ISSN 1738-6055 (Print) ISSN

2233-7660 (Online)

Lab Anim Res 2016: 32 (3), 166-170

http://dx.doi.org/10.5625/lar.2016.32.3.166

Prevalência de Salmonella spp. em tartarugas de estimação e seu ambiente

Du-San Voltar 1, #, Gee-Wook Shin 2, #, Mitchell Wendt 1, Gang-Joon Heo 1, *

1 Veterinary Medical Center e Faculdade de Medicina Veterinária da Universidade Nacional de Chungbuk, Cheongju, Coréia

2 Instituto Bio-Segurança Research e Faculdade de Medicina Veterinária da Universidade Nacional Chonbuk, Jeonju, Coréia

tartarugas de estimação são conhecidas como fonte de Salmonella infecção para os seres humanos quando manuseado em cativeiro. Trinta e quatro tartarugas
comprados a partir de lojas de animais e mercados on-line na Coreia foram examinadas para determinar se as tartarugas e seu meio ambiente estavam
contaminadas com Salmonella spp. Salmonella spp. foram isolados a partir de amostras de fezes de 17 tartarugas. Estes isolados foram identificados como sendo S.
entérica através de sequenciação do gene de ARNr 16S. A taxa de isolamento de Salmonella spp. a partir de amostras de solo e água aumentou ao longo do
tempo. Concluiu-se que uma elevada percentagem de tartarugas sendo vendidos em lojas de animais foram infectados com Salmonella

spp., e seus ambientes tendem a ser contaminados com o tempo se não forem mantidos adequadamente. Estes resultados indicam que tartarugas de

estimação pode ser um risco potencial de salmonelose na Coréia. Palavras-chave: Prevalência, tartarugas de estimação, meio ambiente, Salmonella spp.,

salmonelose

Recebeu 11 julho, 2016; versão revisada recebeu 16 ago 2016; Aceito 21 de agosto de 2016

Salmonella spp., como grama cocobacilos negativa causando várias
doenças em seres humanos e animais, são alguns dos agentes patogénicos
de origem alimentar à base de água e, mais importante em todo o mundo. A
visão atual da S uma lmonella spp. taxonomia atribui os membros deste gênero
a duas espécies: S. entérica e
S. bongori. S. enterica si é dividido em seis subespécies,
enterica, salamae, arizonae, diarizonae, indica, e
houtenae, também conhecido como subespécies I, II, Illa, Illb, IV e VI,
respectivamente. Membros de Salmonella enterica subespécies enterica estão manuseio de animais infectados, como tartarugas infectadas e materiais
Enteritidis e S. entérica serovar typhimurium, que são salmonelose tifóide
[6-8]. Após 6-48 horas de incubação, alguns dias de sintomas clínicos
desenvolver tais como febre, dor de cabeça, náuseas, vómitos, dor de
estômago, e diarreia, mas normalmente os pacientes a recuperar em
três dias [9,10]. Portanto, répteis constituem uma fonte potencial de
zoonose [11].
casos de salmonelose humana são frequentemente associados com
comida, mas frequentemente as pessoas se tornam infectadas pelo

principalmente associados com vertebrados sangue quente e são contaminados, como água e solo [12,13]. Além disso, as pessoas que são
geralmente transmitidas por ingestão de comida ou água contaminada com imaturos ou imuno-comprometido incluindo bebês, crianças menores de 5
fezes infectadas [1]. anos, mulheres grávidas, idosos e pessoas com AIDS são propensas a Salmonella

infecção, o que resulta em sinais clínicos, como febre e diarreia se não

Os répteis são portadores assintomáticos de Salmonella spp. infecção, e lavar as mãos após o manuseio tartarugas de estimação [14,15]. Na
eles intermitentemente excretar esses organismos em suas fezes [2-5]. No Coréia, dois pacientes visitou Hospital Severance crianças em Seul com

uma queixa principal de febre e foram diagnosticados com

entanto, os seres humanos mostram sintomas clínicos quando infectados com Salmonella

spp. tais como gastrenterite aguda causada pela S. entérica serovar

# Estes autores contribuíram igualmente para este trabalho.

* Correspondência: Gang-Joon Heo, Laboratório de Animais Aquáticos Medicina, Faculdade de Medicina Veterinária da Universidade Nacional de Chungbuk, Cheongju 28644,
Coreia
Tel: + 82-43-267-3150; Fax: + 82-43-267-3150; E-mail: gjheo@cbu.ac.kr

