiglobulina humana indireto: Permite detectar hemcias sensibilizadas in
vitro por anticorpos e/ou fraes de complemento. Fenotipagem eritrocitria - detectar
antgenos presentes nas hemcias da amostra em teste que interagem com anticorpos
conhecidos do soro reagente. PAI (pesquisa de anticorpos irregulares) - detectar no soro ou
plasma da amostra os anticorpos irregulares presentes contra antgenos das hemcias de
triagem. Prova Cruzada - detectar anticorpos presentes no soro do receptor contra os
antgenos presentes nas hemcias do doador.
Anticorpos irregulares: 250 antgenos eritrocitrios so conhecidos e classificados em
25 sistemas, alm de 5 colees e 16 sries. Ocorrem em aproximadamente 0,3 a 2% da
populao em geral podendo ser maior em politransfundidos. Risco de aloimunizao em
torno de 1% por unidade transfundida. Podem ser encontrados no soro/plasma dos indivduos
ou ligados membrana eritrocitria. Os anticorpos irregulares podem ser classificados como:
Alo-anticorpos imunes; Alo-anticorpos de ocorrncia natural e Auto anticorpos.
Anticorpos sricos PAI: Verifica a presena ou no de anticorpos irregulares no
soro/plasma do indivduo. Teste transfusional obrigatrio e pode ser realizado em doadores
e gestantes. Utiliza pelo menos 2 frascos de reagentes com clulas do tipo O e que possuem
a maioria dos outros antgenos (que no o ABO) de grupos sangneos. Realizado colocando-
se essas hemcias em contato com o soro/plasma do indivduo.
A partir dos resultados da PAI pode-se impedir que o plasma de um doador com
anticorpo clinicamente significante seja transfundido em receptores que apresentam o
antgeno correspondente, nas hemcias; o receptor com um anticorpo clinicamente
significante seja transfundido com hemcias que apresentam o antgeno correspondente;

37
capacidade de destruio das hemcias in vivo; possibilidade de atravessar a barreira
placentria; a classe e a subclasse de imunoglobulina a qual pertence o anticorpo; a
especificidade do anticorpo e a frequncia em que o antgeno encontrado na populao.

5. GARANTIA DA QUALIDADE EM HEMOTERAPIA

5.1 HEMOTERAPIA E MEIO AMBIENTE

Toda atividade humana causa alterao no meio ambiente ou em algum de seus


componentes. Os pases, diante da preocupao do impacto ambiental, comeam a se
mobilizar visando preservao da biodiversidade. 1972: Conferncia das Naes Unidas em
Estocolmo, um marco nas discusses sobre o meio ambiente a Declarao de Estocolmo
sobre o Ambiente Humano. A preocupao com a quantidade e a diversidade dos resduos
lanados no ambiente tem sido uma das importantes questes tratadas pelos ambientalistas
do mundo inteiro e um desafio para o saneamento bsico de todos os pases.
No Brasil, aos poucos, foram criadas leis, resolues, portarias e normas com o objetivo
de regularizar essa prtica em todas as atividades. Na rea da Sade, define as formas de
descarte, coleta, transporte e disposio final dos resduos. Objetivo diminuir os graves
problemas relacionados ao descarte incorreto dos resduos que causam contaminao no
ambiente e riscos sade das pessoas.
O Conselho Nacional do Meio Ambiente (Conama) sempre foi o rgo na esfera federal
responsvel por regular os processos relacionados rea ambiental, bem como o
gerenciamento de resduos slidos, a includos os resduos de servios de sade. Em 1999, foi
criada a Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria. A Resoluo Conama n 358, de 29 de abril
de 2005, que dispe sobre o tratamento e a disposio final dos resduos dos servios de
sade, e a RDC n 306, de 12 de dezembro de 2004, da Anvisa, que define o regulamento
tcnico para o gerenciamento de resduos de servios de sade.

5.1.1 Gerenciamento de resduos

38
Princpios do gerenciamento: Preveno no gerao e reduo de resduos;
Precauo adoo de medidas para evitar a ocorrncia dos danos ambientais; Gerador
responsvel deve proteger a sade humana e a qualidade ambiental; Desenvolvimento
sustentvel preservao de recursos naturais e incentivo produo mais limpa; Destinao
ambientalmente segura tratamento prvio quando necessrio e disposio final.

