Biologia Celular e Molecular para Nutrição e Metabolismo

RNM 0003

NÚCLEO CELULAR

Vanessa Cristina Arfelli

Doutoranda
Laboratório de Investigação Molecular do Câncer – LIMCa

Ribeirão Preto-SP
07.05.18
 Qual a importância do
Célula eucariótica animal
compartimento nuclear?

Núcleo
Poros nucleares Cromossomos

Nucléolo

Membrana nuclear Cromatina

Características do Núcleo

• Envelope nuclear formado por duas

membranas concêntricas;
• Poros que regulam a passagem
seletiva de moléculas;
• Contém DNA, organizado em
cromatina e formando os
cromossomos;
• Contém proteínas, que entre muitas
funções ajudam a manter os
cromossomos;
• Compartimentos subnucleares com
funções definidas.
Processos que ocorrem no Núcleo

• Síntese de DNA (replicação);

• Síntese de RNA (transcrição);

• Processamento de RNA (splicing);

• Montagem das subunidades ribossomais.

 A estrutura do núcleo é dinâmica!
• Depende da fase do ciclo celular

Núcleo interfásico Metáfase: núcleo Telófase: núcleo

desorganizado começa a se
reorganizar
• Depende do tipo de célula
 Envelope nuclear

• Formado por 2 membranas concêntricas:

Membrana nuclear interna:

Contém proteínas que servem para
ancoragem dos cromossomos e da
proteína lamina.

Membrana nuclear externa:

Composição semelhante à
membrana do RE.

• Mantido por uma rede de filamentos

intermediários.
 Lâmina nuclear
Proteína lamina - filamento intermediário
Funções:
Suporte e resistência
Sítio de ancoramento da cromatina

• Os filamentos intermediários da lâmina nuclear se dissociam e se reagrupam

a cada divisão celular.
Lâmina nuclear
Proteína lamina - filamento intermediário

• Fosforilação das laminas por kinases - dissociação.

• Desfosforilação – reassociação das laminas.
 Poros nucleares
Transporte ativo e seletivo de macromoléculas para o núcleo

• Também permitem difusão de pequenas moléculas;

• Transporte bidirecional;
• Proteínas são transportadas nas suas conformações nativas;
• Subunidades de RNA são transportadas já montadas;
• Controle da qualidade do mRNA.
Proteínas com sinal
de localização
Citoplasma nuclear - NLS
(sequência sinal)

Exportação
Importação

RNAs recém sintetizados, Núcleo

subunidades ribossomais
Poros nucleares
Transporte ativo e seletivo de macromoléculas para o núcleo

Micrografia eletrônica
 Transporte nuclear
Importação • Receptores de importação nuclear
ligam-se ao sinal de localização nuclear

• Interagem com as fibrilas

do complexo proteico do
poro

• Poro age como

um diafragma

Exportação ocorre por um mecanismo semelhante!

GTPase Ran impõe direcionalidade do transporte nuclear

Importação

GAPs

GEFs
GTPase Ran impõe direcionalidade do transporte nuclear

Exportação
GAPs

GEFs
Recapitulando: transporte nuclear
DNA: principal componente do núcleo
O núcleo contém o DNA,
a molécula que abriga a informação genética

Adenina

Nucleotídeo

• Dupla fita – estrutura em hélice

estabilizada por pontes de Hidrogênio
• Cadeias antiparalelas
 DNA : a molécula que contém a informação genética

Purinas Pirimidinas

As bases nitrogenadas não se

pareiam ao acaso!

Purinas: 2 anéis
A AGua é pura!

Pirimidinas: apenas 1 anel

Cadeias antiparalelas :
complementariedade
-Essencial para a replicação
do DNA!
Arranjo energeticamente favorável
Cada célula humana contém aproximadamente
2 m de DNA. O núcleo celular tem apenas de
5-8 μm de diâmetro.
Como todo esse DNA é
compactado???
Cromossomos: o DNA organizado
• Permitem a compactação do DNA no núcleo
• Organização e acesso a enzimas
• Possibilitam a divisão do DNA entre células filhas na divisão celular

1 única molécula linear 1 cromossomo

de DNA

Proteínas são responsáveis pela compactação do DNA!