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a distribuição, e a reprodução em qualquer meio, desde que a obra original, devidamente citada.

166
 Prevalência de Salonella spp. em tartarugas de estimação
salmonelose tifóide [16].
À medida que mais pessoas se interessam em animais de companhia e
os negócios relacionados prospera, o número de aquários, pet shops, lojas
on-line, bem como cafés de animais que vendem anfíbios e répteis
aumentou. répteis de estimação são conhecidos como um reservatório
para os potenciais agentes patogénicos zoonóticos incluindo vírus,
bactérias e fungos, e bactérias, em particular, são excretados como flora
normal em répteis e anfíbios, resultando na classificação das suas
espécies como um grupo de alto risco devido a possíveis sinais clínicos de
infecção direta e indireta de imunocomprometidos e idosos, crianças e
mulheres grávidas [17]. A associação entre a salmonelose e pet tartarugas
motivou a proibição federal de 1975 relativa à venda de tartarugas com
uma carapaça de <10,2 cm (4 polegadas) nos Estados Unidos [18,19]; No
entanto, aqui há tais regulamentos da Coreia [20]. Uma vez que as
bactérias são excretados pelas fezes, factores ambientais, tais como a
água e o solo, também são capazes de transmitir as bactérias [21].
Prevenir
Salmonella spp. infecção em tartarugas bebés, o método de administração de
antibióticos antes de incubação é conhecida; no entanto, os efeitos parecem
temporária e pode mesmo causar resistência a antibióticos [22,23]. Além disso,
a negligência de donos de animais de tartaruga na limpeza da gaiola e água
aumenta a taxa de detecção de Salmonella spp. Recentemente, o aumento de
famílias unipessoais, aumento de agregados familiares idosos e baixa taxa de
natalidade causou um aumento no número de famílias que criam animais de
estimação (cães, gatos e animais exóticos). Como o afeto entre o proprietário e
pet aprofunda, os aumentos de contato físico e permite o risco de exposição a
um patógeno [11]. A susceptibilidade de salmonelose em crianças com menos
de 5 anos é de 5 vezes maior do que os adultos [24,25]. Por exemplo, 39
com 5 ml de água destilada esterilizada durante 24 h. Um mL da água
crianças que participaram de um dragão de Komodo ( Varanus komodoensis) exposição
destilada que contém fezes da tartaruga foi tomada como uma amostra
no Jardim Zoológico de Denver, no Colorado, em 1996, foram infectados com Salmonella
spp. embora nenhum deles tocou os animais [26]. Portanto, as famílias,
creches e escolas levantando tartarugas como animais de estimação deve
separar as tartarugas de crianças menores de 5 anos e outras pessoas
imuno-comprometidos. Em particular, a compra de tartarugas maiores que 4