5.1.2 Classificao de resduos

Grupo A Resduos com a possvel presena de agentes biolgicos que, por suas
caractersticas, podem apresentar risco de infeco. So classificados em cinco categorias:
Categoria A1: Culturas e estoques de microrganismos; resduos de fabricao de produtos
biolgicos, exceto os hemoderivados; descarte de vacinas de microrganismos vivos ou atenuados;
meios de cultura e instrumentais utilizados para transferncia, inoculao ou mistura de culturas;
resduos de laboratrios de manipulao gentica. Resduos resultantes da ateno sade de
indivduos ou animais, com suspeita ou certeza de contaminao biolgica por agentes classe de risco
4, microrganismos com relevncia epidemiolgica e risco de disseminao ou causador de doena
emergente que se torne epidemiologicamente importante ou cujo mecanismo de transmisso seja
desconhecido. Bolsas transfusionais contendo sangue ou hemocomponentes rejeitadas por
contaminao ou por m conservao, ou com prazo de validade vencido, e aquelas oriundas de coleta
incompleta. Sobras de amostras de laboratrio contendo sangue ou lquidos corpreos, recipientes e
materiais resultantes do processo de assistncia sade, contendo sangue ou lquidos corpreos na
forma livre.
Categoria A2: Carcaas, peas anatmicas, vsceras e outros resduos provenientes de animais
submetidos a processos de experimentao com inoculao de microorganismos, bem como suas
forraes, e os cadveres de animais suspeitos de serem portadores de microrganismos de relevncia
epidemiolgica e com risco de disseminao, que foram submetidos ou no a estudo
anatomopatolgico ou confirmao diagnstica.
Categoria A3: Peas anatmicas do ser humano; produto de fecundao sem sinais vitais, com
peso menor que 500 gramas ou estatura menor que 25 centmetros ou idade gestacional menor que
20 semanas, que no tenham valor cientfico ou legal e no tenha havido requisio pelos pacientes
ou familiares.
Categoria A4: Kits de linhas arteriais, endovenosas e dialisadores, quando descartados. Filtros
de ar e gases aspirados de rea contaminada; membrana filtrante de equipamento mdico hospitalar

39
e de pesquisa, entre outros similares. Sobras de amostras de laboratrio e seus recipientes contendo
fezes, urina e secrees, provenientes de pacientes que no contenham nem sejam suspeitos de
conter agentes classe de risco 4, nem apresentem relevncia epidemiolgica e risco de disseminao,
ou microrganismo causador de doena emergente que se torne epidemiologicamente importante ou
cujo mecanismo de transmisso seja desconhecido ou com suspeita de contaminao com prons.
Categoria A5: rgos, tecidos, fluidos orgnicos, materiais perfurocortantes, escarificantes e
resultantes da ateno sade de indivduos ou animais, com suspeita ou certeza de contaminao
com prons.
Grupo B Resduos contendo substncias qumicas que podem apresentar risco
sade pblica ou ao meio ambiente, dependendo de suas caractersticas de inflamabilidade,
corrosividade, reatividade e toxicidade. Produtos hormonais e produtos antimicrobianos;
citostticos; antineoplsicos; imunossupressores; digitlicos; imunomoduladores;
antirretrovirais, quando descartados por servios de sade, farmcias, drogarias e
distribuidores de medicamentos ou apreendidos e os resduos e insumos farmacuticos dos
medicamentos controlados pela Portaria MS/GM no 344, de 12 de maio de 1998, e suas
atualizaes. Resduos de saneantes, desinfetantes; resduos contendo metais pesados;
reagentes para laboratrio, inclusive os recipientes contaminados por estes. Efluentes de
processadores de imagem (reveladores e fixadores). Efluentes dos equipamentos
automatizados utilizados em anlises clnicas. Demais produtos considerados perigosos,
conforme classificao da Norma Brasileira (NBR) n10.004 da Associao Brasileira de
Normas Tcnicas (txicos, corrosivos, inflamveis e reativos).
Grupo C Quaisquer materiais resultantes de atividades humanas que contenham
radionucldeos em quantidades superiores aos limites de iseno especificados nas normas da
Comisso Nacional de Energia Nuclear (CNEN) e para os quais a reutilizao imprpria ou
no prevista. Enquadram-se neste grupo os rejeitos radioativos ou contaminados com
radionucldeos, provenientes de laboratrios de anlises clnicas, servios de medicina nuclear
e radioterapia, segundo a Resoluo CNEN-NE-6.05.
Grupo D Resduos que no apresentem risco biolgico, qumico ou radiolgico
sade ou ao meio ambiente, podendo ser equiparados aos resduos domiciliares. Papel de uso
sanitrio e fralda, absorventes higinicos, peas descartveis de vesturio, resto alimentar de
paciente, material utilizado em antissepsia e hemostasia de venclises, equipo de soro e
outros similares no classificados como A1. Sobras de alimentos e do preparo de alimentos.

