ROTEIRO PARA ATIVIDADES PRÁTICAS 

ATIVIDADE PRÁTICA: 1  
TÍTULO PRÁTICA: A AMOSTRA: EXTRAÇÃO DO DNA DAS CÉLULAS HUMANAS 

CURSOS: BIOMEDICINA 
DISCIPLINA:  PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIVIDADES BIOLÓGICAS
LABORATÓRIO: BIOLOGIA E ANÁLISES BIOLÓGICAS
TUTOR: MELISE CHAVES SILVEIRA 
 

OBJETIVO DO PROCEDIMENTO
Nessa prática iniciaremos com um procedimento básico de Biologia molecular: a extração do DNA. As células da boca 
são uma excelente fonte de DNA para diagnóstico e estudos moleculares. Hoje, vamos extrair DNA humano a partir de 
uma amostra de células da mucosa oral. A partir desse material, uma grande variedade de métodos moleculares podem 
ser realizados. 
 
REFERÊNCIA BIBLIOGRÁFICA
SILVA,  Alexsandro  Macedo  e  RIBEIRO  NETO,  Luciane  Maria. Biologia  molecular:  métodos  e  interpretações. Rio  de 
Janeiro: Grupo Editorial Nacional, s/d. 
MORAES,  Milton.  Extração  de  DNA  de  mucosa  bucal.  Disponível  em: 
http://www.invivo.fiocruz.br/cgi/cgilua.exe/sys/start.htm?infoid=220&sid=3. Acesso em: 20 maio 2019. 
 
MATERIAL NECESSÁRIO PARA A ATIVIDADE (1 ‐5 alunos)
DESCRIÇÃO MATERIAL  QTD 
Copo descartável  1* 
Becker  volume 100ml  2* 
Tubo de ensaio  1* 
Pipeta volumétrica 10ml  1* 
Pipetador de segurança com 3 vias  1 
Proveta volume 100ml  1 
Vidro com tampa volume 10ml  1* 
Pipeta graduada volume 1ml  2 
Abaixador de língua de madeira  1* 
Palito de madeira  1* 
Balança  1 
Bastão de vidro 30cm  3 
Vidro de relógio  1 
Água destilada  200 ml 
Sal de cozinha  3 g 
Detergente  25 ml 
Álcool absoluto ou a 96%  15 ml 
Sal de cozinha  3 g 
 
PROCEDIMENTOS
1. Preparo das soluções 
1.1) Solução de NaCl (sal de cozinha) a 3%  
  
Pesar 3g de NaCl usando o vidro de relógio. 
Medir 100ml de água destilada utilizando a proveta volume 100ml. 
Transferir o NaCl e a água destilada para um becker de 100ml. 
Homogeneizar com o bastão de vidro. 
 
1.2) Solução detergente a 25% 
Medir 25ml de detergente usando a proveta volume 100ml. 
Completar o volume da solução com água destilada para 100ml. 
Homogeneizar com bastão de vidro. 
  
2.Extração do DNA 
Fazer  uma  raspagem  da  mucosa  oral  (menos  língua)  utilizando  o  abaixador  de  língua.  Após  este  procedimento  o 
abaixador de língua deve ser descartado. 
Transferir volume suficiente para bochecho da solução de NaCl para um copo descartável. 
Bochechar vigorosamente por 60 segundos. 
Transferir o volume obtido no bochecho para um becker volume 150ml. 
Com a pipeta volumétrica, transferir 10ml desse volume para um tubo de ensaio. 
Adicionar 500µl de solução detergente usando uma pipeta graduada. 
Homogeneizar com bastão de vidro. 
Adicionar álcool gelado lentamente pela parede do recipiente até completar uma coluna de 1cm. 
Aguardar o DNA formar uma massa esbranquiçada e subir para a superfície. 
 
3. Estocando o DNA 
Com o auxílio de um palito de madeira, recuperar os grumos de DNA.  
Transferir para um vidro de 10ml, com tampa, os grumos de DNA. 
Com pipeta graduada de 1mL, acrescentar 1ml de água destilada ao vidro e homogeneizar vigorosamente. 
Guardar em temperatura de ‐20°C. 
 
 

OBSERVAÇÕES
Seguir as normas de biossegurança: uso de jaleco com mangas compridas, calça jeans ou similar (não permitida a calça 
tipo  legging),  calçado  totalmente  fechado  (não  permitida  a  exposição  de  qualquer  região  do  pé),  cabelos  presos 
(quando se aplicar) e higienização das mãos antes e após a aula prática. Proibido terminantemente lanchar, fumar, 
utilizar aparelho celular, brincar com peças anatômicas ou qualquer comportamento indevido no laboratório. Utilizar 
luvas descartáveis quando se aplicar. 
 

RELATÓRIO
Não se aplica