polegadas e manutenção de um ambiente limpo para elevar as tartarugas é
crucial. lojas de animais também devem informar os seus clientes sobre o risco
de infecção através da água, mesmo que as tartarugas são mais de 4
polegadas e enfatizar a importância da limpeza gaiola. Por último, hospitais e
prestadores de cuidados de saúde devem educar os pacientes sobre os riscos
de tartarugas de estimação e enfatizar a importância da lavagem das mãos
(http://www.cdc.gov/
167
salmonela / pequenos-tartarugas-03-12). Portanto, a Coreia deve promulgar tais
leis para prevenir a infecção salmonelose de tartarugas de estimação de pequeno
porte. Estudamos a taxa de isolamento de Salmonella spp. a partir de amostras
fecais de tartarugas de estimação comprados em lojas de animais, bem como
amostras de água e solo em seu ambiente ao longo do tempo, e nós usamos isso
para avaliar o risco de infecção por tartarugas de estimação e seu ambiente do
ponto de vista da saúde pública e forneceu informações sobre a prevenção de
salmonelose.
Materiais e métodos
Compra de tartarugas de estimação
Trinta e quatro tartarugas de 6 espécies comercialmente populares foram
adquiridas através de 9 lojas de animais e 8 mercados on-line onde estão
localizados em Seul, Daejeon, Cheongju e Busan. As tartarugas adquiridos
tinham um peso médio de 15 ± 2 g, diâmetro de carapaça de 40 ± 5 mm, e
foram menos de 4 semanas de idade.
Entre as 34 tartarugas, 10 tartarugas chineses cerviz da tarja ( Ocadia
sinensis), 8 cursores barriga amarela ( Trachemys scripta scripta), 6 cooters
rio ( concinna concinna Pseudemys), 4 tartarugas softshell do norte da
China ( Pelodiscus maackii), 3 tartarugas pintadas Ocidentais ( Chrysemys
picta belli) e 3 tartarugas musk comuns ( Sternotherus odoratus)
foram estudados.
coleta de amostra fecal
Cada um dos tartarugas compraram foi colocado em 500 mL de copo
fecal. Para prevenir
Salmonella spp. transmissão entre os indivíduos, polygloves foram
mudados cada vez que um animal foi tratado.
Enriquecimento e isolamento de Salmonella spp.
As amostras foram cultivadas de acordo com o método de
International Standard (http://www.iso.org/iso/catalogue_detail. Htm?
Csnumber = 29315, 2002). As amostras fecais foram suspensos em 5
mL de solução salina estéril, e 1 ml da suspensão foi inoculada em 9 ml
de caldo de tetrationato (TTB, MB célula Ltd., Seul, Coreia) a 37 ° C
durante 24 h. Após a incubação, o caldo foi misturada durante 5
segundos com um agitador Vortex. Em seguida, uma ansa de cada tubo
foi riscada numa placa de meio selectivo, ágar verde brilhante (BGA, MB
célula Ltd., Seul, Coreia do Sul) e desoxicolato de xilose lisina (XLD,
célula MB Ltd.,
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168 Du-San Voltar et al.

