MINISTRIO DA EDUCAO

SECRETARIA DE EDUCAO PROFISSIONAL E TECNOLGICA

INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAO, CINCIA E TECNOLOGIA DE RORAIMA
DIRETORIA DE ENSINO
DEPARTAMENTO EM GESTO, SADE E TURISMO
CURSO TCNICO EM ANALISES CLINICAS

RELATRIO FINAL DO ESTGIO CURRICULAR SUPERVISIONADO DO CURSO

DE TCNICO EM ANALISES CLNICAS

BOA VISTA-RR

AGOSTO/2011
 LUCILENE DE LIMA PACHECO

RELATRIO FINAL DO ESTGIO CURRICULAR SUPERVISIONADO DO CURSO

DE TCNICO EM ANALISES CLNICAS

Relatrio Final de Estgio para a

concluso do Curso Tcnico Subsequente
em Analises Clinicas, turma 31811,
matrcula 20081TSL0036, referente aos
estgios realizados nas Unidades de
Sade: Hospital da criana Santo Antnio,
LACEN e IFRR, compreendendo o perodo
de 18/01/2010 a 14/05/2010. Totalizando

BOA VISTA RR

AGOSTO/2011
 AGRADECIMENTOS

Agradeo primeiramente a Deus

pela oportunidade e pela vida,
pelo direcionamento em busca
de melhores conhecimentos. Aos
professores, familiares, amigos e
colegas, pelo apoio e motivao
em todo o tempo.
 DADOS DE IDENTIFICAO

Nome da Estagiria: Lucilene de Lima Pacheco

Curso: Tcnico Subseqente em Laboratrio
Ano de concluso: 2010
Endereo Completo: Av. Chile n 213 Boa Vista
CEP: 69312-062
Telefone: (95) 8112-1337
E-mail: lutty_lene@hotmail.com

Perodo de Estgio: de 18/01/2010 a 14/05/2010.

Total de horas do estgio de auxiliar: 150 horas
Total de horas do estgio de tcnico: 200 horas
Total de horas realizadas: 350 horas

Empresas nas quais foram realizados os estgios:

Hospital da Criana Santo Antnio

Total de horas: 150h
Endereo Completo: Avenida das Guianas, N1645, 13 de Setembro.
Telefone: 3624-1684
Supervisor do Estgio na Empresa ou Instituio: Jeorge Ribeiro
Professor Supervisor do Estgio: Maria Lcia Brasileiro Lacerda
Perodo de realizao do estgio: 18/01/2010 a 18/02/2010

LACEN
Total de horas: 20h
Endereo Completo: Av. Brigadeiro Eduardo Gomes, S/N, Mecejana.
Supervisor do Estgio na Empresa ou Instituio: Mrcia Brando e Ctia Alexandra
Ribeiro Meneses
Professor Supervisor do Estgio: Maria Lcia Brasileiro Lacerda
Perodo de realizao do estgio: 03/03/2010 a 07/03/2010

IFRR
Total de horas: 180h
Endereo Completo: Av. Glaycon de Paiva, N 2496, Pricum.
Telefone: 3621-8000
Supervisor do Estgio na Empresa ou Instituio: Thase Marcon
Professor Supervisor do Estgio: Maria Lcia Brasileiro Lacerda
Perodo de realizao do estgio: 15/03/2010 a 14/05/2010
 PARECER DA COMISSO DE AVALIAO

A Comisso de Avaliao do parecer que o (a) aluno (a)

.....................................................................................................................

seja ( ) APROVADO(A) ( ) REPROVADO(A), tendo obtido nota/

conceito.................... na avaliao do Estgio.

Boa Vista RR, ......../......../ ..........

Coordenador do Curso

Professor Supervisor

Coordenador Pedaggico do Curso

Membro da Comisso
 SUMRIO

DADOS DE IDENTIFICAO....................................................................................04
PARECER DA COMISSO DE AVALIAO...........................................................05
INTRODUO............................................................................................................08
1. Atividades Desenvolvidas no Estgio de Auxiliar......................................09
1.1 Atendimento ao pblico e orientao para coleta de exames
laboratoriais.............................................................................................09
1.2 Recebimento e identificao das amostras.............................................09
1.3 Coleta de amostra: Puno Venosa........................................................09
1.4 Uroanlise................................................................................................11
1.5 Hematologia.............................................................................................13
1.6 Bioqumica e Imunologia.........................................................................14
1.7 Parasitologia............................................................................................14
1.8 Lavagem e Esterilizao..........................................................................14
2. Atividades Desenvolvidas no Estgio de Tcnico (LACEN)......................14
2.1 Coleta......................................................................................................14
2.2 Colorao das lminas............................................................................15
2.3 Semeadura..............................................................................................15
2.4 Srie Bioqumica......................................................................................16
2.5 Antibiograma............................................................................................17
3. Atividades Desenvolvidas no Estgio de Tcnico .....................................17
3.1 Bioqumica.............................................................................................18
3.1.1 Glicose.............................................................................................18
3.1.2 Colesterol.........................................................................................18
3.1.3 Colesterol HDL.................................................................................18
3.1.4 Triglicrides......................................................................................19
3.1.5 Uria.................................................................................................19
3.1.6 Creatinina.........................................................................................20
3.1.7 Protenas Totais 20
3.1.8 Albumina..........................................................................................20
3.1.9 Transaminase TGO e TGP...........................................................21
3.1.10 Bilirrubina.........................................................................................21
3.1.11 Glutamil Transferase Gama GT....................................................22
3.1.12 cido rico.......................................................................................22
3.1.13 Fosfatase Alcalina............................................................................22
3.1.14 Mucoprotena...................................................................................23
3.1.15 CK-NAC............................................................................................24
3.1.16 CK-MB(NAC)....................................................................................24
3.2 Parasitologia..........................................................................................24
3.2.1 Exame Direto a Fresco.....................................................................25
3.2.2 Sedimentao Simples.....................................................................25
3.2.3 Flutuao Simples............................................................................26
3.2.4 Centrfugo-Flutuao.......................................................................26
3.2.5 Centrfugo-Sedimentao................................................................27
3.2.6 Mtodo de Baermann-Moraes..........................................................28
3.2.7 Tcnica de Grahm modificada.........................................................28
3.3 Hematologia...........................................................................................28
 3.3.1 Contagem de Leuccito...................................................................29
3.3.2 Contagem de Plaquetas...................................................................29
3.3.3 Hematcrito......................................................................................29
3.3.4 Tipagem Sangunea em tubo...........................................................30
3.3.5 Velocidade de Hemossedimentao VHS....................................31
3.3.6 Tempo de Sangria............................................................................31
3.3.7 Tempo de Coagulao.....................................................................31
3.3.8 Prova do Lao..................................................................................32
3.3.9 Medida de Retrao de Cogulo.....................................................32
3.3.10 Diagnstico da Malria.....................................................................33
3.4 Uroanlise..............................................................................................33
3.5 Imunologia.............................................................................................34
3.5.1 PCR (Protena C Reativa)................................................................35
3.5.2 ASLO (Anti-Estreptolisina O).........................................................36
3.5.3 VDRL................................................................................................36
3.5.4 Ltex.................................................................................................37
3.5.5 Beta HCG.........................................................................................38
CONCLUSO.............................................................................................................39
REFERNCIAS..........................................................................................................40
 INTRODUO

O presente relatrio tem a finalidade de apresentar uma sntese das

atividades desenvolvidas no Hospital da Criana Santo Antnio, LACEN (Laboratrio
Central de RR) e IFRR (Instituto Federal de Educao, Cincia e Tecnologia de
Roraima) que compreende o perodo 18/01/2010 a 14/05/2010, sendo acompanhado
respectivamente pelo Biomdico Jeorge Ribeiro, Biomdica Ctia Meneses e a
Farmacutico-Bioqumica Thaise Marcon, das instituies concedentes e a
Professora Maria Lcia Brasileiro Lacerda como professora supervisora, destacando
as fases de auxiliar, tcnico e a de Bacteriologia, sendo este relatrio parte
obrigatrio do estgio curricular supervisionado do Curso Tcnico Subseqente em
Laboratrio, perfazendo um total de 350 h.
Tem por objetivo descrever de forma clara e coerente os procedimentos
realizados nas instituies de estgio, destacando as atividades de rotina realizadas
em cada setor do laboratrio de anlises clnicas.
 09

1. ATIVIDADES DESENVOLVIDAS NO ESTGIO DE AUXILIAR

Descrevem-se abaixo as atividades realizadas no Hospital da Criana Santo

Antnio, no perodo que compreende de 18/01/2010 a 18/02/2010.

