Faculdade Metropolitana de Manaus

Curso de Farmácia

Microbiologia Clínica

Professor: Leonardo
Microbiologia: Culturas bacterianas

O crescimento dos microrganismos nos diferentes meios de

cultura utilizados fornece as primeiras informações para a sua
identificação. Eis alguns deles:
Meios de cultura se dividem em:
- Simples
- Ricos
- Seletivos
- Diferenciais

Simples: Possuem nutrientes básicos. Seu objetivo é fazer

crescer o que estiver na amostra.
Ex: Agar Nutriente, Agar PCA (Plate Count Agar)

A ideia aqui é ver o que cresce a partir da amostra.

Meios de cultura se dividem em:
- Simples
- Ricos
- Seletivos
- Diferenciais

Rico: Também chamado de “enriquecido”, tem o mesmo

objetivo do meio simples (ou seja, fazer crescer o que estiver
na amostra). A diferença é que o meio rico possui muitos
nutrientes e em grande quantidade.
Ex: Agar Sangue, Agar Chocolate, etc.

Serve para cultivo de bactérias fastidiosas (exigentes

nutricionais).

OBS.: Várias bactérias de interesse clínico são fastidiosas.

Meios de cultura se dividem em:
- Simples
- Ricos
- Seletivos
- Diferenciais

Seletivos: Esse meio seleciona a bactéria que vai crescer nele,

inibindo o crescimento de outras.
Ex: Agar SS (Salmonela-Shigela), Agar EMB (Eosina Azul de
Metileno), Agar CLED (Cisteína com deficiência em eletrólitos),
etc.

Há meios que só deixam crescer bactérias Gram+, há meios

que só deixam crescem bactérias Gram-, há meios que só
deixam crescer fungos, e assim por diante.
Meios de cultura se dividem em:
- Simples
- Ricos
- Seletivos
- Diferenciais

Diferenciais: São os que permitem fácil identificação das

bactérias existentes na amostra por meio do crescimento das
colônias na placa. Cada tipo de bactéria vai crescer formando
colônias com aspectos diferentes. Ex: Em Agar SS, Salmonela
cresce formando colônias pretas, E. coli cresce formando
colônias rosas, Shigella cresce formando colônias
transparentes, etc.
Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar nutriente (AN)

Meio relativamente simples, de fácil preparo e barato, muito
usado nos procedimentos do laboratório de microbiologia.

Utilidade: análise de água, alimentos e leite como meio para

cultivo preliminar das amostras submetidas à exames
bacteriológicos
Interpretação:
Cor original do meio: branco
opalescente
Positivo: Crescimento na
superfície do ágar;
Negativo: Ausência de
crescimento.
Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar Salmonella-Shigella (SS)

Possui componentes (sais de bile, verde brilhante e citrato de
sódio) que inibem microrganismos Gram positivos. A
incorporação de lactose ao meio permite diferenciar se o
microrganismo é lactose positiva ou não.

Utilidade: selecionar e
isolar espécies de
Salmonella e Shigella, em
amostras de fezes,
alimentos e água.
Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar Salmonella-Shigella (SS)

Interpretação:
Cor original do meio: vermelho alaranjado.
Colônias negras: suspeita de Salmonella.
Colônias incolores: suspeita de Shigella spp.
Colônias cor de rosa ou vermelho: suspeita de Escherichia coli ou
Klebsiella spp.
As bactérias não fermentadoras de lactose são incolores.
As bactérias fermentadoras de lactose aparecem na cor rosa.
Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar Salmonella-Shigella (SS)

Interpretação:
Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar MacConkey (MC)

Apesar de inibir o crescimento de microrganismos Gram
positivos especialmente enterococos e estafilococos, não é tão
seletivo para Gram negativos como, por exemplo, o ágar SS.
Utilidade: isolar bacilos Gram
negativos (enterobactérias e não
fermentadores) e verificar a
fermentação ou não da lactose.
Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar MacConkey (MC)

Interpretação:
Cor original do meio: rosa avermelhado.
Colônias cor de rosa: fermentadoras de lactose.
Colônias incolores: não
fermentadoras de lactose.
Não há crescimento de cocos
Gram positivos.
Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar MacConkey (MC)

Interpretação:
Cor original do meio: rosa avermelhado.
Colônias cor de rosa: fermentadoras de lactose.
Colônias incolores: não
fermentadoras de lactose.
Não há crescimento de cocos
Gram positivos.
Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar sangue (AS)

Por ser rico, oferece ótimas condições de crescimento para a
maioria dos microrganismos. A conservação dos eritrócitos
íntegros favorecem a formação de halos de hemólise nítidos,
úteis para a diferenciação de Streptococcus spp. e
Staphylococcus spp.
Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar sangue (AS)

Interpretação:
Cor original do meio: vermelho.
Alfa hemólise: presença de halo esverdeado ao redor das
colônias semeadas (lise parcial dos eritrócitos).
Beta hemólise: presença de halo transparente ao redor das
colônias semeadas (lise total dos eritrócitos).
Gama hemólise (sem
hemólise): ausência de halo
ao redor das colônias
(eritrócitos permanecem
íntegros).
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Ágar sangue (AS)

Interpretação: Alfa-hemólise
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Ágar sangue (AS)

Interpretação: Beta-hemólise
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Ágar sangue (AS)

Interpretação: Gama-hemólise
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Agar Triptona de Soja (TSA)

É um meio de cultivo, isolamento e manutenção de
microrganismos fastidiosos (exigentes). Se adicionar sangue, pode
ser usado para verificar hemólise das amostras.