Seul, Coréia). Estas placas foram incubadas a 37 ° C durante 24 h. As Tabela 1. taxa de isolamento de Salmonella spp. por espécies de tartarugas

colónias que se suspeita conter Salmonella spp. tal como colónias cor taxa de
Espécies No. No. testados
positivo isolamento * (%)
de rosa-branco no BGA e colónias pretas em XLD foram inoculadas e
cultivadas em outro meio selectivo para os isolar. Ocadia sinensis 10 8 80
Trachemys scripta scripta 8 3 37,5
Pseudemys concinna concinna 6 3 50
Pelodiscus maackii 4 3 75
Identificação usando rRNA 16S sequenciação Chrysemys picta belli 3 0 0
Todas as 17 estirpes de presumíveis Salmonella spp. foram Sternotherus odoratus 3 0 0

identificados utilizando sequenciação do rRNA 16S com os iniciadores Total 34 17 50

universais e 27F 1492R em Cosmogenetech Co., Ltd. (Seoul, Coreia).

Levantando condição de tartarugas de estimação em gaiolas

Um total de 17 gaiolas, contendo cada 1-3 tartarugas da mesma espécie

da mesma loja de animais foram administrados; cada gaiola tinham uma

inclinação feita com o solo e seixos, 2 L de água esterilizada feita com um

sistema de filtração da água e um filtro de cartucho. Durante este estudo, a

mudança na taxa de isolamento ao longo do tempo de Salmonella spp. em

água, foi examinado o solo e as amostras de pele. Alimentação de tartarugas

seguido o método de criação geral: camarão seco Gammarus com

suplementos de cálcio (Samhotech Co., Ltd., Seul, Coreia) foram alimentados

duas vezes por dia, enquanto a temperatura da água foi mantida a 26 ± 2 ° C,

pH 6,5-8,2, e 12 hr de fotoperíodo cada dia foram mantidas durante a Figura 1. Número de gaiolas da tartaruga isolado Salmonella spp. a partir de amostras de
água e solo aumentou ao longo do tempo
experiência.

a partir de 8 de 10 tartarugas chineses tarja de pescoço, 3 de 8 sliders barriga

amarela, 3 de 6 cooters rio, 3 de 4 tartarugas softshell chineses do norte e

taxa de isolamento de Salmonella spp. do meio ambiente ao longo do tempo nenhuma Salmonella spp. foi isolado a partir das tartarugas pintadas ocidentais e

tartarugas de Musk comum. 16S rRNA resultados de sequenciação confirmaram o

Para estudar a presença de Salmonella spp. em ambientes das tartarugas isolado como S. entérica.

ao longo do tempo, as amostras de água e solo foram recolhidas a cada 2 dias

a partir de cada um dos 17 gaiolas durante 10 dias. Cinco gramas de solo de

descanso ou alimentação área de uma tartaruga foi obtido utilizando uma taxa de isolamento de Salmonella spp. do meio ambiente ao longo do tempo

colher esterilizada e incubou-se em 10 mL de TTB [27]. Dez mililitros de água

foram recolhidos de cada gaiola com uma pipeta estéril e suspensas a Tal como mostrado na Figura 1. A seguir, a taxa de isolamento de

temperatura ambiente durante 10 min. Em seguida, um mL do precipitado foi Salmonella spp. aumentou ao longo do tempo. Em outras palavras, no dia 2 Salmonella

inoculada em 9 mL de TTB. Estas amostras foram incubadas a 37 ° C durante spp. foi isolado a partir de cinco amostras de água e amostras de solo 8;

24 h em meio de enriquecimento. O método de enriquecimento e isolamento Contudo, Salmonella spp. Isolou-se a partir de 14 amostras de água e

foi feito pelo mesmo método como a amostra fecal. amostras de solo 15 no dia 10. Isto demonstra que a maioria dos ambientes

de gaiola foram contaminados com Salmonella spp. ao longo do tempo.

Resultados
Discussão
Isolamento e identificação de Salmonella spp. a partir de amostras fecais

À medida que mais pessoas se interessam em animais de companhia e

Salmonella spp. foram isolados a partir de 17 (50,0%) de 34 amostras fecais de os negócios relacionados prospera, o número de aquários, pet shops, lojas

tartaruga (Tabela 1); As amostras positivas foram on-line, bem como cafés pet venda