1.1 Atendimentos ao pblico e orientaes para coleta de exames

laboratoriais
Primeiramente foi explicado todo o processo de atuao na recepo, sendo
orientada e acompanhada pelos tcnicos do local.
Todo o processo baseava-se em atender ao pblico, dando informaes,
orientaes e instrues referentes aos horrios de coleta, jejum, higienizao,
manipulao e transporte de amostras (urina) na residncia do paciente, marcao e
entrega de exames. A recepo protocolava todos os exames, sendo necessria a
assinatura do paciente ou responsvel na hora da entrega do mesmo.
Esses procedimentos eram de suma importncia para evitar transtornos ou
similaridades, assim como garantir o controle de registros.

1.2 Recebimento e identificao das amostras

A identificao das amostras uma prtica fundamental e essencial dentro de
um laboratrio de anlises clnicas. Esta ao deve receber total ateno de quem a
faz, pois, amostras com erros de identificao quanto ao nome do paciente ou troca
de amostra pode acarretar srios transtornos quanto ao real e correto diagnstico do
paciente.
As amostras eram recebidas partir das 7:00h da manh em coletores
especficos, sendo diferenciados em relao a idade do paciente. As mesmas eram
recebidas e identificadas com o nmero de registro e nome do paciente no corpo do
coletor. Aps enviadas para o setor de uroanlise.

1.3 Coleta de amostra: Puno venosa

A colheita de material sanguneo o primeiro passo para todas as anlises
efetuadas em laboratrio clnico. Dela dependem todas as etapas seguintes de forma
 10
ser impossvel a obteno de resultados exatos sem um procedimento correto e a
utilizao de material apropriado.
indispensvel o uso de EPIs para garantir a segurana do tcnico no
momento do procedimento.
Primeiramente analisamos a requisio mdica para nos assegurar quais os
exames a serem realizados. Identificar o(s) tubo(s) a ser utilizados com a numerao
e iniciais do nome do paciente.
Todo o material necessrio para a puno venosa deve estar ao alcance do
tcnico, evitando dificuldades no momento da puno.
Explicamos ao paciente todo o procedimento a ser realizado e o acomodamos
de maneira adequadas e confortvel na cadeira de coleta para que no ocorra
contratempo. O brao do paciente deve ser posicionado no apoio de modo correto,
para que o tcnico tenha uma boa visualizao do local a ser puncionado.
O sangue dever ser colhido por puno de uma veia visvel, de preferncia
do antebrao, na altura da dobra do cotovelo.
Os passos para a colheita de sangue venoso so:
- Retirar a seringa da embalagem estril. Se esta estiver desmontada, acopla-la
corretamente, em seguida puxar o mbolo do cilimdro, em movimentos de vai e vem,
para retirar a presso existente.
- Colocar o garrote ao redor do brao do paciente, acima da dobra do cotovelo.
- Pela visualizao e palpao, determinar a veia a ser puncionada, que
preferencialmente deve ser calibrosa e bem firme.
- Desinfetar a pele sobre a veia selecionada, com algodo embebido com lcool a
70% e deixar secar antes de puncionar.
- Pedir ao paciente que mantenha a mo fechada.
- Esticar a pele da dobra do cotovelo com o dedo indicador da outra mo, a uns 5 cm
abaixo do local da puno.
- Introduzir a agulha na pele ao encontro da veia, lentamente, penetrar em seu
interior.
- O sangue fluir para dentro da seringa espontaneamente, puxar levemente o
mbolo, pra verificar se a agulha est na veia, aps a confirmao, retirar o garrote
de forma cuidadosa e, em seguida, retornar a puxar o mbolo para retirar o sangue
necessrio.
 11
- Retirada a quantidade de sangue necessria, retirar a agulha e colocar um pedao
de algodo seco no local.
- Retirar a agulha da seringa, depositar o sangue colhido no tubo(s), com ou sem
anticoagulante, de acordo com o exame solicitado. Escorrer lentamente o sangue
pelas paredes do tubo, sem provocar a formao de espumas. Tampar o tubo para
evitar contaminao. Os tubos com anticoagulante deve se invertido lentamente
vrias vezes.

1.4 Uroanlise
A anlise da urina representativa para observao de suas caractersticas,
fornecendo informaes prvias no que diz respeito a distrbios como: hemorragias
glomerular, hepatologias, erros inatos do metabolismo e infeces do trato urinrio.
Para a anlise macroscpica ou exame fsico da urina compreendia as
seguintes caractersticas: volume, colorao, aparncia e odor. E exame qumico
realizado por meio da utilizao de fitas reativas, no intuito de avaliar: urobilinognio,
pH, protenas, glicose, cetonas, sangue, bilirrubina, nitrito, densidade e leuccitos.
Exame Fsico da urina:
Volume
Verificar o volume de amostra contida no coletor universal, que graduado e
possui capacidade de 60 ml, anotar o volume contido no mapa ou laudo.
Colorao
Sua colorao da urina varia desde a quase ausncia de cor at o negro.
Essas variaes podem ser devidas a funes metablicas normais, atividade fsica,
substncias ingeridas ou condies patolgicas.
Aparncia ou Turvao
Os termos comumente usados para descrever a aparncia so: transparente,
opaca, ligeiramente turva, muito turva e leitosa.
Urina Normal: Transparente;
Urina Opaca: Precipitao de fosfato, uratos amorfos, cristais de oxalato de
clcio ou de cido rico e carbonato na forma de nvoa branca. H presena de
clulas epiteliais e muco principalmente na urina das mulheres.
Alm dos cristais amorfos, as quatro substncias que mais comumente
causam turvao na urina so: leuccitos, hemcias, clulas epiteliais e bactrias.
 12
Outras substncias que provocam turvao na urina so: lipdios, smen, muco,
linfa, cristais, levedura, material fecal e contaminao externa, como talco, cremes
vaginais e material de contraste radiogrfico.
Normalmente esse procedimento era realizado aps a centrifugao, assim
classificado de acordo com a quantidade de depsitos sedimentados.
Odor
Seus componentes aromticos so classificados em;
- suis generis;
- uria;
- cetonria: odor adocicado de frutas;
- infeco urinria: odor forte, ftido.
Exame Qumico da urina:
Fita Reativa
Consiste em mergulhar a tira completamente e rapidamente em uma amostra
de urina homogeneizada, retirar o excesso de urina encostando a borda da tira no
recipiente ou em papel absorvente, medida que ela vai sendo retirada, esperar o
tempo especificado para que ocorra a reao e comparar a cor da tira com a tabela
de cores.
Tcnica utilizada:
Na bancada do setor de uroanlise, as amostras identificadas eram
organizadas em ordem crescente de nmero de registro. Registrvamos o paciente
no mapa de uroanlise, juntamente com nmero de registro.
Efetuvamos o exame fsico de cada amostra, os dados eram registrados no
mapa de uroanlise.
Preenchamos um tubo cnico com um volume ideal de 12ml de urina,
podendo variar de 10 a 15ml, o mesmo era identificado com a numerao do
paciente. Analisva-se as tiras reativas de cada amostra e os resultados eram
transferidos para o mapa.
Centrifugvamos os tubos cnicos por 5 minutos a 3.000 RPM. Aps
centrifugao, despreza-se o sobrenadante, devendo restar no tubo uma quantidade
uniforme de 0,5ml no tubo para ser usada na suspenso do sedimento e anlise em
lmina microscpica. Em seguida levvamos para o bioqumico realizar a leitura
microscpica.
 13
1.5 Hematologia
No setor de hematologia realizamos: leitura do sangue no aparelho KX,
preparao de esfregao e colorao do mesmo.
Confeco do esfregao
Em uma lmina limpa e desengordurada, colocva-se com auxilio de pipeta
uma gota de sangue a 1cm da borda, poem-se uma lmina distensora com um
ngulo de 30 em frente da gota, puxa-se a lmina para trs, fazendo-la tocar a gota
de sangue depositada, assim preencher toda a borda da mesma. Com um
movimento rpido e constante para frente, desliza-se a mesma para formar uma fina
felcula (esfregao). O esfregao secado a temperatura ambiente e em seguida
estar pronto para colorao.
Colorao do esfregao
Utilizou-se os corantes policromtico:
- lcool Metlico: fixador;
- Eosina: corante cido (colorao vermelho-alaranjado);
- Azul de Metileno: corante bsico (colorao azul).
Com o esfregao seco, megulha-se na ordem: 10s no lcool metlico, 10s na
eosina e 20s no azul de metileno. Lava-se o esfregao com um fio de gua e deixa-
se secar. Aps seco leva-se o mesmo para o bioqumico realizar a visualizao.