DNA + PROTEÍNAS = CROMATINA
Histonas
Proteínas cerne do nucleossomo
• Nucleossomo: primeiro nível de compactação
• Histonas : aminoácidos positivamente carregados
(lisina e arginina)

Cromatina - nível “Colar de pérolas”

Os cromossomos possuem diversos níveis de
compactação do DNA

Histona H1
Mantém os nucleossomos unidos
na fibra de 30 nm

Fibra de 30 nm é a compactação comumente

encontrada nas células em intérfase.
Cromossomos interfásicos e cromossomos mitóticos

Núcleo na intérfase
Cromossomos interfásicos
(fase do ciclo em que a célula
não está se dividindo)

Cromossomos mitóticos 1
Núcleo desorganizado
1- Metáfase
2- Telófase
 Cromossomos mitóticos
Estruturas
Telômero

Braço p (curto)

Cinetócoro

Centrômero

Braço q (longo)

Cromátides irmãs
Cariótipo: conjunto de cromossomos de uma espécie

Cariótipo humano
46 cromossomos
Cromossomos interfásicos
Eucromatina e Heterocromatina

Heterocromatina : região de cromatina mais

compactada, onde os genes não estão sendo
transcritos (quiescentes).

Eucromatina: região mais relaxada,

contém genes que estão sendo expressos.
A posição de um gene no núcleo muda quando ele é
altamente expresso
Cromossomos interfásicos
Formação de heterocromatina
• 10% de um cromossomo interfásico em mamíferos – heterocromatina
constitutiva
• Localiza-se ao redor do centrômero e nos telômeros
• Induzida por modificações específicas nas caudas das histonas – recruta
proteínas

Cauda N-terminal
Exemplo de heterocromatina constitutiva
Cromossomo X – Corpúsculo de Barr
Compartimentos/estruturas/organelas subnucleares
O núcleo não é uma emaranhado de DNA, RNA e proteínas!

Existem compartimentos subnucleares definidos e organizados:

Nucléolo, Speckles, Corpos de Cajal, GEMs, Corpos PML.
Nucléolo
Sede da síntese de rRNA e montagem das subunidades
ribossomais

• Agrupa as regiões cromossômicas que

contêm genes para a síntese de RNA
ribossomal;
Nucléolo
• Genes transcritos pela pol I;

•Um único pré-rRNA é clivado para

1-5 por célula
produzir 5.8S, 18S e 28S;

• Os rRNAs são agrupados com proteínas

ribossomais para formar as subunidades
maior e menor.
Speckles (grânulos de intercromatina)
Reservatório de fatores necessários para o processamento do mRNA

• Concentra fatores de splicing (proteínas e snRNPs – ribonucleoproteínas)

• Encontrados próximos a genes que são muito expressos.

Cortesia: Viviana Loureiro - LIMCa

SRSF2 e SF1: Fatores de splicing

Corpos de Cajal
(Coiled bodies)

• Caracterizados pela presença da

proteína p80-coilina

• Biogênese de snRNPs (small nuclear

RiboNucleoProteins)

• Tráfico de snRNPs e snoRNPs (small

nucleolar RNPs)
Imunofluorescência
p80-coilina fusionada à GFP
GEMs
(Gemini of Cajal bodies)

• Encontrados adjacente aos Corpos de Cajal;

• Caracterizados pelas proteínas SMN (Survival of Motor

Neurons) e Gemin 2;

• Montagem de snRNP;

• Mutação em SMN – atrofia muscular espinhal

GEMs sobrepõem-se aos corpos de Cajal.

PML
(Promyelocytic Leukemia bodies)

• Parecem ser alvo em infecções virais;

• Proteína PML encontra-se fusionada

com a proteína receptora do ácido
retinóico em leucemia promiolocítica
aguda;

• Pacientes apresentam PML bodies

fragmentados.
 Então, o que você aprendeu sobre o
Núcleo Celular???

Estrutura
Compartimentos
dinâmica, de
subnucleares:
acordo com a fase
Nucléolo, Corpos de
Abriga a do ciclo
Cajal, Gems, PML
informação bodies, Speckles
genética, o DNA
DNA possui vários
níveis de
compactação
Eucromatina e
Heterocromatina

Transporte nuclear
Ran GTPase
Bibliografia básica

• Bruce Alberts et al. Fundamentos de Biologia Celular. 3ª

Edição. Capítulos 5, 15, e 17.
• Estruturas subnucleares:
http://www.abcam.com/index.html?pageconfig=resource&rid=1
1025&pid=10026
https://clinicalgate.com/nuclear-structure-and-dynamics/