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GABARITO - Exercicios Sobre Cinetica Enzimatica PDF
GABARITO - Exercicios Sobre Cinetica Enzimatica PDF
GABARITO - Exercicios Sobre Cinetica Enzimatica PDF
1. A enzima urease aumenta a velocidade da hidrólise da uréia em pH 8,0 e 20º C por um fator de
1014. Se uma dada quantidade de urease pode hidrolisar completamente uma certa quantidade de
uréia em 5 minutos a 20º C e pH 8,0, quanto tempo (em anos) levaria para que essa mesma
quantidade de uréia fosse hidrolisada sob as mesmas condições na ausência da urease?
t = 5 min x 1014
Transformando em dias:
Transformando em anos:
𝑉𝑚á𝑥. [𝑆]
𝑉𝑜 =
𝐾𝑚 + [𝑆]
Substituindo:
Resolvendo a equação:
b) Determine a fração de Vmáx que seria obtida nas seguintes concentrações de substrato: 1/2Km;
2Km e 10Km.
i) [S] = ½ Km ou 0,5Km – é só substituir este valor na equação :
𝑉𝑚á𝑥.[𝑆] 𝑉𝑚á𝑥.0,5𝐾𝑚 0,5 𝑉𝑚á𝑥.𝐾𝑚
𝑉𝑜 = → 𝑉𝑜 = → 𝑉𝑜 =
𝐾𝑚+[𝑆] 𝐾𝑚+0,5𝐾𝑚 1,5 𝐾𝑚
iii) [S] = 10 Km
Resposta: 𝑉𝑜 = 0,9. 𝑉𝑚á𝑥
c) Enzimas que catalisam a reação X↔Y são isoladas de 2 espécies de bactérias. As enzimas
possuem a mesma Vmáx, mas diferentes valores de Km. A enzima A tem Km=2 µM e a enzima B
tem Km=0,5 µM. Qual destas enzimas possui maior afinidade pelo substrato?
3. Um grupo de pesquisadores descobriu uma nova enzima, que catalisa a reação abaixo, e que eles
nomearam de felicidase:
FELICIDADE ↔ TRISTEZA
Os pesquisadores iniciaram a caracterização da enzima.
(a) No primeiro experimento, com [Et] de 4 nM, eles observaram que a Vmáx é 1,6 µM.s-1 Com base
nesse experimento, qual é o kcat da felicidase? (coloque as unidades apropriadas)
Portanto:
𝐾𝑐𝑎𝑡 = 400 𝑠 −1
Para este exercício, precisamos utilizar o valor de Kcat obtido no exercício anterior (b).
Com este valor, e utilizando a fórmula da Kcat, podemos calcular o novo valor de Vmáx, com
[Et] = 1 nM:
𝑉𝑚á𝑥 𝑉𝑚á𝑥
𝐾𝑐𝑎𝑡 = [𝐸𝑡]
→ 400 𝑠 −1 = 10−9 𝑀
→ Vmáx = 0,4 . 10-6 M.s-1ou 0,4 µM.s-1
𝑉𝑚á𝑥. [𝑆]
𝑉𝑜 =
𝐾𝑚 + [𝑆]
0,4 µ𝑀. 𝑠 −1 . 30 µ𝑀
0,3 µ𝑀. 𝑠 −1 =
𝐾𝑚 + 30 µ𝑀
Km = 10 µM
(c) Pesquisas posteriores indicaram que a felicidase isolada no primeiro experimento estava
contaminada com um inibidor reversível, denominado RAIVA. Quando RAIVA foi totalmente
removida da preparação de felicidase e os dois experimentos foram repetidos, observou-se que
a Vmáx não foi alterada, mas o valor de Km passou a 20 µM. Com base nestas informações,
qual o tipo de inibição realizada por RAIVA?
4. Embora haja disponibilidade de métodos gráficos precisos para determinação de Vmáx e Km de uma
reação catalisada por enzimas, algumas vezes estes parâmetros podem ser rapidamente
estimados pelo exame dos valores de Vo aumentando a [S]. Estime os valores de Vmáx e Km da
reação catalisada por uma enzima na qual foram obtidos os seguintes dados:
5. A anidrase carbônica de eritrócitos (PM: 30.000 g/mol) tem um dos números de renovação mais
altos conhecidos. Ela catalisa a hidratação reversível do CO2.
- Primeiro, calcular o número de mols de CO2 e da enzima (anidrase carbônica) presente nas
massas dadas no enunciado.
0,3 g de CO2:
46g – 1 mol
0,3g – x
10 µg de anidrase carbônica:
30.000 g – 1 mol
- Agora, é só substituir os valores de Vmáx e concentração total da enzima (em mols, [Et]) na
equação da Kcat:
𝑉𝑚á𝑥
𝐾𝑐𝑎𝑡 =
[𝐸𝑡]
0,00652 𝑚𝑜𝑙/𝑚𝑖𝑛
𝐾𝑐𝑎𝑡 =
3,3. 10−10 𝑚𝑜𝑙