1.6 Bioqumica e Imunologia

Etapa destinada a visualizao de dosagens bioqumicas e testes
imunolgicos, preparao do sangue e obteno de soro, atravs da centrifugao.
Observando se todos os tubos esto corretamente identificados.
Deixava-se o sangue em repouso em um tubo de ensaio, a temperatura
ambiente, para coagular espontaneamente. Desprender o cogulo, que fica aderido
nas paredes, por meio de uma pipeta, passando-a pela periferia do tubo, tomando o
mximo de cuidado para no produzir hemlise. Centrifugar a 2.500 rpm por 5
minutos. Aps a centrifugao, retira-se o soro do cogulo atravs de uma pipeta,
evitando aspirar as hemcias, assim o soro estava pronto para a realizao das
dosagens bioqumicas e testes imunolgicos.
 14
1.7 Parasitologia
O hospital da criana Santo Antnio no realiza exames parasitolgicos,
contudo, no foi possvel realizar o estgio de auxiliar no setor de parasitologia.

1.8 Lavagem e Esterilizao

A lavagem e esterilizao foram realizadas com o cumprimento das leis de
biossegurana, utilizando todos os EPIs obrigatrios.
A lavagem ocorreu normalmente com auxilio de materiais de limpeza
especficos. Para a esterilizao dos materiais utilizou-se autoclave e estufa, com o
objetivo de eliminar/destruir as bactrias, esporos, vrus e fungos atravs de calor
constante durante tempo estimado, s assim os materiais estavam prontos para
serem reutilizados novamente.

2. ATIVIDADES DESENVOLVIDAS NO ESTGIO DE TCNICO (LACEN)

Descrevem-se abaixo as atividades realizadas no Laboratrio Central de
Roraima, no perodo que compreende de 03/13/2010 a 07/03/2010.

2.1 Coleta

Secreo vaginal:
Identificar a lmina e o tubo com BHI de acordo com o nmero estabelecido na
requisio da paciente;
Explicar o procedimento a paciente, pedir para que fique em posio
ginecolgica;
Afastar os grandes lbios insere-se o swab no canal vaginal e realiza
movimentos de rotao;
Inseri-se o swab no tubo com BHI, misturando-o com o lquido;
Coleta-se outro swab para realizao da lmina;
Preparo da lmina: com o swab colocar no centro da lmina o material
evitando a concentrao excessiva num nico local, obtendo um esfregao
homogneo.

Secreo de orofaringe:
Identificar a lmina e o tubo com BHI de acordo com o nmero estabelecido
na requisio da paciente;
 15
Explicar o procedimento a ser realizado ao paciente;
Posicionar a cabea do paciente levemente para trs e com o auxilio de um
palito de madeira pressionar a lngua do paciente para baixo, com um swab estril
coletar o material das amgdalas e da parede da orofaringe, sem tocar o swab na
lngua, bochechas e evitar o mnimo contato com a saliva;
Preparar a lmina e o colocar o swab no tubo com BHI.

2.2 Colorao das lminas

Colorao de Gram:
Material:
Soluo de cristal - violeta 2%;
Soluo de lugol;
lcool-acetona;
Fucsina bsica 0,2%(safranina);
Lmina com a secreo.

Procedimento:
Todo esfregao dever estar seco temperatura ambiente;
Cobrir o esfregao com cristal - violeta e aguardar 1 minuto;
Lavar com um filete de gua corrente;
Cobrir a rea do esfregao com lugol por 1 minuto;
Descorar a lmina com lcool - acetona at que o solvente escorra incolor;
Cobrir o esfregao com fucsina por 30 segundos;
Lavar com um filete de gua corrente;
Deixar secar a temperatura ambiente.

2.3 Semeadura

Tcnica de semeio por campos sobrepostos (utilizada somente para

semeio de urina):
Separar o meio de cultura (Agar Cled) e deixar ficar em temperatura ambiente,
identificar com o nome do paciente, data e o material semeado;
Ficar na zona de segurana, ou seja, cerca de 20 cm da chama do bico de
bunsen, e trabalhar sempre nessa zona;
 16
Pegar uma ala bacteriolgica e flambar no bico de bunsen ate que o metal se
aquea devidamente, esperar a ala esfriar;
Tocar o material a ser semeado com a ala, e semear o meio de cultura
atravs da tcnica de campos sobrepostos;
Flambar a ala bacteriolgica antes de guardar;
A placa de cultura deve ser armazenada em temperatura adequada, com o
fundo para cima, e deixada por tempo suficiente at que as bactrias cresam e
formem colnias.

Tcnica de semeio por esgotamento (utilizado para o semeio de fezes e

secrees em geral):
Meio de cultura adequado secrees - Mac Conkey, SS, Caldo Selenito,
Chocolate, Sangue e Manitol - deixar ficar em temperatura ambiente para poder
semear.
Meio de cultura para secreo de orofaringe: Sangue, Mac Conkey e Manitol.
Meio de cultura para secreo vaginal: Chocolate, Sangue, Mac Conkey e
Manitol. Identificar com o nome do paciente, data e o material semeado;
Ficar na zona de segurana, ou seja, cerca de 20 cm da chama do bico de
bunsen, e trabalhar sempre nessa zona;
Pegar ala bacteriolgica e flambar no bico de bunsen ate que o metal se
aquea devidamente, esperar a ala esfriar;
Tocar o material a ser semeado com a ala, e semear o meio de cultura
atravs da tcnica de esgotamento (formao de estrias);
Flambar a ala bacteriolgica antes de guardar;
A placa de cultura deve ser armazenada em temperatura adequada, com o
fundo para cima, e deixada por tempo suficiente at que as bactrias cresam e
formem colnias.

