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21/02/22, 19:45 Coloração de Gram - O que é bactéria Gram-positiva e Gram-negativa?

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Coloração de Gram – O que é bactéria Gram-
positiva e Gram-negativa?

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saúde pública

A coloração de Gram é um passo muito importante na caracterização e classificação inicial das bactérias.
Afinal, esse método de coloração permite que as bactérias sejam visualizadas no microscópio óptico, uma vez 5.nov.2021
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que sem a coloração é impossível observá-las ou identificar sua estrutura. diagnóstico

O método de coloração de Gram recebeu esse nome em homenagem ao patologista dinamarquês Hans
Christian Joachim Gram que realizou a descoberta em 1884 e, aliás, até hoje continua sendo a mais utilizada
nos laboratórios de análises clínicas e microbiologia. Através da coloração é possível identificar e diferenciar os
dois principais grupos de bactérias, sejam Gram-positivas ou Gram-negativas.

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PRINCÍPIO DA COLORAÇÃO DE GRAM


Em suma, o procedimento de coloração de Gram permite que as bactérias retenham a cor com base nas
diferenças nas propriedades químicas e físicas da parede celular. De fato, o uso dos corantes permite
aumentar o contraste e evidenciar a estrutura bacteriana.

A coloração envolve 3 etapas principais:


Coloração com violeta de cristal (um corante solúvel em água, roxo);
A descoloração (utilizando etanol / acetona);
A contra-coloração (utilizando corante Safranina, vermelho).

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Como os microrganismos se desenvolvem


em um Meio de Cultura?
Podemos ver uma árvore apodrecendo ou sentir o cheiro do leite
azedando, mas podemos não compreender o que está ocorrendo a nível
microscópico. Em ambos os casos, os microrganismos estão agindo. A
árvore apodrece quando os microrganismos decompõe a madeira, …
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Kasvi
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DIFERENÇA ENTRE BACTÉRIA GRAM-


POSITIVA E GRAM-NEGATIVA
A princípio, há diferentes graus de permeabilidade na parede dos microrganismos Gram-positivos e Gram-
negativos.

As bactérias Gram-positivas retém o cristal violeta devido à presença de uma espessa camada de
peptidoglicano (polímero constituído por açúcares e aminoácidos que originam uma espécie de malha na
região exterior à membrana celular das bactérias) em suas paredes celulares, apresentando-se na cor roxa.

Já as bactérias Gram-negativas possuem uma parede de peptidoglicano mais fina  que não retém o cristal
violeta durante o processo de descoloração e recebem a cor vermelha no processo de coloração final.

Exemplos de bactérias Gram-positivas


Bacillus, Nocardia, Clostridium, Propionibacterium, Actinomyces, Enterococcus, Cornyebacterium, Listria,
Lactobacillus, Gardnerella, Mycoplasma, Staphylococcus, Streptomyces, Streptococcus.

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Gram-positiva

Exemplos de bactérias Gram-negativas


Escherichia, Helicobcater, Hemophilus, Neisseria, Klebsiella, Enterobacter, Chlamydia, Pseudomonas, Salmonella,
Shigella.

Gram-negativa

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PASSO A PASSO DA METODOLOGIA DE


GRAM
1.  Cubra o esfregaço com violeta-de-metila e logo após deixe por aproximadamente 15 segundos;
2.  Adicione igual quantidade de água sobre a lâmina coberta com violeta-de-metila e então deixe agir por
mais 45 segundos;
3.  Escorra o corante e lave em um filete de água corrente; Cubra a lâmina com lugol diluído (1/20) e deixe
agir por aproximadamente 1 minuto;
4.  Escorra o lugol e lave em um filete de água corrente;
5.  Adicione álcool etílico (99,5º GL) sobre a lâmina; descorando-a, até que não desprenda mais corante;
6.  Lave em um filete de água corrente;
7.  Cubra a lâmina com safranina e deixe agir por aproximadamente 30 segundos;
8.  Lave em um filete de água corrente;
9.  Deixe secar ao ar livre, ou seque suavemente com o auxílio de um papel de filtro limpo;
10.  Visualize no microscópio. Logo após leia em objetiva de imersão (100 X).

Método
de
coloração
de Gram

APLICAÇÃO E BENEFÍCIOS DA
COLORAÇÃO DE GRAM
De fato a metodologia irá ajudar na identificação de uma infecção bacteriana, determinando qual é o tipo de
bactéria. Em outras palavras, a diferenciação das bactérias Gram-negativas e Gram-positivas permite ao
médico determinar um tratamento eficaz ao paciente, dessa forma aplicando a terapia adequada em cada
caso.

Mesmo que nem todas as bactérias possam ser diferenciadas através da coloração de Gram, com certeza a
metodologia tem grande aplicação no diagnóstico clínico e pesquisa biológica.

PRODUTOS PARA A METODOLOGIA DE


COLORAÇÃO DE GRAM
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