MICROBIOLOGIA

MEIOS DE CULTURA
 ÍNDICE
01 CONCEITO

02 CLASSIFICAÇÃO PELA CONSISTÊNCIA

03 CLASSIFICAÇÃO PELA COMPOSIÇÃO

04 CLASSIFICAÇÃO PELA FORMA DE PREPARAÇÃO

05 CLASSIFICAÇÃO PELA FUNÇÃO

06 CONSTITUINTES E INGREDIENTES
 CONCEITO
Os meios de cultura são insumos preparados em
laboratórios que fornecem os nutrientes para o

01
crescimento e desenvolvimento de microrganismos
(como bactérias e fungos) fora do seu habitat natural.
Existe uma variedade enorme destes meios e são
utilizados para análises laboratoriais e estudos científicos
em diversas áreas, principalmente em alimentos, água,
cosméticos e microbiologia clínica.
 CLASSIFICAÇÃO PELA CONSISTÊNCIA
Meios líquidos: conhecido também como caldos, são
meios constituídos de uma solução aquosa dos
ingredientes da formulação.

02
Meios sólidos: conhecido também como ágar, pois
contém ágar como o agente solidificante, com um
percentual médio de 1,5%.
Meios semissólidos: contém uma concentração média de
0,5% de ágar. São acondicionados em tubos não
inclinados e placas de petri não invertidas.
 CLASSIFICAÇÃO PELA COMPOSIÇÃO
Meios quimicamente definidos: são meios formulados com
ingredientes de composição química definida, cuja
estrutura molecular e grau de pureza são conhecidos.

03 Meios complexos: são aqueles que contêm em sua

formulação ingredientes complexos (peptonas, extrato de
carne, extrato de levedura, extrato de malte, sangue, bile
desidratada, sais biliares, ágar), cuja composição exata
não é conhecida.
Meios cromogênicos ou fluorogênicos: são meios
contendo substratos cromogênicos e/ou substratos
fluorogênicos, para verificara produção de enzimas
características de certos grupos ou espécies de
microrganismos.
 CLASSIFICAÇÃO PELA FORMA DE PREPARO
Meios prontos para uso: são meios de cultura disponíveis
comercialmente já preparados e estéreis. Sua forma de
distribuição são em placas ou tubos, não sendo necessário

04 qualquer manipulação no laboratório, ou sendo

necessário a posterior fusão e/ou suplementação antes do
uso.
Meios desidratados: são formulações completas ou semi
completas (bases) de meios de cultura, disponíveis
comercialmente na forma desidratada. As formulações
completas exigem a hidratação, a esterilização, verificação
e correção do pH e a distribuição.
 CLASSIFICAÇÃO PELA FORMA DE PREPARO
As bases exigem ainda a preparação individual de alguns
componentes da formulação (suplementos), que são
sensíveis ao calor e não fazem parte da formulação

05 comercial. Os suplementos são preparados e esterilizados

separadamente, geralmente por filtração, sendo então
adicionados às bases estéreis. Vários suplementos
encontram-se disponíveis comercialmente na forma
desidratada, já estéreis, precisando apenas a hidratação
para adição aos meios de cultura.
Meios formulados: são meios de cultura totalmente
preparados no laboratório, a partir dos ingredientes
individuais de sua formulação.
 CLASSIFICAÇÃO PELA FUNÇÃO
Meios de transporte: meios cuja função é manter a
viabilidade dos microrganismos durante o intervalo de
tempo entre a coleta e a análise da amostra. Geralmente

06 contém componentes que impedem a multiplicação dos

microrganismos, mas garantem a sua preservação.
Meios de manutenção: meios para manutenção de
culturas em estoque por longos períodos de tempo,
preservando a viabilidade.
Meios de ressuscitação: meios para reparação de células
injuriadas, permitindo a recuperação de sua capacidade
normal de crescimento, sem necessariamente promover a
multiplicação.
 CLASSIFICAÇÃO PELA FUNÇÃO
Meios de enriquecimento: meios predominantemente
líquidos, com composição particularmente favorável à
multiplicação dos microrganismos a que se destinam.