2.4 Srie Bioqumica

TSI: trplice de acar (glicose, sacarose e lactose) e ferro. Verifica-se a

fermentao de acar.
Citrato: verifica o desenvolvimento de uma bactria em um meio de cultura
que tem apenas citrato como fonte de carboidrato.
SIM (Motilidade): verifica se a bactria isolada flagelada ou no.
Uria: verifica se a bactria quebra a molcula de uria.
LIA: desaminao da lisina. Verifica se a bactria desamina a lisina.
 17
Fenilalanina: usada para diferenciao.

Procedimento:
Flambar uma agulha de semeio e esperar esfriar;
Semear os meios de cultura da serie bioqumica com a colnia bacteriana;
Passar a boca dos tubos rapidamente na chama do bico de bunsen para
esterilizar;
Flambar a agulha de semeio antes de guardar.

2.5 Antibiograma
Determina a sensibilidade aos antibiticos e quimioterpicos. Constitui o
principal fator na escolha de um agente teraputico para o tratamento de uma
infeco bacteriana.
Um microrganismo considerado suscetvel a uma droga se for morto ou
inibido por uma concentrao facilmente obtida no local da infeco. A presena de
um arco de inibio indica sensibilidade e a ausncia desse arco indica resistncia.
necessrio que o arco de inibio ultrapasse um certo dimetro, varivel para cada
antibitico.
Identificar a bactria patognica;
Preparar a diluio da colnia bacteriana em meio lquido (BHI);
Semear atravs de campos sobrepostos em uma placa de Agar Muller-Hinton,
com o auxlio de um swab estril mergulhado na diluio;
Colocar sobre a superfcie do Agar ainda mido os discos de antibitico a
serem testados;
Incubar a placa na estufa bacteriolgica durante 24 horas a uma temperatura
de 35 a 37C;
Realizar a leitura do antibiograma medindo o halo formado ao redor dos
discos.

3. ATIVIDADES DESENVOLVIDAS NO ESTGIO DE TCNICO

Descrevem-se abaixo as atividades realizadas no Instituto Federal de

Roraima, no perodo que compreende de 15/03/2010 a 14/05/2010.
 18
3.1 Bioqumica
Primeiramente centrifugvamos as amostra de sangue coagulado para a
obteno do soro, este era transferida para outro tubo, com a correta identificao,
s ento eram realizadas as dosagens bioqumicas.
Equipamentos e materiais utilizados: espectrofotmetro, banho-maria,
cronmetro, proveta, balo volumtrico, bquer, tubos de ensaio, pipetas e ponteiras.

3.1.1 Glicose: kit Doles - colorimtrico

Procedimento tcnico: rotular 3 tubos de ensaio com B(branco), T(teste) e
P(padro).
B T P
Reagente de cor 2.0ml 2.0ml 2.0ml
Soluo padro - - 20l
Amostra - 20l -

Misturar por agitao e incubar por 5 minutos em banho-maria, a 37.

Proceder leitura das absorvncias em espectrofotmetro.

3.1.2 Colesterol: kit Doles colorimtrico

Preparo do reagente: em um frasco adicionar 65ml de gua destilada e todo o
p de um frasco tampo/enzimas. Agitar levemente por inverso at dissolver o p e
em seguida acrescentar 5 gotas de surfactante.
B T P
Reagente de cor 2.0ml 2.0ml 2.0ml
Soluo padro - - 20l
Amostra - 20l -

Misturar por agitao e incubar por 10 minutos, em banho-maria a 37 e ler no

espectrofotmetro.

3.1.3 Colesterol HDL: kit Doles colorimtrico

Em um tubo adicionar 200l de soro e 200l do reagente precipitante.
Homogeneizar e deixar repousar por 10 minutos temperatura ambiente. Centrifugar
durante 15 minutos a 3.500 rpm ou 4 minutos a 12.000 rpm. Utilizar o reagente de
cor do colesterol.
 19
B T P
Reagente de cor 2.0ml 2.0ml 2.0ml
Soluo padro - - 50l
Sobrenadante - 50l -

Misturar por agitao e incubar por 10 minutos, em banho-maria a 37 e ler no

espectrofotmetro.

3.1.4 Triglicrides: kit Doles colorimtrico

Preparo do reagente: transferir parte da soluo de um frasco tampo ( 7ml)
para um frasco enzimas. Dissolver por inverso e retransferir para o frasco tampo.
Homogeneizar por inverso.
B T P
Reagente de cor 2.0ml 2.0ml 2.0ml
Soluo padro - - 20l
Soro - 20l -

Misturar por agitao e incubar por 10 minutos, em banho-maria a 37 e ler no

espectrofotmetro.

3.1.5 Uria: kit Doles colorimtrico

Preparo do reagente:
Reagente 1: transferir o contedo do frasco para um balo volumtrico de
500ml e completar o volume at a marca com gua destilada ou deionizada.
Reagente 2: transferir o contedo do frasco para um balo volumtrico de
500ml e completar o volume at a marca com gua destilada ou deionizada.
B T P
Reagente 1 2.0ml 2.0ml 2.0ml
Urease 2 gotas 2 gotas 2 gotas
Soluo padro - - 20l
Amostra - 20l -

Incubar os tubos a 37C, por 5 minutos.

Reagente 2 2.0ml 2.0ml 2.0ml
 20
Homogeneizar e incubar a 37, por 5 minutos. Proceder leitura das
absorvncias em espectrofotmetro.

3.1.6 Creatinina: kit Doles cintico

Preparo do reagente: em um bquer adicionar os seguintes reagentes: 2,5ml
de reagente pcrico, 10ml de gua destilada ou deionizada e 10 gotas de soluo
alcalina. Homogeneizar e aguardar 5 minutos.
T P
Reagente 1ml 1ml
Padro 100l -

Amostra - 100l

Fazer imediatamente a leitura no espectrofotmetro. S adiciona a amostra na

hora da leitura.

3.1.7 Protenas Totais: kit Laborlab colorimtrico

B P T
gua deionizada 20l - -
Rvo. Padro - 20l -
Amostra - - 20l
Rvo. Biureto 2,0ml 2,0ml 2,0ml

Homogeneizar e incubar durante 15 minutos 37C, ler no espectrofotmetro.

3.1.8 Albumina: kit Laborlab colorimtrico

B P D
gua deionizada 10l - -
Rvo. Padro - 10L -
Amostra - - 10l
Rvo. VBC 2,0ml 2,0ml 2,0ml

Homogeneizar e manter em temperatura ambiente por 10 minutos, fazer a

leitura em espectrofotmetro.
 21
3.1.9 Transaminase TGO e TGP: kit Doles colorimtrico
Preparo da soluo de hidrxido de Sdio 0,4M: transferir para um frasco
contendo 600ml de gua destilada ou deionizada todo o volume de hidrxido de
sdio concentrado. Homogeneizar.
TGP TGO
Substrato TGP 0,5ml -
Substrato TGO - 0,5ml

Colocar em banho-maria a 37C, durante 2 minutos.

Amostra 100l 200l

Homogeneizar e incubar a 37C, durante 30 minutos.

Reagente de cor 0,5ml 0,5ml

Homogeneizar e deixar em repouso a temperatura ambiente durante 20

minutos.
Hidrxido de Sdio 0,4M 5,0ml 5,0ml

Homogeneizar e deixar em repouso, temperatura ambiente durante 2 minutos.