Interpretação:
Cor original do meio: bege
Microbiologia: Culturas bacterianas

Agar Triptona de Soja (TSA)

Interpretação:
Escherichia coli: Gama hemolítica
Staphylococcus aureus: Beta hemolítica
Streptococcus pneuminiae: Alfa hemolítica
Streptococcus pyogenes: Beta hemolítica
Microbiologia: Culturas bacterianas
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Ágar Chocolate (Choc)

Amplamente utilizado para o cultivo de microrganismos
exigentes, embora cresçam neste meio quase todos os tipos de
microrganismos. Diferente do agar sangue, aqui o sangue é
submetido a altas temperaturas, o que faz com que as hemácias
lisem, liberando hemina e hematina, compostos fundamentais
para o crescimento dos microrganismos exigentes.
Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar Chocolate (Choc)

Finalidade: crescimento de microrganismos exigentes
Haemophilus spp., Neisseria spp., Branhamella catarrhalis e
Moraxella spp.

Interpretação:
Cor original do meio: castanho escuro (chocolate).
Colônias de tamanho pequeno a médio, com pigmento amarelo:
sugestivo de Neisseria spp,
Branhamella catarrhalis ou Moraxella spp.
Colônias pequenas e delicadas, com pigmento creme claro:
sugestivo de Haemophilus spp.
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Ágar Chocolate (Choc)

Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar Hektoen Entérico (HE)

É um meio para diferenciação moderadamente seletivo utilizado
para o isolamento e cultura de microrganismos entéricos gram-
negativos, especialmente para o isolamento de Shigella e
Salmonella provenientes de amostras fecais.

Interpretação:
Cor original do meio: verde
Colônias verdes a verdes-azuladas com
centro preto: Salmonella
Colônias verdes claras: Shigella
Colônias amarelas a laranja: E. coli
Colônias amarelas: Enterococcus
faecalis
Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar Hektoen Entérico (HE)

Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar Löwenstein-Jensen (LJ)

Permite amplo crescimento das micobactérias e o crescimento é

satisfatório para o teste de niacina (que é positivo para
Mycobacterium tuberculosis).

Finalidade: Isolamento primário das

micobactérias.
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Ágar Löwenstein-Jensen (LJ)

Interpretação:
Cor original do meio: verde claro
Positivo: Crescimento de colônias amarelas
Negativo: ausência de crescimento.
Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar Ogawa Kudoh (OK)

O meio de Lowenstein Jensen (LJ) é o mais difundido, mas exige

descontaminação da amostra antes da inoculação, sendo o
Método de Petroff o mais usado.
O meio de Ogawa-Kudoh (OK)
baseia-se no de LJ, porem sua
formulação foi modificada focando
otimizar a etapa de
descontaminação.

Finalidade: Isolamento primário das

micobactérias.
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Ágar de Baird-Parker (BP)

É um meio moderadamente seletivo para diferenciação utilizado
para o isolamento e enumeração de Staphylococcus aureus
nas amostras alimentares, ambientais e clínicas.
Interpretação:
Cor original do meio: amarelo
claro.
Colônias cinzento escuras a
preto com halos transparentes:
Staphylococcus aureus
Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar de Baird-Parker (BP)

Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar Saboraud (AS)

Meio com nutrientes que favorece o crescimento de diversos

fungos leveduriformes e filamentosos.
Interpretação:
Cor original do meio:
amarelo claro opalescente.
Após o crescimento, deve-se
seguir a identificação do
microrganismo que cresceu.
Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar Saboraud (AS)

Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar Regan-Lowe (RL)

Consiste em uma base de carvão vegetal acrescida de sangue

(carneiro ou cavalo) e cefalexina.
Finalidade: isolamento do gênero Bordetella em amostras
clínicas que são geralmente contaminadas com a microbiota do
trato respiratório.
Interpretação:
Cor original do meio: preto
Colônias pequenas
acinzentadas e brilhantes:
suspeita de Bordetella
pertussis.
Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar CLED (Cystine Lactose Electrolyte Deficient)

Usado para isolamento e quantificação de microrganismos

presentes em amostras urina. A deficiência de eletrólitos inibe o
véu de cepas de Proteus.

Finalidade: isolar e quantificar microrganismos Gram-positivos,

Gram-negativos e leveduras.
Microbiologia: Culturas bacterianas

Véu de cepas de Proteus

Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar CLED (Cystine Lactose Electrolyte Deficient)

Interpretação:
Cor original do meio: azul claro.
Colônias lactose positiva: cor amarela.
Colônias lactose negativa: cor azul.
Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar Eosina Azul de Metileno (EMB)

Possui uma combinação de eosina e azul de metileno como

indicadores, promovendo uma diferenciação entre colônias de
lactose positivas e negativas. O meio é inibidor parcial de micro-
organismos Gram-positivos.
Finalidade: isolar bacilos Gram-
negativos (enterobactérias e
não fermentadores) e verificar a
fermentação ou não da lactose
e sacarose.
Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar Eosina Azul de Metileno (EMB)

Interpretação:
Cor original do meio: vermelho escuro.
Colônias pretas-azuladas: coliformes.
Colônias com brilho verde metálico: fermentadoras de lactose.
Colônias incolores: não fermentadoras
de lactose.
Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar Mueller-Hinton (MH)

Oferece condições de crescimento das principais bactérias.

Finalidade: realização do teste de avaliação da resistência aos
antimicrobianos pelos métodos de difusão em disco e E-test
para enterobactérias, não fermentadores, Staphylococcus,
Enterococcus sp.
Microbiologia: Culturas bacterianas

Ágar Mueller-Hinton (MH)

Interpretação:
Cor original do meio: amarelo palha.
A zona do diâmetro é particular para cada antibiótico e
organismo, sendo comparado com diâmetros padronizados pelo
CLSI, que determina cada microrganismo sendo sensível,
intermediário ou resistente.