07 Podendo ser não seletivos, seletivos ou seletivos

diferenciais.
# meios de enriquecimento não seletivo: destinado ao
enriquecimento de microrganismos em geral.
Favorecendo a multiplicação da maioria. Nos ensaios com
duas fases de enriquecimento, o meio usado na primeira
fase geralmente é chamado de meio de pré-
enriquecimento.
 CLASSIFICAÇÃO PELA FUNÇÃO
# meios de enriquecimento seletivo: destinado ao
enriquecimento de microrganismos específicos, contendo
agentes seletivos para inibir a maioria dos outros

08 microrganismos.
# meios de enriquecimento seletivo diferencial: destinado
ao enriquecimento e diferenciação dos microrganismos
específicos. Contendo agentes seletivos, para inibir a
maioria da microbiota acompanhante, e agentes
diferenciais, para verificar uma ou mais características
típicas do microrganismos.
 CLASSIFICAÇÃO PELA FUNÇÃO
# meios de isolamento/plaqueamento não seletivo:
destinado ao isolamento e/ou contagem dos
microrganismos em geral, favorecendo a multiplicação da

09 maioria.
# meios de isolamento/plaqueamento seletivos: destinado
ao isolamento e/ou contagem dos microrganismos
específicos, contendo agentes seletivos para inibir a
maioria dos outros microrganismos.
# meios de isolamento/plaqueamento seletivo diferencial:
destinado ao isolamento e/ou contagem dos
microrganismos específicos, contendo agentes seletivos,
para inibir a maioria dos outros microrganismos, e
agentes
 CLASSIFICAÇÃO PELA FUNÇÃO
Meios de isolamento/plaqueamento: podem ser meios
sólidos em placas, que que tem por finalidade favorecer a
multiplicação dos microrganismos e isolar uns dos outros,

10 através da formação de colônias separadas. Nessa forma

são comumente chamados de meios de plaqueamento e
usados na contagem padrão em placas ou na inoculação
por estrias de esgotamento. Também podem ser meios
sólidos ou semissólidos em tubos, para onde são
normalmente transferidas (repicadas) as culturas (puras)
obtidas em colônias isoladas. Assim como o meio de
isolamento podem ser não seletivos, seletivos e seletivos
diferenciais.
 CLASSIFICAÇÃO PELA FUNÇÃO
diferencias, para verificar características típicas que
diferenciem o microrganismo alvo dos não alvo.
Meios de identificação: são meios para inoculação de

11 culturas puras e verificação de características típicas para

identificação. Alguns são usados como meio de
isolamento, no repique direto de colônias isoladas em
meios de plaqueamento.
Agar foi descoberto em 1658 por Em 1860, Pasteur foi o primeiro a usar Em 1881, W. Hesse usou ágar de sua
um meio de cultura para bactérias em esposa (considerado um alimento
Minora Tarazaemon em Japão .
crescimento no laboratório. Este meio exótico) como um agente solidificador
Segundo a lenda, este estalajadeiro
consistia em cinzas de levedura, açúcar para o crescimento bacteriano.
japonês jogou excesso de sopa de algas
e sais de amônio.
marinhas na noite de inverno e
perc ebeu que havia se transformado em

um gel pelo congelamento.

Julius Richard Petri, entrou de forma Em 1882, Koch foi o primeiro a usar ágar
indelével, para a história da medicina e em microbiologia.
das patologias infecciosas, em
decorrência de uma invenção que
revolucionou a prática microbiológica: a
Placa de Petri.
 CONSTITUINTES E INGREDIENTES
UM MEIO DE CULTURA MICROBIOLÓGICO SATISFATÓRIO
DEVE CONTER FONTES DISPONÍVEIS DE:

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# Carbono
# Nitrogênio
# Fosfato inorgânico e enxofre
# Metais vestigiais
# Água
# Vitaminas
 CONSTITUINTES E INGREDIENTES
CONSTITUINTES COMUNS NOS MEIOS DE CULTURA:
# Amino-Nitrogênio - peptonas, hidrolisado de proteína,
infusões e extratos.