Ler as absorbncias.

3.1.10 Bilirrubina: kit Doles colorimtrico

Preparo da soluo padro 10mg/dl: reconstituir a soluo pela adio de 5ml
de gua destilada e agitar. Utilizar aps 10 minutos.
Tcnica Micro:
Identificar 3 tubos de ensaio com B(Branco), BD(Bilirrubina Direta) e
BT(Bilirrubina Total).
B BD BT
Nitrito de sdio - 1 gota 1 gota
Reagente sulfanlico 2 gotas 2 gotas 2 gotas
gua Destilada 2,0ml 2,0mL -
Soluo aceleradora - - 2 mL
Amostra 50L 50L 50L

Misturar, deixar repousar por 3 minutos em temperatura ambiente e ler as

absorvncias.
 22
Tcnica Macro:
Identificar 3 tubos de ensaio com B(Branco), BD(Bilirrubina Direta) e
BT(Bilirrubina Total).
B BD BT
Nitrito de sdio - 2 gotas 2 gotas
Reagente sulfanlico 4 gotas 4 gotas 4 gotas
gua Destilada 4,0ml 4,0ml -
Soluo acelerada - - 4Ml
Amostra 200L 200l 200L
Misturar por agitao, deixar repousar por 3 minutos em temperatura
ambiente. Ler as absorvncias.

3.1.11 Glutamil Transferase Gama GT: kit laborlab cintico

T
Reativo de trabalho 1,0ml
Amostra 100l
Homogeneizar e rapidamente efetuar a leitura.

3.1.12 cido rico: kit laborlab colorimtrico

B T P
Mono-Reagente 1ml 1ml 1ml
Padro - - 20l
Amostra - 20l -

Misturar, incubar por 10 minutos a 37C, ler as absorvncias.

3.1.13 Fosfatase Alcalina: kit Doles colorimtrico

Preparo do hidrxido de sdio 0,1M(soluo de uso): adicionar o contedo de
um frasco de hidrxido de sdio concentrado a um balo volumtrico de 500ml.
Ajustar o volume com gua destilada.
Preparo do substrato (uso): adicionar 10ml de gua destilada ou deionizada a
cada frasco de substrato.
 23

B T
Substrato (uso) 0,4ml 0,4ml
Tampo pH 10,3 2 gotas 2 gotas

Colocar em banho-maria a 37C por 2 minutos.

Amostra - 50l

Incubar a 37C por 10 minutos.

Hidrxido de sdio 0,1M 5,0ml 5,0ml
Amostra 50l -

Homogeneizar e ler as absorbncias.

kit BioTcnica cintico
Preparo do reagente: misturar na seguinte proporo: 4ml de reagente A +
1ml de reagente B. Homogeneizar suavemente.
Pr-aquecer o reagente de trabalho durante 5 minutos a 37C.
Em um tubo de ensaio pipetar 1ml do reagente, juntamente com 20l da
amostra. Homogeneizar e ler imediatamente.

3.1.14 Mucoprotena: kit Doles colorimtrico

Preparo da soluo alcalina: Adicionar o contedo do frasco080-5 a uma
proveta e completar o volume a 250ml com gua destilada.

Desproteinizao T
Soluo fisiolgica 4,2ml
Amostra 0,8ml
cido perclrico 1,8 M 2,5ml

Agitar fortemente, deixar repousar por 10 minutos e filtrar em papel fortemente

retentivo.
Precipitao das mucoprotenas T
Filtrado da etapa anterior 3,0ml
Reagente fosfotngstico 0,5ml

Agitar e deixar repousar por 10 min. Centrifugvamos por 5 minutos 3500

rpm. Decantar todo o sobrenadante. Lavar o precipitado, adicionar ao tubo 0,1ml de
reagente fosfotngstico e 0,5ml de gua destilada, suspendendo o precipitado por
 24
agitao. Centrifugar por 5 minutos. Decantar todo sobrenadante e utilizar o tubo
para o teste.
Colorimetria B T P
Soluo alcalina 4,0ml 4,0ml 4,0ml
Soluo padro - - 20l
Reagente de Folin 0,2ml 0,2ml 0,2ml

Agitar os tubos e colocar em banho-maria a 37C por 15 minutos. Leitura em

espectrofotmetro.

3.1.15 CK-NAC: kit Laborlab cintico

Preparo de mono-reagente: 4 partes de Rvo. Tampo + 1 parte de Rvo.
Enzimtico.
T
Mono-reagente 1,0ml
Amostra 20l

Ler imediatamente.

3.1.16 CK-MB (NAC): kit Laborlab cintico

Preparo do reativo de trabalho: acrescentar 400l do reativo tampo em cada
frasco de reativo enzimtico.
T
Reativo de trabalho 1,0ml
Amostra 50l
Ler imediatamente.

3.2 Parasitologia
Ramo da cincia que estuda os parasitas ou doenas parasitrias, seus
mtodos de diagnsticos e identificao, tratamento e controle da doena. Para a
pesquisa de parasitas a amostra comumente utilizada so as fezes, porm tambm
podem ser encontrados no sangue.
 25
Mtodos de identificao
3.2.1 Exame Direto a Fresco
Fezes diarricas, ou com sangue e/ou muco exame a fresco com salina:
para pesquisa de trofozotos.
Colocar 1 a 2 gotas de soluo de salina a 0,85% em lmina de microscpio;
Remove-se, com auxilio de um basto de vidro ou palito, uma pequena poro
de fezes do recipiente;
Emulsificar-se na salina cobrindo a preparao com lamnula.

Fezes formadas ou pastosas: para pesquisa de cistos, ovos e larvas.

Faz-se a mesma tcnica da pesquisa de exame direto com fezes diarricas,
porm se cora com lugol.

A preparao a fresco deve ser lida usando objetivas de 10x, depois para
confirmao usa-se aumento de 40x.
Observao: devido pequena quantidade de fezes examinada por essa
tcnica, somente recomendada para os seguintes casos:
Fezes lquidas que podem conter trofozotos de protozorios;
Amostras fecais cuja quantidade pequena demais para permitir a realizao
de outras tcnicas.

3.2.2 Sedimentao Simples sedimentao espontnea em gua

(LUTZ, 1919, HOFFMANN, PONS E JANER, 1934).
Usa-se cerca de 5g da amostra, dissolvidas no prprio coletor com um pouco
de gua;
Transferir o material dissolvido para um clice, por meio de filtrao com gaze
dobrada 4x;
Completar at do volume do clice com gua e deixar repousar durante 1 e
2 horas;
Com uma pipeta fixada a um bulbo de borracha, colher uma pequena
quantidade do sedimento, transferir uma pequena poro para a lmina e adicionar
de 1 a 2 gotas de lugol, cobrir com lamnula. Observar no microscpio.
 26
3.2.3 Flutuao Simples Flutuao Saturada de Cloreto de Sdio
(WILLIS, 1921).
Coletar 1 a 2g. de vrias partes do bolo fecal;
Colocar em pequena cuba de vidro de soluo saturada de cloreto de sdio;
Diluir as fezes em da capacidade do recipiente com soluo saturada de
cloreto de sdio;
Suspender as fezes na soluo saturada salina at haver uma total
homogeneizao;
Completar o volume do recipiente com cloreto de sdio;
Pem-se uma lmina em contato com o menisco dessa amostra diluda
durante 15 a 45 minutos;
Cuidado com a formao de bolhas de ar entre a lmina e a superfcie do
lquido;
A gota contendo os ovos se adere face inferior da lamnula;
Remover a lamnula e inverter rapidamente a sua posio sobre uma lmina;
Cuidar com a homogeneizao do material: os ovos no flutuam na superfcie
do reagente quando a homogeneizao do material fecal incompleta;
No ultrapassar o tempo de 30 a 45 minutos.