40
Resto alimentar de refeitrio. Resduos provenientes das reas administrativas. Resduos de
varrio, flores, podas e jardins. Resduos de gesso provenientes de assistncia sade.
Grupo E Sobras de alimentos e do preparo de alimentos. Resto alimentar de
refeitrio. Resduos provenientes das reas administrativas. Resduos de varrio, flores,
podas e jardins. Resduos de gesso provenientes de assistncia sade.

Manejo de resduos: Manejo a ao de gerenciar os resduos dentro e fora do


estabelecimento, desde a produo at a disposio final, incluindo as etapas de classificao,
segregao, acondicionamento, coleta interna, transporte interno, armazenamento, coleta e
transporte externo, tratamento e disposio final. o resultado da anlise dos riscos e das
caractersticas fsicas, qumicas, biolgicas do resduo com o objetivo de enquadr-lo nos
requisitos da RDC n 306/2004. a primeira e mais importante etapa do gerenciamento de
resduos, cujo manejo adequado depende da classificao correta.
Coleta e transporte internos: a retirada dos resduos do local de produo. Deve ser
feita em carros coletores fechados, em horrios preestabelecidos. Devido possibilidade da
existncia de microrganismos nos resduos importante que os funcionrios usem
equipamentos de proteo individual (EPI) durante a coleta e transporte dos resduos do local
de produo at o local de armazenamento. O transporte interno se d pelo traslado dos
resduos dos pontos de produo at o local destinado ao armazenamento externo. Deve ser
feito em carros de coleta de resduos fechados.
Coleta e transporte externos: a remoo dos RSS do local de armazenamento
externo at a unidade de tratamento externo ou disposio final, utilizando-se tcnicas que
garantam a preservao das condies de acondicionamento dos RSS e a integridade dos
trabalhadores, da populao e do meio ambiente, devendo estar de acordo com as
orientaes dos rgos de limpeza urbana. O transporte feito em caminho fechado.
Armazenamento: a guarda dos resduos em ambiente exclusivo at a realizao da
coleta externa. O local de armazenamento externo, denominado de Abrigo de Resduos, deve
ser um ambiente exclusivo para esse fim. Deve ter, no mnimo, um ambiente separado para
armazenar os resduos biolgicos/infectantes (Grupos A e E) e um ambiente para os resduos
comuns (resduos do grupo D). Todas as portas devem ser identificadas, o acesso deve ser
restrito aos funcionrios do gerenciamento e da coleta de resduos, com fcil acesso aos carros

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de coleta interna e aos veculos coletores do sistema de limpeza urbana local (caminhes). A
estrutura fsica do abrigo deve ser de fcil higienizao, as reas de armazenamento devem
ter aberturas para ventilao protegidas com tela de proteo contra entrada de insetos.
Tratamento de resduos: aplicao de mtodo, tcnica ou processo que modifica as
caractersticas dos resduos, reduz ou elimina o risco de contaminao, de acidentes
ocupacionais ou de dano ao meio ambientePode ser aplicado no prprio estabelecimento
produtor (tratamento interno) ou em outro estabelecimento (tratamento externo).

5.2 GESTO DA QUALIDADE EM HEMOTERAPIA

Portaria 158 Art. 240. O servio de hemoterapia dispor de polticas e aes que
assegurem a qualidade dos produtos e servios garantindo que os procedimentos e processos
ocorram sob condies controladas.
1 So, entre outras, as aes de que trata o caput: I - mtodos e ferramentas de
melhoria contnua; II - processos de proposio de aes preventivas e corretivas; e
III - tratamento das reclamaes e sugestes dos usurios.
2 O desempenho dos processos ser acompanhado por meio de indicadores e
definio de metas.

