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DESPIROGENIZAÇÃO POR INATIVAÇÃO DE ENDOTOXINA

-POLIMIXINA B: ANULA A ATIVIDADE BIOLÓGICA DOS LPS, POIS


INTERAGE COM A MEMBRANA EXTERNA DAS GRAM – RETICANDO
CÁLCIO E MAGNÉSIO, TAIS ELEMENTOS SÃO ESSENCIAIS PARA A
ESTABILIDADE DA MEMBRANA BACTERIANA. TAL MECANISMO
RESULTA NO AUMENTO DA PERMEABILIDADE DA MEMBRANA E
CONSEQUENTE LISE
-HIDRÓLISE ÁCIDO- BÁSICA: Nesse método utiliza-se solução ácida ou alcalina
e elimina-se a atividade do lipopolissacarídeo pela inativação do LIPÍDEO A.
(estrutura presente no LPS bacteriano que é responsável pelo transporte do sistema
aquoso).Na HIDRÓLISE ÁCIDA ocorre a inativação do LIPÍDEO A por meio da
alteração de sua estrutura em locais essenciais, e consequentemente a perda de
função. Na HIDRÓLISE ALCALINA ocorre a saponificação da estrutura do LPS,
com consequente perda de função.

-OXIDAÇÃO
O PERÓXIDO DE HIDROGÊNIO conduz à oxidação dos Ácidos graxos presentes
no LIPIDEO A do LPS bacteriano. Tal processo é dependente do : TEMPO, Ph e
CONCENTRAÇÃO DA SOLUÇÃO.
OUTROS OXIDANTES INCLUEM: O2, ÁCIDO HIPOCLOROSO,
HIPOCLORITO, ÁCIDO PERIÓDICO, PERIODATO DE SÓDIO,
PERMANGANATO DE POTÁSSIO DILUIDO, PERMANGANATO NEUTRO,
ÁCIDO NÍTRICO, DICROMATO E DIÓXIDO DE SELÊNIO.
USO: PLÁSTICOS, PERÓXIDO DE HIDROGÊNIO ELIMINA PIROGÊNIO EM
ÁGUA ESTÉRIL ÇARA INJEÇÃO, SALINA DEXTROSE, E SALINA

-ALQUILAÇÃO: HÁ A REDUÇÃO DA ATIVIDADE DA ENDOTOXINA.


São usados-->
Anidrido Acético: Realiza a acetilação (VIA SUBSTITUIÇÃO NUCLEOFÍLICA) e
reduz 100 x a atividade da endotoxina
Anidrido Succínico: Realiza a succinação e reduz 1000x a atividade da endotoxina
AGENTES: ÓXIDO DE ETILENO FORTE AGENTE ALQUILANTE
USO: MATERIAIS TERMOLÁBEIS

-PROCESSO TÉRMICO
CALOR SECO VIA: ESTUFA DE CONVECÇÃO, CONDUÇÃO OU
IRRADIAÇÃO (INFRA-VERMELHO) É O MÉTODO DE ESCOLHA PARA
MATERIAIS TERMORRESISTENTES.
MÉTODO PADRÃO: EXPOSIÇÃO A NÃO MENOS QUE 250ºc POR PELO
MENOS 20 MINUTOS O MECANISMO DE INATIVAÇÃO É A
INCINERAÇÃO.

-RADIAÇÃO IONIZANTE
A RADIAÇÃO IONIZANTE COM Co60 reduz a toxicidade de endotoxinas
bacterianas, sendo alterações físicas e biológicas  DOSE DEPENDENTES.
 A radiação ionizante do Co60 provoca alterações físicas e biológicas
dependente da dose
 Os riscos superam os benefícios, pois esse processo aumenta a possibilidade de
alterações químicas desconhecidas em fármacos.--> TAL MÉTODO NÃO É MUITO
USADO.
DESPIROGENIZAÇÃO POR REMOÇÃO DE ENDOTOXINAS
LAVAGEM: MAIS ANTIGO. É realizada com água estéril para injeção USP .
Assim, níveis baixos de endotoxinas podem ser removidos.
DESTILAÇÃO: É O MAIS ANTIGO E SIMPLES NA REMOÇÃO DE
PIROGÊNIOS. A ÁGUA RECÉM DESTILADA E MANTIDA EM FRASCOS
APIROGÊNIOS É APIROGÊNIA.
ULTRA-FILTRAÇÃO: AS MEMBRANAS DE FILTRAÇÃO REMOVEM
PIROGÊNIOS POR MEIO DA EXCLUSÃO MOLECULAR. UM LPS POSSUI
10.000-20.000 DALTONS, ASSIM, UM FILTRO DE 10.000 PODE REMOVE-
LOS.
OSMOSE REVERSA: MEMBRANA DE O.R ACETATO DE CELULOSE OU
POLIAMIDA COM PEQUENOS POROS QUE EXCLUEM ÍONS. SÃO
EFETIVAS NA REMOÇÃO DE ENDOTOXINAS, NO ENTANTO, A
DESPIROGENIZAÇÃO NÃO É FEITA 100 %. NO ENTANTO, JUNTAMENTE A
DESTILAÇÃO, A O.R É UM DOS MÉTODOS DE OBTENÇÃO PARA ÁGUA
ESTÉRIL.

CARVÃO ATIVO: O CARVÃO ATIVO POSSUI ELEVADA AFINIDADE COM


SUBSTÂNCIAS NÃO IONIZADAS DE ELEVADO PESO MOLECULAR,
ADEMAIS AS ENDOTOXINAS PODEM SE ADSORVER EM CARVÃO ATIVO,
NO ENTANTO, PODE HAVER PERDA DO P.A OU CONTAMINAÇÃO DA
AMOSTRA COM CARVÃO ATIVO.O USO DE CARVÃO SINTERIZADO É
UMA OPÇÃO.

ATRAÇÃO ELETROSTÁTICA: EM PH < 2 OS AGREGADOS DE


ENDOTOXINAS SÃO NEGATIVAMENTE CARREGADOS E COMPORTAM-SE
COMO ÂNIONS. ASSIM, DEVEM SER REMOVIDOS POR ADSORÇÃO A
ADSORVENTES CATIONICAMENTE CARREGADOS, UTILIZANDO-SE O
ASBESTO, QUE EM PH <8,3 POSSUI CARGA POSITIVA. ADICIONALMENTE,
AS FIBRAS DE ASBESTO FORMAM UM FILTRO DE PROFUNDIDADE,
RETENDO CONTAMINANTES MECANICAMENTE. NO ENTANTO, O
ASBESTO ESTÁ BANIDO.

ATRAÇÃO POR MEMBRANA HIDRÓFOBA: POLIMEROS ALIFÁTICOS E


HIDRÓFOBOS, COMO POLIPROPILENO, POLIETILENO, POLIFLUORETO
DE VINILIDENO E POLITETRAFLUORETILENO POSSUEM ELEVADA
AFINIDADE A ENDOTOXINAS (QUE SÃO ANIONICAS). NO ENTANTO, O
MECANISMO DE AÇÃO NÃO ESTÁ ESCLARECIDO, UMA VEZ QUE AS
ENDOTOXINAS SÃO ANIÔNICAS E INEXISTEM NOS POLÍMEROS GRUPOS
HIDRÓFILOS IONIZÁVEIS