3.2.4 Centrfugo-Flutuao em Sulfato de Zinco (FAUST et al. 1938)

Colocar 1 a 2g. de fezes coletadas de vrias partes do bolo fecal em frasco

contendo 10ml de gua corrente;
Filtrar a suspenso atravs de gazes dobradas em quatro vezes, e receber o
filtrado em um tubo cnico de centrfuga de 15ml;
Adicionar gua corrente at completar 2/3 da capacidade do tubo;
Centrifugar;
Decantar o sobrenadante;
Adicionar 1 a 2 ml de gua corrente ao sedimento, antes de ressuspend-lo;
Completar com gua corrente 2/3 do volume do tubo, agitar e centrifugar;
Repetir essa etapa at que o sobrenadante apresente-se relativamente claro;
Depois que o ltimo sobrenadante decantado, adicionar 1 a 2 ml de Sulfato
de Zinco, e ressuspender o sedimento;
Completar com Sulfato de Zinco at 0,5cm da borda do tubo e centrifugar;
 27
Cuidadosamente, remover o tubo da centrifuga e sem agitao coloca-lo em
uma estante em posio vertical;
Com uma ala de arame (dimetro de 5 a 7mm) tocar no centro da membrana
formada na superfcie, transferindo vrias aladas para uma lmina de microscopia.
Examinar ovos, larvas e cistos;

3.2.5 Centrfugo-Sedimentao pela Formalina ter (RITCHIE, 1948)

Em frasco contendo 10ml de soluo salina 0.85% ou gua corrente, colocar 1

ou 2g de fezes coletadas (vrias partes do bolo fecal);
Filtrar a suspenso atravs de gaze dobrada (4x) e receber o filtrado em um
tubo cnico de centrfuga de 15ml;
Centrifugar;
Descartar o sobrenadante e adicionar 1 a 2ml de gua corrente ou soluo
salina a 0,85% ao sedimento antes de ressuspend-lo.
Completar com gua corrente (ou soluo salina a 0,85%) 2/3 do volume do
tubo. Agitar e centrifugar;
Repita a etapa 4, at que o sobrenadante se apresente relativamente claro.
Ressuspender e depois completar o sedimento com formalina a 10%. Deixar
em repouso durante 5 minutos;
Adicionar 3ml de ter ou acetado de etila, fechar o tubo e agitar
vigorosamente, na posio invertida, por 15 segundos. Remover a tampa com
cuidado;
Centrifugar;
Quatro camadas se formaro: (1) sedimento no fundo do tubo contendo os
parasitas, (2) camada de formalina, (3) tampo de detritos fecais, e (4) camada de
ter na superfcie;
Com ala separar o tampo de detritos das paredes do tubo, e com cuidado
decantar as trs camadas superiores. Limpar com swab de algodo as paredes do
tubo, removendo os detritos remanescentes;
Colocar 2 gotas de lugol no deposito cobre com lamnula e pesquisa de ovos,
lavas e cistos. (pesados).
 28
3.2.6 Mtodo de Baermann-Moraes

Tcnica: estante apropriada, funil de vidro com haste ligada a um tubo de

ltex fechado com pina de Mohr, peneira e gaze;
Encher o funil de vidro com gua corrente a 42 a 45C;
Na peneira sobre o funil e da gaze dobrada 2x, colocar 8 a 10g de fezes
recentemente emitidas;
A gua deve tocar as fezes na parte inferior, ficando parcialmente submersas;
Aps 60 minutos abrir a pina de Mohr e retirar 5 a 7ml do lquido do funil para
o vidro de relgio;
Espera 3 minutos, colocar o vidro de relgio sobre uma lmina no microscpio
e examinar na objetiva 10x no microscpio.

3.2.7 Tcnica de Graham modificada - Mtodo do Swab Anal com

fita adesiva

Indicado para ovos e parasitos adultos de Enterobios vermiculares, presentes

na regio perianal. (A. lumbricoides, T. trichiura e ovos de Taenia s.).
A colheita deve ser realizada pela manh antes do paciente defecar ou
higienizar-se.
Tcnica: sobre um tubo de hemlise, fixar uma fita adesiva transparente, com
superfcie gomada voltada para fora;
Colher o material nas regies anal e perianal, pressionando o swab (tocar de
2 a 3x);
Desprender a fita adesiva do tubo e colocar sobre lmina com face gomada
voltada para baixo;
Identificar lmina e observar em micro de 10 e 40x.

Durante o perodo de estgio em parasitologia, houve a visualizao e

identificao dos parasitas: scaris Lumbricides, Endolimax nana, Hymenolepis
nana, Trichuris Trichiura, Girdia lamblia, Entamoeba histolitica, Enterobius
vermicularis, Entamoeba coli.

3.3 Hematologia
No setor de hematologia realizamos os seguintes exames:
 29
3.3.1 Contagem de Leuccitos
Pipetar 400l do lquido de Turk (lquido diluidor) em um tubo de ensaio;
Pipetar 20l de sangue, limpando externamente a ponteira e transferir para o
tubo contendo o liquido de Turk;
Agitar suavemente por 2 minutos;
Encher os dois retculos da cmara de Neubauer, evitando o excesso de
lquido e bolas de ar;
Deixar repousar por cinco minutos para sedimentao dos glbulos.
Focalizar a preparao com objetiva de pequeno aumento (10x), e realizar a
contagem dos leuccitos encontrados nos quadrantes destinados contagem.
Clculo: Leuccitos x 50.
Valores de referncia: 5.000 a 10.000/mm.

3.3.2 Contagem de Plaquetas

Deixar o sangue em repouso para separao do plasma;
Pipetar 1ml de soluo fisiolgica e transferir para um tubo de ensaio limpo;
Adicionar 20l do plasma e misturar com a soluo fisiolgica;
Homogeneizar e preencher a cmara de Neubauer;
Deixar sedimentar em cmara mida por cinco minutos;
Focalizar a preparao com objetiva de 40x, e realizar a contagem das
plaquetas encontradas nos quadrantes destinados contagem.
Clculo: (100 Ht) x 25 x n de plaquetas (Ht=hematcrito).
Valores de referncia: 150.000 a 400.000/mm de sangue.

3.3.3 Hematcrito
Teste referente separao dos elementos constituintes do sangue: Clulas
Sanguneas e Plasma.
O sangue deve estar bem homogeneizado, por meio do agitador ou de forma
manual;
Inclina-se o tudo destampado, introduz a ponta de um tubo capilar no sangue,
por ao capilar, este preenchido at de sua capacidade;
Limpa-se a parte externa do tubo com gaze para a remoo do excesso de
sangue;
A outra extremidade era fechada com massa de modelar;
 30
Depositar o tubo capilar na micro-centrfuga com as pontas seladas de
encontro com a borracha de vedao (sempre colocando os tubos em direes
opostas, para equilibrar);
Tampar corretamente a centrfuga;
Ajustar a velocidade da centrfuga;
Centrifugar por 5 minutos;
Deixa-se a centrifuga parar completamente antes de abrir as tampas;
Determina-se o valor do micro-hematcrito usando a escala de leitura;
Aps determinao do valor, descarta-se o tubo em recipiente adequado.