A International Organization for Standardization (ISO), uma organizao internacional


que tem por objetivo desenvolver padres tcnicos para vrios setores, desenvolveu em 1987
a srie de normas ISO 9000, que define os padres gerais de sistemas de gesto de qualidade.
Baseados nesta norma foram desenvolvidos outros padres, alguns deles especficos para a
rea de hemoterapia como o da American Association of Blood Banks (AABB).
A qualidade responsabilidade de todos dentro de uma organizao. O programa da
qualidade no servio de hemoterapia garante que cada hemocomponente seja processado da
mesma maneira desde a seleo do doador at a transfuso. O controle da qualidade
realizado para determinar se o produto ou servio est de acordo com as especificaes,
sendo, portanto, uma avaliao da qualidade final das unidades amostradas.
Fornece uma segurana estatstica a respeito do processo ou produto avaliado. Gesto
da qualidade possui uma abordagem mais ampla e considera todos os processos da
organizao e a sua relao com clientes e fornecedores. Trata-se de aes coordenadas para
dirigir e controlar uma organizao no que diz respeito qualidade. Garantia da qualidade,

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que a parte da gesto da qualidade, objetiva promover confiana de que os requisitos da
qualidade sero atingidos, ou seja, so as ferramentas utilizadas.

5.2.1 Princpios da Gesto de Qualidade

Foco no cliente: as organizaes dependem de seus clientes e, portanto, importante


que elas entendam as necessidades deles e se esforcem para exceder as suas expectativas.
Liderana: os lderes estabelecem o rumo da organizao. Convm que eles criem e
mantenham um ambiente interno no qual as pessoas sejam envolvidas nos objetivos da
organizao.
Envolvimento de pessoas: as pessoas so a essncia da organizao e o seu
envolvimento possibilita que as suas habilidades sejam utilizadas para o benefcio da
organizao.
Abordagem por processos: as organizaes so constitudas por uma complexa
combinao de recursos interdependentes e inter-relacionados, que devem perseguir os
mesmos objetivos, e cujos desempenhos podem afetar positiva ou negativamente a
organizao. A abordagem sistmica de gesto gerencia os processos como um sistema
contribui para a eficcia e eficincia da organizao na realizao dos seus objetivos.
Melhoria contnua: a melhoria contnua do desempenho da organizao deve ser um
objetivo constante da organizao. Uma ferramenta utilizada para demonstrar a melhoria
contnua a utilizao do Ciclo de Deming ou PDCA. O objetivo principal tornar os processos
da gesto de uma empresa mais geis, claros e objetivos. Pode ser utilizado em qualquer tipo
de empresa, como forma de alcanar um nvel de gesto melhor a cada dia, atingindo timos
resultados dentro do sistema de gesto. A partir do planejamento, as aes tm de ser
realizadas e verificadas para ver se atingiram o planejado e aes corretivas devem ser
tomadas sempre que necessrio.
Abordagem de tomada de deciso baseada em fatos: as decises devem ser tomadas
baseadas em dados e informaes. Dessa forma, so seguras e confiveis.
Relaes mutuamente benficas com fornecedores: uma organizao e seus
fornecedores so interdependentes, e a relao entre eles deve ser benfica de forma que as
duas partes sejam beneficiadas, ou seja, uma relao ganha-ganha.