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 Prevalência de Salonella spp. em tartarugas de estimação
anfíbios e répteis aumentou. répteis de estimação são conhecidos como um
reservatório para os potenciais agentes patogénicos zoonóticos incluindo vírus,
bactérias e fungos, e bactérias, em particular, são excretados como flora
normal em répteis e anfíbios, resultando na classificação das suas espécies
como um grupo de alto risco devido a possíveis sinais clínicos de infecção
direta e indireta de imunocomprometidos e idosos, crianças e mulheres
grávidas [17]. A susceptibilidade de salmonelose em crianças com menos de 5
anos é de 5 vezes maior do que os adultos [24,25]. Por exemplo, 39 crianças
que frequentavam uma exposição Dragão de Komodo no jardim zoológico de
Denver, no Colorado, em 1996, foram infectados com Salmonella spp. embora
nenhum deles tocou os animais [26]. Portanto, as famílias, creches e escolas
levantando tartarugas como animais de estimação deve separar as tartarugas
de crianças menores de 5 anos e outras pessoas imuno-comprometidos. Em
particular, a compra de tartarugas maiores que 4 polegadas e manutenção de
um ambiente limpo para elevar as tartarugas é crucial. lojas de animais
também devem informar os seus clientes sobre o risco de infecção através da
água, mesmo que as tartarugas são mais de 4 polegadas e enfatizar a
importância da limpeza gaiola. Por último, hospitais e prestadores de cuidados
de saúde devem educar os pacientes sobre os riscos de tartarugas de
estimação e enfatizar a importância da lavagem das mãos. Portanto, a Coreia
deve promulgar tais leis para prevenir a infecção salmonelose de tartarugas de
estimação de pequeno porte. Neste estudo, Salmonella spp. foi isolado a partir
de amostras de fezes de 17 de 34 tartarugas (50%). Em estudos semelhantes,
Salmonella spp. Isolou-se a partir de 10,3% de tartarugas no jardim zoológico de
Roma [7] e 6,61 e 6,38% de tartarugas nativas e freeliving em partes de Espanha
[28]. Em comparação, este estudo mostrou uma taxa de isolamento mais elevada.
Contudo, Salmonella
spp. foi isolado de 72,2% das tartarugas em pet shops no Japão [29], um
percentual maior do que o nosso estudo. Isso mostra a possível transmissão
horizontal entre tartarugas devido a uma gestão descuidada de lojas de
de interesse para publicar estes resultados.
animais, bem como elevar muitas tartarugas na mesma gaiola. Desde a Salmonella
spp. derramamento pode ser intermitente e relacionadas com o stress [30,31],
obtendo-se Salmonella spp. de tartarugas selvagens por amostragem simples
não vai ser fácil. A partir dos resultados acima, pode-se concluir que o aumento
tartaruga doméstica e de distribuição tem risco potencial para Salmonella spp.
infecção.
No presente estudo, a sequenciação do rRNA 16S de todos os isolados a partir de
amostras fecais geneticamente confirmado como S. entérica. A maioria dos casos de
salmonelose são causadas por alimentos contaminados com S. entérica também
foram mostrados para ser fontes de infecção para os seres humanos. As proteínas
segregadas têm
169
grande importância para a patogénese de doenças infecciosas causadas
pela S. entérica [ 1]. Como a Figura 1 mostra um aumento gradual de Salmonella
spp. taxa de isolamento ao longo do tempo, a maioria das gaiolas foram
gradualmente contaminado, a menos que a água foi mudado e o ambiente foi
mantida limpa. Portanto, a gestão negligente do ambiente levantamento, tais
como a falta de mudar a água eo solo irá resultar em Salmonella spp.
contaminação. Este estudo concluiu que muitas pequenas tartarugas de
estimação distribuídos na Coréia foram infectados com Salmonella spp. e
gestão imprópria dos seus ambientes de subida irá aumentar a contaminação
do Salmonella spp. ao longo do tempo. embora atualmente S. entérica tem 6
subespécies, e cada um tem associado subespécie 2500 serotipos que
diferem pela especificidade antigénica, apenas cerca de 50 serovares são
isolados em quaisquer números significativos como patogéneos humanos ou
animais e que todos eles pertencem à subespécie enterica. A patogenicidade
da maioria dos sorovares distintos continua indefinida e, mesmo dentro dos
sorotipos mais comuns, muitas questões ainda precisam ser respondidas
sobre as interações entre o organismo eo hospedeiro infectado [1,32]. Além
disso, novos estudos devem se concentrar na patogenicidade para os seres
humanos e resistência a antibióticos de
Salmonella subespécies e serovares obtidas a partir deste estudo.
Agradecimentos
Esta pesquisa foi apoiada pelo Programa de Pesquisa em Ciência
Básica através da Fundação Nacional de Pesquisa da Coreia (NRF),
financiado pelo Ministério da Educação (NRF-2015R1D1A1A01060638).
Conflito de interesses Os autores declaram que não há conflito financeiro
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