3.3.4 Tipagem Sangunea em tubo

O teste em tubo o mais sensvel e confivel mtodo para se determinar o
grupo sanguneo.
Em um tubo de ensaio adiciona 100l de sangue e 1ml de soluo fisiolgica;
Marcam-se trs tubos com A, B e D;
Colocar 1 gota do soro anti-A no tubo A;
Colocar 1 gota do soro anti-B no tubo B;
Colocar 1 gota do soro anti-D no tubo D;
Coloca-se 50l da suspenso em cada um dos tubos;
Centrifugam-se os tubos por 30 segundos;
Agitam-se suavemente os tubos para soltar o sedimento do fundo, e observa-
se a existncia de aglutinao ou no;
Designa-se o grupo sanguneo e fator Rh por meio da aglutinao no tubo
identificado.
Comprovao do fator Rh negativo:
No tubo da etapa anterior (identificado com a letra D), e classificado como
negativo, adicionar 1ml de soluo fisiolgica;
Centrifugar por 1 minuto a 1.800 rpm;
Desprezar o sobrenadante;
Ressuspender com mais 1ml de soluo fisiolgica;
Repetir o procedimento por mais 3 vezes;
Adicionar 1 gota de Coombs;
Centrifugar por 1 minuto;
Homogeneizar e verificar se positivo ou negativo.
 31
3.3.5 Velocidade de Hemossedimentao VHS
a velocidade com que as hemcias se depositam sob condies
laboratoriais.
Mtodo de Westergren
Com a pipeta de Westergren aspira-se o sangue homogeneizado at
exatamente a marca zero;
Coloca-se a pipeta no suporte de modo que permanecesse na posio
vertical;
Marca-se o tempo;
Fazem-se as leituras em mm aps uma e duas horas ao nvel de separao
do plasma e hemcias
Valores normais:
Aps uma hora Aps duas horas
Homens 3 a 5 mm 7 a 15 mm
Mulheres 4 a 7 mm 12 a 17 mm
Crianas 4 a 7 mm 12 a 17 mm

3.3.6 Tempo de Sangria

Procedimento usado para avaliar a funo das plaquetas e pequenos vasos
sanguneos.
Mtodo de Duke:
Explicar o procedimento ao paciente;
Limpar a superfcie do lbulo da orelha com lcool 70% e deixar secar ao ar;
Puncionar o lbulo da orelha com uma lanceta estril e disparar o cronmetro;
Enxugar o sangue com papel de filtro a cada trinta segundos, tocando
levemente na borda da gota;
Parar o cronmetro quando o sangue no for mais absorvido pelo papel de
filtro;
Informar o tempo de sangria conforme os trinta segundos mais prximos.
Valores normais: 1 a 3 minutos.

3.3.7 Tempo de Coagulao

Corresponde ao tempo gasto para o sangue coagular, quando retirado do
organismo.
 32
Mtodo de Lee-White:
Colher o sangue por puno venosa;
Marcar o tempo (cronmetro) logo que o sangue aparecer na seringa;
Colocar 1ml de sangue em dois tubos de ensaio previamente aquecidos a
37C;
A cada minuto examinar um dos tubos, inclinando-o, at que possa ser
inclinado aproximadamente 90, sem que o sangue escorra por sua parede;
Inclinar ento o segundo tubo de trinta em trinta segundos, at a formao do
cogulo;
Marcar este tempo como o tempo de coagulao.
Valores normais: 5 a 11 minutos.

3.3.8 Prova do Lao

Teste que mede a resistncia capilar sob condies de presso sangunea
capilar aumentada artificialmente por meio de um garrote.
Verificar a presena de petquias no brao do paciente. Estas quando
presentes devem ser circuladas;
Colocar o garrote ao brao do paciente;
Manter o garrote preso ao brao do paciente por cinco minutos;
Retirar o garrote e verificar o aparecimento de petquias;
Contar as petquias caso apaream;
As que aparem logo abaixo do garrote no so contadas.
Resultados:
- Negativo: nenhuma ou no mximo seis petquias puntiformes;
- Positivo +: de seis a cinqenta petquias puntiformes;
- Positivo ++: inmeras petquias puntiformes;
- Positivo +++: petquias de dois a quatro milmetros;
- Positivo ++++: petquias maiores que as anteriores.

3.3.9 Mediada de Retrao de Cogulo

representada pelo volume de soro obtido aps coagulao e retrao de
cogulo, de uma quantidade determinada de sangue.
Colher um pouco mais de 5ml de sangue por puno venosa;
Encher o tudo da centrfuga at a marca 5ml;
 33
Colocar o fio de cobre, fixo pela rolha, com a extremidade encurvada
mergulhada no sangue, at a metade da coluna lquida;
Determinar a coagulao do sangue, inclinando o tubo, como para o tempo de
coagulao;
Colocar ento o tudo em banho-maria a 37C durante 1 hora;
Retirar cuidadosamente o cogulo aderido ao fio de cobre atravs da rolha.
Deixar escorrer o lquido existente no coagula por uma a dois minutos.
Clculo: volume do soro x 20.
Valores normais: 48 a 64%.

3.3.10 Diagnstico da Malria

Diagnstico feito pela tradicional pesquisa do parasito no sangue perifrico, seja
pelo mtodo da gota espessa ou pelo esfregao sanguneo. Estas tcnicas baseiam-
se na visualizao do parasito atravs de microscopia tica, aps colorao com
corante vital (azul-de-metileno e giemsa).
Gota espessa:
Colocar duas gotas de sangue, uma em cada extremidade da lmina;
Espalhar o sangue para que fique em formato oval;
Deixe secar ao ar;
Corar sobre imerso no azul de metileno;
Em um suporte, cobrir a lmina com a soluo corante de Giemsa (1 gota do
corante para cada ml de gua destilada ou tampo), deixar atuar por 15 minutos;
Lavar cuidadosamente sob jato de gua;
Deixar secar e examinar ao microscpio com objetiva de imerso.
Esfregao sanguneo:
Proceder ao esfregao normalmente;
Deixar secar ao ar;
Corar com Giemsa;
Deixar secar e examinar ao microscpio com objetiva de imerso.

3.4 Uroanlise
Seguiu-se por meio do exame fsico, qumico e microscpico da urina.
 34
Exame microscpico da urina
A anlise microscpica um auxilio valioso, pois fornece informaes
referentes ao diagnstico e tratamento do paciente.
Tem por finalidade a deteco e identificao os elementos insolveis, cuja
presena na urina e proveniente do sangue, rins, parte inferior do sistema urogenital
e a contaminao externa. Esses elementos so: hemcias, leuccitos, cilindros,
clulas epiteliais, bactrias, leveduras, parasitas, muco, espermatozides, cristais e
artefatos. Como alguns no tem significado clnico e outros so considerados
normais, a menos que presentes em quantidades muito elevadas, o exame do
sedimento urinrio deve compreender tanto a identificao quanto a quantificao
dos elementos encontrados.
As amostras examinadas devem ser recentes ou corretamente conservadas.
As amostras devem ser analisadas o mais breve possvel para evitar a deteriorao
celular e multiplicao de bactrias ou outro microorganismo. Quando no for
possvel, as mesmas devem ser conservadas por meio de refrigerao por 2 a 3
horas, contudo, no momento da anlise a amostra dever estar em temperatura
ambiente.
Procedimento: tcnica utilizada para exame microscpico da urina
Adicionar em mdia 12ml de urina no tubo cnico;
Centrifugar por 5 minutos a 3.000 rpm;
Despreza-se o sobrenadante, restando 0,5 ml a 1 mL no tubo;
Ressuspende-se o sedimento;
Pe-se uma gota do sedimento da ressuspenso numa lmina de
microscpio e cobre com lamnula;
Examina-se em microscpio;
A lmina examinada em pequeno e grande aumento (10x e 40x).
No perodo de estgio foram encontrados os seguintes elementos no exame
microscpico da urina: hemcias, leuccitos, clulas epiteliais, bactrias, cilindro,
cristais, muco e artefatos.