43
5.2.2 Avaliao Externa da Qualidade

Superviso Indireta ou Testes de Proficincia. Envolve a realizao de testes


imunohematolgicos em amostras fornecidas por centros de referncia. Os resultados so
devolvidos a esses centros para avaliao. Relatrios so confidenciais e cada participante
recebe as informaes e orientaes relativas aos seus prprios resultados.
Deve oferecer a seus participantes: Organizao profissional; Avaliao peridica;
Resposta rpida dos resultados obtidos; Definio clara dos resultados esperados;
Confidencialidade; Disponibilidade para discutir resultados; Ajuda para identificar as possveis
causas de erro e sugestes para correo.
Abordagem por processo: Um processo inclui todos os recursos e atividades que
transformam entradas em sadas. Em um servio de hemoterapia os processos devem ser
mapeados e definida a interao entre eles. Uma ferramenta muito utilizada para mapear
processos chamada SIPOC Supplier (fornecedor), Input (entrada), Process (processo),
Output (sada) e Customer (cliente). Com o mapeamento dos processos mais fcil definir
controles e metas para cada processo.
Organizao e responsabilidade: O servio de hemoterapia deve ser organizado de
maneira que possibilite a implantao e o gerenciamento dos sistemas operacionais e de
qualidade. A estrutura organizacional deve estar documentada e as responsabilidades
claramente definidas e entendidas para que o sistema de qualidade seja institudo e mantido.
A direo do servio de hemoterapia deve estar comprometida com o desenvolvimento do
sistema de gesto da qualidade da organizao e com a melhoria contnua. Cabe direo
definir a poltica da qualidade e os objetivos da qualidade. A direo deve indicar um
representante que ter responsabilidade para assegurar que todos os processos de gesto da
qualidade sejam estabelecidos, implantados e mantidos.
Recursos humanos: Todo servio de hemoterapia deve definir e documentar a
competncia baseada em formao, educao, habilidades, treinamentos e experincia
necessrios para a realizao das funes crticas. Os colaboradores dos servios de
hemoterapia devem ser treinados para executar adequadamente as suas atividades.
Treinamentos incluem: capacitao em poltica e objetivos da qualidade, biossegurana,

44
sistemas de informtica, planos de contingncia, confidencialidade e gesto da qualidade e
devem ser registrados.
Documentos e registros: Documento uma informao e o meio no qual ela est
contida. O meio pode ser papel ou meio eletrnico. A documentao do sistema de gesto da
qualidade deve incluir a declarao da poltica da qualidade, o manual da qualidade e os
procedimentos determinados pela organizao como necessrios para assegurar o
planejamento, a operao e o controle dos seus processos. O manual da qualidade o
documento que especifica o sistema de gesto da qualidade da organizao. Os
procedimentos operacionais padro (POP) especificam como executar um processo ou
atividade. A organizao deve possuir POP para todas as atividades crticas. A descrio dos
POP importante para garantir a padronizao das rotinas de trabalho.
Os registros so documentos que apresentam resultados obtidos ou fornecem
evidncias de atividades realizadas, podendo ser realizados em papel ou de forma
informatizada. So exemplos de registros as planilhas, com resultados dos exames realizados
nas bolsas, as anotaes nos pronturios dos pacientes, o destino final dos hemocomponentes
etc. As organizaes devem estabelecer uma sistemtica para controle desses registros que
defina como os mesmos devem ser identificados, armazenados, protegidos, recuperados, o
tempo que devem ser retidos e como devem ser dispostos. Todos os registros devem
permanecer legveis e prontamente recuperveis.
Gesto de materiais e fornecedores: Materiais, fornecedores e servios usados no
servio de hemoterapia e que afetam a qualidade dos produtos ou servios prestados devem
ser considerados como crticos. Podem ser considerados como materiais crticos as bolsas
utilizadas na coleta do sangue total, os reagentes utilizados na realizao dos testes etc. Todos
os materiais considerados crticos, uma vez adquiridos, precisam ser inspecionados para
garantir que esto adequados para uso.
Gestes de equipamentos: Os equipamentos utilizados nos servios de hemoterapia
que fazem parte de processos que tm impacto direto na qualidade dos produtos ou servios
devem ser considerados crticos. As atividades que devem ser realizadas para garantir bom
desempenho dos equipamentos so: qualificao, calibrao, manuteno e monitoramento.
Todos os equipamentos utilizados pelo servio devem ser identificados. Os equipamentos que
realizam algum tipo de medio devem ser calibrados.

