Escolar Documentos
Profissional Documentos
Cultura Documentos
• Cromatina - toda porção do núcleo que se cora, exceto nucléolos e é visível ao M.O.
• Sua organização é dinâmica, pois se altera de acordo com a fase do ciclo celular e com seu grau de
atividade.
• Disposição da cromatina e seu grau de condensação dentro do núcleo variam de um tipo celular para outro,
e são característicos de cada tipo celular.
• Mesma célula pode apresentar cromatina com vários graus de condensação, de acordo com o estágio
funcional e com o estado de diferenciação em que se encontra.
• comprovação de que a quantidade de DNA nas células dos vertebrados é superior do mínimo necessário
para armazenar a informação gênica.
Ex: certos urodelos têm o teor de DNA umas 30 vezes superior ao ser humano.
Cromatina constituída por DNA complexado com proteínas:
• Nos eucariontes, as fibras cromatínicas apresentam DNA associado com as proteínas básicas ® histonas
(proteínas bastante estáveis, não sendo renovadas constantemente) .
• Associação ocorre através dos radicais amino das proteínas com os radicais fosfato do DNA.
• Radicais fosfato de DNA estão neutralizados pelas histonas ® a cromatina adquiri caráter ácido (pois nem
todos os radicais fosfato estão neutralizados)
Histonas:
• São um grupo de proteínas básicas, formada por cinco tipos de proteínas chamadas de : H1, H2a, H2b, H3 e H4,
• H2a, H2b, H3 e H4 – partilham da uma estrutura molecular comum com as cadeias polipeptídicas.
• A cromatina contém ainda: proteína não-histônicas: (células metabolicamente mais ativas apresentam alto
teor de proteínas não-histônicas – neurônios e células glandulares)
a) Proteínas que participam da estrutura dos cromossomos (organização e compactação do DNA nos
cromossomos) – topoisomerase;
b) Proteínas relacionadas com o processo de replicação e reparo do DNA – DNA polimerase, helicases, etc;
c) Proteínas que participam do processo de ativação e repressão gênica – HMG – reduz a compactação e ativa
sua atividade transcricional.
• Octâmero de histonas é formado por duas moléculas de cada uma das histonas H2a, H2b, H3 e H4.
• Ligando um centro do nucleossoma ao outro, encontra-se um segmento de DNA não associado a histona
com 15 até 80pb – DNA de ligação.
• Nucleossomo - constituído pelo centro de nucleossomo mais um dos segmentos do DNA de ligação –
totalizando 200pb de DNA.
• Segundo nível compactação da cromatina – fibra de 30nm – quando a histona H 1 associa-se ao DNA de
ligação que chega e deixa o centro do nucleossomo.
• ME - a associação da H1 aos dois segmentos do DNA de ligação causa um entrelaçamento entre esses
segmentos – configuração em zigue-zague.
• DNA e as histonas formam um complexo químico sob forma de filamentos ® fibras cromatínicas.
Intérfase
• A cromatina que contém os genes ativamente transcritos é formada por fibras de 30nm.
• Cerca de 10% estão na forma de fibras .de 10nm - permitindo o acesso às enzimas envolvidas na transcrição.
• Núcleo interfásico - fibras de 30nm podem organizar-se em grandes alças que se prendem ao envoltório
nuclear através da lâmina nuclear.
• As fibras cromatínicas organizadas em alças parecem se ligar às laminas e à matriz nuclear, através de
segmentos específicos de DNA – regiões de ligação à matriz ou MARs.
CROMATINA E EXPRESSÃO DA INFORMAÇÃO GENÉTICA
•
GENE – sequência de nucleotídeos do DNA que é expresso em um produto funcional, ou seja, em ma
molécula de RNA ou em uma cadeia polipeptídica.
•
Genoma das células eucariontes – grande quantidade de sequências de DNA que não convertidas em
produto funcional – não são codificadoras
•
Muitas dessas sequências não-codificadoras estão localizadas entre os genes, separando um gene do seu
vizinho; outras estão nos próprios genes.
•
Genes apresentam segmentos codificadores - éxons, separados por segmentos não-codificadores íntrons.
•
Todo o gene é transcrito em uma longa molécula de RNA, depois reduzida de tamanho e convertida na
molécula de RNA funcional
•
O processamento das moléculas d RNA ocorre no núcleo e envolve o splicing – remoção e digestão dos
íntrons e posterior junção dos éxons – apenas éxons são mantidos no RNA maduro.
•
Splicing – muito complexo e preciso - a molécula de RNA deve ser clivada em locais exatos e os éxons devem
ser ligados também de forma exata.
•
Todo o processo envolve moléculas de RNA
•
Primeiro passo na expressão de um gene é a sua transcrição em uma molécula de RNA.
•
RNA-polimerase – responsável pela transcrição, que catalisa a polimerização dos ribonucleosídeos
trifosfatados na presença de Mg2+ e Mn2+
•
Apenas uma das fitas do DNA é usada como molde, a molécula de RNA transcrita é complementar à fita de
DNA e o crescimento da cadeia de RNA ocorre sempre no sentido 5’ 3’.