3.5 Imunologia
No estgio de imunologia foram realizados os seguintes testes: PCR, ASLO,
VDRL, Ltex e Beta HCG:
 35
3.5.1 PCR (Protena C Reativa)
Teste realizado para determinao de Protena C Reativa no soro humano.
Seu papel principal reconhecer substncias autgenas potencialmente
txicas, liberadas por tecidos danificados, liga-se a elas e detoxic-las ou remove-las
do sangue. A PCR exibe os aumentos de sua concentrao aps infarto do
miocrdio, trauma, infeces, cirurgias ou proliferao neoplsica. Auxilia no
diagnstico e controle evolutivo de inflamaes de reaes de fase aguda.
Procedimento: teste qualitativo
Identificar na placa trs crculos como teste(T), controle positivo(+) e controle
negativo(-);
Pipetar 20 l de soro do paciente no crculo teste;
Pipetar 20l do reagente controle positivo no crculo do positivo;
Pipetar 20l do reagente controle negativo no crculo do negativo;
Pipetar em cada crculo 20l do reagente teste PCR;
Homogeneizar com bastes, estendendo o lquido sobre a dimenso do
crculo;
Agitar a placa por meio do agitador automtico durante 2 minutos;
Verificar a aglutinao na placa;
Caso ocorrer aglutinao, proceder ao teste semi-quantitativo.
A presena de aglutinao indica um contedo de Protena C Reativa no
soro igual ou superior a 6mg/L.
Teste semi-quantitativo:
Identificar quatro tubos de ensaio com 1:2, 1:4, 1:8 e 1:16; numerar
igualmente quatro crculos da placa;
Em cada tubo adicionar 50l de soluo fisiolgica;
No tubo identificado com 1:2, adicionar 50l do controle positivo,
homogeneizar. Transferir 50l desta mistura para o tubo 1:4, e proceder
sucessivamente com os tubos restantes;
Transferir 20l de cada tubo para a correspondente identificao na placa;
Em cada crculo adicionar 20l do soro do paciente;
Agitar a placa por meio do agitador automtico durante 2 minutos;
Verificar a aglutinao na placa.
 36
O ttulo aproximado corresponder a ltima diluio mais alta do soro que
apresenta aglutinao claramente visvel.

3.5.2 ASLO (ANTI-ESTREPTOLISINA O)

O organismo infectado produz anticorpos especfico contra exotoxinas,
destacando-se entre elas a Anti-Estreptolisina O. A determinao do ttulo de Anti-
Estreptolisina O no soro de um paciente, permitir estabelecer o grau de infeco
devido ao estreptococo Beta-hemoltico.
A determinao do ttulo de Anti-Estreptolisina O se baseia no efeito
inibitrio que o soro de um paciente produz sobre o poder hemoltico de uma
Estreptolisina O previamente titulada e reduzida.
Procedimento: teste qualitativo
Pipetar 20l de soro do paciente no crculo teste + 20l de reagente teste
ASLO;
Pipetar 20l do reagente controle positivo no crculo do positivo + 20l de
reagente teste ASLO;
Pipetar 20l do reagente controle negativo no crculo do negativo + 20l de
reagente teste ASLO;
Homogeneizar com bastes, estendendo o lquido sobre a dimenso do
crculo;
Agitar a placa por meio do agitador automtico durante 2 minutos;
Verificar a aglutinao na placa;
A presena de aglutinao indica um contedo de Anti-Estreptolisina O no
soro igual ou superior a 200 Ul/ml.
Se ocorrer aglutinao, proceder ao teste semi-quantitativo, utilizando a
mesma tcnica descrita no teste imunolgico PCR, porm, utilizando o reagente do
ASLO.

3.5.3 VDRL
O VDRL auxilia no diagnstico e acompanhamento de pacientes com sfilis.
Procedimento: teste qualitativo
Pipetar em lmina escavada 50l da amostra, adicionar 20l do reagente
VDRL;
Agitar a placa por meio do agitador automtico durante 5 minutos;
 37
Examinar no microscpio, com objetiva de 10x.
Resultados:
No reagente: no h floculao.
Reagente: presena de floculao, com formao de grumos de tamanho
variveis.
Teste semi-quantitativo:
Pipetar em 4 cavidades da placa 50l de soluo fisiolgica, em seguida
adicionar 50l da amostra na cavidade n1. Homogeneizar, transferir 50lda
primeira para a segunda cavidade e assim, sucessivamente, at a sexta cavidade.
Desprezar os 50l em excesso da ltima cavidade;
Adicionar 20l de reagente VDRL em cada cavidade da placa;
Agitar a placa por meio do agitador automtico durante 5 minutos
Examinar no microscpio, com objetiva de 10x.
Considera-se como ttulo a maior diluio da amostra em que ocorreu
floculao.

3.5.4 Ltex
O mtodo fundamenta-se em uma reao de aglutinao de partculas de
ltex recobertas com o anticorpo correspondente.
Procedimento: teste qualitativo
Adicionar no 1 crculo da placa 25l da amostra + 25l do reagente Ltex;
No 2, 25l do controle positivo + 25l do reagente Ltex;
No 3, 25l do controle negativo + 25l do reagente Ltex;
Homogeneizar com bastes, estendendo o lquido sobre a dimenso do
crculo;
Agitar a placa por meio do agitador automtico durante 2 minutos;
Verificar a aglutinao na placa.
A aglutinao visvel em amostra com concentrao igual ou superior a
200UI/ml.
Teste semi-quantitativo:
Realizar o mtodo igual a tcnica descrita no teste da PCR, utilizando o
reagente Ltex.
 38
3.5.5 Beta HCG
Teste utilizado para confirmao de gravidez.
Procedimento: teste fita reativa
Em uma fita reativa adicionar aproximadamente 2 gotas do soro da paciente;
Verificar o aparecimento de traos confirmatrios;
Resultados:
Uma linha: negativo.
Duas linhas: positivo.
 CONCLUSO

O curso tcnico em laboratrio teve por intuito a formao de profissionais na

rea de anlises clnicas. Essa formao constituiu-se por meio de aulas tericas em
salas de aula e aulas prticas atravs da realizao de estgios.
Os estgios realizados proporcionaram uma ampla viso em relao
atuao e responsabilidades exigidas em um laboratrio de anlises clnicas. Por
meio destes foi possvel verificar a rotina de trabalho, prticas apropriadas a serem
aplicadas, assim como desenvolver e aperfeioar mtodos e tcnicas que foram
aprendidas em sala de aula.
Contudo, a juno entre teoria e prtica proporcionou a formao de
profissionais qualificados e aptos para atuarem de forma adequada e eficiente dentro
de um laboratrio de anlises clnicas.
 REFERNCIAS

MOURA, Roberto A. de Almeida. Colheita de material para exames de

laboratrio: Assegurando a qualidade dos servios no laboratrio clnico. So Paulo:
Atheneu, 1998.

VALLADO, Edgar. Manual de tcnicas hematolgicas. So Paulo: Atheneu, 2002.

WADA, C.S; ADHEMAR, P.; ROBERTO, A.M. Tcnicas de laboratrio. So Paulo:

Atheneu, 2002.