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Gesto de no conformidades: No conformidade definida como no atendimento
a um requisito. A gesto da qualidade deve incluir um processo para deteco, investigao,
documentao e aes a serem tomadas a partir de no conformidades. So exemplos a
etiquetagem incorreta de bolsas, a falta de assinatura em registros, a falta de conferncia na
liberao de resultados de exames, hemocomponentes estocados na temperatura errada etc.
Ao corretiva: ao tomada para eliminar a causa de uma no conformidade
identificada ou outra situao indesejvel. importante que as aes corretivas sejam
tomadas com a finalidade de prevenir que a no conformidade volte a ocorrer. Todas as aes
corretivas tomadas devem ser documentadas e devem ser monitoradas para verificar se
foram efetivas.
Ao preventiva: Ao preventiva a aquela tomada para eliminar a causa de um
potencial no conformidade ou de outra situao potencialmente indesejvel. importante
que as aes corretivas sejam feitas com a finalidade de prevenir a ocorrncia de uma no
conformidade. Todas as aes preventivas realizadas devem ser documentadas e monitoradas
para saber se foram efetivas.
Auditoria interna: Auditoria um processo sistemtico, documentado e
independente, para obter evidncia da auditoria e avali-la objetivamente a fim de
determinar a extenso na qual os critrios de auditoria so atendidos. As auditorias internas
so realizadas para monitorar a implantao e a manuteno do atendimento aos requisitos
do sistema de gesto da qualidade. Elas devem ser planejadas e realizadas periodicamente
por auditores capacitados para a realizao dessa atividade.
Certificaes e acreditaes: Uma vez que o sistema de gesto da qualidade foi
implantado, ele pode ser certificado ou no. Essa deciso depende de cada servio e a adeso
aos programas de certificao ou acreditao sempre voluntria. A principal certificao de
sistemas de gesto da qualidade a norma ISO 9001. Esta uma norma genrica que se aplica
a qualquer programa de gesto de qualidade, em qualquer segmento.

5.2.3 Comit transfusional

Comit transfusional ou Comit Hospitalar de Transfuso (CHT) so comisses


multidisciplinares, que se renem periodicamente para definir e avaliar a prtica transfusional

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numa determinada instituio. Tem como objetivo garantir que os recursos hemoterpicos
estejam sendo adequadamente aplicados. Objetivos especficos, estrutura e forma de
trabalho devem ser definidos localmente, em cada instituio.
Portaria 158 - Art. 12. Toda instituio de assistncia sade que realiza transfuso
de sangue e componentes sanguneos compor ou far parte de um Comit Transfusional.
1 competncia do Comit Transfusional o monitoramento da prtica
hemoterpica na instituio de assistncia sade visando o uso racional do sangue,
a atividade educacional continuada em hemoterapia, a hemovigilncia e a
elaborao de protocolos de atendimento da rotina hemoterpica.
2 Os servios de hemoterapia e as instituies de assistncia sade que possuam
Agncias Transfusionais constituiro seus prprios Comits Transfusionais.
3 A constituio do Comit Transfusional ser compatvel e adequar-se- s
necessidades e complexidades de cada servio de hemoterapia.

Deve definir e rever a prtica transfusional da instituio, e emitir recomendaes e


relatrios s instncias apropriadas. Reviso peridica das reaes transfusionais; Anlise
estatstica do uso de descarte de hemocomponentes, avaliao das acreditaes do servio,
controles de qualidade interno e externo, adequao das instalaes, pessoal e
equipamentos, definio de escalas de reserva mxima de produtos para cirurgias e definio
de critrios e auditoria do uso de hemocomponentes.
Segundo a Joint Commission for Accreditation of Healthcare Organizations (JCAHO,
EUA) devem ser monitorados pelo CHT: Propriedade da prescrio de sangue e
hemocomponentes; Distribuio e manipulao de sangue e hemocomponentes;
Administrao de sangue e hemocomponentes; Monitorizao dos efeitos do sangue e
componentes nos pacientes, de forma a permitir modificaes apropriadas em tempo hbil.
A maior responsabilidade do CHT deve ser desempenhar um papel central na promoo e
monitorizao do uso seguro e efetivo do sangue e de seus componentes.
Atividades do Comit: Poltica transfusional, procedimentos a serem seguidos para o
ato transfusional. A educao uma das ferramentas mais eficazes para o uso apropriado de
recursos hemoterpicos. A auditoria clnica um dos mecanismos mais frequentemente
sugeridos para controle e acompanhamento da prtica hemoterpica.

