Resumo AUTORIA E REVISTA

Amanda Fernandes de
Medeirosa et al
Caracterização bioquímica de um inibidor do
JOURNAL OF ENZYME
tipo Kunitz de Sementes de Tamarindus INHIBITION AND
indica L. e sua eficácia na redução da leptina MEDICINAL CHEMISTRY,
2018 VOL. 33, NO. 1, 334–348
plasmática em modelo experimental de
obesidade
DISCENTE

RENATA NAYANE
FERNANDES DOS SANTOS

INTRODUÇÃO

Obesidade: doença crônica não transmíssível (DCNT) com alta prevalência;

Indíviduos e animais com obesidade: não tem a mesma sensibilidade sacietogênica da CCK comparada
com indíviduos eutróficos; resistência a leptina é aumentada no estágio da obesidade;
CCK: hormônio regulatório do centro da fome e saciedade - regulação via esimulação da secreção da
insulina e glucagon; Leptina: hormônio secretado por adipocina em proporção ao tecido adiposo;
Habilidade sacietogênica de inibidores isolados de tripsina de diferentes fontes: CCK secretagogo;
Inibidores de tripsina são encontrados em sementes: purificação e caracterização;
Sementes de tamarindo (Tamarindus indica L.) são fontes de inibidores de tripsina (ITI);
Presente estudo: purificação, caracterização e sequenciamento parcial do ITI, reavaliando efeito sobre
a CCK plasmática e leptina em modelo experimental de obesidade.

MATERIAIS MÉTODO

Planta: Tamarindo (Tamarindus indica L.): IBAMA;
Polpa separada da sementes --> farinha das
sementes descascadas;
Animais: Ratos wistar machos obesos, condições
controladas de ambiente.
PURIFICAÇÃO DO INIBIDOR
Modelo experimental: depois do isolamento da
molécula: análise de purificação,
características bioquímicas, estabilidade,
mecanismo de ação, ponto isoelétrico.
Inibidor purificado em modelo experimental
de obesidade: efeito plásmatico da CCK e
leptina em ratos Wistar com obesidade
induzida por dietas de alto índico glicêmico e
carga glicêmica.

Protocolo de obtenção de ITI;

Sementes descascadas: cotilédones triturados até
farinha fina em trituradoe refrigerado;
Solubilização da farinha --> centrífuga -->
sobrenadante: extrato cru (EC);
Fracionamento da proteína do EC em sulfato de
amônia --> precipitação --> centrífuga
Precipitado: aplicação na coluna de afinade de
tripsina- sepharose: proteínas retidas coletadas;
Dialisado contra a extraçãotampão e liofilizado, e o
TTI foi obtido;
Conjunto de Inibidores de tripsina: CLAE,
espectrofotometria
RESULTADOS
Purificação do inibidor de T. indica L:
Redução e alquilação
Sequencimento parcial
Alinhamento múltiplo
Estabilidade a agentes desnaturantes: teste térmico
- manutenção da atividade antritríptica, exceto a
100ºC (70%, comparada a 40ºC)
Ponto isoelétrico
Modelo experimental de obesidade: não houve
diferença estatística significativa
DISCUSSÃO

Caracterização de um inibidor de peptidase: fundamental para conhecimento de suas propriedades e

futuras investigações terapêuticas;
Muitos inibidores de peptidases são caracterizados e estudados em doenças humanas, como AIDS,
Alzheimer, osteoporose, doenças cardiovasculares, artrite reumatóide, câncer, obesidade e outros;
Relatos de efeitos anti-inflamatórios e anti-obesidade de isolados cru de extratos aquosos de sementes
de Tamarindus indica L em ratos Wistar eutróficos;
No processo de purificação da pITI, o purificado inibidor tem proteína IU mg-1 comparada com valores
anteriores, demonstrando aumento do potencial de inibição da proteína quando o processo de
purificação ocorre;
pITI apresentou duas frações proteicas, com massas moleculares próximas e sequências de
aminoácidos idênticas. Após redução e alquilação, as massas moleculares obtidas foram menores do
que o esperado, e essas frações proteicas, apresentaram-se com massas moleculares semelhantes e
sequências de aminoácidos idênticas
Considerando esse estudo, sugere-se que p pITI pertence a família de inibidores de Kunitz, e é uma
molécula que tem uma forte interação competitiva com a tripsina e, portanto, é um candidato a inibidor
para a indústria farmacêutica
pITI apresentou resistência a extremos de pH, mantendo sua atividade anti-tripsina tanto em meio
ácido e alcalino, a termorresistência é uma característica de fundamental importância, uma vez que
vários processos biotecnológicos são realizadas em altas temperaturas, como a síntese de um novo
droga e, portanto, quanto maior a estabilidade térmica do inibidor,mais promissor é para uma
produção em larga escala
ITI não causou um aumento da CCK. No entanto, com o inibidor de tripsina parcialmente purificado,
houve redução significativa do consumo de alimentos, sem ganho de peso, em 10 dias de experimento,
para os animais obesos.

ANÁLISE CRÍTICA CONCLUSÃO

O Artigo apresenta-se bem articulado entre os tema O conhecimento bioquímico desta

(obesidade, inibidor de tripsina, aspectos bioquímicos); molécula e seu efeito sobre a leptina
Os dados relacionados aos procedimentos são bem em um modelo experimental de
detalhados e explicativos; obesidade fornece e informações
Todavia, a linguagem escolhida, em decorrência da inovadoras para uma biomolécula de
especidade do tema ser difícil entendimento, ser torna possíveis aplicações.
complicado até para leitores mais treinados, precisando ter
conhecimentos prévios sobre praticamente todos os
assuntos abordados, especialmente nas análises físico-
químicas do inibidor;
A discussão está bem criteriosa e reconta todo o trabalho,
dando mais embasamento ao leitor para entender o
experimento;
No mais, o artigo é de alto nível de complexidade e
conhecimento, bastante interessante para áre
biotecnológica.