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# Fatores de crescimento – sangue, soro, extrato de
leveduras ou vitaminas e NAD.
# Fontes de energia – açúcar, álcool e carboidratos.
# Sais de tampão – fosfatos, acetatos e citratos.
# Sais minerais e metais – fosfato, sulfato, magnésio, cálcio
e ferro.
# Agentes seletivos – produtos químicos, antimicrobianos
e corantes.
# Corantes indicadores – vermelho de fenol e neutro
# Agentes gelificantes – ágar, gelatina, alginato
 CONSTITUINTES E INGREDIENTES
INGREDIENTES NOS MEIOS DE CULTURA:

# Água purificada - é recomendado para uso na

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preparação do meio cultura. Conforme definido pela
Farmacopeia dos Estados Unidos, Água Purificada é a água
obtida por um processo adequado. Isto é preparado a
partir de água em conformidade com o U.S.
Environmental Regulamentos Nacionais de Água Potável
Primária da Agência de Proteção ou regulamentos
comparáveis ​da União Europeia ou Japão. Não contém
nenhuma substância adicionada.
 CONSTITUINTES E INGREDIENTES
INGREDIENTES NOS MEIOS DE CULTURA:

# Peptonas, hidrolisado de proteína, infusões e extratos -

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são as principais fontes de nitrogênio e vitaminas em
meios de cultura. Peptonas são ingredientes solúveis em
água derivados de proteínas por hidrólise ou digestão do
material de origem; ex., carne, leite.
# Carboidratos - são empregados em meios de cultura
como fontes de energia e pode ser usado para diferenciar
gêneros e identificar espécies.
# Sais de tampão – manter o pH do meio de cultura.
 CONSTITUINTES E INGREDIENTES
INGREDIENTES NOS MEIOS DE CULTURA:

# Agentes seletivos - incluem sais biliares, corantes e

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agentes antimicrobianos. Os sais biliares e o desoxicolato
são seletivos para a isolamento de microrganismos gram-
negativos, inibindo cocos gram-positivos.
# Corantes e indicadores - são essenciais na preparação de
meios de cultura diferenciados e seletivos. Nessas
formulações, Os corantes atuam como agentes
bacteriostáticos ou indicadores de alterações na acidez ou
alcalinidade do substrato.
 CONSTITUINTES E INGREDIENTES
INGREDIENTES NOS MEIOS DE CULTURA:

# Agentes antimicrobianos - são usados ​na mídia para

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inibir o crescimento de bactérias, leveduras e fungos.
# Agentes solidificantes - incluindo ágar, gelatina e
albumina, podem ser adicionado a um meio líquido para
alterar a consistência para um estado sólido ou semi-
sólido.
 CONSTITUINTES E INGREDIENTES
INGREDIENTES NOS MEIOS DE CULTURA:

# Agentes cromogênicos ou fluorogênicos - são substratos

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incorporados em meios de cultura para permitir a
diferenciação do organismo e identificação. Quando esses
substratos são degradados por enzimas específicas, eles
liberam cores diferentes ou fluorescentes compostos. Um
exemplo deste último é o 4-metilumbeliferilβ-D-
glicuronídeo ou MUG.
REFERÊNCIAS

1. ISO 11133:2014/ AMD 2:2020 – Microbiology of food, animal feed and water – Preparation,
production, storage and performance testing of culture media.
2. ISO 7218:2007/AMD 1:2013 – Microbiology of food and animal feeding stuffs – General
requirements and guidance for microbiological examinations.
3. Manual microbiological culture media, Difco, Second Edition.
4. Manual de métodos de análise de alimentos e água, 5ª edição.
5. Microbiologia de Brock [recurso eletrônico] / Michael T. Madigan ... [et al.] ; [tradução : Alice
Freitas Versiani ... [et al.] ; revisão técnica: Flávio Guimarães da Fonseca]. – 14. ed. – Porto
Alegre : Artmed, 2016.
6. Tortora, Gerard J. Microbiologia [recurso eletrônico] / Gerard J. Tortora, Berdell R. Funke,
Christine L. Case ; tradução: Danielle Soares de Oliveira Daian, Luis Fernando Marques Dorvillé ;
revisão técnica: Flávio Guimarães da Fonseca, Ana Paula Guedes Frazzon, Jeverson Frazzon. –
12. ed. – Porto Alegre : Artmed, 2017.
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Danilo Vieira de Moura

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