• Células eucariontes – três tipos de RNA-polimerase, cada uma responsável pela transcrição de um tipo de
RNA.
• Depois de ligado ao DNA a RNA-polimerase abre uma região da hélice para expor a sequência que vai ser
transcrita.
• Uma das fitas serve de molde e a molécula de RNA-polimerase se move ao longo da molécula de DNA,
desenrolando a dupla hélice.
• A sequência de nucleotídeos para servir de molde é exposta e a molécula de RNA é elongada por um
nucleotídeo de cada vez na direção 5’ 3’.
• O processo de elongação da cadeia continua até que a enzima encontra uma sequência especial de
nucleotídeos no DNA molde, o sinal de término, quando a polimerase interrompe a síntese.
• Terminada a transcrição, a polimerase libera o DNA molde, a dupla hélice se refaz e a molécula de RNA
recém-sintetizada é liberada no nucleoplasma onde deverá ser processada.
Heterocromatina constitutiva
• Está sempre condensada (em todas as células de um mesmo organismo) ® extremidade dos cromossomos,
centrômero e região organizadora de nucléolos.
Heterocromatina facultativa
• pode estar condensada em certas células e não condensada em outras®cromossoma x de células fêmeas de
mamíferos®cromatina sexual (a condensação de um cromossomo x das fêmeas ocorre ao acaso).
Núcleo-NUCLÉOLO
• Facilmente vistos ao MO
• Forma e organização estrutural – variam bastante entre os diferentes tipos celulares e dependem de sua
atividade funcional.
• Nucléolos: pequenos e em forma de anel – produzem poucos ribossomos – linfócitos e monócitos do sangue
• Nucléolo: estruturas densas contendo em torno de 60% de matéria seca principalmente proteínas e RNA
ribossômico.
• Apresenta ainda pequena quantidade de DNA – correspondendo a cromatina que contém os genes
codificadores dos rRNAs – DNA ribossômico
• Entre estes estão os RNAs nucleolares de baixo peso molecular – snoRNAs (small nucleolar RNAs).
• Componente fibrilar denso – contendo fibrilas muito finas – 3 a 5nm de diâmetro – podem formar uma rede
ME – centro do nucléolo pouco contrastado – localização do centro fibrilar – contém o rDNA, as moléculas
de RNA-polimerase I, DNA-topoisomerase I e os fatores de transcrição do rRNA.
centros fibrilares – envolvidos total ou parcialmente pelo componente fibrilar denso – encontram-se as
moléculas de rRNA recém-transcrito e as enzimas envolvidas no processamento pós-transcricional do rRNA.
camada mais externa – componente granular – processamento final do rRNA – constituído por grânulos de
rRNA complexados com proteínas
Genes que codificam os rRNAs estão localizados nos centros fibrilares e no componente fibrilar denso
Processamento do rRNA e a sua complexação com proteínas – início no componente fibrilar denso e
continua no componente granular - processo final de montagem das subunidades ribossômicas, serão
exportadas para o citoplasma
Biogênese de ribossomos –
Após compactação irão formar as constrições secundárias de cromossomos específicos – essas regiões
constituem as regiões organizadoras do nucléolo ou NORs.
genes que codificam o rRNA são transcritos pela RNA-polimerase I – cada gene produz o mesmo transcrito
primário.
pré-rRNA – nas extremidades 5’ e 3’, dois espaçadores transcritos externos - ETS e dois espaçadores
transcritos internos ITS1 e ITS2
A medida que a RNA-polimerase I transcreve o rDNA, proteínas são adicionadas às moléculas dos pré-rRNAs
nascentes - pré-rRNPs (pré- ribonucleoproteínas).
A clivagem da molécula de rRNA de 45S é catalisada poe RNA nucleolares de baixo peso molecular
(snoRNAs)
Quebra inicial forma duas moléculas: uma com 32S e outra com 20S
O gene que codifica o rRNA 5S não estão presentes no rDNA, ou seja, esses genes estão localizados na NOR ,
mas sim em outra região do DNA.
Assim esse rRNA é transcrito fora do nucléolo e separadamente das outras moléculas de rRNAs.
Esse rRNA depois de transcrito migra para o nucléolo, onde é complexado com os rRNAs28S e 5,8S e
proteínas – subunidade maior do ribossomo
• Envolve a complexação das moléculas de rRNAs de 18S, 28S, 5,8S e 5S com proteínas.
• Os genes que codificam as proteínas ribossômicas são transcritos fora do nucléolo pela RNA-polimerase II.
Essas proteínas são sintetizadas no citoplasma e importadas para o núcleo.
• São aproximadamente 49 tipos diferentes de proteínas que serão adicionadas aos rRNAs 28S, 5,8S e 5S –
subunidade maior do ribossomo.
• Ocorre a exportação das subunidades ribossômicas para o citoplasma, que envolve o sistema de Ran-GTPase
e proteínas do complexo de poros