5.3 HEMOVIGILNCIA

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A segurana e a qualidade do sangue e hemocomponentes devem ser asseguradas em
todo o processo, desde a captao de doadores at a sua administrao ao paciente.
Hemovigilncia: sistema de avaliao e alerta, organizado com o objetivo de recolher e avaliar
informaes sobre os efeitos indesejveis e/ou inesperados da utilizao de
hemocomponentes. 1942: Primeiro banco de sangue no Brasil. 1964: Criao da Comisso
Nacional de Hemoterapia (CNH) com as primeiras regulamentaes tcnicas. (Portaria
CNH4/64- Testes ABO e RhD). Dcada de 80: Medidas de precauo com o objetivo de
promover a segurana dos procedimentos transfusionais.
Portaria 721/89 Rotina transfusional com as provas de compatibilidade, PAI no
receptor e doador e tipagem ABO e Rhd na bolsa a ser transfundida. Portaria 1376/93: Ficha
transfusional para cada receptor atendido pelo servio de hemoterapia. Portaria 121/95:
Requisitos obrigatrios (equipamentos adequados, centrfugas sorolgicas com velocidade
precisa, banho-maria com temperatura controlada, rotina nas temperaturas de
armazenamento adequadas). RDC/Anvisa 342/02 Situaes de emergncia.
Garantia da rastreabilidade de um componente, identificar com preciso em quem
foram transfundidos os hemocomponentes e quais hemocomponentes os pacientes
transfundidos receberam. A rastreabilidade permite que se realize tanto a investigao
ascendente do receptor ao doador, investigao descendente do doador ao receptor.
Ficha de Notificao: Instrumento de coleta de dados. Dever ser o mais completo e
correto possvel, pois todas as informaes constantes nela so importantes. necessrio
monitorar e avaliar o impacto clnico das reaes transfusionais. Grau I Leve: ausncia de risco
vida: baixa gravidade; Grau II Moderado: morbidade em longo prazo. Gravidade moderada,
com ou sem ameaa vida; Grau III Grave: ameaa imediata vida, sem bito; Grau IV bito:
morte decorrente da reao transfusional.
NOTIVISA um sistema informatizado na plataforma web, com manual para o
notificador, para receber e gerenciar as notificaes de eventos adversos e queixas tcnicas
relacionadas a produtos sob vigilncia sanitria.
A imunomodulao associada s transfuses alognicas poderia influenciar
negativamente o prognstico clnico geral de pacientes submetidos a cirurgias para
tratamento de tumores malignos. Transfuses alognicas no perodo peri-operatrio

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poderiam provocar distrbios na regulao do sistema imunolgico permitindo crescimento
tumoral descontrolado.
Mecanismos associados a imunomodulao: Transfuso de leuccitos alognicos
ativos que prejudicam a funo imune do receptor predispondo infeco ou crescimento
tumoral; Infuso de substncias biolgicas solveis que so secretadas por grnulos ou
membranas de leuccitos e se acumulam durante o armazenamento no sobrenadante de
hemcias. Transfuso de peptdeos HLA solveis ou outros mediadores que circulam no
plasma alognico; um efeito no imunomodulatrio da transfuso que causa disfuno de
rgos do receptor e predispe infeco.
Transfuso de sangue e cncer: 1981 - Associao entre transfuso de sangue
alognico administrada no peri-operatrio e aumento na taxa de recidiva de cncer. Efeitos
negativos foram observados em 60% - mama, pulmo, rim prstata, estmago, colo de tero,
vulva, cabea e pescoo, laringe, tecidos moles, ossos, e metstases hepticas, sendo em 40%
o efeito adverso no foi detectado.
Transfuso de sangue e infeces bacterianas: Relao entre transfuso de sangue
alognico e complicaes infecciosas bacterianas ps-operatrias foi examinada por diversos
estudos clnicos. A maioria so estudos no controlados. Alguns estudos nos ltimos 5 anos
tentam estabelecer relao mais concreta.
Transfuso de sangue e mortalidade: Possvel associao entre transfuso alognica
e mortalidade foi sugerida por estudos clnicos randomizados controlados envolvendo
pacientes submetidos cirurgia cardaca que receberam concentrados de hemcias no
leucorreduzidos comparativamente a pacientes receptores de hemcias leucorreduzidos.
Meta-anlise com 14 estudos entre 1992 e 2002, mas no foi encontrado associao, mas
sugere com anlise especfica de leuccitos e subgrupos.

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